JPH06501961A - 免疫調節活性を有するシユードペンタペプチド - Google Patents

免疫調節活性を有するシユードペンタペプチド

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JPH06501961A
JPH06501961A JP5504226A JP50422692A JPH06501961A JP H06501961 A JPH06501961 A JP H06501961A JP 5504226 A JP5504226 A JP 5504226A JP 50422692 A JP50422692 A JP 50422692A JP H06501961 A JPH06501961 A JP H06501961A
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ハイベルト，チャールズ
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Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 免疫調節活性を有するシニードベンタベブチド技術分野 本発明は、免疫調節活性を有する合成シェードペンタペプチド、薬学的組成物、 および関節炎のような免疫性疾患の治療におけるそれらの使用に関する。より詳 細には、本発明は、血清中で増大した安定性を示すように設計された改良シニー ドペンタペプチドに関する。
背景技術 「サイモポイエチン」と命名された４９個のアミノ酸からなるペプチドを胸腺組 織から単離することは、１９７５年に報告された。（汎用薬としてのサイモポイ エチンは、しばしば、「サイペンチン」と呼ばれる。これら用語は、本明細書に おいて、互換的に用いられている。）インビトロにおいて、サイモポイエチンは 、胸腺前駆細胞の胸腺細胞への分化、並びに後期Ｂ細胞分化、補体レセプターの 誘導、およびリンパ細胞転写を増大させる。インビボにおけるその効果は、胸腺 前駆細胞の誘導、Ｔ細胞依存性抗体応答の増大、およびマウスにおける自己免疫 溶血性貧血の兆候進行の遅延を含む。
１９７９年までに、サイモポイエチンのアミノ酸３２〜３６に該当する合成ペン タペプチドが全長ペプチドの生物学的活性を有することが示された。　ゴールド シュタイン（Ｇｏｌｄ＋ｌ５ｉｎ、　Ｇ、　）らは、ペンタペプチドＡｒｇ−Ｌ ｙｓ　−Ａｓ　ｐ−Ｖａ　１−Ｔｙ　ｒがこれら生物学的効果を示すことを実証 した（Ｓｃ　ｉ　ｅｎｃｅ　（１９７９）２０４　：　１３０９〜１３１０）。
免疫動態を含め該ペンタペプチドのインビボにおける活性に関するさらなる研究 がディ・べり（Ｄｉ　ＰＨｒｉ。
丁、　）らによって報告された（Ｊ、Ｉｍｍｕｎｏ、Ｐｈａ　ｒｍａｃｏｌ、（ １９８０）２：５６７〜５７２）。
サイモポイエチンホルモンおよび対応するペンタペプチドサイモベンチンに関す る初期の研究が、それらの免疫調節活性に焦点が向けられる一方で、これら物質 が慢性関節リウマチに対して明らかな効果を有することが臨床において観察され た。例えば、マレーズ（Ｍｘｌａｉｓｅ、　Ｍ、Ｇ、　）らＬａｎＣｅｔ（１９ ８５）８３２〜８３６参照。このペンタペプチドによる治療結果は非常に有望な ものであるが、その血漿中半減期がわずか３０秒であるという大きな欠点を有し ている。それ故、少なくとも１０分間に渡る輸注が要求されるうえ、繰り返し投 与が必要とされる。しかしながら、その治療はうまくいっている。すなわち、マ レーズらの研究における患者は、−週間に数日程度の継続的輸注が必要とされて いるにもかかわらず、その治療を継続して受けることを強く望んだのである。
類似の結果がピピノ（Ｐｉｐｉｎｏ、Ｆ、）らによって報告されたドは、継続輸 注以外の形態での投与が可能なように充分に安定化されたならば、より適用しや すく広範な用途を見いだせる、毒性がなく、簡便な薬剤であることが明らかにな ってきた。
ペンタペプチドの構造的要件に関する研究、および必要とされる活性を有したま まのペプチドでどのようなアミノ酸配列中の修飾が行えるかについての研究も行 なわれている。本出願人の知りえているそのような研究の最も初期のものは、ヘ ブナ−（Ｈｅａｖｎｕ、　Ｇ、　Ａ、）らによるＡｒｃｈ、Ｂｉｏｃｈｅｍ、Ｂ ｉｏｐｈｙｓ、（１９８５）２４２：２４８〜２５５であり、この研究は、ヒト Ｔ細胞における細胞内ｃ　ＧＭＰ上昇を誘導する能力、およびＴ細胞レセプター に対して放射標識サイモポイエチンと競合する能力によって２９の類似体の活性 を評価している。その結果から、１位のアルギニン残基は、それをＤ−異性体と 置き換えた場合にはわずかな活性しか得られないが、活性にとって必須のもので あることが示されてる。３位のアスパラギン酸についても同じことが言え、Ｄ− 異性体で置き換えた場合には、活性はゼロではないが減少してしまうが、活性に とって必須である。
具体的には、３位のアスパラギン酸残基をグルタミル残基で置き換えることによ りレセプター競合活性およびｃＧＭＰ刺激活性の双方が消失した。サイモポイエ チンに類似した４９アミノ酸ペプチド（アスパラギン酸残基のグルタミン酸によ る置換によって３４位のみが異なる）であるサイスブレニンがウシ牌臓から単離 されたということは興味深い。配列Ａｒ　ｇ−Ｌｙ　ｓ　−Ｇ　１　ｕ−Ｖａ　 １−Ｔｙ　ｒを有する、対応するペンタペプチドであるスブレニンは、その生物 学的活性が他の点では異なるものの、ＴおよびＢ前駆細胞を誘導する類似の能力 を示す（オードヒ＋　（Ａｕｄｈ７ｓ、丁、）ら、Ｐｒｏｃ、Ｎａ　ｔ　１．Ａ ｃａｄ、Ｓｃ　ｉ、ＵＳＡ　（１９８４）８１　：　２８４７〜２８４９）。本 発明者らの知るところでは、慢性関節リウマチに対する効果に関してのスブレニ ンの臨床実験は行なわれていない。
上記へブナ−の研究は、サイモベンチンの構造の２．４および５位において、活 性に不利益な影響を及ぼすことなくいくつかの置換を行なうことができることを 示している。例えば、２位のＬｙｓは、プロリン残基により首尾よ（置き換える ことができ、またＤ−Ｌｙｓまたはα−アミノイソ酪酸（Ａｉｂ）によりそれほ ど首尾よくではないが置き換えることができた。４位のＶａｌは、そのＤ−異性 体、Ａｌａまたはサルコシンにより置き換えることができた。５位のＴｙｒ残基 は、欠失またはＡｌａによる置き換えができなかったが、これをＶａ　１ＳＰｈ ｅ、Ｄ−Ｔｙｒ、３−ニトロ−Ｔｙｒ。
３−クロロ−Ｔｙｒ（Ｌかし、３−ヒドロキシ−Ｔｙｒではない）、Ｈｉｓおよ びＴｒｐで置き換えることにより種々の活性を有する類似体が得られた。
これら結果の相対的な単純性は、分解に対する増大した安定性を有する生物学的 に活性な類似体合成の試みについての同研究グループによる１９８６年の報告に とってかわられた。
半減期の短さの問題が認識されていたので、血漿中でより長い半減期を有する類 似体を設計する試みがなされた。この研究の報告であるヘブナーＧ、Ａ、らは、 いくつかのＮ末端アセチル化類似体およびＣ末端アミド化類似体の活性について 報告した（Ｐｅｐｔｉｄｅｓ　（１９８６）７：１０１５〜１０１９）。先の雑 文は、２位においてプロリン、ＡｉｂおよびＤ−Ｌｙｓにより置換できたことを 示していたが、それらのペプチドのＮ末端をアセチル化すると、Ａｉｂ２類似体 および天然のサイモペンチンは活性を失う結果となった。他方、Ｐｒｏ２類似体 は、完全な活性を保持していた。同様に、恐らく、サイモベンチンベブチドその もののＣ末端をアミド化すると、活性が失われたであろうが、Ｐｒ０２およびＡ ｔｂ２類似体の場合には保持されたであろう。しかしながら、サイモベンチンそ のものは、Ｎ末端アセチル化およびＣ末端アミド化の組合せにより、活性な分子 を得ることができた。
Ａｉｂ２類似体の場合にそのような結果は得られなかった。
該雑文で報告された類似体は、一般に、サイモベンチンそのものに比べて血清中 で増大した半減期を有していた。
分子レベルでのスブレニンおよびサイモベンチンベブチドの生物学的特異性につ いての比較が、最近、ヘブナーＧ、　Ａ。
らによって報告された（Ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ　Ｐｅｐｔｉｄ　ｅ　ｓ　（１９ ９０ン２７　：　２５７〜２６２）、２つの異なるヒトＴ細胞群：ＣＥＭおよび ＭＯＬＴ−４におけるｃＧＭＰの上昇がアッセイ系として用いられた。ヒトサイ スブレニンはＭＯＬＴ−４群に対してのみであるのに対し、サイモベンチンは、 両タイプのＴ細胞群に対して、ｃＧＭＰを刺激させることができた。該アッセイ では、種々の形のヒトサイスブレニン類似体（これは、ウシサイスプレニン全長 ペプチドの３４位（ペンタペプチドの３位）のＧｌｕをＡｈａで置換したもの） が使用された。配列Ａｃ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−ＮＦ２を 有するヒト「スブレノペンチン」（スブレニン）は、ＣＥＭ細胞上のレセプター に対しては不活性であったが、ＭＯＬＴ−４細胞に対しては活性であった。
このパターンは、Ｃ末端Ｔｙｒを欠失したテトラペプチドまたはそのＰｒｏ２類 似体を用いた場合にも同様であった。サイモペンチンのＰｒｏ２類似体中のＴｙ ｒをフェニルアラニンで置換すると活性パターンが逆転した。
上記研究は、分子レベルでの特異性に変動が起こり得るかもしれないか、３位に おいてはＡｓｐＳＧｌｕまたはＡｌａが、また１位においてはＡｒｇである必要 性を除き、一般に、全般的な免疫調節活性を保持したままで、ペンタペプチドの 配列にわずかな修飾を行なうことができることを示している。
また、ある種のサイモベンチン類似体は、特許出願の主題となっている。１９７ ９年４月１２日および１９８０年３月１３日付は米国優先権に基づく特願昭５５ −４６９９０号は、特にＡｒｇ−Ｄ−Ａｌａ−Ａｓｐ−Ｖａ　１−Ｔｙｒ　−Ｎ Ｆ２を含む上位概念種のペンタペプチドを開示し、クレームしている。１９８９ 年８月７日付は公開のスローンーケ・ツタリング社の特開昭６１−０５０９９８ 号は、種々の残基の側鎖を修飾したペンタペプチドの誘導体を開示し、クレーム して０る。１９８８年９月２１日に公開されたヨー口・ノック出願公開Ｎｏ、２ ８２８９１は、ペンタペプチドの「レトロインノく一ソ（ｕｌ＋ｏｉｏｖｕ＋ｏ ）　Ｊ類似体およびトリペプチドフラグメントを開示し、クレームしている。こ れらの類似体において、いくつかのペプチド結合は逆転している。
しかしながら、許容できる血漿中半減期を有し、毒性がなく薬剤としての有効性 を保持している、サイモベンチン活性を有する薬剤を設計する要望がなおも残っ ている。本発明は、サイモベンチンまたはその活性類似体のペプチド結合の１ま たはそれ以上が同配性（目ｏｓｆｓｒｉｃ）非ペプチド結合によって置き換えら れた類似体に関する。
発明の開示 本発明は、免疫系の調節、および関節炎のような免疫性疾患の治療において有効 な、プロテアーゼ耐性のシュードペプチドを提供する。それらは、自己免疫疾患 および感染症のような疾病の治療および抑制に有用である。これら化合物は、サ イモベンチンの本質的な特性を保持しているが、該ペンタペプチドを構成するア ミノ酸残基の間に少なくとも１つの非ペプチド結合を含有する。
すなわち、第１の側面において、本発明は、式：（式中、Ａ　Ａ　ｌは、Ｌまた はＤ形のアルギニン残基であり、Ａ　Ａ　２は、ＬまたはＤ形の、塩基性アミノ 酸残基、中性／非芳香族アミノ酸残基もしくはプロリン残基、またはそのＮ−ア ルキル化（１−６Ｃ）体であり、 八Ａ３は、場合により残りのカルボキシル基がアルキル基（１−６Ｃ）でエステ ル化されていてもよいＬまたはＤ形のアスパラギン酸残基もしくはグルタミン酸 残基、またはアラニン残基であり、 ＡＡ４は、ＬまたはＤ形の中性／非芳香族アミノ酸残基であり、 ＡＡ５は、芳香族部分の１またはそれ以上の水素がＮＯ２またはハロゲンで置換 されていてもよいしまたはＤ形の中性／芳香族アミノ酸残基またはＬもしくはＤ 形の中性／非極性／大／非芳香族アミノ酸残基、またはそのＮ−アルキル化（１ −６Ｃ）体であり、 Ｒは、アシル基（１−６Ｃ）　、アリールスルホニル基、アルキルスルホニル基 、アリールアルキルスルホニル基またはアルコキシカルボニル基であり、 Ｒは、−０Ｈ−−Ｎ　Ｒ２Ｒ３または−ＯＲ４であって、ＲおよびＲ３は、各々 独立して、水素またはアルキル基（１−６Ｃ）であり、°Ｒ４はアルキル基（１ −６Ｃ）であり、■〜ＩＶの番号を付した結合の少なくとも１つは、−ＣＯらな る群から選ばれる修飾ペプチド結合であり、残りの結合は−ＣＯＮＨ−または− ｃＯＮ　ＣＣＨ３）−である）で示されるシュードペプチド、および薬学的に許 容され得るその塩に関する。
第２の側面において、本発明は、式： （式中、Ａ　Ａ　ｌは、ＬまたはＤ形のアルギニン残基であり、Ａ　Ａ　２は、 ＬまたはＤ形の塩基性アミノ酸残基、中性／非芳香族アミノ酸残基もしくはプロ リン残基、またはそのＮ−アルキル化（１−６Ｃ）体であり、 Ａ　Ａ　３は、場合により残りのカルボキシル基がアルキル基（１−６Ｃ）でエ ステル化されていてもよいしまたはＤ形のアスパラギン酸残基であり、 ＡＡ４は、ＬまたはＤ形の中性／非芳香族アミノ酸残基であり、 ＡＡ　は、芳香族部分の１またはそれ以上の水素がＮ　Ｏ２またはハロゲンで置 換されていてもよいＬまたはＤ形の中性／芳香族アミノ酸残基またはＬもしくは Ｄ形のバリン残基、またはそのＮ−アルキル化（１−６Ｃ）体であり、Ｒは、ア シル基（１−６Ｃ）、アリールスルホニル基、アルキルスルホニル基、アリール アルキルスルホニル基またはアルコキシカルボニル基であり、 Ｒは、−ＯＨ，−ＮＲ２Ｒ３または−ＯＲ４であって、ＲおよびＲ３は、各々独 立して、水素またはアルキル基（１−６Ｃ）であり、Ｒ４はアルキル基（１−６ Ｃ）であり、Ｉ〜ＩＶの番号を付した結合の少なくとも１つは、−ＣＯＣＨ−１ −ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ２−および−ＣＨ２ＮＨ−からなる群から選ばれる修飾ペプ チド結合であり、残りの結合は−ＣＯＮＨ−または−ＣＯＮ　（ＣＨ３）−であ る）で示されるシュードペプチド、および薬学的に許容され得るその塩に関する 。
第３の側面において、本発明は、式： ％式％ Ｃ式中、ＡＡ、は、ＬまたはＤ形のアルギニン残基であり、ＡＡ２は、Ｌまたは Ｄ形の塩基性アミノ酸残基、中性／非芳香族アミノ酸残基もしくはプロリン残基 、またはそのＮ−アルキル化（１−６Ｃ）体であり、 ＡＡ３は、場合により残りのカルボキシル基がアルキル基Ｃ１７６Ｃ）でエステ ル化されていてもよいＬまたはＤ形のアスパラギン酸残基であり、 Ａ　Ａ　４は、ＬまたはＤ形のアラニン残基もしくはバリン残基であり、 Ａ　Ａ　ｓは、芳香族部分の１またはそれ以上の水素がＮ　Ｏ２またはハロゲン で置換されていてもよいしまたはＤ形の中性／芳香族アミノ酸残基またはＬもし くはＤ形のバリン残基、またはそのＮ−アルキル化（１−６Ｃ）体であり、Ｒは 、アシル基（１−６Ｃ）、了り−ルスルホニル基、アルキルスルホニル基、アリ ールアルキルスルホニル基またはアルコキシカルボニル基であり、 Ｒは、−ＯＨ，−ＮＲ２Ｒ３または一０Ｒ４であって、ＲおよびＲ３は、各々独 立して、水素またはアルキル基（１−６Ｃ）であり、Ｒ４はアルキル基（１−６ Ｃ）であり、■〜ＩＶの番号を付した結合の少なくとも１つは、−ｃ。
ＣＨっ−、−ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ２−および−ＣＨ２ＮＨ−からなる群から選ばれ る修飾ペプチド結合であり、残りの結合は−ＣＯＮＨ−または−ＣＯＮ　（ＣＨ ３）−である）で示されるシュードペプチド、および薬学的に許容され得るその 塩に関する。
第４の側面において、本発明は、式： ％式％ （式中、ＡＡ、は、ＬまたはＤ形のアルギニン残基であり、ＡＡ２は、Ｌまたは Ｄ形の塩基性アミノ酸残基、中性／非芳香族アミノ酸残基もしくはプロリン残基 、またはそのＮ−アルキル化（１−６Ｃ）体であり、 ＡＡ３は、場合により残りのカルボキシル基がアルキル基（１−６Ｃ）でエステ ル化されていてもよいＬまたはＤ形のアスパラギン酸残基であり、 ＡＡ４は、ＬまたはＤ形のアラニン残基もしくはバリン残基であり、 ＡＡ　は、芳香族部分の１またはそれ以上の水素がＮＯ２またはハロゲンで置換 されていてもよいＬまたはＤ形のフェニルアラニン残基もしくはチロシン残基ま たはＬもしくはＤ形のバリン残基、またはそのＮ−アルキル化（１−６Ｃ）体で あり、 Ｒは、アシル基（１−６Ｃ）、アリールスルホニル基、アルキルスルホニル基、 アリールアルキルスルホニル基またはアルコキシカルボニル基であり、 （１−６Ｃ）であり、Ｒ４はアルキル基（１−６Ｃ）　であり■〜ＩＶの番号を 付した結合の少なくとも１つは、−ｃ。
ＣＨ２−１−ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ２−および−ＣＨｚ　ＮＨ−からなる群から選ば れる修飾ペプチド結合であり、残りの結合＋；ｔ　−ＣＯＮ　Ｈ−また（１−Ｃ ＯＮ　（ＣＨ３）−であル）テ示されるシュードペプチド、および薬学的に許容 され得るその塩に関する。
第５の側面において、本発明は、式； Ｃ式中、Ａ　Ａ　＋は、ＬまたはＤ形のアルギニン残基であり、Ａ　Ａ　２は、 ＬまたはＤ形のりシン残基、アラニン残基、α−アミノイソ酪酸残基、ロイシン 残基、ノルロイシン残基もしくはプロリン残基、またはそのＮ−アルキル化（１ −６Ｃ）（１−６Ｃ）でエステル化されていてもよいＬまたはＤ形のアスパラギ ン酸残基であり、 ＡＡ４は、ＬまたはＤ形のアラニン残基もしくはバリン残基であり、 Ａ　Ａ　５は、芳香族部分の１またはそれ以上の水素がＮＯ２またはハロゲンで 置換されていてもよいＬまたはＤ形のフェニルアラニン残基もしくはチロシン残 基またはＬもしくはＤ形のバリン残基、またはそのＮ−アルキル化（１−６Ｃ） 体であり、 Ｒは、アシル基（１−６Ｃ）　、アリールスルホニル基、アルキルスルホニル基 、アリールアルキルスルホニル基またはアルコキシカルボニル基であり、 Ｒ１は、−ＯＨ，−ＮＲ２Ｒ３または一０Ｒ４であッテ、Ｒ２およびＲ３は、各 々独立して、水素またはアルキル基（１−６Ｃ）であり、Ｒ４はアルキル基（１ −６Ｃ）であり、■〜Ｉｖの番号を付した結合の少なくとも１つは、−〇〇ＣＨ ２−１−ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ２−および−ＣＨ２ＮＨ−からなる群から選ばれる修 飾ペプチド結合であり、残りの結合は−ＣＯＮＨ〜または−ＣＯＮ　（ＣＨ３） −である）で示されるシュードペプチド、および薬学的に許容され得るその塩に 関する。
第６の側面において、本発明は、式： （式中、ＡＡ、は、ＬまたはＤ形のアルギニン残基であり、ＡＡ２は、Ｌまたは Ｄ形のりシン残基、アラニン残基、α−アミノイソ酪酸残基、ロイシン残基、ノ ルロイシン残基もしくはプロリン残基、またはそのＮ−アルキル化（１−６Ｃ） （１−６Ｃ）でエステル化されていてもよいＬまたはＤ形のアスパラギン酸残基 であり、 ＡＡ４は、ＬまたはＤ形のアラニン残基もしくはバリン残基であり、 Ｒは、アシル基（１−６Ｃ）、アリールスルホニル基、アルキルスルホニル基、 アリールアルキルスルホニル基またはアルコキシカルボニル基であり、 で置換されていてもよい４−ヒドロキシ−ベンジル基およびイソプロピル基から 選ばれるものであるか、またはそのＮ−アルキル化（１〜６）体であり、 Ｊ−１１１の番号を付した結合は、それぞれ独立して、−ＣＯＮＨ−または−ｃ ＯＮ　（ＣＨ３）−である）で示されるシュードペプチド、および薬学的に許容 され得るその塩に関する。
本発明は、また、本発明の化合物を有効成分として含有する薬学的組成物に関し 、これら組成物は、免疫調節を達成するため、または関節炎の治療のために有用 である。他の側面においては、本発明は、本発明の化合物および組成物を用いて 、患者において免疫調節を達成させる、または関節炎のような免疫性疾患を治療 する方法に関する。
図面の簡単な説明 図１は、アミノ酸の分類を図式的に概説する図である。
発明を実施するだめの形態 本発明の化合物は、５つのアミノ酸残基を有するンユードペプチドであって、そ れらの残基を結合する少なくとも１つのペプチド結合が、上に述べた群の中から 選ばれる同配性結合によって置換されているものである。すなわち、本発明の化 合物のアミノ酸残基を結合している通常のＣ０ＮＩ（結合を置き換えることによ って機能上の同配体（口ｏｓｌｔｒりを得られるように修飾されている。そのよ うにして得られる化合物は、プロテアーゼによる分解に対する増大した安定性を 有し、式− することによって定義されている。これらに定義において、族アミノ酸残基であ り、Ａ　Ａ　ｓは、中性／芳香族アミノ酸または中性／非極性／大／非芳香族ア ミノ酸、またはそれらの誘導体もしくは置換体である。これらの分類は、以下の ように説明されるニ アミノ酸残基は、一般に、以下の４つの大きなサブクラスに下位分類することが できる： 酸性・　この残基は、生理的ｐＨにおいて、Ｈイオンの欠落により負の電荷を有 するため、生理的ｐＨにおける水性溶媒中にペプチドが存在する場合には、該ペ プチド中の本残基は、水溶液に引き付けられることにより、ペプチドの立体配座 中の表面位置をとる。
塩基性：　この残基は、生理的ｐＨにおいて、Ｈとの会合により正の電荷を有す るため、生理的ｐＨにおける水性媒溶媒中にペプチドが存在する場合には、該ペ プチド中の本残基は、水溶液に引き付けられることにより、ペプチドの立体配座 中の表面位置をとる。
中性／非極性：　この残基は、生理的ｐＨにおいて、荷電しておらず、水性媒体 中にペプチドが存在する場合には、該ペプチド中の本残基は水溶液に反撥され、 ペプチドの立体配座中の内側の位置をとる。これら残基は、本明細書において、 「疎水性」とも表示されている。
中性／極性：　この残基は、生理的ｐＨにおいて、荷電していないが、水性媒体 中にペプチドが存在する場合には、該ペプチド中の本残基は、水溶液に引き付け られ、ペプチドの立体配座中の外側の位置をとる。
もちろん、個々の残基分子の統計的集計では、いくつかの分子は荷電しており、 いくつかは荷電していないであろうし、また大かれ少なかれ水性溶媒に引き付け られ、または反撥されるであろう。「荷電」の定義を合わせるために、個々の分 子の有意の百分率（少なくとも約２５％）が生理的ｐＨにおいて荷電している。
極性または非極性としての分類に要求される引き付けまたは反撥の程度は、任意 的なものであり、それ故、本発明により具体的に企図されたアミノ酸は、それぞ れに明確に分類されている。具体的に命名されていないほとんどのアミノ酸は、 既知の挙動に基づいて分類することができる。
アミノ酸残基は、さらに、当該残基の側鎖置換基に関する自明の分類である、環 状または非環状、および芳香族または非芳香族と下位分類でき、また小または大 と下位分類できる。
カルボキシル基の炭素を含めて全体で４個以下の炭素しか含んでいないならば、 該アミノ酸残基は小とみなされる。小残基は、もちろん、常に非芳香族である。
天然に存在する蛋白アミノ酸についての上記分類法に従う下位分類は以下の通り である。
酸性：　アスパラギン酸およびグルタミン酸；塩基性／非環状：　アルギニン、 リシン；塩基性／環状：　ヒスチジン； 中性／極性／小：　グリシン、セリン、システィン；中性／極性／大／非芳香族 ：　トレオニン、アスパラギン、グルタミン 中性／極性／大／芳香族：　チロシン；中性／非極性／小：　アラニン； 中性／非極性／大／非芳香族：　バリン、イソロイシン、ロイシン、メチオニン ； 中性／非極性／大／芳香族：　フェニルアラニン、およびトリプトファン。
遺伝子によりコードされるアミノ酸であるプロリンは、学術的には、中性／非極 性／大／環状および非芳香族の群に入るものであるが、ペプチド鎖の二次立体配 座におけるその既知の効果の故に例外的にここに定義された群には含まれない。
ある種の普通に遭遇する遺伝子コードによりコードされていないアミノ酸、例え ば、ベーターアラニン（ベーターＡｌａ）、３−アミノプロピオン酸、および４ −アミノ酪酸等のオメガ−アミノ酸、アルファーアミノイソ酪酸（Ａｉｂ）、サ ルコシン（Ｓａｒ）、オルニチン（Ｏｒｎ）、シトルリン（Ｃｉｔ）、ｔ−ブチ ルアラニン（ｔ−ＢｕＡ）、ｔ−ブチルグリシン（ｔ−ＢｕＧ）、Ｎ−メチルイ ソロイシン（Ｎ−Ｍｅｌｌｅ）、フェニルグリシン（Ｐｈｇ）、シクロへキシル アラニン（Ｃｈａ）、ノルロイシン（Ｎｌｅ）、システィン酸（Ｃｙａ）および メチオニンスルホキシド（ＭＳＯ）も含まれる。これらもまた、個々のカテゴリ ーに都合よく分類することができる。
上記定義に基づいて、 Ｓａｒ、ベーターＡｌａおよびＡｉｂは、中性／非極性／小であり； ｔ−ＢｕＡＳｔ−ＢｕＧ、Ｎ−Ｍｅ　Ｉ　１　ｅ、Ｎｌ　ｅおよびＣｈａは、中 性／非極性／大／非芳香族であり；Ｏｒｎは、塩基性／非環状であり； Ｃｙａは、酸性であり； 大／非芳香族であり：並びに Ｐｈｇは、中性／非極性／大／芳香族である。
上に分類したアミノ酸に加えて、それらの誘導体も含まれる。例えば、２−アミ ノ−３−（３−ニトロ−４−ヒドロキシフェニル）プロピオン酸、２−アミノ− ３−（３−フルオロ−４−ヒドロキシフェニル）プロピオン酸、２−アミノ−３ −（３−クロロ−４−ヒドロキシフェニル）プロピオン酸、２−アミノ−３−（ ３−ブロモ−４−とドσ牛ジフェニル）プロピオン酸、２−アミノ−３−（３− ヨード−４−ヒドロキシフェニル）プロピオン酸等である。
種々のオメガ−アミノ酸は、サイズに従って、中性／非極性／小（ベーターａｌ ａ、すなわち、３−アミノプロピオン酸、４−アミノ酪酸）もしくは大（その地 金て）のように分類される。
遺伝子中にコードされるアミノ酸の他のアミノ酸による置換も本発明の範囲内の ペプチド化合物に含まれ得、この一般的な分類法により分類され得る。
ＡＡ２についての好ましい態様は、既知のサイモベンチンのリシル残基、また、 プロリン残基、ノルロイシン残基、ロイシン残基、アラニン残基、α−アミノイ ソ酪酸残基およびそのＮ−アルキル化体を含む。
Ａ　Ａ　３の好ましい態様は、場合により残りのカルボキシル基がアルキル基（ １〜６Ｃ）でエステル化されていてもよいアスパラギン酸残基である。
Ａ　Ａ　４の好ましい態様は、サイモベンチンのバリン残基、並びにアラニン残 基、イソロイシン残基およびロイシン残基を含む。
Ａ　Ａ　ｓの好ましい態様は、芳香族部分の水素原子がＮ　Ｏ２基またはハロゲ ンで置換されていてもよいフェニルアラニン残基および（サイモベンチンで見ら れる）チロシン残基、バリン残基およびそれらのＮ−アルキル化体を含む。
式（１）の化合物のＮ末端におけるα−アミノ基は、また、アシル化、アリール スルホニル化、アルキルスルホニル化、アリールアルキルスルホニル化またはア ルコキシカルボニル化されていてもよい。アシル化基は、ホルミル、アセチル、 ペンタニル、イソブチリル等の対応する１〜６Ｃアシル基である。アリールスル ホニル化基は、ベンゼンスルホニル、０−トルエン−スルホニル、ｍ−トルエン −スルホニル、ｐ−トルエン−スルホニル、キシレンスルホニル、ビフェニルス ルホニル、ナフタレンスルホニル等である。アルキルスルホニル化基は、メチル スルホニル、エチルスルホニル、ブチルスルホニル、ブチルスルホニル、ペンチ ルスルホニル、ヘキシルスルホニル等である。アリールアルキルスルホニル化基 は、ベンジルスルホニル、フェニルエチルスルホニル、フェニルプロピルスルホ ニル、フェニルブチルスルホニル、フェニルペンチルスルホニル、フェニルへキ シルスルホニル等である。アルコキシカルボニル化基は、エトキンカルボニル、 ブトキンカルボニル、ｉ−ペントキシカルボニル、ベンジルオキシカルボニル等 である。
式（１）の化合物のＣ末端において、カルボキシル基は、非誘導体の形態であっ てもよいし、アミド化またはエステル化されていてもよい。非誘導体の形態にお いて、カルボキシル基は、遊離の酸または塩、好ましくは薬学的に許容され得る 塩として存在し得る。
Ｃ末端でカルボニル炭素へ共有結合しているアミド基の窒素原子は、ＮＨ２、− ＮＨＲ，またはＮＲＲ’　（ここで、ＲおよびＲ′は１〜６Ｃの直鎖または分枝 鎖アルキルであり、該アルキルは、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、 ブチル、ペンチル、ヘキシル、イソペンチル等の１〜６Ｃ直鎖または分枝鎖の飽 和炭化水素残基である）である。該アミド基の代表例は、とりわけ、−ＮＨ２、 −ＮＨＣＨ３、−Ｎ（ＣＨ３）　２、−ＮＨＣＨ２ＣＨ３、−ＮＨＣＨ２ＣＨ（ ＣＨ３）２、および−ＮＨＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ３である。エステル 化体は、メチルエステル、エチルエステル、プロピルエステル、ブチルエステル 、ペンチルエステル、ヘキシルエステル等である。
本発明のペプチド結合の置換結合は、−ＣＯＣＨ２−１−ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ−お よび−ＣＨ２ＮＨ−からなる群から選ばれる。該修飾結合の好ましい態様は、− ＣＯＣＨ２−および−ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ２−を含む。特に好ましいものは、−Ｃ ＯＣＨ２−である。
１を越える結合の置換を行ない得るが、本発明の化合物の好ましい態様は、その ような２つのペプチドだけが置換されているものであり、最も好ましくは、１つ のペプチド結合力置換されており、また全ての態様において、該修飾された結合 以外の残りの結合は−ＣＯＮＨ−または−ＣＯＮ　（ＣＨ３）−である。
ヘブナーグループの雑文に指摘されているように、種々の組合せの置換が活性の 点で相対的に予期できない結果をもたらす。既に確立されているもの以外の厳格 なガイドラインを打ち立てることは困難である。しかしながら、害られるシュー ドペンタペプチドの有効性は、容易に確かめることができ、従って免疫系を調節 する活性を示すペプチドのみが本発明の部分をなすのである。
アッセイシステム 本発明の種々のシュードペプチドの有効性は、インビトロのモデルンステムを用 いて実験的に確認することができる。
標識されたサイモベンチンまたはサイモポイエチンによるＴ細胞レセプターに対 する競合は、シュードペプチドが標的細胞に結合する能力を確認するための１つ の好都合な方法である。これに代えてまたはこれに加えて、シュードペプチドが 標的とされたＴ細胞中でサイクリックＧＭＰ産生を刺激する能力も確認すること ができる。これらの確認試験は、上に掲げたへブナ−、Ｇ、Ａ、らのＡｒｃｈ、 Ｂｉｏｃｈｅｍ。
Ｂｉｏｐｈｙｓ、（１９８５）２４２：２４８〜２５５の方法に従って行なうこ とができる。
これらのアッセイについては、ＣＥＭ細胞は、アメリカン・タイプ・カルチャー ・コレクション（口・ツクビル、ＭＤ）から入手され、２０％血清含有ＰＲＭＩ −１６４０中でフラスコ当たり２×１０５細胞の濃度でフラスコ内で継代培養し 、３×１０６細胞／　ｍ　Ｌで凍結保存する。ｃＧＭＰアツセイについては、Ｃ ＥＭ細胞の最終濃度を、ＲＰＭＩ培地中１×１０／ｍＬに調整した。平衡に達し た後、試験に供される化合物を加えて２分間培養する。氷冷ＴＣＡの添加により 反応を停止させ、試料を３回凍結−解凍し、ＴＣＡをエーテル抽出により除去す る。凍結乾燥後、試料をアセテート緩衝液中に再懸濁させ、ＲＩＡによりｃＧＭ Ｐレベルを測定する。
典型的な競合的サイモベンチン結合アッセイは、３７Ｃ１／ミリモルの活性を有 するトリチウム標識サイモベンチンを使用する。ＣＥＭ細胞を結合緩衝液０．１ ｍＬあたり５Ｘ１０６細胞の最終濃度に調整する。サイモベンチンまたはサイモ ベンチン類似体の希釈物を１０−６ないし１０’Ｍの濃度範囲で該ＣＥＭ細胞群 中に加える。次に、放射標識した３Ｈ−サイモペンチン（５４８，ＯＯＯｃｐｍ ）を加え、試験管を２５℃で３０分間インキュベートする。次に、細胞を水冷結 合緩衝液１ｍＬで希釈し、遠心により２回洗浄し、再懸濁させる。放射活性をシ ンチレーション計数により測定する。
胸腺前駆細胞群の”ｒｈｙ　−１胸腺細胞マーカーの発現を促す該試料化合物の 能力を測定する交互のアッセイにより、確証的な結果が入手できる。このアッセ イを実施するために、胸腺前駆細胞をヌードマウスから単離した膵臓より調製す る。
膵臓細胞の調製に際し、全膵臓をＢ　ａ　ｌ　ｂ／Ｃ，ｎ　ｕ／ｎｕマウスから 得、細切し、ＲＰＭＩ−１６４０中に回収する。胸腺細胞は、フィコール−ハイ バーク（ＦｉＣｏｌｌ−ＨｙｐｚｑｕＣ）を用いて遠心により集め、ＲＰＭＩ− １６４０中に１×１０６細胞／ｍＬの濃度で再懸濁させる。
膵臓細胞を種々の濃度の試験化合物とともに３７℃で４゜５時間インモニベート し、０．１％のアジドを含有するＰＢＳ中で洗浄し、ついでＦＩＴＣ標識抗体に より４℃で３０分間処理する。次に、これら細胞を熱により不活性化したウン胎 児血清中で遠心することにより洗浄し、セルソーターによる蛍光活性分析に付し 、Ｔｈｙ＋−１を含有する細胞の数を決定する。
体液性応答は、ＥＬ　Ｉ　ＳＡにより測定する。ＥＬＩ　ＳＡは、ウシタイプＩ Ｉコラーゲンの１０μｇ　／　ｍ　Ｌ溶液１００μｌを用いて、イミュロンＩＩ マイクロタイターウェルを４℃−晩コートするアッセイにより行なう。ついで、 これらプレートを、洗浄剤トゥイーン２０を０．０５％の濃度で含有する緩衝食 塩水で洗浄する。緩衝食塩水中の２％ウシ血清アルブミン溶液を添加することに より、非特異的結合部位がブロックされる。ついで、これらプレートを洗浄し、 マウス血清希釈液を各ウェルに添加する。抗体結合の認識は、ペルオキシダーゼ 結合ヤギ抗マウスＩｇＧ抗体を用いて行なう。酵素依存性発色は、自動ＥＬ　Ｉ 　ＳＡ計測器を用い、４９０ｎｍでの吸光度を読みとることによって定量化され る。
好ましい態様 本発明のシュードペプチドを記述するために使用される命名法は、Ｎ末端アミノ 基がペプチド中の各アミノ酸の左に、カルボキシ基が右にあると仮定するところ の慣行に従っている。本発明の選択された具体的な態様を表わす式において、ア ミノ末端基およびカルボキシ末端基は、しばしば具体的に示されてはいないが、 他の指摘がない限り、生理的ｐＨにおいてそれらが取る形態にあると理解される ものである。すなわち、具体例または一般式において具体的に示されてないな＋ いが、生理的ｐＨにおいてはＮ末端はＨ２であり、Ｃ末端は一〇−であると理解 されるものである。本明細書中に示されたペプチドにおいて、各コードされた残 基は、適切な場合には、以下の常用のリストに従い、アミノ酸の慣用名に対応さ せて、−文字または三文字表示によって表わされる：アルギニン　ＲＡｒｇ アスパラギン　Ｎ　Ａｓｎ アスパラギン酸　Ｄ　Ａｓｐ システィン　ＣＣｙｓ グルタミン　Ｑ　Ｇｉｎ グルタミン酸　Ｅ　Ｇｌｕ グリシン　Ｇ　Ｇｌｙ ヒスチジン　ＨＨｉｓ メチオニン　Ｍ　Ｍ　ｅ　ｔ フェニルアラニン　Ｆ　Ｐｈｅ トリプトファン　Ｗ　Ｔ　ｒ　ｐ チロシン　Ｙ　Ｔｙｒ バリン　Ｖ　Ｖａｌ 遺伝子によりコードされていないアミノ酸は、先に述べたように省略されている 。
本明細書に示されている具体的なペプチドは、Ｄまたは上付きの刻印（十）によ り別段示されていない限り、光学異性体を有するＬ形のアミノ酸残基が意図され ている。本発明のペプチドの残基は、通常、自然のＬ形光学異性体の形態にある が、１または２、好ましくは１のアミノ酸がＤ形光学異性体によって置き換えら れていてもよい。
アミノ酸残基の側鎖上の遊離官能基は、また、例えばそれらの活性に悪影響を及 ぼすことなく当該化合物の溶解性を変更することができる、アミド化、アシル化 あるいはその他の置換によって修飾されていてもよい。
アミノ酸配列を直接示す式において、（ｋ）の挿入は、−〇〇ＮＨ−の代替とし ての結合−ＣＯＣＨ２−を示し、（ＣＨＯＨ）は、−ＣＯＮＨ−（７）代替とし テ（７）−ＣＨ（ＯＨ）　ＣＨ２−を示し、Ｒは、−ＣＯＮＨ−の代替としての −ＣＨ２ＮＨ−を示す。Ｎ末端におけるアシル化は、Ｎ−Ａｃ−によって示され 、Ｃ末端におけるアミド化は、−ＣＯＮＨ２によって示されている。この表示法 を用いて、本発明の化合物の好ましい態様を表１に示す。
表１ ’＝、　Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｓｐ−Ｖａｌ（ｋ）Ｐｂｅ２、　ｘｒｇ−Ｌｙｓ− Ａｓｐ−Ｖａｌ（ｋｌＴｙｒ３人ｒｇ−Ｐｒｏ−Ａｓｐ−ＶａｌｆｋｌＰｈｅ４ 、　Ａｒｇ−Ｎｌｅ−Ａｓｐ−Ｖａｌ（ｋ）Ｐｂｅ５、　入ｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｓ ｐ−Ａｌａ＋ｋｌＰｈｅ６、　入ｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｓｐ−Ｖａｌ［ｋｌＶａ１７ 、　Ａｒｇ−Ａｉｂ−Ａｓｐ−ＶａｌＬｋｌＰｈｅ８、　Ａｒｇ−Ｌｙｓ−人５ ｐ−Ｖａユ（ｋ）Ｐｈｅ−ＣＯＮＨ２９、Ｎ−Ａｃ−Ａｒｇ−Ｉ、ｙｓ−Ａｓｐ −ｖａｌ（ｋ）Ｐｈｅｌｏ、　Ｎ−Ａｃ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−人５ｐ−Ｖａｌ（ｋ ｌＰｈｅ−ＣＯＮｄ２１１、　Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｓｐ−Ｖａｌ（ＣＨＯＨ）Ｐ ｂｅ１２、　Ａｒｇ−Ｎ−ＭｅＬｙｓ−人５ｐ−ＶａｌｌｋｌＰｈｅ１３、　λ ｒｇ−Ｎｌｅ−人５ｐ−人１ａｆｋｌＰｈｅ１４、　入ｒｇ−Ｎｌｅ−ｘｓｐ− ｖａｌ（ｋ）Ｔｙｒ１５、　入ｒｇ−Ｎｌｅ−人５ｐ−ＶａｌＴｋ）Ｐｈｅ−Ｃ ＯＮ）！２１６、　入ｒｇ−Ｎｌｅ−人５ｐ−Ｖａｌ（ＣＨＯＨＩＰｈｅＬ７． 　Ａｒｇ−Ｎ−ＭｅＮｌｅ＝Ａｓｐ−ＶａｌＦｋ）Ｐｂｅ１８、　Ａｒｇ−Ｌｅ ｕ−Ａｓｐ−Ｖａｌ（ｋ）Ｐｂｅ１９、　Ｎ−八ｃ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ａｓｐ− Ｖａｌ（ｋ）Ｐｂｅ２０、　Ｎ−Ａｃ−人ｒｇ−Ｎｌｅ−Ａｓｐ−Ｖａｌ（ｋｌ Ｐｈｅ２１、　入ｒｇ−Ｌｙｓ’−人５ｐ−Ｖａｌ（ｋｌＰｈｅ２２、　Ｎ−Ｂ ｅｎｚｏｙｌ−Ａｒｇ−Ｎｌｅ−Ａｓｐ−Ｖａｌ（ｋｌ：’ｈｅ２３、　Ｎ−Ｔ ｏｓｙｌ−Ａｒｇ−Ｎｌｅ−人５ｐ−ＶａｉＣｋ）Ｐｂｅ２４、　Ｎ−ＭｅＯＣ Ｏ−Ａｒｇ−Ｎｌｅ−人５ｐ−Ｖａｌ（ｋ）Ｐｂｅ２５、　入ｒｇ−Ｎｌｅ−人 ５Ｐ−ＶａｌｌｋｌＶａ１２６、　入ｒｇ−Ｎ−ＭｅＬｅｕ−Ａｓｐ−Ｖａｌ（ ｋｌＰｈｅ２７、　Ａｒｇ（ｋ）Ｌｙｓ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｐｈｅ２ｇ、　Ａｒ ｇ［ｋ）Ｎｌｅ−λ５ｐ−Ｖａｌ−Ｐｈｅ２９、　Ａｒｇ（ｋ）Ｎｌｅ−Ａｓｐ −Ｖａｌ（ｋ）Ｐｂｅ３０、　Ｎ−Ａｃ−Ａｒｇ（ｋｌＮｌｅ−Ａｓｐ−Ｖａｌ −Ｐｂｅ３１、Ｎ−ＡＣ−Ａｒｇ（ＪＮｌｅ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｐｂｅ−ＣＯＮ ？（２３２、　ＡｒｇｌｋｌＮｌｅ−人５ｐ−Ｖａｌ−Ｐｈｅ−ＣＯＮＨ２３３ ，ＡｒｇｌｋｌＮｌｅ−Ａｓｐ−Ａｌａ−Ｐｈｅコ４゜　ＡｒｇｆｋｌＮｌｅ− Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｖａ１３５、　Ａｒｇ（ｋ）Ｎｌｅ−Ａｓｐ−Ｖａｌ（ｋ）Ｖ ａ１１６、　Ａｒｇ（ＣＨＯＨ）Ｎｌｅ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｐｈｅ３７、　入ｒ ｇ（ＣＨｏＨｌｚｙｓ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｐｈｅ３Ｂ、　Ａｒｇ（ｋ）Ｌｙｓ− 人５ｐ−ＶａニーＮ−ＭｅＰｈｅ３９、　Ａｒｇｆｋ）Ｎｌｅ−Ａｓｐ−Ｖａｌ −Ｎ−ＭｅＰｈｅ４０、　Ａｒｇ（ｋ）Ｎｌｅ−人５ｐ−Ｖａｌ’−Ｐｈｅ４１ 、Ａｒｇ−Ｌｙｓ−ＡｓｐｆｋｌＶａｌ−Ｐｈｅ４２、　Ａｒｇ−Ｎｌｅ−Ａｓ ｐ（ｋ）Ｖａｌ−Ｐｈｅ４３、　Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ａｓｐｆｋ）Ｖａｌ−Ｐｈｅ ４４、　Ａｒｑ−Ｍ’ｏ−Ａｓｐ（ｋ）Ｖａｌ−Ｐｈｅ４５、　Ａｒｇ（ｋ）Ｎ ｌｅ−人５ｐｆｋ）Ｖａｌ−Ｐｈｅ＜６．　Ｎ−Ａｃ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−人５ｐ ｆｋ）Ｖａｌ−Ｐｈｅ４フ、　Ｎ−Ａｃ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ａｓｐｆｋ）Ｖａｌ −Ｐｈｅ４８、　ト入ｃ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−人５ｏ（ｋｌＶａｌ−Ｐｈｅ−ＣＯ ＮＨ２４９、Ａｒｇ−Ｐｒｏ−人５ｐ（ｋｌＶａｌ−Ｐｈｅ−ＣＯＮＨ２５０、 Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｓｐ（ｋ）Ａｌａ−Ｐｈ＝５１、　Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｓｐ （ｋｌＶａｌ−’コロゝｙｒ５２、Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｓｐ（ｋｌＶａｌ−Ｐｈ ｅ−Ｃ０ＭＭ２５３、　Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｓｐ（ｋｌＶａｌ−Ｄ−Ｔｙｒ５４ 、　Ａｒｑ−ＮＭｅＬｙｓ−人５ｐ（ｋｌＶａｌ−Ｐｈｅ５５、　Ａｒｇ−Ｎｌ ｅ−Ａｓｐｆｋ）Ｖａｌ−？ｙｒ５６、　ＡｒｇｆＲ）Ｌｙｓ−Ａｓｐ−Ｖａｌ −Ｐｈｅ５７、　Ａｒｇ（ＲＩＬｙｓ−Ａｓｐ−Ｖａｌ（ｋｌＰｈｅ５Ｂ、　Ｎ −＾ｃ−Ａｒｇ（ＲＩＬｙｓ−Ａｓｐ−Ｖａｌｆｋ）Ｐｈｅ５９、　Ｎ−人（− Ａｒｇ（ＲＩＬＹＳ−人ｓｐ＋ｋｌＶａｌ−Ｐｈｅ６０、　Ａｒｇ−Ａｌａ−Ａ ｓｐ−Ｖａｌ（ｋｌＰｈｅ６１、　Ａｒｇ−Ｎｌｅ−八ｓｐ（ＯＭｅ）−Ｖａｌ （ｋｌＰｈｅ（ＯＭｅ１６２、　入ｒｇ−ＮＭｅＮｌｅ−人５ｐ−Ｖａｌ（ｋ） Ｖａ１６３、　入ｒｇ−ｒ、ｙｓ−人ｓｐ（ＯＭｅ）（ｋ）Ｖａｌ−Ｐｈｅ（Ｏ Ｍｅ）本発明の種々のシュードペプチドの特徴を具体的に反映する表示法は、所 望により、ＴＨＰと略されるサイモベンチンに対してそれらの修飾を示す方法を 用いることができる。ヒト中のサイモペンチンは、アミノ酸位置１〜５において 式Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｓｐ−Ｖａ　１−Ｔｙｒの配列を有するペンタペプチドで ある。シュードペンタペプチドは、この配列の修飾として表示される。このよう にして、例えば、Ｐ２−ＴＨＰは、２位のＬｙｓがプロリンによって置き換えら れているシュードペンタペプチドを示す。−文字法アミノ酸コードが使用されて いる場合には、Ｄ鏡像異性体は、上付きの十字印を用いて表示される。このよう にして、Ｄ＋３−ＴＨＰは、３位のＡｓｐがそのＤ鏡像異性体によって置き換え られている形態を表わす。
Ｎ末端アシル化は、式に対する接頭語として表示されている。このようにして、 例えばＡｃ−Ｐ２−ＴＨＰは、２位のアミノ酸がプロリンであるアセチル化すイ モベンチンを表わＣ末端アミド化は、接尾語として表示されている。このように して、Ａ　−ＴＨＰ−ＮＨＣＨ３は、４位のアミノ酸がアラニンであり、５位の チロシンがメチルアミンでアミド化されている類似体を指す。Ｎ−ＭｅＮ　Ｉ　 ｅ２Ｆ５−ＴＨＰは、２位のアミノ酸がメチル基でアルキル化されたノルロイシ ンであり、５位のアミノ酸がフェニルアラニンである類似体を指す。Ｄ　（ＯＭ ｅ）Ｆ５　（ＯＭｅン−ＴＨＰは、３位のアスパラギン酸がメチル基でエステル 化され、５位のアミノ酸もまたメチル基でエステル化されたフェニルアラニンで ある類似体を指す。
本発明の全てのンユードペプチドは通常のペプチド結合の代替結合である少なく とも１つの結合を含んでいるので、これを名称の前のローマ数字で表示する。す なわち、括弧内のローマ数字は置換された結合の位置を示す。−ＣＯＣＨ２−が 置換の好ましい態様であるので、他に指摘がなければ、これが、指摘された位置 における置換結合である。しかじなから、置換の異なる態様が意図されているな らば、下記表２中の化合物６に示したように、該異なる置換は、名称表示の後の 括弧内に示されている。この用法は、基本構造：における置換された結合の位置 および変更を示すために用いられる。
この表示法を用いた本発明の代表的な化合物を表２に示す。
表２ （閃　Ｆ’ＴＨＰ　（ＣＨＯＨＣＨ２１７−ｆ　ＩＶＩ　Ｎ１ｅ２Ａ’Ｆ”−Ｔ ＨＰ８、（閉　Ｎ１ｅ２Ｆ５−’Ｉ’）ＩＰ　（ｃｈｏｈｃｇ２１２７、　（エ エ巧　）任 ３２．（工Ｖ）　Ｎ１ｅ２Ｄ３（ＯＭｅ）Ｆ５（ＯＭｅ）−ＴＨＰ’３３、Ｃエ エＩ）　Ｄ３（ＯＭｅ）Ｆ５（０１づｅ）−ＴＨＰ魚惑 本発明のシュードペプチドのペプチド結合部分は、例えば固相ペプチド合成法の ような当該分野でよく知られている手法により化学的に合成することができる。
合成は、α−７ミノ保護アミノ酸を用いて、ペプチドのカルボキシ末端から開始 される。他の保護基も適切であるが、ｔ−ブチルオキシカルボニル（Ｂｏｃ）保 護基を全てのアミノ基に対して使用することができる。例えば、Ｂｏａ−Ａｓｐ −ＯＨ，Ｂｏｃ−Ｖａ　１−ＯＨ％　ＢｏＣ−Ｐｈｅ−ＯＨＳＢｏｃ−Ａｒｇ　 −ＯＨ，Ｂｏｃ−Ｎｌ　ｅ−ＯＨまたはＢｏＣ−Ｔｙｒ−ＯＨ（すなわち、選択 されたカルボキシ末端アミノ酸）は、クロロメチル化ポリスチレンレジン（ｒ！ ｓｉｎ　）支持体にエステル化できる。ポリスチレンレジン支持体は、好ましく は、スチレンと、ある種の有機溶媒に対して完全に不溶性であるポリスチレン重 合体を誘導するための架橋剤としての０．５ないし２％のジビニルベンゼンとの 共重合体である。スチュワード　（Ｓｌｓｖａ＋１　）　らの５ｏｌｉｄ−Ｐｈ ａｓｅ　Ｐｅｐｔｉｄｅ　５ｙｎｔｈｅｓｉｓ　（１９６９）％Ｗ、Ｈ，７！Ｊ −マン社、サンフランシスコおよびメリフィールド（Ｍｅｒｒｉｌｉｓｌｄ）、 Ｊ、Ａｍ、Ｃｈｅｍ、Ｓｏｃ、（１９６３）８５：２１４９〜２１５４参照。こ れらの、および他のペプチド合成の方法は、米国特許第３．８６２．９２５号、 第３．８４２．０６７号、第３．９７２．８５９号およびｔＪ４，１０５．６０ ２号にも例示されている。
この合成は、手動により、または製造者により供給された指示マニュアル中に指 示に従い例えばアプライド・バイオシステムダ４３０ＡペプチドＯシンセサイザ ー（フォスター市、カリフォルニア）もしくはバイオサーチ・ＳＡＭＩＩ自動ペ プチドシンセサイザー（バイオサーチ社、サン・ラフアニル、カリフォルニア） を用い、自動により行うことができる。
アミド化された形態の本発明化合物を生成するに当り、本類似体化合物は、例え ばＢｏｃ−ＡＡ　−ｐＭＢＨＡ−レジ！ ンまたはＤｏｃ−ＡＡ　−ＢＨＡ−レジン（ここで、ＡＡ。
！ は、以下にさらに詳述するようにＮ末端化合物の選択されたカルボキシ末端アミ ノ酸である）を用いて直接合成することができる。あるいは、これらの形態は、 当該分野でよく知られた手段を用いたペプチドの合成に続いて化学的または酵素 的にアミド化でき、または標準的な液相ペプチド合成プロトコールにより調製で きる。
本発明のシュードペプチドにおいて、ペンタペプチド内の少なくとも１つのアミ ド結合（−ＣＯＮＨ−）は、当該分野で既知の方法ニヨリ、−ＣＨ２ＮＨ−１− ＣｏＣＨ２−および−ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ２−のような同配体である他の結合に置 換されていなければならない。次の文献は、これら代替結合基を含むペプチド類 似体の調製法を記述している：Ｖｅｇａ　Ｄａｔａ　［１９８３年３月、第１巻 、第３号、スパトラ（Ｓｐｘｔｏｌｘ　）　、　Ａ、Ｆ、　、ｒペプチド骨格の 修飾」（総説）］、 Ｂ、ウニインシュタイン（Ｌｉｎｓｌｓｉｎ　）編［マーセルデツカ−（Ｍｕｃ ｔｌ　Ｄｔｋｋｅｒ　）　、ニューヨーク、１９８３年、２６７頁、スパトラ、 Ａ、Ｆ、、ｒアミノ酸ペプチド及び蛋白の化学及び生化学］　（総説）〕、 Ｔｒｅｎｄｓ　Ｐｈａｒｍ、　Ｓｃｉ、１１９８０年、４６３−４６８頁、モー リー（Ｍｏｒｌｅ７）　、Ｊ、Ｓ、（総説）〕、Ｉｎｔ、　Ｊ、　Ｐｅｐｔ、　 Ｐｒｏｔ、　Ｒｅｓ、［１９７９年、第１４巻、１７７〜１８５頁、（−ＣＨ２ ＮＨ−・ｃ　Ｈ２ＣＨ２−）　ハドノン（Ｈｕｄｓｏｎ）　、　Ｄ、等］、Ｊ、 Ｍｅｄ、Ｃｈｅｍ、［１９８０年、第２３巻、１３９２〜１３９８頁、（−ＣＯ ＣＨ２−）アルムキスト（ＡＩＩａｑｕｉ＋Ｉ）　、　Ｒ，Ｇ、等］、Ｔｅｔｒ ａｈｅｄｒｏｎ　Ｌｅｔｔ、［１９８２年、第２３巻、２５３３頁、（−ＣＯＣ Ｈ２−）　、ジェニングスーホワイト（ｌｓｎｎｉｎｇｓ−Ｗｈｉｔｓ）　、Ｃ ，等］、ヨーロッパ特許出願ＥＰ　４５６６５号（１９８２年）およびケミカル ・アブストラクト（ＣＡ）（１９８２年第９７巻、３９４０５　［（−ＣＨ（Ｏ Ｈ）ＣＨ２−）、スツエルケ（Ｓｔｅｌｋυ、　Ｍ、　］　、およびＴｅｔｒａ ｈｅｄｒｏｎ　Ｌｅｔｔ、［１９８３年、第２４巻、４４０１〜４４０４頁、（ −ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ２−）ホラディ（Ｂｏｌｌｘｄｘｒ）　、　Ｍ、　Ｗ、等］ 。
特に好ましいものは、−ＣＯＣＨ２−および−ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ２−である。
以下の実施例は、本発明の種々のシュードペプチドを合成するための方法をさら に例示している。本開示に従い、本類似体化合物を合成する過程で構築された中 間体は、それ自体新規で有用な化合物であり、本発明の範囲内のものである。
投与および用途 本発明の化合物は、免疫調節剤であり、哺乳動物における関節炎のような免疫性 疾患の治療に有用である。
すなわち、これらの化合物およびそれらを含有する組成物は、先天性免疫不全（ 例えば、ディ・ジョージ症候群）；後天性免疫不全（例えば、熱傷後、術後また は放射線照射後損傷およびＡＩＤＳ）；自己免疫疾患（例えば、全身性エリテマ トーデス、慢性関節リウマチ）；アレルギー性疾患（例えば、アトピー性皮膚炎 ）；炎症；真菌、マイコプラズマまたはウィルスによる急性、慢性または再発性 感染（例えば、ヘルペス、癩）；サルコイド−シスおよび乾欝のような種々の免 疫系状態の治療における治療剤として有用である。
本発明は、また、単独で上記治療効果を供することができる、本発明の化合物（ その非毒性塩、アミドおよびエステルを含む）の有効量を含有する組成物を提供 する。この組成物は、生理学的に許容され得る液体、ゲルまたは固体希釈剤、補 助剤および賦形剤とともに提供することができる。
これら化合物および組成物は、家畜に対するような獣医学的使用において、また 他の治療剤と同様の方法によるヒトにおける臨床的使用において、哺乳動物に投 与できる。一般に、治療効果に必要とされる用量は、約０．０１ないし５０，０ ００μｇ／ｋｇであり、通常、０．１ないし１０，０００μｇ／ｋｇ動物体重で ある。あるいは、この範囲内の用量は、所望の治療効果が得られるまでの長期に 渡る継続的輸注によって投与できる。
代表的には、上記組成物は、液剤または懸濁剤のいずれかとしての注射剤として 調製され、注射剤調製に先立って液体中に溶解または懸濁させ液剤または懸濁剤 とするに好適な固形状態で調製することもできる。製剤は、乳剤とすることもで きる。有効成分は、しばしば、生理学的に許容でき、有効成分と適合性を有する 希釈剤または賦形剤と混合される。好適な希釈剤および賦形剤は、例えば、水、 食塩水、デキストロース、グリセロール等、またはそれらの組合せである。加え て、所望により、これら組成物は、湿潤剤または乳化剤、安定化剤またはｐＨ緩 衝剤等の少量の補助剤を含有していてもよい。
本組成物は、通常、例えば皮下注射または静脈内注射により、非経口的に投与さ れる。他の形態の投与に好適な別の製剤は、全開および鼻内エーロゾルであり、 ある場合には経口製剤であり得る。全開については、例えばポリアルキレングリ コールまたはトリク・ノセリドのような伝統的な結合剤および賦形剤を含有して いてもよく、該全開は、０．５ないし１０％、好ましくは工ないし２％の範囲内 で有効成分を含をする混合物として調製できる。経口製剤は、例えば薬学的等級 のマンニトール、ラクトース、スターチ、ステアリン酸マグネシウム、ナトリウ ムサッカリン、セルロース、炭酸マグネシウム等のような通常使用されている賦 形剤を含む。これら組成物は、溶液、懸濁液、錠剤、ビル、カプセル、徐放性製 剤、または粉末の形態を取り、工ないし９５％、好ましくは工ないし１０％の有 効成分を含有する。
本ペプチド化合物は、中性または塩の形態として組成物中に配合できる。薬学的 に許容され得る非毒性塩は、例えば塩酸またはリン酸のような無機酸、または酢 酸、シュウ酸、酒石酸、マンデル酸のような有機酸と（遊離アミノ基とにより） 形成される酸付加塩を含む。遊離カルボキシル基とともに形成される塩は、例え ば水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化アンモニウム、水酸化カルシウム 、または水酸化第二鉄のような無機塩基、およびイソプロピルアミン、トリメチ ルアミン、２−エチルアミノエタノール、ヒスチジン、プロ力イン等の有機塩基 から誘導できる。
本発明の化合物は、単独でまたは混合物として、および／またはスジレニン類の 調節剤のようなそれらの効果を改質する薬剤とともに投与することができる。
本発明の化合物は、また、標皿化試薬、通常、抗体を用いた免疫アッセイに使用 する抗血清を調製するためにも用いることができる。好都合には、本ポリペプチ ドは、必要ならばジアルデヒド、カルボンイミドまたは市販の結合剤を用（為で 、抗原性付与担体に結合できる。これら化合物および免疫学的試薬は、当該分野 でよく知られた手段により、発色団、フルオレセインやローダミンのような発蛍 光団、　Ｉ、　Ｓ、１４Ｃまたは３Ｈのような放射性同位体また（ま磁化粒子等 の種々の標識試薬で標識できる。
これらの標識化化合物および試薬、またはそれらを認識し、それらに特異的に結 合し得る標；化試薬は、例え１ｆ診断用試薬として有用である。生物学的検体か ら誘導された試料Ｃヨ、本発明の化合物に対する抗原決定基を有する物質の存在 または量についての検定に供せられる。さら１こ、モノクローナル抗体を当該分 野で既知の方法により調製すること力（てき、該抗体は、例えば免疫学的に関連 する化合物のインビボでの過剰産生を中和するといった治療的有用性を有して（ 入る。
以下の実施例は、本発明を例示するためのものであり、本発明を制限するもので はない。使用した表示法１こお０て、式（１）の化合物の配列を書き下した場合 、ｒ　（ｋ）　Ｊ　＋よ、ＣＯＣＨ２結合を表わす。
実施例１ないし３．５ないし１３、および１５なｌ、ＸＬ２１は、それぞれ、ペ プチド結合ＩＶＳ　ＩまたはＩ　Ｉ　Ｉｔこ−ＣＯ例４は、ペプチド結合ＩＶに −ＣＨ０ＨＣＨ２−結合を有する式（１）の化合物の合成を示す。実施例２２（ よ、ペプチド３および１５ないし２２に示したよ引こ行われる。
この発明の化合物は、また、標準的な液相ペプチド合成プロトコールにより合成 できる。実施例１４（よ、標準的な液相ペプチド合成プロトコールによる、ペプ チド結合ＩＶに−Ｃ施例２３および２４は、標準的な液相ペプチド合成プロトコ ールによるペプチド結合ＩＩＩに−ＣＯＣＨ２−結合を有する式（１）の化合物 の合成を示す。これらアプローチＣヨ、それぞれ反応スキーム１４．２３および ２４に示される。
これら実施例に示した手順は、反応条件等をより具体的１こ記述するものである 。反応スキーム１〜２４１こ示した工程を実施するための一般的方法は、当業者 １こよく知られてＩｖＡるものである。
Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｓｐ−Ｖａｌ（ｋｌＰｈｅｆＩＶ］Ｆ５−醋Ｐ スキーム　３ Ｂｏａ−Ｖａｌ（ｋ）Ｐｈｅ−○Ｈ Ｂｏａ−Ｖａｌ（ｋ）：’ｈｅ−０−レジン入ｒ　ｑ　−Ｎ　ｌ　ｅ　−Ａ、Ｓ 　ｐ　−’Ｊ　ａ　ｌ（ｋ　ｌ　？　ｉ”ｌ　ｅ＋！Ｖｌ＋Ｉｌｅ　ｒ　−７＠ ｐ スキーム　４ （＞ｒｑ−ＨＩ３−；、５ｐ−Ｖａｌ（ｋ）Ｐｈａｌスキーム　５ Ｂｏａ−Ｖａｌ（ｋｌＰｈｅ−ＯＨ Ｂｏｃ−Ｖａｌ［ｋ）Ｐｈｅ−０−レジン；、、ｃ−Ａｒｇ−ｐｒｏ−Ａｓｏ− ｖａｌｌｋｌＰｎ＝スキーム　６ Ｂｏｃ−Ｖａｌ（ｋｌＰｈｅ−０−１／ジ、ＶＸ−ＩＡｒｇ−Ｄ−Ｌｙｓ−声＋ ５ｏ−Ｖａｌ（ｋｌＰｈｅ（週Ｋ“２Ｆ５−Ｔ：（−） スキーム　７ 人ｒ９−人１ａ−Ａｓｐ−Ｖａｌ（ｋｌＰｈｅ（工ＶＩＡ２ＦｊＴ′、ＩＰ 符表千６−５０１９６１　（１６） Ａｒｇ（ｋｌＮｌｅ−Ａｓｐ−ＶａＬ−Ｐｈｅ（ＩＩＮｌｅ’％５−ＴＨＰ スキーム　９ ２３人ｒｇ［ｋｌＮｌｅ−ＯＢヒ λｒ９ｆｋｌＮｌｅ−人５ｐ−Ｖａｌ−Ｐｈｅ−ｔＪＨ２スキーム　１０ ２３人ｒｇ（ｋ）Ｎｌｅ−ＯＢｔ 入ｒｇ（ｋｌＮｌｅ−人５ｐ−Ｄ−１／ａｌ−Ｐｈｅ（山１ｅ２Ｘ／”ｙ５−７ Ｈｐ スキーム　１１ スキーム　１１　（続き） Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｓｐ（ｋ　１Ｖａｌ−Ｐｈｅスキーム　１２ Ｂｏｃ−Ａｓｐ（ｋｌＶａｌ−０）（ＸＩ工≦Ａｒｇ−？ｒ　ｏ−２，ｓｐ　［ ｋ　）Ｖａｌ−Ｐ！１ｅ−Ｎ：（２Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｓｐ（ｋｌＶａｌ−Ｔｙ ｒスキーム　１４ １１　ＴｓＯＨ Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｓｐ−ＶａｌｌｌＰｈ＝スキーム　１５ スキーム　１５（！ｌ！き） ＩＩＨＯＢヒ、ＤＣＣ ヨｏｃ−ｔ／ａｌ（ｋｌＰｈ＝−レジンＡ、ｒｇイ＝Ｉ＝Ｎｌｅ−Ａｓｐ−１／ ａｌｆｋｌＰ？＋ｅアニソール　精製 （工ＶＩＮ−ｒ−ｉｅＮｌｅ２Ｆ５−ＴＨＰスキーム　１６ Ｅ２Ｃ１２ スキーム　１６（続き） 入ｒｇ−Ｎｉづｅ−Ｎｌｅ−Ａｓｐ−Ｖａｌ（ｋｌ’／ａｌｆＩＶ）Ｎ−ＭｅＮ ｌ＝２Ｖ’ｒｒ（Ｐスキーム　１７ Δ工ｚ−６ スキーム　１７（続き） Ａｒｇ−Ｌｙｓ−八５ｐ（ｋｌＡｌａ−Ｐ？＋ｅ（Ｈ１ｌ入’Ｆ’Ｔ？４Ｐ スキーム　１８ スキーム　１８（続き） ＸＶＩｒニー９’　Ｋ’、’ＩＩＩ−ＬＯ’スキーム　１８（続き） Ｗ工ＩニーＩＱ＋ （工ＩＩ　ＩＮ−ＭｅＫ２Ｆ５−ＴＨＰスキーム　１９ 亙Ｘ」　凰にユ １）レジン洗浄 ＢｏＣ−Ａｒｇ（Ｔｓｌ−Ｎｌｅ−人５ｐｆＯＢｚｌｌ−Ｖａｌｆｋｌｖａｌ− レジン４１　Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｓｌ−ＯＢしＡｒｇ−Ｎｌｅ−Ａｓｐ−Ｖａｌ （ｋｌｖａ１２１　Ｈ’ＬＣ精製 ｆＩＶＩＮ１ｅ２ｖ５−耐Ｐ スキーム　２０ （ＩＶＩＮｌｅ２Ｆ５−ＴＨＰ　（次）Ｎｌｅ２Ｄ３ｆＯＭｅ）Ｆ”ｆＯＭｅｌ −藷！’（実施例３） スキーム　２１ ｆＨ工ＩＦ”−ＴＨＰ　（工ＩＩ　１０３（Ｏｆ−１ｅ　ＩＦ５ＩαＬ１４ｓ　 ｌ　−Ｔ’：４ｐ（実施例１１） スキーム　２２ スキーム　２２（続き） 、ｘｒｇ＋ＩＩｆｃＧ１２ＮＨＩＬｙｓ−Ａｓｐ−ｖａｌ−Ｐｈｅスキーム　２ ３ スキーム　２４ 実施例において、ペプチド化学において通常用いられる以下の略号が使用されて いる。
ＴＭＳ−ＣＩ　クロロトリメチルシランＴｒｔ−ＣＩ　）リフェニルメチルクロ ライド−ＯＢ　ｔ　（、−ベンゾトリアゾールＤＣＣジシクロへキシルカルボジ イミドＴＨＦ　テトラヒドロフラン Ｂｏｃ　ｔｅｒｔ−プチルオ牛ジカルボニルτｓＯＨｐ−トルエンスルホン酸（ トシル）−ＯＢｚｌ　ベンジルオキシ基 ＩｐＯＨインプロパノ−ル ーＣＩＺ　クロロベンジルオキシカルボニル基−ｃＨｅｘ　シクロヘキシル基 ＴＥＡ　）ジメチルアミノ （Ｂｏｃ）　Ｏジーｔｅｒｔ−ブチルジカーボネート Ａ　Ｃ２０無水酢酸 ＤＭＦ　Ｎ、Ｎ−ジメチルポルムアミドＤＩＥＡ　ジイソプロピルエチルアミン ２　ベンジルオキシカルボニル基 ＩＢＣＦ　インブチルクロロホルメートＮＭＭ　Ｎ−メチルモルホリン ＴＦＡ　）リフルオロ酢酸 ＤＭＥ　ジメトキシエタン Ｍ　Ｂ　ＨＡ　ｐ−メチルベンズヒドリルアミンレｌ　ジン ＢＯＰ　ベンゾトリアゾール−１−イルオキシトリス（ジメチルアミノ）ホスホ ニウムへキサフルオロホスフェート ＤＣＵ　ンシクロヘキシル尿素 ＨＯ５ｕ　Ｎ−ヒトミキシスクシンイミドＨＦ　フッ化水素（酸） Ｒｕ　０２　二酸化ルテニウム Ｃ，ｓ　ＨＣＯ３セシウムジカーボネートＥ　ｔ　３　Ｓ　ｒ　Ｈ）リエチルシ ランＢＦ３　三フッ化ホウ素 Ｂ　Ｈ３水素化ホウＸ：（ボラン） ＬｉＡＩＨ水素化リチウムアルミニウムＮ　ａ　Ｂ　Ｈ３ＣＮ　シアノボロ水素 化ナトリウム以下の追加の略号も使用されている。
ＲＴ　保持時間 ＴＬＣ薄層クロマトグラフィー ＨＰＬＣ高性能液体クロマトグラフィー実施例 Ｎ−トリチル−Ｌ−バリン−メルカプトピリジンエステルクロロホルム／アセト ニトリル（５／１）５００ｍＬ中のＬ−バーリン（ジグ？　（Ｓｉｇｍａ　）　 ）　２５．　０ｇ　（０，２１モル）およびクロロトリメチルシラン（アルドリ ッチ（Ａｌｄｒｉｃｈ　）　）２７．１ｍＬ　（２３，２ｇ、０．２１ｍｏｌ） をアルゴン下、還流下で２時間撹拌した。ついで、この混合物を０℃に冷却し、 トリエチルアミン５９．３ｍＬ　（４３，０ｇ５０．４３ｍｏ　１）で滴下処理 し、ついで、クロロホルム２０ＯｍＬ中のトリフェニルメチルクロライド５９． ４ｇ　（（Ｌ　２１モル）溶液で滴下処理した。この混合物を室温で１．５時間 撹拌し、ついで５％クエン酸７５０ｍＬとジエチルエーテル７５０ｍＬとの間で 分配した。有機層を１モル濃度の水酸化ナトリウム（２Ｘ５００ｍＬ）で洗浄し た後、水Ｃ５００ｒｎＬ）で洗浄した。水洗液を併せ、０℃に冷却し、氷酢酸で 中和した（ｐＨ−６〜７）。この混合物をエーテルで抽出した（３×５００ｍＬ ）。有機抽出物を併せ、硫酸ナトリウム上で乾燥し、濃縮した。その白色泡状生 成物（２７，３ｇ）を酢酸エチル３００ｍＬに溶解し、２−メルカプトピリジン ８．５ｇ（７６，４ｍｍｏ　１）で処理した。この溶液を０℃に冷却し、ジシク ロへキシルカルボジイミド１５．７５ｇ　（７６，４ｍｍｏｌ）で処理した。こ の溶液を０℃で３時間撹拌した後、室温で１６時間撹拌した。この混合物をろ過 し、ろ液を濃縮した。残渣をヘキサン／酢酸エチル（１０／１）から結晶化させ ることにより、白色結晶生成物Ｎ−）リチルーし一バリンーメルカプトピリジノ エステル（Ｉ−１）１８．４ｇをバリンからの収率２０％で得た。
分析　Ｃ２９Ｈ２８ＮＯ５・　０．１水和物に対する一計算値：Ｃ，７６，６５ ：Ｈ，６，２６；Ｎ、６．　１６ 実測値：Ｃ，７６，３０；Ｈ，６，３６゜Ｎ、６．　１４ ３−ブロモメチル−４−フェニル−１−ブテン（１−２）テトラヒドロフラン中 ０．　２モル濃度のベンジルマグネシウムクロライド（アルドリッチ、０　、　 １５　ｍ　ｏ　１に相当）７５ｍＬおよび沃化第一銅２．８６ｇをアルゴン下、 ０℃で１５分間撹拌した後、室温で２５分間撹拌した。この混合物を、無水ジエ チルエーテル１５０ｍＬ中の１，４−ジブロモ−２−ブテン２１．４ｇ　（０， １ｍｏｌ）の−６０℃の溶液に加えた。この混合物を一６０℃で３０分間撹拌し た後、室温で１６時間撹拌した。この混合物を５０％飽和塩化アンモニウム／氷 ４００ｍＬに注ぎ、エーテルで抽出した。有機層を乾燥（硫酸ナトリウム）、濃 縮し、黄色油状物（２１，２ｇ）を得た。ＮＭＲは、生成物３−ブロモメチル− ４−フェニル−１−ブテン（１−２）が７０％、ジベンジルが３０％存在するこ とを示した。
６−ドリチルアミノー７−メチルー３−ベンジル−１−オクテン−５−オン（１ −４＞ 乾燥テトラヒドロフラン１５０ｍＬ中のマグネシウム４゜４ｇをエチレンジブロ マイド０．１ｍＬおよび触媒量の沃素で処理した。乾燥テトラヒドロフラン７Ｏ ｍＬ中の３−ブロモメチル−４−フェニル−１−ブテン（１−２）（純度７０％ で２８ｇ５１９．６ｇ　（８７ｍｍｏ　Ｉ）に相当）溶液１０ｍＬを加えた。こ の混合物をアルゴン下５０〜６０℃に加熱した。反応開始後、５０〜６０℃の反 応温度を維持しながら、残りのハロゲン化物を加えた。この混合物を穏やかに還 流させながら２時間撹拌し、ついで室温に冷却してグリニヤール化合物（４−フ ェニル−ブテン−１−イル−３−メチルマグネシウムブロマイド）（Ｉ−３）を 得た。Ｎ−トリチル−Ｌ−バリンメルカプトピリジンエステル（Ｉ−１）　２８ ｇ　（６２ｍｍｏｌ）を全て一度に加えた。この混合物を５０〜６０℃で２時間 撹拌した。この混合物を０℃に冷却し、飽和塩化アンモニウムに注ぎ、エーテル で抽出した。有機層を乾燥（硫酸マグネシウム）、濃縮した。シリカゲル上のフ ラッシュクロマトグラフィー（ヘキサ２９０．５％酢酸エチル）によりジアステ レオマーを分離した。異性体Ａが初めに溶出シ、次に異性体Ｂが溶出した。両異 性体についての全収量は、１異性体Ａ 質量分光は、予期した４８６　（ＭＨ）を示した。
分析　Ｃ３５Ｈ３７Ｎ　Ｏに対する 計算値：　Ｃ，８６，２０：Ｈ，７，６５；Ｎ、２．　８７ 実測値ＩＣ，８６，１８，Ｈ，７，６７；Ｎ、２．　８５ ０．１１２　Ｃｄ、　：ｌＨｌ、　１．０３　（ｃｌ、　３Ｈ１，２，０８＋ｍ 、　２Ｂ１．２．ＬＯ−２，６５（ｍ、　４１（１３，１６ｆｍ、　ＩＨＩ　３ ．２６　（ｒｎ、　ＬＨＩ　４．７０　ｆｄｄ、　ＩＨＩ。
４．８４　（ａｄ、　ＬＨＩ、　５．４２　ｆｒｎ、　１１（］、　６．９７− ７．５６　（ｍ、　２０Ｍ＋　ＣＨ＆Ｎ（異性体Ａ） 異性体Ｂ Ｏ，Ｂ４　ｆｄ、　３Ｈ１，１，１０（ｄ、３ＨＩ、　２．００　（ｍ、　２Ｈ ）、　２．２０−２．６５　Ｔｍ、　４Ｈ１３，０５＋ｍ、　１Ｂ１．１：１０ 　（ｍ、　ＩＨＩ　４．７６　（ｔ、　ＩＨＩ　４．９０（ｄｄ、　ＩＨＩ　５ ．４２　Ｌｍ、　１８１６．９７−７．５４　＋ｍ、　２０）Ｅｌ。
５−Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノ−６−メチル−２−ベンジル −４−オキソ−へブタン酸（Ｉ−７）アセトニトリル５０ｍＬ中の６−ドリチル アミノー７−メチルー３−ベンジル−１−オクテン−５−オン（Ｉ−４、βジア ステレオマー）１　０６ｇ　（２，１７ｍｍｏ　ｌ）およびｐ−）ルエンスルホ ン酸（２，３９ｍｍｏＬ　１．１ｅｑ）を室温で１時間撹拌した。濃縮すること により白色残渣を得た。ヘキサン／エーテル（３／２．５０ｍＬ）を用い粉砕し 、白色固体生成物６−アミツーツーメチル−３−ベンジル−１−オクテン−５− オンｐ−トルエンスルホン酸塩（Ｉ−５）０．８ｇ（理論値の８８％）を得た。
ジクロロメタン５０ｍＬ中の６−アミツーツーメチル−３−ベンジル−１−オク テン−５−オントシレート（Ｉ−５）０．８ｇ　（１，９ｍｍｏ　＋）およびジ ーｔｅｒｔ−ブチルジカーボネート０．８４ｇ　（３，８ｍｍｏ　Ｉ）（７）溶 液をジクロロメタン２ｍＬ中のトリエチルアミン０．２１ｇ　（２，１ｍｍ０１ ）で１０分間かけて滴下処理した。この溶液を室温で１６時間撹拌した。この溶 液を０，５Ｎ塩酸、水、１Ｍ炭酸ナトリウム、水の順で洗浄した。有機層を乾燥 （硫酸ナトリウム）、濃縮した。シリカゲル上のフラッシュクロマトグラフィー （５０％へキサン／ジクロロメタン）により、無色ンロソブ状Ｎ−ｔｅｒｔ−ブ チルオキシカルボニル−６−アミノ−７−メチル−３−ベンジル−１−オクテン −５−オン（ｒ−６）０．４ｇを理論値の６１％で得た。
アセトン１０ｍＬ中のＮ−ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル−６−アミノ−７ −メチル−３−ベンジル−１−オクテン−５−オン（■−６，０，７８ｍｍｏ　 １）０．２７ｇを０℃に冷却し、水５ｍＬ中のメタ過ヨウ素酸ナトリウム０．　 ９ｇ　（４，２ｍｍｏりおよびＲｕＯ−ｘＨ２Ｏ（５９，２７％Ｒｕ）１０．５ ｍｇの０℃溶液で処理した。この混合物を室温で１時間撹拌し、ついでセライト （Ｃｔｌｉｌｓ）を通じてろ過した。セライトパッドをアセトンで洗浄した。ろ 液および洗液を併せ、塩化ナトリウムで飽和させた。この二相混合物をクロロホ ルムで抽出した（エマルジョンのろ過が必要であった）。有機相を１０％亜硫酸 水素ナトリウムで洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥し、濃縮して５−Ｎ−ｔｅｒ ｔ−ブチルオキシカルボニルアミノ−６−メチル−２−ベンジル−４−オキソ− へブタン酸（１−７）　０．　１８ｇ　（理論値の６４％）を淡褐色泡状固体と して得た。質量分光は、予期した３６４　（Ｍ＋１）を示している。
分析　Ｃ２ｏＨ２ｏＮＯ５・０１５水和物に対する計算値：Ｃ，６５，６０：Ｈ ，８，０６。
Ｎ、３．８２ 実測値二Ｃ，６５，６１、Ｈ，７，９５゜Ｎ、３．　７４ ５−Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノ−６−メチル−２−ベンジル −４−オキソ−へブタン酸の異性体Ａのメリフィールドクロロメチルレジンへの 結合（Ｉ−８異性体Ａ） ケトメチレンサブユニッ）Ｉ−７の異性体Ａ　（０，５００ｇ、１．３８ｍｍｏ 　１）をＭｅＯＨと水の混合物（５０ｍＬ９・１）に溶解した。固体炭酸水素セ シウム（０，２６８ｇ、１．３８ｍｍｏ　］）をこの混合物に加え、溶液を室温 で１時間撹拌した。溶媒を減圧下で除去し、得られた残渣をトルエンにより３回 （各５０ｍＬ）蒸留させて残水を除去し、ついで高真空下に一装置いた。このケ トメチレンセシウム塩をＤＭＦ（５０ｍＬ）に溶解し、メリフィールドクロロメ チルレジン（２，Ｏｌｇ、０．７５ｍｅｑ／ｇレジン）を溶液に加えた。この結 合物をアルゴン雰囲気下、５０”Ｃで４８時間撹拌した。反応混合物を室温に冷 却し、ろ過し、レジンをメタノール、メチレンクロライドおよびインプロパツー ルで完全に洗浄した。レジンをジエチルエーテルですすぎ、真空下で２４時間乾 燥した。これにより所望の誘導化レジンｌ−８（異性体Ａ）（２，２９ｇ、０． ４３７ｍｅｑ／ｇレジン）を得た。未反応のケトメチレンサブユニット（０，１ １０ｇ。
０．３０２ｍｍｏｌ）を洗液から回収した。
５−Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノ−６−メチル−２−ベンジル −４−オキソ−へブタン酸の異性体Ｂのメリフィールドクロロメチルレジンへの 結合（Ｉ−８異性体且ム 前述と同様にして、ケトメチレンサブユニットＩ−７の異性体Ｂ　（１，６０ｇ 、４．４１ｍｍｏ　Ｉ）を炭酸水素セシウム（０，８５７ｇ、４．４２ｍｍｏ　 １）で処理した。メリフィールドクロロメチルレジン（９，０２ｇ、０．７５ｍ ｅｑ／ｇレジン）への結合により、所望の誘導化レジンｌ−８（異性体Ｂ）（１ ０，２ｇ、０．３４９ｍｅｑ／ｇレジン）を得た。
Ｎ’　−（Ｎ’−ブチルオキシカルボニル−Ｎ″−２−クロロベンジルオキシカ ルボニル−し−リシル）−Ｌ−アスパラギン酸β−シクロヘキシルエステル（１ −９＞Ｎ　−ブチルオキシカルボニル−Ｎ　−２−クロロベンジルオキシカルボ ニル−し−リジン（２，０８ｇ、５．０ｍｍｏｆ）およびＮ−ヒトミキシスクシ ンイミド（０，６３４ｇ、５．５ｍｏｌ）をメチレンクロライド（２５ｍＬ）に 溶解し、０℃に冷却した（氷−水浴）。メチレンクロライド中のＤＣＣ（Ｌ、２ ５６ｇ、６．０ｍｍｏ　１）を５分間カケテ滴下シた。この反応混合物を０℃で ３時間撹拌し、ついで４℃で一晩放置した。この物質をろ過し、ろ液を固体とな るまで蒸発に供した。Ｎ　−Ｂｏｃアスパラギン酸β−シクロヘキシルエステル （２，２１ｇ、７．０ｍｍｏｌ）をメチレンクロライド（４０ｍＬ）中５０％Ｔ ＦＡと１時間反応させ、その混合物を固体となるまで蒸発に供することによって 調製したア゛　スパラギン酸β−シクロヘキシルエステルのトリフルオロ酢酸塩 を５０％水性ＴＨＦに溶解し、Ｎ−メチルモルホリンでｐＨを８に調整した。こ のスクシニミジルエステルをＴＨＦ（１０ｍＬ）に溶解し、上記アスパラギン酸 溶液に加えた。
Ｎ−メチルモルホリンを用いてｐＨを８に調整し、反応混合物を一晩撹拌した。
減圧下でＴＨＦを除去し、粗製物をジエチルエーテル（２００ｍＬ）と５％炭酸 水素ナトリウム（２００ｍＬ）との間で分配させた。炭酸水素塩層を注意深くｐ Ｈ３まで酸性化し、酢酸エチルで３回抽出した（各１００ｍＬ）。併せた有機層 を硫酸ナトリウム上で乾燥し、ろ過し、泡状固体となるまで蒸発に供した。この 物質をシリカゲルおヨヒフィルターパッドクロマトグラフィーを用いて精製した 。
溶出は、０．２５％の酢酸を含有する酢酸エチル中０〜１０％段階勾配のエタノ ールを用いて行った。純粋画分を集め、泡状固体となるまで蒸発に供してＮ　（ ！　−（Ｎ　（７−ブチルオキシカルボニル−Ｎ　−２−クロロベンジルオキシ カルボニル−Ｌ−リシル）−Ｌ−アスパラギン酸β−シクロヘキシルエステル（ １−９）２．３３ｇ　（７６％）を得た。
Ｒｒ　Ｏ、２Ｂ　（Ｅ　ＯＡ　ｃ中５％ＥｔＯＨ，０，２５％Ａｃ０Ｈ） ’Ｈ−Ｆｒ＝・ｍ　ＬＣＤＣ１３）　ａ　ｌ−２−１９５（ｍ、　１９Ｈ１，２ −８１Ｌｍ。
２Ｈ１，３，１８ｆｍ、　２Ｈ１，４，１８＋ｍ、　ＬＨＩ、　４．７５　（ｍ 、　３Ｈ１，５，２０Ｉｓ。
２ＨＩ、　５．４２　（ｍ、　Ｌｉ（＋、　７．３５　ｆｍ、　４Ｈ１；分析　 Ｃ２９Ｈ４２Ｎ３０９Ｃ１に対する計算値：Ｃ，５６，９０；Ｈ，６，９２；Ｎ 、６．　８６ 実測値：Ｃ，５７，００；Ｈ，７，２０；Ｎ、６．　８４ ５−Ｎ−（Ｌ−アルギニル−し−リシル−Ｌ−アスパルチル）−アミノ−６−メ チル−２−ベンジル−４−オキソ−へブタン酸（（ＩＶ）Ｆ’−ＴＨＰ、異性体 Ａ）の固相合成アルムキストら（１９８８）の一般的手法に従い、Ｂｏｃ−Ｌｙ ｓ　（ＣＩＺ）Ａｓｐ　（ｃＨｅＸ）（１−９）（１，２２ｇ、２．０ｍｍｏ　 Ｉ）およびＨＯＢｔ水和物（０，３１０ｇ、２．０３ｍｍｏｌ）をメチレンクロ ライド（５ｍＬ）　で希釈したＤＭＦ（５ｍＬンに溶解し、水浴中でＯ’Ｃに冷 却した。メチレンクロライド（１０ｍＬ）中ノＤＣＣ（０，４４６ｇ、２．１６ ｍｍｏｌ）を５分間かけて滴下した。この反応混合物をメチレンクロライド中で １５分間撹拌した後、４０％ＴＦＡ／１０％アニソール１５０％ＣＨ２ｃ１２で ３０分間処理してＢｏｃ基を除去した。ジペプチドの活性化中、ケトメチレン誘 導化メリフィールドレジン（Ｉ−Ｂａ）　（２゜２９ｇ、０．４３７ｍｅｑ／ｇ レジン）をメチレンクロライド９ヰ０ で３０分間）してＢｏｃ基を除去した。このペプチド−レジンをメチレンクロラ イドおよびイソプロパツールで交互に洗浄して残存ＴＦＡを洗いだした。活性化 ジペプチド溶液（上記１−９からＲ製）をろ過し、ジイソプロピルエチルアミン （０．３５ｍＬ，２．０ｍｍｏｌ）とともニヘフチトーレシンに沈木た。この反 応混合物を室温で振盪した。反応は、５時間後に完結したと決定された（負のカ イザー（Ｌｉｓｓｒ）試験）。ペプチド−レジンをメチレンクロライド（３×） 、イソプロパツール（２×）およびメチレンクロライド（３×）で順次洗浄した 。ペプチド−レジンをメチレンクロライド９ヰ０ ０分間）することによってＢｏｃ基を除去し、レジンを洗浄してＴＦＡを除去し た。Ｉ−９に関し上に記載したと同じ手法に従い、ＨＯＢｔ水和物（０．３１６ ｇ，２．０６ｍｍ。
１）およびＤＣＣ　（０．４４８ｇ，２．１７ｍｍｏ　ｌ）を用いてＮａ−Ｂｏ ｃ−Ｎｇ−トシル−アルギニン（０，８５７ｇ、２．０ｍｍｏ　１）をそのＨＯ Ｂｔエステルに転化させた。
この活性化エステルをジイソプロピルエチルアミン（０，３５０ｍＬ、２．０ｍ ｍｏ　１）とともにレジンに添加し、反応容器を一晩振盪した。反応の完結を確 認しく負のカイザー試験）、ペプチド−レジンをメチレンクロライド（３Ｘ）、 インプロパツール（２Ｘ）、メチレンクロライド（２×）およびメタノール（２ ×）で順次洗浄した。このペプチド−レジンを＝晩真空下に置いて乾燥ペプチド −レジン３．０４ｇを得た。Ｂｏｃ基を上述のように除去し、レジンをメチレン クロライド（３Ｘ）、インプロパツール（２Ｘ）、メチレンクロライド（２×） およびメタノール（２×）で順次洗浄した。
このペプチド−レジンを真空下で３時間乾燥し、ついで無水ＨＦ　（３０ｍＬ） 中のアニソール（３ｍＬ）によりＯ”Ｃで９０分間処理した。ＨＦ／アニソール を真空下で除去し、レジンを無水ジエチルエーテルで洗浄した。０．　５％ＴＦ Ａを含有する水中１０％アセトニトリルを用いて粗製Ｎ−（Ｌ−アルギニル−し −リシル−し−アスパルチル）−５−アミノ−６−メチル−２−ベンジル−４− オキソ−へブタン酸（（ＩＶ）Ｆ５−ＴＨＰ、異性体Ａ）をレジンから抽出した （４回の２５ｍＬ抽出）。この物質を部分的に蒸発に供してアセトニトリルを除 去し、ついで冷凍し、凍結乾燥した。０，１％ＴＦＡを含有する水中５〜２５％ 勾配のアセトニトリルを用いた直線的ＨＰＬＣにより生成物を精製した。純粋画 分（水中２０％アセトニトリル１０．１％ＴＦＡにより１ｍＬ／分で溶出サセル ハイダ−ｉり（Ｖ７ｄｘＣ）２１８ＴＰ５４１５カラムにおいてに’−３，３５ ｍＬ）を集め、アセトニトリルを蒸発除去し、冷凍し、凍結乾燥した。収量３０ ８．３ｍｇ（３１％）。
ＦＡＢ−ＭＳ　：　６６３ｍ／ｅ　（Ｍ＋Ｈ）分析　Ｃ３，Ｈ５ｏＮ８０８−３ ＣＦ３Ｃｏ２Ｈに対する計算値・Ｃ，４４，２３、Ｈ，５，３１；Ｎ、１１．１ ５．Ｆ、１７．０２ 、実測値：Ｃ，４４，０４，Ｈ，５，１７゜Ｎ、１１．０６．Ｆ、１６．７７ ５−Ｎ−（Ｌ−アルギニル−し−リシル−Ｌ−アスパルチル）−アミノ−６−メ チル−２−ベンジル−４−オキソ−へブタン酸（（ＩＶ）Ｆ５−ＴＨＰ、異性体 Ｂ）の固相合成（ＩＶ）Ｆ５−ＴＨＰ　（異性体Ａ）を合成するために用いたも のと同じ手法を用い、Ｉ−９（１，８４ｇ、３．　Ｑｍｍｏｌ）およびＨＯＢｔ 水和物（０，４６０ｇ、３．０ｍｍ。
１）をＤＣＣ（０，６８０ｇ、３．３０ｍｍｏ　１）を用いて結合し、得られた 活性化エステルをジイソプロピルエチルアミン（０，５２５ｍＬ、玉　Ｏｍｍｏ ｌ）とともに脱保護ケトメチレン誘導化メリフィールドレジン１−８のＴＦＡ塩 （４，１０ｇ、０．３４９ｍｅｑ／ｇレジン）に加えた。反応は４時間後に完結 したと決定された（負のカイザー試験）。
Ｂｏｃ基の除去に続いて、ペプチド−レジンを洗浄し、ジイソプロピルエチルア ミン（０，５２５ｍＬ、３．０ｍｍｏ　１）の存在下にアミノ酸誘導体（０，８ ５７ｇ、２．Ｏｍｍｏｌ）をＨＯＢｔ水和物（０，３１６ｇ、２．０６ｍｍｏ　 １）およびＤＣＣ（０，４４８ｇ、２．１７ｍｍｏ　１）と反応させることによ って調製したＮａ−Ｂｏ　Ｃ−Ｎｇ−）シル−アルギニンのＨＯＢｔエステルと ２．５時間反応させた。このペプチド−レジンを洗浄し、真空下で一晩放置して 乾燥ペプチド−レジン４．９８ｇを得た。異性体Ａに用いた方法と同様にしてレ ジンからペプチドの離脱および回収を行った。０．１％ＴＦＡを含有する水中５ 〜２５％勾配のアセトニトリルを用いた直線的ＨＰＬＣにより生成物を精製した 。純粋画分（水中２０％アセトニトリル１０．１％ＴＦＡにより１ｍＬ／分で溶 出させるバイダック２１８７Ｐ５４１５カラムにおいてに’　＝４．４３ｍＬ） を集め、アセトニトリルを蒸発除去し、冷凍し、凍結乾燥した。収量　３２０． ０ｍｇ　（２１％）。
ＦＡＢ−ＭＳ　：　６６３ｍ／ｅ　（Ｍ＋Ｈ）分析　Ｃ３１Ｈ５ｏＮ８０８・　 ３．５ＣＦ３ＣＯＯＨ−Ｈ２Ｃに対する 計算値：（，４２，２６，Ｈ，５，１８゜Ｎ、１０．３８；Ｆ、１８．４７゜ 実測値：Ｃ，４２，３６，Ｈ，５，１７゜Ｎ、１０．６０；Ｆ、１８．００゜ 実施例　２ （（ＩＶ）Ｎ１　ｅ’　Ａ’　Ｆ’−ＴＨＰ）の調製Ｎ−トリチル−し−アラニ ン（ＩＩ−２）りａａホルム（６４０ｍＬ）とアセトニトリル（１６０ｍＬ）の 混合物中のし一アラニン（４０，０ｇ、０．４５ｍｍｏ１）およびクロロトリメ チルシラン（４８，８ｇ、０．４５ｍｍｏ　ｌ）をアルゴン下、還流下で２時間 撹拌した。この混合物を０℃に冷却し、トリエチルアミン（９０，９ｇ、０．９ ０ｍｍｏ　１）で滴下処理し、ついでクロロホルム（４００ｍＬ）中のトリフェ ニルメチルクロライド（１２５，４５ｇ１０．４５ｍｍｏ＋）の溶液で滴下処理 した。この混合物を室温で１時間撹拌し、ついで、メタノール（４５０ｍＬ）を 加えることによって急冷した。泡状固体となるまで蒸発に供した後、固体を水冷 ５％クエン酸（１０００ｍＬ）とジエチルエーテル（１５００ｍＬ）の間で分配 させ、有機層をＩＮ　ＮａＯＨで抽出した（２Ｘ１０００ｍＬ）、併せた水層を 酢酸で中和し、酢酸エチルで抽出した（３Ｘ５００ｍＬ）。
有機抽出物を併せ、ＭｇＳＯ４上で乾燥し、蒸発に供して１３３．８ｇ　（９０ ％）のｌｌ−２を得た。
”Ｈ拓Ｇ　（ＣＤＣｌ３１６１．２１　（ｄ　７３Ｈｌ　、３−３２　＋　ｍ　 、ＩＨ］　。
６．４５　（ｂｓ、ＬＨＩ、７．００−７．３６　（ｍ、１５Ｈ１゜Ｎ−トリチ ル−Ｌ−アラニン−２−メルカプトピリジンエステル（ＩＩ−３） 酢酸エチル（１６０ｍＬ）中のＩ　Ｉ−２（１４，２ｇ、４２．８ｍｍｏｌ）と ２−メルカプトピリジン（４−７５ｇ。
４２．８ｍｍｏｌ）の溶液にＤＣＣ（９，１ｇ、４４．１ｍｍｏ　１）を加え、 得られた混合物を室温で４日間撹拌した。
ＤＣＵをろ別し、ろ液を蒸発に供して淡黄色固体を得た。この物質を結晶化させ て４．１８ｇ　（２３％）の１１−３を得た。
１Ｈ−印１ｃＤｃ１３１　ｏ　０−９８　ｆｄ、　３Ｈ１，２，３６（ｄ、　Ｌ 吐３．５６　ｆｍ、　ＩＨＩ、　７．００−７．６０　（ｍ、　１８Ｈ１，８， ４０（ｍ、　１ｉｆｌ。
ＴＨＦ　（５０ｍＬ）中のハロゲン化物１１−４　（２，２ｇ。
９．８６ｍｍｏ　１）およびＭｇターニング（ｌｕｒｅｉｎｇ　）　（５００ｍ Ｌ）を用いて、先に記載（Ｉ−３、実施例１）したようにしてグリニヤール化合 物１１−５を調製した。この反応はヨウ素の結晶を用いて開始し、２時間還流さ せた。室温に冷却後、ＴＨＦ　（５０ｍＬ）中のＩ　Ｉ−３（４，１８ｇ、９゜ ８６ｍｍｏｌ）の溶液を１５分間かけて滴下した。得られた混合物を６５℃で２ 時間撹拌した後、室温で一晩撹拌した。
この溶液をジエチルエーテル（４００ｍＬ）と飽和ＮＨ４Ｃｌ　（４００ｍＬ） の間で分配させた。有機層を飽和ブライン（ｂ＋ｉｕ　）で洗浄し、ＭｇＳＯ４ 上で乾燥し、蒸発に供して淡黄色シロップを得た。この物質を、フラッシュクロ マトグラフィーによりヘキサン中２．５％酢酸エチルで溶出させて１．９８ｇ　 （４３，８％）のｌｌ−６を無色シロップとして得た。
ｌＨＮＭＲ（ｃＤｃｌ：＋］　６　Ｌ、ｌｓ　（ｍ、コ１り、１．５０　（ｍ、 ＩＭ）。
２．００　（ｍ、　ＬＨＩ、　２．２２　（ｍ、　ＬＨＩ、　２．４６　Ｌｍ、 　２Ｆ！＋、　３．２１　（ｍ、　２！（ｌ。
４．６０−４．８８　＋ｒｎ、　２Ｈ１，５，２８−５，７２（ｍ、　ＩＨｌ、 　６．９５−７．５２　（ｍ、　２０Ｈ１゜６−ｊｅｒｔ−ブチルオキシカルボ ニルアミノ−３−ベンジル−１−へブテン−５−オン（ＩＩ−７）化合物Ｉ　Ｉ −６（１，８８ｇ、３．９８ｍｍｏ　１）をアセトニトリル（５０ｍＬ）に溶解 し、ｐ−）ルエンスルホン酸−水和物（８３２ｍｇ、３．９８ｍｍｏ　１）で処 理し、得られた溶液を室温で２時間撹拌した。溶媒を除去し、生成物をＣＨ２Ｃ ｌ２　（５０ｍＬ）に懸濁させた。コノ溶液Ｌ　シー　ｔｅｒｔ−プチルジカー ボネー）　（１，７６ｇ、７．９６ｍｍｏ１）およびトリエチルアミン（０，４ ４ｇ、７．９６ｍｍｏ１）を加え、この反応混合物を室温で一晩撹拌した。この 溶液を０．５Ｎ　ＨＣＩ、水、１Ｍ炭酸ナトリウムおよび水で洗浄した。有機層 をＮａ２ＳＯ４上で乾燥し、ついで油状物となるまで蒸発に供した。溶出剤とし てメチレンクロライドを用いたシリカゲル上のフラッシュクロマトグラフィーに より０．９８ｇ　（７７，６％）のｌｌ−７を無色油状物として得た。
９０Ｍ’ＨｚＩＨＮＭＲｆｃＤｃ１３１　６　１．３６　［ｄ、３Ｈ１，１，５ ２（ｓ。
（ｍ、　ＩＨ）、　４．９０−５．４２　＋ｍ、　３ＨＩ、　５．６２−６．０ ２　（ｍ、　ＩＨＩ、　７．３２　（ｍ。
５−ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノ−４−オキソ−２−ベンジル−へ 牛サン酸（ＩＩ−８）水（２０ｍＬ）中メタ過ヨウ素酸ナトリウム（４，８６ｇ 。
２２、．６ｍｍｏ　１）を含有する溶液のアリコート（ｘｌｉｑｕｏｌ　）（４ ｍＬ）を用いてＲｕＯ２・ｘＨ２Ｏ（６，４ｍｇ、５９゜３％Ｒｕ）を溶解した 。メタ過ヨウ素酸塩溶液の第２のアリコー）　（４ｍＬ）をアセトン（３０ｍＬ ）中の化合物ｒＩ−７（９００ｍｇ、２．８４ｍｍｏ　１）（７）溶液ニ加工、 得うした混合物を室温で撹拌した。この混合物に上記ルテニウム−メタ過ヨウ素 酸塩溶液を５分間かけて滴下した。ついで残りの過ヨウ素酸塩溶液を１０分間か けて滴下し、この反応混合物を室温で３時間撹拌した。この混合物をセライトの パッドを通してろ過し、パッドをアセトンで洗浄した（２Ｈ３０ｍＬ）。真空下 でアセトンを除去し、得られた水溶液を水（８０ｍＬ）で希釈し、ＮａＣ１で飽 和させた。この水性物質を発に供した。クロロホルム中４％Ｍ　ｅ　ＯＨを用い たシリカゲル上のフラッシュクロマトグラフィーにより６０３ｍｇ　（６３，３ ％）のｌｌ−８を油状物として得た。
Ｒ，０，３２（ＣＨＣＩ３中５％ＭｅＯＨ）”ＨＮＭＲｆｃＤｃ１３）　６　Ｌ 、２０−１．６０　（ｍ、　１２ＨＩ、　２．６５　［ｍ。
Ｅ＋、　２．９０　（ｍ、　２Ｈ１，３，２７Ｔｍ、　２Ｈ１，４，２８（ｍ、 　ＬＨＩ、　５．０２　Ｉｂｓ。
ＬＨＩ、　１．３３　＋ｍ、　５Ｍ＋、　９．Ｌ２１ｂｓ、　ＩＨＩ。
５−ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノ−４−オキソ−２−ベンジル−ヘ キサン酸のメリフィールドクロロメチルレジンへの結合（ＩＩ−９） 先に記載した手法（Ｉ−８、実施例１）を用いて、１１−８　（５７０ｍｇ、１ ．７０ｍｍｏ　１）および炭酸水素セシウム（３３０ｍｇＳ１．７０ｍｍｏ　ｌ ）を無水メタノール（５０ｍＬ）中で一晩混合した。この混合物を蒸発に供し、 得られた固体をＤＭＦ　（５０ｍＬ）に溶解した。メリフィールドクロロホルム レジン（３，４０ｇ、３．４ｍｍｏ　１＠１ｍｅｑ／ｇレジン）を加え、この懸 濁物をアルゴン下、５０℃で４８時間撹拌した。ＤＭＦのＴＬＣは、ケトメチレ ンの残存を示さなかった。レジンをメチレンクロライドおよびイソプロパツール で多数回洗浄し、ついで乾燥し、３．９０ｇ　（９９％理論値）のｌｌ−９を得 た。
Ｎ“−ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル−し−ノルロイシル−Ｌ−アスパラギ ン酸β−ベンジルエステル（ＩＩ−１０）先に記載したジペプチド調製（１−９ 、実施例１）と同様の手法により、Ｂｏｃ−Ｌ−ノルロイシンスクシンイミド（ ３，９０ｇ５１１．８ｍｍｏ　１）をアスパラギン酸β−ベンジルエステル（２ ，６８ｇ、１２ｍｍｏｌ）と反応させて３．３０ｇ　（６６％）（７）Ｉ　ｌ− １０を得た。
分析　Ｃ２２Ｈ３２０７Ｎ２に対する 計算値：Ｃ：、６０．５３；Ｉ（，７，３９；Ｎ、６．　３５ 実測値：Ｃ，６０，７８；Ｈ，７，４１；Ｎ、６．　３５ Ｎ−（Ｌ−アルギニル−Ｌ−ノルロイシル−Ｌ−アスパルチル）−５−アミノ− ２−ベンジル−４−オキソ−へ牛サン酸、異性体ＡおよびＢ　（（ＩＶ）Ｎｌ　 ｅ’　Ａ’　Ｆ’−ＴＨＰ）の固相合成 先に記載した手法（（ＩＶ）Ｆ５−ＴＨＰ、異性体Ａ：実施例１）を用い、Ｉ　 ｌ−１０（１，１０ｇ、２．５５ｍｍ。
１）　、ＤＣＣ（５７８ｍｇ、２．８０ｍｍｏ　１）およびＨＯＢ　ｔ　（３９ ０ｍｇ、２．５５ｍｍｏ　１）　を併ｅて活性化１ステルを調製した。レジ：／ Ｉ　Ｉ　−９（３，９０ｇ５１．　７０ｍｍｏ＋）からＢｏａ基を除去した後、 活性化エステルおよびジイソプロピルエチルアミン（０，４６ｍＬ、２．５５ｍ ｍ０１）をこのレジンに加え、この反応混合物を一晩振盪した。
結合完結の判定（カイザー試験）後、Ｂｏａ基を除去した。
Ｎａ−Ｂｏａ−Ｎｇ−トシル−Ｌ−アルギニン（１，４５ｇ、３．４０ｍｍｏ　 ］）　、ＤＣＣＣ７７３ｍｇ、３．７５ｍｍ。
１）およびＨＯＢ　ｔ　（５２０ｍｇ、３．４ｍｍｏ　＋）を併せ、得られた活 性化エステルをジイソプロピルエチルアミン（０゜６１ｍＬ、３．４ｍｍｏ　１ ）とともにレジンに加えた。４時間振盪させた後、結合が完結した（カイザー試 験）。レジンを洗浄し、乾燥した。収量４．６８ｇ、このレジンの一部（２，５ ｇ）をＴＦＡで、ついでＨＦで処理してレジンがらペプチドを離脱させ、粗製ペ プチド３８０ｍｇを得た。この生成物を０．１％ＴＦＡを含有する水中１０〜３ ０％勾配のアセトニトリルを用いた直線的ＨＰＬＣにより部分的に精製して、他 の不純物を比較約合まない２つの異性体の混合物を得た。−２４％アセトニトリ ルのアインクラティック条件で直−締約ＨＰＬＣを用いてこれら異性体を分離し た。各異性体毎に純粋画分を集め、それぞれアセトニトリルを蒸発除去し、凍結 乾燥し、（Ｉ　Ｖ）Ｎ１　ｅ２Ａ’　Ｆ５−ＴＨＰの異性体Ａ（２５％アセトニ トリルでに’−１，２５）４６ｍｇ　（純度９８％）、および（ＩＶ）Ｎｌｅ２ Ａ’　Ｆ５−ＴＨＰ）の異性体Ｂ（２５％アセトニトリルでに’−１，５２）２ ５ｍｇ（純度９６％、異性体Ａ４％）を得た。
異性体Ａ ＦＡＢＳ−ＭＳ　ｍ／ｅ　６２０　（Ｍ＋Ｈ）分析　Ｃ２９Ｈ４５０８Ｎ７・２ ＣＦ３ＣＯＯＨ−Ｈ２Ｏに対する 計算値：Ｃ，４５，７８：Ｈ，５，７０；Ｎ、１１．３２；Ｆ、１３．１６ 実測値ＩＣ，４５，６０；Ｈ，５，５６；Ｎ、１１．１３：Ｆ、１０．６０ 分析　ＣＨＯＮ　・２ＣＦ３ＣＯＯＨ・２Ｈ２０に対する 計算値：　Ｃ，４４，８４、Ｈ，５，８１；Ｎ、１１．　０９ 実測値：Ｃ，４５，０９，Ｈ，５，９１；Ｎ、１０．　７８ （（ＩＶ）Ｎｌ　ｅ’　Ｆ’−ＴＨＰ）の調製施例１）に従い、Ｎｃｔ−ｔｅｒ ｔ−ブチルオキシカルボニル−Ｌ−ノルロイシル−し−アスパラギン酸β−ベン ジルエステル（ＩＩＩ−４，１，３０ｇ、３．Ｏｍｍｏ　Ｉ）、ＤＣＣ（６６０ ｍｇ、３．２０ｍｍｏ　１）およびＨＯＢｔ　（４６０ｒａｇ、３．Ｏｍｍｏ　 ｌ）を併せて活性化エステルを調製した。
レジンｌｌｌ−２（異性体Ａ、３．２５ｇ、１．５ｍｍｏ　ｌ）からＢｏａ基を 除去した後、活性化エステルおよびジイソプロピルエチルアミン（０，５２ｍＬ 、玉　Ｏｍｍｏｌ）をこのレジンに加え、この反応混合物を一晩振盪した。結合 完結の判定後、Ｂｏａ基を除去した。Ｎａ−Ｂｏｃ−Ｎｇ−１シル−Ｌ−アルギ ニン（１，９０ｇ、玉　Ｏｍｍｏ　１）　、ＤＣＣ（６７０ｍｇ、３．２５ｍｍ ｏｌンおよびＨＯＢｔ（４６２ｍｇｓ　３．Ｏｍｍｏ　１）を併せ、得られた活 性化エステルをジイソプロピルエチルアミン（０，５３ｍＬ、３．０ｍｍ０１） とともにレジンに加えた。−晩振盪させた後、結合は不完全であった。Ｎｃｔ− Ｂｏｃ−Ｎｇ−’ｐシルーＬ−アルギニン（１，８６ｇ、３．Ｏｍｍｏ　１）　 、ＤＣＣ（６７０ｍｇ。
３．２５ｍｍｏｌ）およびＨＯＢｔ　（４６５ｍｇ、３．Ｏｍｍｏ　］）を併せ 、得られた物質を一晩レジンと結合させた。
結合は、この第２の処理後に完結したと判定された。Ｂｏａ基を除去し、レジン を洗浄し、乾燥して、３．７６ｇの生成物を得た。ＨＦにより残りのレジン（２ ，７８ｇ）からペプチドを離脱させ、粗製ペプチド５８０ｍｇを得た。この生成 物を０．１％ＴＦＡを含有する水中１５〜３５％勾配のアセトニトリルを用いた 直線的ＨＰＬＣによりＮ７製したｇ純粋画分（３０％アセトニトリルでに’−１ ，６７）を集め、アセトニトリルを蒸発除去し、冷凍し、凍結乾燥して、（ＩＶ ）Ｎ　Ｉ　ｅ２Ｆ５−ＴＨＰの異性体Ａ３８ｍｇ　（純度１００％）を得た。不 純画分は、さらなる精製のために凍結乾燥し、保存した。
ＦＡＢＳ−ＭＳ　ｍ／ｅ　６４８　（Ｍ＋Ｈ）　３５７（Ｍ−２９１＋Ｈ“） １Ｈ印ｆＤ２０１６０．７４　（ｄ、　３Ｈ１，Ｏ，Ｂ３Ｉセ２３別、　Ｏ，ａ ６ｆｄ、　３Ｈ］、１．２７　＋ｍ、４ＨＩ、１．６１　ｆｍ、２Ｈ１，１，７ ０Ｏｎ、２Ｈ１，１８９Ｉｑ、２Ｈ１，２，２４４ｍ、ＩＨＩ、２．７６　ｆｍ 、２Ｈ１，２，８５（ｍ、２Ｈ１，２，９４Ｉｍ、２１Ｇ、１０７　（ｍ、ＩＨ Ｉ、３．１９　Ｉｔ、２Ｈ１，４，０１Ｉセ、ＩＦ！］、４．２９Ｉｔ、　２Ｈ １，４，３５ｃｄ、　ＩＨＩ、４．７０　（ｄｄ、　ＩＨＩ、　７．２０−７− ３７　＋ｍ、５１１１３ＣＮ？（Ｒ（Ｄ２０）　ｏ　１６−３２．１９−０４． ２Ｎ−７７、２コ、５０゜２７．２０．２ｇ、１４．２９．３７．３０．９５． ３５．４７．３７．２０．４０．５０．４Ｌ、ＳＯ。
ｔＦ２．０２．５０．１２．５２．６０．５４．０９．６３．６５．１２７．０ ２．１２Ｂ、Ｂｌ。
分析　Ｃ３１Ｈ４９０８Ｎ７・　２．３０Ｆ３ｃｏｏＨに対する計算値：（，４ ６，９８；Ｈ，５，６８７Ｎ、１０．７８；Ｆ、１４．４１ 実測値：　Ｃ，４７，０１；Ｈ，５，８６；Ｎ、１０．７８；Ｆ、１４．　１８ Ｎ−（Ｌ−アルギニル−Ｌ−ノルロイシル−Ｌ−アスパルチル）−５〜アミノ− ６−メチル−２−ベンジル−４−オキソ先に記載した手法（（ＩＶ）Ｆ５−ＴＨ Ｐの異性体Ａ、実施例１）に従い、Ｎ　ａｔ　ｅ　ｒ　ｔ−ブチルオキシカルボ ニル−し−ノルロイシル−Ｌ−アスパラギン酸β−ベンジルエステル（ＩＩＩ− ４，１，３０ｇ、３．０ｍｍｏ１ン、Ｄｅｃ（６６０ｍｇ、３．２０ｍｍｏｌ） およびＨＯＢｔ　（４６０ｍｇ、３．０ｍｍｏ　１）を併せて活性化エステルを 調製した。
レジンｌｌｌ−２（異性体Ｂ、３．２０ｇ、１．５ｍｍｏ　１）からＢｏＣ基を 除去した後、活性化エステルおよびジイソプロピルエチルアミン（０，５２ｍＬ 、３．０ｍｍｏ　１）をこのレジンに加え、この反応混合物を一晩振盪した。結 合完結の判定後、ＢｏＣ基を除去した。Ｎｃｔ−Ｂｏｃ−Ｎｇ−トシル−Ｌ−ア ルギニン（１，９０ｇ、３．０ｍｍｏ　１）　、ＤＣＣ（６７０ｍｇ、３．２５ ｍｍｏ１）およびＨＯＢｔ　（４６２ｍｇ、３．０ｍｍｏ　１）を併せ、得られ た活性化エステルをジイソプロピルエチルアミン（０，５３ｍＬ、３．０ｍｍｏ １）とともにレジンに加えた。−晩振盪させた後、結合は不完全であった。Ｎ　 −ＢｏＣ−Ｎｇ−）シル−し一アルギニン（１，８６ｇ、３．０ｍｍｏ　１）　 、ＤＣＣ（６７０ｍｇ。
３．２５ｍｍｏｌ）およびＨＯＢｔ　（４６５ｍｇ、３．０ｍｍ０１）を併せ、 得られた物質を一晩レジンと結合させた。
結合は、この第２の処理後に完結したと判定された。ＢｏＣ基を除去し、レジン を洗浄し、乾燥して３．９５ｇの生成物を得た。ＨＦによりレジンからペプチド を離脱させ、粗製ペプチド８２４ｍｇを得た。この生成物を０．１％ＴＦＡを含 有する水中１５〜２９％勾配のアセトニトリルを用いた直線的ＨＰＬＣにより精 製した。純粋画分（２６％アセトニトリルでｋ”−２，８９）を集め、アセトニ トリルを蒸発除去し、冷凍し、凍結乾燥して（ＩＶ）Ｎ１　ｅ２Ｆ５−ＴＨＰの 異性体８１６７ｍｇ　（純度１００％）および１４５ｍｇ　（純度９５％）を得 た。
ＦＡＢＳ−ＭＳ　ｍ／ｅ　６４８（Ｍ＋Ｈ＋）、３５７（Ｍ−２９１十Ｈ＋） ＩＨＮＭＲｆＤ２０１６０．７６　（ｄ、　３Ｔ（ｌ、　０．８２　ｆｔ、　３ Ｈ１，０，８３ｆｄ、　３Ｈ）、　１２Ｂ　（ｍ、　４Ｈ）、　１．６３　（ｍ 、　２８）、　１．７０（ｍ、　２Ｈ１，１，８９（ｍ、　２Ｈ１，２，１７ｆ ｍ、　ＩＨＩ、　２．７１　ｆｍ、　１Ｂ１．２．７５　ｆｍ、　ＩＦＩＩ、　 ２．８０（ｍ、　ＩＨＩ、　２．８５　（ｍ、　２Ｈ１，２，９３４ｍ、　ＩＨ Ｉ、　３．０６　（ｍ、　ＩＨＩ、　３．１９ｆｔ、２：！ｌ、４．０１　（セ 、ＩＨＩ、４．２３　（ｄ、ＩＨＩ、４．２９　Ｉヒ、１ｉ（ｌ、４．７０１ｄ ｄ、　１！（＋、　７．２０−７．３６　ｆｍ、　５Ｈ）。
−１３ＣＦ・正ｆＤ２０１６１６．４Ｂ、　１８．８Ｂ、　２１．７８．２１５ ０゜２７．２２．２Ｅ１．１６．２９．２３．　３０．９６．３５ｊ９．３１． ０４．　４０．５２．４０．８５゜４２．０７．　５０．０９．　５２．５０． 　５４．１１．　６４．２６．　１２７．０３．　１２８．８４゜１２９．１７ ．　ｌコ８．２９．　１５６．８２．　１６９．３ｓ、１７１．９８．　１７１ １．５１．　Ｌ７：］、８１゜Ｌ７Ｂ、８４，２１０．５９゜ 分析　Ｃ３１Ｈ４９０８Ｎ７・２．２５ＣＦ３Ｃｏ２Ｈに対する計算値：Ｃ，４ ７，１５；Ｈ，５，６９；Ｎ、１０．８４：Ｆ、１４．　１８ 実測値：Ｃ，４７，０３；Ｈ，５，５５；Ｎ、１０．４６；Ｆ、１３．　９６ 実施例　４ Ａｒｇ−Ｎｌ　ｅ−Ａｓｐ−Ｖａ　１　（ＣＨＯＨ）Ｐｈｅ（（Ｉ　Ｖ）Ｎ１　 ｅ’　Ｆ’　−ＴＨＰ　（ＣＨＯＨＣＨｚ　）の調製Ｎ−（Ｌ−アルギニル−Ｌ −ノルロイシル−Ｌ−アスパルチル）−５−アミノ−６−メチル−４−ヒドロキ シ−２−ベンジル−ヘプタン酸ラクトン（（ＩＶ）Ｎｌ　ｅ’　Ｆ’　−ＴＨＰ −ラクトン、異性体Ａ） メタノール（１，０ｍＬ）中の化合物（ＩＶ）Ｎｌｅ２’　Ｆ５−ＴＨＰの異性 体Ａ　（７８ｍｇ、９０μｍｏｌ）をＴＨＦ　（５，０ｍＬ、１．０ｍｍｏ　１ ）中の０．２Ｍ水素化ホウ素リチウムで滴下処理した。反応を分析用ＨＰＬＣで 追跡した。２０分後、反応は完結したと判定され、この物質をメタノールを用い て２回（各２５ｍＬ）蒸発に供した。ＨＰＬＣ分析は、この物質が開環ヒドロキ シ−酸対ラクトンの比が１９：１で存在することを示した。この物質を、試験反 応で同様に調製した（ＩＶ）ＮＩ　ｅ２Ｆ５−ＴＨＰ　（ＣＨＯＨ）の粗製異性 体Ａ　（１０，５ｍｇ、１２．Ｏμｍｏｌ）と併せ、この併せた物質を０．１％ ＴＦＡを含有する水中１５〜２６％勾配のアセトニトリルを用いたＨＰＬＣによ り精製した。
直線的ＨＰＬＣの酸性条件下で、（ＩＶ）Ｎｌｅ２Ｆ５−ＴＨＰ　（ＣＨＯＨ） の異性体へとそのラクトンとの間の平衡は、ラクトン側に傾く。０．１％ＴＦＡ を含有する水中１５〜２６％勾配のアセトニトリルを用いた第２のＨＰＬＣ精製 を行って（ＩＶ）Ｎ１　ｅ２Ｆ５−ＴＨＰ　（ＣＨＯＨ）の異性体Ａの２つの形 を分離した。第１の精製の場合と同様、Ｂｖ）Ｎ１　ｅ２Ｆ５−ＴＨＰ　（ＣＨ ＯＨ）の異性体Ａの純粋画分はすぐにラクトン化し始めた。これらの画分を集め 、アセトニトリルを蒸発除去し、凍結乾燥してＣＩＶ）Ｎｌｅ２Ｆ５−ＴＨＰ　 （ＣＨＯＨ）の異性体Ａ（２６％アセトニトリルを用いたに’　−１，３７）と （ＩＶ）Ｎ１　ｅ２Ｆ５−ＴＨＰ−ラクトンの異性偉人の混合物２６ｍｇを得た 。純粋ラクトンを含有する画分を集め、アセトニトリルを蒸発除去し、凍結乾燥 して（ＩＶ）Ｎｌ　ｅ２Ｆ５−ＴＨＰ−ラクトンの異性体Ａ（２６％アセトニト リルを用いたに−３，９０）５４ｍｇ（純度１００％）を得た。
（ＩＶ）Ｎｌ　ｅ２Ｆ５−ＴＨＰ−ラクトンの異性体ＡＦＡＢＳ−ＭＳ　ｍ／ｅ 　６３２　（Ｍ＋Ｈ）ジル−ヘプタン酸（（ＩＶ）Ｎ１　ｅ２Ｆ’　−ＴＨＰ　 ＣＣＨＯＨＣＨ，）　、異性体Ａ） （ＩＶ）Ｎｌ　ｅ２Ｆ５−ＴＨＰ−ラクトンの異性体Ａ（８゜８ｍｇ、１０μｍ ｏｌ）を水（２ｍＬ）に溶解し、ＩＮ　ＮａＯＨ（４０ｕ　１，４０μｍｏ　ｌ ）を加えてｐＨ９ｆ）ｇ整した。ラクトン環のけん化を分析用ＨＰＬＣで追跡し 、３０分以内に完結したと決定された。ｐＨが８に低下するまで二酸化炭素（ガ ス）を溶液中に吹き込んだ。この物質を冷凍し、凍結乾燥して、（ＩＶ）Ｎ１　 ｅ２Ｆ５−ＴＩＰ　（ＣＨＯＨＣＨ２）の異性体へを得た。
実施例　５ Ａｃ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ａｓｐ−Ｖａ　１　（ｋ）Ｐｈｅ（（ＩＶ）Ａｃ−Ｐ’ 　Ｆ５−ＴＨＰ）のｇａ＋＋＋１−−一一騨−−―■■―−――−■−−−−― ―−−一１１．１２Ｎ−（Ｎ’−アセチル−Ｌ−アルギニル−Ｌ、−プロリル− し一アスパルチル）−５−アミノ−６−メチル−２−ベンジル−４−オキソ−へ ブタン酸（（ＩＶ）Ａｃ−Ｐ’　Ｆ’　−ＴＨＰ、異性体Ａ）の固相合成 Ｎ”、−ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル−Ｌ−プロリル：」ヨーＺ１ヱＳ乏 コシー醇Ｊ二、さ２≦Ｌ±１ジ乞二Ａづ仁ユ」ユ。手法は、先に記載したジベブ チー調製（ｌ−９、実施例１）と同様。
Ｂｏｃ−Ｌ−プロリンスクシンイミド（１，５６ｇ　；　５ｍｍｏ１）をアスパ ラギン酸β−ベンジルエステル（１，３３ｇ。
６ｍｍｏ　１）と反応させて１．２０ｇ　（５７％）のｖ−３を得た。
分析　Ｃ２ＩＨ２８Ｎ２０７に対する 計算値＋（：、６０．０５；Ｈ，６，６１゜Ｎ、６．８７゜ 実測値：Ｃ，５９，９７：Ｈ，６，６６；Ｎ、６．６６゜ 先に記載した手法（ＣＩＶ）Ｆ５−ＴＩＰの異性体Ａ、実施例１）に従い、Ｖ− ３（１，２６ｇ、３．０ｍｍｏ　１）、ＤＣＣ（６５０ｍｇ、３．１５ｍｍｏ　 １）およびＨＯＢ　ｔ（４６０ｍｇ、３．０ｍｍｏ　＋）を併せて活性化エステ ルを調製した。レジンＶ−２（異性体Ａ、３．５０ｇ、１．５ｍｍｏ　１）から Ｂｏｃ基を除去した後、活性化エステルおよびジイソプロピルエチルアミン（０ ，５２ｍＬ、３．０ｍｍ。
１）をこのレジンに加え、この反応混合物を一晩振盪した。
結合完結の判定（カイザー試験）後、Ｂｏｃ基を除去した。
Ｎ′ｒ−Ｂｏｃ−Ｎｇ−）シルーＬ−アルギニン（１，９０ｇ、３．０ｍｍｏ　 １）　、ＤＣＣ（６７０ｍｇ、３．２５ｍｍｏ　１）およびＨＯＢｔ　（４６２ ｍｇ、３．０ｍｍｏ　１）を併せ、得られた活性化エステルをジイソプロピルエ チルアミン（０゜５３ｍＬ、３．０ｍｍｏ　１）とともにレジンニ加えた。−晩 振盪させた後、結合は不完全であった（正のカイザー試験）。
Ｎａ−Ｂｏｃ−Ｎｇ−トンルーム−アルギニン（１，８６ｇ、３．０ｍｍｏ　１ ）　、ＤＣＣ（６７０ｍｇ、３．２５ｍｍｏ　１）およびＨＯＢｔ　（４６５ｍ ｇ、３．０ｍｍｏ　１）を併せ、得られた物質を再びレジンと一晩結合させた。
結合は、この第２の処理後に完結したと判定された。Ｂｏｃ基を除去し、レジン を洗浄し、乾燥して３．９８ｇの生成物を得た。このレジンの一部（９９４ｍｇ ）をメチレンクロライド中の５％ジイソプロピルエチルアミンで中和し、メチレ ンクロライドで洗浄した（３Ｘ）、このレジンをメチレンクロライド（８ｍＬ） 中の無水酢酸（２ｍＬ）およびピリジン（０，２５ｍＬ）で２時間処理した。レ ジンを洗浄し、乾燥して９６０ｍｇの生成物を得た。無水ＨＦ中の１０％アニソ ールで０℃にて９０分レジンを処理することによってペプチドを開裂させた。
真空下でＨＦを蒸発させ、ペプチドを０．　５％トリフルオロ酢酸を含有する水 中の１０％アセトニトリルで抽出した。凍結乾燥により粗製物２３１ｍｇを得た 。この生成物を０，１％ＴＦＡを含有する水中１４〜２０％勾配のアセトニトリ ルを用いた直線的ＨＰＬＣにより精製した。純粋画分（２８％アセトニトリルで に’−０，７７）を集め、アセトニトリルを蒸発除去し、冷凍し、凍結乾燥して 、（ＩＶ）Ａｃ−Ｐ２Ｆ　−ＴＨＰの異性体Ａ６２ｍｇ　（純度９８％）、７５ ｍｇ（純度９０％）を得た。
ＦＡＢＳ−ＭＳ　ｍ／ｅ　６７４　（Ｍ十Ｈ）分析　Ｃ３２Ｈ４７Ｎ７０９−１ ．２５ＣＦ３ＣＯＯＨに対する計算値・Ｃ，５０，７６；Ｈ，５，９６；Ｎ、１ ２．　０１　、Ｆ、　８．　７３゜実、＠Ｊ価値：Ｃ，４９，７９：Ｈ，５，９ ６；Ｎ、１１．９５．Ｆ、８．４８゜ 実施例　６ Ａｒｇ−Ｄ−Ｌｙｓ−Ａｓｐ−Ｖａ　ｌ　（ｋ）Ｐｈｅ（（Ｉ　Ｖ）Ｋ＋２Ｆ５ −ＴＨＰ）の調製Ｎ−（Ｌ−アルギニル−Ｄ−リシル−Ｌ−アスパルチル）５− アミノ−６−メチル−２−ベンジル−４−オキソーヘブ久Ｚ跨」！堡庄Δユユエ ヱと入”Ｆ’−ＴＨＰ）の固相合成Ｎ”　−（Ｎ”　−Ｂｏ　ｃ　−Ｎ’　−２ −ＣＩ　Ｚ−Ｄ−ＩＪ　シ／ｌ、）−一一一　−１ゝ１１２１−一一一−−―− −−−−−−１１．工、２゜−Ｌ−７スパラギン酸β−ベンジルエステル（Ｖｌ −２）〜 Ｎ′ｒ−Ｂｏｃ−ＮＥ−２−ＣＩＺ−Ｄ−’）シン（１，６６ｇ；４、Ｏｍｍｏ ｌ）およびＮ−ヒドロキシスクシンイミド（０゜４９ｇ　；４．２ｍｍｏ　１） をメチレンクロライド（３０ｍＬ）に溶解し、０℃に冷却した（水浴）。ＤＣＣ （０，８７ｇ　；４、２ｍｍｏ　１）を加え、この反応混合物をＯ’Ｃで２時間 撹拌した後、２０’Ｃで一晩撹拌した。この物質をろ過し、蒸発に供し、ついで 最小量のアセトニトリルに溶解した。このスクシンイミドエステルをアセトニト リル／水混合溶媒系（９：１．３０ｍＬ）中のＬ−アスパラギン酸β−ベンジル エステル（０，９８ｇ　；４．４ｍｍｏ　１）およびＮ−メチルモルホリン（０ ，４８ｍＬ　Ｈ４，４ｍｍｏ　Ｉ）の溶液に加えた。反応を一晩進行させた。減 圧下でアセトニトリルを除去し、得られた物質を水（５０ｍＬ）で希釈した。こ の水性物質を希ＨＣＩで酸性化し、酢酸エチルで抽出した（３Ｘ５０ｍＬ）。
併せた有機層を飽和ブラインで洗浄しく２Ｘ１００ｍＬ）、ＭｇＳＯ４上で乾燥 し、蒸発に供して１．８５ｇ　（７８％）のＶｌ−２を得た。Ｒ，０，３３（Ｃ Ｈ２Ｃ１２中６％ＭｅＯＨ，０，３％Ａｃ０Ｈ） ＩＨＭＭＲｆｃＤｃｌコｌ　６　１．４２　（ｓ、９Ｈ）、１．５５　ｆｍ、６ Ｈ１，：１．０３　（ｍ。
２ＨＩ、３．１６　（ｍ、２Ｈ几　４．２３　Ｉｍ、ＩＨＩ、４．９２　４ｍ　 １）＋１．５．０２　（ｓ。
２Ｈ１，５，２０（ｓ、２）＋１．５．２５　ｆｂｓ、ＩＨＩ、１．３０　（ｍ 、５Ｈ］−先に記載した手法（（ＩＶ）Ｆ５−ＴＨＰの異性体Ａ、実施例１）に 従い、Ｖｌ　−２（６２０ｍｇ、１．Ｏｍｍｏｌ）、ＤＣＣ（２２０ｍｇ、１． ０５ｍｍｏｌ）およびＨＯＢ　ｔ（１６１ｍｇ、１．０５ｍｍｏ　１）を併せて 活性化エステルを調製した。レジンＶＩ−１（異性体Ａ、１．２０ｇ、０゜５ｍ ｍｏｌ）からＢｏｃ基を除去した後、活性化エステルおよびＮ−メチルモルホリ ン（０，１２ｍＬ、１．０５ｍｍ。
ｌ）をこのレジンに加え、この反応混合物を一晩季一盪した。
結合完結の判定（カイザー試験）後、Ｂｏｃ基を除去した。
Ｎａ−Ｂｏ　ｃ−Ｎｇ−）シルーＬ−アルギニン（６４２ｍｇ。
１、　５　ｍｍ　ｏ　１　）　、Ｄ　ＣＣ（３３０ｍ　ｇｓ　１．　６　ｍｍ　 ｏ　１　）およびＨＯＢｔ　（２３０ｍｇ、１．５ｍｍｏｌ）を併せ、得られた 活性化エステルをジイソプロピルエチルアミン（０゜２７ｍＬ、１．５ｍｍｏ　 １）とともにレジンＬ加えた。４時間振盪させた後、結合は完結した（カイザー 試験）。Ｂｏｃ基を除去し、レジンを洗浄し、乾燥して１．３５ｇの生成物を得 た。ＨＦによりレジンからペプチドを離脱させ、粗製ペプチド１４９ｍｇを得た 。この生成物を０．１％ＴＦＡを含有スる水中１０〜２１％勾配のアセトニトリ ルを用いた直線的ＨＰＬＣにより精製した。生成物を含む画分を併せ、凍結乾燥 した。１０〜２１％勾配のアセトニトリルを用いた第２の直線的ＨＰＬＣ精製に より、純粋生成物を得た。画分（２１％アセトニトリルでに’−１，３５＞を集 め、アセトニトリルを蒸発除去し、冷凍し、凍結乾燥して（ＩＶ）Ｋ”Ｆ５−Ｔ ＨＰ）の異性体Ａ３９ｍｇ　（純度１００％）を得た。不純画分をさらなる精製 のために凍結乾燥し、保存した。
ＦＡＢＳ−ＭＳ　ｍ／ｅ　６６３　（Ｍ＋Ｈ＋）ＩＨＮＭＲＬＤ２０１　６　０ −７６　（ｄ、　３’（ｌ　、　０−８６　（ｄ、　３Ｈ１、Ｌ−３７（ｍ、　 ２Ｈ）、　１．６２　Ｉｒｎ、　４Ｈｌ、　１−７４　Ｉｍ、　２ＨＬ　２．２ ４　Ｉｍ、　ＩＨＩ。
２．６６−２．７９　（ｍ、　２Ｈ）、　２．８０−２．８７　（ｍ、　２Ｈ１ ，２，９０−３，０２（ｍ、　４Ｈ１゜コ、０４　、Ｊ−ｍ、１Ｈ）、３．１９ 　（ｔ、１′Ｈ１，４，００（ｅ、ＩＪ（）、４．２３　１ｔ、ＩＮ）。
４．３６　（ｄｄ、　ＬＭ）、　４．７０　ｆｄｄ、　ｌ）！）、　７．１８− ７ｊ７　（ｍ、　５Ｈ１−１３ＣＮ’Ｋ”ｌ　ｔＩ）２０１６１７．４０．１９ ．８７．２３．０２．２４．７３゜２７、コ５．　２Ｂ、９コ、３０．２４．　 ３１．２６．　３６．９３．　３Ｂ、１０．　４０．０Ｂ、４１ｊ０゜４２．６ ７、　ｏ、ｏｓ、　ｓｌ、３７．５３．８３．５５．２１．６４．６２．　＋２ ７．ａ７．１２７．９４゜１２９．７３．１２９．９５．１３０．１１．１５７ ．７６、１７０．５４．　Ｌ７３．０９．１７４．４２゜１７５．２４．１［］ ０．０９．２１１２９゜分析　ＣＨＯＮ　・２．８５ＣＦ　Ｃ０ＯＨ・２Ｈ２０ に対する 、計算値：Ｃ，４Ｂ、０５．Ｈ，５，６１；Ｎ、１０．９４．Ｆ、１５．８８ 実測値：Ｃ，４２，４５，Ｈ，５，１９；Ｎ、１１．０８．Ｆ、１５．４１ 実施例　７ Ａｒｇ−Ａｌａ−Ａｓｐ−Ｖａ　１　（ｋ）Ｐｈｅ（（ＩＶ）Ａ’　Ｆ５−ＴＨ Ｐ）（７）調製Ｎ−（Ｌ−アルギニル−Ｌ−アラニル−Ｌ−アスパルチル）−５ −アミノ−６−メチル−２−ベンジル−４−オキソ−へブタン酸（異性体Ａ、（ ＩＶ）Ａ’　Ｆ５−ＴＨＰ）の固相合成 Ｎ’　−（Ｎ’−Ｂｏｃ−Ｌ−アラニル）−Ｌ−アスパラギン酸β−ベンジルエ ステルＶＩＩ−２゜Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−アラニン（５，６７ｇ　；　３０ｍｍｏ　 １）およびＮ−ヒドロキシスクシンイミド（３，６２ｇ；３１゜５ｍｍｏｌ）を ＴＨＦ　（１５ｍＬ）に溶解し、得られた溶液を０℃に冷却した（水浴）。激し く撹拌しなからＴＨＦ　（ｌＯｍＬ）中のＤＣＣ（６，８０ｇ　；　３３．Ｏｍ ｍｏ　１）を滴下した。この反応混合物を０℃で２時間撹拌した後、室温で一晩 撹拌した。析出したＤＣＵをろ別し、ろ液を蒸発に供して油状ガムを得た。
エーテルとともに粉砕し、スクシンイミドエステル６．５９ｇ　（７２，３％） を得た。このスクシンイミドエステル（６゜０６ｇ　；　２０．Ｏｍｍｏ　１） を５０％水性ＤＭＦ　（４０ｍＬ）中のＬ−アスパラギン酸β−ベンジルエステ ル（４，４６ｇ；２０、Ｏｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（２，８０ｍＬ　 Ｈ２０、Ｏｍｍｏ　１）の溶液に加え、室温で一晩撹拌した。この反応混合物を 氷上に注ぎ、ＬＭ　ＨＣＩでｐＨを２に調整した。この水性懸濁物を酢酸エチル で抽出した（３Ｘ１００ｍＬ）。併せた有機抽出物を０．１〜Ｉ　ＭＣＩで洗浄 しく１×１５０ｍＬ）、ＭｇＳＯ４上で乾燥し、油状物となるまで蒸発に供し、 ヘキサン／エーテルとともに粉砕して２．１３ｇ　（２７４％）　（７）Ｖ　Ｉ 　Ｉ　−２ヲ得り。
ｌＨＮＫＲ（■Ｃ１〕ｌ　６　１ｊ２　（ｄ、３Ｅｌ、１．：１９　（ｓ、９Ｈ １，２，９６＋ｍ、　２８１．４．１４　（ｍ、　ＩＨＩ、　４．ａＯ（ｍ、　 ＩＨＩ、　５．０８　［ｓ、　２Ｂ＋、　５．７９（ｓ、　２８１．７．１５　 Ｆｄ、　ＩＨ３，７，２９（ｓ、　５Ｈ１゜先に記載した手法（（ＩＶ）Ｆ５− ＴＨＰの異性体Ａ、実施例１）に従い、ＶＩ　Ｉ−２（３９４ｍｇ、１．Ｏｍｍ ｏ　１）、ＤＣＣ（２２７ｍｇ、１．１ｍｍｏ　１）およびＨＯＢ　ｔ（１５３ ｍｇ、１．Ｏｍｍｏ　１）を併せて活性化エステルを調製した。レジンＶＩＩ− １（異性体Ａ、１．２０ｇ、０゜５ｍｍｏｌ）からＢｏｃ基を除去した後、活性 化エステルおよびジイソプロピルエチルアミン（０，１８ｍＬ、１．０ｍｍ０１ ）をこのレジンに加え、この反応混合物を６時間振盪した。結合完結の判定（カ イザー試験）後、Ｂｏｃ基を除去した。Ｎａ−Ｂｏｃ−Ｎｇ−トシル−Ｌ−アル ギニン（４２９ｍｇ、１．０ｍｍｏ　１）　、ＤＣＣ（２２７ｍｇ、１．１ｍｍ ｏ　１）およびＨＯＢｔ　（１５３ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）を併せ、得られた活 性化エステルをジイソプロピルエチルアミン（０，１８ｍＬ、１．０ｍｍｏｌ） とともにレジンニ加えた。３時間振盪させた後、結合は完結した（カイザー試験 ）。
Ｂｏｃ基を除去し、レジンを洗浄し、乾燥して１．３９ｇの生成物を得た。ＨＦ によりレジンからペプチドを離脱させ、粗製ペプチド１７６ｍｇを得た。この生 成物を０，１％ＴＦＡを含有する水中１５〜２８％勾配のアセトニトリルを用い た直線的ＨＰＬＣにより部分的に精製した。生成物を含む画分を併せ、凍結乾燥 した。１５〜２８％勾配のアセトニトリルを用いた第２の直線的ＨＰＬＣ精製に より純粋生成物を得た。画分（２５％アセトニトリルでに’−０．６９）を集め 、アセトニトリルを蒸発除去し、冷凍し、凍結乾燥して（ＩＶ）Ａ２Ｆ５−ＴＨ Ｐ）の異性体Ａ３９ｍｇ　（純度１００％）を得た。不純画分をさらなる精製の ために凍結乾燥し、保存した。
ＦＡＢＳ−ＭＳ　ｍ／ｅ　６０６　（Ｍ＋Ｈ）ＩＨＨＦＤ、、０１６０．７５　 ｆｄ、　３Ｈ）、　０．８６　ｆｄ、　３Ｈ１，１１７（ｄ、　３Ｈ１，１，６ ４（ｍ、　２Ｈ１，１，９０ｉｍ、　２ｉ’、Ｉ、　２．２３４ｍ、　ＬＨＩ、 　２．７１−２．８４　ｆｍ、　４Ｈ１，２，９２ｆｍ、　ｌｌ（＋、　２．９ ６　ｃｍ、　ＩＨＩ、　３．０８　ｆｍ、　ＩＨＩ。
３、ｉ９　ｆｔ、２Ｈ）、４．００　（ｔ、ｌ）り、４．３６　Ｌｍ、２Ｈ１， ４，６７ｆｄｄ、１２（）。
ＣＮ×Ｒ（Ｄ２０）　６　１１−２５−　１７−５４−　Ｎ９．８Ｂ、　２４． ３８゜２ｇ、９８．　３０．１８．　３６．５９．　３８．１２．　４１４２． 　４２．４６．　４コ、０１．　５０．５？。
分析　０２８Ｈ４３０ＢＮ７・２ＣＦ３Ｃｏ２Ｈ・２Ｈ２０に対する 計算値：Ｃ，４４，１８，Ｈ，５，６７゜Ｎ、１１．　２７．Ｆ、１３．　１０ 実測値：Ｃ，４４，０２，Ｈ，５，３６゜Ｎ、１１．　０３．Ｆ、１１．　７８ 実施例　８ （（Ｉ）Ｎ１　ｅ’　Ｆ’−ＴＨＰ）の調製Ｎ’　Ｎ’　Ｎ”’　−Ｎ３−Ｌ　 Ａｒｇ　ＣＨ２Ｃｌ　（ＶＩ□−一一一一−２−一一一一一□ ｌｌ−１）工程１：Ｈ２Ｏ−水浴で冷却された、ＴＨＦ　（５ＱｍＬ）中のＮ３ −Ｌ−Ａｒｇ　（１０，０ｇ、１７．４ｍｍｏ１）の溶液に、ＮＥｔ　（１，９ ４ｇ、１９．０ｍｍｏｌ）を加え、ついでイソブチル／クロロホルメート（２， ５９ｇ１９．０ｍｍｏｌ）を一度に加えた。２０分以内にＮＥｔ３・ＨＣＩをろ 過により除去し、ＴＨＦ　（１５ｍＬ）で洗浄した。エーテル性ＣＨＮ　（Ｅｔ ２０中２５ｍｍ０１未満）を加えた。初めに０℃であった反応混合物を室温まで 加温し、６３時間撹拌した。０℃での最初の１．５時間以内に多量の析出物が生 成したが、これは室温で再溶解した。この反応混合物を白色固体となるまで回転 蒸発に供し、ＣＨＣｌ３／ＨＯ開で分配させ、飽和Ｎ　ａ　ＨＣＯ３で洗浄した 。有機層Ｎ　Ｚ　Ｌ　Ａｒｇ　ＣＨＮ２　（５，９３ｇ、５７％）を得た。ｍｐ １２３〜１２４℃；　［ａ］　Ｄ　１５．２　（Ｃ＝１、Ｏ，ＤＭＦ）、　翰Ｎ ＩＧ６ （ＣＤＣＩ３１８．０６．８．０２．７．９８　Ｉｓ、　１ｓＨ，Ｃ６Ｈ５ＣＨ ２−１，５，９３（ｓ、　！Ｈ。
酸感受性ハロケトンに関するアブリン（Ａｐｌｉｎ　）らの文献方法に従い、上 記ジアゾケトン（９，８５ｇ、１６．４ｍｍｏ１）を無水ＬｉＣ１（３５ｇ、０ ．８３ｍｏｌ）を含有する８０％水性ＡｃＯＨ（２５０ｍＬ）に０℃で溶解した 。この混合物を周囲温度まで一晩温めた。激しく撹拌しなから３容量未満のＮ２ ０および７５ｍＬ未満のＥｔＯＡｃを添加し白色固体を析出させ、これをろ過に より集め、デシケータ−で−晩乾燥した。ＴＨＦ−Ｅ　ｔ２０−ＰＥからの再結 晶によりｖＩ　Ｔ　Ｉ−１（６，１８ｇ、６２％）を得た。ｍｐ１３２〜１３４ ℃；　［α］Ｄ−１７．２°　（Ｃ＝１．０、ＤＭＦ）分析　Ｃ３１Ｈ３３ＣＩ 　Ｎ４０７に対する計算値：Ｃ，６１，１３，Ｈ，５，４６；Ｎ、９．２０　： Ｃ１，５，８２゜ 実測値：Ｃ，６１，１９，Ｈ，５，２８；Ｎ、８．７９；Ｃ１，５，２３ ｔｅｒｔ−ブチル−２−ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル−２−ブチル−４− オキソ−５（Ｓ）−５−ペンンルオキシカルボニルーアミノ−８−ジベンジルオ キシ力ルポニルーグアニジノオクタノエー）（ＶＩＩＩ−２）鉱油中５０％のＮ ａＨ（１３５ｍｇ、２．８ｍｍｏｌ）のＤＭＥ　（２５ｍＬ）懸濁液に、ジーｔ ｅｒｔ−ブチルマロネート（６０３ｍｇ、２．８ｍｍｏ　Ｉ）を加え、得られた 溶液を透明になるまでアルゴン下で撹拌した。Ｎ３　Ａｒｇ　ＣＨ２Ｃｌ　（１ ，５３ｍｇ、２．５ｍｍｏｌ）および沃化ナトリウム（３８０ｍｇ、２．５４ｍ ｍｏ　１）をＤＭＥ中に懸濁させ、１５〜２０分間撹拌した。本撹拌中にほとん どの物質は溶解し、ＮａＣ１が析出した。このマロネート溶液を注射器によりヨ ードメチルケトン溶液に移した。ＴＬＣにより、反応が１時間後に完結したこと が示された。この反応混合物を注射器により鉱油中５０％ＮａＨ（１５０ｍｇ、 ３．１３ｍｍｏｌ）を含有するフラスコに移した。移し代えた後、１　゛−ヨー ドブタ：／　（３，４５ｇ、１８．８ｍｍｏｌ）を混合物に加えた。ＴＬＣによ り、３時間後に反応が完結したことが示された。反応混合物を数滴のＡｃＯＨに より急冷し、ＤＭＥを真空下で除去した。粗製物をＣＨ２Ｃ１２（１００ｍＬ） に溶解し、０．１Ｎ　ＨＣｌ　（２Ｈ５０ｍＬ）および飽和Ｎａｃｔ　（２５０ ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥し、演発に供した。油状残渣をフラッシュ クロマトグラフィー（４０Ｘ３００ｍｍ）に供し、ヘキサン（５００ｍＬ）　、 Ｅ　ｔＯＡｃ−ヘキサン（１；９．１００１００ＯおよびＥｔＯＡｃ−へ−１− サン（１：　３．１００１００Ｏで溶出させた。対象の画分を集め、濃縮して１ ．４４２ｇ　（６８％）のＶＩ　Ｉ　Ｉ−２を得た。
Ｒｒｏ、５８　（Ｅ　ｔ　ＯＡ　ｃ／ヘキサン；３゜５：６．５）ＩＨドＫＣＩ 　（ＣＤＣＩコ）　６　０．［１５ＩＬ、　’３Ｈ−ｃａ３）、１−Ｌ５　（ｍ −４Ｈ１，１，４３（ｓ、　１８Ｍ、　Ｃｏ２当Ｊ、　１．４５−１．９８　（ ｍ、　６Ｈ）、　３．０５　＋＝、。
２Ｈ１ｃｏｃ旦２１．　：］、９１　（ｍ、２＋４．　入ｒｇ　６　Ｃ旦２１． 　４．２６　（ｍ、ＩＦ！、入ｒｑ　α（０！１．　５．０２　ＩＩ−、２Ｈ， 入ｒＣＨ２１、５，１１ＩＳ　、　２Ｈ、ＡｒＣｆ１２１　、　Ｓ　、２０　１ ！−。
ＺＨｒ　Ａｒ　Ｃと２ン、５．７４　＋ｄ、１Ｈ，ｋｃ３）、７．３０　（ｓ、 ５Ｈ，Ａｒｐｌ、７．３６　（ｓ。
１０Ｍ、ＡｒＨｌ、９．３１　（ｂｄ、２Ｍ、Ｆｉｌ；１３Ｃ閉　（ＣＤＣ１３ １ｏ　１３．７Ｂ、２２．８３．　２６．６２．　２７．７０゜コ２．５２．　 ４２．２２．　４４．１２．　５Ｇ、コ１．　５９．６Ｌ、６６．９２．　６１ ３．９３．　８１ｊ９゜１２６．８９．１２７．７１．　Ｌ２７．ｌ！９．１２ ８．３０．１２８．７９．１３４．５９．１３６．３１゜１３６．８０．　１５ ５．７２．　Ｌ６０．４３．　Ｌ６３．７］、１６９．７コ、Ｌ６９．６４．　 ２０５．９４゜Ｎ　２−ブチル−４−オキソ−５（Ｓ）−５−ペンジルオキシカ 緊　ルボニルーアミノー８−ジベンジルオキシ力ルポニルーグア１　ニジノオク ９）ニー）　（ＶＩ　ｌｌ−３）〕　化合物ＶＩ　Ｉ　Ｉ−２（１，４４ｇ、１ ．７ｍｍｏ　１）をＴＦＡ　（２０ｍＬ）で４５分間処理し、ついで粘稠なガム とな）　るまで蒸発に供した。残存物質をヘプタンを用いて２回蒸発に供した。
この二酸にピリジン（２０ｍＬ）を加え、反応フラスコを１００℃に予め平衡化 した油浴に浸漬し、反応混合物を３０分間加熱した。減圧下でピリジンを除去し 、残渣をジアステレオマーをＣＨＣ１３（５００ｍＬ）　、ＣＨＣ１３−ＭｅＯ Ｈ（９８：　２．５００　ｍ　Ｌ　）　、ＣＨＣ１３Ｍ　ｅ　０Ｈ（９６：４． １００１００Ｏ，およびＣＨＣ１３−Ｍ　ｅ　０Ｈ（９４：６．１００１００Ｏ で溶出させるフラッシュクロマトグラフィーにより分離した。２つの異性体につ いての両分を集め、蒸発に供してＶｌｌｌ−３の異性体Ａ２８６ｍｇおよびＶＩ ＩＩ−３の異性体８３１４ｍｇを得た。
異性体Ａ Ｒ０，６２（Ｍｅ　０Ｈ−ＣＨＣ１３；　１　：　９）　；（ｓ、２Ｆ、、入ｒ ｃＨ２Ｌ　ｓ、１３１ａ、　２）！、　入ｒＣ！ｉ２１．　ｓ、２ｓ　（ｓ、２ Ｈ，λｒｃＭ２１　。
５．７４　１ｄ、ＩＨ，Ｎｐ）、１．３６　（ｍ、１５Ｈ，入ｒ旦１．　９ｊＬ 　（ｂｓ、２Ｈ，ＮＨＩ。
異性体Ｂ ＲＯ，５７（Ｍｅ　０Ｈ−ＣＨＣ１３；　１　：　９）　；Ｌ　円ｆｃＤｃ１３ １６０．８９　ｆｔ、３Ｈ１Ｃ馬１．１．０５−１．９０イ町　ユＯＨ）、２． ４６　ｆｒｎ、ＩＬ　Ｃｆ１ＣＯ２ｉ（１，２，９０＋ｍ、２Ｈ，ＣＯＣ！１２ ＣＲＩ。
３．９０　ｆｍ、２Ｌ　入ｒｑ　６　Ｃ旦２１．　４．２４　ｆｍ、ＩＨ，Ｍｑ 　ａ　Ｃ！］、５．０８　Ｉｓ。
２Ｍ、入ｒｃ旦、、ｌ、５．１３　（ｓ、２ＦＩ、入ｘｃ品２１．　５．２３　 （ｓ、２）！、ＡｒＣ旦２１゜５．８９　ｆｄ、　Ｅ、　卵）、　７．３５　ｆ ｍ、　１ｓ）Ｉ、　Ａｒｐｌ、　９．３２　（ｂｓ、　２Ｈ，近１゜１３Ｃ−Ｎ ＭＲは、２つの異性体の混合物のケトン炭素に対し２０８ｐｐｍにおいて弱い吸 収を示した。
Ａｒｇ　（ｋ）Ｎｌｅ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｐｈｅ（（Ｉ）Ｎ１　ｅ２Ｆ’−ＴＩ Ｐ、異性体ＡおよびＢ）メチレンクロライド（５ｍＬ）中の化合物Ｖｌｌｌ−３ （異性体Ａ、２８６ｍｇ、０．４１ｍｍｏ　１）およびＤＭＦ（２ｍＬ）中のＨ ＯＢｔ　（６９ｍｇ、０．４５ｍｍｏ　りを併せ、０℃で撹拌した。ＤＣＣ（１ ０４ｍｇ、０．５ｍｍ。
１）を５分間かけて滴下した。この溶液を０℃で１０分間撹拌した後、室温で１ ５分間撹拌した。これとは別に、標準の固相ペプチド合成により調製したＢｏｃ −Ｌ−Ａｓｐ　（ＯＢｚ　１）　−Ｌ−Ｖａ　１−Ｌ−Ｐｈｅレジン（０，５２ ｍｅｑ／ｇ［理論］の０．８０ｇ、０．４２ｍｍｏ　１）からＢｏｃ基を除去し た。この反応混合物をメチレンクロライド中で１５分間撹拌し、ついで４０％Ｔ ＦＡ／１０％アニソール１５０分析　Ｃ３ｌＨ４９０８Ｎ７弓、５　ＣＦ２ＣＯ ＯＨ−３／４Ｈ２０に対する 計算値：　Ｃ，４８，５４；Ｈ，６，３６；Ｎ、１１．６６、Ｆ、１０．１７ 実測値：Ｃ，４８，１６；Ｈ，５，８７；Ｎ、１１．３８．Ｆ、１０．３７ 異性体Ｂ ＦＡＢＳ−ＭＳ　ｍ／ｅ　６４８　（Ｍ＋Ｈ”　）’　９０　Ｍｌ（ｚ　ＩＨＮ ＭＲＣＣＤ３０Ｄ］　６０．９２１ｍ、９ＨＩ　−１２０１−８５（ｍ、９ＨＩ 、Ｌ、Ｂ５−２．２３　（ｒｎ、３！（）、２−５５−３．３０　１ｍ、８Ｈ１ ，７，２２（ｍ。
分析　Ｃ３１Ｈ４９０８Ｎ７・　２．１ＣＦ３ＣＯＯＨに対する計算値：Ｃ，４ ７，６５；Ｈ，５，８２；Ｎ、１１．　０５．Ｆ、１３．　５０ 実測値：　Ｃ，４８，０５、Ｈ，５，６９；Ｎ、１０．　６１　、Ｆ、１４．　 ０３Ａｒｇ　（ｋ）Ｎｌｅ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｐｈｅ（（Ｉ）Ｎ　ｌ　ｅ２Ｆ’ −ＴＨＰ、異性体ＣおよびＤ）メチレンクロライド（５ｍＬ）中の化合物ＶＩＩ Ｉ−３（異性体Ｂ、３１４ｍｇ、０．４６ｍｍｏ　１）およびＤＭＦ（２ｍＬ） 中のＨＯＢｔ　（７５ｍｇ、０．５ｍｍｏ　＋）を併せ、０℃で撹拌した。ＤＣ Ｃ（１１３ｍｇ、０．５５ｍｍ。
１）を５分間かけて滴下した。この溶液を０℃で１０分間撹拌した後、室温で１ ５分間撹拌した。これとは別に、メチレンクロライド中の４０％ＴＦＡ／１０％ アニソールで５分、ついで３０分処理することによって、標準の固相ペプチド合 成により調製したＢｏｃ−Ｌ−Ａｇｐ　（ＯＢｚ　１）−Ｌ−Ｖａｌ−Ｌ−Ｐｈ ｅレジン（０，５２ｍｅｑ／ｇ　ｒ理論〕の０゜９０ｇ、０．４７ｍｍｏ　１） がらＢｏｃ基を除去した。コルジンをメチレンクロライドとイソプロピルアルコ ールで多数回洗浄し、１０％ＤＩＥＡで中和し、メチレンクロライドで洗浄した 。Ｖｌｌ−３の異性体Ｂの活性化エステルをろ過してレジン反応容器に入れ、反 応容器を一晩振盪した。無水ＨＦ中の１０％アニンールとともに０〜５℃で９０ 分間撹拌することによってレジンからペプチドを開裂させた。ＨＦの蒸発後、レ ジンを無水ジエチルエーテル（２５０ｍＬ）で洗浄し、ペプチドを０．５％ＴＦ Ａを含有する水中の２０％アセトニトリルで抽出した（８Ｘ２５ｍＬ）。ペプチ ドを含有する抽出物を併せ、凍結乾燥して粗製物２１２ｍｇを得た。
この粗製物を０．　１％ＴＦＡを含有する水中の９０分間の直線勾配置０〜４０ ％のアセトニトリルを用いて精製した。画分を集め、凍結乾燥して（１）Ｎｌ　 ｅ２Ｆ５−ＴＨＰの異性体Ｃ（２４％アセトニトリル中に’−２．７４）１４． ２ｍｇ（純度１００％）および３５．４ｍｇ　（純度９８％）、並びに（Ｉ）Ｎ １　ｅ２Ｆ５−ＴＨＰの異性体Ｄ　（２３％７−１？トニトリル中に’　−１− ４）３４．７ｍｇ　（純度１００％）および１５．８ｍｇ　（純度９０％）を得 た。
（ｍ−１９３＋Ｈ＋）、３５６　（ｍ−２９２＋Ｈ）分析　Ｃ３１Ｈ４９０８Ｎ ７・２ＣＦ３ＣＯ２Ｈ−Ｈ２Ｃに対する 計算値：Ｃ，４７，０１；Ｈ，５，９８；Ｎ、１０．９７．Ｆ、１２．７５ 実測値：Ｃ，４７，０１；Ｈ，５，９０゜Ｎ、１０．９７；Ｆ、１２．２３ 異性体Ｄ ＦＡＢＳ−ＭＳ　ｍ／ｅ　６４８　（Ｍ十Ｈ＋）分析　ＣＨＯＮ　・　］、’１ ＣＦ３ＣＯＯＨ−Ｈ２０に対する 計算値＋Ｃ，４７，３６，Ｈ，６，０５：Ｎ、１１．１２．Ｆ、１２．２８ 実測値：　Ｃ，４６，８２：Ｈ，５，８４：Ｎ、１１．５２；Ｆ、１２．１４ （（ｒ）Ｎ１　ｅ’　Ｆ’　ＴＨＰ−ＮＨｚ　）の調製Ｂ、実施例８）に従って 、化合物ｌＸ−１異性体Ａ（ＶＩｌｌ−３の異性体Ａ、実施例８）（３６５，５ ｍｇ、０．５３ｍｍｏ　１）　、ＨＯＢｔ　（８２，０ｍｇ、ｏ、５４ｍｍｏ　 １）、ＢＯＰ　（２３６，５ｍｇ、０．５４ｍｍｏ　１）　、およびＮ−メチル モルホリン（８７，５μｍ、０．８０ｍｍｏ　１）をＤＭＦ中で室温で３０分間 同温した。標準の固相ペプチド合成により調製したＴＦＡ−Ａｓｐ　（ＯＢｚ　 Ｉ）−Ｌ−Ｖａ　Ｉ　−Ｌ−Ｐｈｅ−ＭＢＨＡレジン（１，３０ｇ、０．５６ｍ ｍ。
１＠０．４３ｍｅｑ／ｇ）を１０％ジイソプロピルエチルアミンで中和しく２Ｘ ）、レジンをメチレンクロライドで洗浄しく３×）、活性化ケトメチレンを添加 した。反応容器を一晩振盪した。カイザー試験は、結合が完結していないことを 示した。カイザー試験を定期的に実施しながら、反応を７日間行った。カイザー 試験は負を示さなかったが、レジンを洗浄し、乾燥し、１．５８ｇの生成物を得 た。ＨＦによりレジンからペプチドを離脱させて粗製ペプチド３９３ｍｇを得た 。
この生成物を０．１％ＴＦＡを含有する水中の１０〜３０％勾配のアセトニトリ ルを用いた直線的ＨＰＬＣにより部分的に精製して（１）Ｎ　１　ｅ２Ｆ５　Ｔ ＨＰ　ＮＨ２の異性体Ａ（２４％アセトニトリルでに’　＝１．３３）５５ｍｇ 　（純度９８％）を得た。１７〜３０％勾配のアセトニトリルを用いた、異性体 Ｂの第２の直線的Ｉ（ＰＬＣ精製により純粋な生成物を得た。画分（２８％アセ トニトリルでに’　＝１．３３）を集め、アセトニトリルを蒸発除去し、冷凍し 、凍結乾燥して（Ｉ　）　Ｎ　ｌ　ｅ　Ｆ　Ｔ　ＨＰ　−Ｎ　Ｈ２の異性体８７ ０ｍｇ（純度１００％）を得た。
異性体Ａ ＩＨＮＩ（Ｒ（Ｄ２０１　６　０．８３　（ｃｌ、３１１．　０．８３　（ｔ、 ３Ｈ１，０，９６（ｄ、　３Ｍ＋、　１−２４１ｍ、−４Ｈ１，１，４８（ｍ、 　３Ｈ）、　１．６７　（ｍ、　ＬＨＩ、　１．９３（ｍ、ｌ）！＋、２．０６ 　＋ｍ、２Ｈ１，２，７３（ｄｄ、ｌ１１１．　２．８０　（ｒｅ、２）！＋、 ２．９０Ｆｄｄ、　ＩＨＩ、　２．９９　（ｄｄ、　１Ｍ＋、　３．０５　（ａ ｄ、　ＩＨｌ、　３．１３　（ｄｄ、　ｌ）！＋。
３．２０　（ｔ、２Ｈ１，４，０３（４，ＩＨＩ、４ｊｌ　＋（ｌｄ、ＬＨＩ、 ４．５５　（（ｌｄ、１！（）。
４．７４　（ｄｄ、　ＩＨＩ、　７．２１−７．３７　！ｍ、　５Ｈ１゜１３Ｃ 船（Ｄ２０１６１４．１３．１ｇ、６１．　Ｌ９．３Ｇ、　２２．８４゜２４． ３４．２７．４１．２９．３８．３１．０２．３２．５３．３６．９１．３１． ８Ｇ、　４１．４６゜４１．６２．’　４２．４０．５０．８９．５５．７０． ５９．１２．６０．５７．１２８．１９．　Ｃ２９，７５゜１３０．１０．　１ ３７．３４．　１５７．７９．　１７３．２１．　１７３゜８６．　１７５．３ ２．　Ｃ７６，５６゜１７８．７２．２０７．５７゜ 分析　Ｃ３１Ｈ５ｏＯ７Ｎ８−］、］７５ＣＦ３ＣＯＯＨ−２Ｈ２に対する 計算値：Ｃ，４６，９７，Ｈ，６，３７；Ｎ、１２．７０；Ｆ、１１．３１ 実測値：Ｃ，４６，７８；Ｈ，５，７２；Ｎ、１２．２３：Ｆ、９．９８ 異性体Ｂ　゛ ＦＡＢＳ−ＭＳ　ｍ／ｅ　６４７（Ｍ十Ｈ＋）１ｉ（日（Ｄ２ｏ１６０−１６　 ＋６，３Ｈ’Ｊ、　０−７９　（ｄ、３Ｈ１，０，８２（ｔ、　３Ｈ１，１，２ １ｆｍ、　４Ｍ＋、　１４９　Ｌｍ、　３Ｈ１，１６６（ｍ、　ＩＨＩ、　１． ９ｓ（ｄｄ、　ＬＨＩ、　２．０４　（ｍ、　ＩＨ）、　２．６８−２．８６１ ｎｎ、　４Ｍ１．２．９６　ｆｄｄ、　１）＋１゜３．０３　ｆｄｄ、　ＩＨＩ 、　３．１７　（ｃｉｄ、　ＩＨｌ、　１２３　（ｔ、　２Ｈ）、　４．ｏ３　 ｔｄ、　ＩＨＩ。
４．２９　ｆｄｄ、　ＩＨＩ、　４．５９　（ｄ、　ＩＨＩ、　４．６５１ｆ、 　ＩＨｌ、　７．２４−７．：１６　Ｆｍ。
５Ｈ）。
１３ＣＮＭＲＴＤ２０１　６　１３．９８．　１８．０６．　１９．１３．　２ １７Ｌ２４．２０．　２フ、０９．　２９．３１．　３０．９’３．　１２．６ ３．　３６．３３．　３１．６９．　４１．２０゜４１．２Ｂ、４１．９６．　 ５０．８４．　５５．３Ｂ、５８Ｊ８．　６０．２８．　１２７．９４．　１２ ９．４７゜Ｃ２９，ＳＳ、　１２９．９５．　１３７．２９．　ｌｓ７．６０． １１３．ＯＢ、Ｃ７３，６Ｌ、　１７５．１６゜１７６．３２．１７８．２１１ ．　２０６．５１３゜分析　Ｃ２８Ｈ４３０８Ｎ７・１．６５ｃＦ３ＣＯＯＨ・ 　２．５Ｈ２゜に対する 計算値：　Ｃ，４７，３０、Ｈ，６，４４。
Ｎ、１２．８７；Ｆ、１０．８０ 実測値：Ｃ，４７，２３；Ｈ，５，８５；Ｎ、１２．６９．Ｆ、１０．７６ 実施例　１１ ０Ａｒ　（ｋ）Ｎｌ　ｅ−Ａｓｐ−Ｄ−Ｖａ　１−Ｐｈｅ（（１）Ｎｌ　ｅ’　 Ｖ’ｔ’Ｆラ　−ＴＨＰ）　の調製Ｎ“−（２−ブチル−４−オキソ−５（Ｓ） −アミノ−８−グアニドオクタノイル−Ｌ−アスパルチル−Ｄ−バリル−Ｌ−フ ェニルアラニン（（１）Ｎ１　ｅ’　Ｖｔ’Ｆ’−ＴＨＰ）の固相合成 先に記載した手法（（１）Ｆ５−ＴＨＰの異性体ＡおよびＢ１実施例８）に従っ て、化合物Ｘ−１異性体Ａ（Ｖｌｌｌ−３の異性体Ａ１実施例８）（７３１ｍｇ 、１．０６ｍｍ。
１）　、ＨＯＢｔ　（１６４，０ｍｇ、１．０７ｍｍｏ　１）　５ＢＯＦ　（４ ７３ｍｇ、１．０７ｍｍｏ　１）　、およびＮ−メチルモルホリン（１７５μｌ 、１．５９ｍｍｏｌ）をＤＭＦ　（１５ｍＬ）中で室温で３０分間同温した。メ リフィールドｐｈｅ−レジンを用いた標準の固相ペプチド合成により調製したＴ ＦＡ−Ａｓｐ　（ＯＢｚ　１）−Ｄ−Ｖａ　１−Ｌ−Ｐｈｅ−０−レジン（１， Ｌｏｇ、０．６１ｍｍｏ　１　［理論］０．５５ｍｅｑ／ｇ）を１０％ジイソプ ロピルエチルアミンで中和しく２Ｘ）、レジンをメチレンクロライドで洗浄しく ３Ｘ）、活性化ケトメチレンを添加した。反応容器を一晩振盪した。
カイザー試験は、結合が完結していないことを示した。カイザー試験を定期的に 実施しながら、反応を７日間行った。カイザー試験は負を示さなかつたが、レジ ンを洗浄し、乾燥し、１．３１ｇの生成物を得た。ＩＦによりレジンからペプチ ドを離脱させて粗製ペプチド３８７ｍｇを得た。この生成物を０、　１％ＴＦＡ を含有する水中の１０〜３０％勾配のアセトニトリルを用いた直線的ＨＰＬＣに より部分的に精製した。
異性体Ａは、Ａｓｐ−Ｖａ　１−Ｐｈｅ副生成物とともに溶出した。１７〜３０ ％勾配のアセトニトリルを用いた、異性体Ｂの第２の直線的ＨＰＬＣ精製により 純粋な生成物を得た。
画分（２７％アセトニトリルでに’−２，１３）を集め、アセトニトリルを蒸発 除去し、冷凍し、凍結乾燥して（Ｉ）　Ｎ１　ｅ２Ｖ＋４Ｆ５−ＴＩＰの異性体 ８３７ｍｇ　（純度９７％）を得た。
異性体Ｂ ＦＡＢＳ−ＭＳ　ｍ／ｅ　６４８　（Ｍ十Ｈ＋）”ＨＮＭＲ（Ｄ２０１６０．６ １　（ｄ、　３Ｈ）、　０．６９　（ｄ、　３Ｈ１，０，８０（ｔ、　］）ＩＩ 、　１２１　（ｍ、　４Ｈ１，１，４９（ｍ、　３Ｎ＋、　１．６５　（ｍ、　 ＩＨＩ、　１Ｂ２−Ｃ９５ｆｍ、　２Ｍ１．２．０５　（ｍ、　ＩＨｌ、　２． ７１　（ｄｄ、　ｌＨ）、　２．７７１ｄｄ、　ＩＨｌ。
２．８２　（ｍ、　ＩＨｌ、　２Ｊ６　（ｄｄ、　ＩＨＩ、　２．９３　（ｄｄ 、　１Ｎ）、　３．０４　ｌｄｄ。
ＩＨｌ、　３．２１　（ｔ、　２Ｈ１，３，２５（ｄｄ、　１）！＋、　４．１ ５　ｉｒｎ、　ｌＪ（＋、　４．２８ｆｄｄ、　１１１．４．６２−４．６９　 （ｍ、　２Ｈ）、　７．２２−７．３５　（ｒｎ、　５Ｈ）。
１３ＣＮＫＲ（Ｄ２０１　６　１７．５３．　１９．４１．　２２．９０．　２ ４．３７゜２７．２６，２９．４７．　３１．８２．　３２．７３．　コロ、７ ７、　３Ｂ、０３．　４１．３６．　４１．４４゜４２．０３．５１３９．５５ ．５０．５９．０５．５９．４９．１２Ｂ、０６．１２９．７３゜１３０．１２ ．　１３７．７９．　１５７．７６、　１７３．０２．　１７３．２４．　１７ ５．０７．　１７６．４９゜１７１１．６３．２０６．８２゜ 分析　ＣＨＯＮ　−１，５ＣＦ３ＣＯＯＨ−２，５Ｈ２０に対する 計算値：（，４７，２７，Ｈ，６，４９゜実測値：Ｃ，４７，２５，Ｈ，５，９ ５；Ｎ、１１．３０；Ｆ、９．５４ 実施例　１１ Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｓｐ　（ｋ）Ｖａ　１−Ｐｈｅ（（ＩＩＩ）Ｆラ　−ＴＨＰ ）　の調製Ｎ’−トリチルーＬ−アスパラギン酸β−シクロへキシルエステル（ ＸＩ−３） Ｎ　−Ｂｏｃ−β−シクロヘキシル−し−アスパラギン酸β−シクロヘキシルエ ステル（ＸＩ−１，２３，７ｇ、７５゜１ｍｍｏｌ）をＣＨ２Ｃｌ２−ＴＦＡ　 （１：　１．２００ｍＬ）に溶解し、得られた溶液を室温で４５分間撹拌した。
減圧下で溶媒を除去し、得られた油状物をＥ　ｔ　２０　（１００ｍ　Ｌ）で希 釈し、ヘプタン（１００ｍＬ）で析出させた。上清を移しとり、残存溶媒を真空 除去してＸｌ−２を白色固体として得た。−この塩をＣＨ２Ｃ１２（３００ｍ　 Ｌ）に懸濁させ、トリエチルアミン（１０，５ｍＬ、７５ｍｍｏ　１）およびト リメチルシリルクロライド（３３，４ｍＬ、２６２ｍｍｏｌ）を加え、得られた 混合物を還流下で３０分間熱した。反応混合物を室温まで冷却し、さらにトリエ チルアミン（３６，８ｍＬ、２６２ｍｍｏ　１）を加え、この反応混合物を４５ 分間還流させた。ついで、反応容器を０℃まで冷却し、ＣＨ２Ｃｌ　２　（８０ ｍ　Ｌ　）中のＭｅＯＨ（４，５ｍＬ、１１２．５ｍｍｏ　１）を１０分間かけ て滴下した。この反応混合物をさらに１０分間撹拌し、ついで室温まで加温した 。ＣＨ２ＣＩ　２中のトリチルクロライ下（２１・、Ｑｇ、７５ｍｍｏ　１）を 加え、反応混合物を３時間撹拌した。ＭｅＯＨ（５０ｍＬ）を反応混合物に加え 、室温で３０分間撹拌した。　この反応混合物を真空下で粘稠黄色油状物となる まで濃縮し、これをＥｔ２０に溶解し、ＩＮ　ＮａＯＨで抽出した（４Ｘ２５０ ｍＬ）。併せた水層を０℃まで冷却し、固体クエン酸で中和した。この生成物を 水層からＥｔ２０で抽出した（５Ｘ２００ｍ　Ｌ　）　ｏ抽出物を飽和ＮａＣ１ で洗浄しく２Ｘ２００ｍＬ）、ＭｇＳＯ４上で乾燥し、淡黄色泡状となるまで蒸 発に供して２８．８ｇ　（８４％）のＸｌ−３を得た。
ＭＳ　ｍ／　ｅ　４１３　ＣＭ−Ｃ０２）ＩＨＮＭＲ［■Ｃ１３）　６１．１５ −１．９０　＋ｍ、　１１Ｅ、　ｃＨｅｘ　式４〆Ａｓｐ　８　ＣＨＩ、２．５ ６　（ｄｄ、ＬＭ、入ｓｐ　８　Ｃｆ１ｌ、３．５８　（ｍ、ＬＨ，Ａｓｐ　ａ Ｃａｌ、４．７０　ｆｍ、ＬＨ，０（Ｊｊｌ、７．１５−７．５７　４ｍ、１５ Ｈ，入ｒ）１１゜２−メルカプトピリジン（６，９０ｇ、６２．０ｍｍｏｌ）を ＥｔＯＡｃに溶解した。この溶液にアルゴンを吹き込んでチオールの酸化を減少 させた。この混合物を０℃に冷却し、ＥｔＯＡｃ　（５０ｍＬ）中のＤＣＣ（１ ３，７ｇ、６６ｍｍｏ１）を１０分間かけて滴下した。この反応混合物を０℃に ２時間保ち、ついで室温で２日間撹拌した。この反応混合物を冷却し、ついで尿 素副生成物をろ別した。溶媒を減圧下で除去して濃黄色油状物を得た。この生成 物をＥｔＯＡｃ−ヘキサン（１，５：８．　５．１００１００Ｏで溶出させるフ ラッシュクロマトグラフィー（４０Ｘ３００ｍｍ）を用いて精製した。対象の画 分を集め、オフホワイト色の固体となるまで蒸発に供して２７．５４ｇ　（８３ ％）のＸｌ−４を得た。
ＲｆＯ−４７（Ｅ　ｔ　ＯＡ　ｃ−ヘキサン、１：４）１ＨＮＭＲ＋ＣＤＣ１３ ）　６　１．１３　ｆｄｄ、ＩＪ（、入ｓｐ　Ｂ　Ｃ１ｊ）。
１．１ｓ−１，８５ｆｍ、１０Ｈ，ｃＨｅｘｌ、２．４５　（ｄｄ、ＬＨ，入ｓ ｐ　Ｂ　Ｃａｌ、３．４２（ｄ、ＬＨ，ド３１．　１７８　（ｒｎ、ＬＭ、入ｓ ｐ　ａ　ＣＨ１，４，６１（ｍ、ＩＨ，０ＣＲＩ。
７．１０−７．８：ｌ　（ｍ、１８Ｈ，入ｒＨ１，８，６３ｆｒｎ、ＩＨ，入ｒ Ｈ１゜シクロヘキシル　３Ｓ−３〜トリチルアミノ−４−オキソ−６−イツプロ ピルーオクトー７−エノエート（ＸＩ−６）Ｅ　ｔ　２０　（３０ｍ　Ｌ　）中 のＭｇターニング（４，８３ｇ。
０．２モル）の懸濁物をＥｔ２０（３０ｍＬ）中の１．２−ジブロモエタン（１ １，８ｇ、６３ｍｍｏ　１）の滴下により活性化することによってグリニヤール 化合物を調製した。この添加は、一定速度の還流を維持する速度で行った。反応 混合物を還流下に保ちながら、Ｅ　ｔ　２０　（３０ｍ　Ｌ　）中の４−メチル −３−ブロモメチル−１−ペンテン（１１，２ｇ、６３ｍｍｏｌ）の溶液を３時 間かけて滴下した。反応混合物をさらに１時間還流させ、ついで室温まで冷却し た。ＴＨＦ（５０ｍＬ）中のＸＩ　−４（１１，０６ｇ、２０ｍｍｏｌ）の溶液 に、−１０℃（水−メタノール）で、グリニヤール化合物（ＸＩ−５）を注射器 により少しずつ添加した。ＴＬＣの追跡により、全てのグリニヤール化合物を添 加する前に反応が完結したと判定された。反応混合物を飽和ＮＨ４ＮＨ４Ｃ１（ ２００とＥ　ｔ　２０　（２００ｍ　Ｌ　）の混合物に注いだ。
有機層を飽和炭酸水素塩（３Ｘ２００ｍＬ）および飽和ＮａＣＩ　（２Ｘ２００ ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥し、黄色油状物となるまで蒸発に供した。
反応生成物をＥｔＯＡＣ−ヘキサン（１：　９）で溶出させるフラッシュカラム （４０Ｘ３００ｍｍ）で精製して９．６２ｇ　（８９％）のＸｌ−６を得た。
Ｒｆｏ、７８　（Ｅ　ｔ　ＯＡ　ｃ−ヘキサン、１：４）”ＨＮ？’ｌＲ（ＣＤ Ｃｌ２）　６０．７７　（ｍ、　６Ｈ，ＣＨ３）、　１．１−１．９ｆＩｎ、１ ２Ｈ，ｃＨｅｘ　ａｎｄ’Ｃ）ｌ（Ｊｊｌ、　１．９５−２．６２　＋ｒｎ、４ Ｍ、入５ｐ　β　Ｃ旦２＝、ｔｄｃｏｃＨ２）、　３．５４１ｍ、　２８．　Ａ ｓｐ　ａ　Ｃ：３　ｈ−＊ｔζｑ＋、　４．７２　［ｍ、　ＬＭ。
ＱＣ旦］、　４．７５−５．０２　＋ｍ、　２Ｈ，Ｃ＝Ｃ得１．５．２２−５． ６７　Ｆｍ、　ＩＨ。
３０．７４．３１．４９．３Ｂ、３１．４２．０６．４２．２Ｂ、　４４．０６ ．５９．０７．５９．４５゜７１．３１．１３．０５．　ｌｉ５．６３．１１５ ．７１．１２６．４６．　Ｌ２７．８１．１２８．９０゜１１Ｂ、８１．１１９ ．０９．１４６．２４．１７０．５６．２０９．４０゜シクロヘキシル　３Ｓ− ３−ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノ−４−オキソ−６−イツブロビル ーオクトー７−エノエート　（Ｘ　Ｉ　−７） ＣＨＣＮ　（５０ｍＬ）中のｐ−ＴｓＯＨ−Ｈ２Ｏ（４゜３８２ｇ、２３ｍｍｏ 　１）の溶液をＣＨ３ＣＮ　（１００ｍ　Ｌ　）中ノトリチルオＬｚフィンＸ　 Ｉ　−６（１１，８ｇ、　２１．　９ｍｍｏｌ）の溶液に加えた。３０分間撹拌 後、トシレート塩をろ別し、ＣＨ２Ｃｌ２　（１００ｍＬ）に懸濁させ、トリエ チルアミン（４，５６ｇ、４４．５ｍｍｏ　１）と（Ｂ　ｏ　ｃ　）　２０　（ ９，７２ｇ、４４．５ｍｍｏｌ）で処理し、ついで室温で３時間撹拌した。反応 混合物を追加のＣＨ２Ｃｌ２　（１０ＯｍＬ）で希釈し、水冷０．１Ｎ　ＭＣＩ 　（２Ｘ１００ｍＬ。
、氷冷飽和Ｎ　ａ　ＨＣＯ３（２Ｘ　１００　ｍ　Ｌ　）および飽和ＮａＣ１（ ２Ｘ１００ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥し、蒸発に供した。粗製物をＥ ｔＯＡｃ−ヘキサン（１，５：８゜５）で溶出させるフラッシュクロマトグラフ ィー（４０Ｘ　３００ｍｍ）に供した。、生成物画分を集めて６．８０ｇ　（７ ９％）のＸｌ−７を得た。
Ｒ（０，３８（Ｅ　ｔ　ＯＡ　ｃ−ヘキサン、１．　５：８．　５）ＩＨＮＭＲ ＩｃＤｃＩ３）　６０．８６　＋２ｄ、　６Ｈ，（：！（３１，１，１−１，９ （ｍ、ｉ２Ｈ，ｃＨｅｘ　Ｐｌｉｔ’　ＣＨＣ亘１．　１．２−１．９　（ｒｎ 　ｉ夕ｓ’−ｓ　ａセ　１．４ｇ、２１）！。
Ｂｏｃ、　ｃＨｅｘ　１ｔｒｃｉｃ旦１．２６０　ｉｍ、　２Ｈ，ＣＯＣＭ２１ ．２．７６　（ｍ、　２Ｍ。
１３Ｃ欲ｒｃＤｃ１３１６１８．８２．２０．２３．２３．６４．２５．２６゜ ２［１，３０，３１，４４，３５，７ｇ、　３５．９９．４１．３５．４１．６ ２．４４．９８．５６．０４゜５６．２５．　７３．５コ、８Ｏ−Ｏｆ、Ｌ１２ ．ｏｏ、１３８Ｊｌ、１５５．３３．　Ｌ７０．８Ｂ。
シクロヘキシル　Ｂ５−３−ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノ−４−オ キソ−６−カルボキシーツ−メチルオフ液を滴下しながら、アセトン（４０ｍＬ ）中のオレフィンＸｌ−７（１，１５ｇ、２．９ｍｍｏｌ）　の溶液を撹拌しな が）　ら０℃に冷却した。添加終了後、反応混合物を室温まで加温し、２時間撹 拌した。この混合物をセライトを通してろ過し、パッドをアセトンで洗浄した。
併せたろ液をＮａＣ１で飽和させ、ついでＥｔＯＡｃで抽出した（２Ｘ１００ｍ Ｌ）　。有機抽出物を併せ、１０％亜硫酸水素ナトリウム（２×５０ｍＬ　）　 、Ｈ２０（Ｉ　Ｘ　５０　ｍ　Ｌ　）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥し、泡状 物となるまで蒸発に供して８３０ｍｇ　（６９％）のＸｌ−８を得た。
’ＨＮＭＲ（ＣＤＣＩ３７６０．９６　（ｍ、　６Ｂ、　％）、　１．１２−２ ．２３Ｃｍ、　２０Ｍ、　ｅ！（ｅｘ、　Ｂｅｅ　ｚ、ｚｔｉ’ｃ！！１ｃＨ３ １２１，２，３５−１１５（ｍ、　５Ｍ、　Ａｓｐｌｌ　ＣＨ２，ＣＯＣ旦２Ｃ ＨＣＯ２１，４，４５＋ｍ、　ＬＨ，Ａｓｐ　ａ　ＣＨＩ、　４．７４　ｉｎ、 　ＬＭ。
２９．６５．３１３９．３５．９１．３６．９７．４５．８５．５６．０ｇ、　 ７３．５９．３０．２０゜１５５．３３．　１７０．４５．　１７０．９３．　 １７８．９０．　２０６．９０．　２０７．２３゜Ｎ１−カルボベンジルオキシ −Ｌ−リシン　ｔ−ブチルエステル（ＸＩｏ　−２） Ｎ　−カルボベンジルオキシ−し−リジン（５，６０ｇ。
２０ｍｍｏ　１）を１，４−ジオキサン（２５ｍＬ）とイソブチレン（５０ｍＬ ）の混合物に懸濁させた。濃Ｈ２Ｓ　Ｏ４（２ｍＬ）を注意深く反応混合物に加 え、ジュワー（Ｄｓｖ直ｒ　）濃縮器（ドライアイス／アセトン）を用いてイン ブチレンを蒸発させないようにして、反応を室温で進行させた。４時間後、ジュ ワー濃縮器を取り外し、過剰のインブチレンを蒸発させた。反応混合物を水冷Ｉ Ｎ　ＮａＯＨ（２００ｍＬ）に注ぎ、ジエチルエーテルで抽出した（３Ｘ１００ ｍＬ）。併せた有機層を炭酸水素ナトリウム（２ｘ１００ｍＬ）および飽和ブラ イン（２Ｘ１００ｍＬ）で洗浄し、乾燥しくＭｇ５０４）、ＸＩ’−２を油状物 となるまで蒸発に供し、これを直接用いた。収量３．７２ｇ　（５５，３％）。
ＩＮＭＲ６１４６（ｍ、ｌコ）！１．　３．１９　（ｍ、３Ｍ＋、４．８５　（ ｂｓ。
ＩＨＩ、５．０９　１ｇ、２Ｈ］、７．４コ　（ｓ、５ＨＩ　。
Ｎａ、Ｎａ　ｐａ″）リカルボベンジルオキシーＬ−アルギン（５，７６ｇ、１ ０ｍｍｏ　１）をＴＨＦ　（４０ｍＬ）に溶解し、氷−メタノール浴で一１０℃ に冷却した。Ｎ−メチルモルホリン（１，０５ｍＬ、ｌｌｍｍｏｌ）およびイン ブチルクロロホルメート（１，５５ｍＬ、１２ｍｍｏ　１）を順次加えた。−１ ０℃で１５分間撹拌した後、ＴＨＦ　（１０ｍＬ）中のＸＩ’　−２（３，７２ ｇ、ｌｌｍｍｏｌ）の溶液を反応混合物に加えた。この反応混合物をさらに２時 間撹拌し、ついでこれを５０％飽和ブライン溶液（２００ｍＬ）に注ぎ、固体ガ ムを析出させた。この水性物質を移しとり、ガムをメチレンクロライド（２００ ｍＬ）に溶解し、飽和炭酸水素ナトリウム（１００ｍＬ）および飽和ブライン（ ２Ｘ１００ｍＬ）で洗浄し、乾燥し、蒸発に供して白色固体を得た。この物質を ＴＨＦ−ジエチルエーテルから結晶化させてＸＩ’　−３を得た。収量７．６７ ｇ　（８５，７％）ＤＩＨＮＫＩ２イＣＤＣｌ５）　６１．１５−１．９５　（ ｓ　ａｎｄ　ｍ、　１５ｉＨ１，３，０７１ｍ。
２８１、１９１　ｃｍ、　２Ｈ１，４，３７（ｒｎ、　２Ｈ＋、　４．９５　（ ｍ、　６）！１．５．０９　Ｉｓ。
６Ｈ１，５，２２ｉｓ、　２Ｈ１，６，０７（ｂｃｌ、　１）１１．６．７８　 （ｄ、　ＩＨＩ。
７．１５−７．４５　（ｍ、　２０Ｈ１，９ｊ５　（ｂｓ、　２Ｈ１゜ジペプチ ドＸＩ’　−３（１，２２ｇ、１゜３５ｍｍｏｌ）をメチレンクロライド中の５ ０％ＴＦＡにより室温で３０分間処理した。溶媒を真空除去し、淡黄色ガムを得 た。このガムをＴＨＦとともに粉砕した後、ジエチルエーテルを加えて白色固体 を得た。この物質をＴＨＦ−ジエチルエーテルから２回結晶化させてＸＩ’−４ を得た。収量１．　０２ｇ　（９０％）。
Ｆ’−ＴＨＰ、異性体ＡおよびＢ） Ｎ−Ｂ　ｏ　ｃ−Ｌ−７二二ルアラニンレジン（０，６７ｍ　ｅｑ／ｇレジンの ３７３ｍｇ、０．２５ｍｍｏ　１）をメチレンクロライド中の４０％ＴＦＡ／Ｉ Ｑ％アニソールで５分間、ついで３０分間処理してＮ末端Ｂｏｃ基を除去した。
レジンからＢｏｃ基を除去する間に、ケトメチレンジペプチドＸｌ−８（２０８ ｍｇ、０．５０ｍｍｏ　ｌ）、ＢＯＰ　（２２２ｍｇｓ　０．５０ｍｍｏ　１） 　、およびＨＯＢｔ　（７６，９ｍｇ。
０．５０ｍｍｏ　１）をＤ　Ｍ　Ｆ　（２ｍ　Ｌ　）中に溶解した。コノ混合物 をＮ−メチルモルホリン（０，９ｍＬ、０．８２ｍｍｏ１）で処理し、得られた 溶液を３０分間撹拌した。Ｐｈｅ−レジンをメチレンクロライドおよびイソプロ ピルアルコールで多数回洗浄し、メチレンクロライド中の５％ジイソプロピルエ チルアミンで中和し、メチレンクロライドで再び洗浄した。上で得たＸｌ−８の 活性化エステル溶液をレジンに加え、反応を一晩進行させた。カイザー試験は、 結合が不完全であることを示唆した。さらなるケトメチレンサブユニットＸｌ− ８（３℃２ｍｇ、０．７５ｍｍｏｌ）をＢＯＰ　（３３３ｍｇ、０．７５ｍｍｏ 　１）　、ＨＯＢｔ　（１１５ｍｇ、０゜７５ｍｍｏ　１）およびＮ−メチルモ ルホリン（１，４０ｍＬ。
１．５０ｍｍｏ　ｌ）とともに用いて第２の結合を行った。活性化ケトメチレン ジペプチドをレジンと一晩反応させた後、カイザー試験は、結合がなお不完全で あることを示唆した。
それ故、レジンをメチレンクロライド中の無水酢酸（１ｍＬ）およびピリジン（ ０，１ｍＬ）で３０分間処理した。次に、メチレンクロライド中の４０％ＴＦＡ ／１０％アニソールでＢｏｃ基を除去した。Ｎａ、Ｎａ、Ｎ”−）リカルボベン ジルオキシーＬ−アルギニル−Ｎ　−カルボベンジルオキシ−Ｌ−リシン　ＸＩ ’　−４（８４０ｍｇ、１．Ｏｍｍｏ　Ｉ）およびＨＯＢｔ　（１５３，３ｍｇ 、１．０ｍｍｏｌ）を別のフラスコ中のＤ　Ｍ　Ｆ　（２ｍ　Ｌ　）に溶解し、 ０℃に冷却した。メチレンクロライド（５ｍＬ）中のジシクロへキシルカルボジ イミド（２２８，２ｍｇ、１．１ｍｍｏ　Ｉ）を加え、反応混合物を０℃で１５ 分間撹拌した後、室温で３０分間撹拌した。
ペプチド−レジンをメチレンクロライドおよびイソプロピルアルコールで交互に 洗浄して残存ＴＦＡを除去した。上記別フラスコ中でａ製した活性化ジペプチド をこのペプチド−レジンに加えた後、ジイソプロピルエチルアミン（１７５μ１ １１、Ｏｍｍｏ　１）を加えた。ついで、反応容器を一晩振盪した。結合の完結 を確認しく負のカイザー試験）、ペプチド−レジンをメチレンクロライドで洗浄 した。無水ＨＦ中１０％アニソールとともに０〜５℃で１時間撹拌することによ りレジンからペプチドを開裂させた。ＨＦの蒸発後、レジンをジエチルエーテル およびクロロホルムで洗浄し、ついでペプチドを０．５％ＴＦＡが存在する水中 の２０％アセトニトリルで溶出させた。抽出物を冷凍し、凍結乾燥して粗製（Ｉ 　Ｉ　Ｉ）Ｆ５−ＴＨＰ１２８ｍｇを得た。０．１％ＴＦＡを含有する水中０〜 ３０％直線勾配のアセトニトリルを用いたＨＰＬＣにより異性体を分離した。分 離した異性体をさらに精製した：異性体Ａは０．　１％ＴＦＡを含有する水中１ ８％アセトニトリルを用いたアイソクラティック条件下でクロマトグラフィーに 供し、異性体Ｂは０．１％ＴＦＡを含有する水中２２％アセトニトリルを用いた アイソクラティック条件下でクロマトグラフィーに供した。これにより、（Ｉ　 Ｉ　Ｉ）Ｆ５−ＴＨＰの異性体Ａ２５．４ｍｇ　（純度〉９９％）および（Ｉ　 Ｉ　Ｉ）Ｆ５−ＴＨＰの異性体８２０．５ｍｇ　（純度〉９０％）を回ＦＡＢＳ 　ｍ／ｅ　６６Ｂ ｌＸ（ＮＭＲｆＤ、、ｏｌ　６　ｏ、ｓｏ　（ｃｉ、　６Ｈ１、Ｌ−４Ｌ　Ｉｍ −３８１７１，５０−１，７０（ｍ、　４Ｈ１，１，ハ（ｍ、　２Ｈ１，１，８ ７ｃｍ、　２Ｂ１．２．４８　ｆｒｎ。
ＩＨＩ、　、２．５９　（ｄｄ、　ＩＨＩ、　２．６６　ｆｄｄ、　１８１．２ ．８１　ｆｍ、　２Ｈ１，２，９３（ｍ、２Ｈ１，２，９８（ｃｏｄ、１Ｂ１， ３．１４　ｆｃ！ｄ、ＩＨＩ、３．１５　（ｍ、２Ｈ１゜４．００　（ｔ、　Ｉ ＨＩ、　４．３２　（ｃｉｃｉ、　１）！１．４．４４　（ｄｄ、　１８１．４ ．５９　（ｄｄ。
”ＣＮ’）ＩＲ（Ｄ、、０１６１８．２８．１Ｂ、８３．２１．３１．２２．６ ３゜２５、．５Ｂ、２７．２９．　２９．５４．　２り、６７、　３３．５Ｂ、 ３５．９７．　３７．５１．　３８．３１゜コ９．６１．　４６．６２．　５１ ．６６、　５２．８３．　５３．３？、５５．０Ｂ、１２ｇ、２１．　１２７Ｊ ３゜１２８．４１．　Ｌ３５．Ｂ９．　ｌｓ５．９１．　Ｌ６９．９１．１６８ ．５６．１７２．３０．１７３．８２゜１７４．５３．、１７５．１１７．２０ ７．６０゜分析　Ｃ３１Ｈ５ｏＯ８Ｎ８−　２．５ＣＦ３ＣＯＯＨ−２Ｈ２０に 対する 計算値：　Ｃ，４Ｂ、　９４　、Ｈ，５，８０；Ｎ、１１．３９．Ｆ、１４．４ ９ 実測値：（，４４，２７，Ｈ，５，４６；Ｎ、１０．７４．Ｆ、１３．９５ 異性体Ｂ ＩＨＮＫＲ（Ｄ２０）　ｄ　Ｏ，５５（ｄ、　３Ｈ）、　０．６１　（ｄ、　３ Ｈ）、　０．８（ｍ、ＩＨ）、１．３９　（ｍ、２Ｈｌ、１．５７　（ｍ、２） ｆ）、１．６１　（ｍ、２Ｈ）、１．８７（ｍ、　２）！１．２．４８　（ｍ、 　ＩＨ）、　２．５９１ｃｌｄ、　１Ｍ）、　２．７７　（ｍ、　１Ｈ）、　２ ．８０（ｍ、　ＬＭ）、　２．８６　（ｍ、　１）Ｉ）、　２．５１１　ｆｍ、 　３Ｈ）、　３．１４　（ｔ、　２ＨＬ　１．２０（ｄｄ、ＩＪ（ン、３．９９ 　（ｔ、ユＨ）、４ｊｌ　Ｉｄｄ、１１４ン、４．５Ｂ　Ｉｄｄ、ＩＨＩ４．６ コ　（ｄｃｌ、１！（＋、７．２０−７．コ３　１ｍ、５ＨＬ１３ＣＮＭＲｆＤ ２０）　６　１７．６１．　１Ｂ、フ０．　２１２２．　２２．６５゜２５、Ｓ Ｌ、２７．２Ｂ、２９．４２．　２９．６１．　コ４．０６．　３６．２７．　 ３６．７２．　３Ｂ、３１゜３９．５９．４６．３５．５１．７０．５２．９１ ．５３．６６、５４．６１．１２６．２２゜１２７．７８．　１２７．９０．　 １２８．３３．　１３６．１１．　Ｌ５５．９３．　１６１１．５３．　１７２ ・１７、Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ａｓｐ　（ｋ）Ｖａ　１−Ｐｈｅ−ＮＨ７（（Ｉ　Ｉ 　Ｉ）Ｐ’　Ｆ’　−ＴＨＰ−ＮＨ２）の調製Ｎ’、Ｎ’、Ｎ＝−トリベンジル オキシカルボニル−し−アルギニル−Ｌ−プロリン　ｔ−ブチルエステル（ＸＩ Ｉ’−ＴＨＦ　（４０ｍＬ）中のトリベンジルオキシカルボニルアルギニン（２ ，８８ｇ、５．０ｍｍｏｌ）を−１０℃に冷却しく氷−メタノール）、Ｎ−メチ ルモルホリン（０，５３ｍＬｓ　５．５ｍｍｏ　１）およびイソブチルクロロホ ルメート（０，７８ｍＬ、６．Ｏｍｍｏ　Ｉ）を順次加えた。−１０℃で２０分 間撹拌した後、Ｔ　ＨＦ　（１０ｍ　Ｌ　）中のプロリンｔ−ブチルエステル（ ２，３１ｇ）の溶液を反応混合物に加え、ついでＮ−メチルモルホリン（０，５ ２ｍ１，５．５ｍｍ。
１）を加えた。室温で２時間撹拌した後、反応混合物を油状物となるまで蒸発に 供した。この粗製物をメチレンクロライド（１００ｍＬ）に溶解し、５％クエン 酸（２Ｈ１００ｍＬ）と飽和ブライン（２Ｈ１００ｍＬンで洗浄し、Ｍ　ｇ　Ｓ 　Ｏ４上で乾燥し、泡状物となるまで蒸発に供した。ヘキサン中２０％、３０％ および４０％の段階勾配の酢酸エチル（各５００ｍＬ）を用いたフラッシニクロ マトグラフィーにより精製して３．２０ｇ　（８７，７％）のＸＩＩ’−３を得 た。
ＦＡＢＳ−ＭＳ　ｍ／ｅ　７３０　（Ｍ十Ｈ＋）Ｎ’ｔｊｒＲ（ＣＤＣＩ］）　 ６１．４２　Ｉｓ、　９Ｈ）、　１５−２．２５　＋ｍ、　８Ｈ）。
３．５２１ｑ、　２Ｈ３，３，９８Ｉｒｎ、　２Ｈ）、　４．３２　＋ｍ、　２ Ｂ１．５．０６５　（ｓ、　２Ｈ１゜５．１２　（ｓ、　２Ｍ１．５．２２　（ ｓ、　２Ｈ１，５，５６＋４．　ＩＨＩ、　１．２３−１．４５　（ｍ。
１５Ｍ１．９．３０　（ｂｓ、　２）＋１゜分析　Ｃ３９Ｈ４７０９Ｎ５に対す る 計算値：Ｃ，６４，１８，Ｈ，６，４９゜Ｎ、９．　６０ 実測値：Ｃ，６４，２０，Ｈ，６，５０；Ｎ、９．　６７ Ｎ’、Ｎ’、Ｎ“−トリベンジルオキシカルボニル−Ｌ−アルギニル−Ｌ−プロ リン（ＸＩ　Ｉ’　−４）化合物ＸＩ　Ｉ’　−３（１，０６ｍｇ、１．４５ｍ ｍｏ　１）をトリフルオロ酢酸−メチレンクロライド（５０ｍＬ、比１：１）に 溶解し、反応混合物を室温で３０分間撹拌した。この物質を油状物となるまで蒸 発に供した。残渣をメチレンクロライド（１００ｍＬ）に溶解し、水（５０ｍＬ ）および飽和ブライン（２Ｈ５０ｍＬ）で洗浄し、Ｍ　ｇ　Ｓ　０４中を通し、 蒸発に供して８６９ｍｇ　（９２，６％）のＸｌｌ’−４を得た。
ＦＡＢＳ−ＭＳ　ｍ／ｅ　６７４　（Ｍ＋Ｈ”）ＮＭＲ［ＣＤＣｌ２）　６１． ５０−２．０５　（ｍ、　８ＨＩ、　３．５２　（Ｌ　２ＨＩ。
３．８７　（Ｊ＋、　２Ｈ１，４，５０（ｍ、　２Ｈ）、　５．０４　（ｓ、　 ２Ｈ）、　５．１３　（ｓ、　２ＨＩ。
５．１５　（ｓ、　２ＨＩ、　５．９０１ｄ、　ｌ！り、　７．２０−７．４５ 　（ｍ、　１５１１）、　９．２０１ｂｓ、　２Ｈ１゜ 分析　Ｃ３５Ｈ３９ｏ９Ｎ５に対する 計算値：Ｃ，６２，２８；Ｈ，！５．８３；Ｎ、１０．４０ 実測値：Ｃ，６２，２８：Ｈ，５，９０；Ｎ、１０．４１ ［２−イソプロピル−４−オキソ−５（Ｓ）−（Ｌ−アルギニル−Ｌ−プロピル ）−アミノ−６−カルポキシーヘキサノイル〕−フェニルアラニン（異性体Ａ、 （Ｉ　Ｉ　Ｉ）　Ｐ２　Ｆ５−ＴＨＰ−ＮＨ２）の固相合成 先に報告した一般的方法（異性体ＡおよびＢ、（ＩＩＩ）Ｆ５−ＴＨＰ、実施ｆ ｌＪ　１１　）　ニ従つ。化合物Ｘ　１１−１　（Ｘｌ−８、実施例１１）（６ ６８ｍｇ、１．６２ｍｍｏ　ｌ）＃よびＮ−ヒドロキシスクシンイミドをＣＨ２ Ｃｌ２に溶解し、０℃に冷却した（水浴）　。ＤＣＣ（３５１ｍｇ、１．７０ｍ ｍｏｌ）を加え、反応混合物を０℃で２時間撹拌し、ついで−晩冷蔵した。ＤＣ Ｕをろ過し、ついで蒸発に供してスクシンイミドエステルを得た。標準のプロト コールを用いてＢＯｃ−Ｐｈｅ−ＭＢＨＡレジン（２，５ｇ、１．３ｍｍｏｌ＠ ０．５ｍｅｑ／ｇ）からＢＯｃ基を除去し、レジンを中和し、洗浄した。スクシ ンイミドをＣＨ２Ｃ１２（１０ｍ　Ｌ）に溶解し、触媒量のＨＯＢｔ　（５ｍｇ ）とともにレジンに加えた。
カイザー試験を用いて定期的にモニターしながら反応を７日間進行させた。つい で、ＣＨ２ＣＩ　２　（１０ｍＬ）中の無水酢酸（１ｍＬ）およびピリジン（０ ，２ｍＬ）を用いてレジンをキャップした。常法によりＢｏｃを除去し、レジン をＴＦＡ塩として得た。これとは別に、Ｚ３−Ｌ−Ａｒｇ−Ｌ−Ｐｒｏ　（Ｘｌ ｌ’−４，１，０５ｇ、　１．５６ｍｍｏ　Ｉ）およびＨＯＢｔ　（２５０ｍｇ 、１．６４ｍｍｏ　１）をＣＨ２Ｃｌ、７０ｍｍｏ　１）を加えた。レジンを５ ％ＤＩＥＡで中和しく２Ｘ）、上記活性化ジペプチドを添加する直前にＣＨ２反 応完結の決定（負のカイザー試験）後、レジンを洗浄し、乾燥して２．８１ｇの 生成物を得た。ＨＦによりレジンからペプチドを離脱させて粗製ペプチド３５２ ｍｇを得た。この生成物を０．　１％ＴＦＡを含有する水中の１０〜２５％勾配 のアセトニトリルを用いた直線的ＨＰＬＣによって部分的に精製した。なお不純 の画分を生成物を含有する５つのプールにグループ分けした。０．１％ＴＦＡを 含有する水中の２２％アセトニトリルを用いたアイソクラティック系においてさ らに直線的ＨＰＬＣ精製を行った。異性体Ａを含有する画分（２２％アセトニト リルでに’−２，００）を集め、アセトニトリルを蒸発除去し、冷凍し、凍結乾 燥して、（ｒ　ｒ　ｘ）Ｐ　Ｆ　−ＴＨＰ−ＮＨ２の異性体Ａ４２ｍｇ　（純度 ９８％）を得た。異性体Ｂは不安定であるようであり、分析ＨＰＬＣにおいて多 重ピークを示した。
’Ｈ１９（Ｄ２０）　６　Ｑ−４３，０−５８（ｄ、　３ｄＢ　Ｎ−４５（ｍ。
１７？＋、　１．６８　（ｍ、　２Ｈ）、　１．９１　（ｍ、　３Ｍ）、　２． ００　（ｍ、　２Ｈ）、　２．３３　Ｄｏ。
ｉｄｄ、　ＬＨＩ、　４．５９　（ａｄ、　ＬＨＩ、　４．６３　（ｔ、　ＬＨ Ｉ、　７．２２−７．３４　＋ｍ。
ＣＮ？ａ　ｆＤ２０１６２０．０３．２０．２１．２４．０Ｂ、　２５．７５゜ ２７．９５．３０．４３．３０．９０．３５．４９．３７．７１．３９．７９． ４１．４５．４８・５６゜４ａ、９９．５２．１７．５５−７２．５６．Ｌ５． ６１．４８．１２８．０９．１２９．１！２゜１３（＋、０３．　ｌコア、９６ ．　Ｌ５７．Ｂｌ、１６９．０５．　１７４．４５．　１７５．５９．　１７７ ．５１１゜１７１１．３４，２１０．９４゜ 分析　Ｃ３ｏＨ４５０７Ｎ８−　１．８ＣＦ３ＣＯＯＨ−２，５Ｈ２０に対する 計算値：Ｃ，４５，５１、Ｈ，５，９０゜Ｎ、１２．６４；Ｆ、１１．５８ 実測値：　Ｃ，４５，６２；Ｈ，５，４７。
Ｎ、１２．５５．Ｆ、１１．３０ 〔２−イソプロピル−４−オキソ−５（Ｓ）−（Ｌ−アルギニル−Ｌ−リシル） −アミノ−６−カルポキシーヘキサノイル］−チロシン（異性体ＡおよびＢ、Ｃ Ｉ　Ｉ　Ｉ）ＴＨＰ）の固相合成 先に述べた方法（（Ｉ　Ｉ　Ｉ）Ｆ５−ＴＨＰ、異性体ＡおよびＢ、実施例１１ ）を用いて、化合物ＸＩ　Ｉ　！−１（５６６ｍｇ、１．３８ｍｍｏ　１）　、 ＨＯＢｔ　（２１７ｍｇ、１．４１ｍｍｏ　１）　、ＢＯＰ　（６１７ｍｇ、　 １゜４０ｍｍｏｌ）およびＮ−メチルモルホリン（４６７μｍ、４．２７ｍｍｏ ｌ）をＣＨ２Ｃｌ２　（１０ｍＬ）中で併せ、室温で３０分間撹拌した。これと は別に、通常の方法によりＢｏａ−Ｌ−Ｔｙｒ（Ｚ）−０−レジン（２，５９ｇ 、１．５０ｍｍｏ　１＠０゜５８ｍｅｑ／ｇ）からＢｏａ基を除去し、レジンを ＣＨ２Ｃｌ２で洗浄しく３×）、ＣＨ２Ｃｌ２中の１０％ＤＩＥＡで中和しく２ Ｘ）、ＣＨ２Ｃｌ２で洗浄した（３Ｘ）。活性化ケトメチレンをレジンに加え、 ７日間振盪した。ケトメチレンに対して過剰当量のレジンが存在していたので、 カイザー試験は無効であった。未反応アミンをＣＨ２Ｃｌ２　（９ｍＬ）中の無 水酢酸（１，０ｍＬ）およびピリジン（０，１ｍＬ）を用いてキャップした。常 法によりＢｏｃを除去し、レジンをＴＦＡ塩として得た。これとは別に、Ｚ　３ −　Ｌ　−Ａ　ｒ　ｇ　−Ｎ’−Ｚ−Ｌ−Ｌｙｓ　（ＸＩ’−４、実施例１１． １，２６ｇ、１．５０ｍｍｏｌ）およびＨＯＢｔ　（２３０ｍｇ、１゜５０ｍｍ ｏｌ）をＣＨ２ＣＩ　２に溶解し、０℃に冷却し、しかる後ＤＣＣ（３４０ｍｇ 、、１，６５ｍｍｏ　ｌンを加えた。
レジンを５％ＤＩＥＡで中和しく２Ｘ）、上記活性化ジペプチドを添加する直前 にＣ）Ｉ　２　Ｃ１２で洗浄した（３×）。ついで、容器を一晩振盪した。反応 完結の決定（負のカイザー試験）後、レジンを洗浄し、乾燥してペプチド−レジ ン３゜４３ｇを得た。ＨＦによりレジンからペプチドを離脱させて粗製ペプチド ５８８ｍｇを得た。この生成物を分離し、０゜１％ＴＦＡを含有する水中０〜１ ７％勾配のアセトニトリルを用いた直線的ＨＰＬＣによって部分的に精製した。
０．１％ＴＦＡを含有する水中３〜１２％勾配のアセトニトリルを用いたＨＰＬ Ｃにより異性体Ａをさらに精製した。異性体Ａを含有する両分（１３％アセトニ トリルでに’−０，８８）を集め、アセトニトリルを蒸発除去し、冷凍し、凍結 乾燥して（Ｉ　Ｉ　Ｉ）ＴＨＰの異性体Ａ９２ｍｇ　（純度９９％）を得た。０ ．１％ＴＦＡを含有する水中７〜１７％勾配のアセトニトリルを用いたＨＰＬＣ により異性体Ｂをさらに精製した。
異性体Ｂを含有する画分（１６％アセトニトリルでに’　−１゜１２）を集め、 アセトニトリルを蒸発除去し、冷凍し、凍結乾燥して（Ｉ　Ｉ　Ｉ）−ＴＨＰの 異性体８３１ｍｇ　（純度９８％）を得た。
ＩＨ徳ＩＤ２０１６０．８１８　（ｄ、　３ＨＩ、　０．８２　ｆｄ、　３Ｈ１ ゜１．４２　（ｍ、　２ｉ（＋、　Ｌ、５２−ＩＪ２　ｆｍ、　７８１．１．８ ９　（ｑ、　２Ｈ１，２，４９Ｌｍ、１Ｈ）、２．６０　＋ｄｄ、ＩＨ）、２． ６７　１ｄｄ、ＬＭ）、２．７８−２．９７　（ｍ。
５Ｈ１，３，０７（ｄｄ、ｌ）！１　３．１１　（ｍ、２Ｈ１，４，０］　１セ 、ＩＨＩ、４．３４＋ｄｄ、　ＬＨＩ、　４．４７　ｆａｄ、　ＩＨ）、　４． ５４　（ｄｄ、　ＩＨ）、　６．８０　（ｍ、　２１１゜７．１２　ｉｍ、２Ｈ ＋− １］ＣＮＫＲｆＤ２０）　６２０−１２．２０−６３，２３−３−０，２４−４ ４／２１．３Ｂ、２９．１０．　３１．３Ｇ、コ１．４７．　コ５．３９．　３ ６．９Ｂ、３９．３Ｇ、４０．１２゜４１．１２．４１４１．４Ｂ、５２．５３ ．４Ｊ　５４．６４．５５．３５．５６．９：］、　１１６．３３゜１２９、＜ ９．　０１５４．　１５５．３１．　１５７．７１．　１７０ｊ６．　１７４． ０９．　１７５．６９゜１７６．４８．１７７．６ｉ１．２０９．３８分析　Ｃ ＨＯＮ　・　２．６ＣＦ３ＣＯＯＨ・　３Ｈ２０に対する 計算値：　Ｃ，４２，２４；Ｈ，５，７４。
Ｎ、１０．８９．Ｆ、１４．４１ 実測値：Ｃ，４１，９０，Ｈ，５，３１；Ｎ、１０．８３．Ｆ、１４．２１ 異性体Ｂ ＦＡＢＳ−ＭＳ　ｍ／ｅ　６７９（Ｍ＋Ｈ”）ＩＨＮＭＲｆＤ２０１６０．５６ 　（ｄ、　ＩＨ）、　０．６４１ｄ、　ＩＨＩ。
０．７９−０．９２　（ｍ、ＩＨＩ、１４１　（ｍ、２Ｈし　１．５３−１．７ １　（ｒｎ、５Ｍ）、１５７８ｆｍ、　２ｉ（＋、　１．９０　ｆｑ、　２Ｂ１ ．２．５２　ｆｍ、　ＬＨＩ、　２．６２　ｆｄｃｌ、　１Ｂ＋、　２．７９１ ｄｄ、ＩＨＩ、２．８１−２．８７　（ｍ、２Ｈ１，２，８９（ｄｃｉ、１）（ ｌ、２．９６　（ｅ。
２Ｈ１，３，１１１４ｍ、３８１．　４．０２　（仁、ＩＨＩ、４．３４　［ｔ 、１Ｂ＋、４．５７、　ＣＮＭＲ（Ｄ２０１６２１．９６．２：１．１Ｂ、　２ ５．７３．２７．１７゜３０．０３．３１＋１１．３３．９９．３４．１３．３ ８．６６、４０．０７．４１．０４．４２．８４゜４４、ＬＬ、　５０．８２． ５６．２３．５１．４３．５Ｂ、３２．５９．２０．１１９．１４゜０２．６４ ．１３４．２０．１５７．９５．１６０．４５．１７３．０５．１７６．６８． １７８．５４゜１７９．７３．１８０．１８．２１２．１１゜分析　Ｃ３１Ｈ５ ００９Ｎａ　’　２．４ＣＦ　３　ＣＯＯＨ”　３）ｉ２０に対する 計算値：（，４２，７２：Ｈ，５，８５；Ｎ、１１．１３；Ｆ、１３．６０ 実測値＋　Ｃ，４２，４０：Ｈ，５，２４；Ｎ、１０．６８：Ｆ、１３．１５ 実施例　１４ Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｓｐ−Ｖａｔ　（ｋ）Ｐｈｅ（（ＩＶ）Ｆ’−ＴＨＰ）１７ ）液相合成まず標準方法により脱保護ジペプチドＺ　Ａ　ｒ　ｇ　（Ｎ　Ｏ２） −Ｌｙｓ　（Ｚ）（ＸＩＶ−３）を良好な収率で調製した。ついで、Ｎ−ヒドロ キシスクシンイミドおよびＤＣＣを用いてこのジペプチドをアスパラギン酸のベ ンズヒドリルエステル（Ｘ　Ｉ　Ｖ−４）　（上記のように調製）と縮合させて ８４％の収率でＸＩＶ−５を得た。ついで１０％アニソールを含有するトリフル オロ酢酸を用いてベンズヒドリルエステルＸＩＶ−５を開裂させて８３％の収率 でＸ　Ｉ　Ｖ−６を得た。ついで化合物ＸＩＶ−６をそのスクシネート活性エス テルに転化し、ＴｓＱＨ−Ｖａ　１　（ｋ）−ＣＨ（Ｂｚ　１）ＣＨ−ＣＨ２と 縮合させて８７％の収率でＸ　Ｉ　Ｖ−７を得た。ついでｘｒｖ−の最終工程は 、酸性条件下での水素化分解による全ての保護基の除去を要し、２０％の収率で （ＩＶ）Ｆ５−ＴＨＰを得た。
さらに、実施例１〜１４に関して上に説明したものと同様の方法により以下の化 合物を調製した。
Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ａｓｐ−Ｖａｌ　（ｋ）Ｐｈｅ　（異性体Ａお１．７１　ｆｍ 、　２８１．１．８９　（ｍ、　１８１．　Ｂ９４　（ｍ、２Ｈ１，２，０２（ ｍ、　２）！１゜２．２６　（ｍ、　ＩＨＩ、　２ｊ２　（ｍ、　ＬＨＩ、　２ ．７６　＋ｍ、　１Ｂ１．２．Ｂ２１ｍ、　２Ｈ）。
２、Ｂ８　（ｍ、１Ｈ＋、２．９４　（ｍ、２Ｈ１，３，ＬＯ（ｍ、ＩＨＩ、３ ．２２　ｔｔ、２ｉｉ＋。
３．６０　（ｍ、ＩＨＩ、１７３　＋ｍ、ＩＪ）、４．３７　Ｔｍ、２）１１， ４．５０　（ｃｌｄ、ＬＨＩ。
４．６７　（ｃｌｄ、　ＩＨＩ、　７．２２−７．３８　（ｍ、　５Ｈ＋。
１〕Ｃド阿ＲｆＤ２ｏ１　ｏ　１６ｊ３．１９−（Ｊ’Ｌ、　２３−１５．２４ ，７５゜２）、０１．　２り、３５．　２９．５コ、　コ５．４７．　３７．１ ９．　４０．５４．　４１．５７．　４２．０３゜４Ｂ、０６．　５０．３３． ５１．４６．６０．５０．　６３．６３．　１２７．０２．　１２Ｂ、８１゜１ ２９．０Ｂ、１３Ｂ、２５．　ｌｓ６．８フ、１６１ｉ１．Ｌｌ、１７２．１７ ．　１７３．３７．　１７］、９８゜分析　ＣＨＯＮ　・２ＣＦ　Ｃｏ　Ｈ−Ｂ ２０に対する 計算値：Ｃ，４６，５２，Ｈ，５，８５；Ｎ、１１．１５．Ｆ、、１３．００ 実測値：Ｃ，４６，２８；Ｈ，５，１４；Ｎ、１０．９１．Ｆ、１２．１４ （ｍ−２９１＋Ｈ＋） ｆｍ、　１Ｍ１．２．２９　＋ｒｎ、　１Ｍ＋、　２．６９１ｍ、　ＩＨＩ、　 ２．７８１ｒｎ、　２Ｈ１，２，８４＋ｒｎ、　１Ｈ１，２，９０（ｍ、　ＬＨ Ｉ、　３．０４　（ｒａ、　１Ｍ＋、　３．１８　（ｔ、　２Ｈ）、　３．５７ ’ＣＮＭＲ（Ｄ２０１　６　１６．１７．　ＩＢ、Ｂ３．　２３．ＬＳ、２４． ７４゜２６．９９．２９．２１．２９．５２．３５．３Ｂ、　３１．０３．４０ ．５２．４０．９４．４２．１１゜４Ｂ、０５．　５０．３３．　ＳＬ、４Ｓ、 ６０．４９．　６４．１９．　１２７．０２．　１２８．８３゜１２９．１６． 　１３１！、２り、１５６Ｊ３．　１６１＋、１１．　１７２．２４．　１７３ ．コ８．１）３Ｊ６゜分析　ＣＨＯＮ　・２ＣＦ　Ｃｏ　Ｈ−Ｂ２０に対する 計算値：Ｃ，４６、ＯＯ，Ｈ，５，６７；Ｎ、１１．０４．Ｆ、１２．８４ 実測値：Ｃ，４５，９６，Ｈ，５，２７゜Ｎ、１０．８４．Ｆ、１２．３８ ２．６９−２．８５　（ｒ＋１．４Ｈ１，２，８５−３，２２Ｆｍ、　２Ｈ１， ３，０８（ｍ、　ＬＨＩ、　３．１９（セ、２Ｈ１，４，０１１Ｊ　ＬＨＩ、　 ４４６　ｆｍ、　ＬＨＩ、　４．３９　＋ｍ、　ＩＨＩ、　４．７０２４．３９ ．２５．３０．２９．０７．３０．２７．３６．５１．３Ｂ、１２．４０．８Ｂ 、　４Ｌ、４１゜４２．４４．４１００．５１．１１．５３．４０．５３．４９ ．６４．５９．　Ｂ２７．９］。
Ｌ２９ｊ２．　１コ０．１０．　Ｂ９．ｉ４．　ＬＳ７．７４．　１７０．２４ ．　１７２．９２．　１７４．７５゜Ｂ７４．９８．１７９．９８．２１１．０ ０　。
計算値：Ｃ，４６，７５，Ｈ，６，２２；Ｎ、１１．０３；Ｆ、１１．５５ 実測値：　Ｃ，４６，４５、Ｈ，５，７６；Ｎ、１０．８９．Ｆ、１１．４８ 分析　Ｃ３３Ｈ５１ｏ９Ｎ７・ＣＦ３ＣＯ２Ｈ−Ｂ２０に対す計算値：Ｃ，５１ ，１５，Ｈ，６，３２；Ｎ、１１．９３；Ｆ、６．９３ 実測値：Ｃ，５１，２０；Ｈ，６，５０；Ｎ、１１．９２．Ｆ、７．１４ １ＨＮＭ　１Ｄ２０１６０．８３　＋（１，６Ｈｌバ、８７　ｆｍ、　３Ｈ１， Ｌ、］２ｉｍ、４Ｈ１，１，６］　（ｒ＋、２Ｈ１，１，７６ｆｍ、３Ｈ１，１ ，９０ｆｉ、２Ｈ１，２，５１＋ｍ、ＩＨＩ、２．６３　（ｍ、［１，２，６６ ｆａｄ、ＩＦ几　２．８コ　ｆ（ｉｄ、ｚＨ）。
２．８６　（ｄａ、ＩＨＩ、３．０２　ｆｄｅｌ、１８１．　３．１７　ｆｍ、 ＩＨＩ、３．１９　ｆｍ。
２Ｈ）、４．０３　ｆｔ、ＩＨＩ、４．］２　Ｉセ、ＩＨＩ、４．４８　ｆａｄ 、ＩＦ、Ｌ　４．６５ｆｄｄ、　ＩＨＩ、　７．２６−７．３９　（ｍ、　５Ｈ ３゜１３ＣＮ？（ＲｆＤ２０１６１２．２５．１Ｂ、２４．１Ｂ、８０．２０． ８４．２２．６０．　２６．コ０．　２７．２４．　２９．４９．　２９．９２ ．　コ３．２９．　３Ｓ、Ｂ２．　３１．５２゜３９．６０．　４６．５６．　 ５１．６５．　５２．９８．　Ｓコ、０５．　５３．１４．　５４．８１．　１ ２６．２１゜１２７．８］、　１２８．３７．　ｌ］ｓ、７ｓ、　１５５．９２ ．１６８．４Ｌ、　１７２．６８．１７３．４８゜１７４．１４．１７５．８６ ．２０７．６Ｑ。
分析　Ｃ３１Ｈ４９０８Ｎ７・　１．８ｃＦ３ＣＯＯＨ−１／２Ｈ２０に対する 計算値：　Ｃ，４８，２１；Ｈ，６，０７；Ｎ、１１．３８：Ｆ、１１．９１ 実測値：　Ｃ，４８，０１、Ｈ，５，７６。
Ｎ、１１．２２；Ｆ、１１．７８ 異性体Ｂ ＦＡＢＳ−ＭＳ　ｍ／ｅ　６４８　（Ｍ＋Ｈ＋）、３５７１Ｈ同＋Ｄ２０１６０ ．７０　ｆｄ、　３Ｍ１．０．７５　（ｄ、　３Ｈ１，０，９５ｆｍ、　３Ｈ１ ，１，１９Ｉｍ、　４Ｈ１，１，６９（ｍ、　３Ｈ＋、　１．８１　＋ｍ、　２ Ｈ）、　１．９６Ｌｍ、　２Ｈ）、　２．５５　ｃｍ、　ＩＨ）、　２．７６　 （ｄｄ、　ＩＨＩ、　２．７８−１４０（ｔｌする　ｍ、　４Ｈ）、　３．２０ 　（ｔ、　２Ｈ１，３，２６（ｄｄ、　ＩＨＩ、　４．０１（セ、ＩＨＩ、４． ３０　ｆｄｄ、ＬＨＩ、４．６１　（ｍ、１１（１，７，１２−７，２３Ｉｍ、 ５Ｈ１゜１３ＣＮＭＲＩＤ２０１　ｏ　１２．２９　、１７−６４　、１８−７ ２　、２０−８５　。
２２．６５．　２６．３４．　２７２Ｂ、２９．４０．　２９．８Ｂ、３コ、９ ２．　３６．２１．　３６．６９゜３９．６０．４６．３６．５１．７０．５３ ．２７．５１．３７．５４．５０．１２６．２１゜１２７．８９．１２８．３４ ．１３６．０４．１５５．９２．１６８．４７．１７２．６６、１１３．Ｂｏ。
１７４．６７、１７５．６１．２０７．７９゜分析　Ｃ３１Ｈ４９０８Ｎ７・　 １．６ＣＦ３ＣＯＯＨ−１／２Ｈ２０に対する 計算値：Ｃ，４８，９０；Ｈ，６゜２１：Ｎ、１１．６９；Ｆ、１０．８７ 実測値：Ｃ，４８，６３；Ｈ，５，８９；Ｎ、１１．９２．Ｆ、１０．８５ 分析　Ｃ３ｏＨ４５０８Ｎ７・２ＣＦ３ＣＯ２Ｈに対する計算値：　Ｃ，４７， ５０、Ｈ，５，５１；Ｎ、１１．４０．Ｆ、１３．２６ 実測値：Ｃ，４７，８２；Ｈ，５，３３；Ｎ、１１．５２：Ｆ、１３．３３ 実施例　１５ Ａｒｇ−ＮＭｅＮｌｅ−Ａｓｐ−Ｖａｌ　（ｋ）Ｐｈｅ（（ＩＶ）Ｎ−ＭｅＮＩ ｅ２Ｆ’−ＴＨＰ）の調製Ｎ’、Ｎ’、Ｎ″−トリベンジルオキシカルボニル− Ｌ−アルギニル−Ｎ’−メチル−Ｌ−ノルロイシンｔｅｒｔ−ブチルエステル（ ＸＶ−３）。ジオキサン（４０ｍＬ）中の濃硫酸（１，５ｍＬ）の混合物に化合 物ＸＶ−１（２，４５ｇ：１０、、Ｏｍｍｏ　］）を加え、アルゴンのパージ（ ｐｕｒｇｅ　）下で１５分間撹拌した。ジュワー濃縮器を用いてこの反応混合物 にイソブチレン（３０ｍＬ）を濃縮して入れた。この反応混合物を５時間撹拌し 、氷冷ＩＮ　ＮａＯＨ（２００ｍＬ）に注ぎ、ジエチルエーテルを用いて抽出し た（３Ｈ１００ｍＬ）。併セタエーテル抽出物を飽和Ｎ　ａ　ＨＣ０３（１００ ｍＬ）および飽和ＮａＣ１（２Ｈ１００ｍＬ）で洗浄し、Ｍｇ−トリベンジルオ キシカルボニル−Ｌ−アルギニン（２，８８ｇ　；　５．Ｏｍｍｏ　１）を−１ ０℃に冷却し、トリエチルアミン（０，６８ｍＬ　；　５、Ｑｍｍｏｌ）および イソブチルクｏｏホルメート（０，７８ｍＬ　；　６．Ｏｍｍｏ　りを順次加え た。２０分間撹拌した後、メチレンクロライド（２０ｍＬ）中のＸＶ−２の溶液 をこの反応混合物に加え、ついでトリエチルアミン（０，６８ｍＬ　：　５．Ｏ ｍｍｏ　］）を加えた。この反応混合物を室温まで戻し、４時間撹拌した。この 物質を油状物となるまで蒸発に供し、ヘキサン中の１０．２ｏおよび３０％の段 階勾配の酢酸エチル（各５００ｍＬ）を用いたフラッシュクロマトグラフィーに 供して２．　５６ｇ　（３３゜７％）のＸＶ−３を得た。
ＤＣＩ　−ＭＳ　ｍ／ｅ　７６０（Ｍ十Ｈ）９０　商Ｚ　ＩＨ巳（ＣＤＣ１３１ ６０−９０Ｉｍ−１！（＋　。
１．０Ｌ−１，９５（ｍ、ｌ０ＨＩ、１．３９　（ｓ、９Ｈ１，２，フ３　Ｉｓ 、０．６ＰＩｌ、２．８３Ｉｓ、　２．４８１．４．００　ＦＩＴＩ、　２Ｈ１ ，４，６２ｆｍ、　Ｅｌ、　５．０８　＋５．２Ｈ１゜５．１２　、＋ｓ、　２ Ｈ１，５，２０Ｉｓ、　２Ｈｌ、　５．５８　Ｉｄ、　ＩＨＩ、　７．２３−７ ．４５　Ｉｍ。
ＬＳＨＩ、９．コ３　（ｓ、２Ｈ１゜ 分析　Ｃ４１Ｈ５３Ｎ５０９に対する 計算値：　Ｃ，６４，８０；Ｈ，７，０３；Ｎ、９．　２２ 実測値：Ｃ，６４，７１：Ｈ，６，８６；Ｎ、９．　１Ｏ Ｎ’、Ｎ’、Ｎ”　−トリベンジルオキシカルボニル−Ｌ−アルギニル−Ｎ′− メチル−Ｌ−ノルロイシン（ＸＶ−４）トリフルオロ酢酸（１０ｍＬ）およびメ チレンクロライド（１０ｍＬ）の混合物に化合物ＸＶ−３（１，１４ｇ；　１゜ ５ｍｍｏ　ｌ）を溶解し、４０分間撹拌した。この物質を油状物となるまで濃縮 し、メチレンクロライド（５０ｍＬ）中に希釈し、水（４Ｈ５０ｍＬ）および飽 和ＮａＣ１（５０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥し、蒸発に供して９４０ ｍｇ（８９％）のＸＶ−４を得た。
Ｄ　ＣＩ　−ＭＳ　ｍ／　ｅ　５５２　（Ｍ−Ｚ−Ｎ２０）ｓｏ　馳ｌＨ陀ＬＣ ＤＣ１３）　６０．８Ｂ　（ｆｆ＋、３Ｈ１−分析　Ｃ３７Ｈ４５Ｎ５０９に対 する 計算値：Ｃ，６３，１４：Ｈ，６，４５；Ｎ、９．９５ ・実測値：　Ｃ，６３，４１；Ｈ，６，３０。
Ｎ、９．　７４ Ｎ’、Ｎ’、Ｎ”−トリベンジルオキシカルボニル−Ｌ−アルギニル−Ｎ１−メ チル−Ｌ−ノルロイシル−Ｌ−アスパラギン酸β−シクロへキシル−α−ブチル エステル（ＸＶ−６）メチレンクロライド（１０ｍＬ）中の化合物ＸＶ−４（９ １０ｍｇ　；　１．３０ｍｍｏ　１）およびＤＭＦ（１ｍＬ）中のＨＯＢｔ　（ ２１３ｍｇ、１．４０ｍｍｏｌ）を併せ、−１０℃に冷却した。メチレンクロラ イド（５ｍＬ）中のＤＣＣ（３１０ｍｇ　；　１．５０ｍｍｏ　１）を５分間か けて滴下した。
この反応混合物を一１０℃で２０分間撹拌した後、室温で２０分間撹拌した。こ の反応混合物にメチレンクロライド（１０ｍＬ）中のアスパラギン酸β−シクロ へキシル−α−ｔｅｒｔ−ブチルエステル（ＸＶ−５）（４３３ｍｇ　；　１． ６０ｍｍｏ＋）をＮ−メチルモルホリン（０，１８ｍＬ　；　１．６０ｍｍｏ＋ ）とともに加え、−晩撹拌した。この反応混合物を油状物となるまで蒸発に供し 、へ牛サン中の１０，２０および３０％の段階勾配の酢酸エチル（各５００ｍＬ ）を用いたフラッシュクロマトグラフィーに供した。生成物画分を集め、蒸発に 供Ｌｒ１．０４ｇ　（８５９６）（７）ＸＶ−６を得た。
ＤＣＩ−ＭＳ　ｍ／ｅ　９５７（Ｍ＋Ｈ＋）９０１Ｇｉ！　１Ｍ　ｍ　＋ＣＤＣ ｌ３１６０．８８　（ｍ、　３ＨＩ、　１．０−２．０ｆｍ、　２０Ｈ１，１４ ７（ｓ、　９Ｈ１，２，６５−２，９０（ｍ、　ＳＨＩ、　３．９１　（ｍ、　 ２Ｈ１゜４．４−４−．８１ｍ、　３Ｎ）、　５．０８　（ｓ、　２Ｈ）、　５ ．１２　（ｓ、　２Ｍ１．５．２０　（ｓ。
２幻、　５．６０　（ｄ、　ＩＨＩ、　６．７３　（ｄ、　ＩＨＩ、　７．２０ −７．４８　（ｍ、　Ｌ５Ｈね分析　Ｃ３ｌＨ６８Ｎ６０１２に対する計算値： Ｃ，６４，００；Ｈ，７，１６゜’　Ｎ、　８．７８ 実測値：Ｃ，６４，４１；Ｈ，７，０７；Ｎ、　８．８７ Ｎ”、Ｎ’、Ｎ”−トリベンジルオキシカルボニル−Ｌ−アルギニル−Ｎ″−メ チル−Ｌ−ノルロイシル−Ｌ−アスパラギン酸β−シクロヘキシルエステル（Ｘ Ｖ−７）メチレンクロライド（１０ｍＬ）とトリフルオロ酢酸（１０ｍＬ）の混 合物に化合物ＸＶ−６（９６０ｍｇ　；　１．００ｍｍｏｌ）を溶解し、室温で ６０分間撹拌した。この物質を油状物となるまで濃縮し、メチレンクロライド（ ５０ｍＬ）中に希釈し、中性となるまで水で洗浄しく４Ｈ５０ｍＬ）、Ｍ　ｇ　 Ｓ　ＯＪ上で乾燥し、蒸発に供して８４０ｍｇ　（９３％）のｘｖ−７を得た。
９０１’１ｌ（ｚ　’ＨＮｌ’ＲｆｃＤｃｌ、１６０．８７　！ｍ、　３Ｈ１， １，０−２，０（ｍ、　２０Ｍ＋、　２．７０−２．９０　（ｍ、　５Ｈ１，１ ，９６Ｉｒｎ、　２Ｈ）、　４．５０−４．８５　ｆｍ。
３！（ｌ　、巨、、り８　ｆｓ、２Ｈ１，５，１４（ｓ、２Ｈ１，５，２０（ｓ 、２Ｈ１，５，７０（ａ。
ＩＨｌ、　５．９５　ｆｄ、　ｉｌｌ、　７．２３−７．４５　ｆｍ、　１５Ｈ １，９，３５（ｂｓ、　２Ｈ１−ソー２−イソプロピル−ヘプタン酸（異性体Ａ ）の固相合成実施例１においてＡｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｓｐ−Ｖａ　］　（ｋ）Ｐｈ ｅ　（（ＩＶ）Ｆ５−ＴＨＰ）の合成に関して先に記載した手法を用い、メチレ ンクロライド中に４０％ＴＦＡおよび１０％アニソールを含有するカクテルで５ 分間処理しついで新たなカクテルで３０分間第２の処理をすることによってＢｏ ｃ−Ｖａ　１　（ｋ）Ｐｈｅ−レジン（０，５０ｇ：０．２５ｒｎｅｑ）からＢ ｏｃ基を除去した。Ｂｏｃ基の除去後、レジンをメチレンクロライドとイソプロ パツールで交互に４回洗浄し、最後にメチレンクロライドで洗浄した（３ｘ）。
これとは別に、トリペプチドＸＶ−７（６７５ｍｇ　；　０．７５ｍｍｏ　１） およびＨＯＢｔ　（１２２ｍｇ：０．８０ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（１ｍＬ）に溶解 し、メチレンクロライド（１０ｍＬ）で希釈し、０°Ｃに冷却した（水浴）、Ｄ ＣＣ（１８６ｍｇ　；　０．９０ｍｍｏ　１）を加え、得られた混合物を０℃で ２５分間撹拌した後、室温で３０分間撹拌した。この溶液をジイソプロピルエチ ルアミン（１４０μｍ　：　０．８０ｍｍｏ　１）とともに上記レジンに加え、 得られた混合物を一晩振盪した。
カイザー試験を用いて、結合は完結したと判定された。このレジンをメチレンク ロライドおよびイソプロパツールで洗浄し、ついで乾燥し、０．６６、の生成物 を得た。
このペプチド−レジンをＨＦ　（１０ｍＬ）中の１０％アニソールにて０℃で９ ０分間処理し、ついでＨＦアニソール混合物を真空蒸留することによって、側鎖 保護基の離脱を伴って、レジンからペプチドを離脱させた。このレジンをエーテ ルで洗浄し、ペプチドを０．　５％ＴＦＡを含有する水中の１５％アセトニトリ ルで抽出した。抽出物の凍結乾燥により粗製ペプチドＡｒｇ−ＮＭｅＮ１ｅ−Ａ ｓｐ−Ｖａ　１　（ｋ）Ｐｈｅ　（（ＩＶ）Ｎ−ＭｅＮｌ　ｅ２Ｆ５−ＴＨＰ） ９２ｍｇを得た。この生成物を０．１％ＴＦＡが存在する水中の１０〜３０％直 線勾配のアセトニトリルを用いたＨＰＬＣにより精製した。純粋化合物を含有す る両分を集め、アセトニトリルＨＰ）の異性体Ａ（純度９８％、０．１％ＴＦＡ を含有する水中の２７％アセトニトリルでに’　＝１．５８）２１ｍｇを得た。
ＦＡＢＳ−ＭＳ　ｍ／ｅ　６６２　（Ｍ十Ｈ＋）分析　ＣＨＮｏ　・２ＣＦ３Ｃ Ｏ２Ｈに対する３２　５１　７　Ｂ 計算値：　Ｃ，４８，６０、Ｈ，６，００。
Ｎ、１１．０２ 実測値：　Ｃ，４８，７０；Ｈ，５，８９；Ｎ、１０．　６３ ４００１＋ｌ１）ｌｚ　ＩＨ−ＮＭＲ（Ｄ２０１６０−７６　Ｉｍ、ＩＦＩＩ　 、０−Ｂ６　（ｍ−６ＨＩ、１．２２　（ｍ、２Ｈ１，１，１１（ｍ、２Ｈ１， １，６４（ｍ、２Ｈ１，１，８０ｆｍ。
ＩＦＩＩ、Ｌ、ＢＢ　（ｒｎ、３Ｈｒ、２．２６　（ｍ、ＩＨＩ、２．６９−２ ．９５　（ｍ、７Ｈ１，１０２ｆ２ｓ、］Ｉ（ｌ、３．１２　ｆｍ、１．２Ｈ１ ，１２２（ｍ、０．８Ｈ１，４，３３（ｍ、　ＩＨＩ。
４．５２　ｆｍ、１Ｍ１．　４．５８　ｆｍ、４Ｈ１，４，８７ｆｍ、０．６Ｈ １，４，９２ｆｍ。
０．４Ｈ１，７，２０−７，：１８　ｆｍ、５Ｈ１、（ｒｌｒｘｉｏｍｅｎｌ　 ）法によりグリニヤール化合物ＸＶＩ−２を調製した。エーテル（２０ｍＬ）中 のマグネシウムターニング（１，１０ｇ　；４５．６ｍｍｏ　１）に１．２−ジ ブロモエタン（２，７０ｇ；１４．４ｍｍｏｌ）を還流を維持する速度で加えた 。得られた混合物をさらに１時間還流させた後、エーテル（１０ｍＬ）中の３− ブロモメチル−４−メチル−１−ペンテン（ＸＶＩ−１）（２，５０ｇ；１４． １ｍｍ。
１）を３０分間かけて滴下した。還流を１時間続け、混合物を室温に冷却した。
注射器によりＸＶＩ−２をＴＨＦ　（３０ｍＬ）中のＸＶＩ−３（３，１８ｇ　 ；　７．　５ｍｍｏ　］）の冷却溶液（０℃）に移した。反応を室温で一晩進行 させた。この物質をジエチルエーテル（３００ｍＬ）と飽和ＮＨ４ＮＨ４Ｃ１（ ３００の間で分配させた。有機層を飽和ＮａＣ１で洗浄しく　２　×２００　ｍ 　Ｌ　）　、Ｍ　ｇ　Ｓ　Ｏ４上で乾燥し、ろ過し、蒸発に供した。この物質を 四塩化炭素およびメチレンクロライドを溶出剤（０％、２５％、５０％、７５％ 、１００％メチレンクロライド）とする段階勾配を用いたフィルター−パッドク ロマトグラフィーにより精製した。生成物画分を併せ、蒸発に供して１．２６ｇ 　（３８，３％）のＸＶ　Ｉ　−４を透明シロップとして得た。
ＤＣＩ−ＭＳ　ｍ／ｅ　４４０　（Ｍ＋Ｈ＋）９０　化ＩＦＩ　ＮＭｌ’Ｌ　（ ＣＤＣＩ３１６０．６５−１．０５　（ｍ、　９ｉ（１゜１．１４　［ｄｄ、　 ３Ｈ）、　１．２３−１．６８　（ｍ、　２！（ｌ、　Ｌ、８０−２．４５　ｃ ｍ、　３Ｈ）。
３．１Ｂ　Ｉａ’ｄ、　ｌ）！＋、　３．４３　（ｄａ、　ＩＨＩ、　４．７７ −５−１２　＋ｍ、　２Ｈ）。
５．２０−５．’７２　（ｍ、　１１（１，７，１Ｂ−７，６５（ｍ、　Ｌ５Ｈ １゜２２．５　聞ｚ　ＣＮ？Ｑ　ｆ　ＣＤＣ１：ｌ　ｌ　６１７−４６．１８− ２８　。
１Ｂ、８２．１９．Ｌ４．１９．２５．１９．９８．２０．２Ｂ、　２０．７７ 、３０．１４．１１．２２゜３１．４４．３２．３５４３．２０．４３．１９． ４４．２Ｂ、　６５．５２．７０．７２．７０．８２゜１１５．１９．　ＬＬＳ 、９５．　Ｌ２６．３０．１２７．６５．１２８．９０．１２９．１７．　Ｌ１ ２．６５゜１３９．２５．　Ｌ４６．６７、２ｉ０．４３．２１１．０８゜分析 　Ｃ３１Ｈ３７Ｎ　Ｏ・　０．２ＣＨＣ１３に対する計算値：Ｃ，８０，９０、 Ｈ，８，０９；Ｎ、３．０２ 実ＩＩ値：　Ｃ，８０，８４、Ｈ，７，８６。
Ｎ、３．　０３ ７−メチル−５−ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノ−３−イソプロピル −１−オクテン−５、ｔ　ン（ＸＶ　Ｉ　−５）化合物ＸＶＩ　−４（１，２０ ｇ　；２．７３ｍｍｏ　１）をアセトニトリル（１５ｍＬ）に溶解し、ｐ−トル エンスルホン酸−水和物（８６０ｍｇ　；４．５ｍｍｏ　１）で処理したＯ得ら れた溶液を２時間撹拌した。トシル塩が析出しなかったので、この混合物を油状 物となるまで真空下で濃縮した。これをメチレンクロライド（２０ｍＬ）に溶解 し、ジーｔｅｒｔ−プチルジカーボネート（１，３０ｇ　；　６．Ｏｍｍｏ　１ ）で、ついてトリエチルアミン（０，８４ｍＬ　；　６．Ｏｍｍｏ　１）で処理 した。この反応混合物を一晩撹拌し、ついで黄色油状物となるまで蒸発に供した 。四塩化炭素およびメチレンクロライドの段階勾配（０％、２５％、５０％、７ ５％・　１００％メチレンクロライド）を用いたフィルター−ノぐラドクロマト グラフィーを用いて５８９ｇ　（７２％）のＸＶＩ−５を透明シロップとして得 た。
ＤＣＩ　−ＭＳ　ｍ／ｅ　２９８　（Ｍ＋Ｈ）９０　ＫＡｚ　ＩＨＮＭＩＲｆｃ Ｄｃｌコｌ　６　０−６３−Ｌ−００１ｍ、　１２Ｆｌｌ　。
１．２３−ｉ、５９　（ｍ、　２Ｈ）、　１−４０　Ｉｓ、　９Ｈｊ、　２．０ ８　（ｍ、　ＬＨＩ、　２．４７　（！Ｔｌ。
２Ｈ１，４，’ｈ６　（ｒｈ、　ＩＨ）、　４．７８−５．Ｌ５　（ｍ、　３ｋ Ｂ、　５．３２−５．ＩＢ　ｆｎ、　Ｌ！（１２２，５＋（’、ｚ　ＣＩＪＴ９ 　ｔｃＤｃ１３１　６　１６．４９．　１６．５ｓ。
Ｌ！！、５５．　Ｌ８．８７．１９．９０．２０．ＯＬ、　２０，２１１．２８ ．２４．２９．８１．３０．０１゜３Ｌ２２．３１．３３．４３．１４．４３． ５８．４４．８Ｂ、　４５．２６．６３．６７、６４．４３゜７９．４９．　ｉ ｉ６．２２．１３８．６０．１１１１．８１．１５５．８２．２０８．４８．２ ０１＋、８６゜分析　Ｃ１７Ｈ３１ＮＯ３に対する 計算値ＩＣ，６８，６５；Ｈ，１０，５１。
Ｎ、４．７１ 実測値：Ｃ，６８，３８；Ｈ，１０，５８；Ｎ、４．６９ 水（１０ｍＬ）中メタ過ヨウ素酸ナトリウム（２，８０ｇ。
１Ｂ、Ｏｍｍｏｌ）を含有する溶液のアリコート（３ｍＬ）を用いてＲｕＯ−ｘ ＨＯ（３ｍｇ、５９．３％Ｒｕ）を溶解した。上記メタ過ヨウ素酸塩溶液の第２ のアリコート（３ｍＬ）をアセトン（２０ｍＬ）中の化合物ＸＶＩ−５（４８６ ｍｇ、１．６３ｍｍｏ　＋）の溶液に加え、得られた混合物を室温で撹拌した。
この反応混合物に上記ルテニウム−メタ過ヨウ素酸塩溶液を５分間かけて滴下し た。残りの過ヨウ素酸塩溶液を１０分間かけて滴下し、この反応混合物を−晩撹 拌した。この反応混合物にイソプロピルアルコール（３ｍＬ）を加え、その混合 物を１時間撹拌した。この反応混合物をセライトを通してろ過し、セライトをア セトンで洗浄した。真空下でアセトンを部分的に除去し、残渣を飽和ＮａｃＩ　 （１００ｍＬ）に懸濁させ、メチレンクロライドで抽出した（３Ｘ７５ｍＬ）、 併せた抽出物を飽和ＮａＣ１（１００ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥し、 蒸発に供した４メチレンクロライド中の３％メタノールを用いたフィルター一パ ・１ドクロマトグラフイーにより４５８ｇ　（８９％）のＸＶｌ−６を油状淡紫 色固体として得た。
ＤＣＩ　−ＭＳ　ｍ／ｅ　３１６　（Ｍ十Ｈ＋）９０　ＫＨ２１ＨＮ？４１Ｒ（ ＣＤＣＩ３１６０．５Ｏ−０−９Ｂ　Ｉｍ−１２）！ｌ。
ｌｊ４　Ｉｓ、　９Ｈ１，２，０２ｆｍ、　２Ｈ１，２，４５（ｍ、　ＩＨＩ、 　２．７２　Ｔｍ、　２Ｂ＋。
４．２０　ｆｍ、　ｌ）！１．５．１６　（Ｊ　ＩＨＩ、　８．７２　（ｂｓ、 　１８１゜２２．５　ｒｃｄｚ　Ｃｋｎ伝ｆｃＤｃ１３１６１６．２２．１６． ７０゜１９．３０．１９．６］、　１９．７９’、　２０．０６．２８．Ｌ４． ２９．６０．２９．９２．３８．１６゜３Ｂ、９７．４５．４７．４５．９１． ６３．５１．６４．１１，７９．６５．．１５６．０４゜計算値：Ｃ，６０，９ ３，Ｈ，９，２７；Ｎ、４．４４ 実測値ＩＣ，６０，３９，Ｈ，９，３３；Ｎ、　４．４６ ローメチル−５（Ｓ）−ｔｅｒｔ−プチルオ牛ジカルボニルアミノ−４−オキソ −２−イソプロピル−ヘプタン酸のメリフィールドクロロメチルレジンへの結合 （ＸＶＩ−７＞実施例１においてＡｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｓｐ−Ｖａ　１　（ｋ）＋ 　Ｐｈｅ　（ＩＶ）Ｆ５−ＴＨＰ）の合成に関し先に記載した手法を用いて、ケ トメチレンサブユニットＢｏｃ−Ｖａｔ　（ｋ）Ｖａ　１−ＯＨ（ＸＶＩ−６， ４２５ｍｇ　：　１．３５ｍｍｏ　１）および炭酸水素セシウム（２８１ｍｇ、 １．４５ｍｍｏｌ）を無水メタノール（２５ｍＬ）中で一晩混合した。この混合 物を蒸発に供し、得られた固体をＤＭＦ　（２５ｍＬ）に溶解した。メリフィー ルドクロロメチルレジン（２，６２ｇ；２゜６２ｍｍｏ　ｌ＠１ｍｅｑ／ｇレジ ン）を加え、この懸濁物をアルゴン下、５０℃で４８時間撹拌した。ＤＭＦを用 いたＴＬＣにより、ケトメチレンＸＶＩ−６の残存は示されなかった。レジンを メチレンクロライド、メタノールおよびイソプロパツールで多数回洗浄し、つい で乾燥し、２．　８９ｇ　（約０．４７ｍｅｑ／ｇ）のＸＶ　Ｉ　−７を得た。
キラー２−インプロピル−へブタン酸（異性体Ａおよび異性体Ｂ）の固相合成 実施例１においてＡｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｓｐ−Ｖａ　１　（ｋ）Ｐｈｅ　（（ＩＶ ）Ｆ５−ＴＨＰ）の合成に関して先に記載した手法を用い、メチレンクロライド 中に４０％ＴＦＡおよび１０％アニソールを含有するカクテルで５分間処理し、 ついで新たなカクテルで３０分間第２の処理をすることによってレジンＸＶＩ　 −７（１，０ｇ；０．３３ｍｅｑ）からＢｏｃ基を除去した。Ｂｏｃ基の除去後 、レジンをメチレンクロライドとイソプロパツールで交互に３回洗浄し、最後に メチレンクロライドで洗浄した（３回）。これとは別に、トリペプチドＸＶＩ− ８（実施例１５のＸＶ−７）（３３３ｍｇ　；　０゜３７ｍｍｏｌ）およびＨＯ Ｂｔ　（５７ｍｇ；０．３７ｍｍ。
りをＤＭＦ（２ｍＬ）に溶解し、メチレンクロライド（４ｍＬ）で希釈し、０℃ に冷却した（水浴）。メチレンクロライド（２ｍＬ）中のＤＣＣ（８４ｍｇ　； 　０．４１ｍｍｏ　１）を加え、得られた混合物を０°Ｃで１０分間撹拌した後 、室温で２０分間撹拌した。この溶液をジイソプロピルエチルアミン（６５μｌ 　；０．３７ｍｍｏｌ）とともに上記レジンに加え、得られた混合物を一晩振盪 した。トリペプチドＸＶＩ−８（１１０ｍｇ；０．１２ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ　 （１９ｍｇ；０．１２ｍｍｏ　１）及びＤＣＣ（２８ｍｇ；０．１４ｍｍ。
ｌ）を併せ、追加の活性化ＸＶＩ−９を生成した。この溶液をレジンに加え、そ の反応混合物を２日間振盪した。ペプチド−レジンをメチレンクロライド（２回 ）、イソプロパツール（２回）および最後にメチレンクロライド（２回）で洗浄 し、１．３１７ｇの生成物を得た。このペプチド−レジンをＨＦ　（１２ｍＬ） 中の１０％アニソールにて０℃で１時間間処理し、ついでＨＦ／アニソール混合 物を真空留去することによって、側鎖保護基の同時除去を伴ってレジンからペプ チドを離脱させた。このレジンをエーテルで洗浄し、ペプチドを５０％酢酸（５ ０ｍＬ）で抽出した。抽出物を凍結乾燥し、粗製ペプチドＡｒｇ−ＮＭｅＮ１ｅ −Ａｓｐ−Ｖａｌ　（ｋ）Ｖａ　１　（（ＩＶ）Ｎ−ＭｅＮｌ　ｅ２Ｖ５−ＴＨ Ｐ）２５５ｍｇを得た。この生成物を０．　１％ＴＦＡが存在する水中の１６〜 ２７％直線勾配のアセトニトリルを用いたＨＰＬＣにより精製した。純粋化合物 を含有する画分を集め、アセトニド−ＴＨＰ）の異性体Ａ（純度９８％、０．　 １％ＴＦＡを含有する水中の２５％アセトニトリルでに’−０．６３）５４゜６ ｍｇ、およびＡｒｇ−ＮＭｅＮｌ　ｅ−Ａｓｐ−Ｖａ　Ｉ　（ｋ）Ｖａ　１　（ （ＩＶ）Ｎ−ＭｅＮｌ　ｅ２Ｆ５−ＴＨＰ）の異性体Ｂ（純度９５％、０．１％ ＴＦＡを含有する水中の２５％アセトニトリルでに’−１，５２）４１．１ｍｇ を得た。
３Ｐ！１．０．９１　Ｉｍ、　９Ｈ１，１，２０（ｍ、　２Ｈ１，１，３１（ｍ 、　２Ｈ）、　１．６６１ｒｎ。
２Ｈ１，１，７０−１，９７ｆｍ、　ＳＨＩ、　２．６０　ｆｍ、　１）１１． ２．８０　（ｍ、　２Ｈ１゜２．８６　Ｉｍ、　１８）、　３．００　（ｍ、　 ＩＨ）、　３．０２　Ｉｓ、　２Ｂ）、　３．０５　Ｉｓ、　１）！ｌ。
３．２３　（ｍ、　２Ｈ１，４，４２（ｄ、　０．３）１１．４．４５　（ｄ、 　０．７）！１．４．５６　ｆｔ。
０ｊＨ１，４，６０ｆｔ、　０．７Ｈ１，４，７４ｆｄｄ、　１Ｍ１．４．９３ 　（ｄｄ、　ＩＨＩ。
２８．６４．３０．３９．３０．１４．３２．１６．３６．５６．４１．００． ４１．０４．４７・５９゜４７．６６、　５１．３９．　５１．り９．　５８． ６Ｆｉ、６４．７４．　ｌ５７．８６．　１７１．１１゜１７１．７６、１７３ ．４２．　１７：１．５０．１７５．０１．　ｌ７５．０７．　１８０・６６・ ４００　ｍ１ｇ−ＮＭＲ（Ｄ２Ｑｌ　６　ｏ、ｓｏ　（ｄ、３）り、０−８８　 （”−３Ｈ＋、　０．９１　＋ｍ、９）！１．１．２５　（ｍ、　２Ｈ１，１３ ２ｆｍ、　２）！１．１．６７　（ｍ。
２ＨＩ、　１．８０　ｆｍ、ＩＨＩ、　１９２　ｆｍ、４Ｈ１，２，３４ｆｍ、 　ＩＨＩ、２．６２　Ｉｒｏ。
ＩＨＩ、２．７６　（ｄｅｌ、ＩＨ）、２．７９　ｆｄｄ、ＩＨＩ、２．８５　 （ｍ、ＩＪ（＋、コ・０３（ｍ、　１８１．　］−０６（ｓ、：ｌＨｌ、３．２ ３　（ｔ、　２）ｆ）、４．４９　＋ａ、ＩＨＩ、　４．５６ＩＦ−、ＩＨＩ、 ４．１３　Ｉｄｄ、　ＬＨＩ、４．９１　ｆｄｃ！、１ＨＩ。
１００１−訛　ＣＮ？−口（Ｄ、、０１６１４ｊＬ　１７．４２．２０．１７゜ ２０．２４．２０．６Ｌ、２２．８６．２４．５３．　２８．２５．　２Ｂ、４ ５．　２８．７４．　３０゜５１゜３０、ＢＳ、　３２．６７、３７．Ｌ４．４ １．６２．　４７．６６、　４７．７２．５１．７２．５Ｌ８５゜５９．４１． 　６４．７４．　１７１．１７．　１７３．３３．　ｌ１３．５３．　１７５・ ７７、　１８０・６２・実施例　１７ Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｓｐ　（ｋ）Ａｌａ−Ｐｈｅエントレインメント法によりグ リニヤール化合物ＸＶＩＩ−２を調製した。エーテル（２０ｍＬ）中のマグネシ ウムターニング（１，３０ｇ　；　５４．Ｏｍｍｏ　１）に１，２−ノブロモエ タン（３，４ｇ　：１８．Ｏｍｍｏ　１）を還流を維持する速度で加えた。得ら れた混合物をさらに１時間還流させた後、エーテル（１ ０ｍＬ）中の１−ブロモ−２−メチル−３−ブテン（ＸＶＩＩ−１；　２．７０ ｇ　；　１８．Ｑｍｍｏ　Ｉ）を３０分間かけて滴下した。還流を１時間続け、 混合物を室温に冷却した。注射器により、グリニヤール化合物をＴＨＦ　（３０ ｍＬ）中のＸＶＩ　Ｉ　−３（３，３０ｇ　；６．Ｏｍｍｏｌ）の冷却（０℃） 溶液に移した。０℃で２時間撹拌した後、反応混合物を飽和ＮＨ４Ｃｌとジエチ ルエーテル（各４００ｍＬ）の二層混合物中に注いだ。有機層を飽和ＮａＣ１で 洗浄しく２Ｘ２００ｍ　Ｌ　）　、Ｍ　ｇ　Ｓ　０４上で乾燥し、ろ過し、蒸発 に供して粗製物を得た。この物質をヘキサン中１５％酢酸エチルを溶出剤として 用いたフラッシュクロマトグラフィーにより精製して２．６８ｇ　（８８％）の ＸＶＩＩ−４を淡黄色シロップとして得た。
ＤＣＩ−ＭＳ　ｍ／ｅ　５１０（Ｍ＋Ｈ＋）９０　Ｉ’ＪＩｚ　ＩＨＥＬＣＤＣ １３１６０Ｊ２　（ｍ、３ＨＬ　１．：ｔｏ−２，ｉ。
ｆｍ、ＩＩＨＩ、２．支５−２．７２　ｆｍ、４Ｈ１，３，６０ｆｄ、　ＬＨＩ 、１．６５　（ｍ、ＩＨＩ。
５．７０−６．０５　（ｍ、　３Ｆｆｌ、　４．６３　（ｍ、　ＩＫＩ、　７． １８−７．６５　（ｒｎ、　１５Ｈ＋。
２２．５旧２　Ｃ當（ＣＤＣ１〕ｌ　６１４−０）、　Ｌ９−１４゜１９ｊＱ、 　２２．５６．２３．５Ｂ、　２５．２６．３１４９．３１．９］、　３９．０ ３．４３．４１゜４６．２３．　５９．０１．　５９．１２．　７１．２６．　 ７コ、０５．　１１２．４３．　ｌ１２．６ｓ。
１２６．４６．１２６．８４．１２７．２７．１２７．８２．１２８．８４．１ ２９．６０．１４２．９３゜１４４．１！：ｌ、　１４６．１３．１７０．５１ ．２０９．４６゜分析　Ｃ３４Ｈ３９ＮＯ３・０．１５ＣＨＣ１３に対する計算 値：Ｃ，７７，７４；Ｈ，７，４８；Ｎ、２．６５ 実測値：Ｃ，７７，７４，Ｈ７，５０；Ｎ、２．　７０ シクロヘキシル　３−ｔｅｒｔ−プチルオキシカルボニルア化合物ＸＶＩ　Ｉ− ４（２，２４ｇ　；４．４ｍｍｏ　１）をジエチルエーテル（３０ｍＬ）に溶解 し、ｐ−トルエンスルホン酸−水和物（８６０ｍｇ；４．５ｍｒｎｏ＋）で処理 した。
得られた溶液を３時間撹拌した。析出した塩をろ過し、白色固体をメチレンクロ ライド（４０ｍＬ）に懸濁させた。この反応混合物にジーｔｅｒｔ−ブチルジカ ーボネート（１，９５ｇ　；　８．８ｍｍｏ　１）を加え、ついでトリエチルア ミン（１，２２ｍＬ：８．８ｍｍｏＩ）を加えた。コノ反応混合物を４時間撹拌 し、ついで黄色油状物となるまで蒸発に供した。四塩化炭素およびメチレンクロ ライドの段階勾配（０％、２５％、５０％、７５％、１００％メチレンクロライ ド）を用いたフィルター−パッドクロマトグラフィーを用いて１゜３６ｇ（８４ ％）のＸＶＩＩ−５を透明ンロ・ンプとして得た。
ＤＣＩ　−ＭＳ　ｍ／ｅ　３６８　（Ｍ＋Ｈ）９０１−訛ＩＨ票＋ｃｐｃ１〕ｌ 　ｏ　ＯＪＬ　ｔｄ２３Ｈ１−１，０２−Ｌ、８］　（ｍ、　ＩＩＨＩ、　１３ ４　（ｓ、９ｉ（１，２，５１＋ｍ、　２Ｈ１，２，７Ｌ　ｆｍ。
２Ｈ１，４，３０（ｍ、　１）（１，４，６３Ｆｍ、　１）ｉｌ、　４．７０− ４．９８　＋ｍ、　２Ｈ１゜５．４８−５．８４　（ｍ、２８１゜ ２２．５　Ｋ−１ｚ　ＣＮＫ”ｔ　ｆｃＤｃ１３１６１９．５２．２３．５３． ２５．Ｌ６゜２Ｂ、１９．　’３１．３３．３２．５８．３５．８３．４５．１ １．４５．４７．５６．０４．１３．３１゜７９．９３．　ｉｌ２．９７．１４ ２．６１．１５５．Ｄ、　ｌ７０．６１，２０７．０７゜分析　Ｃ２ｏＨ３３Ｎ ○５に対する 計算値・Ｃ，６５，３７，Ｈ，９，０５；Ｎ、３．８１ 実測値：（，６５，４５，Ｈ，９，２５；Ｎ、３．８９ １−〇−シクロへキシル−３−ｔｅｒｔ−ブチルオキシカル水（２０ｍＬ）中メ タ過ヨウ素酸ナトリウム（５，８５ｇ。
２７．２ｍｍｏ　１）を含有する溶液のアリコート（５ｍＬ）を用いてＲｕｏ　 −ｘＨ２Ｏ（６ｍｇ、５９．３％Ｒｕ）を溶解した。上記メタ過ヨウ素酸塩溶液 の第２のアリコート（５ｍＬ）をアセトン（４０ｍＬ）中のＸＶＩ　Ｉ−５（１ ゜２４ｇ　；　３．４ｍｍｏ　］）の溶液に加え、得られた混合物を室温で撹拌 した。このルテニウム−メタ過ヨウ素酸塩溶液を１０分間かけて滴下した。残り の過ヨウ素酸塩溶液を１０分間かけて滴下し、この反応混合物を４時間撹拌した 。この反応混合物にイソプロピルアルコール（５ｍＬ）を加え、反応混合物をさ らに３時間撹拌した。この反応混合物をセライトを通してろ過し、セライトをア セトンで洗浄した。真空下でアセトンを部分的に除去し、残渣を飽和ＮａＣ１（ １００ｍＬ）に懸濁させ、メチレンクロライドで抽出した（３Ｘ１００ｍＬ）　 。併せた抽出物を飽和ＮａＣｌ　（１００ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥 し、蒸発に供しテ１．　３０ｇ　（１００％）のＸＶＩＩ−６を固体として得た 。
ＤＣＩ　−ＭＳ　ｍ／ｅ　３８６（Ｍ＋Ｈ）９０　ｔｃｒ４ｚ　ＩＨＩｆＭＩＲ ＬＣＤＣｌコｌ　６　１−１８　［（１，３Ｈ）、　１．２２０−１−９３Ｉ、 １０Ｍ）、１．４０１ｓ、９Ｈ）、２．５３−３．１８１ｍ、５Ｈ）。
４．４２　ｆｍ、　ＩＨＩ、　４．７０　（ｍ、　ＩＨＩ、　５．６８　（ｄ、 　ＩＨＩ、　１０．２８　（ｂｓ、ＩＨＩ。
２２．５旧ｚＣｍ伝＋ＣＤＣｌ３１６１６．７０．２３．４Ｂ、　２５．１０゜ ２１１、ＯＢ、　３１．２Ｂ、　３４ｊｌ、　１５．７８．４１．８４．５５． ８２．７３．４Ｂ、　８０．０９゜１５５４９、　ｉ７０．４５．１７０．７８ ．　’Ｊ、８０．５３．２０６．２１．２０６．４ｇ。
分析　Ｃｌ９Ｈ３１ＮＯ７に対する 計算値：Ｃ，５９，２０；Ｈ，ｓ、１１；Ｎ、３．　６３ 実測値：Ｃ，５９，３９；Ｈ，８，１６；Ｎ、３．　７５ ル］−Ｌ−フェニルアラニン（異性体Ａおよび異性体Ｂ）の固相合成 Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−フェニルアラニン−レジン（１，６２ｇ：１．０８ｍｍｏ　１ ＠０．６７ｍｅｑ／ｇ）をメチレンクロライド中に４０％ＴＦＡおよび１０％ア ニソールを含むカクテルで５分間処理し、ついでカクテルの第２の部分で３０分 間処理した。レジンからＢｏｃ基を除去する間に、ケトメチレンＸＶＩ　Ｉ−６ （３８７ｍｇ　；　１．Ｏｍｍｏ　１）　、ｉｔ水素化ＤＭＦ（１ｍＬ）中のＨ ＯＢ　ｔ　（１５８ｍｇ　：　１．０ｍｍ。
ｌ）およびＤＣＣ（２２７ｍｇ　：　１．１ｍｍｏ　１）をメチレンクロライド 中で併せ、０℃で２０分間、ついで室温で２０分間撹拌した。レジンをメチレン クロライドおよびイソプロパツールで交互に洗浄しく３×）、メチレンクロライ ド中１０％ＤＩＥＡで中和しく２Ｘ）％メチレンクロライドで洗浄した（３Ｘ） 。ＸＶＩＩ−６の活性化エステルをレジンに加え、反応容器を４日間振盪した。
このレジンを無水酢酸（２ｍＬ）およびピリジン（０，５ｍＬ）で１時間処理し た。結合は完結したと判定された（カイザー試験）。上記のようにレジンからＢ ｏｃ基を除去した。これとは別に、ジペプチドα　δ　ω Ｎ　、　Ｎ　、　Ｎ　−２３−Ｌ−Ａｒｇ−Ｎ　−Ｚ−Ｌ−ｔｙｓ−ＯＨ（実施 例１１のＸＩ’−４）（１，１３ｇ；１．４ｍｍｏ＋）およびＨＯＢｔ　（２１ ０ｍｇ　；　１．４ｍｍｏ　１）をＤＭＦ　（１０ｍＬ）に溶解し、反応混合物 にＤＣＣ（３１０ｍｇ　；　１．４９ｍｍｏ　１）を加えながら、０℃で撹拌し た。
この反応混合物を０℃で１５分間撹拌した後、室温で３０分間撹拌した。活性化 ジペプチドＸＶＩＩ−８の添加直前に、レジンをメチレンクロライド中５％ＤＩ ＥＡ洗液で中和しく２Ｘ）、ついでメチレンクロライド洗浄（３×）した。−晩 にわたる結合反応後、反応は完結したと判定された（カイザー試験）。レジンを ＤＭＦ　（２Ｘ）　、メチレンクロライド（２ｘ）およびイソプロピルアルコー ル（２×）で洗浄し、真空下で乾燥してペプチド−レジン（ＸＶＩ　ｌ−９）２ ．４１ｇを得た。このペプチド−レジン（１，２１ｇ：０．５ｍｍｏ　１）をＨ Ｆ　（１２ｍＬ）中の１０％アニソールにて０℃で１時間間処理し、ついでＨＦ ／アニソール混合物を真空留去することによって、側鎖保護基の離脱を伴って、 レジンからペプチドを離脱させた。このレジンをエーテルで洗浄し、０．５％Ｔ ＦＡを含有する水中の１０％アセトニトリルで抽Ｐ）３９６ｍｇを得た（７８％ 理論）。Ｏ１１％ＴＦＡが存在する水中の０〜２０％直線勾配のアセトニトリル を用いたＨＰＬＣにより異性体を分離した。対象の画分を集め、アセの異性体Ａ （純度９９％、１７％アセトニトリルでに’　−０゜７７）６４ｍｇ、およびＡ ｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｓｐ　（ｋ）Ａｔａ−Ｐｈｅ　（（Ｉ　Ｉ　Ｉ）Ａ’　Ｆ５− ＴＨＰ）の異性体Ｂ（純度９５％、１７％アセトニトリルでに’　＝１．５８） ７９ｍ１．５ａ−１７６（７＋、　４Ｈｌ、　’＝、８２　（ｍ、　２Ｈ１，１ ９３（ｍ、　２７（＋、　２．５９　！ｃｌｄ。
１Ｍ１．２．７０　ｆａｄ、　ＩＨＩ、　２．７６　（ｄｄ、　１Ｍ＋、　２． ８１　（ｍ、２Ｈ１，２，９１ｆａｄ、ＩＨＩ、２．９９　ｆｔ、２Ｈ）、３． ０４　＋ｄｄ、１）１１．　：１．２１　Ｉｔ、２Ｈ）、３．２３ｆｄｄ、ＩＨ ）、４．０７　ｆｔ、ＩＨＩ、４．３７　（セ、ＬＨ＋、４．５４　Ｔｃ１ｄ、 １Ｍ＋、４．６４（ｄａ、ＩＭ）、７．２８−７．４２　Ｉｍ、５ＨＬ１３Ｃづ Ｃ−区　（Ｄ２０１　ｄ　１７．７６、　２コ、Ｑ７．　２４．４１．　２７． ３４゜２９．０８．　：１１．３７．３５．４２．１６．２９．３７．６９．４ ０．１０．４１．３Ｅｌ、　４３．０５゜５１４４、５４．６２．５５．２５． 　５６．６６、１２８．０２．１２９．６３．１３０．２３゜０７．７３．１５ ７．６９．１７０ｊ４．１７４．０９．１７５．４Ｂ、　１７６ｊ０．１７９． ０１゜分析　Ｃ２９Ｈ４６Ｎ８０８・３ＣＦ３ＣＯ２Ｈφ　０．５Ｈ２０に対す る　゛ 計算値：Ｃ，４２，６４；Ｈ，５，１１；Ｎ、１１．３６；Ｆ、１７．３４ 実測値：　Ｃ，４２，５５；Ｈ，４，７４。
Ｎ、１１．３７；Ｆ、１７．３３ １１７．７Ｂ、　ＩＳ７．７Ｌ、　１７０．３１．１７４．０３．１７５．４６ ．１７６．１５．１７８．８９゜分析　Ｃ２９Ｈ４６Ｎ８０８・３ＣＦ３Ｃｏ２ Ｈ・０ｊ３Ｎ−ＡＣ−Ｐｈｅに対する 計算値：Ｃ，４４，３９；Ｈ，５，１４゜Ｎ、１１．１６．Ｆ、１６．３６ 実測値：Ｃ，４４，３６；Ｈ，５，０８゜Ｎ、１０．８２；Ｆ、１６．３６ （（Ｉ　Ｉ　Ｉ）Ｎ−ＭｅＫ’　Ｆ’−ＴＨＰ）の調製グリエコ（Ｇｒｉｓｃｏ ）およびバーサス（Ｂ！ｈｓｓｓ）の手法（Ｊ。
Ｏｒｇ、Ｃｈｅｍ、１９８７，５２．５７４６）に従（１、水（２５ｍＬ）中の ＮＥ−（２−クロロベンジルオキシカルボニル）−Ｌ−リジンメチルエステル塩 酸塩（ＸＶＩＩＩ−１’　）（１４，５９ｇ　；４０．Ｏｍｍｏ　１）に３７％ ホルムアルデヒド（玉　６ｍＬ　；４５．Ｏｍｍｏ　＋）を加えた。シクロベン タジｘン（ＸＶ　Ｉ　Ｉ　Ｉ−２’　）（１５ｍＬ　；　１８３゜０ｍｍｏｌ） を聖人させながら、この溶液を撹拌した。得られた二層混合物を激しく２時間撹 拌した。水性物質を水（５ＯｍＬ）で希釈し、ヘキサンで抽出しく２Ｘ５０ｍＬ ）　、ついで固体炭酸水素ナトリウムで中和し、メチレンクロライドで抽出した （２Ｘ１００ｍＬ）。有機抽出物を飽和ＮａＣｌで洗浄しく　２　Ｘ　１００　 ｍ　Ｌ　）　、Ｍ　ｇ　Ｓ　ＯＪ上で乾燥し、ろ過し、蒸発に供して粗製物を得 た。メチレンクロライド中２％メタノールを溶出剤として用いたシリカ上での精 製により、１４、　７ｇ　（９０％）　＜７）ＸＶＩ　Ｉ　Ｉ　−３°オヨびＸ ＶＩＩＩ−４°を黄色油状物として得た。これを直接使用した。
メチル　Ｎ’−ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル−Ｎ’−メチル−Ｎ’　−（ ２−クロロベンジルオキシカルボニル）−Ｌ−シラン（ＸＶＩ　Ｉ　Ｉ−６’　 ）化合物ＸＶ　Ｉ　Ｉ　Ｉ　−３’　オヨびＸＶ［Ｉ−４’　（８，００ｇ　； 　１９．７ｍｍｏ　ｌ）をトリフルオロ酢酸とクロロホルムの混合物（１；１混 合物２００ｍＬ）に溶解した。トリエチルシラン（１０，０ｍＬ　Ｈ６２，Ｏｍ ｍｏ　ｌ）を加え、反応混合物をアルゴン下、室温で１８時間撹拌した。この物 質を油状残渣となるまで濃縮し、ついでＯ，ＩＮ　ＨＣＩ　（１００ｍＬ）に入 れ、ヘキサンで洗浄した（２Ｘ５０ｍＬ）。
水性層を固体炭酸水素ナトリウムで中和し、メチレンクロライドで抽出した（３ Ｘ１００ｍＬ）。有機抽出部分を飽和Ｎａ　ＨＣＯ３（１００ｍ　Ｌ　）および 飽和ＮａＣ１（２Ｘ１００ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥し、蒸発に供し て４゜３ｇの粗製アミンＸＶＩ　Ｉ　１−５’　を得た。このアミンをメチレン クロライド（５０ｍＬ）に溶解し、ジｔｅｒｔ−ブチルジカーボネート（４，８ ０ｇ　；　２２．Ｏｍｍｏ　ｌ）で処理した。４時間撹拌後、反応混合物を油状 物となるまで蒸発に供し、四塩化炭素およびメチレンクロライドの段階勾配を溶 出剤（０％、２５％、５０％、７５％、１００％メチレンクロライド）として用 いたフィルター−パッドクロマトグラフィーに供した。生成物画分を併せ、蒸発 に供して４．６９ｇ（５４％）のＸＶＩＩＩ−６’　を透明シロップとして得た 。
ＤＣＩ−ＭＳ　ｍ／ｅ　４４３　（Ｍ＋Ｈ”　）９０　ＭＩＨｚ　ＩＨ−Ｙ＋Ｇ 　（ＣＤＣＩコｌ　６　１．１０−２．１５　Ｔｍ、６Ｈ１，１，４０Ｉｓ、　 ９Ｈ１，２，７９（ｓ、　ＩＨＩ、　３．２２　（ｍ、　２Ｈ）、　３．６８　 Ｉｓ、　３ＨＩ、　４．３２ｆｍ、　０．５Ｈ１，４，７６（ｍ、　Ｏ，ＳＨｌ 、　５．００　（ｍ、　ＩＨＩ、　５．２０　（ｓ、　２Ｈ１゜分析　Ｃ２１Ｈ ３１Ｎ２０６　Ｃ１に対する計算値：Ｃ，５６，９４，Ｈ，７，０５；Ｎ、６． ３２；Ｃ１，ｓ、ｏ。
実測値：　Ｃ，５６，６６、Ｈ，７，０４；Ｎ、６．２１　、ＣＩ、７．５４ Ｎ’−ｔｅｒｔ−プチルオキシ力ルボニルーＮ’−メチル−化合物ＸＶＩ　Ｉ　 Ｉ−６’　（４，４２ｇ　；　１０．Ｏｍｍｏ　ｌ）をメタノール（１００ｍＬ ）に溶解し、０℃に冷却した（水浴）。この混合物に、ＩＮ　ＮａＯＨの溶液（ １５ｍＬ　；　１５ｍｍｏｌ）を加えた。この反応混合物を０℃で２時間撹拌し た後、室温で一晩撹拌した。この反応混合物を油状物となるまで濃縮し、水冷０ ．１Ｎ　ＨＣ１（１００ｍＬ）とメチレンクロライド（１００ｍＬ）の混合物で 処理した。水性層を追加のメチレンクロライドで抽出しく２Ｘ１００ｍＬ）、併 せた有機抽出物を飽和ＮａＣ］　（１００ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥 し、蒸発に供して４．２６ｇ　（９２，２％）のＸＶＩＩＩ−７’　を透明油状 物として得た。
トリメチルンリル化ＤＣＩ　−ＭＳ　ｍ／ｅ　４５１　（Ｍ＋Ｈ＋） ９０１ＸＺ　ＬＨ−メツｆｃＤｃ１３１６　ＬＩＯ−１９５＋ｍ−６Ｈ）、１． ＜。
Ｉｓ、　９Ｈ１，２，７９（ｓ、　３ＨＩ、　３．２４　（ｍ、　２８１．４． ３５　Ｌｍ、　０．５Ｈ１，４，７６（ｍ、　０．５ｉ（１，５，０５（ｍ、　 ＩＨｌ、　５．２２　Ｉｓ、　２Ｈ１，７，１５−７，４５Ｉｍ、　４）ＩＬ分 析　Ｃ２０Ｈ２９Ｎ　２０６ＣＩに対する計算値、　Ｃ，５６，００；Ｈ，６， ８２；Ｎ、６．５３；Ｃ１，ｓ、２７ 実測値・Ｃ１５４，５５；Ｈ，６，３３：Ｎ、６．２６；Ｃ１，ｓ、３０ ジオキサン（３５ｍＬ）中の濃硫酸（１，５ｍＬ）の混合物に化合物ＸＶＩＩＩ −７’　（４，ＯＯｇ；８．９ｍｍｏｌ）を加え、アルゴンのパージ下で１０分 間撹拌した。ジュワー濃縮器を用いてこの反応混合物にイソブチレン（３０ｍＬ ）を濃縮して入れた。この反応混合物を６時間撹拌し、ついでＩＮ　ＮａＯＨ（ ２５０ｍＬ）に注いだ。この水性混合物をジエチルエーテルを用いて抽出した（ ３Ｘ１００ｍＬ）。併せたエーテル抽出物を飽和Ｎ　ａ　ＨＣ０３（１００ｍ　 Ｌ）および飽和ＮａＣ１（２Ｘ１００ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥し、 蒸発に供して２．０５ｇのＸＶＩＩＩ−８”を得た。Ｎ“、Ｎδ　Ｎ　ｅ　−） 、リベンジルオキシ力ルボニルーＬ−アルギニン（２，９０ｇ　；　５．Ｏｍｍ ｏ　１）およびインブチルクロロホルメート（０，７８ｍＬＨ６，０ｍｍｏｌ） を順次加えた。２０分間撹拌後、メチレンクロライド（２５ｍＬ）中のＸＶＩＩ Ｉ−８°の溶液をこの反応混合物に加え、ついでＮ−メチルモルホリン（０，５ ３ｍＬ　Ｈ５，０ｍｍ。
ｌ）を加えた。この反応混合物を室温まで戻し、５時間撹拌した。この物質を油 状物となるまで蒸発に供し、ヘキサン中の２０，３０および４０％の段階勾配の 酢酸エチル（各５００ｍＬ）を用いたフラッシニクロマトグラフィーに供して２ ゜８９ｇ　（３０％）　のＸＶＩ　Ｉ　Ｉ−９’を得た。
９０　ＭＨｚ　１１４−ＮＭＲｌＣＤＣ１３）　６１１０−２．１５　Ｉｍ、　 ｌｏｌ＋。
ｌ　コ８　（ｓ、９Ｍ１．　２．８７　（ｓ、３Ｍｌ、３．１９　（ｍ、２８１ ．　１７１　Ｔｍ、ＩＨＩ。
コ、９４　Ｄ＋＋、ＩＨｌ、４．３５　ｉｍ、０．５Ｈ１，４，７２（ｍ、１． ５Ｈ１，４，９５−５，４０（ｍ、　７Ｈ）、　５．Ｂ４１ｍ、　ＩＨ）、　７ ．１５−７．４９１ｍ、　１９Ｈ］、　９．３８１’ｏｓ、　２Ｈ１゜分析　Ｃ ４９Ｈ５１Ｎ６０１１Ｃ１に対する計算値：Ｃ，６２，３８，Ｈ，６，３２；Ｎ 、８．９１　；ｃｔ、３．７６ 実測値：Ｃ，６２，１２：Ｈ，６，１１；Ｎ、８．９２．ＣＩ、ＮＡ Ｎ’、Ｎ’、Ｎ”−）リベンジルオキシカルボニルーし一アルギニルーＮ’−メ チルーＮ″−（２−クロロベンジルオキシカルボニル）　−Ｌ−リシン（ＸＶＩ 　Ｉ　ｌ−１０’　）トリフルオロ酢酸（１０ｍＬ）とメチレンクロライド（１ ０ｍＬ）の混合物に化合物ＸＶＩ　Ｉ　Ｉ−９’　（１，４２ｇ　；１．５０ｍ ｍｏ　１）を溶解し、４０分間撹拌した。この物質を油状物となるまで濃縮し、 メチレンクロライド（５０ｍＬ）中に希釈し、水（４Ｘ　５０ｍＬ）および飽和 ＮａＣ１（５０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥し、蒸発に供して１゜１６ ｇ　（８７％）　のＸＶＩ　Ｉ　ｌ−１０°を得た。
＋ｍ、　ＩＨＩ、　７．１５−７．４９１ｍ、　１９１１．９．４５　（ｂｓ、 　］）！１゜分析　Ｃ４５Ｈ４３Ｎ６０１１Ｃｔ、に対する計算値：　Ｃ，６０ ，９１、Ｈ，５，７９。
Ｎ、９．４７．ＣＩ、４．００ 実測値：　Ｃ，６０，９３、Ｈ，５，８４。
Ｎ、９．７０．ＣＩ、ＮＡ ンーヘキサノイル］−フェニルアラニン（異性体Ａ）の固相実施例１７において 先に記載した一般的な方法に従う。化合物ＸＶＩ　Ｉ　Ｉ−１（実施例１１にお けるＸＩＸｌ−８）（４１３，１，００ｍｍｏ　＋）およびＮ−ヒドロキシスク シンイミド（１２１ｍｇ　；　１．０５ｍｍｏ　１）をメチレンクロライド（２ ０ｍＬ）に溶解し、０℃に冷却した（水浴）。ＤＣＣ（２２６ｍｇ　；　１．１ ０ｍｍｏ　１）を加え、反応混合物を０℃で３時間撹拌し、ついで−晩冷凍した 。ＤＣＵをろ別し、ろ液を蒸発に供してスクシンイミドエステルＸＶＩＩＩ−２ を得た。メチレンクロライド中に４０％ＴＦＡおよび１０％アニソールを含有す るカクテルで５分間処理しついで新たなカクテルで３０分間第２の処理をするこ とによって、メリフィールドＢｏｃ−Ｐｈｅ−Ｑ−レジン（２，２５ｇ；１．　 ５ｍｍｏｌ）からＢｏｃ基を離脱させた。レジンをメチレンクロライドで洗浄し く３×）、メチレンクロライド中の５％ＤＩＥＡで中和しく２Ｘ）、メチレンク ロライドで再び洗浄した〔３×〕。化合物ＸＶＩＩＩ−２をメチレンクロライド （１０ｍＬ）に溶解し、触媒量のＨＯＢｔ　（１５ｇ）とともにレジンに加えた 。ＮＭＲにより上清を定期的にモニターしながら、反応を１０日間進行させ、化 合物ＸＶＩＩＩ−３を得た。メチレンクロライド（１０ｍＬ）中の無水酢酸（１ ｍＬンおよびピリジン（０，２ｍＬ）を用いてレジンをギヤ。ノブした。上記の ようにＢｏｃ基を除去し、レジンをメチレンクロライドとイソプロパツールで交 互に３回、ついでメチレンクロライドで洗浄しく３Ｘ）、レジンをＴＦＡ塩とし て得た。
コレトハ別に、ジペプチドＸＶＩ　Ｉ　ｌ−１０°　（１，０６ｍｇ　；　１． ２０ｍｍｏ　１）およびＨＯＢｔ　（１９０ｍｇ；１゜２５ｍｍｏｌ）をＤＭＦ 　（１ｍＬ）に溶解し、メチレンクロライド（１０ｍＬ）で希釈し、０℃に冷却 した（水浴）。ＤＣＣ（２７０ｍｇ　；　１．３０ｍｍｏ　１）を加え、得られ た混合物を０℃で２０分間撹拌した後、室温で３０分間撹拌した。
レジンをメチレンクロライド中の５％ＤＩＥＡで中和しく２×）、ついでメチレ ンクロライドで洗浄しく３Ｘ）、上記活性化ジペプチドをただちにレジンに加え た。容器を一晩振盪した。反応完結の判定（カイザー試験）後、このレジンをメ チレンクロライド（２Ｘ）、イソプロパツール（２×）およびエーテル（１×） で洗浄し、ついで乾燥して３．３５ｇの化合物ＸＶＪＩＩ−４を得た。このペプ チド−レジンをＨＦ（３０ｍＬ）中の１０％アニソールにて０℃で９０分間処理 し、ついでＨＦ／アニソール混合物を真空蒸留することによって、側鎖保護基の 同時除去を伴ってレジンからペプチドを開裂させた。このレジンをエーテルで洗 浄し、ペプチドを０゜５％ＴＦＡを含有する水中の１５％アセトニトリルで抽出 し、凍結乾燥して粗製ペプチドＡｒｇ−ＮＭｅＬｙｓ−Ａｓｐ（ｋ）Ｖａｌ−Ｐ ｈｅ　（（Ｉ　Ｉ　Ｉ）Ｎ−ＭｅＫ２Ｆ５−ＴＨＰ）３２９ｍｇを得た。分析Ｈ ＰＬＣにより、この物質が４つの主要成分からなることが示された。この粗製混 合物を０゜１％ＴＦＡを含有する水中１０％アセトニトリルに溶解し、５つの部 分に分けた。各部分を、０．　１％ＴＦＡを含有する水中の１０〜３０％勾配の アセトニトリルを用いた直線的ＨＰＬＣにより部分的に精製した。画分をＡｒｇ −ＮＭｅＬｙｓ−Ａｓ　ｐ　（ｋ）　Ｖａ　Ｉ−Ｐｈｅ　（（Ｉ　Ｉ　Ｉ）　Ｎ −ＭｅＫ２Ｆ５−ＴＨＰ）の異性体Ａに相当する生成物を含有する６つのプール に集めた。０．１％ＴＦＡを含有する水中の１７％アセトニトリルのアイソクラ ティック直線システムを溶出剤として用い、集めたそれぞれの両分に対しさらな る直線的ＨＰＬＣを行った。この処理により高純度の４つの画分を得、これを、 ０．　１％ＴＦＡを含有する水中の１２〜２５％勾配のアセトニトリルに供した 。純粋画分を集め、アセトニトリルを蒸発除去し、冷凍し、凍結乾燥してＡｒｇ −ＮＭｅＬｙｓ−Ａｓ　ｐ　（ｋ）　Ｖａ　１−Ｐｈｅ　（（Ｉ　Ｉ　Ｉ）　Ｎ −ＭｅＫ２Ｆ５−ＴＨＰ）の異性体Ａ（０，１％ＴＦＡを含有する水中１７％ア セトニトリルでに’　＝１．７６）２３ｍｇを得た。
ＦＡＢＳ−ＭＳ　ｍ／ｅ　６７７　（Ｍ＋Ｈ）４００　Ｋ−！ｚ　１：１−ＮＴ ／ＲｆＤ２０３　６　０．８６　ｆｄ、６Ｈ１，１，１７ｆｎ。
２８１、１．６２−２．００　（ｍ、　９）！１．　２．５５　（ｗ、　ＩＨ） 、２．７０１ｍ、ＩＨＩ、２．Ｂ］（ｍ、　２Ｈ１，３，０４（ｍ、　５Ｈ１， １１６（ｍ、　１！（＋、　３．２１　ｃｍ、　２Ｊ（ｌ、　４．５６＋ｍ、３ Ｈ１，５，０３＋ｍ、　ＩＨ）、７．２６−７．４２　４ｍ、５Ｈ１゜ｒ　実施 例　１９ Ａｒｇ−Ｎｌｅ−Ａｓｐ−Ｖａ　ｌ　（ｋ）Ｖａ　１）　（（ＩＶ）Ｎｌｅ’　 Ｖ’−ＴＨＰ）の調製≦ リ　６−メチル−５（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル［アミノ−４− オキソ−２−イソプロピル−ヘプタン酸のメリフィールドクロロメチルレジンへ の結合（ＸＩＸ−２）先に記載した手法（実施例１のＡｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｓｐ− Ｖａ　ｌ　（ｋ）Ｐｈｅ　（（ＩＶ）Ｆ５−ＴＨＰ）を用いて、ケトメチレンサ ブユニットＸｌＸ−１（４２５ｍｇ、１．３５ｍｍｏりおよび炭酸水素セシウム （２８１ｍｇ、１．４５ｍｍｏｌ）を無水メタノール（２５ｍＬ）中で一晩混合 した。
この混合物を蒸発に供し、得られた固体をＤＭＦ　（２５ｍＬ）に溶解した。メ リフィールドクロロメチルレジン（２，６２ｇ；２．６２ｍｍｏｌ＠１ｍｅＱ／ ｇレジン）を加え、この懸濁物をアルゴン下、５０℃で４８時間撹拌した。ＤＭ ＦのＴＬＣは、ケトメチレンＸｒＸ−１の残存を示さなかった。
レジンをメチレンクロライド、メタノールおよびイソプロパツールで多数回洗浄 し、ついで乾燥して２．８９ｇＣ約０゜４７ｍｅｑ／ｇ）のＸ　Ｉ　Ｘ−２を得 た。
６−メチル−５〜（Ｓ）−（Ｌ−アルギニル−Ｌ−ノルロイシル−Ｌ−アスパル チル）−アミノ−４−オキソ−２−イソプロピル−ヘプタン酸（異性体Ａおよび 異性体Ｂ）の固相合実施例１においてＡｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｓｐ−Ｖａ　ｌ　（ｋ ）Ｐｈｅ　（（ＩＶ）Ｆ５−ＴＨＰ）の合成に関して先に記載した手法を用い、 メチレンクロライド中に４０％ＴＦＡおよび１０％アニソールを含有するカクテ ルで５分間処理し、ついて新たなカクテルで３０分間第２の処理をすることによ って、レジ：／ＸｌＸ−２（１，４３ｇ；０．６７ｍｅｑ）からＢ。
Ｃ基を除去した。Ｂｏｃ基の除去後、レジンをメチレンクロライドとイソプロパ ツールで交互に数回、最後にメチレンクロライドで洗浄した。これとは別に、Ｄ ＭＦ（２ｍＬ）中のジペプチドＢｏｃ−Ｎｌｅ−Ａｓｐ　（ＯＢｚｌ）−〇Ｈ（ 実施例３のＩ　Ｉ　Ｉ−ｌ−４）（４５５；　１．Ｏｍｍｏ　＋）、ＤＣＣ（２ ２６ｍｇ　；　１．１ｍｍｏ　１）およびＨＯＢｔ　（１５３ｍｇ　：　１．Ｏ ｍｍｏ　ｌンをメチレンクロライド（８ｍＬ）に加え、０℃で１５分間撹拌した 後、室温で２０分間撹拌して活性化エステルＸｌＸ−３を調製した。この活性化 エステルをジイソプロピルエチルアミン（１７５μｍ；１．０ｍｍ０りとともに 上記レジンに加え、得られた混合物を一晩振盪した。Ｘ　Ｉ　Ｘ−４の完全な反 応および生成を確保するために、第２の結合を行った。結合完結の判定（カイザ ー試験）後、上記のようにＢｏｃ基を除去した。ＤＭＦ（２ｍＬ）中のＮ”−Ｂ ｏｃ−Ｎ”−トシル−Ｌ−アルギニン（５７４ｍｇ　；　１．３ｍｍｏ　＋）　 、ＤＣＣ（３０４ｍｇ　；　１．５ｍｍ。
１）およびＨＯＢｔ　（２０５ｍｇ　；　１．３ｍｍｏ　１）をメチレンクロラ イド（８ｍＬ）に加え、０℃で１５分間撹拌した後、室温で２０分間撹拌した。
得られた活性化エステルＸｌＸ−５をジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＥＡ） （２３５μｌ　；　１．３ｍｍｏ　ｌ）とともに上記レジンに加え、反応混合物 を４時間振盪した。Ｘ　Ｉ　Ｘ−６の完全な反応および生成を確保するために、 第２の結合を行った。上記のようにＢ。
Ｃ基を除去し、レジンを洗浄し、乾燥して１．７５ｇの生成物を得た。このペプ チド−レジンをＩＦ　（１２ｍＬ）　中の１０％アニソールにて０℃で１時間間 処理し、ついでＨＦ／アニソール混合物を真空蒸留することによって、側鎖保護 基の同時除去を伴ってレジンからペプチドを離脱させた。このレジンをエーテル で洗浄し、ペプチドを５０％酢酸で抽出した。
抽出物を凍結乾燥して粗製ペプチドＡｒｇ−Ｎｌｅ−Ａｓｐ−Ｖａ　１　（ｋ） Ｖａｌ　（（ＩＶ）Ｎ−Ｎｌ　ｅ２Ｖ５−ＴＨＰ）３４６ｍｇ　（理論の８６％ ）を得た。０．１％ＴＦＡが存在する水中の１６〜３０％直線勾配のアセトニト リルを用いたＨＰＬＣにより異性体を分離した。異性体を含有する両分をＶ５− ＴＨＰ）の異性体Ａ（純度９９％、２６％アセトニトリルでに’　＝０．８６） ７２ｍｇ、およびＡｒｇ−Ｎｌｅ−Ａｓｐ−Ｖａ　１　（ｋ）Ｖａ　１　（（Ｉ Ｖ）Ｎｌｅ２Ｖ５−ＴＨＰンの異性体Ｂ（純度９９％、２６％アセトニトリルで に′＝１．５５）６８ｍｇを得た。
１Ｈ−に（０２０＋　６０．７７　（ｄ、３ＨＬ　０，８３　ｆｍ２３ＨＬ０． ８６−０．９２　（ｒｎ、９Ｈ＋、　１．２８　（ｍ、４Ｂ＋、１．６３　Ｃｍ 、２Ｈ１，１，７１（ｍ。
２Ｈ１，１，８９１ｍ、　３Ｂ＋、２．３１　１ｔ＋、１）！１．　２．５９　 （ｍ、ＩＨＩ、２．７２−２．８０ｆｍ、２Ｈ１，２，８７ｆｃｉｄ、１Ｍ１， ３．００　（ｄｄ、ＩＨＩ、：Ｃ１９Ｉｔ、２Ｈ１，４，０１（ｔ、Ｅ）、４　 コＯ（ｔ、１３（Ｌ　４．４４　Ｃｄ、ＩＨＩ。
１３Ｃ−立（Ｄ２０）６１４．０７，１７．１９，１９，３６７２０．ｏｌ。
２０．３９．　２２．６６、　２４．３９．　２ｇ、１２．　２９．０６．　３ ０．３０．　３０．６３．　コ１．８４゜３６．７９．　４０．８１．　４１． ４１．　４７．４９．　５Ｌ、２Ｂ、５３．５０．　５４．９７．　６４．５０ ゜１５７．７６、　１７０．２６．　１７３．１５．　１７４．４６．　１７５ ．コ３．　１Ｂ０．ＳＬ、２１１．８１゜分析　Ｃ２７Ｈ４９Ｎ７０８・２ＣＦ ３ＣＯ２Ｈに対する計算値ＩＣ，４４，９Ｂ：Ｈ，６，２１；Ｎ、１１．８４； Ｆ、１３．　７７ 実測値：Ｃ，４４，６３；Ｈ，６，２５；Ｎ、１１．　７５；Ｆ、１３．　６８ 異性体Ｂ ＦＡＢＳ−ＭＳ　ｍ／ｅ　６００　（Ｍ＋Ｈ”　）ＩＨ−Ｎ＋イＲ（Ｄ２０　６ 　０．８２−０．９８　（ｍ、１５Ｈ１，ｌ　コＯ（ｍ、４Ｈ］、１．６６　ｆ ｍ、　２Ｈ１，１，７４［ｒｈ、　２Ｂ＋、　１．９２　＋ｍ、　３Ｂ＋、　２ ．２７でＪ　ＩＨＩ。
２．６３　＋ｍ、ＩＨＩ、２．７５　（ｄｄ、ｌＨＩ、２．８０　（ｄｄ、ｉｌ ｌ、２．９０−２．９９（ｍ、２Ｂ＋、１．２２　ｆｔ、２Ｂ＋、４．０４　（ セ、ＩＨＩ、４．３２　Ｉセ、ＩＨＩ、４．３３１コＣ−ＫＧ　ｆＤ２ｏ１　４ 　１４ｊ４．１Ｂ−０８，２０−０８−２ＦＬ７゜２０．６０，２２．９１．２ ４．６７、２Ｂ、４０．２９．３３．３０．＜４．３０．８８．３２．０９゜１ ６．９１．４０ｊ２．４１６９．４７．９４．５１．４９．５１７８．５５．２ ６．６５．６７゜：５ＢＩ１３．　１７０．５５．　１７３．４５．　１７４． ７０．　１７５．４５．　Ｃ８０，６Ｂ、２１２．８Ｂ。
分析　ＣＨＮｏ　・２．２ＣＦ３Ｃｏ２Ｈ−Ｎ２０に対する 計算値：　Ｃ，４Ｂ、　４４　、Ｈ，６，１７。
Ｎ、１１．２８．Ｆ、１４．１０ 実測値：　Ｃ，４Ｂ、２１　、Ｈ，５，８６。
Ｎ、１０．９１　、Ｆ、１３．　９０ 実施例　２０ （ＯＭｅ）−ＴＨＰ）の調製 化合物Ａｒｇ−Ｎｌｅ−Ａｓｐ−Ｖａｌ　（ｋ）Ｐｈｅ　；（ＩＶ）Ｎｌ　ｅ２ Ｆ５−ＴＨＰ　（実施例３）（３６ｍｇ；４１μｍｏｌ）をメタノール（１５ｍ Ｌ）に溶解した。三ツ・ノ化ホウ素エーテレート（４８μｍ、３９０μｍｏｌ） を加え、反応混合物を１時間加熱還流させた。この反応混合物を冷却し、油状物 となるまで濃縮し、水で希釈し、凍結乾燥した。
生成物を０．０５％ＴＦＡが存在する水中の１０〜４０％直線勾配のアセトニト リルを用いて精製した。純粋化合物を含有する画分を集め、アセトニトリルを蒸 発除去し、凍結乾燥してＡｒｇ−Ｎｌｅ−Ａｓｐ　（ＯＭｅ）−Ｖａｌ　（ｋ） Ｐｈｅ　（ＯＭｅ）（（ＩＶ）Ｎ１　ｅ　Ｄ　（ＯＭｅ）Ｆ５　（ＯＭｅ）−Ｔ ＩＰ）の異性体Ａ（純度９８％、０．　１％ＴＦＡを含有する水中の３６％アセ トニトリルでに’　−１，０８）　２５．３ｍｇ　（７０％）を得た。
ＦＡＢＳ−Ｍｓ　ｍ／ｅ　６７６　（Ｍ＋Ｈ”　）４００　＋’：ｉＺ　ＩＨ− 岳（Ｃｎ３ｃＤｌ　６０ＪＯ（６，３８１，０，９１（ｔ。
’：ａ、　０．９２１ｅ、　３Ｈ１，１，３９（ｍ、　４Ｈね１６８（ｒａ、　 ２ｉ（）、　１７７（ｍ、　２！（ｌ、　Ｌ、９２　（＊、　２Ｈ１，２，２３ （ｍ、　ＩＨＩ、　２．６２　（ｃｉｄ、　ＬＨＩ、　２．７１ｉｄｃｌ、　Ｌ Ｈｉ、　２．７８ｆａ＋ｌ：、　ｌ：１．ｌ、　２．８６　＋ｄ（：、　ＩＨＩ 、　２．９４　ｆｒｎ、　４Ｈ１゜３．０Ｂ　（ｒｈ、二Ｍ＋、　３．２３　Ｉ ｔ、　２）１１．１５８　Ｉｓ、　３８）、　３．６７　Ｉｓ、　：ＩＨＩ。
コ９４ＩｂＪＩＨＩ、４．３４（ｍ、２２ミ）、４．７７（ｍ、１Ｍ１，７．１ ３−７．２８［ｍ。
分析　Ｃ３３Ｈ５３Ｎ７０８・３ＣＦ３ＣＯ２Ｈに対する計算値＋　Ｃ，４６， ０１；Ｈ，５，５４；Ｎ、９．６３ 実測値・Ｃ，４６，３０，Ｈ，５，６４。
Ｎ、９．　２７ Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｓｐ　（ＯＭｅ）　（ｋ）Ｖａ　１−Ｐｈｅニル−Ｌ−リシ ル）−アミノ−６−メチルオキシカルボニル−ヘキサノイル〕フェニルアラニン メチルエステル（異性体Ａ）を与えるＡｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｓｐ　（ｋ）Ｖａ　１ −Ｐｈｅ　；（Ｉ　Ｉ　Ｉ）Ｆ’　−ＴＨＰ　（実施例１１）のエステル化化合 物Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｓｐ　（ｋ）−Ｐｈｅ　；　（Ｉ　Ｉ　Ｉ）Ｆ５−ＴＨＰ 　（実施例１１）（５６ｍｇ　；　５６μｍｏ　１）をメタノール（２０ｍＬ） に溶解した。三フッ化ホウ素エーテレート（８０μｍ、６５０μｍｏｌ）を加え 、反応混合物を１時間加熱還流させた。この反応混合物を冷却し、約１０ｍＬま で濃縮し、水（１００ｍＬ）で希釈した。生成物を０゜０５％ＴＦＡが存在する 水中の１０〜２０％直線勾配のアセトニトリルを用いて精製した。純粋化合物を 含有する画分を集め、アセトニトリルを蒸発除去し、凍結乾燥してＡｒｇ−Ｌｙ ｓ−Ａｓｐ　（ＯＭｅ）（ｋ）Ｖａ　１−Ｐｈｅ　（ＯＭｅ）（（Ｉ　Ｉ　ｒ） Ｄ３　（ＯＭｅ）Ｆ５　（ＯＭｅ）−ＴＨＰ）の異性体Ａ（純度９８％、０．１ ％ＴＦＡを含有する水中の２０％アセトニトリルでに’　＝３．１７）２８．２ ｍｇ　（４９％）１Ｈ−Ｎ？（ＲｆｃＤ３０Ｄ）　６０．８ｇ　（ｄ、　３Ｅ） 、　０．９０　ｆｄ、　３）＋３゜１．ｓ］　（ｍ、　２Ｍ１．１．７１　（ｂ ｍ、　４Ｈ１，１，８２Ｃｍ、　２Ｈ１，１９２（ｂｍ、工ｊ（Ｉ。
２．０２　（ｈｍ、　ＬＭ）、　２．６０　（ｍ、　２Ｈ１，２，６６（ｄｄ、 　ＬＨＩ、　２．８６　（ｍ、　ＬＨＩ。
２．９０　ｆｃ＋ｄ、　ＩＨ）、　２．９５　Ｉｔ、　２Ｈ１，２，９９（ｄｄ 、　ｌｘｌ、　３．０７　ｆａｄ。
ＬＨＩ、　３．２２　（ｍ、　２ＨＩ、　３．６２　（ｓ、　３Ｈ１，３，６５ （ｓ、　３Ｈ）、　４．０９　（ｍ。
１）＋１．４．３８　（ｍ、　ＩＧＩＩ、　４．５６　ｆｄｄ、　ＩＨＩ、　４ ．６１　＋ｄｅｌ、　ＩＨＩ。
分析　Ｃ３３Ｈ５４Ｎ８０８−３ＣＦ３Ｃｏ２Ｈ−２，５Ｈ２０に対する 計算値：　Ｃ，４３，４５、Ｈ，５，８０；Ｎ、１０．３９ 実測値：　Ｃ，４３，３４、Ｈ，５，７１。
Ｎ、１０．７７ 実施例　２２ Ａｒｇ　（Ｒ）Ｌｙｓ−Ａｓｐ−Ｖａ　Ｉ−Ｐｈｅ　（Ｎ）Ｆ’フエーレンッ（ Ｆｒｈｒｔｎｚ　）およびカストｏ　（Ｃｘｓｌｒｏ）の手Ｌ　（１９８Ｂ）＋ ：従い、Ｎａ、Ｎａ、Ｎｏ−トリーベンジルオキシカルボニルーし一アルギニン （２，５８ｇ；４．４８ｍｍｏ＋）’ｉミーメチレンクロライド溶解し、室温で 撹拌した。
このアミノ酸溶液にトリエチルアミン（０，６２５ｍＬ　；４゜５ｍｍｏｌ）お よびＢＯＰ　（２，０４ｇ　；４．６ｍｍｏ　１）を順次加えた。この混合物を ５分間撹拌した後、Ｎ、Ｏ−ジメチルヒドロキシルアミン塩酸塩（０，４９８ｇ ；５．１２ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（０，７２０ｇ；５．１８ｍｍｏ ｌ）を加え、得られた反応混合物を室温で２時間撹）　れ飢００′ｌ帥２′仲＞ ’ｙｏ９４　）’　（２００”口で希釈し、冷ＩＮ　ＨＣ１で３回（各７０ｍＬ ）　、冷飽和炭酸水素ナトリウムで３回（各７０ｍＬ）および飽和塩化ナトリウ ムで２回（各７０ｍＬ）順次洗浄した。有機層を硫酸マグネシウム上で乾燥し、 蒸発に供して粗製生成物（２，７１ｇ；９８％）を白色固体として得た。この生 成物を酢酸エチル−ヘキサン（１，０Ｌ；４：６）で溶出させるフラッシュク０ ７トグラフイー（ＥＭサイエンシスＥＭ　５ｃｉｅｎｃｔ）のキーゼルゲル（Ｋ ｉｅｕｌｇｓｌ　）　６０の３０ｍｍＸ２００ｍｍベッド、２３０〜４００メツ シュＡＳＴＭシリカゲル）に供した。純粋画分を集め、蒸発に供して２．１８ｇ 　（７９％）のＸＸ１１−２を得た。
Ｒｒ　＝０．４０　（Ｅ　ｔ　０Ａｃ−ヘキサン、１：１）；ＩＨ−Ｎ’ｌ’ｌ ＲｆｃＤｃ１３１６　Ｌ、６Ｓ　（ｍ、　４Ｈ１，１１２（ｓ、　３Ｈ）。
３．６３　（ｓ、３Ｈ）、３．９３　（ｍ、２Ｈｌ、４．７０　（ｍ、ＩＨＬ　 ５．０７　（ｓ、２ＨＬ５．１２１ｓ、　２＋４１．５．２１　（ｓ、　２）ｆ ｌ、　５．４７　（６，ＩＨＩ、　７．４３４ｓ、　１５Ｈ１゜ＭＳ　（ＤＣＩ −ＮＨ３）　ｍ／ｅ　６２０　（Ｍ十Ｈ＋）、４８６ｍ／ｅ　（Ｍ＋Ｈ−Ｚ） 分析　Ｃ３２Ｈ３７Ｎ５０８に対する 計算値ＩＣ，６２，２０；Ｈ，６，０２；Ｎ、１１．　３０ 実測値：　Ｃ，６２，０５；Ｈ，６，０１；Ｎ、１１．　３１ Ｎ　−１−リーベンジルオキシカルボニルーし一アルギニン（１１，５ｇ　；　 ２０．Ｏｍｍｏ　１）をメチレンクロライドとＴＨＦの混合物（１５０ｍＬ　； ４　：　１）ｌ：溶解Ｌ、ソノフラスコを一１５℃で５分間撹拌した。この反応 容器にＮ−メチルモルホリン（２，３１ｍＬ；２１．Ｏｍｍｏｌ）およびイソブ チルクロロホルメート（２，７２ｍＬ；２１．Ｏｍｍ。
ｌ）を順次加え、得られた混合物を一１５℃で１５分間撹拌したメチレンクロラ イド（２５ｍＬ）中のＮ、Ｏ−ジメチルヒドロキシルアミン塩酸塩（２，１５ｇ ；２２．Ｏｍｍｏｌ）およびＮ−メチルモルホリン（２，４２ｍＬ　Ｈ２２，０ ｍｍ０１）を反応容器に滴下し、反応混合物を一１５℃で５分間、ついで室温で ４時間撹拌した。この反応混合物を水冷０．　２５Ｎ　ＨＣＩで３回（各１００ −ｍＬ）、氷冷水で１回（１００ｍＬ）　、水冷飽和炭酸水素ナトリウムで２回 （各１００ｍＬ）および飽和塩化ナトリウムで２回（各１００ｍＬ）順次洗浄し た。有機層を硫酸マグネシウム上で乾燥し、蒸発に供して１１．８ｇ　（９４， ８％）のＸＸｌｌ−２を白色固体として得た。これは、ＴＬＣにより、純度〉９ ８％であった。
’Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣ＋３）：方法人で得られた生成物について記載したスペク トルと同一。
ゲールらの手法（１９８８）を使用して、オーバーヘッド撹拌器および滴下漏斗 を備えた三首丸底フラスコ中で水素化アルミニウムリチウム９５％（０，１４６ ｇ　；　３．６６ｍｍｏｆ）をＴＨＦ　（５０ｍＬ）に懸濁させた。この物質を アルゴン下で急速に３０分間撹拌し、得られた微細懸濁物を一５０℃に冷却しく ドライアイス−イソプロパツール）、１５分間撹拌した。浴温度を一５０℃に保 ちながら、この反応混合物にＴＨＦ　（１０ｍＬ）中のＸＸＩ　Ｉ　−２（２， Ｏｌｇ；３゜２４ｍｍｏ　りを５分かけて滴下した。このアミノ酸の添加直後に 、ゼラチン状の析出物が生成した。このアルギニン誘導体の最後の添加の２分以 内に水素ガスの発生が停止した。
上記冷浴を取り外し、反応混合物を５分間撹拌したが、さらなる水素発生の形跡 はなかった。この反応混合物を再び一５０℃に冷却し、硫酸水素カリウム（０， ８９０ｇ：６．５４ｍｍｏ＋）の水溶液（１０ｍＬ）を注意深く３分かけて反応 混合物に添加した。最初の２ｍＬの添加中に水素が激しく発生し、次に止んだ。
この反応混合物を高速度で２０分間撹拌してゼラチン状生成物を破砕した。反応 容器に酢酸エチル（３０ｍＬ）を注ぎ、この物質を分離漏斗に移した。容器を酢 酸エチル（１００ｍＬ）ですすぎ、併せた有機溶液を水冷ＩＮ　ＭＣＩで３回（ 各１００ｍＬ）、氷冷水で１回（１００ｍＬ）　、水冷飽和炭酸水素ナトリウム で２回（各１００ｍＬ）および飽和塩化ナトリウムで２回顧次洗浄した。有機層 を硫酸マグネシウムのフィルターパッドを通して乾燥し、蒸発に供して１．９６ ｇのＸＸｌｌ−３を固体として得た。この粗製物質は、ＴＬＣにより、純度〉８ ５％であった。（酢酸エチル−へ牛サン（１：　１）におけるＲ、は、アルデヒ ドに対し０．６８；出発物質に対し０．４０；少量の不純物に対し０．１５）。
１１４−ＫＧ　ＩｃＤｃＩ３１６　Ｌ、６７　ｆｍ、　４Ｈ１，１９０１ｍ、　 ２Ｈ１，４，０８ｇｍ、　ＩＨＩ、　５．０５　＋ＩＴＩ、　４Ｈ１，５，１８ （ｓ、　２Ｈｌ、　ｓ、ｓｓ　（ｂｄ、　１）＋１．７．３゜ｆｒｎ、　１５Ｍ ）、　９．２６　（ｂｓ、　２Ｈ１，９，４５（ｓ、　１ＨＩ。
１３ｃｍ師ｕＣＤＣ１３１６２４，３９，２５，２Ｌ　４３−９５，５９．６７ ゜６５．１９．６６．９２．６８．９Ｂ、　１２６Ｊ９．１２７．５４．１２７ ．８７．１２Ｂ、Ｏ］。
１２Ｂ、３６．１２８．４７．１２１１．７９．１２８．９０．　ｌ：１４．５ ３．１３４．６４．　Ｌ３６．２１゜１３６．７０．１４０．９３．１５５．６ ６、１５５．８２．１６０．４８．１６１５７．１９９．８１゜ＭＳ（ＤＣＩ− ＮＨ３）　ｍ／ｅ　５６１（Ｍ＋Ｈ）、４２７　（Ｍ＋Ｈ−Ｃｂｚ） Ｎ’　−［２−５−ベンジルオキシカルボニルアミノ−５−（ジ−ベンジルオキ シカルボニル）−グアニド−ペンチル］Ｎ′−ベンジルオキシカルボニル−し− リシン（ＸＸＩＴ−土と 粗製ＸＸＩ　Ｉ−３（１，９６ｇ　；＜３．２ｍｍｏ　１）をＤＭＦ　（１０ｍ Ｌ）に溶解し、ついでメタノール（４０ｍＬ）で希釈した。ＮＥ−ベンジルオキ シカルボニル−し−リジン（１，９９ｇ　；　７．１ｍｍｏ　１）をこのフラス コニ加え、ついで酢酸（０，５０ｍＬ）を加えた。過剰のシアノボロ水素化ナト リウム（０，６３２ｇ　；　１０．Ｏｍｍｏ　１）を少しずつ３分かけて加えた 。この反応混合物をアルゴン下、室温で一晩撹拌した。未反応のＮ−ベンジルオ キシカルボニル−Ｌ−リシンをろ別し、ろ液を蒸発に供してメタノールを除去し た。残った液体に無水ジエチルエーテルを加え、微細白色粉末を析出させた。こ の混合物を１５分間撹拌し、ろ過した。
この固体物質を最小量のメチレンクロライドに溶解し、ジエチルエーテルで再析 出させた。これにより１．　３２ｇ　（５０％）のＸＸｌｌ−４を回収した。
ＦＡＢＳ−ＭＳ　ｍ／ｅ　８２５　（Ｍ＋Ｈ＋）９０　ｆｒｉｚ　ＩＨ−ｋＮＲ （ＣＤＣＩ３１６１．０５−１．９５　（ｂｍ、　１０ＨＩ。
２．７５−３．２５　（ｂｒｎ、４８１．　３．３−４．２　Ｔｂｍ、　ＳＨＥ 、４．９−５．２　［ｍ、８Ｈ１゜５Ｊ　（ｂｓ、　ＩＨＩ、　１．３３　（ｍ 、　２０Ｈ１，９，２５（ｂｓ、　２ＨＬム」」ム」」土工リュ５し」二影ビ」 工しユ土Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−Ａｓｐ　（ＯＢｚｌ）−Ｌ−Ｖａｌ　−Ｐｈｅ−レジ ン（０，５２ｍｅｑ／ｇ　（理論）の９６０ｍｇ。
Ｎａ−Ｂｏｃ−Ｌ−Ｖａ　１−ＯＨおよびＮａ−Ｂｏｃ−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）− ＯＨのＮ　−Ｂｏｃ−Ｌ−Ｐｈｅ−０−メリフィールドレジンへの標準の固相結 合により調製；０．５ｍｍｏｌ）をメチレンクロライド中の４０％ＴＦＡ／１０ ％アニソールで５分間、ついで３０分間処理した。このレジンをメチレンクロラ イドおよびイソプロピルアルコ−１しで洗浄しく各３回）、１０％ジイソプロピ ルエチルアミン（Ｄ　Ｉ　ＲＡ）で中和し、メチレンクロライドで洗浄した（３ 回）。メチレンクロライド（５ｍＬ）中の化合物ＸＸＩ　Ｉ−４（１゜２４ｇ　 ；　１５０ｍｍｏ　１）　、ＤＭＦ　（２ｍＬ）中のＨＯＢｔ（２３０ｍｇ　； 　１．５０ｍｍｏｌ）およびメチレンクロライド（５ｍＬ）中のＤＣＣ（３４０ ｍｇ　；　１．６５ｍｍｏ　１）を順次レジン反応容器に加え、この容器を一晩 振盪した。レノンのカイザー試験は、反応が完結したことを示した。無水ＨＦ中 の１０％アニソールとともに０〜５℃で９０分間撹拌することによりレジンから ペプチドを開裂させた。ＨＦの蒸発後、レジンを無水ジエチルエーテル（２５０ ｍＬ）で洗浄し、ペプチドを０６５％ＴＦＡを含有する水中の２０％アセトニト リルで抽出した（６Ｘ２５ｍＬ）。ペプチドを含有する抽出物を併せ、凍結乾燥 して粗製生成物３４０ｇを１尋た。
この粗製物を０．１％ＴＦＡを含有する水中の０〜３０％直線勾配アセトニトリ ルを用いて９０分間精製した。画分（１７％アセトニトリルでに’−１，０；純 度１００％）を集め、凍結乾燥して２１２ｍｇのＡｒｇ　（Ｒ）Ｌｙｓ−Ａｓｐ −Ｖａ　Ｉ　Ｐ　ｈ　ｅ　（（Ｉ）　Ｆ　ＴＨＰ　（ＣＨ２ＮＨ）を単一異性体 として得た。
ＦＡＢＳ−ＭＳ　ｍ／ｅ　６５０　（Ｍ＋Ｈ）９０馳ＩＨ−隠［ＣＤ３０ＤＩ　 ＋５　ｏ、９１＋ａａ、　６Ｈ１；　Ｌ、２−２．２［ｍ、　ＩＬＨＩ、　２． ７０−３．０５１ｍ、　５Ｍ１．３．０５−３．３５　Ｔｍ、　６１１．３．５ ２　Ｔｍ。
ＬＭ）、　１．８２　（ｍ、　ＩＨｌ、　４．２５　（ｍ、　ＩＨＩ、　４．７ ２　Ｔｍ、　ＩＨ）、　７．３２　（Ｓ。
分析　Ｃ３０Ｈ５１Ｎ９０７　’　４　ＣＦ　３　Ｃ０２Ｈに対する計算値：Ｃ ，４１，２７，Ｈ，５，０１。
Ｎ、１１．４０；Ｆ、２０．６２ 実測値：Ｃ，４１，０８；Ｈ，４，８９；Ｎ、１１．５５．Ｆ、１８．６８ 実施例　２３ 芭二越二エニ臼ヱ互二七」土ムヨＬ咀ムニロユ」−ブトキシカルボニルアミノ− ６−シクロヘキシル−オキシカルボニル−ヘキサノイル］−’Ｌ−フェニルアラ ニン　ベンジルエステル（ＸＸＩ　Ｉ　Ｉ−２の異性体Ａおよび異性体Ｂ）フェ ニルアラニンベンジルエステルトシレート塩（８，５５ｇ　；　２０．Ｏｍｍｏ 　１）をメチレンクロライド（１００ｍＬ）に懸濁させ、ＩＮ　ＮａＯＨ（１０ ０ｍＬ）で処理した。
それらの層を分離し、メチレンクロライド層を飽和ＮａＣ１で洗浄しく２　Ｘ　 １００　ｍ　Ｌ　）　、Ｍ　ｇ　Ｓ　Ｏ４上で乾燥し、約１０ｍＬまで濃縮した 。これとは別に、化合物ＸＸｌｌｌ−１（実施例１１におけるＸｌ−８）（４， ６５ｇ；１１．２５ｍｍｏｌ）をメチレンクロライドに溶解し、−１０℃に冷却 した（ＭｅＯＨ−水浴）　。ＤＣＣ（２，７２ｇ　；　１３．２ｍｍ０１）およ び上記フェニルアラニンベンジルエステル溶液を順次加えた。この反応混合物を 一１０℃に６時間保ち、ついで室温で一晩撹拌した。反応混合物をろ過し、油状 物となるまで蒸発に供し、ヘキサン中１０．２０．３０および４０％酢酸エチル の段階勾配（各５００ｍＬ）を用いたフラッシュクロマトグラフィー（３０Ｘ３ ００ｍｍベッド）に供した。
この方法により、速く溶出するＸＸｌｌｌ−２の異性体Ｂ（上層）と表示される ジアステレオマー（Ｒ，０，３８；ヘキサン中３０％ＥｔＯＡｃ）Ｑ、９６ｇ、 遅く溶出するＸＸｌｌｌ−２の異性体Ａ（下層＞　（Ｒ，０，３４；ヘキサン中 ３０％ＥｔＯＡｃ）０．８６ｇ、およびこれら２つの生成物の混合物２．５８ｇ を回収した。
ＸＸｌｌｌ−２の異性体Ｂ ＤＣＩ　−ＭＳ　６５１　ｍ／ｅ　（Ｍ＋Ｈ＋）９０　ＭＨ２ＩＨ−？ｆＭＲｆ ｃＤｃ１３１６　Ｑ、８２　ｆｄ、　６Ｈ１，１，０−２，０（ｍ、　２０Ｈｌ 、　２．４８　ｆｍ、　ＬＭ）、　２．６２　（ｒｎ、　ＩＨＩ、　２．８２　 ｆｍ、　２Ｈ１，３，ＯＢｌｍ、　３！（＋、　４．５０　（ｍ、　ＬＨＩ、　 ４．７０　（ｍ、）Ｍｌ、　４．８６　（ｑ、　ＩＨＩ、　５．１４＋ｍ、　２ Ｈ１，５，６２ｆｄ、　ＩＨｌ、　６．２６　（ｄ、　ＬＨＩ、　７．２０　（ ｍ、　５Ｈ１，７，２９分析　Ｃ３７Ｈ５ｏＮ２０８に対する 計算値：　Ｃ，６８，２８、Ｈ，７，７４；Ｎ、４−　３０ 実測値：Ｃ，６８，５０；Ｃ，７，５８；ＤＣＩ　−ＭＳ　６５１　ｍ／ｅ　（ Ｍ＋Ｈ＋）９’　ＭＡｚ　１）１−ＮＫＲＩ　ＣＤＣｌ３　）　６０．８０　Ｉ 　ａ　、６ｉ（ｌ　７１　、ＯＳ−２−００（ｍ、　２０ＨＩ、　２．４５１ｒ ｎ、　ＩＨＩ、　２．６　＋ｍ、　ＩＨＩ、　２．１Ｂ　（ｍ、２Ｍ＋、　３． ０Ｈｌｍ、　３Ｈｌ、　４．５０　（ｍ、　１）ｌ）、　４．８０　ｆｍ、　２ Ｈ１，５，１２Ｃｍ、　２）１１．５．７１分析　Ｃ３７Ｈ５ｏＮ２０８に対す る 計算値：Ｃ，６８，２８；Ｈ，７，７４゜Ｎ、４．　３０ 実測値：Ｃ，６７，８６；Ｃ，７，６３゜Ｎ、４．０９ ル］−フェニルアラニン（異性体Ａ）の液相合成化合物ＸＸｌｌｌ−２の異性体 Ａ　（４００ｍｇ　；０．６１ｍｍｏｌ）をＨＣＩで飽和させた酢酸エチル（５ ０ｍＬ）により処理し、得られた混合物を９０分間撹拌した。この物質を泡状物 となるまで濃縮し、エーテルを用いて再蒸発に供しく３回）、高真空下に一装置 いた。ジペプチドＸＸｌｌ−５（実施例１１におけるＸＩ’−４）（５８７ｍｇ 　：　０．７０ｍｍｏ＋）およびＨＯＢｔ　（１１５ｍｇ；０．７５ｍｍｏｌ） をＤＭＦ　（１ｍＬ）に溶解し、メチレンクロライド（１０ｍＬ）で希釈し、０ ℃に冷却した（水浴）。メチレンクロライド（２ｍＬ）中のＤＣＣ（１６５ｍｇ 　；０．８０ｍｍｏ　ｌ）を反応混合物に加え、その溶液を０℃で３０分間撹拌 した後、室温で４５分間撹拌した。化合物ＸＸｌｌｌ−４の異性体Ａをメチレン クロライド（１０ｍＬ）に溶解し、上記活性化エステル溶液に加えた。ジイソプ ロピルエチルアミン（１１０μｌ　；　０．６２ｍｍｏ　１）を１時間かけて徐 々に加え、この反応混合物を一晩撹拌した。この物質を、メチレンクロライド（ ５００ｍＬ）　、メチレンクロライド中の２０％酢酸エチル（１０００ｍＬ）　 、メチレンクロライド中の３０％酢酸エチル（５００ｍＬ）およびメチレンクロ ライド中の３５％酢酸エチル（５００ｍＬ）からなる段階勾配を用いたシリカフ ラッシュカラム（３０Ｘ３００ｍｍ）で精製した。生成物画分を集め、蒸発に供 してＸＸｌｌｌ−７の異性体Ａ（純度〉９５％）５３６ｍｇ　（６４％）、およ びＸＸｌｌｌ−７の異性体ＡとＸＸｌｌｌ−７の異性体Ｂの混合物（異性体比９ ：１）２００ｍｇ　（２４％）を得た。
３００　＋ＧＩＺ　１ｉ（−め正（ＣＤＣｌ３１６０．８２　ｆｄ、　６Ｈ１゜ Ｃ１５−Ｃ５５ｆｂｍ、　ＩＩＨＩ、　１．６２−１８６　（ｂｍ、　１０ＨＩ 、　２．４２　Ｉｍ、　ＩＨＩ。
２．５６　（ｍ、　ＩＨＩ、　２．７：ｌ　（ｍ、２！（＋、２．９７　ｔｍ、 　ＩＨｌ、　１０４　（ｍ、　４Ｈ１゜１．９２　（ｍ、　２Ｈ１，４，２９（ ｍ、２Ｈ１，４，６８（ｍ、　２ｉ（）、　４．８７　（ｒ：＋、　１８１゜５ ．０６　（ｒｒ＋、　ａＨｌ、　Ｓ、１８＋ｍ、　ｉＨｌ、　５．２１　Ｉｓ、 　２Ｈ１，６，０５（ｄ、、　０．５Ｈ１゜６．１２　＋ａ、　０．５Ｈ１，６ ，８１［ｄ、　０．５Ｈ１，７，０８［ｍ、　１．５Ｈ１，７，１５−７，３８ 分析　Ｃ７６Ｈ９ｏＮ８０１６に対する計算値：　Ｃ，６６、５５、Ｈ，６，６ １。
Ｎ、８．　１７ 実測値：Ｃ，６６、４１、Ｈ，６，６８；Ｎ、８．４８ Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｓｐ　（ｋ）Ｖａ　１−Ｐｈｅ　（（Ｉ　Ｉ　Ｉ）Ｆ５−Ｔ ＨＰ）の異性体Ａ 化合物ＸＸｌｌｌ−７０’）異性体Ａ　（２００ｍｇ；０．１５ｍｍｏｌ）をＩ Ｆ　（５ｍＬ）中の１０％アニソールにより０℃で１時間処理した後、ＨＦ／ア ニソール混合物を真空除去、した。残渣をエーテルで洗浄し、ペプチドを０．５ ％ＴＦＡを含有する水（１００ｍＬ）に溶解し、冷凍し、凍結乾燥した。直線的 ＨＰＬＣ（０，１％ＴＦＡを含有する水中１０〜ＴＨＰ）の異性体Ａ１０７ｍｇ 　（７３％）を得た。この回収した物質は、固相方法を用いて調製した物質と同 一であった。
［２−イソプロピル−４−オキソ−５（Ｓ）−（Ｌ−アルキニルーＬ−リシル） −アミノ−６−カルポキシーヘキサノイＪＬ！］−フェニルアラニン（異性体Ｂ ）の液相合成化合物ＸＸｌｌｌ−２の異性体Ｂ　（２４２ｍｇ；０．３７ｍｍｏ ｌ）をＨＣＩで飽和させた酢酸エチル（５０ｍＬ）により処理し、得られた混合 物を３０分間撹拌した。この物質を名状物となるまで濃縮し、エーテルを用いて 再蒸発に供しく２回）、高真空下に一装置いた。ジペプチドＸＸｌｌｌ−５（実 施例１１におけるＸＩ’−４）（３３５ｍｇ；０．４０ｍｍｏｌ）およびＨＯＢ ｔ　（６３ｍｇ；０．４１ｍｍｏｌ；をＤ　Ｍ　Ｆ　（０、５ｍ　Ｌ　）に溶解 し、メチレンクロライド（１０ｍＬ）で希釈し、−１０℃に冷却した（メタノー ル−水浴）、ＤＣＣ（９３ｍｇ　；　０．４５ｍｍｏ　１）を反応混合物に加え 、その溶液を一１０℃で２０分間撹拌した後、室温で３０分間撹拌した。化合物 ＸＸｌｌｌ−４の異性体Ｂをメチレンクロライド（１０ｍＬ）に溶解し、上記活 性化エステル溶液に加えた。ジイソプロピルエチルアミン（７８μｍ；０．４５ ｍｍｏ　＋）を３０分時間かけて徐々に加え、この反応混合物を一晩撹拌した。
この物質を、メチレンクロライド（２００ｍＬ）　、メチレンクロライド中の２ ５％酢酸エチル（１００ｍＬ）　、メチレンクロライド中の５０％酢酸エチル（ ２００ｍＬ）からなる段階勾配を用いたシリカゲルフィルターパッド（ベッド容 積６０ｍＬ）で精製した。生成物画分を集め、蒸発に供してＸＸＩ　Ｉ　Ｉ−７ の異性体Ｂ（純度〉９５％）３２０ｍｇ　（６３％〕を得た。
−ＸＸｌｌｌ−７の異性体Ｂ ＦＡＢＳ−ＭＳ　ｍ／ｅ　１３７０　（Ｍ　）６．１３１ｄ、　０．５１！３． ６．９１　（ｄ、　０．５Ｈ１，７，０ｌｒｎ、　ＩＨＩ、　７．０５　（ｄ。
０．５Ｈ１，７，１８−７，３８（ｍ、３１Ｍ＋、９．３２（ｂｄ、２Ｍ）。
）　分析　Ｃ７６Ｈ９ｏＮ８０１６に対する計算値：Ｃ，６６，５５；Ｈ，６， ６１；）　Ｎ、８．１７ 実測値：Ｃ，６６，４０；Ｈ，６，６８；Ｎ、８．　２８ Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｓｐ　（ｋ）Ｖａ　１−Ｐｈｅ　（（Ｉ　Ｉ　Ｉ）Ｆ’−Ｔ ＨＰ）の異性体Ｂ 化合物ＸＸ　Ｉ　Ｉ　Ｉ　−７（７）異性体Ｂ　（１００ｍｇ　；０．０７ｍｍ ｏｌ）をＨＦ　（５ｍＬ）中の１０％アニソールにより０℃で１時間処理した後 、ＨＦ／アニソール混合物を真空除去した。残渣をエーテルで洗浄し、ペプチド を０．　５％ＴＦＡを含有する水（５０ｍＬ）に溶解し、冷凍し、凍結乾燥して Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｓｐ　（ｋ）Ｖａ　１−Ｐｈｅ　（（Ｉ　Ｉ　Ｉ）Ｆ５−Ｔ ＨＰ）ｅｖｘ性体Ｂ（ＨｐＬｃｔ＝よる純ｙｘ９６％）６２ｍｇ　（７３％）を 得た。この回収した物質は、固相方法を用いて調製した物質と同一であった。
実施例　２４ ジペプチドＸＸＩＶ−３（実施例１８におけるＸＶＩＩ１１０’　）（３０３ｍ ｇ；０．３４ｍｍｏｌ）およびＨＯＢｔ（６１ｍｇ　；　０．４０ｍｍｏ　１） をＤＭＦ　（０，５ｍＬ）に溶解し、メチレンクロライド（１０ｍＬ）で希釈し 、−ｉ。
℃に冷却した（メタノール−氷浴）。メチレンクロライド（５ｍＬ）中のＤＣＣ Ｃ８３ｍｇ　；０．４０ｍｍｏ　１）を反応混合物に加え、その溶液を一１０℃ で２０分間撹拌した後、室温で３０分間撹拌した。化合物ＸＸＩＶ−２の異性体 Ａ（実施例２３におけるＸＸｌｌｌ−４の異性体Ａ）（２０２ｍｇ　；　０．３ ４ｍｍｏ　ｌ）をメチレンクロライド（１０ｍＬ）に溶解し、上記活性化エステ ル溶液に加えた。ジイソプロピルエチルアミン（６０μｌ　；　０．３４ｍｍｏ 　１）を１度に加え、この反応混合物を一晩撹拌した。この物質を、メチレンク ロライド（１５０ｍＬ）　、ヘキサン中の２０％酢酸エチル（１５０ｍＬ）、ヘ キサン中の３０％酢酸エチル（１５０ｍＬ）、ヘキサン中の４０％酢酸エチル（ １５０ｍＬ）およびヘキサン中の５０％酢酸エチル（１５０ｍＬ）からなる段階 勾配を用いてシリカフラッシュパッド（ベッド容［６０ｍＬ）で部分的に精製し た。生成物画分を集め、蒸発に供してＸＸＩＶ−５の異性体Ａ（純度〉９０％） ３４６ｍｇ　（７１％）を得た。この物質（３００ｍｇ　：　０．２２ｍｍｏ　 １）をＨＦ（５ｍＬ）中の１０％アニソールにより０℃で１時間処理した後、Ｈ Ｆ／アニソール混合物を真空除去した。残渣をエーテルで洗浄し、ペプチドを０ ．　１％ＴＦＡを含有する水中の１０％アセトニトリル（１００ｍＬ）に溶解し 、冷凍し、凍結乾燥してＡｒｇ−ＮＭｅＬｙｓ−Ａｓｐ　（ｋ）Ｖａ　１−Ｐｈ ｅ　（（Ｉ　Ｉ　Ｉ）Ｎ−ＭｅＫ２Ｆ５−ＴＨＰ）の粗製異性体Ａ２２８ｍｇを 得た。直線的ＨＰＬＣ（０，１％ＴＦＡを含有する水中１０〜２０％勾配のアセ トニトリル）を用いた精製により、Ａｒｇ−ＮＭｅＬｙｓ−Ａｓｐ　（ｋ）Ｖａ ｌ　−Ｐｈｅ　（（Ｉ　Ｉ　Ｉ）Ｎ−ＭｅＫ２Ｆ５−ＴＨＰ）の異性体Ａ（純度 ９９％）８８ｍｇ　（４０％）、およびＡｒｇ−ＮＭｅＬｙｓ−ＡＳＩ）（ｋ） Ｖａ　１−Ｐｈｅ　（（Ｉ　Ｉ　Ｉ）Ｎ−ＭｅＫ２Ｆ５−ＴＨＰ）の異性体Ａ（ 純度９０％）６２ｍｇを得Ａｒｇ−ＮＭｅＬｙｓ−Ａｓｐ　（ｋ）Ｖａ　１−Ｐ ｈｅ　（（１分析　Ｃ３２Ｈ５２Ｎ８０８・３ＣＦ３Ｃ０２Ｈ−Ｎ２０に対する 計算値：　Ｃ，４４，０１；Ｈ，５，５４；Ｎ、１０．８０ 実測値：　Ｃ，４３，８２；Ｈ，５，４９；Ｎ、１０．５５ 上述のインビトロでのＣＥＭ細胞結合アッセイにより、全体的競合活性について 、真正ＴＨＰに対して相対的にサイモペンチン類似体をランク付けした。このア ッセイは、非放射標識ＴＨＰまたは非標識類似体とトリチウム標識ＴＨＰとが結 合において競合する能力に基づいている。競合物質の不存在下では、一定量の結 合放射活性が、暴露および温度の設定時間の関数として観察される。非放射標識 競合物の結合により、その濃度およびサイモペンチンレセブターに対する相対的 親和性に比例して、放射活性の量が減少する。
類似体は、ＣＥＭ細胞へ結合した残存放射活性の平均値に基づき最高から最低ま での順序でランク付けている。ＣＥＭ細胞の濃度は、常に一定にした。データは 、添加した競合物質のモル濃度が１０　および１０−４における測定の平均を示 している。競合物質の不存在下での放射標識ＴＨＰの結合の平均総合カウントは 、３０７８ｃｐｍ　（Ｎ＝４７）であり、真正ＴＨＰは、結合を１１５０ｃｐｍ 　（Ｎ＝７５）まで減少させた。以下の結果が得られた。
（ＩＩＩ＋ＴＩＰ　（異性体Ａ）　６５３（ＩＩＩ）Ｆ５−ＴｉＩＰ　（異性体 Ａ）　８４４ｆｉｌｌ）Ｆ５−ＴＢＰ　（異性体Ｂ）　１０９１（ＩＩＩ）Ｎ１ ｔ２Ｆ５−ＴＢＰ　（異性体Ａ）　１２３２（Ｎ’）　Ｎｌξ２　Ｆ５−丁ＵＰ 　（異性体Ａ）　１２５４（ＩＩＩＩＮＩｓ２Ｆ５−ＴＩＩＰ　（異性体Ｂ）　 １４４７（ＩＶ）　Ｎ１ｔ２Ｆ５−ＴＨＰ　（異ａ体Ｂ）　１４５３ｆｌＶ）　 Ｆ５−ＴＨＰ　（Ｘ柱体Ｂ）　１６７３（ＩＶ）　Ｎｌ！２Ａ４Ｆ’　−丁ＨＰ 　（Ｘ柱体Ａ）　１６７６（ＩＩＩ）Ｐ２Ｆ５−丁１１Ｆ　（異性体Ｂ）　１６ ８６（１）Ｎｌｅ２Ｖ”　Ｆ５−ＴＢＰ　（異性体Ｂ）　１７１３ｆｌＶ）　Ｎ １ｃ２Ａ’　Ｆ５−ＴＢＰ　（異性体Ｂ）　１７１５（ＩＶ）　Ｆ５−ＴＩＩＰ 　（異性体Ａ）　１７３５（ＩＶ）　人２Ｆ５−ＴＩＩＰ　（異性体Ａ）　１７ ８０（ＩＩＩ）ＴＩＩＰ　（異性体Ｂ）　１７８１（ＩＶ）　Ｐ２Ｆ５−ＴＩＩ Ｐ　（異性体Ａ）　１８４３ｆｌＶ）　Ｌ２Ｆ５−ＴＨＰ　（異性体Ａ）　１８ ５１（１）　Ｆ５−ＴＨＰ　（Ｃ１１２Ｎ１１１　（異性体Ａ）　１９０５（Ｉ Ｖ）　Ｐ２Ｆ５−丁ＨＰ　（異性体Ｂ）　１９９９（ＩＶＩ　ｆｌｉｃ２Ｖ５− ＴＥＰ　（Ｘ柱体Ａ）　１６００（ＩＶＩ　Ｎ１ｅ２Ｖ５−ＴＨＰ　（異性体Ｂ ）　１７１３実施例　２６ 競合的結合アッセイ 標準量の　Ｈ−サイモベンチン（３Ｈ−ＴＨＰ）の結合を阻害する能力について 、実施例１５．１７．１８．１９および２２のサイモベンチン類似体を３種の濃 度（１０’Ｍ、１０　Ｍ、および１０’Ｍ）で試験した。
以下の結果が得られた。
表４ ＴＨＰ類似体と３Ｈ−ＴＨＰとの ＣＥＭ細胞への結合における競合 ＋ＩＩＩ）Ａ　Ｆ　−ＴＢＰ　１０’Ｍ　１５４４　５０（異性体Ａ）　１０’ Ｍ　２８００　９１０−５Ｍ　３０８５ （１１１１人　Ｆ　−丁ＨＰ　１０−３Ｍ　２２１９　２８（異性体Ｂ）　１０ ’Ｍ　２９９４　３１０’Ｍ　３１３６　− （ＩＶＩＮＩｓ　Ｖ　−ＴＥＰ　１０’Ｍ　１１０９　６４（異性体Ａ）　１０ ’Ｍ　２０９１　３２１０’Ｍ　２９２６　５ （ＩＶＩ　ＮＩＣ２Ｖ５−ＴＨＰ　１０−３Ｍ　１０７６　６５（異性体Ｂ）　 １０’Ｍ　２３５１　２４１０’Ｍ　２８２６　８ （Ｉｖ）Ｎ−ＭｅＮｌｓ２ｆ５−１０−３Ｍ　１９４４　３７丁ＨＦ　（異性体 Ａ）　１０−’Ｍ　２７６８　１１１０’Ｍ　２８９２　７ （ｌｉｔ）ＬＭｒＫ２　Ｆ５−丁ＢＰ１０’Ｍ　２５５８　１７（異性体Ａ）　 １０−４Ｍ　３０８２　−０−４Ｍにおける各類似体の平均活性により競合的結 合の代表的指標が与えられる。各類似体およびＴＨＰに対する値を以（異性体Ａ ） （ＩＩ１１人’　Ｆ５−ＴＨＰ　２６０６（異性体Ｂ） （ＩＶ）　Ｎ１ｅ２Ｖ５−ＴＩＩＰ　１６００（異性体Ａ） （ＩＶ）　Ｎ１ｅ２Ｖ５−ＴＩＴＰ　１７１３（異性体Ｂ） （ＩＶ）　Ｎ−ＭｓＮＩｓ２Ｆ５−ＴＩＰ　２３５６（異性体Ａ） （Ｉ　ＩＩ）　Ｎ−ＭｅＫ２Ｆ５−ＴＨＰ　２８２０（異性体Ａ） （＋）Ｆ５−ＴＩＩＰ　２０００ 真正ＴＨＰ　１０４９本 ＊この値は、表３中の１１５０に匹敵する。
実施例　２７ ＣＥＭ細胞におけるサイクリックＧＭＰアッセイＣＥＭ細胞は、アメリカン・タ イプψカルチャー・コレクション（ロックビル、ＭＤ）から入手した。これらの 細胞を２０％血清含有ＰＲＭＩ−１６４０中でフラスコ当たり２×１０５細胞の 濃度でフラスコ内で継代培養し、ｃＧＭＰ放出アッセイに使用するために３×１ ０６細胞／　ｍ　Ｌでバイアル中に凍結保存した。このｃＧＭＰアッセイについ ては、ＲＰＭｌ培地中の最終濃度を１×１０７／ｍＬに調整した。平衡に達した 後、試験に供される化合物を加えて２分間培養した。
氷冷ＴＣＡの添加により反応を停止させた。試料を３０凍結−解凍し、ＴＣＡを エーテル抽出により除去した。凍結乾燥後、試料をアセテート緩衝液中に再懸濁 させ、ＲＩＡによりｃ　Ｇ　Ｍ　Ｐレベルを測定した。
サイモベンチンおよびサイモペンチン類似体に応答するＯＥＭ細胞中の細胞内サ イクリックＧＭＰレベルは、類似体（１）Ｎｌ　ｅ２Ｆ５−ＴＨＰ　（異性体Ａ ）および（Ｉ）Ｎｌｅ２Ｆ５−ＴＨＰ　（異性体Ｂ）についての結合アッセイを 裏付けるものであった（表５）。１０’Ｍの濃度での類似体＜１）Ｎｌｅ２Ｆ５ −ＴＩＰ　（異性体Ｂ）は、対照細胞（ｐ−Ｏ，ＯＳ、マン−ウィツトニー（Ｍ ｓｕ＋−ＷｈＨｎ！７）　）と比べｃＧＭＰを２倍増加させ、一方、類似体（Ｉ ）Ｎｌ　ｅ２Ｆ５−ＴＨＰ　（異性体Ａ）の添加においても対照細胞に匹敵すべ きレベルが示された。
表５ ＣＥＭ細胞における細胞内ｃＧＭＰ放出に対するサイモベンチンおよびサイモペ ンチン類似体の効果放出ｃＧＭＰ　ｐｍｏｌｓ／ 試料　Ｎ　１０’細胞、平均±Ｓ、　Ｄ。
真正ＴＨＰ　（１０’Ｍ）　６　１゜８±１．０（１）旧ｅ２Ｆ５−ＴｉＩＰ　 （異性体Ａ）　２　３．　１±０．３（１）Ｎｌ＜２Ｆ５−ＴＩＩＰ　（真性体 Ｂ）３　６．９±３．８実施ｆ１２８ ’ｒｈｙ”−１抗原の誘導 ｎ　ｕ　／　ｎ　ｕマウスから得た膵臓細胞群におけるＴｈｙ＋−１抗原の誘導 について研究した。’ｒｈｙ＋−１抗原の誘導の量を蛍光細胞ソーティング（ｓ ｏＮｉＢ　）により分析した。
Ｔｈｙ　−１抗原の誘導の分析は、胸腺前駆細胞源としてｎｕ／ｎｕマウスの膵 臓細胞を用いて行った。膵臓細胞を１×１０７細胞／　ｍ　Ｌの濃度で懸濁させ 、フィコール／／＼イパーク分離を用いて分画した。単離した膵臓細胞を最終濃 度１×１０６細胞／ｍＬに調整し、３７℃で４．５時間ＴＩ（Ｐまたは類似体（ ＩＶ）Ｎｌ　ｅ２Ｆ５−ＴＨＰ　（異性体Ａ）と接触させた。ついで、細胞を０ ．１％のアジドを含有するホスフェート緩衝食塩水中で洗浄し、ＦＩＴＣ標識抗 体により４℃で３０分間処理した。次に、これら細胞を熱により不活性化したウ シ胎児血清中で遠心することにより洗浄し、蛍光活性化セルソーターによる分析 のために固定した。
ＴＨＰおよび（ＩＶ）Ｎｌ　ｅ２Ｆ５−ＴＩＰ　（異性体Ａ）の双方は、１０’ Ｍの濃度で、Ｔｈｙ　−１を示す細胞の割合を増加させた。ＴＨＰまたは（ＩＶ ）Ｎ１　ｅ２Ｆ５−ＴＨＰ（異性体Ａ）のいずれかの存在下で、Ｔｈｙ−ｉ陽性 細胞は、未処理対照の２５％に対し、それぞれ３８％および４６％へ増加した。
ＴＩＰおよびａａ体（ＩＶ）Ｎｌｅ２Ｆ５−ＴＨＰ　（異性体Ａ）との接触処理 後の”ｒｈｙ　−１陽性細胞の細胞分布について得られた代表的なプロファイル を表６にＴｈｙ−１抗原の誘導 試料　Ｔｈ７−１陽性細胞（％） 未処理　２５％ 真正ＴＨＰ　（１０−３Ｍ）　２８％ （ＩＶ）　Ｎ１５２Ｆ５−ＴＨＰ　（異性体Ａ）　４６％実施例　２９ ＨＰＬＣ分析によるサイモペンチン類似体の血清中安定性の測定 試験化合物をヘパリン処理したヒト血漿およびＥＤＴＡ−処理したマウス血漿と ともに３７℃で、０ないし１０分間の特定の可変時間培養することによりＴＨＰ 類似体の血清中半減期を分析した。最終濃度が１０％ｖ　／　ｖになるようにト リフルオロ酢酸（ＴＦＡ）を添加することにより血清培養を停止させた。この混 合物を０℃に１時間保ち、遠心（１０，０００ＸＧ　１５分間）により蛋白を除 去した。上滑を集め、−２０℃で保存した後ＨＰＬＣ分析に供した。
ＴＦＡの存在下、アイソクラティック勾配の水中アセトニトリルを用いて溶出を 行った。出発物質と代謝物との間の時間依存性変換の指標としてのピーク溶出時 間を用いてＴＨＰ。
ＴＨＰ類似体および分解生成物の同定を行った。
この結果から、ＴＨＰ競合結合アッセイで良好な結果を与えた化合物は、血清中 半減期が最大に延長したことが示された。これらの結果を表７に示す。
表７ 真正ＴＨＰ　０．５　＋、！ Ａｒｇ−Ｌ７ｓ−＾５ｐ４ａｌ（ｋ）Ｐｈｅ　（異性体Ａ）　４．９２．ｃ＾ｒ ｇ−Ｐｒｏ−Ａｓｐ−４ｘｌ（ｋ）Ｐｈｅ　（異性体Ａ）　１７．０　６．０＾ ｒｇ−Ｎｌｅ−Ａｓｐ−Ｖａｔ（ｋ）Ｐｈｃ（異性体Ａ）　２１．１　１．９Ｎ −ＡＣ−＾ｒｇ−Ｎｌｚ−Ａｓｐ４ｘｌ（ｋ）Ｐｈｃ（異性体Ａ）　＞３２．０ 　５．１＾ｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｓｐ−４ａｌ（ｋ）Ｐｈｓ　（異性体Ａ）　５．８ 　２．７Ａｒｔ（ｋ）Ｎｌｅ−Ａｓｐ−Ｖｘｌ−Ｐｈｓ　−１２，５Ａｒｇ−Ｎ ｌｅ−Ａｓｐ４ａｌ（ｋ）Ｐｈｔ（異性体Ａ）　２０．０　２．５Ａｒｇ−ＮＭ ｃＮｌｅ−Ａｓｐ−ｖａｌ　ｆｋ）Ｐｈｅ（異性体Ａ、）　＞３２．０　＞３２ ．ＯＡｒｇ−Ｎｌｒ−＾５ｐ−ＶｘＩ（ｋ）ＶｘＩ　（異性体Ａ）　１．２　２ ．４Ａｒｇ−Ｎｌｒ−Ａｓｐ４ｘｌ（ｋ）Ｙｘｌ　（異性体Ｂ）　２．６　２． ４Ａｒｇ−ＮＭｃＮｌｔ−Ａｓｐ−４ａｌ（ｋ）Ｖａｌ　（異性体Ａ）　＞３２ ．０　＞３２．ＯＡｒｇ−ＮＭｅＮＩｅ−Ａｓｐ４ａｌ　（ｋ）Ｖａｔ　（異性 体Ｂ）　＞３２．０　＞３２．ＯＡｒｇ−ＮＭｃＬ７ｓ−人５ｐ（ｋ）Ｖａｌ− Ｐｈｅ　（異性体Ａ）　＞３２．０　＞３２．０＾ｒｇ　（Ｒ）Ｌ７ｓ−＾５ｐ −Ｖａｔ−Ｐｈｃ＞３２．０１３．８図　１ 酸性　＋Ｇｌｕ　ＩＥＩ、　Ａｓｐ　ＩＤＩ、システィン酸（ＣＹ（１１Ｓｅｒ 　ｔｓｌ　ＡＳｎ　（ＮＩ　Ｌｅｕ　！ＬＩ　Ｔｒｐ　（ＷＩＣｙｓ　ＩｃＩ　 Ｇｉｎ　（ＱＩ　Ｉｃｅ　（ＩＩＭｅｔ　（Ｍ） Ｃｉｆ　Ｓｏｒ　ｔ８ｕＡ　Ｐｈｇ ＭＳＯべ−９−ＡＩＯｔＢｔＪＧ ７セチルＬＹＳ　Ａｉｂ　Ｎ−Ｍｅｔ１１ｅｈａ 国際調査報告　Ｄｒ丁１．ＩＤ　０２／＋１１＋１１ｆ。
■ １　、 、　Ｉ □ ！　・ 、　１ ］　； フロントページの続き （８１）指定−ＥＰ（ＡＴ、ＢＥ、ＣＨ，ＤＥ。
ＤＫ、ＥＳ、ＦＲ，ＧＢ、ＧＲ，ＩＥ、ＩＴ、ＬＵ、ＭＣ，ＮＬ、　ＳＥ）、　 ＣＡ、ＪＰ、　ＫＲ（７２）発明者　ハイベルト、チャールズアメリカ合衆国、 カリフォルニア州 ９５１３６　、サン・ホセ、チャーチル・パーク・ドライブ　５５５ （７２）発明者　スミス、アール・レーンアメリカ合衆国、カリフォルニア州 ９４３０６−２６１８．パロ・アルド、イリマ・ウェイ　９４７ （７２）発明者　内１）逸部 神奈川県横浜市緑区梅が丘６番地２　日本たばこ産業株式会社医薬研究所内

Claims (11)

    【特許請求の範囲】
  1. １．式 Ｉ　ＩＩ　ＩＩＩ　ＩＶ Ｒ−ＡＡ１−−ＡＡ２−−ＡＡ３−−ＡＡ４−−ＡＡ５−Ｒ１（式中、ＡＡ１は 、ＬまたはＤ形のアルギニン残基であり、ＡＡ２は、ＬまたはＤ形の、塩基性ア ミノ酸残基、中性／非芳香族アミノ酸残基もしくはプロリン残基、またはそのＮ −アルキル化（１−６Ｃ）体であり、 ＡＡ３は、場合により残りのカルボキシル基がアルキル基（１−６Ｃ）でエステ ル化されていてもよいＬまたはＤ形のアスパラギン酸残基もしくはグルタミン酸 残基、またはアラニン残基であり、 ＡＡ４は、ＬまたはＤ形の中性／非芳香族アミノ酸残基であり、 ＡＡ５は、芳香族部分の１またはそれ以上の水素がＮＯ２またはハロゲンで置換 されていてもよいＬまたはＤ形の中性／芳香族アミノ酸残基またはＬもしくはＤ 形の中性／非極性／大／非芳香族アミノ酸残基、またはそのＮ−アルキル化（１ −６Ｃ）体であり、 Ｒは、アシル基（１−６Ｃ）、アリールスルホニル基、アルキルスルホニル基、 アリールアルキルスルホニル基またはアルコキシカルボニル基であり、 Ｒ１は、−ＯＨ、−ＮＲ２Ｒ３または−ＯＲ４であって、Ｒ２およびＲ３は、各 々独立して、水素またはアルキル基（１−６Ｃ）であり、Ｒ４はアルキル基（１ −６Ｃ）であり、Ｉ〜ＩＶの番号を付した結合の少なくとも１つは、−ＣＯＣＨ ２−、−ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ２−および−ＣＨ２ＮＨ−からなる群から選ばれる修 飾ペプチド結合であり、残りの結合は−ＣＯＮＨ−または−ＣＯＮ（ＣＨ３）− である）で示されるシュードペプチドまたは薬学的に許容され得るその塩。
  2. ２．式 Ｉ　ＩＩ　ＩＩＩ　ＩＶ Ｒ−ＡＡ１−−ＡＡ２−−ＡＡ３−−ＡＡ４−−ＡＡ５−Ｒ１（式中、ＡＡ１は 、ＬまたはＤ形のアルギニン残基であり、ＡＡ２は、ＬまたはＤ形の塩基性アミ ノ酸残基、中性／非芳香族アミノ酸残基もしくはプロリン残基、またはそのＮ− アルキル化（１−６Ｃ）体であり、 ＡＡ３は、場合により残りのカルボキシル基がアルキル基（１−６Ｃ）でエステ ル化されていてもよいＬまたはＤ形のアスパラギン酸残基であり、 ＡＡ４は、ＬまたはＤ形の中性／非芳香族アミノ酸残基であり、 ＡＡ５は、芳香族部分の１またはそれ以上の水素がＮＯ２またはハロゲンで置換 されていてもよいＬまたはＤ形の中性／芳香族アミノ酸残基またはＬもしくはＤ 形のバリン残基、またはそのＮ−アルキル化（１−６Ｃ）体であり、Ｒは、アシ ル基（１−６Ｃ）、アリールスルホニル基、アルキルスルホニル基、アリールア ルキルスルホニル基またはアルコキシカルボニル基であり、 Ｒ１は、−ＯＨ、−ＮＲ２Ｒ３または−ＯＲ４であって、Ｒ２およびＲ３は、各 々独立して、水素またはアルキル基（１−６Ｃ）であり、Ｒ４はアルキル基（１ −６Ｃ）であり、Ｉ〜ＩＶの番号を付した結合の少なくとも１つは、−ＣＯＣＨ ２−、−ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ２−および−ＣＨ２ＮＨ−からなる群から選ばれる修 飾ペプチド結合であり、残りの結合は−ＣＯＮＨ−または−ＣＯＮ（ＣＨ３）− である）で示されるシュードペプチドまたは桑学的に許容され得るその塩。
  3. ３．式 Ｉ　ＩＩ　ＩＩＩ　ＩＶ Ｒ−ＡＡ１−−ＡＡ２−−ＡＡ３−−ＡＡ４−−ＡＡ５−Ｒ１（式中、ＡＡ１は 、ＬまたはＤ形のアルギニン残基であり、ＡＡ２は、ＬまたはＤ形の塩基性アミ ノ酸残基、中性／非芳香族アミノ酸残基もしくはプロリン残基、またはそのＮ− アルキル化（１−６Ｃ）体であり、 ＡＡ３は、場合により残りのカルボキシル基がアルキル基（１−６Ｃ）でエステ ル化されていてもよいＬまたはＤ形のアスパラギン酸残基であり、 ＡＡ４は、ＬまたはＤ形のアラニン残基もしくはバリン残基であり、 ＡＡ５は、芳香族部分の１またはそれ以上の水素がＮＯ２またはハロゲンで置換 されていてもよいＬまたはＤ形の中性／芳香族アミノ酸残基またはＬもしくはＤ 形のバリン残基、またはそのＮ−アルキル化（１−６Ｃ）体であり、Ｒは、アシ ル基（１−６Ｃ）、アリールスルホニル基、アルキルスルホニル基、アリールア ルキルスルホニル基またはアルコキシカルボニル基であり、 Ｒ１は、−ＯＨ、−ＮＲ２Ｒ３または−ＯＲ４であって、Ｒ２およびＲ３は、各 々独立して、水素またはアルキル基（１−６Ｃ）であり、Ｒ４はアルキル基（１ −６Ｃ）であり、Ｉ〜ＩＶの番号を付した結合の少なくとも１つは、−ＣＯＣＨ ２−、−ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ２−および−ＣＨ２ＮＨ−からなる群から選ばれる修 飾ペプチド結合であり、残りの結合は−ＣＯＮＨ−または−ＣＯＮ（ＣＨ３）− である）で示されるシュードペプチドまたは薬学的に許容され得るその塩。
  4. ４．式 Ｉ　ＩＩ　ＩＩＩ　ＩＶ Ｒ−ＡＡ１−−ＡＡ２−−ＡＡ３−−ＡＡ４−−ＡＡ５−Ｒ１（式中、ＡＡ１は 、ＬまたはＤ形のアルギニン残基であり、ＡＡ２は、ＬまたはＤ形の塩基性アミ ノ酸残基、中性／非芳香族アミノ酸残基もしくはプロリン残基、またはそのＮ− アルキル化（１−６Ｃ）体であり、 ＡＡ３は、場合により残りのカルボキシル基がアルキル基（１−６Ｃ）でエステ ル化されていてもよいＬまたはＤ形のアスパラギン酸残基であり、 ＡＡ４は、ＬまたはＤ形のアラニン残基もしくはバリン残基であり、 ＡＡ５は、芳香族部分の１またはそれ以上の水素がＮＯ２またはハロゲンで置換 されていてもよいＬまたはＤ形のフェニルアラニン残基もしくはチロシン残基ま たはＬもしくはＤ形のバリン残基、またはそのＮ−アルキル化（１−６Ｃ）体で あり、 Ｒは、アシル基（１−６Ｃ）、アリールスルホニル基、アルキルスルホニル基、 アリールアルキルスルホニル基またはアルコキシカルボニル基であり、 Ｒ１は、−ＯＨ、−ＮＲ２Ｒ３または−ＯＲ４であって、Ｒ２およびＲ３は、各 々独立して、水素またはアルキル基（１−６Ｃ）であり、Ｒ４はアルキル基（１ −６Ｃ）であり、Ｉ〜ＩＶの番号を付した結合の少なくとも１つは、−ＣＯＣＨ ２−、−ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ２−および−ＣＨ２ＮＨ−からなる群から選ばれる修 飾ペプチド結合であり、残りの結合は−ＣＯＮＨ−または−ＣＯＮ（ＣＨ３）− である）で示されるシュードペプチドまたは薬学的に許容され得るその塩。
  5. ５．式 Ｉ　ＩＩ　ＩＩＩ　ＩＶ Ｒ−ＡＡ１−−ＡＡ２−−ＡＡ３−−ＡＡ４−−ＡＡ５−Ｒ１（式中、ＡＡ１は 、ＬまたはＤ形のアルギニン残基であり、ＡＡ２は、ＬまたはＤ形のリシン残基 、アラニン残基、α−アミノイソ酪酸残基、ロイシン残基、ノルロイシン残基も しくはプロリン残基、またはそのＮ−アルキル化（１−６Ｃ）体であり、 ＡＡ３は、場合により残りのカルボキシル基がアルキル基（１−６Ｃ）でエステ ル化されていてもよいＬまたはＤ形のアスパラギン酸残基であり、 ＡＡ４は、ＬまたはＤ形のアラニン残基もしくはバリン残基であり、 ＡＡ５は、芳香族部分の１またはそれ以上の水素がＮＯ２またはハロゲンで置換 されていてもよいＬまたはＤ形のフェニルアラニン残基もしくはチロシン残基ま たはＬもしくはＤ形のバリン残基、またはそのＮ−アルキル化（１−６Ｃ）体で あり、 Ｒは、アシル基（１−６Ｃ）、アリールスルホニル基、アルキルスルホニル基、 アリールアルキルスルホニル基またはアルコキシカルボニル基であり、 Ｒ１は、−ＯＨ、−ＮＲ２Ｒ３または−ＯＲ４であって、Ｒ２およびＲ３は、各 々独立して、水素またはアルキル基（１−６Ｃ）であり、Ｒ４はアルキル基（１ −６Ｃ）であり、Ｉ〜ＩＶの番号を付した結合の少なくとも１つは、−ＣＯＣＨ ２−、−ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ２−および−ＣＨ２ＮＨ−からなる群から選ばれる修 飾ペプチド結合であり、残りの結合は−ＣＯＮＨ−または−ＣＯＮ（ＣＨ３）− である）で示されるシュードペプチドまたは桑学的に許容され得るその塩。
  6. ６．修飾結合による置換が結合Ｉ〜ＩＶのうちの１箇所のみである請求項１ない し５のいずれか１項記載のシュードペプチド。
  7. ７．Ｒがアセチル基である請求項１ないし５のいずれか１項記載のシュードペプ チド。
  8. ８．Ｒ１がＮＨ２またはＯＨである請求項１ないし５のいずれか１項記載のシュ ードペプチド。
  9. ９．【配列があります】および 【配列があります】からなる群から選 ばれる請求項１ないし５のいずれか１項記載のシュードペプチド。
  10. １０．式 Ｉ　ＩＩ　ＩＩＩ　▲数式、化学式、表等があります▼（式中、ＡＡ１は、Ｌま たはＤ形のアルギニン残基であり、ＡＡ２は、ＬまたはＤ形のリシン残基、アラ ニン残基、α−アミノイソ酪酸残基、ロイシン残基、ノルロイシン残基もしくは プロリン残基、またはそのＮ−アルキル化（１−６Ｃ）体であり、 ＡＡ３は、場合により残りのカルボキシル基がアルキル基（１−６Ｃ）でエステ ル化されていてもよいＬまたはＤ形のアスパラギン酸残基であり、 ＡＡ４は、ＬまたはＤ形のアラニン残基もしくはバリン残基であり、 Ｒは、アシル基（１−６Ｃ）、アリールアルキルスルホニル基、アリールスルホ ニル基、アルキルスルホニル基またはアルコキシカルボニル基であり、 Ｒ５は、場合によりＮＯ２またはハロゲンで置換されていてもよいベンジル基、 場合によりＮＯ２またはハロゲンで置換されていてもよい４−ヒドロキシ−ベン ジル基およびイソプロピル基から選ばれるものであるか、またはそのＮ−アルキ ル化（１〜６）体であり、 Ｉ〜ＩＩＩの番号を付した結合は、それぞれ独立して、−ＣＯＮＨ−または−Ｃ ＯＮ（ＣＨ３）−である）で示されるシュードペプチド、または桑学的に許容さ れ得るその塩。
  11. １１．請求項１ないし５のいずれか１項または請求項１０記載のシュードペプチ ドの有効量と薬学的に許容され得る賦形剤とを包含する薬学的組成物。
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