JPH06500798A - 合成カルシトニンペプチド - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 合成カルシトニンペプチド 発明の背景 本発明は、様々な種の天然カルシトニンの低カルシウム血症作用と類似したもの を有する合成ペプチドに関する。

特に、人間に投与された場合にヒトのカルシトニンの低カルシウム血症効力より も高く、かつ／または異種のカルシトニンよりも低い免疫原性を人間において有 する合成カルシトニンペプチドに関する。本発明は、さらに、これらの合成ペプ チドを作るための合成方法にも関する。

カルシトニンは、カルシウム代謝の調節にかかわる３２−アミノ酸ペプチドホル モンである。カルシトニンは、完全には理解されていないメカニズムに従って、 骨代謝の調節および血液カルシウムレベルの恒常性の調節において、副甲状腺ホ ルモンと関係する。正常な骨代謝は、骨溶解性の吸収および新しい骨の骨芽細胞 形成のバランスをもって吸収空間を埋める。カルシトニンは副甲状腺ホルモンの 骨溶解性活性を妨害するようであり、破骨および骨細胞活性を変えることによっ て骨吸収を禁止するように直接作用する。カルシトニンは骨芽細胞の刺激によっ て新しい骨形成を促すことができる。

カルシトニンは血清カルシウムレベルに対して正規化する効力を有する。正常な 人間では、骨吸収は少なく、かつ外因性カルシトニンは低カルシウム血症効果を 有しない。

しかし、いくつかの病状態では、妨害のない骨吸収はカルシウムおよびアルカリ 性ホスファターゼを循環内に放出し、かつコラーゲンを含む骨マトリックスの分 解により、尿のヒドロキシプロリンの症状を引起こす。生理的メカニズムによる と、高められた血清カルシウムレベルは、低カルシウム血症の作用を示すカルシ トニンの分泌を促す。

骨破壊の禁止、新しい骨の形成の促進およびカリウム血症の制御に加えて、カル シトニンはカルシウム尿症を減らし、セル内のカルシウムを固定させる。カルシ トニンは重要な鎮痛薬的特性をも有する。

外因性カルシトニンは骨の代謝回転または吸収が促進される場合の疾患に治療学 的に有用である。この種の１つの重要な病気は骨粗しよう症、特に閉経後の種類 のものであり、骨質量における累進的な損失がある。骨粗しよう症におけるカル シトニンの効能は合計身体カルシウムを増やすことができるその能力によって定 められる。この種の別の疾患はパンエツト病（変形性骨炎）であり、正常な骨の 特徴的構造が欠けている新しい（パジエティック）　（ｐａｇｅｔ＊Ｃ）骨にお ける不均衡な形成が伴う骨の過度な吸収によって特徴付けられる。有効なカルシ トニンの治療は、この病の人間に見られるアルカリホスファターゼおよび尿のヒ ドロキシプロリンの高められた血清レベルを減少させる。パンエツト病における カルシトニン療法の利益は、骨再形成の放射線学証拠によって示されるが、これ は骨生検に見られる破骨の数が減ることに相関し、骨吸収における減少と一致す る。

カルシトニン療法は、持続するなら命にもかかわる低カルシウム血症の治療に役 立つ。低カルシウム血症は一次性甲状腺機能冗進症および悪性の病気、主にガン および悪性骨髄腫に起こる。この症状は、腫瘍が骨に転移した場合および転移な しのガンに起こる。

カルシトニンは、パリエツト病、骨粗しよう症、悪性骨溶解、および骨粗しよう 症的を椎骨折のように骨の吸収に伴う骨の痛みを和らげる。カルシトニンの痛み 軽減作用は、骨（こ対するホルモンによって引出される効果から異なるように見 える。カルシトニン療法が用いられる場合、たとえばパリエツト病の治療におい て用いられる場合、鎮痛効果は骨の病気における生化学的マーカーにおいてすべ ての変化を進行させ、骨の損傷の回復期を経験する患者においても見られる（ゲ ナリ（Ｇｅｎｎｓｒｉ　）　Ｃ，およびり、アグヌスディ　（Ａｇｎｏｓｄｅｉ ）　、ｒカーレントセラピュティックリサーチＪ　（Ｃｕｔｒｅｎｔ　Ｔｈｅｒ ａｐｅｕｔｉｃ　Ｒｅ＋ｅｘｒｅｈ）　４４　（５）　＋　７１２−７２２　（ １９８８）’）。

カルシトニンは哺乳類、鳥および魚を含む多様なを椎動物の種において見られる 。ホルモンは、哺乳類の甲状腺にあり、下等を椎動物のさい後体腺にあるＣ細胞 によって分泌される。ヒトのカルシトニン（ｈＣＴ）は以下のアミノ酸配列を有 する： Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−ＮＨ２カルシトニンは、下等を椎動物および 高等を椎動物の間で、アミノ酸配列においてかなりの違いを見せ、高度に保護さ れた残基はカルシトニン分子の２つの端部において集まっており、これが生物学 的活性に重要であると信じられている。たとえば、１−７ジスルフイド架橋およ びＣ−末端プロリンアミドは、すべての種の間で不変である。いくつかのほかの 不変であるアミノ酸残基はＮ−およびＣ−末端端部近くで起こる。分子の中央部 分、位置１０ないし２７は、ペプチドの効力および持続期間を制御するものと思 われ、アミノ酸組成においてかなり変わる。プレイマー（Ｂｒｅｉｍｅｒ　）　 、Ｌ、Ｈ，、？ツクインタイア（Ｍａｃｌ１７ｒｅ　）、■０、およびザイジ（ ２ａｉｄｉ　）　、Ｍ、　、ｒＢｉａｃｈｅｍ、Ｊ、　Ｊ２５５　：　３７７− ３９０　（１９８８）は、種々の種からのカルシトニンペプチドの構造および生 物学的特性を検討し、この情報はここに引用により援用される。

天然カルシトニンペプチドの効力は人間において広く変化し、ヒト以外のある種 のカルシトニンは、ヒトのカルシトニンよりも人間にとって効力があるようだ。

鮭、鰻、および鳥類のような起源においてさい後体であるカルシトニンは、ヒト または豚の甲状腺カルシトニンよりも効力がある。鮭、鰻、豚およびヒトのカル シトニンは、パリエツト病、骨粗しよう症、および悪性の高カルシウム血症の治 療ならびに骨の痛みのために現在臨床で使われている。

カルシトニンペプチドの構造に対する効力の相関はよく理解されていない。向上 した効力は、ホルモンの受容体により好ましく結合されるペプチド立体配座を可 能にするアミノ酸配列によるものかもしれない（マルクス（Ｍａｒｘ）ら、ｒｓ ｃｉｅｎｃｅＪ１７８：９９８−１００１　（１９７２）。

より小さいあまりかさばらないアミノ酸によってもたらされる特徴であるより柔 軟な立体配座は、生物学的活性に影響するものと定められた（エパンド（Ｅｐｘ ｏｄ　）ら、「Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｆｒ７Ｊ　２５　：１９６４−１９６８　（ １９８８）　）　。鰻および鮭のカルシトニンの同一の生物学的効力は、類似し た基本構造および類似した柔軟性を基準として説明できるかもしれない。ヒト以 外のカルシトニンの比較的高い効力に対する代替の基準としては、特定の種の特 徴であるこれらのカルシトニンのアミノ酸配列が、ヒトのカルシトニンよりも人 体において代謝的低下に対してより大きな抵抗性をもたらし、この理由によって より持続する効果があるのかもしれない（ヘイベナー（Ｈａｂｅｎｅｒ　）ら、 ｒＮａｌａｒｅ　（Ｌ。

ｎｄｏｎ）Ｊ２３２：９１−９２　（１９７１））。たとえば、鮭のカルシトニ ンは投与後約６時間効力を有するが、ヒトのカルシトニンは約２時間効力を持つ 。

しかし、そのより高い効力にもかかわらず、さい後体カルシトニンのようなヒト 以外のカルシトニンは、人間の臨床使用としては完全には満足できるものではな い、というのはこれらのカルシトニンの低く保護された中央部分が生体内におい て免疫原として働くからである。したがって、結果の抗体産物はその有用性を制 限することになる。

さらに、皮下注射によってヒトに投与された後、すべての天然カルシトニンは比 較的短い半減期を有するが、それは、血漿酵素によって蛋白分解を遅らせる作用 をする種の違いにもかかわらず、それらは迅速な腎臓および組織の浄化作用を受 けるからである。

生体内においてより大きな安定性のため、かつ／または本来のホルモンよりもよ り高い効力およびより長い持続作用のため、臨床使用においてより有効なカルシ トニンペプチドを有することは役に立つ。さらに、本来のホルモンよりも免疫原 性が低いカルシトニンペプチドを有することは有用である。さらに、親油性およ び疎水性が高められた類似体は、薬物動態学を変え、向上した非経口的、鼻また は口による生物学的利用率を有する。

したがって、本発明の目的は、人間の病気の治療において、ヒトおよびほかの種 からの本来のカルシトニンよりもより効果がありかつ抗原性の低い合成カルシト ニンペプチドを提供することである。本発明のさらなる目的は、これらのカルシ トニン類似体の合成方法を提供することである。

発明の要約 本発明は低カルシウム血症ペプチドの類似体、薬事的に許容される塩類またはそ の組成物、その調製方法、およびを推動物における病気の治療における用途に関 する。

本発明のある局面に従って、カルシトニンペプチドの類似体である合成ペプチド が提供され、低カルシウム血症カルシトニン活性を持ち、 Ｙ’　−ｘＣＴ の式を有し、Ｙは位置０．ｘＣＴのＮＨ２−末端にある部分であり、かつ工ない し８の炭素原子の分枝されたまたは分枝されないアルキル側鎖を有するし−もし くはＤ−アミノ酸、Ｌ−もしくはＤ−メチオニン、Ｌ−もしくはＤ−トレオニン 、Ｌ−もしくはＤ−セリン、またはその類似体からなるグループから選ばれた脂 肪族アミノ酸であり、さらに　ｘＣＴは本来のカルシトニン、たとえばヒト（ｈ ＣＴ）サケ（ｓＣＴ）、ウナギ（ｅＣＴ）、ラット（ｒＣＴ）、ブタ（ｐＣＴ） 、ウシ（ｂＣＴ）、ヒツジ（ＯＣＴ）、ニワトリ（ＣＣＴ）、またはラビットの カルシトニンのアミノ酸配列を表わす。好ましいペプチドはＹＯがＬｅｕであり 、特に好ましいのは（Ｌｅｕ’）−ｈａｔ　；　（Ｌｅｕ’）−ｅＣＴ；　（Ｌ ｅｕＯ）−ｓＣＴ；　（Ｌｅｕ’）−ｃＣＴ；および（Ｌｅｕ’）−ｒＣＴであ る。

カルシトニン類似体の別のクラスは、 ８−ｘＣＴ の式を有し、ＹおよびｘＣＴは上記で規定されたとおりである。好ましいペプチ ドはＹ８がＬｅｕであり、特に好ましいのは（Ｌｅｕ８）−ｈＣＴ；　（Ｌｅｕ ８）−ｂＣＴ；（Ｌｅｕ８）　−ｃｃＴ；　（Ｌｅｕ８）−ｅＣＴ；　（Ｌｅｕ ８）−ｏＣＴ　；　（Ｌｅｕ８）−ｐＣＴ　；　（Ｌｅｕ８）−ｒＣＴ；　（Ｌ ｅｕ８）−ｓＣＴであり、ｈＣＴ、ｂＣＴ、ｃＣＴ、ｅＣＴ、ＯＣＴ、　ｐＣＴ ＳｒＣＴ、およびｓＣＴは上記で規定されたとおりである。

本発明は０−および８−位置においてＹアミノ酸置換を有するカルシトニン類似 体を含む。この基の好ましいペプチドは（Ｌｅｕｏ”　）−ｂＣＴ　；　（Ｌｅ ｕｏ・８）−ｃｃＴ　；（Ｌｅｕ０８）−ｅＣＴ　；　（Ｌｅｕ”’　）−ｈＣ Ｔ　；　（Ｌｅｕ０８）−ｏＣＴ　；　（Ｌｅｕｏ・８）−ｐＣＴ　；　（Ｌｅ ｕ”’　）−ｒＣＲ；　（Ｌｅｕ”　）−ｓＣＴである。本発明のさらに他の局 面に従って、ＹｏもしくはＹ８アミノ酸置換を有する、または０−および８−位 置の両方においてＹアミノ酸置換を有し、位置４．１２．１６．２１もしくは２ ７で少なくとも１つの付加的Ｙアミノ酸置換がある、カルシトニンペプチド類似 体が提供される。この基の好ましいペプチドは（Ｌ　ｅ　ｕＯ・８・”）　−ｈ ＣＴ　；　（Ｌ　ｅ　ｕＯ８”＋６）−ｈＣＴ　；　（Ｌｅｕ’８１６）−ｈＣ Ｔ；　（Ｌｅｕ’”）−ｈＣＴ；　（Ｌｅｕ””）−ｈＣＴ；　（Ｌｅｕ０１２ ”６）−ｈＣＴ　；　（Ｌｅｕ８′２）−ｈＣＴ；　（Ｌｅｕ８・””’　）− ｈＣＴ　；　（Ｌｅｕ８′６）−ｈＣＴ　；または（Ｌｅｕ１２、１６　）　− ｈ　ｃ　Ｔであり、ｈＣＴはヒトカルシトニンのアミノ酸配列を表わす。

開示されたすべてのカルシトニン類似体では、ＹはＧｌｙ、Ａｌａ、Ｌｅｕ、Ｉ 　ｌｅ、Ｖａ　ｌ、Ｔｈｒ、Ｎｏｒ−Ｌｅｕ、Ｎｏ　ｒ−Ｖａ　ｌ、Ｍｅ　ｔ、 またはＳｅｒからなるグループから好ましくは選択される。Ｌｅｕは特に好まし い。

本発明の別の局面に従って、ｙｏ付加もしくはＹ８置換を有する、または位置４ ．１２．１６．２１もしくは２７においてＹ置換と共に同じ置換を有するカルシ トニン類似体が提供され、そこにおいてｘＣＴは位置１９ないし２２において１ つ以上のアミノ酸残基が削除されているカルシトニン配列を表わす。この基にお ける好ましいペプチドは（Ｌｅｕ０８．ｄｅｓ　（１９））−ｈＣＴ；　（Ｌｅ ｕＯ”。

ｄｅ　ｓ　（１９−２２））−ｈＣＴ　；　（ＬｅｕＯ８１２，ｄｅｓ　（１９ ））−ｈＣＴ　；　（Ｌｅｕ０８１２．ｄｅｓ　（１９−２２））−ｈＣＴ；　 （ＬｅｕＯ”１２・１６．ｄｅｓ　（１９））−ｈＣＴ　；　（Ｌｅ　ｕ”８１ ２”６．ｄｅ　ｓ　（１９−２２））−ｈＣＴ；　（Ｌｅｕ０８．ｄｅｓ　（１ ９））−ｅＣＴ；（Ｌｅｕ０’、ｄｅｓ　（１９−２２））−ｅＣＴ；　（Ｌｅ ｕ０８．ｄｅｓ　（１９））−ｓＣＴ；　（Ｌｅｕ”８．ｄｅｓ　（１９−２２ ））−ｓＣＴ；　ＣＬｅｕ０８．ｄｅｓ　（１９））−ｅＣＴ；および（Ｌｅｕ ｏ８．ｄｅｓ　（１９−２２））−ｅＣＴであり、ここにおいてｈＣＴはヒトカ ルシトニン、ｅＣＴはウナギカルシトニン、およびｓＣＴはサケカルシトニンで ある。

本発明のさらに他の局面に従って、薬事的に許容される担体に組合わせて、本発 明の少なくとも１つのカルシトニン類似体の有効な治療量を含む製薬の調合が提 供される。

本発明はさらに開示されたカルシトニン類似体の用途を含む、病気治療のための 方法を提供する。低カルシウム血症を治療するための方法は、このような治療を 必要とする前記哺乳類に、本発明の合成カルシトニンペプチドの、血液カルシウ ムを減少する有効な量を投与するステップを含む。パリエツト病または骨粗しよ う症を治療するために提供される方法は、冒されている患者に、骨吸収を減らす またはなくすのに十分な期間の間、本発明の合成カルシトニン類似体の、骨吸収 を妨害する量を投与することを含む。

本発明のさらに他の治療方法は、骨粗しよう症、骨粗しよう症の骨折、パリエツ ト病および悪性の骨溶解に伴う骨痛みの治療向けられ、述べられた病気に伴う骨 の痛みを経験している患者に、本発明の少なくとも１つの合成カルシトニン類似 体の、鎮痛量を投与することを含む。

発明の詳細な説明 本来のカルシトニンの類似体であるが、アミノ酸残基が添加、置換または削除さ れた低カルシウム血症ペプチドは合成され、これらのカルシトニン類似体は、本 来の種および異なる種において、本来のカルシトニンペプチドよりもより効力が ある生物的反応をもたらす。好ましいカルシトニン類似体は、本来のヒトカルシ トニン自体よりも人間においてより効力がある種である。

本発明のカルシトニンペプチドは、重要な薬理的特性を有する。これらは、たと えば、悪性の高カルシウム血症のようなカルシウムの高められた血清レベルに伴 う病に苦しむ患者の血清血漿カルシウムレベルを下げるために、ならびにパリエ ツト病および骨粗しよう症、特に老化した種類の治療のために、用いられること ができる。本発明の合成カルシトニン類似体の使用は、人間においてヒト以外の 種の本来のカルシトニンを使うことによって一般的に経験される免疫原的活性を 減じる。類似したカルシトニンペプチドは、たとえば１９８９年１２月６日に出 願された同時係属出願第０７／４４６．９３２号および１９９０年８月２４日に 出願された第０７１５７２，６７４号において既知である。しかしながら、本発 明のカルシトニン類似体はすべて〇−位置において、付加的脂肪族アミノ酸Ｙを 含む、すなわち本来のカルシトニンｘＣＴのＮＨ２−末端残基に付加される、ま たは本来のカルシトニンのｘＣＴの８位で置換される脂肪族アミノ酸Ｙを含む。

Ｙ０カルシトニン類似体は位置４．８．１２．１６．２１または２７において、 置換された脂肪族アミノ酸残基Ｙを有することもでき、類似的に、Ｙ８カルシト ニン類似体も位置４．１２．１６．２１または２７で置換された脂肪族アミノ酸 残基を有することができる。

Ｙは好ましくはＬ−またはＤ−ロイシン（Ｌ　ｅ　ｕ）であるが、工ないし８の 炭素原子の分校されたまたは分校されないアルキル側鎖を有するし−もしくはＤ −アミノ酸、たとえばグリシン、アラニン、β−アラニン、バリン、ノルバリン 、α−アミノ−ｎ−酪酸、γ−アミノーｎ−酪酸、β−アミノ−イソ酪酸、イソ ロイシン、ノルロイシン、メチオニン、トレオニン、セリン、ホモセリン、また はその類似体からなるグループから選択された脂肪族アミノ酸である。

以下において、これらの合成カルシトニン類似体は本発明のカルシトンペプチド と呼ぶ。

本発明の好ましいカルシトニンペプチドは、（Ｌｅｕ’）−ｘＣＴまたは（Ｌｅ ｕ８）　−ｘＣＴの式を有し、ｘＣＴは好ましくはヒトカルシトニンであるが、 サケ（ｓＣＴ）、ウナギ（ｅＣＴ）、ラット（ｒＣＴ）、ウシ（ｂＣＴ）、ヒツ ジ（ＯＣＴ）、ブタ（ｐＣＴ）、ニワトリ（ｃＣＴ）またはラビットカルシトニ ンである。

カルシトニンペプチドの立体配座の柔軟性はその生物学的有効性を高めることが できると示唆されている（イーバンド（Ｅｐｘｎｄ　）　、ＲｌＭ、ら、「バイ オケミストリ」（Ｂ１ｏｃｈｅｍｉｓ＋ｒ７）　２５　：１９６４−１９６８　 （１９８６）　）。

強直ならせんの形成を促すかさのある残基が存在しないところにおいて柔軟性が 向上することが示されている（シーザー（Ｋａｉｓｅ＋）　、Ｅ、Ｔ、およびケ シ−（Ｋｅｄｘｉ）、Ｆ、Ｊ。

、「サイエンスＪ　（Ｓｃｉｅｎｃｅ　）　２２３　：　２４９−２５５（１９ ８４））。

したがって、本発明のカルシトニン類似体は低カルシウム血症ペプチドを含み、 部分的にもとのカルシトニンに対応し、位置０においてＹアミノ酸を加え、かつ ／または位置８においてＹアミノ酸を置換し、柔軟性は、多様なよりかさばらな い部分によっていくつかのアミノ酸残基を置換することによって高められた。し たがって、位置４．１２．１６および２７におけるもとのカルシトニンのものに 対応するアミノ酸残基は、ロイシンによって本発明のカルシトニン類似体の基に おいて置換されている。

このタイプの特に好ましいカルシトニンペプチドは：（Ｌｅｕ’）−ｈＣＴ；　 （Ｌｅｕｏ・８）−ｈＣＴ；　（Ｌｅｕ０８１２）−ｈＣＴ　；　（Ｌｅｕｏ” １２１６）−ｈＴ　；　（Ｌｅ　ｕＢ１２）　−ｈＣＴ　；　（Ｌ　ｅ　ｕ８１ ２１６）　−ｈＣＴ　；　（Ｌｅｕ８１６）−ｈＣＴ　；　（Ｌｅｕ”６）−ｈ ＣＴ、（Ｌｅｕ０１２）−ｈＣＴ；　（Ｌｅｕｏ”１６）−ｈＣＴ；　（Ｌｅｕ ”１６）　−ｈＣＴ　；および（Ｉ　ｅｕＯ”６）−ｈＣＴであり、ｈＣＴはヒ トカルシトニンのアミノ酸配列を表わす。

このタイプのカルシトニンペプチド類似体の第２のグループでは、ペプチド鎖の 柔軟性は特定のアミノ酸残基をなくすことによって高められる。たとえば、残基 １９−２２を含むアミノ酸配列は生物学的活性にとって可欠であると示され、し たがって本発明に従ったカルシトニンペプチドの１つのグループは、本来カルシ トニンの少なくとも１個および多くてすべての残基がなくされた低カルシウム血 症ペプチドを含む。したがって、上記で開示されたＹＯおよびＹ８カルシトニン 類似体のいずれもは、位置１９．２０．２１および２２においてアミノ酸がさら に削除されてもよい。

このタイプの好ましいカルシトニン類似体は　［ＹＯｌｄｅｓ（１９）　コ　− ｘＣＴ、　［Ｙ’、ｄｅｓ　（１９−２２）］　ｘＣＴ、　［Ｙ　０８　、　ｄ ｅｓ　（Ｌ９）　コ　−ｘ　ＣＴ、　［Ｙ　０８、ｄｅｓ　（１９−２２）］　 −ｘＣＴ、［Ｙｏ−８−”、ｄｅｓ　（１９）］　−ｈＣＴ、［Ｙ’・８・”、 ｄｅｓ　（１９−２２）］　−ｈＣＴ、［Ｙｏ”＋２・”　、ｄｅ　ｓ　（１９ ）］　−ｈＣＴ。

［Ｙ”８１２＝６．ｄｅｓ　（１９−２２）］　−ｈＣＴ、［Ｙａ、ｄｅｓ　（ １９）］　−ｘＣＴ、［Ｙａ、ｄｅｓ　（１９−２２）］　−ｘＣＴ、［Ｙａ、 １２．ｄｅｓ　（１９）］　−ｈＣＴ、［Ｙａ”、ｄｅｓ　（１９−２２）］　 −ｈＣＴ、［Ｙａ”１６．ｄｅ　ｓ　（２２）］−ｈＣＴおよび［Ｙａ、＋２． １６゜ｄｅｓ　（１９−２２）］　−ｈｃＴ１？ある。

すべての既知の天然カルシトニンは、３２アミノ酸の配列を含むポリペプチドで ある。カルシトニンペプチド鎖にかかわる各アミノ酸の位置は、鎖の一方端にお いてＣｙｓの位置１で始まりかつ他方端で位置３２でＰｒｏで終る許容されたプ ロシージャに従って番号付けられる。この同じ番号材はシステムは、天然に起こ るカルシトニンに存在する３２アミノ酸ユニツトよりも少ないものであっても、 すべてのカルシトニンペプチド鎖に適用される。用いられるアミノ酸省略記号は 、ペプチド分野において一般に用いられかつ文献において、たとえばＩＵＰＡＣ −ＩＵＢコミッションオンバイオケミカルノーメンクラッチャ、ｒＪ、Ｂｉｏｌ 、　Ｃｈｅｒｎ、Ｊ２４７．９７９−９８２　（１９７２）の文献に示されてい るものである。ヒトカルシトニンは現在周知のヒトカルシトニン配列を含む。こ こで述べられるアミノ酸は、特に言及しない限りＬ−形である。

リジン、アルギニン、およびヒスチジンのような基本アミノ酸を含む本発明のカ ルシトニンペプチドは、塩化物、アセテート、リン酸塩、クエン酸塩、コハク酸 塩、シュウ酸塩などのような塩類の形で存在してもよい。アセテートおよび塩酸 塩類が特に好ましい。本発明の目的のため、本発明のペプチドおよびその酸添加 塩類は１つでありかつ同じであると考えられる。

カルシトニンは未熟なラットの血液カルシウムを、骨吸収を妨げることによって 低下させる。したがって、その効力は、検査動物の血清カルシウムを１０％下げ るために要するペプチドのマイクログラムを決定することによって評価できる。

本発明の合成カルシトニンペプチドの生物学的活性の生体内テスト結果は、例３ ０および例３１において示される。テストされたすべてのペプチドはその効力、 作用の持続時間、またはその両方において本来のヒトカルシトニンに比べて優れ ていた。

治療的応用 本発明の低カルシウム血症カルシトニンペプチドは、病の治療において天然のカ ルシトニンに比べて多くの利点を提供する。その主要な利点は、もとのカルシト ニンに比べて効力が増加していることである。たとえば、Ｌｅｕ８・０１２−　 ｈ　ＣＴは、本来のヒトカルシトニンのものと類似したアミノ酸配列を保持しな がらサケカルシトニン配列に実質的に等しい生物学的活性を有する。

したがって、本発明は、人間および動物医学における薬物として用いられること ができる薬事的製剤の調製のための本発明のカルシトニンペプチドおよびその薬 事的に許容される塩類の使用に関する。この目的のため、少なくとも１つの賦形 剤または助剤とともに、投与に適する形に変えることは可能である。適する賦形 剤は腸内（たとえば経口）、非経口、局所的、経皮的または鼻腔からの投与に適 しかつカルシトニンペプチドと反応しない有機または無機物質である。示される 調合は殺菌された、および／または潤滑剤、保存安定剤、湿滑剤、乳剤、緩衝剤 、着色剤、および甘味剤のような補助剤を含んでもよい。

活性ペプチドは非経口で、すなわち皮下、筋肉内または静脈注射で投与されても よい。注入使用のための適する薬事的な製剤は、溶剤もしくは散布剤、および注 入する溶剤もしくは散布剤の即座な調製のための粉末を含む。カルシトニンペプ チドを凍結乾燥させて、得られた凍結乾燥物を、たとえば注入のためのプロダク トの調製のために用いることができる。すべての場合、製剤は無菌でなければな らず、溶剤は簡単に注射できるという点で流体でなければならない。製造および 保管の条件下で安定していなければならず、またたとえば細菌および真菌のよう な微生物の汚れに対して保存できなければならない。担体はたとえば水、または グリセロールのようなポリオル、およびその適切な混合物を含む溶媒または散布 媒体であることができる。筋肉内で使用するための組成は、張度を調整するため および溶液を緩和するために少量の塩類、酸および塩基を含んでもよい。

適する緩和および等張性試剤は当業者にとって容易に定められる。

経口または鼻による投与は、親油性が高い類似体に特に可能である。経口摂取の ための製剤はタブレット、カプセル、錠剤、粉末活性剤のアンプル剤の形、また は油性もしくは水性の懸濁剤または溶液の形にある。タブレットまたはほかの非 液体経口組成物は、薬事的組成の製造のため当該技術において既知である許容可 能な賦形剤を含んでもよ（、乳糖または炭酸カルシウムのような希釈薬、ゼラチ ンまたはデンプンのような結合剤、および食べやすくするために甘味剤、味付剤 、着色または保存剤からなるグループから選択された１つ以上の物質を含む。さ らに、このような経口による調製物は、腸内の崩壊および吸収をさらに遅らすた めに既知の技術によってコーティングされてもよい。

このような経口組成および調製物は、組成のパーセンテージが広範囲にわたって もよいが、活性ペプチドの少なくとも０．１％を含むべきである。このような組 成物における治療学的に活性な混合物の量は、消化のための適切な量で得られる 適切な投薬量のものである。

カルシトニンペプチドのリポソームの調製物は、引用により援用される米国特許 第４，６９２．４３３号「哺乳類の血清カルシウムレベルを調整するための方法 および組成」で開示されているように、経口投与を高めるために有用である。

鼻による投与の製剤は、液体の形であってもよく、また当該分野において訓練さ れているものにとって周知である吸収促進物質、たとえば水溶性有機酸のラクト ンまたは類似した機能の他の化合物を含んでもよい。鼻腔による製剤はたとえば メチオニンのようなアミノ酸であるエキステンダーとともにカルシトニンペプチ ドを含むエアロゾルの形であってもよい。Ｙ、スズキちの米国特許第４．６１３ ゜５００号に開示されるような粉末鼻腔製剤はカルシトニンペプチドを患者に投 与する有用な方法である。調合物は、手によってまたは推進薬によって推進でき る、たとえばクロロフルオロカーボンまたは圧縮ガスのような測られた噴射を提 供するための装置にパッケージされてもよい。

経皮的適用の製剤は適切な局所的キャリアまたはバッチとして任意に組込まれた カルシトニンペプチドを含むことができる。カルシトニンはたとえばジメチルス ルホキシド（ＤＭＳＯ）　、ジメチルホルムアミド、ジメチルアセトアミド、ま たはアゾン０、アザシクロへブタン−２−ワンのような浸透強化剤と組合わせら れることができる。局所的キャリアおよび浸透性強化物の使用はともにプラーグ （ＢｌａＩＩｇ）、Ｓ、第８７章、「レミングトンズファルマキュテイカルサイ エンセスＪ　（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ　Ｐｈａｒｍａｃｅａｊｉｃａｌ　５ｃ ｉｅｎｃｅｓ　）　、第１５版、マツクパブリシング社（Ｍａｃｋ　Ｐｕｂｌｉ ｓｈｉｎｇ　Ｃｏ、）イーストン、ＰＡ　１８０４２　（１９７５）において開 示される。

本発明は、上皮小体亢進症、ビタミンＤ過度投与、乳児の特発性低カルシウム血 症、骨折、悪性骨溶解、クル病、腎性骨ジストロフィ、パリエツト病、多様病因 の骨粗しよう症、特に一般の老人性のもの、神経性ジストロフィ、骨溶解性の転 移、およびこれらの病に伴う骨痛み、加えて関節リューマチの治療のように、人 間または動物の体の治療学的療法のため、および血清カルシウムの減少もしくは 正規化がめられる、病を制御するため、または骨代謝に影響するための本発明の カルシトニンペプチドの用途に関する。カルシウムペプチドは胃の分泌を妨げる ので、急性膵臓炎および胃腸障害、特に胃の疾患の治療のために役立つ。

これらの低カルシウム血症ペプチドは既知の治療カルシトニンと同様に、１日当 りキログラム体重当り０．０５ないし１００国際単位（ＩＵ）にわたる範囲の量 で投与される。最適の結果をもたらすための好ましい投与量は０．２ないし１０ 　ＩＵ／ｋｇ／日である。ペプチドは少なくて週に１もしくは２回、または多く て１日２回与えることができる。特定の場合における活性化合物の実際の好まし い量は用いられる特定カルシトニンペプチド、特定の製剤、および治療される特 定の障害に応じて変わることは理解されるであろう。特定の患者に対する投与養 生法は、臨床指示を含めた従来の条件を用いて決定されることができる。

悪性の高カルシウム血症の治療では、バグエツト病、骨粗しよう症および骨の痛 みの投薬量（０，２ないし２　ＩＵ／ｋｇ／日）よりもいささか多い投薬量が必 要かもしれない（５ないし２０　ＩＵ／ｋｇ／日）。経口、鼻腔、および皮下に よる投与は１゜５ないし１００倍多い投薬量を必要とする。

以下に説明する化学的反応は、本発明のカルシトニンペプチドの調製に対してそ の一般的適用の言葉で開示される。

時には、反応は開示された範囲内に含まれる各ペプチドに対して記載されている ように適用できないかもしれない。

これが起こるペプチドは、当業者にとって容易に認識される。このような場合す べてにおいて、当業者にとって既知である従来的変形によって、たとえば関与す る基を適切に保護することによって、代替の従来的試薬に変えることによって、 または反応条件のルーチン変形のどちらかによって、反応はうまく行なうことが できる。代替的に、ここに開示されるほかの反応、およびほかの態様では従来的 な反応は、本発明の対応するカルシトニンペプチドの調製に適用することができ る。すべての調製方法において、すべての出発原料は既知である、または既知の 出発原料から容易に調製すことができる。

ペプチド合成：本発明の低カルシウム血症ペプチドは固相法、液相法または遺伝 子工学に従って合成することができる。液相法、特に固相法が特に好ましい。こ れらの方法は当業者にとって周知であり、かつたとえばバラニー（Ｂ２ｒａＩＩ Ｙ）、Ｇ、およびＲ，Ｂ、　メリフィールド（Ｍｅｒｒｉｆｉｅｌｄ）の「ザ・ ペプチドＪ　（Ｔｈｅ　Ｆ’ｅｐ＋１ｄｅｓ）　、第２巻、編集Ｅ。

グロスおよびＪ、メインホッファ、アカデミツクプレス、ニューヨーク、３−２ ８４頁（１９７９）の文献で詳細に説明されている。Ｃ−末端アミド基を含むカ ルシトニンのようなペプチドの合成は、好ましくは４−メチルベンツヒドリルア ミン−ジビニルベンゼン−共重合スチレンで行なわれ、これは一般に市場で入手 できるＭＢＨＡ樹脂と呼ばれ、５ＰＰＳにおけるその調製および応用は当該分野 において文献がたくさんあり、ビニツタ（Ｐｉｅｃｅ）　、Ｐ、Ｇ。

およびＧ、　Ｒ，マーシャル（Ｍａｒ＋ｈａｌｌ）、ｒＪ、　Ｃｈｅｗ、Ｓｏｃ 、ＤＪ、６５０−６５１　（１９７０）、およびチャナバサバイア（Ｃｈａｎｎ ａｂａｓａｖａｉａｈ　）　、Ｋ、　＆　Ｊ、　Ｍ、スチュアート（Ｓ＋ｅｖａ ｒｔ　）、ｒＢｉｏｃ）ｕＩＩｌ、Ｂｉｏｐｈｙｓ、Ｒｅｓ、Ｃｏｗｍｕｎ、Ｊ ８６．１２６６−１２７３、（１９７９）参照。本発明において説明されるペプ チドは、市場で入手可能であるＭＢＨＡ樹脂（Ｂｏ　ｃ−Ｐ　ｒ　ｏ−ＭＢＨＡ ）に結合されるｔ−ブチルオキシカルボニル−プロリンから始まって調製される 。Ｂｏ　ｃ−Ｐ　ｒ　ｏ−ＭＢＨＡ樹脂は無水トリフルオロ酢酸（Ｔ　Ｆ　Ａ） で処理される、またはジクロロメタン（ＴＦＡ−ＤＣＭ）における２５ないし７ ５％混合のＴＦＡで処理されて、アミノ基を脱保護し、結果の塩はＤＣＭ（ＴＥ Ａ−ＤＣＭ）における５ないし２０％のトリエチルアミンを使ってまたはＤＣＭ 　（Ｄ　Ｉ　ＥＡ−ＤＣＭ）における５ないし２０％のジイソブロイルエチルア ミンを使って中和されて、Ｈ２Ｎ−Ｐ　ｒ　ｏ−ＭＢＨＡ樹脂を与える。適当な 保護基を含む配列（ＡＡ３１）における次のアミノ酸は、Ｎ、Ｎ’　−ジシクロ へキシルカルボジイミド（Ｄ　ＣＣ）およびＮ−ヒドロキシベンゾトリアゾール （ＨＯＢｔ）を使ってＨ２Ｎ−Ｐ　ｒ　ｏ−ＭＢＨＡ樹脂に結合される。結合反 応は１ないし１８時間およびトルエン、ジクロロメタン（ＤＣＭ）、ジメチルホ ルムアミド（ＤＭＦ）またはテトラヒドロフラン（ＴＨＦ）またはその混合のよ うな適切な溶媒で行なわれる。望ましいペプチド鎖は適当なアミノ酸誘導体を使 って脱保護、中和および結合反応を連続的に繰り返すことによって組立てられる 。アミノ酸は１つ以上の反応官能基を含み、５ｐｐｓの様々な工程に関与しない １つ以上のこれらの基をマスクする必要があることは、当業者にとって周知であ る。本発明で説明される様々なペプチドの５ＰＰＳのために使われる市場で入手 可能な誘導体化されたアミノ酸は、Ｂｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ，Ｂｏｃ−Ａｒｇ　（ Ｔｏｓ）−ＯＨ，Ｂｏａ−Ａｓｎ−ＯＨ，Ｂｏｃ−Ａｓｐ（ｏ−シクロヘキシル ）−ＯＨ，Ｂｏｃ−Ａｓｐ　（ＯＢｚ　１）−ＯＨ，Ｂｏｃ−Ｃｙｓ　（Ｓ−４ −ＭｅＢｚ　１）−ＯＨ，Ｂｏｃ−Ｇｉｎ−ＯＨＳＢｏｃ−Ｇｌｕ　（０−シク ロヘキシル）−ＯＨ，Ｂｏｃ−Ｇｌｕ　（ＯＢｚ　１）−０Ｈ１Ｂｏｃ−Ｇｌｙ −ＯＨ，Ｂｏｃ−Ｈｔｓ　（Ｔｏｓ）−ＯＨＳＢｏｃ−Ｈｉ　ｓ　（Ｂｏｍ）− ＯＨ１Ｂｏｃ−Ｉ　１　ｅ−ＯＨ，Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ，Ｂｏｃ−Ｌｙｓ　（ Ｃ１−Ｚ）−ＯＨ，Ｂｏ　ｃ−／／Ｉ１０イシン、Ｂ　ｏ　ｃ　−／　ルバリン 、Ｂｏｃ−Ｍｅ　ｔ−ＯＨ，Ｂｏｃ−Ｐｈｅ−ＯＨＳＢｏｃ−Ｐｒｏ−ＯＨ，Ｂ ｏｃ−３ｅ　ｒ　（Ｂｚ　１）−ＯＨＳＢｏｃ−Ｔｈｒ　（Ｂｚｌ）−ＯＨ，Ｂ ｏｃ−Ｔｈｒ　（Ｂｚｌ）−ＯＨ，Ｂｏｃ−Ｔｒｐ−ＯＨ，Ｂｏｃ−Ｔｒｐ　（ ホルミル）−ＯＨＳＢｏｃ−Ｔｙｒ　（Ｂｒ−Ｚ）−ＯＨ，およびＢｏｃ−Ｖａ 　１−ＯＨである。合成の後、ペプチド樹脂はフッ化水素で処理されてペプチド を放出し、それがさらにクロマトグラフィーによってさらに精製される。

当業者は、前の説明を用いて、その最大限において本発明を使用することができ ると信じられている。本発明は以下の例を用いて詳細に述べられるが、説明され る方法は以下に与えられる例に限定されず、記載されるすべてのペプチドの調製 に適用することができる。

したがって以下の好ましい実施例は、単に例示的なものであり、いかなる場合に おいても残りの開示に対して限定するものではない。以下の例において、すべて の温度は摂氏温度において変えられずに述べられており、特に言及しない限りす べての部分およびパーセンテージは、重量である。

Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−ＮＨ２ 樹脂ペプチド合成：Ｂｏｃ−Ｐｒｏ−ＭＢＨＡ樹脂（２ｇ１１ｍｍｏｌ）はベッ クマン９９０　Ｂペプチドシンセサイザ（ベックマンインストラメンツ、パロア ルト、カリフォルニア）の反応容器に入れられ、以下の操作が行なわれた。

各ステップは特に明記しない限り１回行われ、各ステップ後の試・薬および溶媒 は、窒素の濾過によってペプチド樹脂から分離された。

ステップ　試薬／溶媒量／回数　混合時間（分）Ｌ　ＤＣＭ　（３０ｍ！、　３ 回）■、５２　ＴＦＡ−ＤＣＭ（１：ｌ）　（３０ｍｌ）　１．５３　ＴＦＡ− ＤＣＭ（１：Ｉ）　（３０ｍｌ　３０．０４　０ｅＭ　（３０ｍ１．３回）■、 ５５　Ｍｅｔｈａｎｏｌ　（３０ｍｌ、　３回）■。

６　ＤＣＭ　（３０ｌｌ１ｌ、　３回）ｌ、５７　ＴＦＡ−ＤＣＭ（１：１）　 （３０ｍｌ　１．５８　ＴＦＡ−ＤＣＭ（１：ｌ）　（３０ｍｌ　５．０９　Ｄ ＣＭ　（３０ｍｌ、　３回）　１．５１０　ＤＭＦ　（３ｅｍ１．３回）１５１ １　Ｂｏｃ−Ｔｈｒ（Ｂｒｌ）−０Ｈ／ＨＯＢｔ／ＤＣＣ（各４　ｍｍｏｌ）Ｄ ＭＦ　２０　ｍｌ　２４０．０＊１２　ＤＣＭ　（３０ｍ１．３回）１．５１３ 　Ｍｅｔｈａｎｏｌ　（３０ｍｌ、　３回）１．５１４　０ｅＭ　（３０ｍｇ、 ３回）１．５＊結合反応は、この場合のように平均４時間、またはニンヒドリン テスト（シーザー（Ｋａｉｓｅ＋）　Ｅ、Ｔ、ら、［Ａｎａｌ、　Ｂｉｏｃｈｅ ｍ、Ｊ　３４　：　５９５−８．１９６９）が遊離アミノ基の不在を示す負の結 果を示すまで行なわれた。同じ反応シーケンスは、適当なアミノ酸誘導体を使っ て、必要なペプチド鎖が樹脂で組立てられるまで繰り返された。この合成の完了 の後、樹脂は容器から取出され真空で乾燥された。

フッ化水素（ＨＦ）を使った樹脂−ペプチドの分解：乾燥されたペプチド樹脂（ １ｇ）、アニソール（１ｍｌ）およびｐ−クレゾール（０，１ｇ）はＫｅｌ　Ｆ 反応容器に入れられた。容器は液体窒素の浴槽に入れられ、無水ＨＦ　（１５ｍ ｇ）は容器内に凝縮された。反応混合物は一１０℃で１時間撹拌され、ＨＦは真 空下の蒸発によって取除かれた。残基はドライエーテル（５０ｍｇ）で粉砕され 、ろ過され、付加的量のエーテル（３＊５０ｍｌ）によって洗浄された。混合物 におけるペプチドプロダクトは氷酢酸（３＊５０ｍｌ）で抽出することによって 隔離され、凍結乾燥されて溶媒を取除いた。

ジスルフィド結合形成：位置１および７でシスチン残基に自由スルフヒドリル基 を含む線状ペプチドは、蒸留水（１ｍｇ当り５ｍ１）に溶かされ、２４時間の間 ｐＨ７゜５で空気酸化にさらされた。溶剤は溶けない材料を取除くために濾過さ れ、濾過されたものはプロダクトを白い粉末として得るように凍結乾燥された。

ほかのプロシージャ、たとえばイオジンまたはフェリシアン化カリウムとの酸化 を用いることができる。

ペプチド精製二上記で得られたペプチド粉末（２００ｍｇ）はＩＮ酢酸ｃａｍｌ ）で溶かされ、セファデックスＧ−２５（ごく微細）カラム（１，５ｃｍｘｌＯ Ｏｃｍ）に入れられ、ＩＮ酢酸で溶離された。ペプチドを含む溶離断片は貯留さ れ、凍結乾燥された。結果のペプチド（５０ｍｇ）は、ウオーダーズ（Ｗａ　ｔ 　ｅ　ｒ　ｓ）　Ｃ−４カラムおよび水中０．１％ＴＦＡないし水中０．１％Ｔ ＦＡの７０％アセトニトリルの緩衝液勾配を使って、既成の逆相高速りロマトグ ラフィ−（ＲＰ−ＨＰＬＣ）によってさらに精製された。純ペプチドを含む画分 （分析的ＨＰＬＣによって定められる）は混合され、プロダクトは凍結乾燥によ って分離された。ペプチドの純度はＨＰＬＣによって９５％より高く、アミノ酸 分析は酸加水分解（６Ｎ　ＨＣＩ、１１０℃、２４時間）が続いて、予期された アミノ酸比をもたらした。

例１ａ：　［Ｖａｌ’、Ｌｅｕ８”６］　−ｈＣＴ；例１ｂ：　［Ｉｌｅ’、Ｌ ｅｕｓ・””］−ｈＣＴＨ例１ｃ：［Ｍｅｔ’、Ｌｅｕ８１２１６］−ｈＣＴＨ 例１ｄ：［Ｔｈｒ’、　Ｌｅｕ　８・　”　１６　コ　−　ｈＣＴ、例　１ｅ： 　［Ｓｅｒ’。

Ｌｅｕｌｌ・”’　］　−ｈＣＴ　；例１ｆ　：　［Ａ１ａ’、Ｌｅｕｌｌ２． １６３　１．ＣＴ、例１ｇ：　［Ｎｏｒｖａｌｉｎｅ’。

Ｌｅｕ８・”１６］−ｈＣＴ；および例１ｈ：［Ｎｏｒｌｅｕｃ　ｉｎｅ’、Ｌ ｅｕ８１２１６コーｈＣＴは、最後の結合サイクルの間適切なアミノ酸誘導体を 使うことを除いて、上記の方法に従って調製された。

例１ｔ　：　［Ｌｅｕ０８”６．ｄｅｓ　（１９）］　−ｈＣＴ；例１　ｊ　： 　［Ｌｅ　ｕ”８”６．　ｄｅ　ｓ　（１９−２２）コーｈＣＴ、例１に：　［ Ｖａｌ’、Ｌｅｕ””’、ｄｅｓ（１９）］−ｈＣＴ、例１１　：　［Ｖａ　ｌ ’、　Ｌｅｕ８１２１６、ｄｅｓ　（１９−２２）］　−ｈＣＴＨ例１ｍ：　［ ＩＬｅＯ，Ｌｅｕ８”１６．ｄｅｓ　（１９）］−ｈＣＴ；例１ｎ：［Ｉ　ｌｅ ’、Ｌｅｕ”２１６．ｄｅｓ　（１９−２２）］　−ｈＣＴ、例１ｏ：　［Ｍｅ ｔｏ、Ｌｅｕ”１２°”、ｄｅｓ（１９）　］　−ｈＣＴ　、例１　ｐ　；　［ Ｍｅｊ　Ｏ、ｌ、　ｅｕ８．＋２．１６　、ｄｅｓ　（１９−２２）　コ　−ｈ ＣＴ、　例１ｑ：［ＴＨｒｏ、　Ｌｅｕ　８　］２１６　、　ｄｅｓ　（１９） 　コ　−ｈＣＴ、例１　ｒ　：［Ｔｈｒ’、Ｌｅｕ８・１２・１６．ｄｅｓ　（ １９−２２）］−ｈＣＴ、例ｉｓ　：　［５ｅｒＯ，Ｌｅｕ８”６．ｄｅｓ（１ ９）　コ　−ｈＣＴ、例１　ｔ　：　［Ｓｅｒ’、　Ｌｅｕ”　１２１’、ｄｅ ｓ　（１９−２２）］−ｈＣＴＨ例１ｕ：［Ａｌａｏ、　Ｌｅｕ　８　””’、 　ｄｅｓ　（１９）　コ　−　ｈＣＴ、例１　ｖ　：［Ａｌａ’、Ｌｅｕ　８　 ”　６　、　ｄｅｓ　（１９−２２）　コ　−ｈＣＴ、例１ｗ：　［Ｎｏｒｖａ ｌｉｎｅ’、Ｌｅｕ”１２１６、ｄｅｓ　（１９）］−ｈｃＴ；例１ｘ：　［Ｎ ｏｒｖａｌｉ　ｎｅ’　、Ｌｅｕ”２・１６．ｄｅ　ｓ　（１９−２２）］　− ｈＣＴ；例１ｙ：　［Ｎｏｒｌｅｕｃｉｎｅ’、Ｌｅｕ８”’６、ｄｅｓ　（１ ９）］−ｈＣＴ、および例１ｚ：［Ｎｏｒｌｅｕｃｉｎｅ’、Ｌｅｕ”２゛１６ ．ｄｅｓ　（１９−２２）］−ｈＣＴは、示されるようにアミノ酸１９または１ ９ないし２２に対する結合サイクルをなくすことを除いて、上記の方法に従って 調製された。

Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−ＮＨ２ Ｂｏｃ−Ｐｒｏ−ＭＢＨＡ樹脂（２ｇ、Ｉｍｍｏ　ｌ）から始まって、タイトル のペプチドは適切なアミノ酸誘導体を用いて合成された。樹脂は次に濾過され、 真空の下で乾燥された。樹脂からのペプチドの分解、精製および特性付けは例１ で記載されるように行なわれた。

例２ａ　：　［Ｖａｌｏ、Ｌｅｕ８”］−ｈＣＴＨ例２ｂ：［１１ｅ’、Ｌｅｕ ８１２］−ｈＣＴＨ例２ｃ：［Ｍｅｔ’。

Ｌ　ｅ　ｕ　８．＋２コ　−　ｈＣＴ、例　２ｄ：　［Ｔｈｒ’、　Ｌｅｕ”２ ］−ｈＣＴ、例　２ｅ　：　［Ｓｅｒ’、　Ｌｅｕ”２コ　−　ｈＣＴ。

例２ｆ　：　［ＡｌａＯ，Ｌｅｕ”’］−ｈＣＴＨ例２ｇ＝［Ｎｏｒｖａｌｉｎ ｅ’、Ｌｅｕ８”］　−ｈＣＴおよび例２ｈ：　［Ｎｏｒｌｅｕｃｉｎｅ’、Ｌ ｅｕ”］　−ｈＣＴは、最後の結合サイクルの間適切なアミノ酸誘導体を用いる ことを除いて、上記の方法に従って調製された。

例２　ｔ　：　［Ｌｅｕｏ””、　ｄｅ　ｓ　（１９）　］　−ｈＣＴ　；例２ ｊ　：　［Ｌｅｕ０８”、ｄｅｓ　（１９−２２）］　−ｈＣＴ；例２に：　［ Ｖａｌ’、Ｌｅｕ８・１２．ｄｅｓ　（１９）］−ｈＣＴ、例２１　：　［Ｖａ ｌ’、Ｌｅｕ”１２．ｄｅｓ　（１９−２２）］　−ｈＣＴ、例２ｍ：　［１１ ｅ’、Ｌｅｕ”２゜ｄｅｓ　（１９）］　−ｈＣＴ；例２ｎ：　［１１ｅＯ，Ｌ ｅｕ”１２．ｄｅｓ　（１９−２２）］−ｈＣＴ、例２ｏ：［Ｍｅｔ’、Ｌｅｕ ”’、ｄｅｓ　（１９）］　−ｈＣＴ：例２ｐ：［Ｍｅｔ’、　Ｌｅｕ　８１２ ．　ｄｅｓ　（１９−２２）　コ　−ｈｃＴ；例２ｑ　：　［Ｔｈｒ’、Ｌｅｕ ８１２．ｄｅｓ　（１９）］−ｈＣＴ、例２ｒ：　［Ｔｈｒ’、Ｌｅｕ８°１２ ．　ｄｅｓ　（１９−２２）］　−ｈＣＴ、例２ｓ　［Ｓｅｒ’、Ｌｅｕ８．１ ２゜ｄｅｓ　（１９）］−ｈＣＴＨ例２ｔ：　［Ｓｅｒ’、Ｌｅｕ”２．ｄｅｓ 　（１９−２２）］−ｈｃＴＨ例２ｕ：［ＡＩａ’、Ｌｅｕ”１２．ｄｅｓ　（ １９）］−ｈＣＴ；例２ｖ：［Ａ１ａ’、Ｌｅｕ８・”、ｄｅｓ　（１９−２２ ）］　−ｈＣＴ；例２Ｗ：　［Ｎ０ｒｖａｌ　１ｎｅ０．Ｌｅｕ”１２．ｄｅＳ 　（１９）　］　−ｈＣＴ　、例２ｘ：　［Ｎｏｒｖａｌ　ｉｎｅ’。

Ｌｅｕ８１２．ｄｅｓ　（１９−２２）］−ｈＣＴ；例２ｙ。

［ＮｏｒｌｅｕｃｉｎｅＯ，Ｌｅｕ”１２．ｄｅｓ　（１９）コ−ｈＣＴ、およ び例２ｚ：　［Ｎｏｒｌｅｕｃｉｎｅ’、Ｌｅｕ””、ｄｅｓ　（１９）］−ｈ ＣＴは、示されるようにアミノ酸１９または１９ないし２２の結合サイクルをな くすことを除いて、上記方法に従って調製された。

例３　［Ｌｅｕ０８コーｈＣＴの合成 Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ａｓｎ−Ｌｙｓ−Ｐｈａ−Ｈｉｓ−Ｔｈｒ−Ｐｈａ−Ｐｒｏ− Ｇｌｎ−Ｔｈｒ−Ａｌａ−工１ａ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｐｒｏ− ＮＨ２ Ｂｏｃ−Ｐｒｏ−ＭＢＨＡ樹脂（２ｇｓ　Ｉｍｍｏ　ｌ）から始まって、タイト ルのペプチドは適切なアミノ酸誘導体を用いて合成された。樹脂は次に濾過され 、真空の下に乾燥された。樹脂からのペプチドの分解、精製および特徴付けは例 １において記載されているように行なわれた。

例３ａ：　［Ｖａｌ’、Ｌｅｕ’］−ｈＣＴＨ例３ｂ＝［１１ｅ’、Ｌｅｕ８］ −ｈＣＴＨ例３ｃ：［Ｍｅｔ’。

Ｌｅｕ８］−ｈＣＴＨ例３ｄ：　［Ｔｈｒ’、Ｌｅｕ８］　−ｈＣＴ、例３ｅ　 ：　［Ｓｅｒ’、Ｌｅｕ８］　−ｈＣＴ；例３ｆ　：　［Ａｌａ’、ＬｅｕＢ］ −ｈＣＴ；例３ｇ：［Ｎｏｒｖａｌｔｎｅ’、Ｌｅｕ８］−ｈＣＴ；および例３ ｈ：［Ｎｏｒｌｅｕｃｉｎｅ’、Ｌｅｕ８］−ｈＣＴは、最後の結合サイクルの 間適切なアミノ酸誘導体を用いることを除いて、上記の方法に従って調製された 。

例３ｔ：　［Ｌｅｕ０８．ｄｅｓ　（１９）］　−ｈＣＴ；例３ｊ　：　［Ｌｅ ｕ　０８　、ｄｅｓ　（１９−２２）　コ　−ｈＣＴ。

例３に：　［Ｖａｌ’、Ｌｅｕ’、ｄｅｓ　（１９）　コ　−ｈｃＴ；例３１： 　［Ｖａｌ’、Ｌｅｕ”、ｄｅｓ　（１９−２２）コ　−ｈＣＴ　、例３ｍ＋　 ［Ｉ　ｌｅ’、Ｌｅｕ　ｓ　、ｄｅｓ　（１９）　］　−ｈＣＴ　、例３ｎ：　 ［１１ｅ’、Ｌｅｕ’、ｄｅｓ（１９−２２）］−ｈＣＴ、例３ｏ：　［Ｍｅｔ ’、Ｌｅｕ８、ｄｅｓ　（１９）］　−ｈＣＴＨ例３ｐ　＋　［Ｍｅ　ｔ’　、 　Ｌｅｕ８．ｄｅｓ　（１９−２２）］−ｈＣＴ；例３Ｑ：［Ｔｈｒ’、Ｌｅｕ ８．ｄｅｓ　（１９）］−ｈＣＴ；例３ｒ：［Ｔｈｒ’、Ｌｅｕ”、ｄｅｓ　（ １９−２２）］　−ｈＣＴ　Ｈ例３ｓ　：　［５ｅｒ０．Ｌｅｕ８．ｄｅｓ　（ １９）］　−ｈＣＴ；例３ｔ　：　［５ｅｒＯ，Ｌｅｕ８．ｄｅｓ　（１９−２ ２）］−ｈＣＴ；例３ｕ：　［ＡＩａ’、Ｌｅｕ’、ｄｅｓ　（１９）　］　− ｈＣＴ　、例３ｖ：　［Ａ１ａ’、ＬｅｕＢ、ｄｅｓ（１９−２２）　］　−ｈ ＣＴ　、例３ｗ：　［Ｎｏｒｖａｌ　ｉｎｅ’、Ｌｅｕ’、ｄｅｓ　（１９）］ −ｈＣＴ；例３ｘ：［Ｎｏｒｖａｌｉｎｅ’、Ｌｅｕ’、ｄｅｓ　（１９−２２ ）］−ｈＣＴ、例３ｙ：　［Ｎｏｒｌｅｕｃｉｎｅ’、Ｌｅｕ’、ｄｅｓ　（１ ９）］−ｈＣＴ；および例３ｚ：［Ｎｏｒｌｅｕｃｉｎｅ’、Ｌｅｕ’、ｄｅｓ 　（１９−２２）］　−ｈＣＴは、示されるようにアミノ酸１９または１９ない し２２に対する結合サイクルをなくしたことを除いて、上記方法に従って調製さ れた。

Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−ＮＴ（２ Ｂｏｃ−Ｐｒｏ−ＭＢＨＡ樹脂（２ｇｓ　１ｍｍｏｌ）から始まって、タイトル のペプチドは適切なアミノ酸誘導体を用い６て合成された。樹脂は次に濾過され 、真空の下に乾燥された。樹脂からのペプチドの分解、精製および特徴付けは例 １において記載されているように行なわれた。

例４ａ　：　［Ｖａｌ’］−ｈＣＴ；例４ｂ：　［Ｉｌｅ’］−ｈＣＴ、例４ｃ ：　［Ｍｅｔ’］−ｈＣＴ；例４ｄ：［Ｔｈｒ’］−ｈＣＴ；例４ｅ：［Ｓｅｒ ’コーｈＣＴ、例４ｆ　：　［Ａｌａ’］　−ｈＣＴ；例４ｇ：　［Ｎｏｒｖａ ｌｉｎｅ’］−ｈＣＴ；および例４ｈ：　［ＮｏｒｌｅｕｃｉｎｅＯ］−ｈＣＴ は、最後の結合サイクルの間適切なアミノ酸誘導体を用いることを除いて、上記 の方法に従って調製さＢｏｃ−Ｐｒｏ−ＭＢＨＡ樹脂Ｃ２ｇ５１ｍｍｏ　１）か ら始まって、タイトルのペプチドは適切なアミノ酸誘導体を用いて合成された。

樹脂は次に濾過され、真空の下に乾燥された。樹脂からのペプチドの分解、精製 および特徴付けは例１において記載されているように行なわれた。

例６　：　［Ｌｅｕ８１２］　−ｈＣＴの合成１　２　３　４　５　６　７　Ｂ 　９１０１１１２１３１４１５ＣＹ　Ｓ　−Ｇ　ｌ　ｙ−Ａｓ　ｎ　−Ｌｅ　ｕ −５ｅ　ｒ−Ｔｈ　ｒ　−ＣＹ　Ｓ　−Ｌｅ　ｕ−Ｌｅｕ−ＧＩ　Ｙ−Ｔｈｒ− Ｌｅ　ｕ−sｈｒ−ｃ　１　ｎ−ＡＳｐ− −−−Ｓ １６　１７　１８　１９　２０　２１　２２　２３　２４　２５　２６　２７　 ２Ｂ　２９　３０Ｐｈｅ−Ａｓｎ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−Ｈｉｓ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ− Ｐｒｏ−Ｇｌｎ−Ｔｈｒ−Ａｌａ−工１ｅ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ｂｏ　ｃ −Ｐ　ｒ　ｏ−ＭＢＨＡ樹脂（２ｇ、１ｍｍｏ　ｌ）から始まって、タイトルの ペプチドは適切なアミノ酸誘導体を用いて合成された。樹脂は次に濾過され、真 空の下に乾燥された。樹脂からのペプチドの分解、精製および特徴付けは例１に おいて記載されているように行なわれた。

Ａｌａ−Ｐｒｏ−ＮＨ２ Ｂｏ　ｃ−Ｐ　ｒ　ｏ−ＭＢＨＡ樹脂（２ｇ、１ｍｍｏ　１）から始まって、タ イトルのペプチドは適切なアミノ酸誘導体を用いて合成された。樹脂は次に濾過 され、真空の下に乾燥された。樹脂からのペプチドの分解、精製および特徴付け は例１において記載されているように行なわれた。

Ｂｏａ−Ｐｒｏ−ＭＢＨＡ樹脂（２ｇ、１ｍｍｏ　ｌ）から始まって、タイトル のペプチドは適切なアミノ酸誘導体を用いて合成された。樹脂は次に濾過され、 真空の下に乾燥された。樹脂からのペプチドの分解、精製および特徴付けは例１ において記載されているように行なわれた。

Ｌｅｕ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ−Ａｓｎ−Ｌｅｕ−Ｓｅｒ−Ｔｈｒ−Ｃｙｓ−Ｍｅｔ− Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ｔｈｒ−Ｇｌｎ−Ｉ Ａｓｐ−Ｌａｕ−Ａｓｎ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−Ｈｉｓ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｐｒｏ− Ｇｌｎ−Ｔｈｒ−Ａｌａ−工１ｅ−Ｇ１ｙ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｐｒｏ− ＮＴ（２ Ｂｏ　ｃ−Ｐ　ｒ　ｏ−ＭＢＨＡ樹脂（２ｇ、１ｍｍｏ　１）から始まって、タ イトルのペプチドは適切なアミノ酸誘導体を用いて合成された。樹脂は次に濾過 され、真空の下に乾燥された。樹脂からのペプチドの分解、精製および特徴付け は例１において記載されているように行なわれた。

Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−ＮＨ２ Ｂｏａ−Ｐｒｏ−ＭＢＨＡ樹脂（２ｇ、１ｍｍｏ　りから始まって、タイトルの ペプチドは適切なアミノ酸誘導体を用いて合成された。樹脂は次に濾過さ、れ、 真空の下に乾燥された。樹脂からのペプチドの分解、精製および特徴付けは例１ において記載されているように行なわれた。

例１０ａ：　［Ｖａｌ’、Ｌａｕ８”コーｈＣＴ、例１０ｂ：　［１１ｅ’、Ｌ ｅｕ”’］−ｈＣＴＨ例１０ｃ：［Ｍｅｔ’、　Ｌｅｕ　８１６コ　−　ｈＣＴ 、例　１０ｄ：　［Ｔｈｒ’。

Ｌ　ｅ　ｕ”　”］　−ｈ　ＣＴ　；例１０ｅ：　［Ｓｅｒ’、Ｌａｕ８”、’ １−ｈＣＴ、例１０ｆ　：　［ＡＩａ’、Ｌｅｕ”６］　−ｈＣＴ；例１０ｇ： 　［Ｎｏｒｖａｌｉｎｅ’、Ｌａｕ８”］−ｈＣＴ、および例ＩＱｈ：　［Ｎｏ ｒｌｅｕｃｉｎｅ’。

Ｌｅｕ”６］−ｈＣＴは、最後の結合サイクルの間適切なアミノ酸誘導体を用い ることを除いて上記方法に従って調製された。

例１１　：　［Ｌｅｕ”２］　−ｈＣＴの合成Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−ＮＨ２ Ｂ　ｏ　ｃ−Ｐ　ｒ　ｏ−ＭＢＨＡ樹脂（２ｇｓ　１ｍｍｏ　ｌ）から始まって 、タイトルのペプチドは適切なアミノ酸誘導体を用いて合成された。樹脂は次に 濾過され、真空の下に乾燥された。樹脂からのペプチドの分解、精製および特徴 付けは例１において記載されているように行なわれた。

例１１ａ：　［Ｖａｌ’、Ｌｅｕ＋２］　−ｈＣＴ；例１１ｂ　：　［１１ｅ　 Ｏ、Ｌｅｕ’　２　コ　−ｈＣＴ、例１１ｃ：［Ｍｅｔ’、　Ｌｅｕ’　２　コ 　−　ｈＣＴ、例１ｉｄ：　［Ｔｈｒ’。

Ｌｅｕ’　２］−ｈＣＴ；例１ｉｅ　：　［Ｓｅｒ’、Ｌｅｕ’２］−ｈＣＴ　 ；　例１１ｆ　：　［Ａｌａ’、Ｌｅｕ”　コ　−６０１１例１１ｇ＋　［Ｎｏ ｒｖａｌ　ｉｎｅ’、Ｌｅｕ’　”］−ｈＣＴ、および例１１ｈ：　［Ｎｏｒｌ ｅｕｃｉｎｅ’。

Ｌｅｕ”　］−ｈＣＴは、最後の結合サイクルの間適切なアミノ酸誘導体を用い ることを除いて、上記方法に従って調製された。

例１２　：　［Ｌｅｕ８］　−ｅＣＴの合成Ｓ　Ｓ Ｂｏｃ−Ｐｒｏ−ＭＢＨＡ樹脂（２ｇｓ　１ｍｍｏ　ｌ）から始まって、ペプチ ド鎖は適切な保護されたアミノ酸誘導体を用いて組立られた。樹脂からのペプチ ドの分解、ジスルフィド架橋の形成、精製および特徴付けは例１において記載さ れているプロシージャに従って行なわれた。

５　ｓ Ｇｌ　ｕ−Ｌａｕ−Ｈｉｓ−Ｌｙｓ　−Ｌｅｕ−Ｇｌｎ−Ｔｈｒ−Ｔｙｒ−Ｐｒ ｏ−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｂｏｃ−Ｐｒｏ−ＭＢ ＨＡ樹脂（２ｇｓ　１ｍｍｏ　１）から始まって、ペプチド鎖は適切な保護され たアミノ酸誘導体を用いて組立られた。樹脂からのペプチドの分解、ジスルフィ ド架橋の形成、精製および特徴付けは例１において記載されているプロシージャ に従って行なわれた。

例１３ａ＋　［ＶａｌＯ，Ｌｅｕ８コーｅＣＴＨ例１３ｂ＝［１１ｅ’、Ｌｅｕ ８］　−ｅＣＴＨ例１３ｃ：　［Ｍｅｔ’。

Ｌｅｕ８］−ｅＣＴ；例１３ｄ：　［Ｔｈｒ’、Ｌｅｕ８］−ｅＣＴ；例１３ｅ ：　［Ｓｅｒ’、Ｌｅｕ８］　−ｅＣＴ；例１３ｆ　：　［ＡＩａ’、Ｌｅｕ８ コーｅＣＴ；例１３ｇ：［Ｎｏｒｖａｌ　ｔｎｅ’、Ｌｅｕ８］−ｅＣＴ；およ び例１３ｈ：　［Ｎｏｒｌｅｕｃｉｎｅ’、Ｌｅｕ’ｌ　−ｅＣＴは、最後の結 合サイクルの間適切なアミノ酸誘導体を用いることを除いて、上記の方法に従っ て調製された。

例１３ｉ　：　［Ｌｅｕ０’、ｄｅｓ　（１９）］　−ｅＣＴ；例１３ｊ　：　 ［Ｌｅｕ”８．ｄｅｓ　（１９−２２）］　−ｅＣＴ；例１３に：　［Ｖａｌ’ 、Ｌｅｕ’、ｄｅｓ　（１９）］−ｅＣＴＨ例１３１　：　［Ｖａｌ’、Ｌｅｕ ’、ｄｅｓ　（１９−２２）　コ　−　ｅＣＴ；　例１３ｍ：　［１１ｅ’、　 Ｌｅｕ　８　。

ｄｅｓ（１９）　コ　−ｅＣＴ；　例１３ｎ：　［Ｉ　ｌｅ’、Ｌａｕ８．ｄｅ ｓ　（１９−２２）］−ｅＣＴ；例１３ｏ：［Ｍｅｔ’、Ｌｅｕ”、ｄｅｓ　（ １９）］−ｅＣＴ；例１３ｐ：［Ｍｅｔ’、Ｌａｕ８．ｄｅｓ　（１９−２２） ］−ｅＣＴ；例１３ｑ：　［Ｔｈｒ’、Ｌｅｕ’、ｄｅｓ　（１９）］　−ｅＣ Ｔ；例１３ｒ：　［Ｔｈｒ’、Ｌｅｕ”、ｄｅｓ　（１９−２２）　コ　−　ｅ ＣＴ；　例１３ｓ　：　［Ｓｅｒ’、　Ｌｅｕ’、　ｄｅｓ　（１９）］−ｅＣ Ｔ；例１３ｔ：　Ｃ３ｅｒＯ，Ｌｅｕ”、ｄｅｓ　（１９−２２）］−ｅＣＴ； 例１３ｕ：［ＡＩａ’、Ｌａｕ８．ｄｅｓ　（１９）］　−ｅＣＴＨ例１３ｖ： ［ＡｌａＯ，Ｌｅｕ’、ｄｅｓ　（１９−２２）］　−ｅＣＴ：例１３ｗ：　［ Ｎｏｒｖａｌｉｎｅ’、Ｌａｕ８．ｄｅｓ（１９）］−ｅＣＴＨ例１３ｘ：　［ Ｎｏｒｖａｌ　ｉｎｅ’。

Ｌｅｕ”、ｄｅｓ　（１９−２２）　コ　−ｅｃＴ；　例１３ｙ　：［Ｎｏｒｌ ｅｕｃｉｎｅ’、Ｌａｕ８．ｄｅｓ　（１９）］−ｅＣＴ；および例１３ｚ：　 ［Ｎｏｒｌｅｕｃｉｎｅ’。

Ｌａｕ８．ｄｅｓ　（１９−２２）コーｅＣＴは、示されるようにアミノ酸１９ または１９ないし２２に対して結合サイクルをなくすことを除いて、上記方法に 従って調製された。

例１４　：　［Ｌｅｕ’］　−ｅＣＴの合成Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｒｏ−ＮＨ２ Ｂｏ　ｃ−Ｐ　ｒｏ−ＭＢＨＡ樹脂（２ｇ、１ｍｍｏ　ｌ）から始まって、ペプ チド鎖は適切な保護されたアミノ酸誘導体を用いて組立られた。樹脂からのペプ チドの分解、ジスルフィド架橋の形成、精製および特徴付けは例１において記載 されているプロシージャに従って行なわれた。

例１４ａ：　［Ｖａｌ’］−ｅＣＴＨ例１４ｂ：　［Ｉｌｅ’］−ｅＣＴ；例１ ４ｃ：　［Ｍｅｔ’］−ｅＣＴ；例１４ｄ：　［Ｔｈｒ’］−ｅＣＴ；例１４ｅ ：　［Ｓｅｒ’］　−ｅＣＴ；例１４ｆ　：　［Ａｌａ’］−ｅＣＴＨ例１４ｇ ：［Ｎｏｒｖａ　ｌ　ｉｎｅ’］−ｅＣＴ；および例１４ｈ：［Ｎ。

ｒ　ｌ　ｅｕｃ　ｉｎｅ’］−ｅＣＴは、最後の結合サイクルの間適切なアミノ 酸誘導体を用いることを除いて、上記方法に従って調製された。

Ｂｏｃ−Ｐｒｏ−ＭＢＨＡ樹脂Ｃ２ｇ５１ｍｍｏ　ｌ）から始まって、ペプチド 鎖は適切な保護されたアミノ酸誘導体を用いて組立られた。樹脂からのペプチド の分解、ジスルフィド架橋の形成、精製および特徴付けは例１において記載され ているプロシージャに従って行なわれた。

Ｌａｕ−ＣＹＳ−５ｅｒ−ＡＳｎ−Ｌａｕ−５＠ｒ−Ｔｈｒ−Ｃ”ｌ’５−Ｌｅ ｕ−Ｌａｕ−Ｇｌ’ｆ−ＬＭＳ−Ｌｅｕ−５ｅｒ−Ｇｌｎ−５□Ｓ Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｒｏ−ＮＨ２ Ｂｏｃ−Ｐｒｏ−ＭＢＨＡ樹脂（２ｇ、１ｍｍｏ　ｌ）から始まって、ペプチド 鎖は適切な保護されたアミノ酸誘導体を用いて組立られた。樹脂からのペプチド の分解、ジスルフィド架橋の形成、精製および特徴付けは例１において記載され ているプロシージャに従って行なわれた。

例１６ａ：　［Ｖａｌｏ、Ｌｅｕ８］−５ＣＴＨ例１６ｂ：［１１ｅＯ，Ｌｅｕ ８］−５ＣＴＨ例１６ｃ：［Ｍｅｔ’。

Ｌｅｕ８］−５ＣＴ；例１５ｄ：　［Ｔｈｒ’、Ｌａｕ８コ−５ＣＴ；例１６ｅ ：　［５ｅｒ０．Ｌｅｕ８］−５ＣＴＨ例１６ｆ　＋　［Ａｌａ’、Ｌｅｕ８］ 　−５ＣＴ；例１６ｇ：［Ｎｏｒｖａｌｉｎｅｏ、Ｌｅｕ８コーｓＣＴ；および 例１６ｈ：　［Ｎｏｒｌｅｕｃｉｎｅ’、Ｌｅｕ８］　−５ＣＴは、最後の結合 サイクルの間適切なアミノ酸誘導体を用いることを除いて、上記の方法に従って 調製された。

例１６ｉ：　［Ｌａｕ０８．ｄｅｓ　（１９）］　−５ＣＴＨ例１６ｊ　：　［ Ｌｅｕ”、ｄｅｓ　（１９−２２）　コ　−　ｓＣＴ：例１６に：　［Ｖａｌ’ 、Ｌｅｕ”、ｄｅｓ　（１９）］−ｓｃ′ｒ；例１６１：　［Ｖａｌ’、Ｌａｕ ８．ｄｅｓ　（１９−２２）　コ　−　ｓＣＴ；　例１６ｍ：　［１１ｅ　Ｏ、 Ｌｅｕ　８　。

ｄｅｓ（１９）　コ　−　ｓＣＴ；　例１６ｎ：　［Ｉｌｅ　０　、Ｌｅｕ　８ 　、ｄｅｓ　（１９−２２）　コ　−ｓＣＴ；　例１６ｏ：［Ｍｅｔ’、Ｌａｕ ８．ｄｅｓ　（１９）］−５ＣＴＨ例１６ｐ：［Ｍｅｔ　Ｏ、Ｌｅｕ　８　、　 ｄｅｓ　（１９−２２）　コ　−　ｓＣＴ；ｆＩＨ６ｑ　：　［Ｔｈｒ’、Ｌｅ ｕ　８　、ｄｅｓ　（１９）　コ　−８０１１例１６ｒ：　［Ｔｈｒ’、Ｌａｕ ８．ｄｅｓ　（１９−２２）］　−５ＣＴ；例１６ｓ　：　［Ｓｅｒ’、Ｌａｕ ８．ｄｅｓ　（１９）］　−５ＣＴＨ例１６ｔ　：　［Ｓｅｒ’、Ｌａｕ８　、 ｄｅｓ　（１９−２２）　コ　−　ｓＣＴ；６Ｍ１６ｕ　：　［Ａｌａ’、Ｌｅ ｕ　８　、　ｄｅｓ　（１９）　コ　−　ｓ　ＣＴ　；ｆ’Ｊ１５ｖ：［Ａｌａ ’、Ｌａｕ８．ｄｅｓ　（１９−２２）］　−５ＣＴ；例１６ｗ：　［Ｎｏｒｖ ａｌｉｎｅｏ、Ｌｅｕ”、ｄｅｓ（１９）］−８ｃＴ；例１６ｘ：　［Ｎｏｒｖ ａｌｉｎｅ’。

Ｌｅｕ　８　、ｄｅｓ　（１９−２２）　コ　−　ｓＣＴ；　例１６　ｙ　：［ Ｎｏｒｌｅｕｃｉｎｅ’、Ｌａｕ８．ｄｅｓ　（１９）コ−５ｃＴ；および例１ ６ｚ：　［Ｎｏｒｌｅｕｃｉｎｅ’。

Ｌａｕ８．ｄｅｓ　（１９−２２）］−５ＣＴは、示されるようにアミノ酸１９ または１９ないし２２に対する結合サイクルをなくすことを除いて、上記方法に 従って調製された。

Ｂｏ　ｃ−Ｐ　ｒ　ｏ−ＭＢＨＡ樹脂（２ｇ、１ｍｍｏ　ｌ）から始まって、ペ プチド鎖は適切な保護されたアミノ酸誘導体を用いて組立られた。樹脂からのペ プチドの分解、ジスルフィド架橋の形成、精製および特徴付けは例１において記 載されているプロシージャに従って行なわれた。

例１７ａ：　［ＶａＩ’］−５ＣＴ；例１７ｂ：　［Ｉｌｅ’］−５ＣＴＨ例１ ７ｃ：　［Ｍｅｔ’］−５ＣＴ；例１７ｄ：　［Ｔｈｒ’］−５ＣＴ；例１７ｅ ：　［Ｓｅｒ’］　−５ＣＴ；例１７ｆ　：　［ＡＩａ’］−５ＣＴＨ例１７ｇ ：［Ｎｏｒｖａｌｉｎｅ’コーｓＣＴ；および例１７ｈ：［Ｎ。

ｒｌｅｕｃｉｎｅ’１−ｓＣＴは、最後の結合サイクルの間適切なアミノ酸誘導 体を用いることを除いて、上記方法に従って調製された。

例１８　：　［Ｌｅｕ８］　−ｒＣＴの合成Ａｌａ−Ｐｒｏ−ＮＨ２ Ｂｏ　ｃ−Ｐ　ｒ　ｏ−ＭＢＨＡ樹脂（２ｇ、１ｍｍｏ　ｌ）から始まって、ペ プチド鎖は適切な保護されたアミノ酸誘導体を用いて組立られた。樹脂からのペ プチドの分解、ジスルフィド架橋の形成、精製および特徴付けは例１において記 載されているプロシージャに従って行なわれた。

例１９　：　［ＬｅｕＯ”コーｒＣＴの合成Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−ＮＨ２ Ｂｏｃ−Ｐｒｏ−ＭＢＨＡ樹脂（２ｇｓ　１ｍｍｏ　ｌ）から始まって、ペプチ ド鎖は適切な保護されたアミノ酸誘導体を用いて組立られた。樹脂からのペプチ ドの分解、ジスルフィド架橋の形成、精製および特徴付けは例１において記載さ れているプロシージャに従って行なわれた。

例１９ａ：　［Ｖａｌ’、Ｌｅｕ’］−ｒＣＴＨ例１９ｂ。

［１１ｅ’、Ｌｅｕ８］−ｒＣＴ；例１９ｃ：　［Ｍｅｔ’。

Ｌｅｕ８］−ｒＣＴ；例１９ｄ：　［Ｔｈｒ’、Ｌｅｕ８コ−ｒＣＴ；　例１９ ｅ　：　［Ｓｅｒ’、　Ｌｅｕ’　コ　−　ｒＣＴＨ例１９ｆ　：　［Ａ１ａ’ 、Ｌｅｕ８］−ｒＣＴＨ例１９ｇ：［Ｎｏｒｖａｌｉｎｅ’、Ｌｅｕ８１−ｒＣ Ｔ；および例１９ｈ　：　［Ｎｏｒ　１ｅｕｃ　ｉｎｅ’、Ｌｅｕ８］　−ｒＣ Ｔは、最後の結合サイクルの間適切なアミノ酸誘導体を用いることを除いて、上 記の方法に従って調製された。

Ｓ□Ｓ Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−ＮＨ２ Ｂｏｃ−Ｐｒｏ−ＭＢＨＡ樹脂（２ｇ、１ｍｍｏ　１）から始まって、ペプチド 鎖は適切な保護されたアミノ酸誘導体を用いて組立られた。樹脂からのペプチド の分解、ジスルフィド架橋の形成、精製および特徴付けは例１において記載され ているプロシージャに従って行なわれた。

例２０ａ：　［Ｖａ２’コーｒＣＴ；例２０ｂ：［１１ｅＯ３−ｒＣＴ；例２０ ｃ　：　［Ｍｅｔ’ｌ　−ｒＣＴ；例２０ｄ：　［Ｔｈｒ’］　−ｒＣＴＨ例２ ０ｅ：　［Ｓｅｒ’　コ　−　ｒＣＴ：例２０ｆ　：　［Ａｌａ’］−ｒＣＴＨ 例２０ｇ：［Ｎｏｒｖａｌｉｎｅ’コーｒＣＴ；および例２０ｈ：［Ｎ。

ｒｌｅｕｃｉｎｅ’］−ｒＣＴは、最後の結合サイクルの間適切なアミノ酸誘導 体を用いることを除いて、上記方法に従って調製された。

例２１　：　［Ｌｅｕ８］　−ｃｃＴの合成りｏｃ−Ｐｒｏ−ＭＢＨＡ樹脂（２ ｇ、１ｍｍｏ　ｌ）から始まって、ペプチド鎖は適切な保護されたアミノ酸誘導 体を用いて組立られた。樹脂からのペプチドの分解、ジスルフィド架橋の形成、 精製および特徴付けは例１において記載されているプロシージャに従って行なわ れた。

Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｒｏ−ＮＨ２ Ｂｏｃ−Ｐｒｏ−ＭＢＨＡ樹脂（２ｇｓ　１ｍｍｏ　ｌ）から始まって、ペプチ ド鎖は適切な保護されたアミノ酸誘導体を用いて組立られた。樹脂からのペプチ ドの分解、ジスルフィド架橋の形成、精製および特徴付けは例１において記載さ れているプロシージャに従って行なわれた。

例２２ａ：　［Ｖａｌ’、Ｌｅｕ８］−ｃＣＴＨ例２２ｂ＝［Ｉ　Ｉｅ’、Ｌｅ ｕ　８　コ　−　ｃＣＴ；　例２２ｃ：　［Ｍｅｔ’。

Ｌｅｕ　８　コ　−　ｃＣＴ　；　例２２ｄ：　［Ｔｈｒ’、Ｌｅｕ　８１−ｃ ＣＴ；例２２ｅ：　［Ｓｅｒ’、Ｌｅｕ８］−ｃＣＴ；例２２ｆ　：　［Ａ１ａ ’、Ｌｅｕ８コ　−ｃｃＴ；例２２ｇ　：［Ｎｏｒｖａ　１　ｉｎｅ’、Ｌｅｕ ８コーｃＣＴ；および例２２ｈ：　［Ｎｏｒｌｅｕｃｉｎｅｏ、Ｌｅｕ８］　− ｃＣＴは、最後の結合サイクルの間適切なアミノ酸誘導体を用いることを除いて 、上記方法に従って調製された。

例２３：［Ｌｅｕ’コーｃＣＴの合成 Ｓ□Ｓ Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｒｏ−ＮＯ２ Ｂｏｃ−Ｐｒｏ−ＭＢＨＡ樹脂（２ｇｓ　１ｍｍｏ　１）から始まって、ペプチ ド鎖は適切な保護されたアミノ酸誘導体を用いて組立られた。樹脂からのペプチ ドの分解、ジスルフィド架橋の形成、精製および特徴付けは例１において記載さ れているプロシージャに従って行なわれた。

例２３ａ：　［Ｖａｌ’］−ｃＣＴ；例２３ｂ：［Ｉｌｅ’］−ｃＣＴ；例２３ ｃ：　［Ｍｅｔ’］　−ｃｃＴ；例２３ｄ：　［Ｔｈｒ’］−ｃＣＴＨ例２３ｅ ：　［Ｓｅｔ’］　−ｃＣＴ；例２３ｆ　：　［Ａｌａ’］−ｃＣＴＨ例２３ｇ ：［Ｎｏｒｖａｌｉｎｅ’］−ｃＣＴ；および例２３ｈ：［Ｎ。

ｒ　１ｅｕｃｉｎｅ’］−ｃＣＴは、最後の結合サイクルの間適切なアミノ酸誘 導体を用いることを除いて、上記方法に従って調製された。

１５　１．６　１７　１８　１９　２０　２１　２２　２３　２４　２５　２６ 　２７　２Ｂ　２９Ａｓｎ−Ｌａｕ−Ａｓｎ−Ａｓｎ−Ｐｈｅ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ −Ｐｈｅ−５ｅｒ−Ｇｌｙ−Ｍｅｔ−Ｇｌｙ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｂｏ　 ｃ−Ｐ　ｒ　ｏ−ＭＢＨＡ樹脂ｃ２ｇ、１ｍｍｏ　ｌ）から始まって、ペプチド 鎖は適切な保護されたアミノ酸誘導体を用いて組立られた。樹脂からのペプチド の分解、ジスルフィド架橋の形成、精製および特徴付けは例１において記載され ているプロシージャに従って行なわれた。

例２４ａ：　［Ｖａｌ’、Ｌｅｕ’］−ｐＣＴＨ例２４ｂ＝［１１ｅ’、Ｌｅｕ ８］−ｐＣＴＨ例２４ｃ：　［Ｍｅｔ’。

Ｌｅｕ６］　−ｐＣＴ　Ｈ例２４ｄ：　［Ｔｈｒ’、Ｌｅｕ１３コ−ｐｃ’ｒ； 例２４ｅ：　［Ｓｅｒ’、Ｌｅｕ’］−ｐＣＴＨ例２４ｆ＋　［Ａ１ａ’、Ｌｅ ｕ８］−ｐＣＴ；例２４ｇ：［Ｎｏｒｖａｌ　ｉｎｅ’、Ｌｅｕ８］　−ｐＣＴ ；および例２４ｈ：　［Ｎｏｒｌｅｕｃｉｎｅ’、Ｌｅｕ８］　−ｐＣＴは、最 後の結合サイクルの間適切なアミノ酸誘導体を用いることを除いて、上記方法に 従って調製された。

Ｔｈｒ−ＰｒＰ−ＮＯ２ Ｂｏ　ｃ−Ｐ　ｒ　ｏ−ＭＢＨＡ樹脂（２ｇ、１ｍｍｏ　ｌ）から始まって、ペ プチド鎖は適切な保護されたアミノ酸誘導体を用いて組立られた。樹脂からのペ プチドの分解、ジスルフィド架橋の形成、精製および特徴付けは例１において記 載されているプロシージャに従って行なわれた。

Ｇｌｕ−Ｔｈｒ−Ｐｒｏ−ＮＯ２ Ｂｏ　ｃ−Ｐ　ｒ　ｏ−ＭＢＨＡ樹脂（２ｇ、１ｍｍｏ　ｌ）から始まって、ペ プチド鎖は適切な保護されたアミノ酸誘導体を用いて組立られた。樹脂からのペ プチドの分解、ジスルフィド架橋の形成、精製および特徴付けは例１において記 載されているプロシージャに従って行なわれた。

例２６ａ　：　［Ｖａ　ｌ’、ＬｅｕＢコーｂＣＴ、例２６ｂ　：［１１ｅ’、 　Ｌｅｕ　８　コ　−　ｂＣＴ、例２６ｃ：　［Ｍｅｔ’。

Ｌｅｕ８］−ｂＣＴ；例２６ｄ：　［Ｔｈｒ’、ＬｅｕＢ］−ｂＣＴ、例２６ｅ ：　［Ｓｅｒ’、Ｌｅｕ８１−ｂＣＴ；例２６ｆ　：　［Ａ１ａ’、Ｌｅｕ８］ −ｂＣＴＨ例２６ｇ。

［Ｎｏｒｖａｌｉｎｅｏ、Ｌｅｕ’コーｂＣＴ、および例２６ｈ：　［Ｎｏｒｌ ｅｕｃｉｎｅ’、Ｌｅｕ８］　−ｂＣＴは、事後の結合サイクルの間適切なアミ ノ酸誘導体を用いることを除いて、上記方法に従って調製された。

例２７　：　［Ｌｅｕ８］　−ｂＣＴの合成Ｔｈｒ−Ｐｒｏ−ＮＨ，。

Ｂｏｃ−Ｐｒｏ−ＭＢＨＡ樹脂（２ｇｓ　１ｍｍｏ　ｌ）から始まって、ペプチ ド鎖は適切な保護されたアミノ酸誘導体を用いて組立られた。樹脂からのペプチ ドの分解、ジスルフィド架橋の形成、精製および特徴付けは例１において記載さ れているプロシージャに従って行なわれた。

例２８　：　［Ｌｅｕ＝”　］　−ｏＣＴの合成Ｇｌｕ−Ｔｈｒ−Ｐｒｏ−ＮＨ ２ Ｂ　ｏ　ｃ’−Ｐ　ｒ　ｏ−ＭＢＨＡ樹脂（２ｇ、１ｍｍｏ　ｉ）から始まって 、ペプチド鎖は適切な保護されたアミノ酸誘導体を用いて組立られた。樹脂から のペプチドの分解、ジスルフィド架橋の形成、精製および特徴付けは例１におい て記載されているプロシージャに従って行なわれた。

例２８ａ：　［Ｖａｌ’、Ｌｅｕ８］−ｏＣＴＨ例２８ｂ：［１１ｅ’、　Ｌｅ ｕ　８　コ　−ｏＣＴＨ例２８ｃ：［Ｍｅｔ’。

Ｌｅｕ８］−ｏＣＴ；例２８ｄ：　［Ｔｈｒ’、Ｌｅｕ８コー　ｏＣＴ；　例２ ８ｅ：　［Ｓｅｒ’、　Ｌｅｕ　８　コ　−　ｏＣＴ；例２８ｆ　：　「ＡＩａ ’、Ｌｅｕ８］−ｏＣＴ；例２Ｂｇ　：［ＮｏｒｖａｌｉｎｅＯ，Ｌｅｕ８コー ｏＣＴ；および例２８ｈ：　［Ｎｏｒｌｅｕｃｉｎｅ’、Ｌｅｕ’］　−ｏＣＴ は、最後の結合サイクルの間適切なアミノ酸誘導体を用いることを除いて、上記 方法に従って調製された。

Ｔｈｒ−Ｐｒｏ−ＮＨ２ Ｂｏｃ−Ｐｒｏ−ＭＢＨＡ樹脂（２ｇ、１ｍｍｏ　ｌ）から始まって、ペプチド 鎖は適切な保護されたアミノ酸誘導体を用いて組立られた。樹脂からのペプチド の分解、ジスルフィド架橋の形成、精製および特徴付けは例１において記載され ているプロシージャに従って行なわれた。

例３０：生物学的分析 本発明のペプチドは重要な低カルシウム血症活性を示す。

この活性は以下のとおり測られた：雄のネズミ（Ｓｐ＋ａｇｕｅ［１ａｖｌｅ７ ）体重約１００ｇは前夜絶食させらた。ペプチドは、１ｍｌ当り０．１μｇから 約１００μｇの濃度範囲でｐＨ７，４ＰＢＳ緩衝剤で溶解された。ネズミはメト フエイヌ（Ｍｅｔｏｐｈａｎｅ　’　）で麻酔され、重さが計られ、１ｋｇの体 重当り０゜１から約１００μｇの用量でペプチド溶液で皮下注入された。様々な 時間の後、動物は麻酔され腹部切開が行なわれ、工大静脈から血液サンプルが採 られ、血清はり一ダイク（Ｌｉｅｄｋｅ）　、ｒクリニカルケメストリＪ　（Ｃ １ｉｎｉｃａｌ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ）　、２７．２０２５−２０２８　（１９ ８１）の方法によってカルシウムが分析された。カルシウム濃度を１０％低下す るのに必要なペプチドの量は、１０　ＩＵと規定される。この方法に従って、種 々のカルシトニンペプチドの低カルシウム血症効力は以下のとおり決定される。

混合物　低カルシウム血症効力（ＩＵ／ｍｇ）ｈＣ”　１５０−２００１１Ｉ／ ｍｇ ｓＣＴ　４．Ｑ［ｌＯ劃／ｍｇ ｃＣＴ４．０００１Ｕ／ｌｌ１ｇ 例１：［：Ｌｅｕ”８１２１６］　−ｈＣＴ　４．ＱＱＱＩＵ／ｍｇ例２　：　 ［Ｌ　ｅ　ｕ０８・”］　−ｈＣＴ　４，０００１Ｕ／ｍｇ例３　：　［Ｌｅｕ Ｏ’　］　−ｈＣＴ　１，５００　［Ｕ／ｍｇ例４　：　［Ｌ　ｅ　ｕＯ］　− ｈＣ７２０［１１Ｕ／ｍｇ例５　：　［Ｌ　ｅ　ｕ”１２１’　］　−ｈＣＴ　 ２，０００１Ｕ／ｌｌ１ｇ例６　：　［Ｌｅｕ”　］　−ｈＣＴ　２．ＯＯＧ　 Ｉ［Ｉ／ｍｇ例７　：　［Ｌ　ｅ　ｕ８］　−ｈ　ＣＴ　５００１１Ｉ／（０ｇ 例１２：　［：Ｌｅｕ　８　コ　−ｅ　ＣＴ　５．０００　１０／ｍｇ例１３： 　［Ｌｅｕ　０・８　コ　−ｅ　ＣＴ　６．５００　ＩＩＩ／ｍｇ本発明のペプ チドは鼻腔内に投与されると、動物において低カルシウム血症効果を示す。その 生物学的利用率を定めるために、鼻腔内に投与された低カルシウム血症ペプチド の影響は、以下で示すように、静脈注入されたものと比べられた。乾燥粉末３０ ｍｇ当り１００１Ｕを含む鼻による粉末製剤は、実質的に米国特許第４．６１３ ．５００号で示されるように調製された。ペプチドはウサギに対して、２．８Ｉ Ｕ／ｋｇの用量で鼻腔内に、または１．７５１Ｕ／ｋｇの用量で静脈内に与えら れた。血液サンプル併ペプチドの投与前、および投与後０．５．１．２．４、お よび６時間後採られ、血清カルシウムレベルが定められた。鼻腔内および静脈に よる投与後の低カルシウム血症効果（０ないし６時間）の曲線による領域の比率 が計算された。

したがって、本発明はその精神または本質的特性から逸脱することなくほかの特 定の形で実施されてもよい。示された実施例はあらゆる点において例示だけであ り、制限されるものではなく、したがって発明の範囲は前の説明よりむしろ添付 のクレームによって示される。クレームの法的等価の意味および範囲内にあるす べての変形は、その範囲内において包含される。

Claims (20)

【特許請求の範囲】
1. １．式 Ｙ０−ｘＣＴ を有する低カルシウム血症ペプチドであって、Ｙは位置０、ｘＣＴのＮＨ２−末 端に存在する部分であり、１ないし８炭素原子の分枝もしくは分枝されないアル キル側鎖を有するＬ−もしくはＤ−アミノ酸、Ｌ−もしくはＤ−メチオニン、Ｌ −もしくはＤ−トレオニン、Ｌ−もしくはＤ−セリン、Ｌ−もしくはＤ−ホモセ リン、またはその類似体からなるグループから選択された脂肪族アミノ酸であり 、さらに ｘＣＴはヒト、サケ、ウナギ、ネズミ、ウシ、ヒツジ、ブタ、ウサギ、またはニ ワトリのカルシトニンのアミノ酸配列を表わす、ペプチド。
2. ２．（Ｌｅｕ０）−ｘＣＴである、請求項１に記載のペプチド。
3. ３．（Ｌｅｕ０）−ｈＣＴ；（Ｌｅｕ０）−ｅＣＴ；（Ｌｅｕ０）−ｓＣＴ；（ Ｌｅｕ０）−ｃＣＴ；および（Ｌｅｕ０）−ｒＣＴからなるグループから選択さ れ、ｈＣＴはヒトカルシトニン、ｅＣＴはウナギカルシトニン、ｓＣＴはサケカ ルシトニン、ｃＣＴはニワトリカルシトニンおよびｒＣＴはネズミカルシトニン である、請求項２に記載のペプチド。
4. ４．位置４、８、１２、１６、２１または２７におけるｘＣＴの少なくとも１つ のアミノ酸残基はＹによって置換され、前記ＹおよびＹ０は同じかまたは異なる 、請求項１に記載のペプチド。
5. ５．（Ｌｃｕ０．８）−ｘＣＴである、請求項４に記載のペプチド。
6. ６．（Ｌｅｕ０．８）−ｂＣＴ；（Ｌｅｕ０．８）−ｃＣＴ；（Ｌｅｕ０．８） −ｅＣＴ；（Ｌｅｕ０．８）−ｈＣＴ；（Ｌｅｕ０．８）−ｏＣＴ；（Ｌｅｕ０ ．８）−ｐＣＴ；（Ｌｅｕ０．８）−ｒＣＴ；（Ｌｅｕ０．８）−ｓＣＴからな るグループから選択され、ｂＣＴはウシカルシトニン、ｃＣＴはニワトリカルシ トニン、ｅＣＴはウナギカルシトニン、ｈＣＴはヒトカルシトニン、ｏＣＴはヒ ツジカルシトニン、ｐＣＴはブタカルシトニン、ｒＣＴはネズミカルシトニンお よびｓＣＴはサケカルシトニンである、請求項５に記載のペプチド。
7. ７．（Ｌｅｕ０．８，１２）−ｈＣＴ；（Ｌｅｕ０．８，１２，１６）−ｈＣＴ ；（Ｌｅｕ０．８，１６）−ｈＣＴ；（Ｌｅｕ０．１２）−ｈＣＴ；（Ｌｅｕ０ ．１６）−ｈＣＴまたは（Ｌｅｕ０．１２，１６）−ｈＣＴであり、ｈＣＴはヒ トカルシトニンのアミノ酸配列を表わす、請求項４に記載のペプチド。
8. ８．式 （Ｙ８）−ｘＣＴ を有する低カルシウム血症ペプチドであって、ＹはｘＣＴの位置８に存在する部 分であり、１ないし８炭素原子の分枝もしくは分枝されないアルキル側鎖を有す るＬ−もしくはＤ−アミノ酸、Ｌ−もしくはＤ−メチオニン、Ｌ−もしくはＤ− トレオニン、Ｌ−もしくはＤ−セリン、またはその類似体からなるグループから 選択された脂肪族アミノ酸であり、さらに ｘＣＴはヒト、サケ、ウナギ、ネズミ、ウシ、ヒツジ、ブタ、ウサギ、またはニ ワトリのカルシトニンのアミノ酸配列を表わし、 Ｙ８は本来のｘＣＴの位置８で−般に見出されるアミノ酸ではない、ペプチド。
9. ９．（Ｌｅｕ８）−ｘＣＴである、請求項８に記載のペプチド。
10. １０．（Ｌｅｕ８）−ｈＣＴ；（Ｌｅｕ８）−ｂＣＴ；（Ｌｅｕ８）−ｃＣＴ； （Ｌｅｕ８）−ｅＣＴ；（Ｌｅｕ８）−ｏＣＴ；（Ｌｅｕ８）−ｐＣＴ；（Ｌｅ ｕ８）−ｒＣＴ；（Ｌｅｕ８）−ｓＣＴからなるグループから選択され、ｈＣＴ はヒトカルシトニン、ｂＣＴはウシカルシトニン、ｃＣＴはニワトリカルシトニ ン、ｅＣＴはウナギカルシトニン、ｏＣＴはヒツジカルシトニン、ｐＣＴはブタ カルシトニン、ｒＣＴはネズミカルシトニンおよびｓＣＴはサケカルシトニンで ある、請求項９に記載のペプチド。
11. １１．位置４、１２、１６、２１または２７の位置におけるｘＣＴの少なくとも １つのアミノ酸残基はＹによって置換され、前記ＹおよびＹ８は同じかまたは異 なる、請求項８に記載のペプチド。
12. １２．（Ｌｅｕ８，１２）−ｈＣＴ；（Ｌｅｕ８，１２，１６）−ｈＣＴ；また は（Ｌｅｕ８，１６）−ｈＣＴであり、ｈＣＴはヒトカルシトニンのアミノ酸配 列を表わす、請求項１１に記載のペプチド。
13. １３．位置４および８におけるｘＣＴのアミノ酸残基はそれぞれＹ４およびＹ８ によって置換され、Ｙ４およびＹ８の各々は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｌｅｕ、ｌｌｅ 、Ｖａｌ、Ｔｈｒ、Ｎｏｒ−Ｌｅｕ、Ｎｏｒ−Ｖａｌ、ＭｅｔまたはＳｅｒから なるグループから独立に選択されたし−またはＤ−アミノ酸である、請求項４ま たは８に記載のペプチド。
14. １４．Ｙは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｌｅｕ、ｌｌｅ、Ｖａｌ、Ｔｈｒ、Ｎｏｒ−Ｌｅ ｕ、Ｎｏｒ−Ｖａｌ、ＭｅｔまたはＳｅｒからなるグループから選択されたＬ− またはＤ−アミノ酸である、請求項１または１１に記載のペプチド。
15. １５．ｘＣＴはｄｅｓ（１９）−ｘＣＴまはたｄｅｓ（１９−２２）−ｘＣＴで ある、請求項４に記載のペプチド。
16. １６．（Ｌｅｕ０．８，ｄｅｓ（１９））−ｈＣＴ；（Ｌｅｕ０．８，ｄｅｓ（ １９−２２））−ｈＣＴ；（Ｌｅｕ０．８，１２，．ｄｅｓ（１９））−ｈＣＴ ；（Ｌｅｕ０．８，１２，ｄｅｓ（１９−２２））−ｈＣＴ；（Ｌｅｕ０．８， １２，１６，ｄｅｓ（１９））−ｈＣＴ；（Ｌｅｕ０．８，１２，１６，ｄｅｓ （１９−２２））−ｈＣＴ；（Ｌｅｕ０．８，ｄｅｓ（１９））−ｅＣＴ；（Ｌ ｅｕ０．８，ｄｅｓ（１９−２２））−ｅＣＴ；（Ｌｅｕ０．８，ｄｅｓ（１９ ））−ｓＣＴ；および（Ｌｅｕ０．８，ｄｅｓ（１９−２２））−ｓＣＴからな るグループから選択され、ｈＣＴはヒトカルシトニンであり、ｅＣＴはウナギカ ルシトニン、およびｓＣＴはサケカルシトニンである、請求項１５に記載のペプ チド。
17. １７．薬事的に許容される担体と組合わせて、請求項１、４、８または１５に記 載される構造を有するペプチドの有効な血液カルシウム減少量を含む、製薬的組 成物。
18. １８．哺乳類において血清カルシウムレベルを減らすことによって病気を治療す るための方法であって、クレーム１、４、８または１５のいずれかに記載される 構造を有するカルシトニンペプチド類似体の有効な血液カルシウム減少量を、こ のような治療を要する前記哺乳類に含む、方法。
19. １９．バジェット病または骨粗しょう症を治療するための方法であって、 クレーム１、４、８または１５のいずれかに記載される構造を有する合成カルシ トニンの骨吸収妨害量を病んでいる患者に投与し、それによって前記病気に伴う 骨の吸収が減少またはなくなる、方法。
20. ２０．骨の痛みを治療するための方法であって、クレーム１、４、８または１５ のいずれかに記載される構造を有する合成カルシトニンの有効な痛み軽減量を必 要な患者に投与し、 それによって骨粗しょう症、骨粗しょう症骨折、バジェット病または悪性骨溶解 に伴う骨の痛みが減じられるまたはなくなる、方法。