JPH0638779A - 固定化リパーゼを用いた油脂類のエステル交換方法 - Google Patents

固定化リパーゼを用いた油脂類のエステル交換方法

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JPH0638779A
JPH0638779A JP5121653A JP12165393A JPH0638779A JP H0638779 A JPH0638779 A JP H0638779A JP 5121653 A JP5121653 A JP 5121653A JP 12165393 A JP12165393 A JP 12165393A JP H0638779 A JPH0638779 A JP H0638779A
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Abstract

(57)【要約】 【構成】 疎水性の不溶性有機高分子から形成された担
体であって、平均径が１０ｎｍ以上の細孔を有し、かつ
担体表面にエポキシ基を有する担体に、リゾプス属、ム
コール属、アルカリゲネス属及びキャンディダ属由来の
リパーゼからなる群から選ばれる１種または２種以上の
リパーゼが固定されている油脂類のエステル交換用固定
化リパーゼの存在下、パーム油を含まない油脂および脂
肪酸、またはパーム油を含まない２種以上の油脂をエス
テル交換する。 【効果】 リパーゼ活性が極めて高く、微水系でエステ
ル交換反応を行うのに特に適しており、かつリパーゼの
使用量を低減できる固定化リパーゼを用いてパーム油を
含まない油脂類のエステル交換方法を効率的に行うこと
ができる。

Description

【発明の詳細な説明】
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は油脂類のエステル交換に
適した固定化リパーゼを用いたパーム油を含まない油脂
類のエステル交換方法に関する。
【０００２】
【従来技術】エステル交換反応は、ワックスエステル、
各種脂肪酸エステル、糖エステルやステロイド等の製造
法、あるいは植物油、動物油の改質法として重要な技術
である。このエステル交換反応の触媒として、油脂分解
酵素の一種であるリパーゼを用いると温和な条件下でエ
ステル交換反応を行うことが可能となり、また、その基
質特異性や位置特異性により目的物を効率よく生産する
ことができる。又、系内の水分をできる限り少なくし、
かつ酵素の活性が発現するに充分な量のリパーゼを存在
させてエステル交換反応を行うことが提案されている。
ところが、リパーゼは水溶性であり、微水系（油系）で
は均一に分散することが困難である。このような問題を
解決するためにリパーゼを不溶性担体に担持させた固定
化リパーゼが用いられている。そして、固定化リパーゼ
を採用することによって、さらに、生産物の分離が容易
となり、リパーゼの繰り返し利用が可能となり、反応系
の連続化が容易になるなどの利点が得られている。
【０００３】しかし、このような利点を有しているにも
係わらず、実用化に耐えうる固定化リパーゼは得られて
いない。固定化リパーゼの調製方法としては、多孔性の
キトサン成型物（特開昭５９−２１３３９０）、マクロ
ポーラス型陰イオン交換樹脂（特開昭６０−９８９８
４）、マクロポーラス型フェノール系吸着樹脂（特開昭
６１−２０２６８）、獣骨（特開昭６４−８０２８
６）、発泡性フェノール樹脂の焼成物（特開平２−１０
０６７８）、５０ｎｍ以上の細孔径を持つ疎水性担体
（特開平２−１３８９８６）、陽イオン交換樹脂（特開
平３−６４１８５）、マクロポーラス型アクリル系吸着
樹脂（特開平３−５０１９２２）を担体として用いるも
のが提案されている。しかしながら、これらの担体を使
用したのでは、十分なリパーゼ活性が得られない。又、
特開昭６０−１３７２９０では多糖類の水酸基を酸化し
たアルデヒド基を用いて酵素を多糖類担体に固定化する
方法が示されている。しかし、担体が親水性のため微水
系での反応には適していない。また、特開平１−２６２
７９５にはキレート樹脂に酵素を固定化する方法が示さ
れているが、実用に耐える活性を得るには至っていな
い。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】本発明は、担体に固定
化したリパーゼであって、リパーゼ活性の発現に優れ、
微水系でエステル交換反応を行うのに特に適しており、
かつリパーゼの使用量を低減できる固定化リパーゼを用
いたパーム油を含まない油脂類のエステル交換方法を提
供することを目的とする。
【０００５】
【課題を解決するための手段】本発明は、担体表面にエ
ポキシ基を有し、マクロポーラス型の吸着樹脂で形成さ
れた特定の担体に特定のリパーゼを担持させた固定化リ
パーゼを使用することにより、上記目的を解決できると
の知見に基づいてなされたのである。すなわち、本発明
で使用する固定化リパーゼは、疎水性の不溶性有機高分
子から形成された担体であって、平均径が１０ｎｍ以上
の細孔を有し、かつ担体表面にエポキシ基を有する担体
に、リゾプス属、ムコール属、アルカリゲネス属及びキ
ャンディダ属由来のリパーゼからなる群から選ばれる１
種または２種以上のリパーゼが固定されている油脂類の
エステル交換用固定化リパーゼである。かかる固定化リ
パーゼは、疎水性の不溶性有機高分子から形成された担
体であって、平均径が１０ｎｍ以上の細孔を有し、かつ
担体表面にエポキシ基を有する担体に、上記特定のリパ
ーゼの水溶液を接触させて、共有結合で該リパーゼを担
体に担持させ、しかる後に乾燥することにより製造する
ことができる。かくして、本発明は、パーム油を含まな
い油脂および脂肪酸、またはパーム油を含まない２種以
上の油脂を上記固定化リパーゼの存在下でエステル交換
することを特徴とする油脂のエステル交換方法を提供す
る。
【０００６】本発明で用いる固定化リパーゼにおいて、
担体を形成する疎水性の不溶性有機高分子としては、ス
チレン−ジビニルベンゼン共重合体、メタクリル酸エス
テル樹脂、アクリル酸エステル樹脂、ポリプロピレン、
ナイロン、フェノール樹脂などが用いられる。このう
ち、特にジビニルベンゼンとスチレン及び／又はメタク
リル酸エステルとの共重合体が好ましい。また、樹脂の
細孔径は１０ｎｍ以上、好ましくは１０ｎｍ〜1,０００
ｎｍである。本発明の固定化リパーゼでは、上記疎水性
の不溶性有機高分子で形成された担体の表面にエポキシ
官能基が位置するように、該担体を構成する不溶性有機
高分子に、エポキシ官能基をアルキル鎖またはアリール
鎖を介して結合させるのがよい。ここで、エポキシ基と
してはいかなるタイプのものでもよいが、好ましくは隣
り合った炭素に酸素原子が付加した１，２エポキシドが
用いられる。エポキシドに続くアルキル鎖の炭素数は１
〜２０、好ましくは１〜１０である。アルキル鎖の代わ
りにアリール鎖を用いることも可能である。この場合、
ベンゼン核の数は１〜１０、好ましくは１〜３である。
これらの官能基を導入した樹脂は例えばメタクリル酸グ
リシドとジビニルベンゼンとの共重合反応により得ら
れ、もしくは、上記の吸着樹脂あるいはこれを前処理し
て官能基を生成させたものに、エステル結合等の一般の
化学結合法でエポキシ基を導入することにより調製でき
るが、予めエポキシ官能基を導入した市販の樹脂を用い
ることも可能である。このようなものとしては、バイエ
ル社のレバチットＲ２５９Ｋ、Ｒ２６０Ｋやオルガノ社
のＦＰ４０００などが入手できる。
【０００７】本発明の固定化リパーゼでは、担体として
任意の粒径のものを使用することができるが、一般に担
体の粒子径の９０％以上が５０〜1,０００μｍのものを
使用するのが好ましいが、特に平均粒径が３００〜６０
０μｍのものを使用するのが好ましい。上記担体に固定
されるリパーゼは、リゾプス属、ムコール属、アルカリ
ゲネス属及びキャンディダ属由来のリパーゼからなる群
から選ばれる１種又は２種以上のリパーゼである。本発
明では、このように特定のリパーゼを固定することによ
り、初めて高活性の固定化リパーゼが得られたのであ
る。これらのうち、特に、ムコール属又はリゾプス属の
リパーゼを用いるのが好ましい。好ましい固定化酵素の
エステル交換活性は固定化酵素１ｇ（乾燥重量）あたり
１５０ユニット以上である。
【０００８】次に、固定化リパーゼの製造方法について
説明する。本発明では、エポキシ基を導入した疎水性の
母材からなる多孔質の不溶性担体に酵素液を接触させる
ことにより担体にリパーゼを担持させる。ここで、リパ
ーゼ液としては用いるリパーゼによって決まるが、例え
ば、リパーゼを0.０５〜１０重量％含む水溶液を担体
（乾燥重量）１重量部当たり１〜２００重量部使用する
のが好ましい。この際緩やかに撹拌することが好まし
い。固定化に要する時間は１０分から４０時間で、好ま
しくは４時間から２４時間である。固定化時の温度は４
℃から５０℃、好ましくは５℃から２５℃である。ま
た、必要に応じて酵素液を緩衝液で調製することもでき
る。この場合、調整ｐＨは酵素の至適ｐＨ付近が好まし
く、リパーゼを用いる場合、遊離酵素の状態で測定した
加水分解活性の至適ｐＨ、例えばｐＨ５〜９に調整する
のが好ましい。緩衝液の種類は特に規定されないが、酢
酸緩衝液、リン酸緩衝液を用いることができる。酵素を
担持した担体は濾過等により残液を除き、必要に応じて
イオン交換水等で洗浄する。この際、洗浄液にトリス塩
酸緩衝液等のアミノ基を有する物質を含んだ水溶液を用
いることにより、担体に残存する、未反応のエポキシ基
をブロックすることも可能である。除液した固定化酵素
は減圧乾燥法等により乾燥するのが好ましく、乾燥後の
水分が0.５重量％〜３０重量％、好ましくは５重量％〜
１０重量％となるようにするのがよい。乾燥後の水分が
0.５重量％未満の場合、十分にエステル交換活性が発現
されず、また３０重量％を超える場合、失活の原因にな
るとともに副反応である加水分解が無視できなくなる。
固定化操作において使用する担体と酵素の割合は、担体
１ｇ（乾燥重量）に対し、酵素中のタンパク質が0.１ｇ
から１０ｇ、好ましくは0.２ｇから５ｇであるが、特に
これに限定されるものではない。
【０００９】固定化に供する酵素には多くの場合夾雑タ
ンパク質が多く含まれているため、固定化時にはこれら
の夾雑物のなかから目的とするタンパク質であるリパー
ゼをある程度選択的に担持すること、および担持された
酵素が有効にエステル交換活性を発現することが高活性
の固定化酵素を得るうえで重要な因子である。これらは
それぞれ以下に定義される濃縮度及び発現効率で評価で
きる。 加水分解活性の測定には種々の方法があるが、ここでは
オリーブ油（局方）１重量部と２％ＰＶＡ水溶液（クラ
レ製ポバール１１７：１8.５ｇ／１、ポバール２０５：
1.５ｇ／１）1.５重量部を混合して乳化させた溶液を基
質とし、この乳化液５ｍｌにマッキルベン緩衝液（ｐＨ
７）４ｍｌと酵素液１ｍｌを加え３７℃で６０分反応さ
せた場合に加水分解で生じる遊離脂肪酸の量から計算さ
れる、１分あたり遊離脂肪酸１μｍｏｌを増加させる活
性を１ユニットとする。エステル交換活性の測定には種
々の方法があるが、ここではトリオレイン５０ｍＭ、パ
ルミチン酸５０ｍＭ、水分１００〜１５０ｐｐｍを含む
ヘキサン溶液を基質とし、この基質に２０ないし２００
ｍｇ（乾燥基準）の固定化酵素を加え５０℃で反応させ
た場合のパルミチン酸濃度の減少速度の最大値から計算
される、１分あたりパルミチン酸１μｍｏｌを減少させ
る活性を１ユニットとする。
【００１０】本発明では、上記固定化リパーゼを用い
て、パーム油を含まない油脂類のエステル交換を効率的
に行うことができる。特に、反応系中の水分含有量を５
０〜２０００ｐｐｍ、好ましくは１００〜１０００ｐｐ
ｍに低下させた微水系でエステル交換反応を行うのに適
している。本発明において、好適なエステル交換反応と
しては、温度３０〜７０℃であり、必要に応じて有機溶
媒を用いることもできる。用いる有機溶媒としては固定
化酵素の活性を低下させないものが選ばれ、例えばｎ−
ヘキサンや石油エーテルがあげられる。又、対象となる
油脂類としては、パーム油を含まない植物由来の油脂お
よび脂肪酸が好適であるが、この他に動物油脂、魚貝類
油脂およびそれらの脂肪酸を対象とすることもできる。
なおパーム油とは、パーム油、その分別油、水添油等の
加工油脂等のほか、これらを混合した各種油脂を包含す
るものである。ワックスエステル、各種脂肪酸エステ
ル、糖エステルやステロイド等の製造法、あるいは植物
油、動物油の改質法として種々のエステル交換反応を行
うことができる。
【００１１】
【発明の効果】本発明により、リパーゼ活性が極めて高
く、微水系でエステル交換反応を行うのに特に適してお
り、かつリパーゼの使用量を低減できる固定化リパーゼ
を用いてパーム油を含まない油脂類のエステル交換方法
を効率的に行うことができる。次に実施例により本発明
を説明する。
【００１２】
【実施例】
参考例１ １，３位特異性を持つリパーゼ（天野製薬（株）製リパ
ーゼＦ−ＡＰ１５、Rhizopus oryzae 由来）１ｇ（２１
万加水分解ユニット／ｇ）を５０ｍｌのイオン交換水に
溶解した酵素液を調製し、これにジビニルベンゼンにス
チレンを導入した共重合体を母材としかつエポキシ基を
含む多孔性樹脂（バイエル社製レバチットＲ２５９Ｋ
細孔径：１７ｎｍ、平均粒径５００μｍ）５ｇ（含水率
約６０％）を加え、５℃で４時間緩やかに振とう撹拌し
て、リパーゼを樹脂に共有結合により担持させた。濾過
により残液を除いた後、減圧乾燥により含水率約１０％
の固定化リパーゼを調製した。 参考例２ ジビニルベンゼンにスチレンを導入した共重合体を母材
としかつエポキシ基を含む多孔性樹脂（バイエル社製レ
バチットＲ２６０Ｋ、細孔径２９ｎｍ、平均粒径５００
μｍ）を用いた他は、参考例１と同様にして固定化リパ
ーゼ（但し、含水率５％）を調製した。
【００１３】参考例３ ポリアクリル酸を母材としかつエポキシ基を含む多孔性
樹脂（オルガノ社製ＦＰ４０００、細孔径５５ｎｍ、平
均粒径１００μｍ）を用いた他は、参考例１と同様にし
て固定化リパーゼを調製した。 参考比較例１〜３ フェノール樹脂を母材とする弱塩基性陰イオン交換樹脂
（ローム・アンド・ハース社製デュオライトＡ−５６
８、粒径範囲２００〜４００μｍ）〔参考比較例１〕、
フェノール樹脂を母材とする吸着樹脂（ローム・アンド
・ハース社製デュオライトＳ−７６２、粒径範囲２００
〜４００μｍ）〔参考比較例２〕、スチレン−ジビニル
ベンゼン共重合体を母材とする吸着樹脂（三菱化成工業
（株）製ダイヤイオンＨＰ−４０、平均粒径３２０μ）
〔参考比較例３〕をそれぞれ用いた他は、参考例１と同
様にして固定化リパーゼを調製した。参考例１〜３、及
び参考比較例１〜３で得られた固定化リパーゼのタンパ
ク質およびオリーブ油の加水分解活性の担持量を表−１
に示す。
【００１４】
【表１】 表−１ ─────────────────────────────────── タンパク質担持量 加水分解活性 (mg/g-dry 固定化 担持量(unit/g 担 体 酵素） - 固定化酵素） 濃縮度 ─────────────────────────────────── 参考例１ レバチットR259K ２２０ １０８３００ 1.４ 参考例２ レバチットR260K １７７ ９０１００ 1.５ 参考例３ FP4000 １０２ ８４５００ 1.５ 参考比較例１ デュオライトA-568 ２４４ ２６１００ 0.３ 参考比較例２ デュオライトS-762 １６７ ８８４００ 1.５ 参考比較例３ ダイヤイオンHP-40 １７８ ７１９００ 1.２ ───────────────────────────────────
【００１５】参考例４ トリオレイン（５０ｍＭ）、パルミチン酸５０ｍＭを含
むヘキサン溶液（水分１００ｐｐｍ）１０ｍｌに実施例
１で調製した固定化リパーゼ２００ｍｇ（乾燥物基準）
を加え、５０℃、１００ストローク／分で振とう撹拌し
ながら反応させた。反応開始後１０分、２０分、４０
分、６０分、１２０分後の反応液のパルミチン酸および
その他の脂肪酸の濃度を測定した。エステル交換はパル
ミチン酸のトリグリセリドへの取り込みでみることと
し、パルミチン酸の減少速度の最大速度をエステル交換
活性（ユニット）として表−２に示す。 参考例５ 参考例２で調製した固定化リパーゼを使用した以外は参
考例４と同様にしてエステル交換反応を行なった。得ら
れたエステル交換活性を表−２に示す。
【００１６】参考例６ 参考例３で調製した固定化リパーゼを使用した以外は参
考例４と同様にしてエステル交換反応を行なった。得ら
れたエステル交換活性を表−２に示す。 参考比較例４〜６ 参考比較例１〜３で調製した固定化リパーゼを使用した
以外は、参考例４と同様にしてエステル交換反応を行な
った。 参考比較例７ 市販されている固定化リパーゼ（ノボ・ノルディスク・
バイオインダストリー社製リポザイムＩＭ６０）を用い
て、参考例４と同様にしてエステル交換反応を行なっ
た。参考例４〜６及び参考比較例４〜７で得られたエス
テル交換活性を表−２に示す。
【００１７】
【表２】 表−２ ─────────────────────────────────── エステル交換活性 (unit/g 担 体 -固定化酵素） 発現効率 ─────────────────────────────────── 参考例４ レバチットＲ２５９Ｋ ２８2.４ 2.６１×１０-3 参考例５ レバチットＲ２６０Ｋ ２４7.２ 2.７４×１０-3 参考例６ FP4000 ２１8.４ 2.５８×１０-3 参考比較例４ デュオライトＡ−５６８ １1.２ 0.４３×１０-3 参考比較例５ デュオライトＳ−７６２ ２4.７ 0.２８×１０-3 参考比較例６ ダイヤイオンＨＰ−４０ ８2.９ 1.１５×１０-3 参考比較例７ リポザイムＩＭ６０ １４5.３ −−−−− ───────────────────────────────────
【００１８】参考例７ リパーゼとしてリリパーゼＡ（長瀬産業（株）製、Rhiz
opus japonicus由来）９万加水分解ユニット／ｇを１ｇ
用いた以外は、参考例１と同様にして固定化リパーゼを
調製し、参考例４と同様にしてエステル交換反応を行っ
た。 参考比較例８ 固定化リパーゼとして参考比較例２の樹脂デュオライト
Ｓ−７６２を用いた以外は参考例７と同様にして固定化
リパーゼを調製し、参考例４と同様にしてエステル交換
反応を行った。参考例７及び参考比較例８で得られたエ
ステル交換活性を表−３に示す。
【表３】 表−３ ─────────────────────────────────── エステル交換活性 (unit/g 担 体 -固定化酵素） 発現効率 ─────────────────────────────────── 参考例７ レバチットＲ２５９Ｋ ２０3.４ 5.２１×１０-3 参考比較例８ デュオライトＳ−７６２ １0.４ 0.８０×１０-3 ───────────────────────────────────
【００１９】参考例８ リパーゼとしてリパーゼＭ（天野製薬（株）製、Mucor
javanicus 由来）１万５千加水分解ユニット／ｇを３ｇ
用いた以外は、参考例１と同様にして固定化リパーゼを
調製し、参考例４と同様にしてエステル交換反応を行っ
た。 参考例９ リパーゼとしてリパーゼＰＬ（名糖産業（株）製、Alca
ligenes sp由来）９万加水分解ユニット／ｇを１ｇ用い
た以外は、参考例１と同様にして固定化リパーゼを調製
し、参考例４と同様にしてエステル交換反応を行った。 参考例１０ リパーゼとしてリパーゼＯＦ（名糖産業（株）製、Cand
ida cylindracea 由来）２２万加水分解ユニット／ｇを
１ｇ用いた以外は、参考例１と同様にして固定化リパー
ゼを調製し、参考例４と同様にしてエステル交換反応を
行った。
【００２０】参考比較例９ リパーゼとしてリパーゼＣＥＳ（天野製薬（株）製、Ps
eudomonas sp由来）３万４千加水分解ユニット／ｇを３
ｇ用いた以外は、参考例１と同様にして固定化リパーゼ
を調製し、参考例４と同様にしてエステル交換反応を行
った。 参考比較例１０ リパーゼとしてリパーゼ三共（三共（株）製、Aspergil
lus niger 由来）２万４千加水分解ユニット／ｇを３ｇ
用いた以外は、参考例１と同様にして固定化リパーゼを
調製し、参考例４と同様にしてエステル交換反応を行っ
た。参考例８〜１０及び参考比較例９〜１０で得られた
エステル交換活性を表−４に示す。
【００２１】
【表４】 表−４ ────────────────────────────────── エステル交換活性 (unit/g 酵素 -固定化酵素） 発現効率 ────────────────────────────────── 参考例８ リパーゼＭ １９0.１ 4.５３×１０-3 参考例９ リパーゼＰＬ ２１5.５ 5.２６×１０-3 参考例１０ リパーゼＯＦ ２２8.３ 1.６２×１０-3 参考比較例９ リパーゼＣＥＳ ４5.２ 0.５１×１０-3 参考比較例１０ リパーゼ三共 ２9.８ 0.８９×１０-3 ──────────────────────────────────
【００２２】実施例１および比較例１ 参考例１で得られた固定化リパーゼ、及び参考比較例１
０で得られた固定化リパーゼ（リパーゼとしてAspergil
lus niger 由来のものを使用）各１ｇを、ハイオレイッ
クヒマワリ油（オレイン酸含量８３％）：菜種油の１：
１混合油１００ｇ（水分含量１８０ｐｐｍ）に添加した
後、５０°Ｃ、１００ストローク／分で振とう攪拌しな
がらエステル交換反応を行った。２時間、６時間及び２
４時間後に油脂部をサンプリングしエステル交換率を測
定した（実施例１および比較例１）。ここで、エステル
交換率とは、反応前及び実質的反応平衡時の炭素数５３
のトリグリセリド含有率を測定し、反応前を０％、実質
的反応平衡時を１００％として計算して得た値である。
結果を表−５に示す。
【００２３】
【表５】 表−５ ─────────────────────────────────── エステル交換率（％） リパーゼ 担体 2 Hr 6 Hr 24Hr ─────────────────────────────────── 実施例１ リパーゼF-AP15 レバチットR259K 49.8 85.5 99.0 比較例１ リパーゼ三共 レバチットR259K 9.5 20.1 49.6 ─────────────────────────────────── 実施例２ 参考例１で得た固定化酵素をカラムにつめ、ハイオレイ
ックヒマワリ油（オレイン酸含量８３％）：ステアリン
酸（純度９８％）＝１：１の混合物を６５℃でＳＶ＝１
にて流した。４００時間後にサンプリングし、トリグリ
セリド組成を測定し、反応前後のトリグリセリド組成の
変化から反応率を算出した。この反応油から蒸留により
遊離脂肪酸を５％以下まで除去した。次に、ヘキサンを
用いて１８℃および５℃にて２段分別した後、中融点部
を精製してカカオ代用脂を得た。結果を表−６に示す。 比較例２ 参考比較例１で求めた固定化酵素を用いる以外は実施例
２と同様にして反応率の測定ならびに中融点部を得た。
結果を表−６に示す。
【表６】 表−６ ───────────────────────────── 反応率 中融点部収率 （％） （％） ───────────────────────────── 実施例２ ８３ ３０ 比較例２ ４２ １８ ─────────────────────────────
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.5 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 (Ｃ１２Ｐ 7/64 Ｃ１２Ｒ 1:845） (Ｃ１２Ｐ 7/64 Ｃ１２Ｒ 1:785） (Ｃ１２Ｐ 7/64 Ｃ１２Ｒ 1:05） (Ｃ１２Ｐ 7/64 Ｃ１２Ｒ 1:72） (72)発明者 安藤 登 神奈川県横浜市神奈川区守屋町３丁目13番 地 千代田化工建設株式会社千代田リサー チパーク内 (72)発明者 皆見 武志 神奈川県横浜市神奈川区守屋町３丁目13番 地 千代田化工建設株式会社千代田リサー チパーク内

Claims (6)

    【特許請求の範囲】
  1. 【請求項１】 疎水性の不溶性有機高分子から形成され
    た担体であって、平均径が１０ｎｍ以上の細孔を有し、
    かつ担体表面にエポキシ基を有する担体に、リゾプス
    属、ムコール属、アルカリゲネス属及びキャンディダ属
    由来のリパーゼからなる群から選ばれる１種または２種
    以上のリパーゼが固定されている油脂類のエステル交換
    用固定化リパーゼの存在下、パーム油を含まない油脂お
    よび脂肪酸、またはパーム油を含まない２種以上の油脂
    をエステル交換することを特徴とする油脂のエステル交
    換方法。
  2. 【請求項２】 固定化リパーゼの不溶性有機高分子が、
    スチレン−ジビニルベンゼン共重合体、メタクリル酸エ
    ステル樹脂、ポリプロピレン及びナイロンから選ばれる
    樹脂である請求項１記載のエステル交換方法。
  3. 【請求項３】 固定化リパーゼの担体の粒子径の９０％
    以上が５０〜1,０００μｍである請求項１記載のエステ
    ル交換方法。
  4. 【請求項４】 固定化リパーゼのエポキシ官能基が、
    １，２エポキシドである請求項１記載のエステル交換方
    法。
  5. 【請求項５】 固定化リパーゼが減圧乾燥により含水率
    が0.５〜３０％に調整されている請求項１記載のエステ
    ル交換方法。
  6. 【請求項６】 パーム油を含まない油脂および脂肪酸が
    植物由来である請求項１記載のエステル交換方法。
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