JPH0643444B2 - 血液代替物用の新規化合物およびその製造方法 - Google Patents
血液代替物用の新規化合物およびその製造方法Info
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Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08H—DERIVATIVES OF NATURAL MACROMOLECULAR COMPOUNDS
- C08H1/00—Macromolecular products derived from proteins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
- A61P7/08—Plasma substitutes; Perfusion solutions; Dialytics or haemodialytics; Drugs for electrolytic or acid-base disorders, e.g. hypovolemic shock
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
- C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic Table
- C07F9/02—Phosphorus compounds
- C07F9/06—Phosphorus compounds without P—C bonds
- C07F9/08—Esters of oxyacids of phosphorus
- C07F9/09—Esters of phosphoric acids
- C07F9/091—Esters of phosphoric acids with hydroxyalkyl compounds with further substituents on alkyl
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
- C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
- C08B37/0006—Homoglycans, i.e. polysaccharides having a main chain consisting of one single sugar, e.g. colominic acid
- C08B37/0009—Homoglycans, i.e. polysaccharides having a main chain consisting of one single sugar, e.g. colominic acid alpha-D-Glucans, e.g. polydextrose, alternan, glycogen; (alpha-1,4)(alpha-1,6)-D-Glucans; (alpha-1,3)(alpha-1,4)-D-Glucans, e.g. isolichenan or nigeran; (alpha-1,4)-D-Glucans; (alpha-1,3)-D-Glucans, e.g. pseudonigeran; Derivatives thereof
- C08B37/0021—Dextran, i.e. (alpha-1,4)-D-glucan; Derivatives thereof, e.g. Sephadex, i.e. crosslinked dextran
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Description
【発明の詳細な説明】 本発明は血液代替物およびその製造方法に関する。
米国特許第4,064,118号明細書は約5,000〜約2,000,000
の分子量を有するヒドロキシエチル澱粉またはデキスト
ランと共有結合したヘモグロビンの水溶性生成物より成
る血液代替物または血液増量剤組成物として有用な組成
物を記載している。この米国特許明細書はまたかかる組
成物の製造方法をも記載しているが、これはヘモグロビ
ンを約5,000〜約2,000,000の分子量を有するヒドロキシ
エチル澱粉またはデキストランと化学的に結合させるこ
とより成る。
の分子量を有するヒドロキシエチル澱粉またはデキスト
ランと共有結合したヘモグロビンの水溶性生成物より成
る血液代替物または血液増量剤組成物として有用な組成
物を記載している。この米国特許明細書はまたかかる組
成物の製造方法をも記載しているが、これはヘモグロビ
ンを約5,000〜約2,000,000の分子量を有するヒドロキシ
エチル澱粉またはデキストランと化学的に結合させるこ
とより成る。
しかしながら、ヘモグロビンと比較すると、米国特許第
4,064,118号明細書に記載の生成物は幾分より大きな酸
素親和性を示す傾向にあるがヘモグロビンの本質的な酸
素輸送および放出能を保持していることがわかる。半飽
和酸素圧力（tension）により測定した場合、米国特許
第4,064,118号明細書の方法Ｉにより製造されたデキス
トラン−ヘモグロビンコンプレツクスは遊離ヘモグロビ
ンよりも約2.5倍大きい酸素親和性を示す。
4,064,118号明細書に記載の生成物は幾分より大きな酸
素親和性を示す傾向にあるがヘモグロビンの本質的な酸
素輸送および放出能を保持していることがわかる。半飽
和酸素圧力（tension）により測定した場合、米国特許
第4,064,118号明細書の方法Ｉにより製造されたデキス
トラン−ヘモグロビンコンプレツクスは遊離ヘモグロビ
ンよりも約2.5倍大きい酸素親和性を示す。
ピリドキサール−５′−ホスフエートは、ヘモグロビン
に可逆的に結合することが知られており、またこの結合
は還元により不可逆的にすることができ、可逆的に結合
した生成物および不可逆的に結合した生成物のいずれも
がヘモグロビンそれ自体よりも低強度の酸素結合特性を
有することも知られている。しかしながら、ピリドキサ
ール−５′−ホスフエートで共有結合誘導体化してもデ
キストラン−ヘモグロビンの酸素親和性を低めてピリド
キサール−５′−ホスフエートで誘導体化したヘモグロ
ビン（PLP-Hb）のそれに近づけることができないことが
わかつた。PLP-Hbの酸素親和性に近いまたはそれよりも
低い酸素親和性が満足のいくヘモグロビン基血液代替物
にとつて望ましいと考えられる。
に可逆的に結合することが知られており、またこの結合
は還元により不可逆的にすることができ、可逆的に結合
した生成物および不可逆的に結合した生成物のいずれも
がヘモグロビンそれ自体よりも低強度の酸素結合特性を
有することも知られている。しかしながら、ピリドキサ
ール−５′−ホスフエートで共有結合誘導体化してもデ
キストラン−ヘモグロビンの酸素親和性を低めてピリド
キサール−５′−ホスフエートで誘導体化したヘモグロ
ビン（PLP-Hb）のそれに近づけることができないことが
わかつた。PLP-Hbの酸素親和性に近いまたはそれよりも
低い酸素親和性が満足のいくヘモグロビン基血液代替物
にとつて望ましいと考えられる。
本発明者らは今般、例えば米国特許第4,064,118号明細
書に記載されているような生理学的に許容し得るポリサ
ツカライドヘモグロビンコンプレツクスをこれまでより
も低い酸素親和性を有する改変された形態で製造できる
ことを見出した。
書に記載されているような生理学的に許容し得るポリサ
ツカライドヘモグロビンコンプレツクスをこれまでより
も低い酸素親和性を有する改変された形態で製造できる
ことを見出した。
本発明によれば、約70,000〜約2,000,000の分子量を有
しそして式Ｉ (PS)−Ｘ−(HB)−Ｚ Ｉ （式中PSは、約2,000〜約2,000,000の分子量を有する生
理学的に許容し得るポリサツカライドを表わし、 Ｘは共有結合した化学的架橋基を表わし、HBはヘモグロ
ビン残基を表わし、そして Ｚは２個またはそれ以上のヒドロキシ基がりん酸でエス
テル化されているポリオールである）を有する水溶性化
合物が提供される。特に好ましいＺは２〜６個、より好
ましくは２〜４個のホスフエート基を含む。Ｚがポリオ
ールのホスフエートエステルである場合には、少なくと
も２個、好ましくはすべてのヒドロキシ基がりん酸でエ
ステル化されている。４〜８個の炭素原子を有しそして
直鎖基であるＺも好ましい。更に、各々の炭素原子（少
なくとも１個の末端炭素原子以外のもの）が場合により
りん酸でエステル化されたヒドロキシ基を有するポリオ
ールより成るＺも好ましい。
しそして式Ｉ (PS)−Ｘ−(HB)−Ｚ Ｉ （式中PSは、約2,000〜約2,000,000の分子量を有する生
理学的に許容し得るポリサツカライドを表わし、 Ｘは共有結合した化学的架橋基を表わし、HBはヘモグロ
ビン残基を表わし、そして Ｚは２個またはそれ以上のヒドロキシ基がりん酸でエス
テル化されているポリオールである）を有する水溶性化
合物が提供される。特に好ましいＺは２〜６個、より好
ましくは２〜４個のホスフエート基を含む。Ｚがポリオ
ールのホスフエートエステルである場合には、少なくと
も２個、好ましくはすべてのヒドロキシ基がりん酸でエ
ステル化されている。４〜８個の炭素原子を有しそして
直鎖基であるＺも好ましい。更に、各々の炭素原子（少
なくとも１個の末端炭素原子以外のもの）が場合により
りん酸でエステル化されたヒドロキシ基を有するポリオ
ールより成るＺも好ましい。
Ｚ基はヘモグロビンに対し当業者により容易に認識され
るであろう広範にわたる様々な方法で結合することがで
きる。
るであろう広範にわたる様々な方法で結合することがで
きる。
すなわち本発明によれば、 (a)式II (PS)−Ｘ−(HB) II 式中PS、ＸおよびHBは前記定義のとおりである）で表わ
される化合物を、Ｚ配位子を供与し得る化合物と結合さ
せるか、 (b)式III (HB)−Ｚ III （式中HBおよびＺは前記定義のとおりである）で表わさ
れる化合物をポリサツカライドPSと結合させるか、また
は (c)還元されうる二重結合を有する相当する式Ｉの化合
物の還元により式Ｉの化合物の還元型を製造する ことより成る式Ｉの化合物の製造方法が提供される。
される化合物を、Ｚ配位子を供与し得る化合物と結合さ
せるか、 (b)式III (HB)−Ｚ III （式中HBおよびＺは前記定義のとおりである）で表わさ
れる化合物をポリサツカライドPSと結合させるか、また
は (c)還元されうる二重結合を有する相当する式Ｉの化合
物の還元により式Ｉの化合物の還元型を製造する ことより成る式Ｉの化合物の製造方法が提供される。
すなわち、例えば、Ｚ基を次のとおりアミド結合により
ヘモグロビン上のアミノ基に結合させることができる。
すなわち RCONH(HBX)-X-(PS) （式中ＸおよびPSは前記定義のとおりであり、(HBX)NH
はヘモグロビン残基であり、そしてRCOはＺ基であ
る）。
ヘモグロビン上のアミノ基に結合させることができる。
すなわち RCONH(HBX)-X-(PS) （式中ＸおよびPSは前記定義のとおりであり、(HBX)NH
はヘモグロビン残基であり、そしてRCOはＺ基であ
る）。
このような結合は慣用のアシル化技術により、例えば化
合物RCOOHをその活性エステル、例えばＮ−ヒドロキシ
スクシンイミドエステルに転化し、そして生成エステル
を予め形成されたポリサツカライド−ヘモグロビンコン
プレツクスと反応させることにより作ることができる。
しかしながら、このようなアシル化反応は幾分非特異的
であり、Ｚ基がヘモグロビン上のあまり好ましくない位
置に結合してしまう可能性がある。
合物RCOOHをその活性エステル、例えばＮ−ヒドロキシ
スクシンイミドエステルに転化し、そして生成エステル
を予め形成されたポリサツカライド−ヘモグロビンコン
プレツクスと反応させることにより作ることができる。
しかしながら、このようなアシル化反応は幾分非特異的
であり、Ｚ基がヘモグロビン上のあまり好ましくない位
置に結合してしまう可能性がある。
従つてＺ基は次のとおり、シツフ塩基結合、好ましくは
還元シツフ塩基結合を通してヘモグロビンに結合させる
のが好ましい。すなわち Ｒ−CH＝Ｎ−(HBX)−Ｘ−(PS) Ｒ−CH2−NH−(HBx)−Ｘ−(PS) 〔式中ＸおよびPSは前記定義のとおりであり、(HBX)−
Ｎ＝および(HBX)−NH−はヘモグロビン残基であり、そ
してＲ−CH＝またはＲ−CH2−はＺ基である〕。
還元シツフ塩基結合を通してヘモグロビンに結合させる
のが好ましい。すなわち Ｒ−CH＝Ｎ−(HBX)−Ｘ−(PS) Ｒ−CH2−NH−(HBx)−Ｘ−(PS) 〔式中ＸおよびPSは前記定義のとおりであり、(HBX)−
Ｎ＝および(HBX)−NH−はヘモグロビン残基であり、そ
してＲ−CH＝またはＲ−CH2−はＺ基である〕。
このような結合は、慣用の技術により、例えば、アルデ
ヒドRCHOを予め形成されたポリサツカライド−ヘモグロ
ビンコンプレツクスと反応させ、次いで必要に応じて、
生成シツフ塩基を選択的還元を行なうことにより作るこ
とができる。適当な還元剤としてはジエチルアミンボラ
ンまたはナトリウムシアノボロハイドライド、あるいは
より好ましくはジメチルアミンボランまたはナトリウム
ボロハイドライドなどが挙げられる。
ヒドRCHOを予め形成されたポリサツカライド−ヘモグロ
ビンコンプレツクスと反応させ、次いで必要に応じて、
生成シツフ塩基を選択的還元を行なうことにより作るこ
とができる。適当な還元剤としてはジエチルアミンボラ
ンまたはナトリウムシアノボロハイドライド、あるいは
より好ましくはジメチルアミンボランまたはナトリウム
ボロハイドライドなどが挙げられる。
Ｚ基の(PS)−Ｘ−(HB)部分への結合は(PS)−Ｘ−(HB)部
の大きさに影響されない方法により行なわれる。すなわ
ち、様々な範囲のポリサツカライド対ヘモグロビン比を
用いて広範囲にわたる大きさの生成物分子を作ることが
できる。
の大きさに影響されない方法により行なわれる。すなわ
ち、様々な範囲のポリサツカライド対ヘモグロビン比を
用いて広範囲にわたる大きさの生成物分子を作ることが
できる。
Ｚ基をイノシトールホスフエートから誘導するのが好ま
しい。
しい。
イノシトールホスフエートは既知化合物であり、またそ
れ自体知られている方法により製造、単離することがで
きる。
れ自体知られている方法により製造、単離することがで
きる。
特に好ましいＺ基はイノシトールテトラホスフエート、
例えば大割合のイノシトールテトラホスフエートと小割
合の他のイノシトールホスフエートとを含有する混合物
から誘導される。
例えば大割合のイノシトールテトラホスフエートと小割
合の他のイノシトールホスフエートとを含有する混合物
から誘導される。
すなわち、化合物RCHOは好ましくはイノシトールホスフ
エートアルデヒド、より好ましくは 式IV OHC-CHRX-CHRX-CHRX-CHRX-CHO IV （式中少なくとも２個、好ましくは４個の基ＲＸはホス
フエート基であり、残りのものは-OH基である） で表わされるイノシトールホスフエートジアルデヒドで
ある。４個よりも少ない個数の基ＲＸがホスフエート基
である式IVを有する化合物は構造異性体として存在しま
た様々な立体異性体としても存在する。４個の基ＲＸが
すべてホスフエート基である式IVを有する化合物は様々
な立体異性体として存在する。式IVを有する化合物は所
望によりら、それ自体知られた慣用の方法を用いてそれ
らの様々な構造および／または光学異性体の形態に分割
してもよい。あるいはまた、そして好ましくは、式IVの
化合物は混合物として以後のヘモグロビンまたはヘモグ
ロビン−ポリサツカライドコンプレツクスとの反応に用
いてもよい。
エートアルデヒド、より好ましくは 式IV OHC-CHRX-CHRX-CHRX-CHRX-CHO IV （式中少なくとも２個、好ましくは４個の基ＲＸはホス
フエート基であり、残りのものは-OH基である） で表わされるイノシトールホスフエートジアルデヒドで
ある。４個よりも少ない個数の基ＲＸがホスフエート基
である式IVを有する化合物は構造異性体として存在しま
た様々な立体異性体としても存在する。４個の基ＲＸが
すべてホスフエート基である式IVを有する化合物は様々
な立体異性体として存在する。式IVを有する化合物は所
望によりら、それ自体知られた慣用の方法を用いてそれ
らの様々な構造および／または光学異性体の形態に分割
してもよい。あるいはまた、そして好ましくは、式IVの
化合物は混合物として以後のヘモグロビンまたはヘモグ
ロビン−ポリサツカライドコンプレツクスとの反応に用
いてもよい。
式IVを有する化合物は２個の隣接遊離ヒドロキシ基を有
する適宜のイノシトールホスフエートの選択的酸化によ
り製造することができる。適切には、その酸化は緩和な
酸化条件を用いて、例えばパーハロ酸、例えば過沃素酸
を用いることにより行うことができる。
する適宜のイノシトールホスフエートの選択的酸化によ
り製造することができる。適切には、その酸化は緩和な
酸化条件を用いて、例えばパーハロ酸、例えば過沃素酸
を用いることにより行うことができる。
好都合には、この反応は（特にイノシトールテトラホス
フエートを出発物質として用いる場合には）低pHまたは
高められた温度で行なうことができる。
フエートを出発物質として用いる場合には）低pHまたは
高められた温度で行なうことができる。
ポリサツカライド−ヘモグロビンコンプレツクスは広範
囲にわたる様々なポリサツカライド、例えばヒドロキシ
アルキル澱粉（例えばヒドロキシエチル澱粉）、イヌリ
ンまたは好ましくはデキストランなどから誘導してもよ
い。より詳細には、例えばTam.BlumensteinおよびWong
共著「Proc.Nat. Acad. Sci.(USA)第７３巻、第2128-21
31頁（1976）、または英国特許第1,549,246号明細書の
実施例１に記載されているような方法でヘモグロビンを
Ｎ−ブロモアセチルアミノエチルアミノデキストランと
反応させることにより製造したコンプレツクスが好まし
い。好ましいポリサツカライドは約5,000〜2,000,000の
分子量を有するもの、例えば10,000〜100,000の平均分
子量を有するものである。好ましいポリサツカライドは
70,000、40,000、または20,000の平均分子量を有するデ
キストランである。
囲にわたる様々なポリサツカライド、例えばヒドロキシ
アルキル澱粉（例えばヒドロキシエチル澱粉）、イヌリ
ンまたは好ましくはデキストランなどから誘導してもよ
い。より詳細には、例えばTam.BlumensteinおよびWong
共著「Proc.Nat. Acad. Sci.(USA)第７３巻、第2128-21
31頁（1976）、または英国特許第1,549,246号明細書の
実施例１に記載されているような方法でヘモグロビンを
Ｎ−ブロモアセチルアミノエチルアミノデキストランと
反応させることにより製造したコンプレツクスが好まし
い。好ましいポリサツカライドは約5,000〜2,000,000の
分子量を有するもの、例えば10,000〜100,000の平均分
子量を有するものである。好ましいポリサツカライドは
70,000、40,000、または20,000の平均分子量を有するデ
キストランである。
使用できる特定のデキストラン−ヘモグロビンコンプレ
ツクス例は約20,000の分子量を有するデキストランとヒ
トヘモグロビンとの間の1:1コンプレツクスである〔J.
E.ChangおよびJ.T/Wong共著「Canadian Journal of Bio
chemistry、」第５５巻、第398-403頁、（1977）参
照〕。
ツクス例は約20,000の分子量を有するデキストランとヒ
トヘモグロビンとの間の1:1コンプレツクスである〔J.
E.ChangおよびJ.T/Wong共著「Canadian Journal of Bio
chemistry、」第５５巻、第398-403頁、（1977）参
照〕。
ポリサツカライドコンプレックス中（または式IIIの化
合物中）のＺ基の割合はホスフエート：ヘモグロビン比
が実施例１に記載の方法により測定した場合に２〜16:
1、好ましくは４〜16:1の範囲となるようにするのが好
ましい。
合物中）のＺ基の割合はホスフエート：ヘモグロビン比
が実施例１に記載の方法により測定した場合に２〜16:
1、好ましくは４〜16:1の範囲となるようにするのが好
ましい。
基Ｚの生成にジアルデヒドを用いる場合には、ヘモグロ
ビン部分同志間で一部架橋が生起する可能性があり、あ
るいは、２個のアルデヒド基が同じヘモグロビン分子上
の異なるアミノ基と反応する可能性がある。
ビン部分同志間で一部架橋が生起する可能性があり、あ
るいは、２個のアルデヒド基が同じヘモグロビン分子上
の異なるアミノ基と反応する可能性がある。
式(HB)-Za（式中Zaはイノシトールホスフエートから誘
導される基であり、特にZaは前述の如くイノシトールホ
スフエートアルデヒドから誘導される）で表わされる変
性ヘモグロビンは新規化合物であつて本発明の一特徴を
形成する。これら新規変性ヘモグロビンは酸素輸送能を
有し、またポリサツカライドへの結合に有用であるばか
りでなく、それ自体で、あるいは重合された形態で、酸
素輸送体能として有用である。
導される基であり、特にZaは前述の如くイノシトールホ
スフエートアルデヒドから誘導される）で表わされる変
性ヘモグロビンは新規化合物であつて本発明の一特徴を
形成する。これら新規変性ヘモグロビンは酸素輸送能を
有し、またポリサツカライドへの結合に有用であるばか
りでなく、それ自体で、あるいは重合された形態で、酸
素輸送体能として有用である。
すなわち、本発明によれば更に、重合された(HB)-Zaお
よび(HB)-Zaを重合することより成る重合された(HB)-Za
の製造方法が提供される。
よび(HB)-Zaを重合することより成る重合された(HB)-Za
の製造方法が提供される。
(HB)-Zaの重合は、ヘモグロビンの重合についてそれ自
体知られた方法を用いて、例えばヘモグロビンとグルタ
ールアルデヒドとを例えば水性溶液中０°〜１０゜Cの温
度で反応させることにより行なうことができる。その反
応は略中性のpHを維持するための緩衝剤中で行なうこと
ができる。その(HB)-Zaは重合前に脱酸素する必要はな
い。重合生成物は既知の重合ヘモグロビンや変性重合ヘ
モグロビンに比べその酸素解離曲線が右にシフトするの
で有利である。重合度は生成物に所望される個々の目的
に従つて変えることができる。しかしながら、一般に重
合度が高すぎるとその重合体の溶液が粘稠になりすぎ、
一方、重合度が低すぎると腎臓に対し傷害を与える原因
となり得る多くの遊離ヘモグロビン分子を残すことにな
る。
体知られた方法を用いて、例えばヘモグロビンとグルタ
ールアルデヒドとを例えば水性溶液中０°〜１０゜Cの温
度で反応させることにより行なうことができる。その反
応は略中性のpHを維持するための緩衝剤中で行なうこと
ができる。その(HB)-Zaは重合前に脱酸素する必要はな
い。重合生成物は既知の重合ヘモグロビンや変性重合ヘ
モグロビンに比べその酸素解離曲線が右にシフトするの
で有利である。重合度は生成物に所望される個々の目的
に従つて変えることができる。しかしながら、一般に重
合度が高すぎるとその重合体の溶液が粘稠になりすぎ、
一方、重合度が低すぎると腎臓に対し傷害を与える原因
となり得る多くの遊離ヘモグロビン分子を残すことにな
る。
Ｚ基を予め形成されたヘモグロビンポリサツカライドコ
ンプレツクスに結合する方法〔前記方法ａ）〕に対する
別法として、Ｚ基をまず、例えば前述の技術または他の
慣用の結合技術を用いて、ヘモグロビンに結合させても
よい。その変性ヘモグロビンを次に所望により、例えば
米国特許第4,064,118号明細書に記載の技術を用いるな
どして更にポリサツカライドに結合させてもよい〔前記
方法ｂ）〕。
ンプレツクスに結合する方法〔前記方法ａ）〕に対する
別法として、Ｚ基をまず、例えば前述の技術または他の
慣用の結合技術を用いて、ヘモグロビンに結合させても
よい。その変性ヘモグロビンを次に所望により、例えば
米国特許第4,064,118号明細書に記載の技術を用いるな
どして更にポリサツカライドに結合させてもよい〔前記
方法ｂ）〕。
本明細書において言及されるヘモグロビンは任意の適当
な動物、例えばウシ科動物に由来するものであつてもよ
いが、ヒトヘモグロビンであるのが好ましい。
な動物、例えばウシ科動物に由来するものであつてもよ
いが、ヒトヘモグロビンであるのが好ましい。
本発明の化合物、すなわち式Ｉを有する化合物、化合物
Hb-Zaおよび重合Hb-Zaは、酸素輸送能を有し有用であ
る。すなわちそれら化合物は例えば米国特許第4,343,71
5号明細書に記載された系における固定化酸素抽出物と
して有用である。それら化合物はまた血液代替物または
血液増量剤組成物への用途を有する。すなわち、それら
化合物は難灌流組織の酸素飽和度を高めるのに用いるこ
とができる。このような難灌流組織は癌増殖部、心筋梗
塞症、脳内出血の場合に存在する可能性がある。それら
化合物はまた、血液代替物として、例えば、事故や暴力
の犠牲者に対し、血液型および適合性を調べることが不
可能あるいは与えられた時間内で不可能な場合に、患者
が通常の輸血では危険またはそれを拒否する場合に、保
存すべき組織および器官に酸素を供与する目的で、体外
循環系をプライミングするために、あるいは赤血球が通
常指示されるその他の状態に用いることができる。
Hb-Zaおよび重合Hb-Zaは、酸素輸送能を有し有用であ
る。すなわちそれら化合物は例えば米国特許第4,343,71
5号明細書に記載された系における固定化酸素抽出物と
して有用である。それら化合物はまた血液代替物または
血液増量剤組成物への用途を有する。すなわち、それら
化合物は難灌流組織の酸素飽和度を高めるのに用いるこ
とができる。このような難灌流組織は癌増殖部、心筋梗
塞症、脳内出血の場合に存在する可能性がある。それら
化合物はまた、血液代替物として、例えば、事故や暴力
の犠牲者に対し、血液型および適合性を調べることが不
可能あるいは与えられた時間内で不可能な場合に、患者
が通常の輸血では危険またはそれを拒否する場合に、保
存すべき組織および器官に酸素を供与する目的で、体外
循環系をプライミングするために、あるいは赤血球が通
常指示されるその他の状態に用いることができる。
それら化合物は、当該患者に対し、薬学的に許容し得る
賦形剤、希釈剤または担体と混合して、例えば水性溶液
（これは緩衝され平衡した塩溶液であつもよい）として
投与してもよい。一般にそれら化合物は血漿増量剤の投
与について慣用的に用いられる様々なタイプの製剤、包
装、および投与形態を用いて投与されることになる。そ
れら化合物はまた、場合により寒冷保護剤と共に凍結乾
燥し後に使用のために再生してもよい。
賦形剤、希釈剤または担体と混合して、例えば水性溶液
（これは緩衝され平衡した塩溶液であつもよい）として
投与してもよい。一般にそれら化合物は血漿増量剤の投
与について慣用的に用いられる様々なタイプの製剤、包
装、および投与形態を用いて投与されることになる。そ
れら化合物はまた、場合により寒冷保護剤と共に凍結乾
燥し後に使用のために再生してもよい。
化合物の投与量は患者の背格好、状態および所望の処置
に応じて変わることになる。
に応じて変わることになる。
しかしながら、重篤な場合には実質的にすべての患者の
血液を本発明の化合物を含有する組成物により置換して
もよい。
血液を本発明の化合物を含有する組成物により置換して
もよい。
式Ｉを有する化合物および本発明のその他の化合物は類
似の既知化合物よりも望ましい酸素吸収および放出特性
を有し有利である。すなわち、本発明のある種の化合物
はホスホピリドキシル化ヘモグロビンよりも右にシフト
した酸素解離曲線（実施例３参照）を有する。本発明の
化合物はまた容易にかつ比較的高収率で製造でき有利で
ある。
似の既知化合物よりも望ましい酸素吸収および放出特性
を有し有利である。すなわち、本発明のある種の化合物
はホスホピリドキシル化ヘモグロビンよりも右にシフト
した酸素解離曲線（実施例３参照）を有する。本発明の
化合物はまた容易にかつ比較的高収率で製造でき有利で
ある。
本明細書中の分子量はMnではなくむしろMwとして表わさ
れる。
れる。
本発明を説明したが、次の実施例によつて全く制限され
るものではない。
るものではない。
実施例１ (a)イノシトールテトラキスホスフエートの製造 フイチン酸ナトリウム（イノシトールヘキサホスフエー
ト）を、可溶性小麦フイターゼを用いて脱ホスホリル化
した〔R.V.TomlinsonおよびC.E.Ballou共著「Biochemis
try」第１巻、第166〜171頁（1962）参照〕。あるいは
５０％エタノールで２回および９５％エタノールで１回
洗浄したふすま（Wheat bran）をフイターゼ源として用
いてもよい。脱ホスホリル化は有意量のイノシトールヘ
キサホスフエートまたはイノシトールペンタホスフエー
トが溶液中に残らなくなるまで進行させた。フイターゼ
の使用量はこの手順に約７２時間を要するように選択し
た。その反応混合物を過し次いで遠心分離することに
より清澄化した。IM FeCl3を生成溶液に添加してFeCl3:
もとのフイテートのモル比を3:1とした。黄色沈澱を遠
心分離により集めそして蒸留水に再懸濁した。固体NaOH
をその懸濁液に添加してpH１２とし、そしてその混合物
を攪拌しそしてpH１２に３時間維持した。過後、液
を酢酸を用いてpH5.2となるまで中和した。（最初に50m
Mのイノシトールヘキサホスフエートを含有する）５ｌ
の消化物（digest）から得られる液を蒸留水で平衡し
た１ｌカラムのDowex-1樹脂に負荷した。負荷後にカラ
ムを１ｌの蒸留水で洗浄しそして７ｌの0.3N HCl、次い
で４ｌの1N HClで溶出した。イノシトールテトラホスフ
エート含有画分を３容量の９５％エタノールで沈澱させ
た。４°で一夜放置後、上清を注ぎ山し粘稠沈澱を残し
た。無水エタノールを沈澱が白色粉末となるまで添加し
た。その粉末を無水エタノール、1:1エタノール：エー
テル、最後にエーテルを用いて洗浄して所望の生成物を
得た。
ト）を、可溶性小麦フイターゼを用いて脱ホスホリル化
した〔R.V.TomlinsonおよびC.E.Ballou共著「Biochemis
try」第１巻、第166〜171頁（1962）参照〕。あるいは
５０％エタノールで２回および９５％エタノールで１回
洗浄したふすま（Wheat bran）をフイターゼ源として用
いてもよい。脱ホスホリル化は有意量のイノシトールヘ
キサホスフエートまたはイノシトールペンタホスフエー
トが溶液中に残らなくなるまで進行させた。フイターゼ
の使用量はこの手順に約７２時間を要するように選択し
た。その反応混合物を過し次いで遠心分離することに
より清澄化した。IM FeCl3を生成溶液に添加してFeCl3:
もとのフイテートのモル比を3:1とした。黄色沈澱を遠
心分離により集めそして蒸留水に再懸濁した。固体NaOH
をその懸濁液に添加してpH１２とし、そしてその混合物
を攪拌しそしてpH１２に３時間維持した。過後、液
を酢酸を用いてpH5.2となるまで中和した。（最初に50m
Mのイノシトールヘキサホスフエートを含有する）５ｌ
の消化物（digest）から得られる液を蒸留水で平衡し
た１ｌカラムのDowex-1樹脂に負荷した。負荷後にカラ
ムを１ｌの蒸留水で洗浄しそして７ｌの0.3N HCl、次い
で４ｌの1N HClで溶出した。イノシトールテトラホスフ
エート含有画分を３容量の９５％エタノールで沈澱させ
た。４°で一夜放置後、上清を注ぎ山し粘稠沈澱を残し
た。無水エタノールを沈澱が白色粉末となるまで添加し
た。その粉末を無水エタノール、1:1エタノール：エー
テル、最後にエーテルを用いて洗浄して所望の生成物を
得た。
(b)イノシトールテトラキスホスフエートの酸化 １１ｇのイノシトールテトラキスホスフエート（工程a)
と同様にして製造）の0.6M HIO4・2H2O 322ml中の溶液を
２２゜Cで暗所に８時間インキユベートした。その反応混
合物を5N KOHでpH5.2となるまで中和し、０゜Cに１０分
間保ち、次いで遠心分離してKIO4を除去した。その上清
にアスコルビン酸（56.7g）を添加した。10分後３容量
のエタノールを添加しそしてその混合物を４゜Cに１時間
保つた。透明粘稠沈澱を遠心分離により集めた。その沈
澱を１００mlの無水エタノールに添加した。磨砕すると
その沈澱はより固化しそしてそのエタノール性上清を各
５０mlの無水エタノールで４回置換すると最終的に粉末
となつた。生成白色粉末をエタノール、1:1エタノー
ル：エーテルおよびエーテルで順次洗浄しそして空気乾
燥した。イノシトールテトラキスホスフエートのジアル
デヒド誘導体（FPA）を7.7ｇの収量で得た。
と同様にして製造）の0.6M HIO4・2H2O 322ml中の溶液を
２２゜Cで暗所に８時間インキユベートした。その反応混
合物を5N KOHでpH5.2となるまで中和し、０゜Cに１０分
間保ち、次いで遠心分離してKIO4を除去した。その上清
にアスコルビン酸（56.7g）を添加した。10分後３容量
のエタノールを添加しそしてその混合物を４゜Cに１時間
保つた。透明粘稠沈澱を遠心分離により集めた。その沈
澱を１００mlの無水エタノールに添加した。磨砕すると
その沈澱はより固化しそしてそのエタノール性上清を各
５０mlの無水エタノールで４回置換すると最終的に粉末
となつた。生成白色粉末をエタノール、1:1エタノー
ル：エーテルおよびエーテルで順次洗浄しそして空気乾
燥した。イノシトールテトラキスホスフエートのジアル
デヒド誘導体（FPA）を7.7ｇの収量で得た。
(c)ジメチルアミン−ボラン（DMAB）を用いた FPAのデキストランヘモグロビンの共有結合分子量20,00
0を有するデキストランを用いるほかは英国特許（BP）
第1,549,246号明細書の実施例１の方法により製造され
た、pH7.4の0.05M（ビス−〔２−ヒドロキシエチル〕−
アミノ−トリス−〔ヒドロキシメチル〕）メタン（ビス
−トリス）中の６％w/w（ヘモグロビンのみについて測
定）のデキストランヘモグロビン（Dx-Hb)0.25mlにpH5.
2の0.05M酢酸ナトリウム緩衝液0.17ml中のFPA1.25mgを
添加した（約7.3FPA:1Dx-Hb）。その混合物のpHを希NaO
Hで7.4に調節し、0.025mlの0.5Mジメチルアミンボラン
（DMAB）を添加し、そしてその溶液を０゜Cで２時間イン
キュベートした。生成混合物をpH8.5の0.1M２−アミノ
−２−（ヒドロキシメチル）−1,3−プロパンジオール
（トリス）1N NaCl緩衝液中で平衡した３０mlのSephade
x G25カラムに適用しそして４゜Cで流した。ピークの最
初の2/3を集め、pH7.4の0.05Mビス−トリス緩衝液で一
夜透析し、次いで酸素解離測定に用いた。前記Sephadex
カラムの使用は所望により省略してもよい。
0を有するデキストランを用いるほかは英国特許（BP）
第1,549,246号明細書の実施例１の方法により製造され
た、pH7.4の0.05M（ビス−〔２−ヒドロキシエチル〕−
アミノ−トリス−〔ヒドロキシメチル〕）メタン（ビス
−トリス）中の６％w/w（ヘモグロビンのみについて測
定）のデキストランヘモグロビン（Dx-Hb)0.25mlにpH5.
2の0.05M酢酸ナトリウム緩衝液0.17ml中のFPA1.25mgを
添加した（約7.3FPA:1Dx-Hb）。その混合物のpHを希NaO
Hで7.4に調節し、0.025mlの0.5Mジメチルアミンボラン
（DMAB）を添加し、そしてその溶液を０゜Cで２時間イン
キュベートした。生成混合物をpH8.5の0.1M２−アミノ
−２−（ヒドロキシメチル）−1,3−プロパンジオール
（トリス）1N NaCl緩衝液中で平衡した３０mlのSephade
x G25カラムに適用しそして４゜Cで流した。ピークの最
初の2/3を集め、pH7.4の0.05Mビス−トリス緩衝液で一
夜透析し、次いで酸素解離測定に用いた。前記Sephadex
カラムの使用は所望により省略してもよい。
(d)NaBH4を用いたFPAのDx-Hbへの共有結合 pH7.4の0.05Mビス−トリス中の６％Dx-Hb（前記ｃ）に
おいて用いたものと同様のもの）0.25mlに２０mg／ml溶
液中のFPA3.41mgを添加した（２０FPA:1Dx-Hb）。その
溶液の最終pHは7.0であつた。０゜Cで２０分間インキユ
ベートした後、0.025mlの0.8M NaBH4を添加した。その
溶液を０゜Cで更に２時間インキユベートした。次にその
反応混合物をpH8.5の0.1Mトリス1N NaCl中で平衡した３
０mlのSephadexＧ２５カラムにかけそして４゜Cで流し
た。ピークの最初の2/3を集め、前記c)におけると同様
にして透析しそして酸素解離測定に用いた。この場合
も、Sephadexカラムの使用を所望により省略してもよ
い。
おいて用いたものと同様のもの）0.25mlに２０mg／ml溶
液中のFPA3.41mgを添加した（２０FPA:1Dx-Hb）。その
溶液の最終pHは7.0であつた。０゜Cで２０分間インキユ
ベートした後、0.025mlの0.8M NaBH4を添加した。その
溶液を０゜Cで更に２時間インキユベートした。次にその
反応混合物をpH8.5の0.1Mトリス1N NaCl中で平衡した３
０mlのSephadexＧ２５カラムにかけそして４゜Cで流し
た。ピークの最初の2/3を集め、前記c)におけると同様
にして透析しそして酸素解離測定に用いた。この場合
も、Sephadexカラムの使用を所望により省略してもよ
い。
別法として、pH7.4の0.05Mビス−トリス中の0.2mlの６
％Dx-Hb（前記c)で用いたものと同様のもの）に５mg／m
l溶液としての0.68mgのFPAを添加した（５FPA:1Dx-H
b）。その混合物を０゜Cで２０分間インキユベートし、
そして0.02mlの0.5M NaBH4を０゜Cで常時攪拌しながら２
時間にわたつて添加した。
％Dx-Hb（前記c)で用いたものと同様のもの）に５mg／m
l溶液としての0.68mgのFPAを添加した（５FPA:1Dx-H
b）。その混合物を０゜Cで２０分間インキユベートし、
そして0.02mlの0.5M NaBH4を０゜Cで常時攪拌しながら２
時間にわたつて添加した。
(e)ジメチルアミン−ボランまたはNaBH4を用いたFPAのH
bへの共有結合 pH7.4の0.05Mビス−トリスに溶解した0.25mlの６％w/w
ヘモグロビンに、pH5.2の0.05M酢酸ナトリウム緩衝液0.
17ml中の1.25mgのFPAを添加した。その混合物のpHを希N
aOHで7.4に調節し、0.025mlの0.5Mジメチルアミンボラ
ンを添加し、そしてその溶液を０゜Cで２時間インキユベ
ートした。その反応混合物を1N NaClを含むpH8.5の0.1M
トリス緩衝液中で平衡した30mlのSephadex G25カラムに
かけそして４゜Cで流した。ピークの最初の2/3を集め、p
H7.4の0.05Mビス−トリス緩衝液で一夜透析し、次いで
酸素測定に用いた。（Sephadexカラムの使用は省略して
もよい。）そのようにして得られたFPA-Hbは遊離Hbより
も右にシフトした酸素解離曲線を有し、それ故に、血液
置換または固定化酸素抽出物中への取込みのために低酸
素親和性が重要である場合に酸素運搬体として用いるこ
とができる。NaBH4をDMABに代えて用いてもよい。その
ようにして製造されたFPA-Hbはまた下記(f)および(g)に
おいても有用である。
bへの共有結合 pH7.4の0.05Mビス−トリスに溶解した0.25mlの６％w/w
ヘモグロビンに、pH5.2の0.05M酢酸ナトリウム緩衝液0.
17ml中の1.25mgのFPAを添加した。その混合物のpHを希N
aOHで7.4に調節し、0.025mlの0.5Mジメチルアミンボラ
ンを添加し、そしてその溶液を０゜Cで２時間インキユベ
ートした。その反応混合物を1N NaClを含むpH8.5の0.1M
トリス緩衝液中で平衡した30mlのSephadex G25カラムに
かけそして４゜Cで流した。ピークの最初の2/3を集め、p
H7.4の0.05Mビス−トリス緩衝液で一夜透析し、次いで
酸素測定に用いた。（Sephadexカラムの使用は省略して
もよい。）そのようにして得られたFPA-Hbは遊離Hbより
も右にシフトした酸素解離曲線を有し、それ故に、血液
置換または固定化酸素抽出物中への取込みのために低酸
素親和性が重要である場合に酸素運搬体として用いるこ
とができる。NaBH4をDMABに代えて用いてもよい。その
ようにして製造されたFPA-Hbはまた下記(f)および(g)に
おいても有用である。
(f)臭化シアン活性化デキストランのFPA-Hbへの共有結
合 70,000の分子量を有するデキストラン２ｇを８０％ホル
ムアミド−２０％水v/v混合物に溶解し、そしてその溶
液を−１５゜Cに冷却した。４゜Cの８０％ホルムアミド−
２０％水v/v3.2ml中の1.6ｇのCNBrを次いで攪拌しなが
ら添加した。−１５゜Cのジメチルホルムアミド中の1.5M
トリエチルアミン15.1mlを更に、攪拌しながら滴加し
た。−１５゜Cで１０分間インキユベートした後、１容量
のアセトン（−２０゜C）をその混合物に添加して活性化
デキストランを沈澱させた。その沈澱をアセトン（−２
０゜C）を用いて遠心分離により２回、エーテルを用いて
１回洗浄し、そして空気乾燥して活性化デキストランを
得た。３５mgの活性化デキストランをpH7.4の0.05Mビス
−トリス中の１mlのFPA-Hb(Hbに対して３％）に添加
し、そしてその溶液を０゜Cで１６時間保つた。
合 70,000の分子量を有するデキストラン２ｇを８０％ホル
ムアミド−２０％水v/v混合物に溶解し、そしてその溶
液を−１５゜Cに冷却した。４゜Cの８０％ホルムアミド−
２０％水v/v3.2ml中の1.6ｇのCNBrを次いで攪拌しなが
ら添加した。−１５゜Cのジメチルホルムアミド中の1.5M
トリエチルアミン15.1mlを更に、攪拌しながら滴加し
た。−１５゜Cで１０分間インキユベートした後、１容量
のアセトン（−２０゜C）をその混合物に添加して活性化
デキストランを沈澱させた。その沈澱をアセトン（−２
０゜C）を用いて遠心分離により２回、エーテルを用いて
１回洗浄し、そして空気乾燥して活性化デキストランを
得た。３５mgの活性化デキストランをpH7.4の0.05Mビス
−トリス中の１mlのFPA-Hb(Hbに対して３％）に添加
し、そしてその溶液を０゜Cで１６時間保つた。
この方法により得られたFPA-Dx-Hb(Hbに対して８％）0.
15mlを１１８mlのSephadex G150カラムでのクロマトグ
ラフイーにより未結合FPA-Hbから分離して第１図に示さ
れる576nmにおける光学濃度グラフを得た。図面中矢印
は未結合FPA-Hbの位置を示す。
15mlを１１８mlのSephadex G150カラムでのクロマトグ
ラフイーにより未結合FPA-Hbから分離して第１図に示さ
れる576nmにおける光学濃度グラフを得た。図面中矢印
は未結合FPA-Hbの位置を示す。
(g)グルタールアルデヒドを重合剤として用いたポリ-FP
A-Hbの製造 ４゜CでpH7.5の0.1Mりん酸ナトリウム緩衝液中のFPA-Hb
（Hbに対して６％）6.5mlに同じ緩衝液中の５％グルタ
ールアルデヒド0.195mlを添加した。その混合物を４゜C
に１６時間保ち、そして0.15mlのその混合物を１１８ml
のSephadexＧ 150カラムにおけるクロマトグラフイー
により分離して第２図に示された576nmにおける光学濃
度グラフを得た。図面中矢印は遊離Hbの位置を示す。
A-Hbの製造 ４゜CでpH7.5の0.1Mりん酸ナトリウム緩衝液中のFPA-Hb
（Hbに対して６％）6.5mlに同じ緩衝液中の５％グルタ
ールアルデヒド0.195mlを添加した。その混合物を４゜C
に１６時間保ち、そして0.15mlのその混合物を１１８ml
のSephadexＧ 150カラムにおけるクロマトグラフイー
により分離して第２図に示された576nmにおける光学濃
度グラフを得た。図面中矢印は遊離Hbの位置を示す。
ホスフエート測定 0.5mlまでの量のFPA-Dx-HbまたはFPA-Hb溶液を1.2mlの
７０％HClO4を添加し次いで透明になるまで沸騰させる
ことにより消化した。次いで、８mlのH2O、0.05mlの５
％モリブデン酸アンモニウムおよび0.05mlの0.25%１−
アミノ−２−ナフトール−４−スルホン酸を添加した。
得られた溶液を１０分間沸騰させそして８２０nmにおけ
る吸光度または光学濃度を読取つてホスフエート濃度を
測定した。
７０％HClO4を添加し次いで透明になるまで沸騰させる
ことにより消化した。次いで、８mlのH2O、0.05mlの５
％モリブデン酸アンモニウムおよび0.05mlの0.25%１−
アミノ−２−ナフトール−４−スルホン酸を添加した。
得られた溶液を１０分間沸騰させそして８２０nmにおけ
る吸光度または光学濃度を読取つてホスフエート濃度を
測定した。
ヘモグロビン濃度はD.L.DrabkinおよびJ.H.Austin共
著、「J.Biological Chemistry」第112巻、第51〜65頁
（1935年）により測定した。
著、「J.Biological Chemistry」第112巻、第51〜65頁
（1935年）により測定した。
実施例２ ａ）0.5ミリモルの2,3−ジホスホグリセレートを１０ml
の水に溶解しそしてピリジン型のDowex（またはAG）−5
0カラムに通した。流出液を集めそして減圧濃縮した。
無水ピリジンを添加しそして濃縮することにより水を除
去した。残留する水およびピリジンをピリジン臭がなく
なるまで（２回）無水ジメチルホルムアミドで洗浄する
ことにより除去した。６ミリモルのアミノアセトアルデ
ヒドジエチルアセタールを無水ジメチルスルホキシドを
溶媒として用いて添加しそして振盪により混合した。６
ミリモルのジシクロヘキシルカルボジイミドを添加しそ
してその混合物を室温で３〜４時間攪拌した。次に少量
の水を添加しそして沈澱を去した。その液を残留反
応成分を除去するために無水エーテルで抽出し（３
Ｘ）、そしてその溶液を濃縮乾涸して白色粉末生成物を
得た。
の水に溶解しそしてピリジン型のDowex（またはAG）−5
0カラムに通した。流出液を集めそして減圧濃縮した。
無水ピリジンを添加しそして濃縮することにより水を除
去した。残留する水およびピリジンをピリジン臭がなく
なるまで（２回）無水ジメチルホルムアミドで洗浄する
ことにより除去した。６ミリモルのアミノアセトアルデ
ヒドジエチルアセタールを無水ジメチルスルホキシドを
溶媒として用いて添加しそして振盪により混合した。６
ミリモルのジシクロヘキシルカルボジイミドを添加しそ
してその混合物を室温で３〜４時間攪拌した。次に少量
の水を添加しそして沈澱を去した。その液を残留反
応成分を除去するために無水エーテルで抽出し（３
Ｘ）、そしてその溶液を濃縮乾涸して白色粉末生成物を
得た。
ｂ）工程a)の粗製生成物（もとの2,3−ジホスホログリ
セレート約0.5ミリモルに等しい）を少量の水に溶解し
た。その溶液をDowex-50-H+型に通して遊離アミンを除
いた。流出液の酸性部分を集め、約２mlに濃縮しそして
0.5mlの1NHClを添加した。得られた溶液を４゜Cに３０〜
６０分間放置しそして等価量のNH4HCO3を添加してpHを
約７に調節した。
セレート約0.5ミリモルに等しい）を少量の水に溶解し
た。その溶液をDowex-50-H+型に通して遊離アミンを除
いた。流出液の酸性部分を集め、約２mlに濃縮しそして
0.5mlの1NHClを添加した。得られた溶液を４゜Cに３０〜
６０分間放置しそして等価量のNH4HCO3を添加してpHを
約７に調節した。
ｃ）英国特許第1,549,246号明細書の実施例１の方法に
より製造した３μモルの６％デキストラン−ヘモグロビ
ン（酸素化されているかまたは脱酸素されているもの）
をpH7.4の0.05Mトリス中に溶解した。工程b)の生成物
（15μモル）およびナトリウムシアノボロハイドライド
（60μモル）を添加し、そしてその反応混合物を２時間
室温に保持した。次いで工程b)の過剰生成物を、(i)pH
8.5の1M NaCl/0.05Mトリスで透析するかまたは(ii)pH8.
5の1M NaCl/0.05Mトリスで平衡したSephadex C25に通し
先端ピークを集めることにより除去した。式ＩのDx-Hb-
NH-CH2-CH2-NH-CO-CH(OPO3 2-)-CH2(OPO3 2-)（ここでDx-
HbはヘモグロビンとＮ−ブロモアセチルアミノエチルア
ミノデキストランとの反応により得られたコンプレック
スであり、-NH-はヘモグロビン上の側鎖から由来するア
ミノ部分を示す）を有する化合物が得られた。
より製造した３μモルの６％デキストラン−ヘモグロビ
ン（酸素化されているかまたは脱酸素されているもの）
をpH7.4の0.05Mトリス中に溶解した。工程b)の生成物
（15μモル）およびナトリウムシアノボロハイドライド
（60μモル）を添加し、そしてその反応混合物を２時間
室温に保持した。次いで工程b)の過剰生成物を、(i)pH
8.5の1M NaCl/0.05Mトリスで透析するかまたは(ii)pH8.
5の1M NaCl/0.05Mトリスで平衡したSephadex C25に通し
先端ピークを集めることにより除去した。式ＩのDx-Hb-
NH-CH2-CH2-NH-CO-CH(OPO3 2-)-CH2(OPO3 2-)（ここでDx-
HbはヘモグロビンとＮ−ブロモアセチルアミノエチルア
ミノデキストランとの反応により得られたコンプレック
スであり、-NH-はヘモグロビン上の側鎖から由来するア
ミノ部分を示す）を有する化合物が得られた。
実施例３ 実施例１の生成物および出発ヘモグロビンデキストラン
の酸素解離曲線をBenesch、MacDuffおよびBenesch共著
「Anal.Biochem.」第１１巻第81〜87頁（1965）の方法
を用いるが２４゜Cの温度およびpH7.4で0.05Mのビス−ト
リス緩衝液を用いて測定した。
の酸素解離曲線をBenesch、MacDuffおよびBenesch共著
「Anal.Biochem.」第１１巻第81〜87頁（1965）の方法
を用いるが２４゜Cの温度およびpH7.4で0.05Mのビス−ト
リス緩衝液を用いて測定した。
結果は添付第３図および第４図に示す。
第１図は実施例１(f)で得られたFPA-Dx-Hbについての容
量と576nmにおける光学濃度との関係を示す図であり、
第２図は実施例１(g)で得られたポリ-FPA-Hbについての
容量と576nmにおける光学濃度との関係を示す図であ
り、第３図は、Sephadexカラムで分離する前の実施例1
g)の生成物についての酸素飽和とLogPo2との関係を示す
図であり、１はヒトのポリ-FPA-Hb、そして２はウシの
ポリ-FPA-Hbのそれぞれの結果を示し、そして第４図は
酸素飽和とLogPo2との関係を示す図であり１は実施例１
c)のデキストランヘモグロビン出発物質についての結
果、２は実施例１d)の生成物についての結果、３は実施
例１c)の生成物についての結果そして４は実施例(e)のD
MABを用いた生成物についての結果を示す。
量と576nmにおける光学濃度との関係を示す図であり、
第２図は実施例１(g)で得られたポリ-FPA-Hbについての
容量と576nmにおける光学濃度との関係を示す図であ
り、第３図は、Sephadexカラムで分離する前の実施例1
g)の生成物についての酸素飽和とLogPo2との関係を示す
図であり、１はヒトのポリ-FPA-Hb、そして２はウシの
ポリ-FPA-Hbのそれぞれの結果を示し、そして第４図は
酸素飽和とLogPo2との関係を示す図であり１は実施例１
c)のデキストランヘモグロビン出発物質についての結
果、２は実施例１d)の生成物についての結果、３は実施
例１c)の生成物についての結果そして４は実施例(e)のD
MABを用いた生成物についての結果を示す。
Claims (7)
- 【請求項１】約70,000〜2,000,000の分子量を有しそし
て式Ｉ (PS)−Ｘ−(HB)−Ｚ Ｉ （式中PSは約2,000〜約2,000,000の分子量の生理学的に
許容し得るポリサッカライドを表わし、Ｘは共有結合し
た化学的架橋基を表わし、HBはヘモグロビン残基を表わ
し、そしてＺは２個またはそれ以上のヒドロキシ基がり
ん酸でエステル化されているポリオールである）を有す
る水溶性化合物。 - 【請求項２】Ｚが２〜６個のホスフェート基を有する特
許請求の範囲第１項に記載の化合物。 - 【請求項３】Ｚが式IV OHC-CHRx-CHRx-CHRx-CHRx-CHO IV （式中基Rxのうち少なくとも２個はホスフェート基であ
りそして残りは-OH基である）で表わされる化合物から
導かれる特許請求の範囲第１〜２項のいずれか一つに記
載の化合物。 - 【請求項４】ポリサッカライドが10,000〜100,000の平
均分子量を有するデキストランである特許請求の範囲第
１〜３項のいずれか一つに記載の化合物。 - 【請求項５】ホスフェート：ヘモグロビン比が２〜16：
１の範囲にある特許請求の範囲第１〜４項のいずれか一
つに記載の化合物。 - 【請求項６】約70,000〜2,000,000の分子量を有しそし
て式Ｉ (PS)−Ｘ−(HB)−Ｚ Ｉ （式中PSは約2,000〜約2,000,000の分子量の生理学的に
許容し得るポリサッカライドを表わし、Ｘは共有結合し
た化学的架橋基を表わし、HBはヘモグロビン残基を表わ
し、そしてＺは２個またはそれ以上のヒドロキシ基がり
ん酸でエステル化されているポリオールである）を有す
る水溶性化合物の製造方法であって、 (a)式II (PS)−Ｘ−(HB) II （式中PS、ＸおよびHBは前記定義のとおりである）で表
わされる化合物を、Ｚ配位子を供与し得る化合物と結合
させるか、 (b)式III (HB)−Ｚ III （式中HBおよびＺは前記定義のとおりである）で表わさ
れる化合物をポリサッカライドPSと結合させるか、また
は、 (c)還元されうる二重結合を有する相当する式Ｉの化合
物の還元により式Ｉの化合物の還元型を製造する ことより成る前記製造方法。 - 【請求項７】約70,000〜2,000,000の分子量を有しそし
て式Ｉ (PS)−Ｘ−(HB)−Ｚ Ｉ （式中PSは約2,000〜約2,000,000の分子量の生理学的に
許容し得るポリサッカライドを表わし、Ｘは共有結合し
た化学的架橋基を表わし、HBはヘモグロビン残基を表わ
し、そしてＺは２個またはそれ以上のヒドロキシ基がり
ん酸でエステル化されているポリオールである）を有す
る水溶性化合物を薬学的に許容し得る賦形剤、希釈剤ま
たは担体と混合して成る血液代替物または血液増量剤ま
たは酸素抽出物として適当な酸素輸送体。
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| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| GB838328917A GB8328917D0 (en) | 1983-10-28 | 1983-10-28 | Blood substitute |
| GB8328917 | 1983-10-28 |
Related Child Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP5254619A Division JPH0714961B2 (ja) | 1983-10-28 | 1993-10-13 | 新規な変性ヘモグロビン |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS60123503A JPS60123503A (ja) | 1985-07-02 |
| JPH0643444B2 true JPH0643444B2 (ja) | 1994-06-08 |
Family
ID=10550912
Family Applications (2)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP59224269A Expired - Lifetime JPH0643444B2 (ja) | 1983-10-28 | 1984-10-26 | 血液代替物用の新規化合物およびその製造方法 |
| JP5254619A Expired - Fee Related JPH0714961B2 (ja) | 1983-10-28 | 1993-10-13 | 新規な変性ヘモグロビン |
Family Applications After (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP5254619A Expired - Fee Related JPH0714961B2 (ja) | 1983-10-28 | 1993-10-13 | 新規な変性ヘモグロビン |
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| Country | Link |
|---|---|
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| EP (1) | EP0140640B1 (ja) |
| JP (2) | JPH0643444B2 (ja) |
| AT (1) | ATE51629T1 (ja) |
| AU (1) | AU567593B2 (ja) |
| CA (1) | CA1236014A (ja) |
| DE (1) | DE3481844D1 (ja) |
| DK (1) | DK162395C (ja) |
| FI (1) | FI74979C (ja) |
| GB (1) | GB8328917D0 (ja) |
| IL (1) | IL73334A (ja) |
| NO (1) | NO165709C (ja) |
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| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4831012A (en) * | 1984-03-23 | 1989-05-16 | Baxter International Inc. | Purified hemoglobin solutions and method for making same |
| US5464814A (en) * | 1986-06-20 | 1995-11-07 | Northfield Laboratories, Inc. | Acellular red blood cell substitute |
| FR2600894B1 (fr) * | 1986-07-02 | 1989-01-13 | Centre Nat Rech Scient | Conjugues macromoleculaires d'hemoglobine, leur procede de preparation et leurs applications |
| DE3636590A1 (de) * | 1986-10-28 | 1988-05-26 | Braun Melsungen Ag | Blutersatzmittel |
| US5449759A (en) * | 1987-05-16 | 1995-09-12 | Somatogen, Inc. | Hemoglobins with intersubunit desulfide bonds |
| GB8712240D0 (en) * | 1987-05-23 | 1987-07-01 | Fisons Plc | Pharmaceutical formulation |
| DK110188D0 (da) * | 1988-03-02 | 1988-03-02 | Claus Selch Larsen | High molecular weight prodrug derivatives of antiinflammatory drugs |
| FR2630329B1 (fr) * | 1988-04-20 | 1991-07-05 | Merieux Inst | Conjugues macromoleculaires d'hemoglobine, leur procede de preparation et leurs applications |
| US4900780A (en) * | 1988-05-25 | 1990-02-13 | Masonic Medical Research Laboratory | Acellular resuscitative fluid |
| AU658821B2 (en) * | 1990-03-14 | 1995-05-04 | University Of Toronto Innovations Foundation, The | Acyl phosphate esters and modification of proteins therewith |
| US6172039B1 (en) | 1990-04-16 | 2001-01-09 | Apex Bioscience, Inc. | Expression of recombinant hemoglobin and hemoglobin variants in yeast |
| US5334705A (en) * | 1991-08-15 | 1994-08-02 | Duke University | Benzenetricarboxylate derivative-crosslinked low oxygen affinity hemoglobin |
| DE69226197T2 (de) * | 1991-11-08 | 1999-02-11 | Somatogen Inc | Hämoglobine als arzneimittelabgabesystem |
| US5900477A (en) * | 1992-01-30 | 1999-05-04 | Baxter International, Inc. | Use of hemoglobin in the treatment of hemorrhagic shock |
| US5334706A (en) * | 1992-01-30 | 1994-08-02 | Baxter International | Administration of low dose hemoglobin to increase perfusion |
| US5612310A (en) * | 1993-05-24 | 1997-03-18 | Duke University | Methods for improving therapeutic effectiveness of agents for the treatment of solid tumors and other disorders |
| US5554638A (en) * | 1993-05-24 | 1996-09-10 | Duke University | Methods for improving therapeutic effectiveness of agents for the treatment of solid tumors and other disorders |
| US5840851A (en) * | 1993-07-23 | 1998-11-24 | Plomer; J. Jeffrey | Purification of hemoglobin |
| US5578564A (en) * | 1993-07-23 | 1996-11-26 | Somatogen, Inc. | Nickel-free hemoglobin and methods for producing such hemoglobin |
| US5631219A (en) * | 1994-03-08 | 1997-05-20 | Somatogen, Inc. | Method of stimulating hematopoiesis with hemoglobin |
| US6242417B1 (en) | 1994-03-08 | 2001-06-05 | Somatogen, Inc. | Stabilized compositions containing hemoglobin |
| US6458762B1 (en) | 1994-03-28 | 2002-10-01 | Baxter International, Inc. | Therapeutic use of hemoglobin for preserving tissue viability and reducing restenosis |
| JPH10501823A (ja) * | 1995-04-10 | 1998-02-17 | バクスター、インターナショナル、インコーポレイテッド | クモ膜下出血の治療における架橋ヘモグロビンの使用 |
| US5733869A (en) * | 1995-10-06 | 1998-03-31 | Baxter International, Inc. | Therapeutic administration of hemoglobin in cardiac arrest |
| EP1007062A4 (en) * | 1996-10-21 | 2002-10-02 | Baxter Int | THERAPEUTIC USE OF HEMOGLOBIN FOR THE TREATMENT OF HEAD INJURIES |
| US5814601A (en) * | 1997-02-28 | 1998-09-29 | The Regents Of The University Of California | Methods and compositions for optimization of oxygen transport by cell-free systems |
| AU735799C (en) * | 1997-02-28 | 2005-04-28 | Regents Of The University Of California, The | Methods and compositions for optimisation of oxygen transport by cell-free systems |
| US6894150B1 (en) * | 1999-10-01 | 2005-05-17 | Ross Walden Tye | Non-pyrogenic, endotoxin-free, stroma-free tetrameric hemoglobin |
| CA2319966A1 (en) * | 2000-09-19 | 2002-03-19 | Dextro-Sang Corporation | Improved dextran-hemoglobin conjugate as potential blood substitute |
| FR2828206B1 (fr) * | 2001-08-03 | 2004-09-24 | Centre Nat Rech Scient | Utilisation d'inhibiteurs des lysyl oxydases pour la culture cellulaire et le genie tissulaire |
| US20050164915A1 (en) | 2002-04-01 | 2005-07-28 | Sangart, Inc. | Compositions for oxygen transport comprising a high oxygen affinity modified hemoglobin |
| US20030153491A1 (en) * | 2002-01-11 | 2003-08-14 | Winslow Robert M. | Methods and compositions for oxygen transport comprising a high oxygen affinity modified hemoglobin |
| CA2488230C (en) * | 2002-04-29 | 2013-04-09 | Yves Claude Nicolau | Inositol pyrophosphates, and methods of use thereof |
| JP3912206B2 (ja) * | 2002-07-05 | 2007-05-09 | 株式会社日立製作所 | 筒内直接燃料噴射装置用燃料ポンプ |
| KR20050095636A (ko) * | 2003-01-29 | 2005-09-29 | 노쓰필드 라보라토리스, 인코포레이티드 | 감소된 양의 테트라머를 지닌 중합된 헤모글로빈 용액 및이의 제조 방법 |
| US20060106000A1 (en) * | 2004-07-06 | 2006-05-18 | Claude Nicolau | Use of inositol-tripyrophosphate in treating tumors and diseases |
| US20060258626A1 (en) * | 2004-07-06 | 2006-11-16 | Claude Nicolau | Use of inositol-tripyrophosphate in treating tumors and diseases |
| US7745423B2 (en) * | 2004-07-06 | 2010-06-29 | NormOxys, Inc | Calcium/sodium salt of inositol tripyrophosphate as an allosteric effector of hemoglobin |
| US20070135389A1 (en) * | 2004-07-06 | 2007-06-14 | Claude Nicolau | Tumor eradication by inositol-tripyrophosphate |
| US20090004159A1 (en) * | 2006-01-24 | 2009-01-01 | The Board Of Trustees Of The University Of Illinoi | Polymerized Hemoglobin Media and Its Use in Isolation and Transplantation of Islet Cells |
| WO2007087570A2 (en) | 2006-01-24 | 2007-08-02 | Northfield Laboratories, Inc. | Polymerized hemoglobin media and its use in isolation and transplantation of islet cells |
| US7494974B2 (en) * | 2006-10-24 | 2009-02-24 | Ikor, Inc. | Carboxymethylated cross-linked tetrameric hemoglobin |
| US7504377B2 (en) * | 2006-10-23 | 2009-03-17 | Ikor, Inc. | Nitric oxide-blocked cross-linked tetrameric hemoglobin |
| CN101784193A (zh) * | 2007-05-01 | 2010-07-21 | 诺尔姆奥克西斯公司 | 促红细胞生成素互补或替代 |
| US20140227677A1 (en) * | 2013-02-07 | 2014-08-14 | OPK Biotech, LLC | Perfusion of prospective donor hearts with polymerized hemoglobin |
Family Cites Families (16)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE2449885C3 (de) * | 1974-10-21 | 1980-04-30 | Biotest-Serum-Institut Gmbh, 6000 Frankfurt | Verfahren zur Herstellung von chemisch modifizierten haltbaren Hämoglobinpräparaten sowie das nach diesem Verfahren hergestellte modifizierte Hämoglobinpräparat |
| US4053590A (en) * | 1975-02-27 | 1977-10-11 | Alza Corporation | Compositions of matter comprising macromolecular hemoglobin |
| CA1055932A (en) * | 1975-10-22 | 1979-06-05 | Hematech Inc. | Blood substitute based on hemoglobin |
| DE2616086C2 (de) * | 1976-04-13 | 1986-04-03 | Dr. Eduard Fresenius, Chemisch-pharmazeutische Industrie KG, 6380 Bad Homburg | Substanz zur Verwendung in einem kolloidalen Blutvolumenersatzmittel aus Hydroxyethylstärke und Hämoglobin |
| US4136093A (en) * | 1976-04-23 | 1979-01-23 | Biotest-Serum-Institut Gmbh | Hemoglobin preparation with increased oxygen release |
| DE2740053A1 (de) * | 1977-09-06 | 1979-05-03 | Klaus Prof Dr Med Gersonde | Verwendung von allosterischen effektoren mit hilfe von lipidvesikeln ueber eine irreversible inkorporierung zwecks verbesserter o tief 2 -entladung des haemoglobins in erythrozyten |
| JPS5716815A (en) * | 1980-07-02 | 1982-01-28 | Ajinomoto Co Inc | Oxygen transporting agent for artificial blood |
| US4343715A (en) * | 1980-10-10 | 1982-08-10 | Duke University | Immobilized hemoglobin, and processes for extracting oxygen from fluids using the same |
| US4401652A (en) * | 1980-12-31 | 1983-08-30 | Allied Corporation | Process for the preparation of stroma-free hemoglobin solutions |
| JPS57206622A (en) * | 1981-06-10 | 1982-12-18 | Ajinomoto Co Inc | Blood substitute |
| IN158551B (ja) * | 1981-08-12 | 1986-12-06 | Gen Electric Co Plc | |
| US4473496A (en) * | 1981-09-14 | 1984-09-25 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Army | Intramolecularly crosslinked hemoglobin |
| DE3144705C2 (de) * | 1981-11-11 | 1983-12-08 | Biotest-Serum-Institut Gmbh, 6000 Frankfurt | Verfahren zur Herstellung eines lagerstabilen, vernetzten Hämoglobinpräparates mit hoher Sauerstoff-Transportkapazität, sowie das nach diesem Verfahren hergestellte Hämoglobinpräparat |
| US4529719A (en) * | 1983-05-04 | 1985-07-16 | Tye Ross W | Modified crosslinked stroma-free tetrameric hemoglobin |
| FR2551660B1 (fr) * | 1983-09-13 | 1986-11-14 | Centre Nat Rech Scient | Hemoglobine modifiee chimiquement, sa preparation, solutions aqueuses en contenant et leur utilisation |
| US4600531A (en) * | 1984-06-27 | 1986-07-15 | University Of Iowa Research Foundation | Production of alpha-alpha cross-linked hemoglobins in high yield |
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