JPH06107542A - 医薬組成物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【構成】 ９−シス−レチノイン酸、その薬学的に許容
し得る塩またはその薬学的に許容し得る加水分解性エス
テル、および治療的に不活性な薬学的に許容し得る担体
を含有する医薬組成物。 【効果】 上記医薬組成物は前悪性の上皮病変、すなわ
ち前癌性の病変の進行を遅延させる。特に胸部、頸、前
立腺、皮膚、結腸、膀胱、食道、胃、喉頭、肺または口
腔の上皮の前悪性または前癌性病変の治療に有効であ
る。また、種々な白斑症、特に口および舌の白斑症の前
悪性または前癌性病変を治療するために利用することも
できる。上記医薬組成物は経口的または局部的に投与さ
れる。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】本発明は９−シス−レチノイン酸、その薬
学的に許容し得る塩およびその薬学的に許容し得る加水
分解性エステルを含有する新規な医薬組成物に関するも
のである。

【０００２】さらに、本発明は医薬として使用するため
の９−シス−レチノイン酸、その薬学的に許容し得る塩
およびその薬学的に許容し得る加水分解性エステルに関
するものである。

【０００３】他の見地においては、本発明は以下に記載
するような医療に適用される医薬の製造における９−シ
ス−レチノイン酸、その薬学的に許容し得る塩およびそ
の薬学的に許容し得る加水分解性エステルの使用に関す
るものである。

【０００４】本発明によって、９−シス−レチノイン
酸、その薬学的に許容し得る塩またはその薬学的に許容
し得る加水分解性エステルは、上皮病変に関して、抗過
形成、抗化生、抗新形成の、腫瘍予防性および腫瘍治療
性を有し、レチノイド類（retinoids ）に関連して毒性
または他の不利な影響は限定されていることが見出され
た。上記性質を含む病理学的疾患の治療は、９−シス−
レチノイン酸、その薬学的に許容し得る塩またはその薬
学的に許容し得る加水分解性エステルを全身的にまたは
局所的に投与することにより効果的に治療できるという
ことが見出された。

【０００５】本発明の一実施態様によれば、９−シス−
レチノイン酸、その薬学的に許容し得る塩またはその薬
学的に許容し得る加水分解性エステルは、前悪性の上皮
病変、すなわち前癌性の病変を有する哺乳動物に投与し
た場合、これらの病変の進行を遅延させる。これらの化
合物はこれらの前悪性または前癌性病変の細胞生長およ
び分化を抑制しそして細胞修復をもたらす。これによ
り、これらの病変の上皮癌への進行が防止される。

【０００６】これらの病変の癌への進行を遅延させるた
めの前悪性または前癌性上皮病変の治療において、９−
シス−レチノイン酸、その薬学的に許容し得る塩または
その薬学的に許容し得る加水分解性エステルは、これら
の病変の進行を遅延させるのに有効な量で、これらの病
変に侵された患者に経口的または局所的に投与される。
これらの投与量は病変の量と大きさおよび患者の必要性
により決定される。

【０００７】９−シス−レチノイン酸、その薬学的に許
容し得る塩またはその薬学的に許容し得る加水分解性エ
ステルは、特に胸部、頸、前立腺、皮膚、結腸、膀胱、
食道、胃、喉頭、肺または口腔の上皮の前悪性または前
癌性病変の治療に有効である。好適な実施態様によれ
ば、これらの化合物は種々な白斑症、特に口および舌の
白斑症の前悪性または前癌性病変ならびに胸部の前癌性
または前悪性の病変を治療するために利用することがで
きる。

【０００８】本発明の他の実施態様によれば、９−シス
−レチノイン酸、その薬学的に許容し得る塩またはその
薬学的に許容し得る加水分解性エステルは、上皮起点の
癌または腫瘍を治療してこれらの腫瘍の進行を遅延する
ために利用することができる。これらの化合物の抗癌特
性または抗腫瘍特性によって、これらの化合物による腫
瘍の治療は、これらの腫瘍の大きさおよび数の両方を後
退させる。抗腫瘍剤としてのこれらの化合物の利用にお
いて、これらの化合物は特に胸部、頸、前立腺、皮膚、
結腸、膀胱、食道、胃、喉頭、肺また口の腫瘍の進行を
遅延させるのに有効である。９−シス−レチノイン酸は
前悪性または前癌性病変を有する患者の治療に関して上
述した方法で患者に投与することができる。

【０００９】上述した治療にあたっては、９−シス−レ
チノイン酸、その薬学的に許容し得る塩またはその薬学
的に許容し得る加水分解性エステルは、９−シス−レチ
ノイン酸および該化合物と適合し得、かつ薬学的に許容
し得る担体を含有する組成物として、全身的または局所
的に投与される。このような組成物の製造においては、
通常の薬学的に許容し得る担体はどのようなものでも利
用することができる。薬剤が経口的に投与される場合
は、それは規則的な時間的間隔で、好都合には食事時間
にまたは１日１回投与される。この化合物は局所的に投
与される場合および経口的に投与される場合には、比較
的非毒性であることが確証された。

【００１０】９−シス−レチノイン酸で有効に治療され
る前悪性および前癌性上皮病変または腫瘍を含む疾患の
例は、例えば、口、舌、咽頭および喉頭の粘膜の光線性
角化症、ヒ素性角化症、色素性乾皮症、Bowen 氏病、白
斑症、化生症、異形成症および乳頭腫、化生症および異
形成症のような気管支粘膜の前癌生変化（特にヘビース
モーカーおよびアスベストおよび／またはウラニウムを
取扱う人々にしばしばみられる）、子宮頸の異形成症お
よび白斑症、外陰部ジストロフィー、膀胱の前癌変化、
例えば膀胱の化生症、異形成症、乳頭腫ならびに腸管路
のポリープである。９−シス−レチノイン酸により有効
に治療される上皮起点の半悪性または悪性の腫瘍または
癌の例は、胸部腫瘍、頸および前立腺腫瘍、皮膚腫瘍、
例えば基底細胞癌、膀胱腫瘍、例えば表面膀胱癌、結腸
腫瘍、食道腫瘍、胃腫瘍、喉頭腫瘍および肺腫瘍であ
る。

【００１１】上皮性の前癌性病変および悪性腫瘍の治療
は、９−シス−レチノイン酸、その薬学的に許容し得る
塩またはその薬学的に許容し得る加水分解性エステル
を、単独でまたは手術、放射線療法、ホルモン療法また
は標準的な化学療法（細胞増殖抑制剤および細胞毒性
剤）または生物学的応答変性剤（インターフェロン類、
インターロイキン類または他のサイトカイン類）による
治療と組み合わせて使用して行うことができる。

【００１２】さらに、本発明によって、患者の皮膚に局
所的に適用された９−シス−レチノイン酸、その薬学的
に許容し得る塩および加水分解性エステルは、光損傷に
係わる症状を修復するということが見出された。このた
めに、太陽光線に露出することにより損傷された患者の
皮膚に９−シス−レチノイン酸を局所的に適用すること
によって、しわ形成、弾力線維症および早期老化の影響
を修復して、皮膚の外観を改善し得る。

【００１３】９−シス−レチノイン酸、その薬学的に許
容し得る塩および加水分解性エステルは、局所投与によ
り皮膚損傷の修復を促進し、なめらかなそして若年の外
観を有する皮膚を与えることができる。

【００１４】また、本発明によって、９−シス−レチノ
イン酸、その薬学的に許容し得る塩またはその薬学的に
許容し得る加水分解性エステルは、経口的または局所的
に患者に投与された場合、皮脂分泌を減少させるという
ことが見出された。それ故に、皮脂分泌の減少および座
瘡病変を緩解するように作用するこれらの化合物の投与
は、座瘡、油性頭髪および油性頭皮のような病気を抑制
する手段を提供する。このような方法において、座瘡ま
たは油性頭皮および頭髪のような過剰な皮脂分泌により
起る病気に対する予防またはこれらの病気の治療に、こ
れらの化合物の投与を行うことができる。

【００１５】皮脂生成および／または分泌の阻害は、座
瘡のような病気の治療および／または予防に有効である
ということは知られている。増大した皮脂分泌は、ふ
け、油性皮膚、油性頭髪、白色面皰および黒色面皰を含
む脂漏症のような皮膚病学的疾患を生じさせる。

【００１６】本発明によれば、９−シス−レチノイン
酸、その薬学的に許容し得る塩およびその薬学的に許容
し得る加水分解性エステルの局所的および経口的投与
は、炎症性および非炎症性のようなすべての形態の座瘡
の治療に有効である。

【００１７】さらに本発明の他の見地において、９−シ
ス−レチノイン酸、その薬学的に許容し得る塩またはそ
の薬学的に許容し得る加水分解性エステルは、乾癬の患
者に経口的または局所的に投与した場合、それは乾癬の
治療に有効であるということが見出された。これらの化
合物の投与は、病気である乾癬の皮膚での影響を減少さ
せる。

【００１８】薬学的に許容し得る塩は、薬学的に許容し
得る製剤として、９−シス−レチノイン酸に対して化学
的に許容し得、かつヒト患者に適用できるどのような塩
も包含する。このような通常の薬学的に許容し得る何れ
の塩も利用することができる。利用し得る通常の塩は、
例えば、アルカリ金属塩、例えばナトリウムまたはカリ
ウム塩、アルカリ土類金属塩、例えばカルシウムまたは
マグネシウム塩、およびアンモニウムまたはアルキルア
ンモニウム塩を包含する塩基塩である。

【００１９】本発明によれば、９−シス−レチノイン酸
は、その薬学的に許容し得る加水分解性エステルの形態
で投与することができる。薬学的に許容し得る加水分解
性エステルの何れもが、本発明の組成物および方法に使
用することができる。エステルは、例えば、ベンジル
（ＯＢｚｌ）または低級アルキル、ハロゲン、ニトロに
より置換されたベンジルのような芳香族エステル；低級
アルキル、例えばｔ−ブチルエステル；シクロペンチ
ル、シクロヘキシルもしくはシクロヘプチルエステル；
または９−フルオレニルメチルエステルである。

【００２０】本発明によれば、９−シス−レチノイン酸
またはその薬学的に許容し得る塩またはその薬学的に許
容し得る加水分解性エステルは、薬学的に許容し得る経
口的または局所的組成物として与えることができる。本
発明のこれらの医薬組成物は、該９−シス−レチノイン
酸またはその薬学的に許容し得る塩またはその薬学的に
許容し得る加水分解性エステルを適合し得る薬学的に許
容し得る担体物質と一緒に含有する。何れの通常の担体
物質も利用することができる。担体物質は、経口投与に
適した有機または無機の不活性担体物質であることがで
きる。適当な担体は、水、ゼラチン、アラビヤゴム、ラ
クトース、澱粉、ステアリン酸マグネシウム、タルク、
植物油、ポリアルキレングリコール、ワセリンなどを包
含する。さらに、この医薬製剤は他の薬学的に活性な活
性剤を含有することができる。さらにこの医薬配合に許
容されている実施例にしたがって、風味剤、防腐剤、安
定剤、乳化剤、緩衝剤などのさらなる添加剤を加えるこ
とができる。

【００２１】この医薬製剤は、（ａ）錠剤、カプセル、
ピル、粉末、顆粒などのような経口投与に適した固体形
態および（ｂ）溶液、懸濁液、軟膏、クリーム、ゲル、
微小粉末、エーロゾルなどのような局所投与に適した製
剤を包含する通常のどのような形態でも製造することが
できる。この医薬製剤は滅菌することができ、そして／
または防腐剤、安定剤、湿潤剤、乳化剤、浸透圧を変化
する塩および／または緩衝剤のような補助剤を含有する
ことができる。

【００２２】皮膚に対する局所投与のために、上述した
化合物は、好ましくは軟膏、チンキ、クリーム、ゲル、
溶液、ローション、スプレー、懸濁液、シャンプー、頭
髪ソープ、香水などとして製造される。事実、頭皮また
皮膚に適用するために利用される通常のどのような組成
物も、本発明により利用することができる。本発明の活
性成分を含有する組成物を適用する好ましい方法は、ゲ
ル、ローションおよびクリームの形態である。皮膚に局
所的に投与するための医薬製剤は、上述した活性成分
を、このような製剤に慣用的に使用される非毒性の治療
的に不活性な固体または液体の担体と混合することによ
って製造することができる。これらの製剤は組成物の全
重量を基にして活性成分の少なくとも約０．０１重量％
を含有しなければならない。活性成分である９−シス−
レチノイン酸は比較的非毒性でありそして非刺激性であ
るので、それは、０．１５％を超える量で局所組成物に
使用することができる。これらの製剤は組成物の全重量
を基にして、活性成分の約０．０１〜０．１５重量％を
含有することが好ましい。また、これらの製剤を皮膚に
１日１回または２回適用することが好ましい。これらの
製剤は患者の必要性により適用することができる。本発
明の実施において、活性成分は水溶液またはエチルアル
コールのようなアルコール溶液として適用することがで
きる。

【００２３】上述した局所用製剤の製造において、局所
用製剤の医薬配合の技術において通常の保存剤、増粘
剤、香料などのような添加剤を使用することができる。
さらに、通常の抗酸化剤または通常の抗酸化剤の混合物
を、上述した活性成分を含有する局所用製剤に混入させ
ることができる。これらの製剤に利用することのできる
通常の抗酸化剤は、Ｎ−メチル−α−トコフェロールア
ミン、トコフェロール、ブチル化ヒドロキシアニソー
ル、ブチル化ヒドロキシトルエン、エトキシクイン（et
hoxyquin）など含む。本発明により使用される活性成分
を含有するクリーム−基材の医薬処方は、脂肪酸アルコ
ール、半固体の石油炭化水素、１，２−エチレングリコ
ールおよび乳化剤を含む水性懸濁剤からなる。

【００２４】本発明による活性成分を含有する軟膏処方
は、半固体の石油炭化水素と活性物質の溶剤分散液から
なる。本発明に使用される活性成分を含有するクリーム
組成物は、好ましくは、湿潤剤、粘度安定剤および水の
水相、脂肪酸アルコール、半固体の石油炭化水素および
乳化剤の油相ならびに安定剤−緩衝剤水溶液中に分散さ
れた活性成分を含有する相から形成された乳濁液からな
る。安定剤を局所用製剤に加えることができる。通常の
どのような安定剤も本発明により利用することができ
る。油相において、脂肪酸アルコール成分は安定剤とし
て作用する。これらの脂肪酸アルコール成分は、少なく
とも約１４個の炭素原子の飽和長鎖脂肪酸の還元により
誘導される。また、一般に頭髪の局所用製剤に利用され
ている通常の香料およびローションを、本発明により利
用することができる。さらに、必要に応じて、通常の乳
化剤を本発明の局所用製剤に利用することができる。

【００２５】好ましい経口投与形態は、錠剤、硬質もし
くは軟質ゼラチン、メチルセルロースまたは消化管路中
で容易に溶解する他の適当な材料のカプセルからなる。
本発明により企図される経口投与用量は、処方医師によ
り決定され、個々の患者の必要性により変化する。しか
しながら、一般に、患者の体重１kg当り約０．０１mg〜
約３mg、好ましくは患者の体重１kg当り約０．０２５mg
〜約１．５mgの１日当りの投与量が使用される。この投
与用量は患者の必要性により医師により決定された投与
計画にしたがって、決めることができる。

【００２６】明細書中に列挙した治療的に活性な物質を
経口単位投与形態に混入することは、経腸投与のための
所望のどのような量であっても、同様に本発明の範囲内
にある。しかしながら、一回の投与用量が適当な治療的
に不活性な充填剤および稀釈剤と一緒に活性物質約１mg
〜約５０mgを含有するような方法で、本発明の活性物質
を含有する製剤を処方することが好ましい。特に、この
ような投与用量を軟膏ゼラチンカプセルおよび錠剤に混
入することが望ましい。

【００２７】本発明による使用における９−シス−レチ
ノイン酸の効能は、以下に記載する試験モデルにおいて
証明することができる。

【００２８】

【実施例】

Ａ．ヒトの腫瘍細胞系および実験腫瘍における９−シス
−レチノイン酸の抗腫瘍効果 ヒトの形質転換された上皮細胞系の生長および増殖に対
する阻害作用 ９−シス−レチノイン酸を、ヒトの腫瘍細胞系ＳＣＣ１
５（舌の扁平上皮癌）およびＡ４３１（外陰の扁平上皮
癌）に対して試験した。増殖は糸粒体酵素活性によりＭ
ＴＴ染料［３−（４，５−ジメチルチアゾール−２−イ
ル）−２，５−ジフェニルテトラゾリウムブロマイド］
を還元する生菌細胞の能力により測定した［Mosmann
T., Rapid Colorimetric assay for cellular growth a
nd survival: application to proliferation and cyto
toxic assays, J. Immunol. Methods 65: 55-63, 1983
］。

【００２９】 結果 ヒトの扁平上皮癌ＳＣＣ１５（舌） ７日間培養後の生菌細胞の割合（％） 比較対照（ＤＭＳＯ） １００±１１．４ ９−シス−レチノイン酸 ５４± ７．５ ｐ＜０．００２５ （３・１０^-7M) インターフェロンα（ＩＦＮα） ６０± ８．３ ｐ＜０．００５ （１，０００U/ml） ９−シス−レチノイン酸＋ＩＦＮα ２０± ２．５ ｐ＜０．００１

【００３０】３・１０^-7M の濃度の９−シス−レチノイ
ン酸は、増殖を４６％、そしてＩＦＮαと組み合わされ
て増殖を８０％阻害した。

【００３１】 ヒトの扁平上舌癌Ａ４３１（外陰） ７日間培養後の生菌細胞の割合（％） 比較対照（ＤＭＳＯ） １００± ８．７ ９−シス−レチノイン酸 ３６± １．８ ｐ＜０．００１ （３・１０^-7M) ＩＦＮα（１，０００U/ml） ４２± ０．９ ｐ＜０．０００５ ９−シス−レチノイン酸＋ＩＦＮα ２３± １．４ ｐ＜０．００１

【００３２】３・１０^-7M の濃度の９−シス−レチノイ
ン酸は、増殖を６４％、そしてＩＦＮαと組み合わされ
て増殖を７７％阻害した。

【００３３】９−シス−レチノイン酸は試験した２種の
ヒトの上皮癌細胞系に対して著しい生長阻害作用を示し
た。

【００３４】さらに、他の形質転換された細胞系に対す
る９−シス−レチノイン酸の効果について調査した。増
殖分析を、ウイルス含有細胞系に対して行なった。ヒト
の乳頭腫ウイルス１６（ＨＰＶ１６）を含有する形質転
換されたケラチノサイト細胞系であるＳＫv-l １を、４
回反復での２つの実験において、９−シス−レチノイン
酸による増殖の阻害に関して試験した。５・１０⁴ 細胞
／ウエルをイーグル培地中の平板培養で２日間培養し
た。１０^-6M の濃度におけるレチノイドおよび相当する
ＤＭＳＯ比較対照での、培養前および培養後にヘモサイ
トメーターによる直接的な細胞計数を行なった。生長阻
害は比較対照に比較した％で表わした。

【００３５】結果：１０^-6M の濃度の９−シス−レチノ
イン酸は、ヒトの形質転換されたケラチノサイトＳＫv-
l １の増殖を有意に３２．４％（ｐ＜０．００１）阻害
した。

【００３６】Ｂ．腫瘍細胞誘導脈管形成における９−シ
ス−レチノイン酸の効果 腫瘍の制限のない生長が脈管形成（angiogenesis）に依
存するということは、確立されている。腫瘍細胞集団の
増大は、腫瘍上に集中する新規な毛細管の増加によって
先行されなければならない。それ故に、脈管形成を阻害
することによって、腫瘍生長は阻害される［Folkman
J., How is blood vessel growth regulated in normal
and neoplastic tissue? G.H.A. Clowes Memorial Awa
rd Lecture. Cancer Res. 46: 467-473, 1986; Sidky Y
A およびBorden EC., Inhibition of angiogenesis by
interferons: Effects on tumor-and lymphocyte-induc
ed vascular responses. Cancer Res. 47: 5155-5161,
1987] 。

【００３７】脈管形成分析は、すでに記載されている
［Sidky YAおよびAuerbach R., Lymphocyte induced an
giogenesis; A quantitative and sensitive assay of
the graft-vs-host reaction. J exp Med 141: 1084-11
00, 1975. Majewski Sら.,Inhibition of tumor-induce
d angiogenesis by systemically administered protam
ine sulfate. Int J Cancer 33: 831-833, 1984]。９−
シス−レチノイン酸の試験において、２つの分析法を使
用した。第１の分析法においては、レチノイドを試験管
内において細胞系に加え、次いでその細胞をマウスに注
射した。第２の分析法においては、マウスに生体内的に
レチノイドを腹腔内的に注射し、次に腫瘍細胞系を皮内
的に注射した。

【００３８】方法：２種の腫瘍形成細胞系ＳＫv-e ２お
よびＨｅＬａならびに非腫瘍形成細胞系ＳＫv-e １の細
胞を、１０^-7M の濃度の９−シス−レチノイン酸と一緒
に試験管内で４８時間予備培養し、次いで細胞計数し、
ＴＣ１９９培地中で洗浄した。細胞濃度を、培地０．１
ml当り生菌細胞２・１０⁵ に調節し、レチノイド処理し
ないでＸ線照射したＢａｌｂ／ｃマウスに皮内的に注射
した。比較対照動物には、ＤＭＳＯを使用して予備培養
した腫瘍細胞を注射した。上述した方法により脈管形成
効果を測定した。

【００３９】結果 （ａ）Ｂａｌｂ／ｃマウスにおける細胞系ＳＫv-e ２
（腫瘍形成）、ＨｅＬａ（腫瘍形成）およびＳＫv-e １
（非腫瘍形成）の脈管形成能力における９−シス−レチ
ノイン酸を使用した試験管内予備培養での効果 血管の平均数 比較対照 ９−シス−レチノイン酸 ＳＫv-e ２ ３４．７±３．７ ２３．６±４．２ｐ＜０．００１ ＨｅＬａ ３２．５±２．７ ２３．８±２．９ｐ＜０．００１ ＳＫv-e １ ２６．３±１．５ ２５．６±２．２ｐ＜０．１

【００４０】２種の腫瘍形成細胞系により誘導される新
血管の形成に対する９−シス−レチノイン酸の阻害効果
に対して、９−シス−レチノイン酸は非腫瘍形成細胞系
により誘導される脈管形成を阻害しなかった。

【００４１】（ｂ）Ｂａｌｂ／ｃマウスを生体内的に９
−シス−レチノイン酸で予備処理することによる細胞誘
導脈管形成効果の阻害 血管の平均数 比較対照 ９−シス−レチノイン酸 ＨｅＬａ（腫瘍形成） ２８．３±０．８ １６．３±１．８ｐ＜０．００１ ＳＫv-l ２（腫瘍形成） ３０．３±２．６ １５．３±１．０ｐ＜０．００１ ＳＫv-２（腫瘍形成） ３１．３±２．７ １９．７±０．６ｐ＜０．００１ ＳＫv-e １（非腫瘍形成）１９．７±３．７ ２４．３±５．６ｐ＜０．１

【００４２】３種の腫瘍形成細胞系の細胞で注射した場
合、９−シス−レチノイン酸で処理したマウスは、新血
管形成の阻害を示した。非腫瘍形成細胞系を使用した場
合は、抗脈管形成効果はなかった。

【００４３】９−シス−レチノイン酸は試験管内および
生体内で腫瘍細胞系により誘導される新血管の形成を阻
害した。新血管形成は腫瘍生長に対するあらかじめ必要
な条件であるので、９−シス−レチノイン酸は増殖およ
び／または分化の誘導の阻害を経て直接的な抗腫瘍作用
によって効くのみでなく、抗脈管形成効果によって作用
するので間接的に腫瘍生長を阻害する。

【００４４】Ｃ．マウスでの化学的に誘導された皮膚乳
頭腫における９−シス−レチノイン酸の効果 皮膚、呼吸、消化および尿管ならびに乳腺の化学的に誘
導された腫瘍に対するレチノイドの予防的および治療的
作用は、よく知られている［Bollag W. およびHartmann
HR., Prevention and therapy of cancer with retino
ids in animaland man, Cancer Surveys 2: 293-314, 1
983] 。９−シス−レチノイン酸はマウスの確立された
皮膚乳頭腫に対して著しい治療効果を有し、これらの上
皮腫瘍を後退させた。乳頭腫試験はレチノイドの抗腫瘍
スクリーニングのための標準試験である。

【００４５】 結果 投与量 １匹のマウス当り乳頭腫直径の平均総計における変化％ mg/kg 腹腔内 比較対照 ＋２３．５±２．１ ９−シス−レチノイン酸 ４００ −４３．３±２．４ ｐ＜０．０００５ ２００ −２４．８±４．５ ｐ＜０．０００５

【００４６】９−シス−レチノイン酸はマウスの確立さ
れた化学的に誘導された皮膚乳頭腫に対して実質的な治
療的抗腫瘍効果を有し、この上皮腫瘍を後退させた。

【００４７】Ｄ．抗乾癬活性における９−シス−レチノ
イン酸の効果 抗乾癬活性はパラグラフＣにおいて引用した試験モデル
において、マウスの化学的に誘導された皮膚乳頭腫を後
退させる能力によって測定することができる。乳頭腫試
験はレチノイドの抗乾癬効果のための標準試験である
［Teelmann K. およびBollag W., The relevance of th
e mouse papilloma test as a predictorof retinoid a
ctivity in human psoriasis, Dermatologica 180: 30
-35, 1990] 。

【００４８】パラグラフＣに示されたデータから理解す
ることができるように、９−シス−レチノイン酸はヒト
における抗乾癬活性を予測するこのモデルにおいて著し
い治療効果を示した。

【００４９】Ｅ．座瘡および皮脂抑制における９−シス
−レチノイン酸の活性 座瘡の病因は多要因的であって、過剰な皮脂分泌、過角
化および細菌集落形成が、その病理学において重要な役
割を果す。

【００５０】抗座瘡活性に対する測定手段として、次の
２つのモデルを使用した。

【００５１】１．ヒトの皮脂細胞の増殖分析が、座瘡が
ヒトで臨床的に試験された化合物とつよく関連している
ことを証明している（Doran T.I.およびShapirs S.S. R
etinoid effects on sebocyte proliferation. In"Ret
inoids, Part B. Cell Differentiation and Clinical
Applications". Methods in Enzymology, Volume 190.
Ed. L. Packer, Academic Press, 334-338,1990] 。

【００５２】２．リノマウス(rhino mouse) 抗角化分析
も、また、抗座瘡活性の測定手段として使用されている
［Mezick J.A., Bhatia M.C.およびCapetola R.J., Top
icaland systemic effects of retinoids on horn-fill
ed utriculus size in therhino mouse. A model to q
uantify "antikeratinizing" effects of retinoids.
J Invest Dermatol 83, 110-113, 1984.ならびに Mezic
k J.A., Bhatia M.C., Shea L.M., Thorne E.G. および
Capetola R.J., Anti-acne activity of retinoids in
the Rhino-mouse. In: Models of Dermatology, Maiba
ck and Lowe(eds), Karger (Basel), volume 2, 59-63,
1985］。

【００５３】１．皮脂細胞の増殖 Ｉ．方法 皮脂細胞を、成人のヒトの皮脂腺から単離し、化粧外科
手術中に除去された顔面皮膚から誘導し、そしてマウス
３Ｔ３線維芽細胞の層上で培養した［Doran T.I., Baff
R., Jacobs P.およびPacia E., Characterization of
human sebaceous cells in vitio. J Invest Dermatol
96, 341-348, 1991 ］。細胞を試験化合物なしに培地中
で平面培養し、次いで初期の平面培養の２４−４８時間
の後に、新鮮な培地中に試験化合物を与えた。培養物を
４８時間毎に試験化合物を含有する新鮮な培地に与え
た。収穫の日に、培養物をＰＢＳ中の０．０３％ＥＤＴ
Ａですすいで３Ｔ３線維芽細胞のみを除去し、次いでト
リプシン０．０５％／ＥＤＴＡ０．０３％中で培養し
た。細胞を懸濁し、はげしく混合して単一の細胞懸濁液
を調製し、そしてヘモサイトメーター中で計数した。結
果は、稀釈剤でのみ処理した比較対照培養物と比較し
て、皮脂細胞の増殖を５０％（ＩＣ₅₀）まで阻害するの
に必要な化合物の量（μM)として測定した。

【００５４】II．結果 ９−シス−レチノイン酸は試験管内で０．１μM のＩＣ
₅₀値を有し、ヒトの皮脂細胞の増殖の抑制に活性であっ
た。

【００５５】２．リノマウス卵形のうの減少および抗角
化分析 Ｉ．方法 ６〜８週令の雌のリノマウス（ｈｒ^hrｈｒ^hr）をJackso
n Laboratoriesから得た。１群当り６匹の動物を使用し
た。化合物は、化合物をアセトンに溶解することにより
調製した。試験化合物をミクロピペットでマウスの背に
塗布した。試験物質１００μl を連続して３週間の間５
日間毎日塗布した。マウスにＣＯ₂ を吸入させて殺し
た。背から皮弁を切断し、そして組織学的検査に使用し
た。真皮から分離した表皮を、金網の組織学的カセット
中におき、７０％、８０％、９５％、１００％エタノー
ルおよびキシレン中においてそれぞれ２時間脱水した。
皮膚試料をキシレン浴から除去しそしてガラス製の顕微
鏡スライド上においた。最終像系を使用する像分析を使
用して、卵形のう平均面積を測定した。１匹のマウス当
りほぼ１５０の卵形のうを分析した。

【００５６】II．結果 ３週間局所塗布した後のリノマウスの卵形のうの大きさの減少における９−シ ス−レチノイン酸の効果 化合物 投与量 卵形のうの大きさ 変化％ （溶液の％） （mg/kg) （平方、ミクロン） （平均±ＳＤ） ９−シス− ０．００１％ ０．０４ ２，５９３±５５９ −５２ レチノイン酸 ０．０１％ ０．４ １，４２５±１６７ −７４ ０．１％ ４．０ １，２１０± ７６ −７８ 比較対照 ベヒクル ５，４２０± ４２ ---

【００５７】ｐ値は、すべて、ベヒクル処理したグルー
プに対する化合物処理したグループの比較に対して＜
０．００１である。Student's ｔ−検定は、統計学的測
定に対して行なった。９−シス−レチノイン酸はこの抗
角化および抗座瘡分析において活性であった。

【００５８】Ｆ．９−シス−レチノイン酸による尋常性
座瘡患者の治療における臨床データ１５〜４８才（平均
年令２７才）の８人の患者（男性２名および女性６名）
を、１〜３ケ月の間９−シス−レチノイン酸で治療し
た。８人の患者のうち、２人は１ケ月間、２人は２ケ月
間そして４人は３ケ月間治療した。５人の患者は面皰で
あり、７人の患者は丘疹であり、６人の患者は濃疱であ
りそして１人の患者は結節であった。７人の患者は顔面
にのみ病変を有し、１人の患者は顔面および背部に病変
を有していた。９−シス−レチノイン酸を次の処方、す
なわち、エタノール−プロピレングリコール（５０／５
０）中の活性化合物０．０１％の溶液処方で与えた。こ
の溶液を座瘡病変が存在する部位に毎夕１日１回塗布し
た。

【００５９】病変（面皰、丘疹、濃疱および結節）を、
基準線および治療の１、２および３ケ月後に別々に計数
した。基準線の計数からの全病変の計数の減少％をすべ
ての患者に対して測定し、平均値を計算した。結果は次
の通りである：１ケ月後、全病変計数（８人の患者）は
平均４８％まで減少し、２ケ月後、病変計数（６人の患
者）は７２％まで減少し、３ケ月後、病変（４人の患
者）は７７％まで減少した。皮膚の刺激に特に注意し
た。２人の患者において、治療の初期に、僅かな紅斑お
よび僅かな鱗屑が観察された。これらは、連続した治療
にもかかわらず、一時的であり、１〜２週間以内に消失
した。患者は、これらの副作用に注意が引かれることは
殆どなかった。

【００６０】９−シス−レチノイン酸による座瘡の治療
は、すべてのトランスまたは１３−シス−レチノイン酸
により達成される結果に匹敵する非常に良好な結果を与
えた。有利な局所治療に必要な薬剤濃度は、０．０１％
であり、同じ治療結果を達成するのに、０．０５％の濃
度が必要であるすべてのトランス−レチノイン酸または
１３−シス−レチノイン酸の濃度より著しく低い。さら
に、９−シス−レチノイン酸の治療的に有効な濃度で
は、副作用はすべてのトランスまたは１３−シス−レチ
ノイン酸より実質的に少ない。

【００６１】Ｇ．光損傷における９−シス−レチノイン
酸の活性 Ｉ．方法 無毛のマウスにＵＶＢ照射し、その後に９−シス−レチ
ノイン酸で局所的に処理して皮膚損傷の修復を行った。

【００６２】照射および処理した領域の皮膚の修復の程
度を組織学的に評価した。修復は表皮から圧縮エラスチ
ンにのびる正常な真皮の外観により定義した。修復の程
度はこの帯域の幅に反映されている。

【００６３】この方法は以下に記載されている：Bryce
G.F., Bogdan N.J.,および Brown C.C, Retinoic acids
promote the repair of the dermal damage and the e
ffacement of wrinkles in the UVB-irradiated hairle
ss mouse. J. Muest Dermatol. 91, 175-180, 1988 。

【００６４】II．結果 処理 修復 しわ形成 領域（mm² ×１０^-3） スケール０−４ ＥＤ₅₀ ＥＤ₅₀ 比較対照 ０．２１±０．１２ ３．１±０．３ ９−シス−レチノイン酸 １０μg ０．５７±０．４８ ２．６±０．７ ３０μg ０．８７±０．３４ １．８±０．３^** １００μg ７．３７±２．０４^** ０．３±０．１^*** ２００μg ６．４６±１．５７^** ０^*** ** ｐ＜０．０１ *** ｐ＜０．００１対比較対照

【００６５】Ｈ．急性毒性 急性毒性はFuellinsdorf 白マウスで測定した。９−シ
ス−レチノイン酸をなたね油に懸濁し、そして１回の投
与量で腹腔内的に投与した。マウスの１０％、５０％お
よび９０％の致死投与量（ＬＤ）を１回の投与量で適用
後、２４時間、１０日および２０日後に記録した。それ
ぞれの群に対して１０匹のマウスを使用した。

【００６６】 結果（投与した化合物のmg/kg) ２４時間 １０日 ２０日 ＬＤ１０％ ＞４，０００ １，２００ １，２００ ＬＤ５０％ ＞４，０００ １，４００ １，４００ ＬＤ９０％ ＞４，０００ １，８００ １，８００

【００６７】以下の例は、本発明により与えられる９−
シス−レチノイン酸を含有する医薬製剤を例示する。９
−シス−レチノイン酸は、（Ｅ，Ｚ，Ｅ，Ｅ）−３，７
−ジメチル−９−［２，６，６−トリメチル−１−シク
ロヘキセン−１−イル］−２，４，６，８−ノナテトラ
エン酸と称することもできる。

【００６８】例１ ローション（溶液） 好適には ９−シス−レチノイン酸 ０．０２ − ０．３０g プロピレングリコール ５．００ −２０．００g １０．００g ＰＥＧ−グリセリルココエート^* ０．００ −２０．００g １０．００g dl−α−トコフェロール ０．００１− ０．５０g ０．０２g パルミチン酸アスコルビル ０．０１ − ０．２０g ０．１０g 没食子酸プロピル ０．００１− ０．０２g ０．００２g クエン酸（無水）^** ０．００ − ０．２０g ０．０１g イソプロパノール^*** ４０．００ −９０．００g ５０．００g 水 １００．００g にする量 １００．００g にする量 （それぞれml） * または他のテンサイド類（tensides） ** または他の複合剤、例えばＥＤＴＡ *** または他のアルコール、例えばエタノール

【００６９】例２ ゲル 好適には ９−シス−レチノイン酸 ０．０２ − ０．３０g プロピレングリコール ５．００ −２０．００g １０．００g ＰＥＧ−グリセリルココエート^* ０．００ −２０．００g １０．００g dl−α−トコフェロール ０．００１− ０．５０g ０．０２g パルミチン酸アスコルビル ０．０１ − ０．２０g ０．１０g 没食子酸プロピル ０．００１− ０．０２g ０．００２g クエン酸（無水）^** ０．００ − ０．２０g ０．０１g イソプロパノール^*** ４０．００ −９０．００g ５０．００g ＨＰＭＣ^**** ０．５０ − ５．００g ３．００g 防腐剤^***** 十分な量 十分な量 水 １００．００g にする量 １００．００g にする量 * または他のテンサイド ** または他の複合剤、例えばＥＤＴＡ *** または他のアルコール、例えばエタノール **** ヒドロキシプロピルメチルセルロースまたは他の
重合体、例えば中性化したカルボマー、メチルセルロー
ス、ナトリウムカルボキシメチルセルロース ***** 防腐剤、例えばパラベンエステル（メチル、エチ
ル、プロピル、ブチル）、ソルビン酸、安息香酸

【００７０】例３ クリーム 好適には ９−シス−レチノイン酸 ０．０２ − ０．３０g グリセロール ０．００ −１０．００g ５．００g Ｎａ₂ ＥＤＴＡ ０．００１− ０．５０g ０．０３g グリセライド* ５．００ −２０．００g １０．００g セチルアルコール ０．５０ − ５．００g １．００g ステアリルアルコール ０．５０ − ５．００g １．００g グリセロールモノステアレート １．００ − ８．００g ４．００g セタエレス（Cetaereth)^** ０．５０ − ５．００g ２．００g dl−α−トコフェロール ０．００１− ０．５０g ０．０２g 防腐剤^*** 十分な量 十分な量 水 １００．００g にする量 １００．００g にする量 * 例えばカプリル酸／カプリン酸／トリグリセライ
ド、カプリル酸／カプリン酸／リノール酸／トリグリセ
ライド、天然グリセライド、ならびに例えばプロピレン
グルコール、ジカプリレート／ジカプレートおよびワッ
クス、例えばステアリルステアレート、オレイルオレエ
ート、ミリスチン酸イソプロピル ** セタエレス５−３０、または他の乳化剤、例えばポ
リソルベート２０−８０、脂肪酸のソルビタンエステ
ル、ＰＥＧの脂肪酸エステル *** 防腐剤、例えばパラベンエステル（メチル、エチ
ル、プロピル、ブチル）、ソルビン酸、安息香酸

【００７１】例４ 軟質ゼラチンカプセルに対する充填混合物 ９−シス−レチノイン酸 ５．００−５０．００mg 油^* １− ３部 ワックス混合物^** １− ５部 充填容量 １− ６ミニム（mini
m) * 天然植物油、例えば大豆油、落花生油および人工グ
リセライド ** 天然および人工ワックスの組成物または部分的水和
化脂肪。

【００７２】例５ １．活性物質２０mgを含有する硬質ゼラチンカプセル 組成：１個のカプセルは次の成分を含有する。 ９−シス−レチノイン酸 ２０．０mg ゼラチンブルーム３０ ７０．０mg マルトデキストリンＭＤ０５ １０８．０mg dl−α−トコフェロール ２．０mg アスコルビン酸ナトリウム １０．０mg 微結晶性セルロース ４８．０mg ステアリン酸マグネシウム ２．０mg （カプセル含有重量） ２６０．０mg

【００７３】操作：活性成分を、ゼラチン、マルトデキ
ストリン、dl−α−トコフェロールおよびアスコルビン
酸ナトリウムの溶液中で湿潤ミル処理した。

【００７４】湿潤ミル処理した懸濁液を、噴霧乾燥し
た。

【００７５】噴霧乾燥した粉末を、微結晶性セルロース
およびステアリン酸マグネシウムと混合した。

【００７６】この混合物のそれぞれ２６０mgを、適当の
大きさおよび色の硬質ゼラチンカプセルに充填した。

【００７７】例６ ２．活性物質２０mgを含有する錠剤 組成： 錠剤核： ９−シス−レチノイン酸 ２０．０mg 無水のラクトース １３０．５mg 微結晶性セルロース ８０．０mg dl−α−トコフェロール ２．０mg アスコルビン酸ナトリウム １０．０mg ポリビニルピロリドンＫ３０ ５．０mg ステアリン酸マグネシウム ２．５mg （核重量） ２５０．０mg フィルム被覆： ９ヒドロキシプロピルメチルセルロース ３．５mg ポリエチレングリコール６０００ ０．８mg タルク １．３mg 酸化鉄、黄色 ０．８mg 二酸化チタン ０．８mg （フィルムの重量） ７．４mg

【００７８】操作：９−シス−レチノイン酸を無水のラ
クトースおよび微結晶性セルロースと混合した。

【００７９】この混合物を、ポリビニルピロリドン、dl
−α−トコフェロールおよびアスコルビン酸ナトリウム
の溶液／分散液とともに水中で顆粒化した。

【００８０】この顆粒物質をステアリン酸マグネシウム
と混合し、そしてその後２５０mgの重量を有する核とし
て圧縮した。

【００８１】この核を上述した組成の溶液／懸濁液でフ
ィルム被覆した。

【００８２】例７ 活性物質５０mgを含有するサツシエ(Sachet) 組成： ９−シス−レチノイン酸 ５０．０mg ラクトース（微粉末） ９９０．０mg 微結晶性セルロース １，４００．０mg ナトリウムカルボキシメチルセルロース １４．０mg dl−α−トコフェロール ５．０mg アスコルビン酸ナトリウム ２０．０mg ポリビニルピロリドンＫ３０ １０．０mg ステアリン酸マグネシウム １０．０mg 風味剤 １．０mg （サツシエの充填重量） ２，５００．０mg

【００８３】操作：９−シス−レチノイン酸をラクトー
ス、微結晶性セルロースおよびナトリウムカルボキシメ
チルセルロースと混合した。

【００８４】この混合物をポリビニルピロリドン、dl−
α−トコフェロールおよびアスコルビン酸ナトリウムの
溶液／分散液とともに水中で顆粒化した。

【００８５】この顆粒をステアリン酸マグネシウムおよ
び風味剤と混合した。

【００８６】それを適当な大きさのサツシエ中に充填し
た。

フロントページの続き (31)優先権主張番号 ８２４６４７ (32)優先日 1992年１月23日 (33)優先権主張国 米国（ＵＳ） (72)発明者 ジョセフ・フランシス・グリッポ アメリカ合衆国、ニュージャージー 07920、バイキングリッジ、ウッドストー ンロード 63 (72)発明者 アーサー・レビン アメリカ合衆国、ニュージャージー 07028、グレンリッジ、ストーンハウスロ ード 132

Claims (5)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 ９−シス−レチノイン酸、その薬学的に
   許容し得る塩またはその薬学的に許容し得る加水分解性
   エステル、および治療的に不活性な、薬学的に許容し得
   る担体を含有する医薬組成物。
2. 【請求項２】 前悪性または前癌性の、上皮病変または
   上皮腫瘍を治療するための請求項１記載の組成物。
3. 【請求項３】 光損傷された皮膚に係わる症状を治療す
   るための請求項１記載の組成物。
4. 【請求項４】 皮脂分泌の減少および座瘡症状を緩解さ
   せるための請求項１記載の組成物。
5. 【請求項５】 乾癬を治療するための請求項１記載の組
   成物。