JPH05500515A - キメラアミノ酸類似体 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 キメラアミノ酸類似体 発明の分野 本発明はアミノ酸類似体（同族体）およびこれら類似体を含有するタンパク質ま たはペプチドに関する。さらに詳しくは、本発明はプロリンの誘導体または他の アミノ酸、特にアルギニンおよびリジンの類似体と見ることができ、アルギニン 、リジンおよびオルニチンの代わりとして、またはそれを模擬（ミミック）して 、ペプチドに導入する（取り込ませる）ことができる、立体配座が制限されたキ メラアミノ酸類似体に関する。とりわけ本発明は、血小板凝集阻害活性を有する これらの類似体を含有するテトラペプチドおよびペンタペプチドに関する。

発明の背景 医学的に重要な合成ペプチド（または環状ペプチド）に、天然のアミノ酸の代わ りに組み込むことができるアミノ酸類似体はそれらのペプチドに好ましい性質を 付与することが知られている。例えば、非天然アミノ酸を含有するペプチドは、 その天然物質に比べると、プロテアーゼまたはペプチダーゼを特異的に阻害し、 かつ／またはりセブタ−（受容体）作動作用または拮抗作用を示す。そのような 改変されたペプチドは薬剤として有用である。

アレン（Ａｌｉｅｎ）およびウェブ（Ｗｉｄｅ）　［Ｉｎｔ、Ｊ、Ｐｅｐｔｉｄ ｅ　ＰｒｏｔｅｉｎＲｅｓ、、　３２：８９−９７　（１９８８）］はシシラス ルｓｃｉｓｓｉｌｅ）　Ｌｙｓ−Ｔｈｒ結合の位置またはその周囲にＤ−アミノ 酸を含有するソマトスタチン類似体が、トリプシンの攻撃に安定な類似体を与え ることを示した。これらの著者はまたオルニチンを置換することで標的Ｌｙｓ側 鎖の長さを修飾し、タンパク質分解を阻害したと述べている。生物学的な活性の 向上はブラッディら［（Ｂｒａｄｙ　ｅｔ　ａｌ、）＋　Ｊ、Ｏｒｇ、Ｃｈｅｍ 、、　５３ニア６４−７８９（１９８７）］によって証明されたが、ここではＤ −アミノ酸とＮ−メチル化アミノ酸とを含有する高能力の極めて有用なヘキサペ プチドソマトスタチン類似体が生産された。同様に、Ｎ−メチルグリシン（Ｓａ ｒ）およびＮ−メチルアラニンをプロリンの代わりに用いること、並びにアルギ ニンをそのＤ−立体異性体で置換することはＡｒｇ−バソプレッシンにおける抗 利尿作用を増大することが示された［ズピニューら（Ｚｂｉｇｎｉｅｗ）、　Ｊ 、Ｍｅｄ、Ｃｈｅｍ、、　２９：９６−９９（１９８７）］　、アルギニン残基 を側鎖の長さを増大または減少することで修飾し、グアニジノ基をアセトアミド およびＮ−メチルグアニド基で置換し、ブラジキニン同族体の生物学的活性を測 定した研究者もいる［ビンカ−ら（Ｐｉｎｋｅｒ）、Ｊ、Ｃｈｅｍ、Ｓｏｃ、Ｐ ｅｒｋｉｎ　Ｔｒａｎｓ、１，２２０−２２８　（１９７６）］　ｏ　し力１し ながらこれらの著者の誰も、側鎖長、機能性および特異的な配向性の変化と同時 にα−炭素の回りの立体配座を変化することのできる類似体を提供していない。

立体的に束縛されたアミノ側鎖を有するある種のプロリン誘導体素結合で相互作 用し、その結果、鎌型赤血球貧血におけるヘモグロビンの重合特性を阻止するこ とが報告された［アブラノ＼ムら（Ａｂｒａｈａ＋ａ）、　Ｊ、Ｍｅｄ、Ｃｈｅ ｍ、、　２６：５４９−５５４　（１９８３）］　、これらの著者ｉよ他の２つ のγ−アミ／プロリン誘導体、即ち、（４Ｓ−１−ブチル−４−［（カルボキシ メチル）アミノ］　−Ｌ−プロリンおよびすＩＪチレ−ト脱離基を何するその１ −ベゾイル類似体、は共有結合的にγ−アミノプロリル誘導体のＬｙｓ１３２の ε−アミノに結合し得ると考察している。これらの立体特異的な″ｃｉｓ″異性 体は供与および受容ＨｂＳ分子間のトラペゾイダル領域（ｔｒａｐｅｚｏｉｄａ ｌ　ｒｅｇｉｏｎ）内の特殊な残基と結合するように設計されており、アルギニ ン、オルニチンまたはリジンをミミノク（模擬）するに必要な充分な長さの側鎖 長を持たない。

ブラジキニン内のアルギニンを置換するのに適したアミノ酸類似体がムーアらに よって示された［Ｍｏｏｒｅ　ｅｔ　ａｌ、、　Ｊ、Ｃｈｅｍ、Ｓｏｃ、　Ｐｅ ｒｋｉｎｓ　Ｔｒａｎｓ、　１．２０２５−２０３０　（１９７７）］　、これ らの著者は末端アルギ＝ン残基を、特に、ｐ−グアニジノフェニル−し−アラニ ンで置換したと報告している。この型の化合物類はα−カルボニル−α−アミン 平面について必要な立体配座の厳格性を有していないばかりか、それらは、側鎖 を特異的な空間領域に配向させるためのグアニジノ基の立体異性体でもない。

アダムスら［＾ｄａｍｓ　ｅｔ　ａｌ、、　ＵＳ　Ｐａｔｅｎｔ　Ｎｏ、　４． ８５７，５０６］は式：Ｘ　−Ｇ　１ｙ−Ａ　５ｐ−Ｙ ［ここにＸはアルギニン類似体を表し、式：　Ｈ，ＮＣ（ＮＨ）ＮＨ−（ＣＨ， ）　１ｌ−ＣＨ（Ｚ）ＣＯＯＨ（、：こｌ、：ＺｉｉＨ，ＮＨ，ＪたはＮＨ−Ａ ｃｙｌ、ｎは１−４を表す）で示される］で示される血小板凝集阻害ペプチド誘 導体のアルギニン類似体を開示した。しかしながら、これらのアルギニン類似体 はペプチドバックボーンに対してグアニジ／基を特定の領域に制限するのに必要 なα−炭素周囲の厳密な立体配座を与えるものではない。

上記から、塩基性アミノ酸残基は天然および合成ペプチドの重要な構成成分であ るが、これらアミノ酸の適当な類似体は、タンパク質−タンパク質またはタンパ ク質−ペプチド相互作用におけるアミノ酸側鎖の立体配座の効果の完全な探索に は利用できないことが分かる。従って、適当な大きさの、塩基性側鎖をペプチド バックボーンに対して特定の空間領域に向けるよう立体配座の制限された、二塩 基性アミノ酸類似体が必要である。これらの類似体は天然ペプチドのアミノ酸残 基を模し、それを含有する合成ペプチドに好ましい性質を付与することができる 。

発明の要約 本発明は天然の二塩基性アミノ酸のミミノクとして適した側鎖官能基を有するア ミノ酸類似体クラスを提供するものである。これらのアミノ酸は、ざらにα−ア ミノ−α−カルボニル平面に対して特定の領域に塩基性側鎖を同けるために必要 な立体配座の厳密性を有「式中、Ｐｌは水素またはアルキルアミンまたはアリー ルアミン保護基、Ｐ、は水素、アミン保護基、または基：［式中、Ｐ、およびＲ ４は独立して水素またはアミン保護基、ＸはＯＨ，ＮＨ，、ハロゲン、置換また は非置換アミンおよびニス、−ル、並ひに保護基および活性化基からなる群のい ずれかの適合する基（好ましくはＸは好適な脱離基）、ｎはＯ−２の整数を表す ］で示される。本明細書では、ピロリジン環の２位および４位のＲおよびＳエナ ンチオマー、並びにその製造方法について詳細に説明する。

式ｌて示される化合物は線状、環状、または架橋ペプチドおよびポリペプチドの 製造に用いることができ、式２゜０式中、Ｘ、は０ＨＳＮＨ，、ＮＨＲ（式中、 ＲはＣ、−Ｃ，アルキル）、少なくとも１個のアミノ酸、ペプチド、ポリペプチ ド、またはタンパクｉｔ；Ｘｔは水素、Ｃ、−Ｃ，アルカノイル、少なくとも１ 個のアミノ酸、ペプチド、ポリペプチドまたはタンパク質、Ｘ、は水素、アミノ イミノメチル、Ｃ，−Ｃ，アシル、少なくとも１個のアミノ酸、ペプチド、ポリ ペプチド、またはタンパク質、ｎはＯｌｌ、また；土２を表す。ただしＸ、が水 素の場合、ｎは○でない。コで表すことができる。

上記の好ましい型のペプチド化合物は、血小板凝集阻害剤であり（式中、Ｒ４は 水素、Ｃ，−Ｃ，アルカノイル、Ｃ，−Ｃ，、アコイル、アミノ酸または２−２ ０アミノ酸のペプチド：Ｒ１およびＲ３は水素、分枝鎖または直鎖状、非置換ま たは置換アルキルまたはアリール基であって、同一または異なる基、Ｒ４はヒド ロキシ、置換または非置換アミン、ハロゲン、または置換または非置換アルキル 、アルフキン、アリールまたはアリールオキシ基；Ｘ３は水素またはアミ／イミ ／メチル；ｎは０，１、または２を表す。ただしＸ、が水素のときｎは０でない 。） て示される。

Ｒ１およびＲｏは、所望によりＲ３と一緒になって式４・（式中、ｘ３、ｎおよ びＲ２は上記定義と同意義、ＡＡはＤまたはＬα−アミノ酸、Ｑはアルキルジラ ジカル、ｓ、ｓｏ、ｓｏ、、または置換または非置換イミン、Ｒ７、Ｒ６、Ｒｏ 、Ｒ１゜は独立して水素および置換または非置換アルキルまたは了り−ルから選 択される基を表す） で示される環状化合物を形成してもよい。

本発明は式１−４で示される化合物の製造方法をも包含する。

本発明はまた、式１て示される化合物を用いる方法であって、化合物をアミノ酸 、ペプチド、ポリペプチドおよびペプチドフラグメントから選択される第１反応 物質と接触させて共有結合フンジュゲー・トを得、所望によりいずれかの保護基 を選択的に除去し、フン／ユゲート上のいずれかの官能基を活性化し、次いで、 活性化フンシュゲートと、アミノ酸、アミノ酸類似体、ペプチド、ポリペプチド 、ペプチドフラグメントおよびその活性化誘導体からなる群から選択される第２ 反応物質とを反応させることからなる方法をｔ４！供するものである。

式３または式４て示される血小板凝集阻害剤は、通常、面栓形成の増大傾同を有 する哺乳類の治療の為に、所望により、面栓溶解剤または抗凝結剤と一緒に、医 薬組成物に含有させて用いることができる。

発明の詳細な説明 本発明の新規な化合物は特異的なりラスのアミノ酸類似体並ひにこれら類似体を 含有するポリペプチドを含む。新規なポリペプチドはペプチドまたはポリペプチ ドに１呆護された、そして好ましくは活（式中、Ｐｌ、Ｐｌ、Ｘおよびｎは上記 定義に従う）で示される新規なアミノ酸類似体を導入することにより、構築され る。

一度ベブチドに取り込まれると、これらの類似体はピリミジン環の４位の置換基 または側鎖を通じて、アミノ酸リジン（Ｐ、＝水素、ｎ−２）またはオルニチン （Ｐ、＝水素、ｎ＝１）、またはアルギニン（Ｐ、−アミノイミノメチル、ｎ＝ １）を模する。加えて、他のアミノ酸とＸおよびＰｌを介して結合した場合、こ れらの類似体はプロリンを模し、ペプチドバックボーンに特異的な立体配座（α −へリノクス破壊）制限を与える。従って、式１で示される類似体はキメラアミ ノ酸と見なすことができる。

最後に、化合物１の全立体異性体（即ち、ピロリジン環についてＲおよびＳ立体 配座の両方）を構築するための合成経路を与えることにより、特定のエナンチオ マー（対掌体）をペプチドに導入することにより、グアニジ７またはアミ７基が ペプチドパックホーンに対して特有の配向性に限定されることが理解されるであ ろう。

これらの特徴は、本発明の新規なアミノ酸類似体および新規なペプチドを、様々 な生物化学的適用に特に有用なものとする。

例示によれば、新規なアミノ酸類似体はペプチドに導入され、側鎖の変化とペプ チドバックボーンのα−炭素周囲の立体配座の改変の両方によってタンパク質加 水分解への安定性を付与するのに有用である。立体配座か束縛されたペプチド（ 即ち、環状ペプチド）は特異的な受容体の潜在的なアゴニストまたはアンタゴニ ストとなり得ることが知られている。従って、本発明のアミノ酸類似体をペプチ ドに導入することは、それらを所望の生物学的活性の調整に有用なものとする。

本発明類似体の有用な適用の１つはより強力な血小板凝集阻害剤の構築に見いだ されるが、この場合、ある血小板受容体Ｇ　Ｐ　ｌ１ｂｌｌｌａへのフィブリノ ゲン結合阻害剤に存在する配列−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−におけるアルギニン の代わりに化合物１を用いる。

当業者ならば、本発明のアミノ酸類似体の他の数多くの用途を理解するであろう 。それらは例えばペプチドの架橋、免疫原の作成および新規な酵素阻害剤の構築 等を含むがこれらに限定されない。

以下、下記の標準的なアミノ酸略語を用いる。

アラニン　Ａｌｇ アルギニン　Ａｒｇ アスパラギン　Ａｓｒｌ アスパラギン酸　Ａｓｐ システィン　Ｃｙｓ グルタミン酸　Ｇｌｕ ヒスチジン　Ｈｉｓ メチオニン　Ｍｅｔ ノルロイシン　Ｎｌｅ ファニルアラニン　Ｐｈｅ プロリン　Ｐｒ。

セゾン　Ｓｅｔ 本明細書および、請求の範囲をも含め、特に明記しない限り、以下のごとく定義 する。アルキル、アルケニル、およびアルキニルはそれぞれ、単結合、二重結合 、３型詰合を有する直線または分枝状の炭化水素鎖を意味する。Ｃ，−Ｃ，、ア リール基とは、フェニルまたはナフチル等の非置換芳香環または融合環を意味す る：ヘテロとはへテロ原子０．Ｎ、またはＳを意味する：芳香性へテロ環基（異 項環基）とは最高４個のへテロ原子を含有する５−１０員環を意味する。ハロゲ ンまたはハロとはＦ、ＣＩ、Ｂｒ、または■原子を意味する：アルコキシとはＯ に結合したアルキル基を意味する。

Ｃ，−Ｃ，アルキルまたはＣ，−Ｃ，アルケニル基の例にはメチル、エチル、プ ロピル、イソプロピル、ブチル、ｔ−ブチル、ペンチル、イソペンチル、ヘキシ ル、ビニル、アリル、ブテニル等；ｃ３−ＣＩ。

−シクロアルキル基の例にはンクロプロビル、／クロペンチル、ンクロヘキシル 等、芳香性へテロ環基の例にはピリジル、チェニル、フリノヘインドリル、ベン ズチェニル、イミダゾリル、チアゾリル、キノリニルおよびイソキノリニルが含 まれる。

本発明のアミノ酸同族体は、それを従来の方法で直接ペプチドおよびボＵペプチ ドに導入し得るように、既知の保護基を用いて製造される。例示アミノ酸グアニ ジンｆ呆護基は以下により詳細に記載されている［（列えば、グリーン（Ｇｒｅ ｅｎ、丁）７“Ｐｒｏｔｅｃｔｉｎｇ　Ｇｒｏｕｐｓ　ｉｎＯｒｇａｎｌｃ　Ｓ ｙｒ＋ｔｈｅｓｉｓ”、Ｊｏｈｏｎ　Ｗｉｌｅｙ　ａｎｄ　５ｏｎｓ　１９８１ コが、新しい保護基が利用可能となればこれらも本発明に用いられることは理解 されるであろう。

本発明のアミノ酸同族体を導入してポリペプチドを合成する場合には、Ｎ−１を 介する鎖の増加か最も普通の工程であり、従って様々な保護基かペプチド合成の ための条件に２Ｎ１合する（安定である）必要がある。しかしながら、ある場合 には、環外アミンを介するペプチド鎖の増加が好ましく、その場合にはＰ、はこ れらの鎖延長条件に適合する必要かある。

例によって、ｎ−１または２の時、Ｐ、は鎖延長条件下で安定なアミン保護基で あってよく、例えばベンジルオキシカルボニルまたは４−クロロベンジルオキシ カルボニル化学を含む。同様に、Ｐ。

であってｎ＝ｏまたは１の時、Ｐ、またはＰ４は、例えば、ニトロ、ｐ−トルエ ンスルホニル、２．４，５，７．８−ペンタメチルクロマノー６−スルホニルま たは２，３．６−ドリメチルー４−メトキジフェニルスルホリル化学を用いるペ プチド合成の間に、Ｐｌと適合するグアニジン保護基であってよい［例えば、Ｒ ａｍａｇｅ　ａｎｄ　Ｇｒｅｅｎ。

Ｔｅｔ、　Ｌｅｔｔｅｒｓ　（１９８７）　２８：２２８７−２２９０　参照コ 。上記において、Ｐ。

は好ましくはｔ−ブトキンカルボニル（ＢＯＣ）　、９−フルオレニルメトキシ カルボニル（ＦＭＯＣ）またはベンジルオキシカルボニル（ＣＢＺまたはＺ）で ある。逆に、ペプチド鎖が環外アミンを介して延長される場合、Ｐ、は鎖延長条 件に安定でなければならず、従って、Ｐ、およびＰ、の例として、それぞれ、Ｆ ＭＯＣおよびＢＯＣ１またはＢＯＣおよび４−クロロベンジルオキシカルボニル が挙げられる。

グアニジン基の他の導入方法は、Ｐ、が選択的に開裂されるアミン保ｆ基（例え ばアリルオキシカルボニル基）であるという設定からなされる。次いで、ペプチ ドを調製し、選択的にＰ、を除去した後、遊離状態のアミンを、脱保護アミンを 直接非保護グアニジン基に変換し得る試薬と反応させる［キムら（Ｋｉｍ、に、 　ｅｔ　ａｌ、）、　Ｔｅｔ、Ｌｅｔｔｅｒｓ　（＋９８８）　２９．　３１８ ３−３１８６＋　７リアノフら（Ｍａｒｙａｎｏｆｆ　ｅｔ　ａｌ、）。

Ｊ、Ｏｒｇ、Ｃｈｅｍ、　（１９８６）　５１．１８８２−１８８４；ツエゾタ ルス力（Ｒｚｅｓｚｏｔａｒｓｋａ。

Ｂ、　ｅｔ　ａｌ、）、　Ｏｒｇ、Ｐｒｅｐ、Ｐｒｏｃ、Ｉｎｔ’ｌ　（１９８ ８）２０．４２７−４６４、およびそれらに記載の引用文献参照］。

化合物１の置換基Ｘは一般に良好な脱離基、即ち請求核試薬によるカルボニル攻 撃に対する感受性を増大する基である。一般に、Ｘは隣接するカルボニルと一緒 になってエステルを形成するが、最も好ましいのは請求核置換反応に反応性であ ることが知られている活性なエステルを形成する。この場合、Ｘは好ましくはア リール部分または置換されたアルコキン上に選択吸引性基（ｅｌｅｃｔｉｏｎ　 ｖｉｔｈｄｒａｗｎ　ｇｒｏｕｐ）、また好ましくは電子吸引性置換基を有する Ｏ−アリールであろう。後者の場合、Ｘは０−ＣＨ，ＣＮ、０−ＣＨ，−ＣＯ− ＣＨ，ＣＨ３、またはＯＣＨ，−ＣＯ−ＣＨ３から選択スルコトカ好ましい。他 の例では、Ｘは例えばチオアルコール、チオアリールまたはチオアルキル基等の 好ましい脱離基である。Ｘはまた隣接するカルボニル基と一緒になって無水物を 形成していてもよい。この場合、Ｘは一般式　○ＣＯ，Ｒで示され、好ましくは Ｒは近位のカルボニルの立体障害となる。あるいは化合物１の２モルから無水物 を形成してもよい。他の好ましいＸ基は０−Ｃｏ、Ｒ（ここに−Ｃｏ、Ｒはアル キルオキシカルボニルまたはペンシルオキシカルボニル基を表す）で示される。

Ｘはまたヒドロキシルアミンを基礎とする化合物から選択されてもよい。

最も好ましいＸ基には０−ニトロフェニル、ｐ−ニトロフェニル、２−クロロ− ４−ニトロフェニル、シアノメチル、２−メルカブトピリジル、ヒドロキシベン ズトリアゾール、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド、トリクロロフェニル、テトラ フルオロフェニル、２−フルオロフェニル、４−フルオロフェニル、２．４−ジ フルオロフェニル、０−ニトロ−ｐ−スルホフェニル、Ｎ−ヒドロキシフタルイ ミド、Ｎ−ヒドロキシピロリドン、テトラフルオロチオフェニル、２．３，５． ６−テトラフルオロフェニルおよびその等価物が含まれるがこれらに限定されな い。

式１の化合物は４−ヒドロキシプロリンの様々な立体異性体（２位および４位の 炭素原子のキラリティーはＲまたはＳである）を出発物質として製造することが できる。即ち、４−ヒドロキシプロリンの４個の可能な立体異性体の各々か式１ の化合物の合成出発点として有用である。４−ヒドロキシプロリンの異性体から 式１の化合物を調製するために用いる特異的な化学変換を、例示出発物質とし− ｃ　（２Ｓ、４Ｒ）−４−ヒドロキシプロリン（式５）に相当する構造を用い、 以下に述べる。

反応式■に示すように、異性体５を、Ｘがメトキシ、エトキシ、またはベンジル オキシでありカルボン酸がエステルとして保護されており、またＰｌがｔｅｒｔ −ブトキシカルボニル（ＢＯＣ）　、ベンジルオキシカルボニル（Ｃｂｚ）また は同様の基であり、アミン官能基がウレタン誘導体として保護されている、中間 体６に変換することができる。エチルエステルとＢＯＣアミン保護基との組み合 わせが特に有用である。そのような誘導体６はベーカーら［Ｇ、　Ｌ、　Ｂａｋ ｅｒｅｔ　ａｌ、、　Ｊ、Ｏｒｇ、Ｃｈｅｍ、（１９８１）４６．２９５４−２ ９６０］の方法に従って製造できる。６のヒドロキシル基を７におけるメタンス ルホネート誘導体またはｐ−トルエンスルホネ−１・等の反応性のエステル基り に変換し、これは、ジメチルスルホキシドまたはジメチルホルムアミド等の溶媒 中でアジド［アブラハムら（Ａｂｒａｈａｍ、　Ｄ、　Ｊ、　）　Ｊ、　Ｍｅｄ 、　Ｃｈｅｗ、　（１９８３）、　２６．５４９−５５４参照］またはシアン化 物イオンで置換すれば４位における新規な置換基の立体化学が出発物質のヒドロ キシ誘導体と逆である８および９を得ることができる。例えばジメチルホルムア ミド中で７（Ｌ＝メタンスルホネート）とテトラ−ｎ−ブチルアンモニウムシア ニドとを５５℃で反応させると、９が好結果で得られる。所望により、水とジク ロロメタンまたはトルエン等の有機溶媒からなる溶媒系を用いて相転移法を採用 し、８または９を得ることができる。

あるいは、まず最初に４位の立体化学を逆転させた後、反応性の基をアジドまた はシアニドイオンによって置換することによってもアジドおよびンアノ基か出発 物質ヒドロキシ誘導体と同じ立体化学を有する同族体８および９を得ることがで きる。例えば、６をジクロロメタン等の溶媒中、トリフェニルホスフィンと四臭 化炭素で処理して臭素誘導体１０を得ることができるが、これはアジドおよびシ ア／誘導体１１および１２に変換される。

反応式Ｉに記載のようにして調製されたアジドおよびシアノ同族体を対応するア ミ／同族体（反応式Ｉ＋）に変換してもよい。例えばＸがエトキンである８およ び９を水性メタノールまたは水性エタノールのような溶媒中、化学量論量の水酸 化ナトリウム等の適当な塩基で処理した後、例えばＨＣ１、酢酸、またはクエン 酸のような希酸で注意深く酸性にすることにより、酸誘導体（Ｘ＝ＣＨ）に加水 分解することができる。水性エタノール等の適当な溶媒中、パラジウム／炭素の ような触媒を用いて水素添加するとアミノ誘導体１３（＊４は４位炭素のキラリ ティーを表す）を得る（ここに、１３ａは８から、１３ｂは９から導かれたこと を表す）。同様に、１１および１２はそれぞれ１３ｃおよび１３ｄに変換される 。所望により、Ｘ−エトキ／であるニトリル９および１２を上記のごとく、対応 するアミンに還元する。アミンを、例えば、水中で亜硝酸処理しアルコール１４ ａおよび１４ｂに変換する。アルコールをメタンスルホン酸エステルに変換し、 次いで、シアニドで置換し、それぞれ、ニトリル１５ａおよび１５ｂを得る。次 いで、ニトリル（Ｘ−エトキン）を加水分解（Ｘ＝ＣＨ）Ｌ、水素添加して、そ れぞれ同族体１３ｅおよび１３ｆを得る。

新たに形成された化合物１３のアミン基を次いで、直接ペプチドに導入するのに 適した誘導体、例えば４−クロロベンジルオキシカルボニル誘導体に変換する。

あるいは、アミン類１３ａ−ｆは、例えば、ベーカーら［Ｐ、Ｌ、Ｂａｒｋｅｒ 、Ｊ、Ｏｒｇ、Ｃｈｅｍ、　（１９８１）　４６．２４５５−２４６５］の記載 した方法に従い、それぞれ、対応するＮ−ｐ−ｉ−ルエンスルホニルグアニジン 化合物１６ａ−１６ｆに変換される。化合物１６はペプチドへの直接導入に適す る。

反応式ｌ１ 上記反応式Ｉおよび］１に記載の、ピロリジン環の２位炭素のキラリティーがＲ である化合物の同族体の合成が、２位のキラリティーがＲである既知の４−ヒド ロキシプロｉ１ン誘導体を出発物質として行い得ることは極めて明らかである。

ペプチド合成 以下のペプチド合成に関する記載は脱保護された、または保護された化合物１の 製造を包含する。以下の記載で用いるアミノ酸という語句は化合物ｌを包含する と理解すべきである。ペプチドの定義に用いた名称はシロダー（Ｓｃｈｒｏｄｅ ｒ）およびルブヶ（Ｌｕｂｋｅ）の“Ｔｈｅ　Ｐｅｐｔｉｄｅｓ”（Ａｃａｄｅ ｎｕｃ　Ｐｒｅｓｓ　（１９６５））に明らかにされたものであり、ここでは従 来通り、Ｎ末端のアミ７基を左に、Ｃ末端カルボキシル基を右側に示されている 。

“アミノ酸”という語句は、構造：　−Ｃ（０）ＲＮＨ−（ここにＲは通常−Ｃ （Ｒ，）−であって、Ｒ，は一般にＨまたは“側鎖”と称される置換基を有する 炭素を表す）を有する。たいていの場合、本発明のポリペプチドに用いたアミノ 酸はタンパク質に見いだされる、天然に存在するアミノ酸、またはそのようなア ミノ酸の天然の同化または異化産物であって、アミン基およびカルボキシル基を 有するものである。それらアミノ酸のＤおよびし立体異性体も、そのアミノ酸の 構造が立体異性体構造の余地がある場合には、含まれる。

本出願の目的から、指名されたアミノ酸は、それが立体異性体の型で存在し得る ならば、ＤまたはＬ立体異性体の両方を包含すると解釈されるが、Ｌ立体異性体 の方が好ましい。

好ましいアミノ酸は化合物１、グリシン、アラニン、バリン、ロイシン、イソロ イシン、セリン、スレオニン、システィン、メチオニン、グルタミン酸、アスパ ラギン酸、リジン、アルギニン、ヒスチジン、フェニルアラニン、チロシン、ト リプトファン、およびプロリンである。本出願の目的から、プロリンはヒドロキ シプロリンを含み、ロイシンは／ルロイシンを含み、リジンはオルニチンまたは ヒドロキシリジンを含み、セリンは３−ホスホセリン、ホモセリンおよび○−ホ スホホモセリンを含み、チロシンはジヒドロキシフェニルアラニンを含み、トリ プトファンは５−ヒドロキシトリプトファンを含み、システィンはＳ−メチルシ スティンを含み、ヒスチジンは１−メチルヒスチジンおよび３−メチルヒスチジ ンを含み、アラニンはβ−アラニンを含み、そしてアルバラギン酸はβ−アルパ ラチルホスフェートを含む。本発明において天然に存在するアミノ酸が占めるよ う企画された部位に用いるのに適当な他の天然アミノ酸代謝産物または前駆体と して、オルニチン、シトルリン、アルキ／コハク酸、シスタチオニン、アスバル チノクβ−セミアルデヒド、Ｎ−スクシニル−Ｌ〜、α−ε−ジアミノピメリン 酸、Ｌ、Ｌ−ジアミノピメリン酸、α−アミノアジピノクーε（またはδ）−セ ミアルデヒド、α−アミ７−アジピン酸、カナリン、カナバニン、α−アミノ− β−ケトアジピン酸、デルタアミンロインリン酸、γ−アミノ酪酸、システィン スルフィン酸、システィン酸、イソブチイン、インパルチン、フェリニン、Ｎ− ホルミルキヌレニンキヌレニン、アントラニルＬ　３−ヒドロキシキヌレニン、 および３−ヒドロキシアントラニル酸を挙げることができる。ロングネ、カーら 「Ｌｏｎｇｎｅｃｋｅｒ）　Ｄｒｕｇ　Ｉｎｔｅｌｌ、　Ｃ１１ｎ、　Ｐｈａｒ ｍ、　（１９８８）２２．９９−１０６］の記載したアミノアルコール類もタン パク加水分解に対する感受性を低下させるのに有用である。

完全固相合成法は「固相ペプチド合成」　［スチニワードおよびヤング（Ｓｔｅ ｗａｒｄ　＆　Ｙｏｕｎｇ）、　Ｆｒｅｅｍａｎ　＆　Ｃｏ、、　Ｓａｎ　Ｆｒ ａｎｃｉｓｃｏ、　１９６９］および米国特許Ｎｏ、　４．１０５．６０３　（ １９７８年８月８日発行）に記載されている。古典的な溶液合成力は論文ｒＭｅ ｔｈｏｄｅｎ　ｄｅｒ　Ｏｒｇａｎｉｓｃ　ｈｅｎ　Ｃｈｅｍｉｅ　（Ｈｏｕｂ ｅｎ−Ｗｅｙｌ）　５ｙｎｔｈｅｓｅ　ｖｏｎ　ＰｅｐｔｉｄｅｎＪ　［Ｅ、Ｗ ｕｎｓｈ　（ｍ）（１９７４）。

Ｇｅｏｒｇ　Ｔｈ１ｅ＋＋＋ｅ　Ｖｅｒｌａｇ、　Ｓｔｕｔｔｇａｒｄ、　Ｖ、 Ｇｅｒ、］　に詳細に記載されている。フラグメント縮合合成法は米国特許Ｎｏ 、　３．９７２．８５９　（１９７６年８月３日発行）に例示されている。その 他の利用可能な合成法は米国特許Ｎｏ、　３．８４２．０６７　（１９７４年１ ０月１５日発行）、米国特許Ｎｏ、　３．８６２．９２５　（１９７５年１月２ ８日発行）に例示されている。

ペプチドは、完全な固相合成法、部分的固相合成法、フラグメント縮合法、古典 的溶液カップリング法、または組換えＤＮＡ法、即ち、関連のポリペプチドをコ ードする遺伝子を含有する発現ベクターで形質転換された、遺伝的に操作された 宿主細胞を培養することによる方法、あるいは遺伝子工学による方法とペプチド 合成法の組み合わせ等の、任意の適当な方法で合成される。

ペプチドか組換えＤ　Ｎ　Ａ法で合成されない場合、メリフィールドの一般的な 記載［（Ｍｅｒｒｉｒｉｅｌｄ）、Ｊ、Ａｍ、ＣｅｔＳｏｅ、（１９６３）８５ ．２１４９３等に従い固相合成法により製造することが好ましいが、当業者既知 の他の同等な化学合成法も用いることができることは前述の通りである。固相合 成法は保護されたα−アミノ酸を適当な樹脂に結合させることにより、ペプチド のＣ−末端から開始される。そのような出発物質はα−アミノ保護アミノ酸をエ ステル結合によってクロロメチル化樹脂またはヒドロキシメチル化樹脂に結合さ せるか、あるいはアミド結合によってＢＨＡ樹脂またはＭＢＨＡ樹脂に結合させ ることによって製造することができる。ヒドロキシメチル樹脂の調製法はボダン スキーら［Ｂｏｄａｎｓｋｙ、　Ｃｈｅｗ、　ｌｎｄ、　（Ｌｏｎｄｏｎ）　（ １９６６）３８゜１５９７−１５９８］により記載されている。クロロメチル化 樹脂はＢｉｏＲａｄＬａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ（Ｒｉｃｈ＋ｍｏｎｄ、　ＣＡ） およびＬａｂ、Ｓｙｓｔｅｍｓ、Ｉｎｃ、から市販品を入手することができる。

そのような樹脂の調製法はスチュワードらがＬＥ載している［（Ｓｔｅｗａｒｔ ）“５ｏｌｉｄ　Ｐｈａｓｅ　Ｐｅｐｔｉｄｅ　５ｙｎｔｈｅｓｉｓ″Ｆｒｅｅ ｍａｎ　＆　Ｃｏ、、　Ｓａｎ　Ｆｒａｎｃｉｓｃｏ　１９６９）　Ｃｈａｐｔ ｅｒ　１．　ｐｐ、　１−６１　。ＢＨＡおよびＭ　Ｂ　ＨＡ樹脂支持体は市販 品を入手することができ、一般に合成されるポリペプチドがＣ−末端に非置換ア ミドを有する場合にのみ用いられる。

アミノ酸を、当該技術分野で既知のペプチド結合を形成するための方法に従って ペプチド鎖に結合させる。１つの方法ではカルボキシル基をペプチドフラグメン トの遊離のＮ−末端アミノ酸と反応し易い誘導体に変換する方法を含む。例えば 、保護されたアミノ酸とクロロギ酸エチル、クロロギ酸フェニル、クロロキ酸５ ｅａ−フチル、クロロギ酸イソブチル、塩化ピノ＼ロイル等の酸塩化物との反応 （こよってアミノ酸を無水物混合物に変換することができる。ある−）（マ、ア ミノ酸を２．４．５−４リクロロフエニルエステル、ペンタクロロフェニルエス テル、ペンタフルオロフェニルエステルフェニルエステル、Ｎ−ヒドロキシスク シンイミドエステル、または１−ヒドロキシベンゾトリアゾールとの間で形成さ れるエステル等の活性エステルに変換することができる。

他の力，ブリング法はＮ，Ｎ’　−ンシクロヘキシルカーボンイミドまたはＮ， 　Ｎ’　−ジイソプロピル−カーポジイミド等の適当なカップリング剤を用いる 。他の適当なカップリング剤は当該技術者にとって自明であり、グロス（Ｅ．　 Ｇｒｏｓｓ）およびメイエンホノファ−（Ｊ．Ｍｅｉｅｎｈｏｆｅｒ）Ｉこよっ て示された［Ｔｈｅ　Ｐｅｐｔｉｄｅｓ二Ａｎａｌｙｓｉｓ，　Ｓｔｒｕｃｔｕ ｒｅ。

Ｂｉｏｌｏｇｙ，　Ｖｏｌ．　１：　Ｍａｊｏｒ　Ｍｅｔｈｏｄｓ　ｏｒ　Ｐｅ ｐｔｉｄｅ　Ｂｏｎｄ　Ｆｏｒｍａｔｉｏｎ　（Ａｃｄｅｍｉｃ　Ｐｒｅｓｓ． 　Ｎｅｗ　Ｙｏｒｋ）］。

ペプチド合成に用いる各アミノ酸のα−アミ７基は、活性なα−アミ７基を巻き 込んだ副反応を避けるために、カップリング反応の間、保護しておかねばならな いことを認識しておくべきである。また、あるアミノ酸は反応性の側鎖官能基（ 例えばスルフヒドリル、アミ／、カルボキシル、ヒドロキシル等）を有しており 、そのような官能基もまた、初期の、その後のカフプリング工程の両方において 、該部位で化学反応が起きることを防止するために適当な保護基で保護しなけれ ばならない。当業者既知の適当な保護基はグロス（Ｅ。

Ｇｒｏｓｓ）およびメイエンホノフｙ　−　（Ｊ，　Ｍｅｉｅｎｈｏｆｅｒ）に よって示されている［Ｔｈｅ　Ｐｅｐｔｉｄｅｓ：　Ａｎａｌｙｓｉｓ，　Ｓｔ ｒｕｃｔｕｒｅ，　Ｂｉｏｌｏｇｙ，　Ｖｏｌ．３：　Ｐｒ。

ｔｅｃｔｉｏｎ　ｏｒ　Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ　Ｇｒｏｕｐｓ　ｉｎ　Ｐｅｐｔ ｉｄｅ　Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ　（Ａｃｄｅｍｉｃ　Ｐｒｅｓｓ、Ｎｅｗ　Ｙｏｒ ｋ）　１９８１コ　。

ペプチド合成に用いる特定の側鎖保護基の選択は以下の一般的な規則に従う。α −アミ７基保護基は・　（ａ）カップリング反応に採用した条件下でα−アミ７ 基を不活性にしなければならない；　（ｂ）側鎖保護基を脱離させず、またペプ チドフラグメントの構造を変化させない条件下で、カップリング反応の後に容易 に除去されねばならない：　（Ｃ）力、ブリング直前の活性化に際してラセミ化 の起きる可能性が排除されていなければならない。側鎖保護基は、（ａ）カップ リング反応に採用した条件下で側鎖官能基を不活性にしなければならない：　（ ｂ）α−アミン保護基の除去に採用される条件下で安定でなければならない；　 （Ｃ）所望のアミノ酸ペプチドの完成後、ペプチド鎖の構造を変化させない反応 条件下で容易に除去されねばならない。

当業者にとって、既知のペプチド合成に有用な保護基と、その除去に用いられる 試薬との反応性が様々であることは明らかである。

例えば、トリフェニルメチルおよび２−（ｐ−ビフェニル）イソプロピルオキ７ カルボニル等のある種の保護基は非常に不安定であり、穏やかな条件下で容易に 開裂される。ｔ−ブチルオキシカルボニル（ＢＯＣ）　、ｔ−アミルオキシカル ボニル、アクマンチルオキシカルボニル、およびｐ−メトキシベンジルオキシカ ルボニルの不安定さはやや少なく、その除去にはトリフルオロ酢酸、塩酸または 酢酸中の３７ノ化ホウ素のようなやや強い酸が必要である。ベンジルオキシカル ボニル（ＣＢＺまたはＺ）、へロペンジルオキシ力ルボニル、ｐ−ニトロベンジ ルオキシカルボニル　シクロアルキルオキシカルボニル、およびイソプロピルオ キシカルボニルははさらに不安定でなく、その除去にはフッ化水素、臭化水素、 またはトリフルオロ酢酸中、ホウ素化トリフルオロ酢酸（ｂｏｒｏｎ　ｔｒｉｆ ｌｕｏｒｏａｃｅｔａｔｅ）等のさらに強い酸が必要である。有用なアミノ酸保 護基のクラスには、以下のものが含まれる。

（１）α−アミ７基のための、（ａ）芳香性ウレタン型保護基、例エバフルオレ ニルメチルオキシカルボニル（ＦＭＯＣ）ＣＢＺ、および置換ＣＢＺ、例えば、 ｐ−クロロベンジルオキシカルボニル、ｐ−６−ニトロベンジルオキシカルボニ ル、ｐ−ブロモベンジルオキシカルボニル、およびｐ−メトキシヘンシルオキシ カルボニル０−クロロペンシルオキ７カルボニル、２．６−ジクロロベンジルオ キシカルボニル等：　（ｂ）脂肪族ウレタン型保護基、例え＋ｆＢ。

Ｃ１　ｔ−アミルオキシカルボニル、イソプロピルオキシカルボニル２−（ｐ− ビフェニリル）−イソプロピルオキシカルボニルルオキシカルボニル等；　（Ｃ ）シクロアルキルウレタン型保護基、例えばシクロペンチルオキシカルボニル、 アクマンチルオキシカルボニル、およびシクロへキシルオキシカルボニル等：お よび（ｄ）アリルオキシカルボニル。好ましいα−アミノ保護基はＢＯＣまたは ＦＭＯＣである。

（２）Ｌｙｓに存在する側鎖アミン基の保護はＢＯＣ，　ｐ−クロロベンジルオ キシカルボニル等の、上記（１）に記載の任意の保護基で行うことができる。

（３）Ａｒｇのグアニジ７基はニトロ、トシル、ＣＢＺ，アダマンチルオキシカ ルボニル、２，３．６−ドリメチルー４−メトキンフェニルスルホニル、または ＢＯＣ等によって保護される。

（４）Ｓｅｒ，ＴｈｒまたはＴｙｒの水酸基は、例えばｔ−ブチル：ベンジル（ ＢＺＬ）　、ｐ−メトキシベンジル、ｐ−ニトロベンジル、ｐ−クロロベンジル 、Ｏ−クロロベンジル、２．６−ジクロロベンジル等によって保護される。

（５）ＡｓｐまたはＧｌｕのカルボキシル基の保護は、例えばＢＺＬ，ｔ−ブチ ル、シクロヘキシル、シクロペンチル等によって行われる。

（５）　Ｈ　ｉ　ｓのイミダゾール窒素の保護にはトシル部分が適当である。

（７）Ｔｙｒのフェノール性水酸基にはテトラヒドロピラニル、ｔ。

ｒｔ−ブチル、トリチル、ＢＺＬ，クロロベンジル、４−ブロモベンジル、およ び２，６−ジクロロベンジルが適する。好ましい保護基ハ２，６−ジクロロベン ジルである。

（８）ＡｓｎまたはＧｌｎの側鎖には牛サンチル（Ｘａｎ）が好ましい。

（９）Ｍｅｉの場合にはアミノ酸を保護しないままで置くことが好ましい。

（１０）Ｃｙｓのチオ基には−、般にｐ−メトキンベンジルを用いる。

Ｃ−末端アミノ酸、例えばＬｙｓのＮ−アミノ位置を適宜選択した保護基、例え ばＬｙｓの場合はＢＯＣで保護する。ＢＯＣ−Ｌｙｓ−ＯＨをまず、ホリキら（ Ｈｏｒｉｋｉ）の方法［Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ　Ｌｅｔｔｅｒｓ、　（１９７８） 　１８５−１８８］に従って、または約２５℃で２時間、撹拌下にイソプロピル カーポジイミドを用いて、ベンジヒドリルアミンまたはクロロメチル化樹脂に結 合させることができる。ＢＯＣ保護アミノ酸の樹脂支持体への結合の後、塩化メ チレン中トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）またはＴＦＡ単独でα−アミノ保護基を除 去する。脱保護は約Ｏ′Ｃから室温で行う。他の標準的な開裂試薬、ジオキサン 中ＨＣ１、および特定のα−アミノ保護基の除去条件は５ｃｈｒｏｄｅｒおよび Ｌｕｂｋｅ（前掲、　Ｃｈａｐｔｅｒ　Ｉ、　ｐｐ、７２−７５）によって示さ れている。

α−アミノ保護基の除去後、残るα−アミノおよび側鎖が保護されたアミノ酸を 所望の順番で結合させる。各アミノ酸を別々に合成に加える代わりに、固相合成 装置に加える前に、あらかじめ、あるものを互いに結合させておいてもよい。適 当なカップリング剤の選択は当業者にとって既知の範囲である。特に適当な力、 ７プリング剤はＮ、Ｎ’　−ジシクロへ牛シルカーポジイミドまたはジイソプロ ピルカーポジイミドである。

それぞれ保護されたアミノ酸またはアミノ酸配列の過剰量を固相リアクターに導 入し、カップリングはジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）またはＣＨ，ＣＩ、また はその混合物等の溶媒中で適切に行われる。もしもカップリングが不完全であっ た場合には、次のアミノ酸のカップリングに先立つＮ−アミ／保護基の除去より 先にカップリング工程を繰り返す。合成あ各段階での各カップリング反応の成功 を監視する。好ましい合成監視法は、カイザーら［（Ｋａｉｓｅｒ）　Ａｎａｌ Ｂｉｏｃｈｅｍ、　（１９７０）　３４：　５９５１に記載のニンヒドリン反応 による。カップリング反応はＢｉｏｓｅａｒｃｈ　９５００　Ｐｅｐｔｉｄｅ　 ５ｙｎｔｈｅｓｉｚｅｒ等の周知の方法で自動的に行うことができる。

所望のペプチド配列が完成されたら、保護ペプチドを樹脂支持体から切り離し、 全保護基を除去しなければならない。開裂反応および保護基の除去は同時にまた は逐次、適切に行うことかできる。樹脂支持体がクロロメチル化ボワスチレン樹 脂である場合、ペプチドを樹脂に固定している結合はＣ−末端残基の遊離のカル ボキシル基と樹脂マトリクスに存在する多（のクロロメチル基の１つとの間に形 成されたエステル結合である。固定化結合はエステル結合を切断することができ 、樹脂マトリクスに浸透し得ることが分かっている試薬によって開裂できること は理解されるであろう。特に好都合な１つの方法は液状無水フッ化水素による処 理である。この試薬は樹脂からペプチドのみならず、全保護基を除去する。従っ て、この試薬を用いると、完全に脱保護されたペプチドを直接、得ることができ る。クロロメチル化樹脂が用いられている場合には、フン化水素処理によって遊 離のペプチド酸が生成する。アニソールおよびベンジルスルフィドの存在下、０ °Ｃで１時間、フッ化水素を反応させると側鎖保護基の除去とペプチドの樹脂か らの遊離とが、同時に起きる。

保護基を除去しないでペプチドを開裂する必要がある場合、保護ペプチド−樹脂 をメタンリンスに付し、Ｃ−末端力ルホキフル基がメチル化された保護ペプチド を得る。次いで、メチルエステルを穏やかなアルカリ性条件下で加水分解し、遊 離のＣ−末端力ルポ牛シル基を得る。次いで、ペプチド鎖上の保護基をフッ化水 素溶液等の強酸で処理することにより除去する。特に有用なメタツリシスの方法 はムーアら（Ｍｏｏｒｅ）　［Ｐｅｐｔｉｄｅｓ、　Ｐｒｏｃ、　Ｆｉｆｔｈ　 Ａｍｅｒ、　Ｐｅｐｔ、　Ｓｙｍｐ、。

Ｍ、Ｇｏｏｄｍａｎ　Ｊ、　Ｍｅｉｅｎｈｏｆｅｒ　Ｅｄｓ、、　（Ｊｏｈｏｎ 　Ｗｉｌｅｙ、　Ｎ、Ｙ、、　１９７７）、　ｐ、５１８−５２１．］によって 記載されており、保護ペプチド−樹脂をクラウンエーテルの存在下、メタノール とシアン化カリウムで処理している。

クロロメチル化樹脂を用いた場合に、保護ペプチドを樹脂から切り離すのに用い られる他の方法はアンモノリシスまたはヒドラジン処理である。所望により、常 法通り、得られたＣ−末端アミドまたはヒドラジドを加水分解して遊離のＣ−末 端カルボキシル部分とし、保護基を除去することができる。

また、Ｎ−末端α−アミ７基上の保護基は保護ペプチドが樹脂から切り離される 前、または後に優先的に除去されることも分かるであろう。

本発明のポリペプチドの精製は調製用ｆ（ＰＬＣ（逆相ＨＰＬＣを含む）、また はゲル振盪、イオン交換、分配クロマトグラフィー、モノクローナル抗体カラム を含む、常法により達成される。

ポリペプチド鎖は、化合物１等の多機能性架橋剤を用い、架橋モノマー鎖により 、直接または多官能性ポリマーを介して間接的に重合される。通常は、２つの実 質的に同じポリペプチドを、２機能性架橋剤の存在下、それらのＣまたはＮ末端 で架橋結合させる。その試薬は末端アミンおよび／またはカルボキシ基との架橋 結合に用いられる。適当な架橋剤の選択によって１個のポリペプチドのα−アミ ンが池のポリペプチドの末端カルボキシル基と架橋結合するが、一般に両末端カ ルボキシル基または両末端アミン基が互いに架橋結合する。好ましくはポリペプ チドはＣ−末端がシスティンで置換されている。当該技術分野で周知の条件下、 ジスルフィド結合は末端システィン間で形成され、その結果、ポリペプチド鎖を 架橋結合させる。例えば、遊離のシスティンの金属触媒による酸化により、ある いは適当に修飾されたシスティン残基の核置換によって、都合良くジスルフィド 架橋を形成することができる。架橋剤の選択はポリペプチドに存在するアミノ酸 の活性な側鎖の種類によって変化する。例えば、ジスルフィド架橋はシスティン かポリペプチドのＣ−末端以外の部位にも存在する場合には好ましくない。メチ レン架橋によって橋架けされたペプチドも本発明の範囲内である。

Ｎ−末端アミ７およびＣ−末端カルボキシル基以外のペプチドの好ましい架橋部 位はりンン残基に認められるイプシロンアミ７基、並びにペプチドの内部残基の 側鎖上に存在するアミノ、イミノ、カルボキシル、スルフヒドリル、およびヒド ロキシル基または隣接する配列に導入された残基である。エクストリーマリイ　 （ｅｘｔｅｍａｌｌｙ）に加えられた架橋剤を介する架橋は、例えば、当業者に よく知られた架橋剤、例えばポリペプチドのカーポジイミド処理等を用いて適切 に達成される。他の適切な多機能性（通常、２機能性）の架橋剤には、以下のも のがある：１，１−ビス（ジアゾアセチル）−２−フェニルエタン；グルタルア ルデヒド；４−アジドサリチル酸とのエステルのようなＮ−ヒドロキシスクシン イミドエステル［ブラッグ（Ｂｒａｇｇ）およびホウ（Ｈｏｕ）　Ｊ、　Ｐｅｐ 、　Ｐｒｏ、　Ｒｅｓ、　（１９８７）３０：１１７−１２４］；３，３’　− ジチオビス（スクシンイミジル−プロピオネート）等のジスクシンイミジルエス テルおよびジメチルアジピミデート２塩酸塩［ザーン（Ｚａｈｎ）　、　Ａｇｎ ｅｗ　ＣｈｅＩｌｌ、　（１９５５）　６７：　５６１−５７２　；ゴールデン （Ｇｏｌｄｅｎ）およびハリソン（Ｈａｒｒｉｓｏｎ）　Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔ ｒｙ　（１９８２）２１：　３８６２−３８６６１等を含むホモ２機能性イミド エステル類、ビス−Ｎ〜マレイミド−１，８−オクタン等の２機能性マレイミド ；ジスクシンイミジルスベレート　［ノビツクら（Ｎｏｖｉｃｋ）　Ｊ、Ｂｉｏ ｌ、Ｃｈｅｍ。

（１９８７）　２６２：　８４８３−８４８７］　、ビス（スルホスクシンイミ ジル）スベレート［リー（Ｌｅｅ）およびコンラッド（Ｃｏｎｒａｄ）　Ｊ、Ｉ ｍｍｕｎｏｌ、（１９８５）　１３４：５１８−５２５］　：　１喘にＮ−ヒド ロキシスクシンイミド部分を、他の端にマレイミド基を有するものを含めて、ヘ テロ２機能性架橋剤［ロマンツ（Ｌｏｍａｎｔｓ）およびフェアバンクス（Ｆａ ｉｒｂａｎｋｓ）、Ａｒｃｈ。

Ｂｉｏｃｈｅａ＋、　Ｂｉｏｐｈｙｓ、　（１９７６）　１６７：　３１１−３ ２１；　Ａｎｊａｎｅｙｕｌａおよび５ｔａｒｏｓ　（前掲）、バトリスら（Ｐ ａｒｔｉｓ）　Ｊ、Ｐｒｏｃ、Ｃｈｅｍ、（１９８３）２：２６３−２７７；ウ ェルトマンら（Ｗｅｌｔｍａｎ）　Ｂｉｏ　Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ、　（１９８ ３）　ｌ：　１４８−１５２；　ヨシタケら（Ｙｏｓｈｔａｋｅ）　Ｊ、Ｂｉｏ ｃｈｅＩｌｌ（１９ｇ２）９２：１４２３−１４２４］　；スクシンイミジル４ −（Ｎ−マレイミドメチル）シクロへ牛サンー１−カルポキシレー１−　（ＳＭ ＣＣ）［マハンら（Ｍａｈａｎ）　Ａｎａｌ、Ｂｉｏｃｈｅｍ、（１９８７）１ ６２．　１６３−１７０）；　スルホ−ＳＭＣＣ（ハシダら（Ｈａｓｈｉｄａ） 。

Ｊ、Ａｐｐｌｉｅｄ　Ｂｉｏｃｈｅｍ、（１９８４）　６：５６−６３］　；　 ｍ−マレイミドベンゾイル−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル（ＭＢＳ） 、スルホ−ＭＢＳ；スクシンイミジル４−（ｐ−マレイミドフェニル）ブチレー ト（ＳＭＰＢ）；スルホ−ＳＭＰＢ、Ｎ−スクシンイミジル（４−ヨードアセチ ル）アミノベンゾニー１−　（Ｓ　ＩＡＢ）；スルホ−８ＩＡＢ：１−エチル− ３−（３−ジメチルアミノプロピル）カーポジイミド塩酸塩（ＥＤＣ）；および Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド。

メチル−３−［（ｐ−アジド−フェニル）ジチオ］プロピオイミデートのような 架橋剤は光照射下に架橋剤結合を形成し得る光活性化可能な中間体を与える。要 すれば、ジアルギニル基側鎖のような感受性の残基を架橋の間保護し、その後、 保護基を除去してもよい。

多重架橋をすることができるポリマーは間接的な架橋剤として作用する。例えば 、米国特許３，９５９，０８０：３．９６９．２８７；３，６９１，０１６；４ ，１９５，１２８＋４，２４７，６４２；４，２２９．５３７：４，０５５．６ ３５；４，３３０，４４０に開示されている臭化シアン活性化炭水化物およびそ のシステムを本発明のペプチドの架橋に適するように改良する。ペプチドのアミ ７基への橋架けは塩化シアヌル、カルボニルジイミダゾール、アルデヒド反応性 基（ＰＥＧアルコキシド＋ブロモアセトアルデヒドのジエチルアセタール；　Ｐ ＥＧ＋ＤＭＳＯおよび無水酢酸またはＰＥＧ塩化物＋４−ヒドロキシベンズアル デヒドのフェノキシト）等に基づく既知の化学によって行われる。スクシンイミ ジル活性エステル、活性化ジチオカーボネートＰＥＧおよび２，４．５−トリク ロロフェニル−クロロギ酸−活性化ＰＥＧまたはｐ−ニトロフェニル−クロロギ 酸−活性化ＰＥＧも有用である。カーポジイミドを用いてＰＥＧ−アミンのカッ プリングを行いカルボキシル基を誘１体化する。しかしながら、通常、架橋剤は 多官能性ポリマーでなく、分子Ｎ５００以下の小さい分子である。

本発明のペプチドの立体配座は環化によっても安定化され得る。

環化は、通常、本発明の１つのペプチドのＮ−末端およびＣ−末端領域と池のペ プチドの対応する末端とを共有結合させて、内部ペプチドの配列か実質上同一で ある、２またはそれ以上のペプチド反復配列からなるンクロオリコマーを形成す ることにより、行われる。

次いで、環化ペプチド（ンクロオリゴマーまたはンクロモ／マーのいずれか）を 架橋結合させて２−６個のペプチドで構成される１−３環状構造を形成する。好 ましくは、α−アミノ基と主鎖カルボキシル基間（頭−尾）を介する共何結合の 形成てなく、Ｎ−末端およびＣ−末端領域に位置する残基の側鎖を介し、ペプチ ドを架橋結合させる。このように、架構部位は一般に残基の側鎖間となろう。

本発明の環状構造は下記の一般式を有するであろう。

式中、ＡおよびＢは本発明のペプチドを表し、ＡおよびＢは同一または異なるペ プチドであってよい。ＡおよびＢは単一のペプチドか２またはそれ以上のペプチ ドの頭−尾ポリマーである。Ｃは１またはそれ以上の結合、あるいは架橋部分を 表す。

本明細書に記載のごとく多（のモノー環状ペプチドおよびポリー環状ペプチドの 多くの製造法は自体既知である。Ｌｙｓ／Ａｓｐ環化は固体支持体上のＮａ−Ｂ ＯＣ−アミノ酸に、Ｌ　ｙ　ｓ　／　Ａ　ｓ　ｐのためのＦＭＯＣ／９−フルオ レニルメチル（○Ｆｍ）側鎖保護を用いて行われていた：工程はピペリジン処理 、次いで、環化で完了する。

ＧｌｕおよびＬｙｓ側鎖はサイクリック（環状）ペプチドまたはビサイクリック （二環式）ペプチドの調製により架橋される：ｐ−メチルベンズヒドリルアミン 樹脂上の固相化学によりペプチドが合成される。ペプチドを樹脂から開裂し、脱 保護する。環状ペプチドは希メチルホルムアミド中、ジフェニルホスホリルアジ ドを用いて形成される。他′の方法は７ラーら（Ｓｃｈｉｌｌｅｒ）によって記 載された［Ｐｅｐｔｉｄｅ　Ｐｒｏｔｅｉｎ　Ｒｅｓ、（１９８５）　２５：１ ７１−１７７］　。米国特許４．５４７，４８９をも参照。

ジスルフィド架橋結合された、または環化されたペプチドは従来法で製造し得る 。ペルトンらの方法［Ｐｅ１．ｔｏｎ、　Ｊ、Ｍｅｄ、Ｃｈｅｎ、（１９８６） ２９：　２３７０−２３７５］　、ただしＰｅ１ｊｏｎらが７クロモ／マーの製 造において記載している希釈反応溶液でなく、より濃厚な溶液中で彼らの操作を 行うってシクロオリゴマー成分をより多くすることを除き、彼らの方法が適する 。同じ化学理論は２量体、シクロオリコマ−またはンクロモノマーの製造にも有 用である。チオメチレン’Ｒｍ　［Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ　Ｌｅｔｔｅｒｓ　 （１９８４）２５：　２０６７−２０６８１　も有用である。コブイーら（Ｃｏ ｄｙ）のＪ、Ｍｅｄ、Ｃｈｅｍ、（１９８５）２８：　５８３をも参照。

所望のサイクリックまたはポリメリックペプチドの精製はゲルろ過の後、逆相高 速液体クロマトグラフィーまたは他の常法により行われる。ペプチドは滅菌ろ過 し、通常の薬学的に許容し得るビヒクルにより製剤化される。

ペプチド、ポリペプチドおよびタンパク質上記から、天然、合成、線状、環状ま たは架橋ペプチド、ポリペプチド、またはタンパク質の任意のアミノ酸を、式１ で示されるキメラアミノ酸類似体で置換し得ることか分かるであろう。置換され るアミノ酸は他の二塩基性アミノ酸であることが好ましく、さらにＰｌがアミノ イミノメチルであってｎ＝−１である類似体でＡｒｇ、Ｐ、が水素であってｎ＝ ２である類似体でＬｙｓを置換することが最も好ましい。従って、本発明のキメ ラアミノ酸類似体を含膏する最も一般的なペプチドは式２・ ［式中、Ｘ、は水素、アミノイミノメチル、Ｃ，−Ｃ，アシル、アミノ酸、ペプ チド、ポリペプチド、およびタンパク質、ｎはＯ，ｌまたは２（ただしＸ３が水 素のときはｎはＯでない）：Ｘ＋はＯＨ，ＮＦ２、ＮＨＲ（ここにＲはＣ，−Ｃ ，アルキルを表す）、アミノ酸、ペプチド、ポリペプチド、およびタンパク質か ら選択される基、Ｘ。

は水素、Ｃ，−Ｃ，アルカメイル、アミノ酸、ペプチド、ポリペプチド、および タンパク質を表す。］ で示される。

式２で示される構造は任意のペプチド、とりわけアミノ酸残基数か７５またはそ れ以下のペプチドを包含する。式２て示される好ましいペプチドは２−５０アミ ノ酸残基ペプチドであって、例えば上皮性成長ホルモン、成長ホルモン放出因子 、並びに適合する大きさの他のペプチドである。式２で示される最も好ましいペ プチドは３−２５アミノ酸残基ペプチドであって例えばソマトスタチン、タフト ンン（ｔｕｆｔｓｉｎ）　、ブラジキニン、ＬＨ−ＲＨ／ＦＳＨ−ＲＨ／Ｇｎ− ＲＨ、チロシン放出ホルモン、バソプレッシン、オキシトシン、アンギオテンシ ンＩＩ受容体結合タンパク質およびエンケファリン、並びに同様の大きさの他の ペプチドであるがこれらに限定されない。

上記の型の好ましい線状ペプチドは血小板凝集阻害物質であって（式中、Ｒ１は アミノ酸、好ましくはＧＩｙまたはＨ；Ｘ、は好ましくはアミノイミノメチル、 ｎは１．そしてＲ２またはＲ１は疎水性の基、好ましくはイソプロピルのような 低級アルキル：他の基はＣ−末端アミノ酸がＶａ（になるように水素である。好 ましくは、Ａｓｐ残基のγ−カルボキンおよびＶａｌ残基のα−カルボキンは、 ＣＯＲ，（ここにＲ４はＯＨ，Ｃ，−Ｃ，、アルコキシ、またはベンジルオ上記 の型の好ましい環状ペプチドは血小板凝集阻害作用を有する化合物であって、式 ４ で示される。

環状ペプチド４は、ペプチド３においてＲＩＧＲ，＊たはＲ３と結合させ、他の 置換基を水素とすることで好適に得られる。好ましくはＸ、はアミノイミノメチ ル、ｎは１、ＡＡはＧｌｙ、ｌ）−またはＬ−Ｔｙｒ、Ｖａｌ、ＰｈｅＳＡ　Ｉ 　ａ、Ｓｅ　ｒ、Ｔｈ　ｒ、またはＩＩｅ等の任意のアミノ酸、Ｒ７およびＲ８ は例えば、好ましくはいずれもメチルのような低級アルキル、またはいずれも水 素、Ｒ８およびＲ５ｏは例えば、いずれも水素または、例えば１個はフェニルの ような置換基であって、池は水素を表す。Ｑは酸素、窒素または硫黄、または置 換窒素（置換基は例えばアルカ／イル基）または酸化されてスルホキシドまたは スルホンとなっている硫黄であってよい、Ｑはまた１−４個のメチレン基を有す るアルキレンブリッジであってもよい。好ましくはＲ４はＯＨ，Ｃ，あ−Ｃ４， アルコキシまたはペンジルオキシである。

式３および４で示される血小板凝集阻害物質は、通常、血栓形成増大傾向を有す る哺乳類の治療のために、所望により、血栓溶解剤または抗凝結剤と一緒に医薬 組成物に含有させて用いることができる。代表的な血栓溶解剤には組織プラスミ ノーゲン活性化物質（ｔ−ＰＡ）、ストレプトキナーゼ、アシル化プラスミノー ゲン／ストレフトキナーゼ活性化物質複合体（ＡＰＳＡＣ）　、ウロキナーゼ、 ブローウロキナーゼ（ｓｕｅ−ＰＡ）等が含まれるがこれらに限定さレナい。代 表的な抗凝結剤にはヘパリン、ジクマロール、ワルツリン等［例えば、コルマン ら（Ｃｃｌｍａｎ）、　）Ｉｅｍｏｓｔａｓｉｓ　ａｎｄ　ＴｈｒｏＩＩｌｂｏ ｓｉｓ。

２ｎｄ　Ｅｄｉｔｉｏｎ、　Ｊ、Ｂ、Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ　Ｃｏ、、　Ｐｈ１ ｌａｄｅｌｐｈｉａ　（１９８７）参照］が含まれるがこれらに限定されない。

血栓栓塞疾患の管理のためには、式３または４で示されるペプチドの組成物を、 経口投与用の錠剤、カプセル、またはエリキンル；直腸投与用の生薬、注入可能 なエアゾル投与用滅菌溶液または滅菌懸濁液等々として用いる。本発明化合物を 用いる治療か必要な哺乳類に至適効果を上げ得る用量の本発明化合物を投与する 。投与量および投与方法は動物によ・〕で異なり、体重、飼料、同時的な投薬、 およびその他の当該技術者が認識し得る池の因子等によって変化するであろう。

本発明化合物の投与用製剤は所望の精製度の環状ポリペプチドと生理学的に許容 し得る担体、賦形剤、または安定化剤とを混合することにより、貯蔵または投与 用に調製される。そのような物質は採用される投与量および濃度で受容者に非毒 性であり、りん酸塩、クエン酸塩、酢酸塩および他の有機酸の塩等のバッファー ；アスコルビン酸等の抗酸化剤、ポリアルギニン等の底分子量（約１０残基以下 ）ペプチド、血清アルブミン、シェラチン、または免疫グロブリン類等のタンパ ク質：ポリビニルピロリドン等の親水性ポリマー。

グリシノ、グルタミン酸、アスパラギン酸、またはアルギン等のアミノ酸；セル ロースまたはその誘導体、グルコース、マンノース、デ牛ストリンなどを含む単 糖類、三糖類、およびその他の炭水化物：ＥＤＴＡ等のキレート化剤、マンニト ールおよびソルビトール等の糖アルコール；　ＴＷＥ　Ｅ　Ｎ、　Ｐ　１ｕｒｏ ｎｉｃｓまたはポリエチレングリコール等のナトリウムおよび／または非イオン 性界面活性剤を含有する。

治療投与に用いられる本発明化合物の投与製剤は滅菌されていなければならない 。滅菌は０．２ミクロンメンブラン等の滅菌ろ過膜で濾過することにより容易に 行うことができる。通常、投与製剤は凍結乾燥形、または水溶液形で保存される であろう。製剤のｐＨは一般に３〜１１が好ましく、５〜９がさらに好ましく、 ７〜８が最も好ましい。前記の賦形剤、担体、または安定化剤の内のあるものを 用いると、塩が形成されることが分かるであろう。皮下注射針ににる投与経路が 好ましいが、生薬、噴霧剤、経口投与等の剤形の製剤、軟膏、点眼薬、および皮 膚バッチのような局所投与方法も想定される。

本発明化合物の治療用製剤は、通常、静注溶液バッグまたは皮下注射針によって 貫通し得るストッパーを付けたビン等の滅菌用の口部を有する容器に入れられる 。

治療有効量はインビトロまたはインビボの方法で決定される。インビトロ分析法 に基いて治療有効量の範囲がめられる。本発明の特定の化合物の各々について、 必要な至適投与量が別個に決定されるであろう。治療有効量の幅は当然ながら投 与経路に影響されるであろう。皮下注射針による注射のための投与量は体液への 供給を仮定することになる。他の投与経路については各化合物について、薬学的 に周知の方法で各化合物の吸収効率を決定する必要がある。治療用量は０．００ １　ｎＭから１．ＱｎＭ、好ましくはＱ、ｌ　ｎＭから１００μＭ、より好まし くは１．ＱｎＭから５０ｇＭとすることができる。

医薬組成物としての、式３または４の化合物の代表的な製剤は、遊離の酸または 塩基の形の、あるいは薬学的に許容し得る塩の形の式３または４の化合物、また はその混合物約０．５〜５００Ｉ１１９を、製薬業務において認められている生 理学的に許容し得るビヒクル、担体、賦形剤、結合剤、保存剤、安定化剤、香料 等と混合する。これら組成物中の活性成分の量は指示された用量範囲を達成する に適当な量である。

実施例 当業者は上記の記載および実施例を用い、これ以上の説明を必要とせず、本発明 を完全に用い、利用することができる。それ故に、以下の実施例は本発明の好ま しい態様を具体的に指摘するものであり、いかなる意味においても開示の他の部 分を制限するものではない。

ＮＭＲスペクトルのための化学／ブトデータは内部標準として化学シフトをＯと 帰属されているテトラメチルシランを用いて測定する。実施例に例外のある場合 には、その都度、随所に記載されている。

実施例で用いた略語は以下の通りである　ＢＯＣ（ｔ−ブ）・キシカルボニル） 、Ｃｂｚ（ヘンンルオキシカルボニル）、ＴｓまたはＴＯ５（＋）−トルエンス ルホニル）。

実施例１−４０を実施するための一般的な反応。方法Ａ２反応混合物を０．５Ｍ クエン酸と酢酸エチルに分配した。酢酸エチルで水層を３回抽出し、有機抽出液 を合わせ、食塩水で洗浄し、Ｍ　ｇ　Ｓ　Ｏ４で乾燥し、減圧濃縮した。方法Ｂ ・反応混合物を水−水に注加し、酢酸エチルで３回抽出した。有機抽出液を一緒 にし、水で３回洗浄した後、食塩水で洗浄した。酢酸エチル抽出液をＭｇ　Ｓ　 Ｏ，乾燥し、濃縮した。方法Ｃ方法Ｂにおいて、水洗浄てなく５％Ｎ　ａ　ＨＣ Ｏ３洗浄を行う。

（４Ｓ）　１−ｔｅｒｔ−ブトキンカルボニル−４−クロロ−し−プロリンエチ ルエステル （４Ｒ）−１−ｔ−ブトキシカルボニル−４−ヒドロキシプロリンエチルエステ ル［アブラハムら（Ｄ、Ｊ、Ａｂｒａｈａｍ）　Ｊ、Ｍｅｄ、Ｃｈｅｍ、　１９ ８３．２６：５４９　５５４；　１４　ｇ　、　５４　ｍｍｏｌ］をピリジン２ ００ｍ１から濃縮し、次いで、トルエン各２００ｍ１から３回濃縮してｔ−ブタ ノールを除去した。残渣をジクロロメタン１００ｍ１と四塩化炭素１００ｍ１の 混合物に溶解し、次いて、よく撹拌しなからトリフェニルホスフィン（３０ｇ、 １１４　ｍｍｏｌ）を加えた。添加の間中、溶液を加温した。この溶液を２時間 撹拌し続けた後、エタノールＩｏｎｌを加え、溶液を２２°Ｃで１６時間撹拌し た。次いで、溶液を約１００ｍ１まで濃縮し、濃縮液を一２０°Ｃまで冷却しト リフェニルホスフィン酸化物を析出させた。エーテル（１００ｍｌ）を加え、混 合物をろ過し、固体をエーテル１００＠ｌで洗浄し、濾液と洗浄液とを濃縮した 。残渣をシリカゲル（５０％エーテル／ヘキサン）によるフラッシュクロマトグ ラフィーで精製し、標題の化合物１１゜４ｇを無色の油状物質として得た（収率 ７６％）。

’ＲＮＭＲ（ＣＤＣＩｓ）　：　１．２８（ｔ、　３Ｈ）、　１．４２／１．４ ５（２ｓ、　９Ｈ）、　２．３６（ｍ、　ＬＨ）、　２．６R（ｍ。

ＩＨ）、　３．６３（ｍ、　ＩＨ）、　３．９５（ｍ、　ＩＨ）、　４．２０（ ｑ、　２Ｈ）、　４．３５（ａ＋、　２Ｈ）。

この層状化合物をエタノール中無水ＨＣＩで処理すると【−ブトキンカルボニル 基が除去され（４Ｓ）−４−クロロ−し−プロリンエチルエステル塩酸塩が得ら れる。ｍｐ＝１３２−１３４℃（エーテル／エタノール）、元素分析゛　（Ｃ， ８，３Ｎｏ、Ｃ１２）Ｃ，Ｈ。

（４Ｓ　）　−１−ｔｅｒｔ−ブト牛／カルボニルー４−ブロモ−し一プロリン エチルエステル （４，Ｒ）−１−ｊ−ブト牛ンカルボニルー４−ヒドロキシフ゛ロリンエチルニ ステルロ実施例１の文献参照、１３ｇ、５０　ｍｍｏｌ−ｊを実施例１記載の方 法と同様にピリジンおよびトルエンから’ｔＲＪａし、ジクロロメタン１００ｍ １に溶解した後、四臭化炭素（６６ｇ、２０Ｑｍｍ○１）を加えた。溶液を水浴 で冷却し、トリフェニルホスフィン（５２，５ｇ、２００　ｍｍｏｌ）を充分な 撹拌下で１０分間で加えた。

発熱し暗赤色に変化した反応混合物を５時間撹拌した後、エタノール１０ｍ１を 加え、−夜撹拌を続行した。得られた暗色溶液と沈殿をエーテル５００ｍ１で処 理してろ過し、残渣をエーテル２００ｍ１で洗浄した。ろ液および洗浄液を濃縮 し、実施例１記載のごとくにして精製し、標記化合物の精製物８．５ｇを得た。

（収率５３％）。

’ＨＮＭＲ（ＣＤＣ１ａ）　：　１．３０（ｔ、　３Ｈ）、　１．４３／１．４ ７（２ｓ、　９Ｈ）、　２．４３（ｍ、　ＩＨ）、　３．７P（ｍ、 １８）、　４．　Ｏ６（ｍ、　ＩＨ）、　４．２２（ｑ、　２Ｈ）、　４．３５ （ｍ、　２Ｈ）。

この生成物は放置すると結晶化し融点３２−３４°Ｃの物質を与えた。

元素分析：　（ＣＩｆｆＨｔＯＮＯａＢ　ｒ）Ｃ，Ｈ，Ｎ。

（４Ｓ）　−１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−４−アジド−し−プロリン （４Ｓ）−１−ｔ−ブトキンカルボニル−４−アジド−し−プロリンエチルエス テル［アブラハムら（Ｄ、Ｊ、Ａｂｒａｈａｍ）　Ｊ、Ｍｅｄ、Ｃｈｅｍ、　１ ９８３、２６：５４９−５５４；　１．８０ｇ、　６．３３ｍｍｏｌ］を実施例 １１に記載のごとく加水分解した。生成物をフラノシニクロマトグラフィー（Ｏ −１０％Ｍ　ｅ　ＯＨ／ジクロロメタン）で精製し、所望のアンド１２ｇ（収率 ７４％）を油状物質として得た。

（４Ｓ　）　−１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルー４−アミノ−Ｌ−プロリン 実施例３で調製したアジ化酸（１，，１０ｇ、４　、２９　ｍｍｏｌ）を１５０ ｍｇの１０％Ｐｄ／Ｃを含有する１０％水／エタノールｌｏｏｍｌに溶解し１０ Ｑｐｓｉで１６時間水素添加した。を昆合物をセライトバ／ドでろ過し水／エタ ノール（１：　ｌ）５０ｍｌで洗浄し、ろ液を濃縮乾固した。この物質を水／エ タノールから再結晶し、所望のアミノ化合物９００ｍｇを得た（収率８４％）。

ｍｐ＝２２５−２２７°Ｃ（分解）。

’ＨＮＭＲ（Ｃ２０）　：　１．４０／’１．４４（ｍ、　９ｉ（）、　２．１ １（ｍ、　ＬＨ）、　２．６８（ｍ、　１８）、　３．６９iｍ、　２Ｈ）。

３、９９（ｍ、　２Ｈ）、　４．２０（ｄｄ、　Ｊ＝９．０／３．９Ｈｚ、　Ｌ Ｈ）。

元素分析：　（Ｃ１ｏＩ（ｌｓＮ　ｔ○、＋　Ｈ，○’）Ｃ，Ｈ，Ｎ。

（４Ｓ　）　−１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−４−（Ｎ−（ｐ−トルエン スルホニルゴミ／アミ／メチル）アミノ）　−Ｌ−７’ロリン実施例４で調製し たアミノ酸（７５０ｎ＋ｇ、３　、０２　ｍｍｏｌ）を実施例１３記載の方法を 用いて標記化合物に変換した。酢酸エチル／ヘキサンから２回再結晶して生成物 １．１５ｇを得た（収率７４％）。

ｍｐ＝１７１−１７２℃。

’ＨＮＭＲ（ＣＤＣＩ３）　：　１．３８／１．４４（２ｓ、　９Ｈ）、　２． ２８（ｍ、　２Ｈ）、　３．４５（ｍ、　２Ｈ）、　４．４Q（ｍ。

２Ｈ）、　５．８０（ｂｓ、　１）Ｉ）、　６．２０（ｂｓ、　２）１）、　７ ．２３（ｄ、　Ｊ４）１ｚ、　２８）、　７．７６（ｄ、　i＝８１（ｚ、　２ ＦＩ）。

元素分析・　（Ｃ，、Ｈ２，Ｎ、ｓｏ、）Ｃ，Ｈ，Ｎ０実施例６ 実施例１で調製したり四ロエステル（５，５ｇ、１９．８ｍｍｏｌ）とＮａＮａ （５，５ｇ、８４　、６　ｍｍｏｌ）を７５°Ｃの油浴上ＴＤＭＦ　２　ＱＯｍ ｌに溶かし、同温度で６４時間撹拌した後、方法Ｂで仕上げた。

生成物４５ｇ（粗板率８０％）を得、これを実施例７記載の工程に付した。

’）ＩＮＭＲ（ＣＤＣＩ、）　、　１２８（し、　３Ｈ）、　１．４１／１．４ ６（２ｓ、　９Ｈ）、　２．１７（ｍ、　ＩＨ）、　２．３Q（ｍ。

１Ｈ）、　３．７０（ｄｄ、　ＩＨ）、　４．１８（ｍ、　３Ｈ）、　４．３４ （ｍ、　ＩＨ）ＦＡＢＭＳ：ＭＨ−１−（ＣＩ２Ｈ＊＋Ｎ−０４としテ）：計算 値：２８５゜１５６３：　実測値：２８５．１５７４゜上記実施例で調製したト ランス体アンドエステル（４，４５ｇ。

１５　、７　ｍｍｏｌ＞を実施例１１に記載のごとく加水分解し、生成物３１ｇ （収率７７％）を得、直接実施例８記載の反応に用いた。

’ＨＮＭＲ（ＣＤＣ１３）　：　１．４１／１．４８（２ｓ、　９Ｈ）、　２． ２４（ｍ、　１８）、　２．５２（ｍ、　ＬＨ）、　３．５S（ｍ。

１）１）、　３．７１（ｍ、　１ｔ（）、　４．１７（ｍ、　ｌ）［）、　４． ４０（ｍ、　１ｔ（）。

（４Ｒ）　１．−ｔｅｒｔ−ブトヰ／カルボニル−４−アミ／−Ｌ−プ実施例７ て調製したトランス体アジド酸（３，０ｇ、　ｌ　１．７ｍｍｏｌ）を実施例４ に記載のごとく水素添加し、エタノールから結晶化して標記の所望のアミン化合 １８ｇ（収率６７％）を得た。ｍ　ｐ’　＝　２２８−２２９°Ｃ（分解）。

’ＨＮＭＲ（ＣＤＣ１ｚ）　：　１．４２／１．４７（２ｓ、９Ｈ）、　２．２ ９（ｍ、　ＬＨ）、　２．４５（ｍ、　ＩＨ）、　３．５８iｍ。

ＩＨ）、　３．８０（ｍ、　ｉＨ）、　３．９９（ｍ、　ＩＨ）、　４．２４（ ｍ、　ＬＨ）元素性Ｆｒ：　（Ｃ＋ａＨｔｓＮ２０４’０．５ＨｚＯ）Ｃ，Ｈ， Ｎｏ（４Ｒ）　−１−ｔｅｒｔ−ブトキンカルボニル−４（Ｎ（ｐ−）ルエンス ルホニルイミ／アミノメチル）アミン’）　−Ｌ−ニア’ロリン実施例８で調製 したアミノ酸（１４ｇ、６　、０８　ｍｍｏｌ）を実施例１３記載の方法を用い て標記化合物に変換した。酢酸エチル／エーテル／ヘキサンヘキサンから結晶化 して所望の化合物６００ｍｇを得たく収率２３％）、ｍｐ＝１９０−１９１°Ｃ ６’ＨＮＭＲ（ｄａ−ＤＭＳＯ）：　１．３２／１．３７（２ｓ、９Ｈ）、２． ０５（ｍ、２Ｈ）、２．３５（ｓ、３Ｈ）、３．０４（ｍ、ＩＨＩ　３．３４（ ｂｓ、２Ｈ）、３．５３（ｍ、ｌ１ｌ）、４．１．１（ｂｓ、２Ｈ）、６．６９ （ｂｓ、２Ｈ）、７．２９（ｄ、Ｊ：８Ｈｚ、　２Ｈ）、　７．６３（ｄ、　Ｊ ＝８Ｈｚ、　２Ｈ）。

元素分析：　（Ｃ＝ｇＨｔｅＮ４ＳＯｓ）Ｃ，Ｈ，Ｎ、ΔＮ＝−１，１２％実施 例１○ （４Ｓ）　ｌ　ｔｅｒｔ−ブト牛７カルボニルー４−シア／−Ｌ−プロリンエチ ルエステル （４Ｒ）−ｔ−ｔ−ブト牛／カルボニル−４−メタンスルホニルオキシーＬ−７ ’ロリンエチルエステル［アブラハムら（Ｄ、Ｊ、＾ｂｒａｈａｍ）　Ｊ、Ｍｅ ｄ、Ｃｈｅｍ、１９８３．２６：５４９　５５４：　１０．０　ｇ　（クルード ）、３０　、７　ｍｍｏｌｊおよびＮａＣＮ（１５ｇ、３０６　ｍｍｏｌ）を乾 燥ジメチルスルホキシド２００ｍ１中で撹拌した。この混合物を５５°Ｃの油浴 で５５時間加温し、次いて２５°Ｃに冷却し、方法Ｂて仕上げた。粗製残渣をカ ラムクロマトグラフィー（１０−５０％エーテル／ヘキサン）で精製し、出発物 質３．０ｇを回収し、標記化合物３．０ｇを無色の油状物質として得た（回収し た出発物質に基つく収率＝５２％）。

’ＨＮＭＲ（ＣＤＣＩ、）：　１．３０（ｔ、３Ｈ）、１．４０／１．４４（２ ｓ、９Ｈ）、２．３０（ｍ、ＩＨ）、２．６７（ｍ。

ＩＨ）、　３．　’０９（ｍ、　ＩＨ）、　３．６７（ｍ、　ＩＨ）、　３．９ ３（ｍ、ＩＨ）、　４．２４（ｑ、　２Ｈ）、　４．３４（香A　ＬＨ）。

（４Ｓ）　１−ｔｅｒｔ−ブトキ／カルボニルー４−ンア／−Ｌ−プロリン １１例１０で調製したシアノエチルエステル（２９ｇ、１２，１ｍｍｏｌ）をメ タ／−ル１００ｍ１に溶解し、ＩＭ　ＮａＯＨ１５ｍ１をよく撹拌しながらＳ分 間で加えた。２２°Ｃでさらに１６時間撹拌した後、８０％酢酸／水１ｍｌで処 理し、さらに濃縮し、方法Ａで仕上げた。残渣を５°Ｃに放置すると結晶が析出 し、これを酢酸エチル／ヘキサンから再結晶して標記化合物２．２ｇ（７６％） を得た。ｍｐ＝１３８−１３９°Ｃ（分解）。

ＩＲ（ＫＢｒ）　：　２２５３　ｃｍ”（＝トリル）。

’Ｉ（ＮＭＲ：　１．４０／１．４６（２ｓ、　９Ｈ）、　２．４４（ｍ、　Ｉ Ｈ）、　２．７０（ｍ、　ＩＨ）、　３．１２（ｍ、　ＬＨj、　３．６ ５（ｍ、　ＩＨ）、　３．９２（ｍ、　ＬＨ）、　４．３６（ｍ、　ＬＨ）。

元素分析・　（Ｃ，、Ｈ，ｅＮ、０４）Ｃ，Ｈ，Ｎｏ（４Ｓ　）　−１−ｔｅｒ ｔ−ブトキンカルボニル−４−アミノメチル−１０％水／エタノールＬＯＯｍｌ 中で、実施例１１て調製したシアノ酸（１，６ｇ、６．６７ｍｍｏｌ）と１０％ Ｐｄ／Ｃ５００ｍｇとを、ステンレス鋼製加圧反応装置内で４５０ｐｓｉに加圧 した。混合物を２２°Ｃで１６時間撹拌した後、セライトパッドでろ過し残渣を エタノール／水（１・１）５０＋Ｉｌｌで洗浄した。ろ液を濃縮乾固し、白色固 形物を得た。この生成物を水／エタノールから結晶化し、１．６ｇ（収率９８％ ）を得た。ｍｐ＝１８７−１８９°Ｃ（分解）。

’ＨＮＭＲ（ＤｔＯ，ＨＤＯ＝４．８６）　：　１．４０／１．４４（２ｓ、　 ９Ｈ）、　１．６２（ｍ、　１Ｈ）、　２．５５（ｍ、　２煤i）。

３、１３（ｎ、　２Ｈ）、　３．７５（ｎ＋、　２Ｈ）、　４．１０（ｍ、　Ｉ Ｈ）。

元素分析：　（Ｃ，、）１．。Ｎ、Ｏ，・０．２５ＥｔＯＨ）理論値　Ｃ，５４ ，００：Ｈ，８，４７＋Ｎ、１０．９５実測値　Ｃ，５３，８５；Ｈ，７，８’ γ：Ｎ、ＩＯ，３５゜（４Ｓ　）　１−ｔｅｒｔ−ブトキ／カルボニル−４−（ Ｎ−（ｐ−トルエンスルホニルイミノアミノメチル）アミノメチル）−Ｌ−プロ リン［バーカー；）（Ｌ、　Ｂａｒｋｅｒ）、　Ｊ、　Ｏｒｇ、　Ｃｈｅｍ、　 １９８１．４６：　２４５５−２４６５および該文献記載の文献？照） 実施例１２て調製したアミノ酸（５００ｍｇ、２　、０５　ｍｎｏｌ）およびＳ 、Ｓ−ジメチル−Ｎ　ｐ　ｈルエンスルホニルイミノジチオ力ルポイミダー）　 （ＤＴＤＣ，６００ｍｇ、　２．１８ａ＋ｍｏ＋）を乾燥エタノール１２ｍ１に 懸濁し、１．００ＭＮａＯＨ２，００ｍ１を加えた。反応混合物を１２時間還流 し、２２°Ｃに冷却し、８０％酢酸／水０゜５ｍｌで処理した。次いで反応２ｆ ｊ１合物を濃縮し、方法Ａに従って処理した。これにより粗メチルイソチオウレ ア誘導体１．１ｇを得、アセトニトリル（３ｘｌＯ○ｍｌ）から濃縮することで 乾燥した。この物質をＥ　ｔ　３Ｎ　０．７ｍ１ｆｉ：含有するアセトニトリル ３５ｍ１に溶解し、水浴で冷却した後、無水アンモニアで飽和した。得られた懸 濁液に５°Ｃ（内部温ｌｆ）で０．５時間を要して１０ｍ１アセトニトリル中Ａ ｇＮ○ｉ（３９０ｍｇ、２　、２９　ｍｍｏｌ）溶液を滴下した。混合物を２２ ℃で１６時間撹拌した後、濾過し残渣をアセトニトリル／水（１・１）（５０ｍ ｌ）で洗浄した。ろ液を濃縮し方法人に従って仕上げた。

（ｉＪｃ渣をジクロロメタン／エーテル／ヘキサンから再結晶し所望のプロリン 誘導体２５０ｎｇ（収率２８％）を得た。２５０°Ｃ以下では融点を観察しなか った。

’）ＩＮＭＲ（ｄ、　ＤＭＳＯ）　：　１．３２／１．３８（２ｓ、　９Ｈ）、 　２．２４（ｍ、　２Ｈ）、　２．３４（ｓ、　３Ｋ）、　Q．９０（ｍ。

１）１）、　３．０９（ｍ、　２Ｈ）、　３．３８（ｍ、　２Ｈ）、　４．００ （ｍ、　ＬＨ）、　６．６（１（ｂｓ、　２Ｈ）、　６．９O（ｂｓ、　ＬＨ） 。

７、２６（ｄ、　Ｊ＝８Ｈｚ、　２Ｈ）、　７．６３（ｄ、　Ｊ＝８Ｈｚ、　２ ）１）。

実施例１４ （４Ｒ）　−１−ｔｅｒｔ−ブトキンカルボニル−４−シアノ−し−プロリンエ チルエステル 実施例２で調製したブロモエステル（７，５ｇ、２３　、３　ｍｍｏｌ）および テトラ−ｎ−ブチルアンモニウムシアニド（１０，５ｇ、３９　、１　ｍｍｏｌ ）をジメチルホルムアミド７０ｍ１に溶解した。得られた溶液を５５°Ｃの油浴 で１８時間加温し、次いで２２°Ｃに冷却し、方法Ｂて佳上げ、粗生成物５．５ ｇを得た。ＴＬＣ（シリカゲル、４０％エーテル／ヘキサン）および’ＨＮＭＲ は粗生成物が所望のシアノ化合物と１−（ｔ−ブトキシカルボニル）−３，４− デｔ＝　ドローＬ−プロリンエチルエステルとの３：１混合物であることを示し く４　Ｒ）　−１−Ｌｅｒｔ−フ゛トキンカルボニルー４−メタンスルホニルオ キシーＤ−ブｃＩ＋、１ジエチルエステルｃｉｓ　４−ヒドロ牛／−１−（ｔ− ブトキンカルボニル）−Ｄ−プロリンエチルエステル（組物１ｔ１６ｇ、６２ｍ ｍｏｌ）　をピリジン２００ｍ１に溶解し濃縮して水とｔ−ブタ／−ルを除去し た。残渣をビリ７ン１５０ｍ１に溶解し、水浴中で撹拌した。この溶液を３０分 間かけて塩化メタンスルホニル（８ｍＬ　１０３ｍｍｏｌ）で処理した後、２２ °Ｃで一夜撹拌した。反応溶液を水−アセトン浴で冷却し、３０分間かけて１０ ％水／ピリジン５３ｍ１を加えた。次いて、溶液を少量に濃縮し、方法Ｃで仕上 げ、暗色油状物質（１５ｇ、７２％粗製物′Ｍ）を得、これを直接次工程に用い た。

’）ＩＮＭＲ（ＣＤＣｌ２）：　１．２７（ｔ、　３１（）、　ｌ、４２／１． ４６（２ｓ、　９Ｈ）、　２．５１（ｍ、　２Ｈ）、　３．O１（ｓ。

３）１）、　３．７７（ｍ、　Ｈ４）、　４．２［ｉ（ｑ、　２１（）、　４． ４３（ｍ、　ＩＨ）、　５．２２（ｍ、　１）Ｉ）。

実施例１６ 一ブロリンエチルエステル ｃｉｓ−４−ヒドロキシ−１−（ｔ−ブトキシカルボニル）−Ｄ〜プロリンエチ ルエステル（組物質１１　ｇ、４２．５ｍｍｏｌ）　をジクロロメタン５０ｍ１ に溶解した。この溶液を撹拌し、四臭化炭素（３２ｇ、９６．７ｍｍｏｌ）で処 理した後、１０分間を要してトリフェニルホスフィン（２４ｇ、９１．５ｍｍｏ ｌ）を加えた。暗褐色に変化した混合物を２２°Ｃで６時間撹拌した。この時間 の経過後、白色沈澱（トリフェニルホスフィンオキシト、２４ｇ）が形成され、 これをろ別してジクロロメタン２００ｍｔで洗浄した。ろ液を濃縮し、フラノシ コクロマトグラフィ−（シリカゲル；５−４０％エタノール／ヘキサン）で精製 した。その結果、襟記化合物と一緒に溶出する約３０％の１　ｔｅｒｔ−ブトキ シカルボニル−５−ｔ−ブトキシ−Ｄ−プロリンエチルエステル（実施例２５参 照）を含有する所望のブロモ化合物９．８５ｇ　（収率７２％）を得た。

実施例１７ （４Ｓ）　１　ｔｅｒｔ−ブトキンカルボニル−４−アジド−Ｄ−プロリンエチ ルエステル 実施例Ｘ５の粗生成物（５，５ｇ、１６．９ｍｍｏｌ）とＮａＮ＊（５゜０　ｇ 、　７７　ｍ１ｏｌ）をジメチルホルムアミド２００ｍ１に懸濁した。この混合 物を５５°Ｃの油浴で１６時間加温した後、方法Ｂで仕上げた。

これにより標記化合物４．５ｇ　（９３％、粗生成物）を油状物質として得、こ れを次工程にそのまま用いた。

’ＨＮＭＲ（ＣＤＣＩｓ）　：　１．２８（ｔ、　３８）、　１．４１／１．４ ４（２ｓ、　９Ｈ）、　２．１７（ｍ、　１８）、　２．３Q（ｍ。

１）１）、　３．５２（＋ｎ、　ＬＨ）、　３．６９（ｍ、　ＩＨ）、　４．１ ８（＋ｏ、　３Ｈ）、　４．３５（ｍ、　ＬＭ）。

ＦＡＢＭＳ　；ＭＨ＋　、計算値（Ｃ，、Ｈ，、Ｎ、Ｏ，としｒ）：２８５．１ ５６３：実測値：　２８５．１５７３゜（４Ｓ　）　−１−４ｅｒｔ−ブトキシ カルボニル−４−アジド−Ｄ−プロリン 実施例１７で調製したアジドエチルエステル（４，４５ｇ、１５７　ａｎａｌ） を加水分解（実施例１１参照）シ、標記化合物２．０５ｇ（粗収率５１％）を無 色油状物質として得た。

’ＨＮＭＲ（ＣＤＣＩ、）　：　’−，４４／１．４３（２ｓ、　９）り、　２ ．２４（ｍ、　１）１）、　２．５６（ｍ、　ＩＨ）、　３D５３（ｍ。

ＬＨ）、　３．７１（ｍ、　ＬＨ）、　４．１７（ｓ、　ｌ）り、　４．４２（ ａ＋、　１）（）。

ＦＡＢＭＳ；ＭＨ↓　計算値（Ｃ、、）！　、、Ｎ、Ｏ，として）：２５７．１ ２５０、実測値：２５７．１２５４゜ （４Ｓ）　Ｌ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−４−アミノ−Ｄ−プロリン トランスアジド酸（実施例１８．２．０ｇ、７．　８１ｍｍｏｌ）を水素添加（ 実施例４参照）し、エタノールから結晶化して、エタノール１モルを含有する（ ’ＨＮＭＲによる）、標記化合物２．１ｇ（収率９７％）を得た。ｍｐ＝２２５ −２２６℃（分解）。

’ＨＮＭＲ（ＣＤＣ１３）：　１．４２／１．４７ぐ２ｓ、９Ｈ）、２．２８（ ｎ＋、１）Ｉ）、２．４５（０１，ＩＨ）、３．５８（Ｉｌ戟B ＩＨ）、　３．８０（ｍ、　１）１）、　３．９９（ｍ、　ＬＨ）、　４．２４ （＋ｍ、　ＩＨ）。

５５°Ｃ１１８時間の高真空処理後の元素分析、（Ｃ１゜Ｔ（ｌａＮ　！０４・ ０２５Ｈ，Ｏ）Ｃ，Ｈ，Ｎ。

（４Ｓ　）　−１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−４−（Ｎ−（ｐｈルエンス ルホニルイミノアミ／メチル）アミ／）　−Ｄ−７’ロリン実施例１９のアミノ 酸（１，５ｇ、５　、４３　＋＋＋ｌ１ｌｏｌ）を実施例１３の方法を用いて標 記化合物に変換した。酢酸エチル／エーテル／ヘキサンから結晶化し６００ｆｆ ｉｇ（収率２６％）を得た。ｍｐ＝１９０−１９１°Ｃ（分解）。

’ＨＮＭＲ（ｄ＊　ＤＭＳＯ）　：　１．３２／１．３７（２ｓ、　９Ｈ）、　 ２．０５（ｍ、　２Ｈ）、　２．３５（ｓ、　３Ｈ）、　３D０４（ｍ。

１ｔｌ）、　３．３４（ｂｓ、　２）１）、　３．５３（ｍ、　ＬＨ）、　４． １１（ｂｓ、　ＬＨ）、　６．６９（ｂｓ、　ＬＨ）、　７D２９（ｄ、　に ８Ｈｚ、　２Ｈ）、　７．６３（ｄ、　Ｊ＝８Ｈｚ、　２Ｈ）。

元素分析：（Ｃ＋ｓＨ！８Ｎ　４Ｓ　Ｏｓ　・０．５　Ｅ　ｔｏ　Ａｃ）　Ｃ， Ｈ，Ｎ、Ｓ　０（４Ｓ）　１−ｔｅｒｔ−ブトキンカルボニル−４−ンアノーＤ −プロリンエチルエステル 実施例１５の（４Ｒ）　−１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−４−メタンスル ホニルオキシ−Ｄ−プロリンエチルエステル（ｔｏ、ｏｇ粗初物質３０７開ｏ１ ）およびテトラ−ｎ−ブチルアンモニウム／アニド（１５ｇ、５７　ｆｆ１ｌｎ ｏｌ）を乾燥ジメチルホルムアミド１００ｍ１に溶解し、５５°Ｃの油浴上で２ ０時間撹拌した。これを実施例１０の方法で辻上げ、５．８ｇ（粗収率７２％） を得た。

’ＨＩＩＭＲ（ＣＤＣ１３）・１．２７（２ｔ、　３）［）、　１．４２／１． ４７（２ｓ、　９ｆ（）、　２．３６（ｍ、　ＩＨ）、　２D４９（ｍ。

１Ｂ）、　３．６６（ｎ、　２Ｈ）、　４．２４（Ｑ、　２Ｈ）、　４．４２（ ｍ、ＬＨ）。

実施例２２ 実施例２１の／アノエチルエステル（５，０ｇ、１８．６ｍｍｏｌ）を加水分解 （実施例１１参照）し所望の物質４．４ｇｇ（定量的な粗板量）を油状物質とし て得た。

ＩＲ（ＫＢｒ）　：　２２５３ｃｍ−’（ニトリル）。

’）ＩＮＭＲ（ＣＤＣｈ）　：　１．４３／　１．４７（２ｓ、　９Ｈ）、　２ ．５２（ｍ、　２Ｈ）、　３．７２（ｍ、　３）１）、　４D２３（ｍ。

ｌＨ０ 実施例２３ 実施例２２のシアノ酸（４，０ｇ粗生成物、１６　、６　ｍｍｏｌ）を水素添加 （実施例１２参照）し標記化合物の粗生成物を得た。この物質を水／エタノール から結晶化し、１，６ｇを得た（収率４０％）。ｍｐ＝２３１−２３４℃（分解 ）。

’）ＩＮＭＲ（ＤｔＯ，）ＩＤＯ；４．８４）　：　１．４０／１．４５（２ｓ 、　９Ｈ）、　２．１１（＋、　ＬＨ）、２．６１（ｍ、　kＨ）。

３、１２（ｏ＋、　２）１）、　３．７３（ｍ、　ＩＨ）、４．１７（ｄｄ、　 Ｊ＝９．０／３．９．１）Ｉ）。

元素分析　（Ｃ，ａＨ２ＯＮｔＯ，−０，５ＨｔＯとＬｒ）理論値：Ｃ，５３， １１；Ｈ・　８・５１：Ｎ・　１１・２５実測値：Ｃ，５２，８５：Ｈ，７，８ ７；Ｎ、１０．１０゜実施例２４ ルエンスルホニルイミ／アミノメチル）アミ／メチル）−Ｄ−プロ実施例２３の アミノ酸（１，４０ｇ、５．７４開０１）を実施例１３記載の方法を用いて標記 化合物に変換した。残渣を酢酸エチル／エーテル／ヘキサンから再結晶し標記化 合物１．５ｇを得た（収率５９％）。ｍｐ＝２３２−２３４℃。

’ＨＮＭＲ（ｄ、−ＤＭＳＯ）：　１．３３／１．３８（２ｓ、９）１）、１． ７３（ｍ、２Ｈ）、２．３４（ｓ、３１（）、２．９３（ｍB ｌＨ）、　３．０７（ｍ、　２）１）、　３．３０（ｍ、　２Ｈ）、　３．４１ （ｍ、　１）Ｉ）、　４．０６（ｍ、　ＩＨ）、　６．６０iｂｓ、　２Ｈ）。

６、９０（ｂｓ、　ＬＨ）、　７．２６（ｄ、　Ｊ＝８ｆ（ｚ、　２Ｈ）、　７ ．６３（ｄ、　Ｊ＝８Ｈｚ、　２８）。

実施例２５ （４Ｒ）　１−ｔｅｒｔ−ブトキ／カルボニル−４−シアノ−Ｄ−プロリンエチ ルエステル 乾燥ジメチルホルムアミド８０ｍ１中の実施例１６のブロモエステル（９，０ｇ 粗生成物）　とテトラ−ｎ−プチルアンモニウムシニド（１２，６ｇ、４６．９ 開ｏ１）とを５５°Ｃの油浴上て２０時間撹拌し、実施例１０と同様に仕上げた 。カラムクロマトグラフィー精製により標記化合物１．７ｇ（ブロモエステル消 費量に基づく収率３０％）を得た。

’ＨＮＭＲ（ＣＤＣ１，）　：　１．２９（ｔ、　３８）、　１．４１／１．４ ４（２ｇ、　９１（）、　２．２９（ｍ、　Ｉｆ（）、　２D６８（＊。

１）１）、　３．１０（ｍ、　１ｔ（）、　３．６８（ｉ、　ＬＢ）、　３．９ ３（ｍ、　ＩＢ）、　４．２４（ｑ、　２８）、　４．３４i瀉、ＩＨ）。

Ｒｆが最高の生成物（１４ｇ、収率２７％）を塩基で加水分解し、クロマトグラ フィーおよびスペクトル特性に関して１　（ｔｅｒｔ−ブトキシ力ルポニル）− ３，４−デヒドロ−し−プロリン樟準物質と同一である生成物を得た。

（４Ｓ）　１−ｔｅｒｔ−−ブトキシカルボニル−４−ブロモ−Ｄ−ブと一緒に 溶出した物質は１−ｔｅｒｔ−ブトキンカルボニル−５−を−ブトキシ−Ｄ−プ ロリンエチルエステル（ｍｐ＝７７−７８°Ｃ，ヘキサン）と同定された。

’ＨＮＭＲ（ＣＤＣ１，）　：　１．３１（ｔ、　３Ｈ）、　１．４３／１．４ ５／１．４７（３ｓ、　１８［（）、　２．３４（ｍ、　ｌm（）、　２゜ ４５（＋ｎ、　ＩＦＩ）、　３．５８（ｍ、　１）１）、　３．７８（ｍ、　１ ［（）、　４．２０（ｍ、　ＬＨ）、　４．４０（ｍ、　２g）、　５．０７（ ｍ。

１１（）。

（４Ｒ）　１−ｔｅｒｔ−ブトキンカルボニル−４−シアノ−Ｄ−プロリン 実施例２５のシアノエ・チルエステル（１，２ｇ、４．４８ｍｍｏｌ）を加水分 解（実施例１１参照）し、所望の化合物７５０ｍｇ（収率７０％）を得た。この 物質を５°Ｃで放置すると結晶化し、それを酢酸エチル／ヘキサンから再結晶し た。ｍ＋）＝　１３４−１３５℃（分解）。

ＩＲ（ＫＢｒ）：　２２５３ｃｍ−’　にトリル）。

’ＨＮＭＲ（ＣＤＣＩ、）　：　１．４０／１．４６（２ｓ、　９Ｈ）、　２． ４４（ｍ、　１ｔ（）、　２．７０（ｍ、　ＩＨ）、　３．P２（ｍ。

１８）、　３．６５（＋＊、　ＩＨ）、　３．９２（ｍ、　１１（）、　４．３ ６（ｍ、　ＩＨ）。

元素分析：Ｃ，、Ｈ，、Ｎ、０．、Ｃ，Ｈ，Ｎ。

実施例２７ （４Ｒ）　ｌ　ｔｅｒｔ−ブトキンカルボニル−４−アミノメチル−Ｄ−プロリ ン 実施例２６のンアノ酸（６５０ｍｇ、２．７＋＋＋＋ｎｏｌ）を水１ｇ添加〈実 施例１２参照）した。生成物を水／エタノールから結晶化し６３０ｍｇ（収率９ ５％）を得た。ｍｐ＝１８７−１８９°Ｃ（分解）。

’ＨＮＭＲ（Ｄ、Ｏ，）１００１．　ｆｓ６）　：　１．４０／１．４４（２ｓ 、　９Ｈ）、　Ｌ　６２（ｍ、　ＬＨ）、　２．５５（＋ｎA　２）１）。

３、１３（ｍ、　２ｔ（）、　３．７５（ｍ、　２Ｈ）、　４．１０（ｍ、　１ ）Ｉ）元素分析：（Ｃ，、Ｈ，。Ｎ、○４） （４Ｒ）　１−ｔｅｒｔ−ブトキンカルボニル−４−（Ｎ−（ｐ−トルエンスル ホニルイミノアミ／メチル）アミノメチル）　−Ｄ−７’ロリン 実施例２７のアミノ酸（６００ｍｇ、２　、４６　ｍｍｏｌ）を標記化合物に変 換した（実施例１３参照）。この物質をジクロロメタン／エーテル／ヘキサンか ら再結晶して純枠な標記プロリン誘導体５５０ｍｇを得た（収率５１％）。融点 は、２５０’Ｃ以下では観察されな力１つだ。

’ＨＮＭＲ（ｄｏ−ＤＭＳＯ）　：　１．３２／１゜３８（２ｓ、　９Ｈ）、　 ２．２５（ｎ＋、　２Ｈ）、　２．３４（ｓ、　３Ｈ）、　Q．９０（ｍ。

ＬＨ）、　３．０９（ｍ、　２）１）、　３．３７（ｍ、２Ｈ）、　４．００（ ｍ、　ＩＨ）、　６．６０（ｂｓ、　２Ｈ）、　６．９０（ｂ刀A　ＬＨ１ ７、２５（ｄ、　Ｊ＝８Ｈｚ、　２Ｈ）、　７．６２（ｄ、　Ｊ＝８Ｈｚ、　２ Ｈ）。

寒皇烈ｌ旦 、（４Ｓ）−４−ヒドロキシ−Ｌ−プロリンベンシルエステルートルエンスル十 ン酸塩 ベンセン（６０ｍｌ）およびｐ−トルエンスル十／酸（１．４．７９ｇ，７７、 ５闘ｏ１）を含有するベンンルアルコール６０ｍｌの混合物中の（４Ｓ）−４− ヒドロキシ−し−プロリン（１０ｇ、７６、３ｍｍ。

ｌ）懸濁液を還流した。ディーンスターク装置を用い、１６時間を要して水を除 去し、赤色溶液を約２２°Ｃに放冷した。次いでこの溶液を乾燥エーテル１５０ ｍｌで希釈し、５°Ｃで２時間放置した。混合物をろ過し、残渣をエーテルＬ５ ０ｎｌで洗浄した。残渣をデシケータ−内で真空乾燥して標記化合物２８．２ｇ 　（９４％）を得た。ｍｐ＝１１９−１２０°Ｃ０ ’ＨＮＭＲ（Ｄ，Ｏ．　ＨＣＯ−３．　８６）　：　２．　３７（ｓ．　３Ｈ） 、　２．　４６（ｍ．　２Ｈ）、　３．　３９（ｍ，　２Ｈj、　４．　６０（ ｍ。

１１（）、　４．　６６（ｄｄ．　Ｉｔ（）、　５．　２９（ｄ，　に１２１（ ｚ，　１Ｂ）、　５．　３３（ｄ，　Ｊ＝１２Ｈｚ．　１８j、　７．　３６（ ｄ．　Ｊ ＝８Ｈｚ．　２８）、　７．　４４（ｓ．　５Ｈ）、　７．　６９（ｄ．　Ｊ＝ ８Ｈｚ．　２Ｈ）。

（４Ｓ）　１−ｔｅｒｔ−ブトキンカルボニル−４−ヒドロキシ−し−フロリン ベンジルエステル Ｎ、Ｎ’　−ジイソプロピルエチルアミン（６ｍｌ、　３４　ｍｍｏｌ）を含有 するジオキサン２５ｍ１中の実施例２９の１ユベンジルエステル（９，７３ｇ、 ２４，８門０１）にノーｔ−プチルジカーボナート（８゜Ｏｇ、３６．７ｍｍｏ ｌ）を一度で加えた。この溶液を０５時間撹拌した後、方法已に従って仕上げた 。残渣を５°Ｃで放置するとゆっくり結晶が析出し、これを酢酸エチル／ヘキサ ンから再結晶し標記化合物６９ｇ（収率７７％）を得た。ｍｐ＝７２−７３℃。

’ＨＮＭＲ（ＣＤＣ１３）　：　１．３４／１．４６（２ｓ、　９ｔ（）、　２ ．０８（ｍ、　ＬＨ）、２．３１（ｍ、　ＩＨ）、３．２１i２ｄ。

１ｔ（）、　３．６１（ｍ、　２Ｈ）、　４．３５（ｍ、　２）１）、　５．２ ２（ｍ、　２Ｈ）、　７．３５（ｓ、　５）１）。

実施例３１ （４Ｓ）　１−Ｌｅｒｔ−ブトキ７カルポニルー４−メタンスルホニル、オキ７ −Ｌ−プロリンベンノルエステル実施例３０のヒドロキシベンジルエステル（６ ，３ｇ、１９．７Ｈｍｏｌ）を実施例１５と同様に処理して標記化合物８．３ｇ （粗状率１０６％）を得た。この粗油状物質を直接次工程に用いた。

’ＨＮＭＲ（ＣＤＣ１ｚ）　：　１．３６／１．４６（２ｓ、　９８）、　２． ５１（ｍ、　２１（）、　２．７７／２．８２（２ｓ、　３g）、　３ ７７（ｇ＋、　２）１）、　４．３３／４．５７（２ｄｄ、　Ｊ＝８．７／３． 　Ｏ）Ｉｚ、　１Ｂ）、　５゜１６（ｍ、　３）１）、　７D３５（ｓ、　５Ｈ ）。

実施例３２ （４Ｒ）−４−ヒドロキシ−〇−プロリンベンジルエステル、ｐ−トルエンスル ホン酸塩 （４Ｒ）−４−ヒドロキシ−〇−プロリンを実施例２９の方法に付し、標記化合 物を得た。ｍｐ−１２０−１２１℃。

’ＨＮＭＲ（Ｄ、０．　ＨＤＯ＝４．８６）　：　２．３８（ｓ、　３８）、　 ２．４５（ｍ、　２Ｈ）、　３．４２（ｍ、　２Ｈ）、　４D６０（ｍ。

１８）、　４．８６（ｄｄ、　ＬＨ）、　５．２９（ｄ、　Ｊ＝１２Ｈｚ、　Ｉ Ｈ）、　５．３４（ｄ、　に１２Ｈｚ、　ＩＨ）、　７．３{（ｄ、　Ｊ ・８Ｈｚ、　２Ｋ）、　７．４２（ｓ、　５Ｈ）、　７．６６（ｄ、　Ｊ４Ｈｚ 、　２Ｈ）。

実施例３３ （４Ｒ）　１　ｔｅｒｔ−ブトキンカル−ニル−４−ヒドロキ’ｙ−Ｄ−プロリ ンベンジルエステル 実施例３２のベンジルエステル（６，４５ｇ、２４　、８　ｍｍｏｌ）を実施例 ３０の方法に付し、標記化合物７．５ｇ（収率９４％）を得た。

ｍｐ＝７１−７２°Ｃ（酢酸エチル／へ牛サン）。

’ｌ（ＮＭＲ（ＣＤＣＩ、）　：　１．３４／１．４６（２ｓ、　９Ｆ＋）、　 ２．０８（ｍ、　ＩＨ）、　２．３１（ｍ、　１）１）、　R．２１（２ｄ。

ＬＨ）、　３．６１（ｍ、　２Ｈ）、　４．３２（ｍ、　２Ｍ）、　５．２２（ ｍ、　２Ｈ）、　７．３５（ｓ、　５Ｈ）。

実施例３４ 実施例３３の生成物（５，３４ｇ、Ｌ　６．　７ｍｍｏｌ）および四臭化炭素（ １６，６ｇ、　５０ｍｍｏｌ）をジクロロメタンｌｏｏｍｌに（容解した後、ト リフェニルホスフィン（１３，１ｇ＋　５０ｍｍｏｌ）を１０分間で加えた。こ の溶液を１８時間撹拌した後、実施例１の方法で仕上げて精製し、標記化合物４ ．７３ｇ（収率７４％）を得た。この物質は放置すると結晶化した。ｍｐ＝８７ −８８°Ｃ（エーテル／ヘキサン）。

’ＨＮＭＲ（ＣＤＣＩ３）　：　１．３５／１．４６（２ｓ、　９ｔ（）、　２ ．４１（ｍ、　２Ｈ）、　２．５８（ｍ、　ＩＨ）、　３．X０（ｍ。

２Ｈ）、　４．４８（ｍ、４Ｈ）、　５．１９（ｍ、　２Ｈ）、　７．３４（ｓ 、　５Ｈ）。

（４Ｒ）　１−ｔｅｒｔ−ブト牛ソカルボニルー４−ンアノーＬ−プロリンベン ノルエステル 実施例３１のメタンスルホン酸エステル（８，０ｇ、２０ｍｍｏｌ）を実施例２ １と同様に反応させて標記化合物３．３ｇ（収率５２％）を得た。この物質を５ °Ｃで放置するとゆっくりと結晶化した。ｍｐ＝９７−９９°Ｃ（エーテル／ヘ キサン）。

’ＨＮＭＲ（ＣＤＣＩｓ）　：　１．３３／１．４５（２ｓ、　９）１）、　２ ．３３（ｍ、　１ｔ（）、　２．５０（ｍ、　１８）、　３D２１（ｍ。

ＩＨ）、　３．６２（ｍ、　ＩＨ）、　３．８９（ｍ、　ＩＨ）、　４．４１／ ４．５２（２ｄｄ、　Ｊ　＝８．７／３．　ＯＩ＋ｚ、　Ｌg）、　５．１６ （ｍ、　２）１）、　７．３４（３，５Ｈ）。

（４Ｒ）　１−ｊｅｒｔ−ブトキンカルボニル−４−アミ／メチル−し−プロリ ン 実施例３５の生成物（３，０ｇ、９．１ｍｍｏｌ）を水素添加（実施例１２参解 ）シた。生成物を水／エタノールから結晶化し１．５ｇ（収率６７％）を得た。

’ＨＮ＼ＩＲ（Ｄ、Ｏ，ＨＣＯ−３，８６）　：　１．４１／１．４６（２ｓ、 　９Ｈ）、　２．１１（ｍ、　ＬＨ）、　２．６０（ｍ、　hＨ）。

３、１２（ｍ、　２Ｈ）、　３．７３（ｍ、　［Ｈ）、　４．１７（ｄｄ、　Ｊ ・９．０／’３．９．　Ｌ）ｌ）。

（４Ｒ）　−１−ｔｅｒｔ−ブトキンカルボニル−４−（Ｎ−（ｐ−トルエンス ルホニルイミノアミノメチル）アミノメチル）−Ｌ−プロリン 実施例３６のアミノ酸ぐ１．４ｇ、５　、７　ｍｍｏｌ）を実施例１３の方法に 従い標記化合物に変換した（１．３ｇ、収率５１％）。

’ＨＮＭＲ（ｄｏ　ＤＭＳＯ）　：　１．３４／１．４０（２ｓ、　９Ｈ）、　 １．７８（ｍ、　２Ｈ）、　２．３６（ｓ、　３Ｈ）、　２D９４（ｍ。

ＬＨ）、　３．０９（ｍ、　２Ｈ）、　３．３３（ｍ、　２Ｈ）、　３．４１（ ｍ、　１［（）、　４．０９（ｍ、　ＬＨ）、　６．８０（ｂ刀A　２Ｈ）。

６、９０（ｂｓ、　ＩＨ）、　７．２６（ｄ、　Ｊ＝８Ｈｚ、　２Ｈ）、　７． ６３（ｄ、　Ｊ＝８Ｈｚ、　２Ｈ）。

（４Ｒ）　１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−４−アジド−Ｄ−プロリンベン ジルエステル 実施例３４のベンジルエステル（４，６７ｇ、１２　、１　ｍｍｏｌ）およびＮ ａＮ、（４，７ｇ、７２．３ｍｍｏｌ）をジメチルホルムアミド１７５ｍ１に懸 濁し、実施例１７と同様に反応させた。所望の生成物３７３ｇ（粗状率８９％） を無色油状物質として得、これを次工程にそのまま用いた。

’ＨＮＭＲ（ＣＤＣＩｓ）　：　１．３３／１．４５（２ｓ、　９Ｈ）、　２． １８（ｍ、　ＩＨ）、　２．４８（ｍ、　ＩＨ）、　３．７P（ｍ。

ＬＨ）、　４．１４（ｍ、　ＩＨ）、　４．３５／４．４９（２ｄｄ、　Ｊ：８ ．７／３．０Ｈｚ、　ＬＨ）、　５．１６（ｍ、　２Ｈ）、@７．３４ （４Ｒ）　−１−ｔｅｒｔ−ブトキンカルボニル−４−アミ／−Ｄ−プロリン 実施例３６のアジ化ベンジルエステル（２，６５ｇ、７．６５ｍｍｏｌ）を水素 添加（実施例４参照）し所望のアミン１．４７ｇ（収率８３％）を得た。水／エ タノールから結晶化した。ｍｐ＝２６３−２６４°Ｃ（分解、２２２°Ｃから暗 色化開始）。

’ＨＮＭＲ（ＤｚＯ，ＨＤＯ”４．８６）　：　１．４２／１．４６（ｍ、９Ｈ ）、２．１１（ｍ、１８）、２．６８（ｍ、ＩＨン、３７０（ｍ、　２Ｈ）、　 ４．００（ｍ、　２Ｈ）、　４．１８（ｄｄ、　Ｊ＝９．　（１／３．９Ｈｚ、 　１１（）。

元素分析、（Ｃ１ｏＨ１゜Ｎ、ｏ、・Ｈ２Ｏ）。

（４Ｒ）　１　ｔｅｒｔ−ブトキンカルボニル−４−（Ｎ−（ｐ−）ルエンスル ホニルイミ／アミノメチル）アミノ）−Ｄ−プロリン実施例３９の生成物（１， ４０ｇ、５７４開。ｌ）を実施例１３の方法に従い標記化合物に変換した。残渣 を酢酸エチル／エーテル／ヘキサンから再結晶して所望の生成物１８７ｇを得た く収率５９％）。

ｍｐ＝１３２−１３３°Ｃ０ ’ＨＮＭＲ（ｄ、　ＤＭＳＯ）　：　１．３３／１．３８（２ｓ、　９Ｈ）、　 １．７４（ｍ、　ＩＨ）、　２．３４（ｓ、　３Ｈ）、　２D９７（ｍ、 ＩＨ）、　３．３３（ｍ、　ＩＨ）、　３．６３（ｍ、　ＬＨ）、４．０８（ｍ 、　２Ｈ）、　６．６５（ｂｓ、　２Ｈ）、　６．９３（ｂ刀A　ＩＨ）。

７、２７（ｄ、　Ｊ＝８Ｈｚ、　２）１）、　７．６４（ｄ、　に８Ｈｚ、　２ Ｈ）。

実施例５．９．１３．２０．２４．２８．３７および４ｏで調製じた化合物の環 外アミンはペプチド合成にそのまま用いられる。実施例１２．２３および２７で 調製した環状アミン群は例えば４−クロロ−ベンジルオキシカルボニル基［ボダ ンツキーら（Ｂｏｄａｎｓｚｋｙ。

Ｍ）−Ｐｌｉｎｃｉｐｌｅｓ　ｏｆ　Ｐｅｐｔｉｄｅｓ　５ｙｎｔｈｅｓｉｓ″ Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ、　Ｎｅｗ　Ｙｏｒｋ、　１９８４］で保護す ることができる。次いで、保護されたアミノ酸類似体を、溶液中の式２の合成ペ プチドまたは２％架橋ポリスチレン樹脂（Ｍｅｒｒｉｆｉｅｌｄ　ｒｅｓｉｎ） およびこの方法に適した適当な側鎖保護を有するα−Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニ ル保護アミノ酸［グリーンスタイン（Ｇｒｅｅｎｓｔｅｉｎ、　Ｊ）およびウイ ンツ（Ｗｉｎｉｔｚ、　Ｍ）前掲］を用い（上記参照）で固体支持体上の式２の 合成ペプチドに組み込む。ペプチドの最終的な脱保護はフッ化水素を用いて行い 、ペプチド精製はＨＰＬＣを用いて行うことができる。式２の脱保護ペプチドに おいて、Ｘ、は常に水素またはアミノメチル、ｘｌはＣ−末端ペプチド鎖、Ｃ− 末端アミノ酸、アミドまたはヒドロキシル基；Ｘ２はＮ−末端ペプチド鎖、Ｎ− 末端アミノ酸または水素を表す。

別の適合する保護基および／または適合する固体支持体を用いる池の液相または 固相ペプチド合成法（例えばＦＭＯＣ化学、上記参照）は当業者に既知であり、 これらによっても化合物１（保護されていない形）を含有させることができるで あろう。これは実施例！−４０に記載した化学の適当な改良または拡張によって 達成し得る。

実施例１−４１記載の化合物は実施例４１記載の固相合成法で製造された。生成 物は、実施例４１記載の同時保護基開裂法を用いて樹脂から切り離された。

グリシル−［（４Ｓ）−４−［（イミノアミノメチル）アミノ］−Ｄ−プロリル ］−クリンルーＬ−アスパルチル−し〜バリン襟題の化合物は２％架橋ポリスチ レン樹脂（Ｍｅｒｒｉｒｉｅｌｄ　ｒｅｓｉｎ）を用いる標準的な固相ペプチド 合成法により製造された。グリシル−し−アスパルチル−Ｌ−バリンはアルパラ ギン酸のβ−カルボン酸をシクロヘキシルエステルとして保護し、樹脂上で製造 された。

次いで、実施例２０の酸をジメチルホルムアミド５ｍｌに溶かし、溶液をＮ−メ チルモルホリン（０，１５ｍｌ、１　、２５　ｍｍｏｌ）およびＢＯＰ　（０， ２２１ｇ、０．５ｍｍｏｌ）およびヒドロキシヘンズトリアゾール（０、５ｍｍ ｏｌ）で処理することにより、樹脂上のトリペプチドフラグメントにカンブリン グさせた。次いで樹脂を５０％トリフルオロ酢酸／ジクロロメタンで処理してｔ −ブトキシカルボニル基を除去した。次いで得られた樹脂を実施例２０の生成物 の代わりにＮ−ｔ−ブトキシカルボニル−グリシンを用いて上記のようにカップ リングさせた。

以下の方法を用いて、ペプチドからｐ−トルエンスルホニル、ｔ−ブトキシカル ボニル、およびシクロヘキシル保護基を除去すると同時にペプチドを樹脂から除 去した。上記の中間体をアニソール１ｍｌ、メチルエチルスルフィド１ｍｌおよ びチオフレソール約１ｇを含有するフ、化水素液２５ｍ１で０°Ｃにおいて１時 間処理した。この時間の経過護に反応混合物を減圧下で４５時間保持し、溶媒と 揮発性物質を除去した。残渣をエーテルと水で処理した。水層をさらにエーテル で洗浄した後、凍結乾燥して無晶形固形物０．２０　ｇを得た。

粗生成物を１０ミクロン、ポアサイズ３００オングストロームのＣ−１８バンキ ングによる逆相高速液体クロマトグラフィー（ＲＰ−ＨＰＬＣ）で精製した。ア セトニトリル：０．１％トリフルオロ酢酸の線状グラディエンド（０％−４０％ アセトニトリル、８０分間）で溶離した。適当な画分を凍結乾燥し純粋な標記生 成物をトリフルオロ酢酸塩として得た。

ＦＡＢマススペクトル、計算値、５００　；観察値、５０１（Ｍ＋１）。

ＲＰ−ＨＰＬＣの保持時間・１１．１分。

実施例４２ 実施例４１記載の方法と実施例５．９．１３．２４．２８．３７および４０の保 護されたアミノ酸誘導体を用い、式３の選択されたペプチドを合成し、表１に示 す。

表１ Ｒｔが水素、Ｒ１がイソプロピル、Ｒ４が０ＨＳＸ、がアミ／イミノメチルであ る式３のペプチド ｎ　Ｒ１が　争４２　Ｍｙｙｃ３　ｙ　Ｗ１４　日Ｔ（多り）５０　時　Ｓ　Ｓ 　４９９．１　５０１．０　１６０　、ＨＳ　Ｓ　４４２．１　４４４．０　１ ００　下し千ｒＩ／　Ｓ　Ｓ　４Ｂ４．１　４８５．０　１３１　Ｇｌｙ　Ｓ　 Ｓ　５１５．０　５１５．０　１３１ＨＳ　Ｓ　４Ｓ７．１４５８．０　１３０ 　１Ｇｌｙ　Ｓ　Ｒ５００，２５０１，０１２１Ｇ瞭　日　Ｓ　５１４．２　５ ｊ５．０　１２１　ＨＲ３４５７，２４５８，１９ １３１ｙ　ＲＲ５１４，２５１５，０１２１ＧｌｙＳ　Ｒ５１４，２５１５，０ １１０Ｇｌｙ　ＲＲ５００，２５００，＋３　１１注 １　ピロリジン環の２位炭素の立体化学２、ピロリノン環の４位炭素の立体化学 ３、ペプチド生成物の分子量計算値 ４、質量分析によってめたペプチド生成物の分子量５、ペプチド生成物のＨＰ　 Ｌ　Ｃ［１／ｙｄａｃ　１．ｏｕ　Ｃ−１８逆相カラム（４，６ｍｍＫ　２５０ ｍｍ）、１００％０１％トリフルオロ酢酸／水で開始し、０４％トリフルオロ酢 酸／アセトニトリルに増加するグラディエンド（増加率０．５％／分・全流速２ ．Ｃ）ｍ＋７分）で溶出］における保持時間。

実施例４３ 式１７で示される環状ペプチドの合成 式１７の化合物は２％架橋ポリスチレン樹脂（Ｍｅｒｒｉｒｉｅｌｄ　ｒｅｓｉ ｎ）を用いる標準的な固相ペプチド合成法により製造された。グリ／ルーＬ−ア スパルチルーＬ−システィンはアルバラギン酸のβ−カルホン酸をンクロヘキ／ ルエステルとして保護し、ンスティンのメルカプト官能基をｐ−メチルベンジル 基で保護し、樹脂上で製造された。次いで、実施例２０の酸をジメチルホルムア ミド５ｍｌに溶かし、溶液をＮ−メチルモルホリン（０，１５ｍ１．１　、２５ 　ｍｍｏｌ）およびＢＯＰ　（０，２２］、　ｇ＋　ｏ、　５ｍｍｏｌ）および ヒドロキシヘンズトＩＪ　７ゾール（０、５ｍｍｏｌ）で処理することにより、 樹脂上のトリペプチドフラグメントにカップリングさせた。次いで樹脂を５０％ トリフルオロ酢酸／ジクロロメタンで処理してｔ−ブトキンカルボニル基を除去 した。次いで得られた樹脂を洗浄後、実施例２０の生成物の代わりにＮ−ｔ−ブ トキシカルボニルグリシンを用い、上記のようにＮ−ｔ−ブトキシ力ルポニルグ リンル基をピロリジン環の窒素原子に結合させてカップリングさせた。５０％ト リフルオロ酢酸／ジクロロメタンを用いて処理することによりＮ−ｔ−ブトキシ カルボニル基を除去した。得られた樹脂を洗浄後、上記のごとくブロモ酢酸を用 い、ブロモアセチル基をグリシン残基の窒素原子に結合させることでカップリン グさせた。

実施例４１に記載のごとく、７ノ化水素酸を用いて保護基を除去し、粗ペプチド 生成物を単離した。粗生成物を脱イオン水に溶かしく１ｍｇ／ｍｌ）、水酸化ア ンモニウムを用いて溶液のｐＨを８．０−８゜５に調節した。周囲温度で４時間 撹拌した後、溶液をトリフルオロ酢酸でｐＨ３，０−３，５に調節し、凍結乾燥 した。得られた粗生成物を実施例４１に記載したようにＨＰＬＣで精製した。所 望の生成物は１１分後に溶出した。

ＦＡＢマススペクトル：計算値、５４４．２；観察値、５４４．７゜実施例４４ 実施例４３記載の方法と実施例５．９．１３．２４．２８．３７および４０の保 護されたアミノ酸誘導体を用い、式４のペプチドを合成した。それらを表２に示 す。

表２ Ｒ７、Ｒ，、Ｒ，およびＲ１゜が水素、Ｑが硫黄、Ｒ４かがＯＨ，Ｘ、がアミ／ イミノメチルである式４の環状ペプチドｎ　ＡＡ　＠２１　°４２　ＭＷＣ３Ｍ ＷＩ’　ＲＴ（／７）　）５１　Ｇｌｙ　Ｓ　３　５５Ｂ、２　５５９．０　ａ 、ｓＩ　Ｇｌｙ　日　８　５５８．２　５５９．０　１３１Ｇｌｙ　Ｓ　Ｒ５５ ８，２５５９，０８，５０Ｇｌｙ　Ｓ　５５４４．２　５４５．２　９．００　 Ｇｌｙ　Ｓ　Ｒ５４４，２５４５，２ＨＯＧｌｙ　ＲＲ５４４，２５４４，７１ ０１Ｇｌｙ　ＲＲ５５［３，２５５ａ、７　１２１　Ｔｙｒ　Ｓ　Ｒ６６４，４ ６６５，１１９注。

１　ピロリジン環の２位炭素の立体化学２　ピロリジン環の４位炭素の立体化学 ３、ペプチド生成物の分子量計算値 ４、買置分析によってめたペプチド生成物の分子量５、ペプチド生成物のＨＰ　 Ｌ　Ｃ［Ｙｙｄａｃ　１０ｕ　Ｃ−１８逆相カラム（４，６ｎ＋ｎ＋ｘ　２５０ ａｕｏ）、１００％０．１％トリフルオロ酢酸／水で開始し、０．１％トリフル オロ酢酸／アセトニトリルに増加するグラディエンド（増加率０．５％／分：全 流速２．０ｍｌ／分）で溶出］での保持時間。

生物活性 全般的な類似体１クラスのどのメンバーが、特定の適用に最も有利であるかを決 定するためには、このクラスの幾つかのメンバーを含有する、潜在的に生物活性 なペプチドを合成する必要があるだろう。上記のペプチド合成のどの方法をも用 いることができるが、自動合成装置を用いるＢＯＣ化学が好ましい方法であろう 。当業者に予測可能な方法で、ペプチド合成法を選ぶことにより、用いるＰ。

およびＰ２基が決定される。

実施例４５ Ｇ　Ｐ　ＩＩｂ［ＩＩａへのフィブリ／ケン結合の阻害マイクロタイタープレー トをフィブリ／ケン（１０μｓ／ｍｌ）でコートし、０，５％ＢＳＡ含宵ＴＡＣ ＴＳバ、ファーでプロ、りする。（ＴＡＣＴＳバ／ファーは２０＋ｎＭＴｒｉｓ −ＨＣＩ（ｐＨ７，５）、０．０２％アジ化ナトリウム、２ｍＭ塩化カルシウム 、０．０５％Ｔｗｅｅｎ２０．１５０ｍＭ塩化ナトリウムを含有する）。プレー トをＯ０Ｏ］％Ｔｗｅｅｎ２０を含有するりん酸緩衝化食塩水で洗浄し、阻害活 性を測定するペプチド試料の希釈液を加え、ＴＡＣＴＳ、０．５％ＢＳＡ中の可 溶化１１ｂｌｌｌａ受容体（４０ａ　ｇ／ｍｌ）を加える。インキュベーション 後、プレートを洗浄しネズミモノクローナル抗血小板抗体ＡＰｆｆ（１μｇ／ｍ ｌ）を加えた。再度洗浄した後、西洋ワサビペルオキ／ダーゼ結合ヤギおよび抗 マウスＩｇＧを加える。最終洗浄を行い、展開試薬溶液（１０ｍｇｏ−フエニレ ンジアミンニ塩酸塩、０．０２１２％過酸化水素、０．２２ｍＭクエン酸塩、５ ０ｍＭりん酸塩、ｐＨ５，０）を加えた後発色するまでインキュベートする。ｌ Ｎ硫酸で反応を停止さゼ、４９２ｎｍの吸収を記録する。ＩＣ，。が小さいほど 、被検化合物のフィブリ／ケンのＧ　Ｐ　［１ｂｌｌｌａへの結合阻害活性が強 力である。式３および４のペプチドのＩＣ３゜を、それぞれ表３および表４に示 す。

表３ 式３のペプチド（Ｒ，は水素、Ｒ１はイノプロピル、Ｒ６はＯ）（、Ｘ。

はアミノイミノメチル）によるフィブリノゲンのＧＰＩｌｂｌｌｌａへの結合阻 害 １、ピロリジン環の２位炭素の立体化学２　ピロリノン環の４位炭素の立体化学 ３、実施例４５記載の方法でめた阻害値轟Ａ 式４の環状ペプチド（Ｒ，、Ｒ，、Ｒ９およびＲ１゜は水素、Ｑは硫黄、Ｒ４は ○Ｈ，Ｘ、はアミノイミノメチル）によるフィブリノゲンのＧＰ　１ｌｂｌｌｌ ａへの結合阻害 ＡＡ　”２１　・４２１ｃ５０（ｎＭ）３注； ■、ピロリジン環の２位炭素の立体化学２、ピロリジン環の４位炭素の立体化学 ３、実施例４５記載の方法でめた阻害値特異的なアミノ酸置換をスクリーンする ための最も好ましい化合物１サブクラスの選択には、以下の一般的な検索ルール を用いることができる。オルニチン置換のためにはｍ＝ｏおよびｎ−１を選択す る。リンン置換のためにはｍ−〇およびｎ＝２を選択する：最後にアルギニン置 換のためにはｍ＝ｌおよびｎ−１を選択する。一般に、目的の生物活性ペプチド のペプチド同族体に取り込まれる化合物１のメンバーが多いほど、最も望ましい 特性のペプチドを見付ける可能性が大きくなるようである。次いで、選択した類 似体を含有するペプチドを所望の活性、例えば酵素阻害または耐性、および／ま たは受容体アゴニズムまたはアンタゴニズムについて、適当な生物系でスクリー ニングする。

血小板凝集阻害 ヒト全血５０ｍ１（９部）を少な（とも２週間アスピリンまたは近縁の薬物を摂 取していない供与体から３６％クエン酸ナトリウム（１部）に採血する。血液を ２２°ＣＣ１１６０ｘで１０分間遠心した後５分間放置し、その後ＰＲＰをデカ ントする。残る血液から、２０００ｘｇで２５分間遠心した後、血小板が乏しい 血漿（、Ｐ　Ｐ　Ｐ）を単離する。ＰＲＰの血小板計数をＰＲＰで約３００００ ０／μｍに、希釈した。

ＰＲＰ各２２５μｌおよび被検試料の希釈液または対照（ＰＢＳ）のいずれかを Ｃｈｒｏｎｏ−１部ｇ　Ｔｈｏｌｅ　Ｂｌｏｏｄ　Ａｇｇｒｅｇｏｍｅｔｅｒで 、２５°Ｃにて５分間インキコベートする。アデノシンニりん酸（ＡＤＰ、８μ Ｍ）を加え、血小板凝集を記録する。式３および４のペプチドのＩＣ６゜値をそ れぞれ、表５および６に示す。

表５ 式３のペプチド（Ｒ，は水素、Ｒ５はイソプロピル、Ｒ４はＯＨ，Ｘ。

はアミノイミノメチル）による、アデノンンニりん酸（ＡＤＰ）刺激上血小板凝 集の阻害 ０　日１　°２１　６４２１０５０（ＬＩＭ１３１　ｑ　日　Ｓ　ｊｏ、２ １　ＨＲＳ　２３ 注 １　ピロリジン環の２位炭素の立体化学２　ピロリジン環の４位炭素の立体化学 ３実施例４６記載の方法でめた阻害値 轟旦 式４のペプチド（（Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９およびＲ１゜は水素、Ｑは硫黄、Ｒ４はＯ Ｈ，Ｘ、はアミノイミノメチル）による、アゾ／／ンニりん酸（ＡＤＰ）刺激上 血小板凝集の阻害 ｎ　＾＾　＊２ｊ　＠４２　１０５０１０５０（ＬＩ　Ｇｌｙ　Ｓ　５　１．２ １ＧｌｙＳ　Ｒ０，５ 注・ ｌ、ピロリジン環の２位炭素の立体化学２　ピロリジン環の４位炭素の立体化学 ３、実施例４６記載の方法でめた阻害値実施例４７ 以下に、ノナペプチドブラジキニン（Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｐｈｅ −３ｅｒ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−Ａｒｇ）とその受容体［ビンカ−ら（Ｐｉｎｋｅｒ 、Ｔ、Ｇ、）　、　Ｊ、Ｃｈｅｍ。

Ｓｏｃ、　Ｐｅｒｋｉｎ、　ｌ　１９７６．２２０−２２８３　との相互反応を 例に引き本発明方法を説明する。

ブラジキニンは２個のアルギニン（１位および９位）を有するので、両方を置換 することができる。即ち、Ｍｅｒｒｉｒ　１ｅｌｄ樹脂（Ｍｅｒｒｉｆｉｅｌｄ 、　Ｊ、Ａｍ、Ｃｈｅｍ、Ｓｏｃ、前掲）に結合させた実施例１３．２４．２８ および３７の化合物を用い、ＢＯＣ化学で延長し、最後にフッ化水素で脱保護を 行い、式２　（Ｘ、＝ＯＨ，Ｘ、＝＾ｒｇ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｐｈｅ− ３ｅｒ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−１Ｘ、＝アミノイミノメチル、ｎ＝１）の４つの改変 ペプチドを製造することができる。同様にＭｅｒｒｉｆ　１ｅｌｄ樹脂に結合さ せた、保護Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｐｈｅ−Ｓｅｒ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−Ａｒｇ も実施例１３．２４．２８および３７の化合物とそれぞれ別個に結合させフッ化 水素で処理し４個の立体化学的に異なる、式２　（ｘｔ＝水素、ｘｓ＝アミノイ ミ／メチル、Ｘ　＋＝Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｐｈｅ−Ｓｅｒ−Ｐｒｏ−Ｐｈ ｅ−Ａｒｇ、　ｎ　＝　１　）の化合物の４つの誘導体を得ることができる。上 記のようにしてペプチドを精製し、ラット摘出子宮試験（Ｐｉｎｋｅｒ、　Ｔ、 　Ｇ、ら、前掲参照）のようなバイオアッセイで受容体アゴニズムまたはアンタ ゴニズムについて試験することができる。ペプチドはまた、特定の酵素（例えば トリプシン）に対する抵抗（または阻害）に関しても評価されるビＴｈｅ　Ｅｎ ｚｙｍｅｓ″、　Ｖｏｌ、４．　（＾ｃａｄｅｍｉｃ　Ｐｒｅｓｓ、　Ｎｅｗ　 Ｙｏｒｋ、　２ｎｄ、　ｅｄ、。

１９６０）　ｐ、　１１９−１３２］。この方法で、特定の薬学適用１こ最主、 望まし℃１特性を有するアミノ酸同族体含有ペプチドを選択すること力・出来る 。

実施例４８ 式４の環状ペプチドスルホキシドの製造実施例４３および４４の純化生成物を１ ０ｍｇ／ｍｌの濃度で水（こ溶解する。溶液のｐＨを７に調節する。過酸化水素 の５０％溶液を力口えて最終濃度３％過酸化水素とし得られた反応混合物を室温 で１夜撹拌する。溶液を直接オクタデシルシｌし逆相クロマトク゛ラフイーカラ ムに適用し、アセトニトリル／１％トＩ叡ルオロ酢酸／水の線状グラディエンド で溶離し精製する。反応で生成したスルホキシド性体は、ＱがＳｅ基であること を除き、実施例４３および４４１こ記載の化合物と構造上同一であるだろう。

実施例４９ 式４（式中、ＱはＣＨ．、Ｒ７、Ｒ，、Ｒ８、Ｒ１。（家水素、Ｒ．ｉよ○Ｈ， Ｘ，，はアミノイミハチルを表す）で示される環状ペプチドの製造 実施例５、９、１３、２０、２４、２８、３７、および４０の保護されたアミノ 酸誘導体の各々を、氷浴温間て、ジクロロメタン中、５０％トリフルオロ酢酸で 処理しＢＯＣ保護基を除去する。得られたアミノ酸トリフルオロ酢酸塩を次いで 、ＦＭＯＣ基の結合のための標準的な反応条件を用いて保護されたＦＭＯＣ誘導 体に変換する。

αーＦＭＯＣーアミノアジピン酸δ−アリルエステルをジイソプロピルカーポジ イミドとジクロロメタン溶媒中触媒量の４−ジメチルアミ／ピリジンとを用いて Ｗａｎｇ樹脂に力・ノブリングさせる。次いで、２０％ピペリジン／Ｎ，Ｎ−ジ メチルアセトアミドを用いてＦＭＯＣ基を除去する。次いで、標準的なＦＭＯＣ 合成化学を用いて＾ｓｐ（βーシクロヒキシルエステル）、次いでＧｌｙを加え る。次いで実施例５、９、１３、２０、２４、２８、３７、または４０のＢＯＣ 類似体に対応するＦＭＯＣ保護環状アミノ酸の１つをＧｌｙ樹脂にカップリング させる。ＦＭＯＣ基を除去し、適当に保護されたＮ−ＦＭ○ＣＤ−またはし−ア ミノ酸をカップリングさせる。

Ｄ−またはＬ−アミノ酸のカップリングの後、樹脂に結合したペプチドを２０％ ピペリジン含有Ｎ、Ｎ’　−ジメチルアセトアミド中テトラキス（トリホスフィ ン）パラジウム（０）０．３当量で処理しアリルおよびＦＭＯＣ基を除去する。

次いで、樹脂−結合ペプチドをＮ、Ｎ’　−ジメチルアセトアミド中５％Ｎ−メ チルモルホリンで５回洗浄する。次いでペプチドをＢＯＰ試薬２当量で環化する 。

トリフルオロ酢酸ニトリエチルシラン（９８：２）処理によって樹脂からペプチ ドを開裂する。得られたペプチドをＨＦ処理するとトルエンスルホニルおよびシ クロヘキシル保護基が除去される。粗生成物をオクタデシルシリル逆相クロマト グラフィーカラムに適用し、アセトニトリル／１％トリフルオフロ酢酸／水の線 状グラディエンドで溶離して精製する。

実施例５０ 式４（式中、ＱはＮＨ，Ｒ，、Ｒ８、Ｒ，、Ｒｌｏは水素、Ｒ６はＯＨ。

Ｘ、はアミノイミノメチルを表す）で示される環状ペプチドの製造Ｎ−ＣＢＺ− Ｄ−セリンメチルエステル、ジメトキシブロノくン（５当量）および触媒量のベ ンゼン中ピリジニウムｐ−トルエンスルホネート（０，０１４当量）をゆっくり 蒸留すると清澄なメチル　３−Ｃｂｚ−２，２−ジメチルオキサゾリジン−４− カルボキシレートが形成される。メチルエステルを２：１のエタノール：　ＴＨ Ｆ中Ｌ　ｉ　ＢＦ２（３当ｉ１）で還元すると３−Ｃｂｚ−２，２−ジメチルオ キサゾリジン−４−メタノールが得うレル。ＣＨ，ＣＩ、中（ｃｏｃ＋）ｔ（２ 当量）、ＤＭＳＯ（４当量）およびＥｔ３Ｎ（５当量）でＳｗｅｍ酸化すると３ −Ｃｂｚ−２，２−ジメチルオキサゾリジン−４−カルボキシアルデヒドが生成 する、これはメタノール中グリシンベンジルエステル塩酸塩（５当量）とＮａＢ Ｈ，ＣＮ　（１当量）でアミン化され４−（Ｎ−ベンジルオキシカルボニルメチ ル）−アミノメチル−３−Ｃｂｚ−２，２−ジメチルオキサゾリジンとなる。得 られたアミンは２：ＩＴＨＦ／水中ＢＯＣ，Ｏ（１，２５当量）およびＮａＨＣ Ｏ，（１４当量）で保護しＢＯＣ誘導体とする。前工程で得た４−（Ｎ−ｔ−ブ トキシカルボニル−Ｎ−ベンジルオキ７カルボニルメチル）−アミノメチル−３ −Ｃｂｚ−２，２−ジメチルオキサプリジンのメタノール溶液を１０％Ｐｄ−Ｃ の存在下、５０ｐｓｉで水素添加するとＣＢＺおよベンジルエステル基が開裂さ れてオキサゾリジン環が加水分解され、Ｌ−２−アミ／−３−（Ｎ−ｔ−ブトキ ／カルボニル−Ｎ−カルホキツメチル）−アミノ−１−プロパ／−ルが得られる 。ＦＭＯＣ基は１．１のジオキサン：水中Ｎ−（９−フルオレニルメトキシカル ボニルオキシ）スクシンイミド（１，１５当量）およびＮａＨＣＯ，（２，５当 量）を用いて２−アミノ官能基に付加する。ＤＭＦ中臭中子化アリル当量）およ びＮａＨＣＯ，（２゜５当量）を用いるω−カルボキシル基のアリルエステル化 、次いで１級アルコ−・ルのＪｏｎｅｓ酸化（３当量）によってり、−２−ＦＭ ＯＣ−アミノ−３−（Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニル−Ｎ−アリルオキシカルボニ ルメチル）アミノプロピオン酸が得られる。Ｌ−２−ＦＭＯＣ−アミ／−３−（ Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニル−Ｎ−アリルオキシカルボニルメチル）アミノプロ ピオン酸を実施例４９のα−ＦＭＯＣ−アミノアジピン酸δ−アリルエステルに 代え、所望の標記化合物を得る。

実施例５１ 式４（式中、ＱはＯ，Ｒ，、Ｒ８、Ｒ，、Ｒ，、は水素、Ｒ４は０Ｈ１Ｘ、はア ミノイミノメチルを表す）で示される環状ペプチドの製造ＮａＨ（２，２当量） および臭化アリル（１，１当量）で連続処理することでＤＭＦ溶液中Ｎ−ＣＢＺ −Ｄ−セリンの○−アリル化を行った。塩化メチレン中イソブチレンおよびＨ， ＳＯ４を用いてカルボン酸をｔｅｒｔ−ブチルエステルに変換しＯ−アリル−Ｎ −Ｃｂｚ−Ｌ−セリンｔ−ブチルエステルを得た。アリル基の末端オレフィンを メタノール中でオゾン分解し、ジメチルスルフィド仕上げを行って開裂し、アル デヒドを得、これを単離することなく、ＮａＢＨ，（１当量）で還元し、〇−（ ２−ヒドロキシ−１−エチル）−Ｎ−Ｃｂｚ−Ｌ−セリンｔ−ブチルエステルを 得た。まず、メタノール中１０％Ｐｄ−Ｃ触媒上、５０ｐｓｉＨ，でＣＢＺ基を 還元的に開裂し、次いで得られた遊離のアミンを２：１のＴＨＦ−水中で、フル オレニルメチルクロロホルマート（１，１５当量）およびＮａＨＣＯ，（１８当 量）で再保護した。ヒドクキンエチル基上のアルコールのＪｏｎｅｓ酸化（３当 りによってＦＭＯＣ−０−カルボキシメチル−Ｌ−セリンｔ−ブチルを得、これ をＤＭＦ中臭死臭化アリル当量）およびＮａＨＣ○、（１，５当量）で処理し、 ＦＭＯｃ−ｏ−了りルヵルポニルメチルーＬ−セリンｔ−ブチルを得た。最後に 、トリフルオロ酢酸によってｔ−ブチルエステルを除去し、Ｎ　−Ｆ　Ｍ　ＯＣ −０−７’）ルオキシカルボニルメチルーＬ−セリンを得た。

Ｎ−ＦＭＯＣ−０−アリルオキシカルボニルメチル−し−セリンを実施例４９の δ−アリルエステルに代え、所望の標記化合物を得る。

他の実施態様 本発明の範囲内の他の実施態様は上記の化学の拡張によって生成することができ る。そのような実施態様には、以下のものが含まれる二酸化［バウアーら（Ｂｏ ｗｅｒｓ）　Ｊ、Ｃｈｅｍ、Ｓｏｃ、２５５５（１９５３）］　、および式１４ の化合物の保護によって得られるグルタミン酸（Ｇｌｕ）類似体の可能な立体異 性体。グルタミン酸塩（グルタミン酸）　（Ｇｌｕ）またはグルタミン（Ｇｌｎ ）についても１組の異性体類似体を得ることができる。これらの類似体は式１５ の化合物の加水分解によっても製造できる［サイヤーら（Ｔｈａｙｅｒ）　Ｏｒ ｇ、　Ｓｙｎ、　、　Ｃｏ１１．　Ｖｏｌ、　ｌ　：　１１７（１９４１）］。

同様に、式１４の化合物等を保護し、セリン（Ｓｅｒ）またはスレオニン（Ｔｈ ｒ）類似体としてペプチドに導入することができる。４−ヒドロキシプロリンま たは式１４の化合物の様々な保護異性体から導かれるメンラードまたは臭化物等 の化合物をチオ酢酸と塩基で処理し［ボナーら（Ｂｏｎｎｅｒ）、Ｊ、　Ａｍ、 　Ｃｈｅｗ、　Ｓｏｃ、　（１９６２）　７３　：２６５９］、システィン（Ｃ ｙ’ｓ）類似体としてペプチド合成に用いるために保護することができる。式１ ４の化合物等はヒスチジンのイミダゾール側鎖を含有する同族体の製造における 中間体としても役立つに相違ない。このように、本発明により、多くの天然に存 在する重要なアミノ酸の立体配座的に抑制された新規なキメラアミノ酸類似体を 含有するペプチドの製造および使用が可能となる。

当然ながら本発明の好ましい態様について説明したので、上記の明細書を読めば 、当該技術者は、本発明の技術思想を逸脱することなく、本明細書記載の目的物 質に、様々な変化、等価の置き換え、および改変を行うことができるであろう。

従って、本発明は本明細書に具体的に記載した方法以外の方法でも実施できる。

それ故、特許文章によって認められる保護は添付の特許請求の範囲およびその等 個物のみに限定されることを意図する。

本明細書記載の文献のすべてを参考文献として引用した。

国際調査報告 ｌＭｔｍＪＩＩＭ８１Ａ−ａｍｌｉｓ’ｘＮ＆　ＰＣＴ／ＵＳ　９０１０５４１ ９１＋ＩａｔＲ１１ｍＭＩＩ　Ａｍ＋−崗ＰＣＴ／ＵＳ　９０１０５４１９国際 調査報告 櫂：：ＱＷ＠：：？ｓ？：’、：：：、−ｔ７＝二＆：ｌ：＠、：Ａｈａ、ｅ： ａ：：で７；＋＋　ａｉｍ　Ｉｎ　＋ｍ°　ｚｉｋ７ｆｉ）■■戟{Ｗｌ　＠ｅ ｅ＋’ｃｌｔ　ｆｉｍｖｂ・＠ｕｍ−・＊＊Ｐ―雷−内１ａｒ＋＋ｔｅｉｓｉ勇 ＾・ｗｅｙｌｉａ伽ｔｏｊａｒｌＩ＋ｎ＊ｔｕｍｅｉ＋ｌ鐙ｆｉ−慢＝ｃｈａｍ ｍ{ｖｎ嗜鳴ｗｍｍｒｅｅａ＊・イーｍｅ？９１ｍ１ｅ＋＋。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １）式１： ▲数式、化学式、表等があります▼１ ｛式中、Ｐ１は水素；またはＣＯ２Ｗ１［Ｗ１は、Ｃ６−Ｃ１２−アリールメチ ル（アリール基はＣ１−Ｃ６アルコキシ、またはハロ（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）か ら選択される１またはそれ以上の基で置換されていてもよい）、ｔ−Ｃ４−Ｃ１ ４アルキル、Ｃ６−Ｃ１２アリール−Ｃ１−Ｃ６アルキル、およびＣ３−Ｃ６− ２−アルケニルから選択される基］；Ｐ２は水素；ＣＯ２Ｗ１；または基： ▲数式、化学式、表等があります▼ Ｐ３およびＰ４は独立して水素；ＮＯ２：ＣＯ２Ｗ１；およびＳＯ２Ｗ２（Ｗ２ は、Ｃ１−Ｃ６アルコキシおよびＣ１−Ｃ６アルキルから選択される基で置換さ れていてもよいＣ６−Ｃ１４−アリールを表す。ただしＰ４がＮＯ２またはＳＯ ２Ｗ２のとき、Ｐ３は水素であり、Ｐ４がＣＯ２Ｗ２のときＰ３は水素であり、 Ｐ４がＣＯ２Ｗ１のときＰ３はＣＯ２Ｗ１であることを条件とする。）； ＸはＣ１；Ｎ３；ＮＨＷ３（Ｗ３は水素；Ｃ１−Ｃ８アルコキシおよびＣ１−Ｃ ４アリルから選択される１またはそれ以上の基で置換されていてもよいＣ６−Ｃ １２−アリールメチル）；ＯＣＨ２ＣＮ；ＯＮＨＷ４；ＯＣＯＷ４；ＯＣＨ２Ｃ Ｏ２Ｗ４（Ｗ４はＣ１−Ｃ１０アルキル、Ｃ６−Ｃ１８アリール、Ｃ２−Ｃ１２ アルケニルおよびＣ６−Ｃ１０アリール−Ｃ１−Ｃ６アルキルから選択される基 ）；ＯＣＯ２Ｗ５（Ｗ５はＣ１−Ｃ５アリルおよびベンジルから選択される基） ；ＯＷ６［Ｗ６は水素：Ｃ６−Ｃ１４アリール：ＮＯ２、ハロ（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ 、Ｉ）およびＣＮから選択される基で置換されているＣ６−Ｃ１４アリール；Ｃ ６−Ｃ１４アリール−Ｃ１−Ｃ１０アルキル；Ｃ１−Ｃ１０アルキル：Ｃ１−Ｃ ６アルコキシ、ハロ（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）から選択される置換基で置換されて いるＣ６−Ｃ１４アリール−Ｃ１−Ｃ１０アルキル；およびＣ１−Ｃ１５アルキ ルから選択される基］から選択される基；ｎは０−２を表す。ただしＰ２が水素 のときｎは０でないことを条件とする。） で示される化合物およびその薬学的に許容し得る塩。 ２）Ｐ２が基： ▲数式、化学式、表等があります▼ で示される請求項１の化合物。 ３）Ｐ１がＣＯ２Ｗ１である請求項２の化合物。 ４）ピロリジン環の２位および４位の置換基のキラリティーが独立してＲおよび Ｓから選択される請求項１の化合物。 ５）式２； ▲数式、化学式、表等があります▼２ （式中、Ｘ１はＯＨ、ＮＨ２、ＮＨ−Ｃ１−Ｃ６アルキル、ＤおよびＬα−アミ ノ酸、ペプチド、ポリペプチドおよびタンパク質から選択される基；Ｘ２は水素 、Ｃ１−Ｃ６アルカノイル、ＤおよびＬα−アミノ酸、ペプチド、ポリペプチド 、およびタンパク質から選択される基；Ｘ３は水素、アミノイミノメチル、Ｃ１ −Ｃ６アシル、ＤおよびＬα−アミノ酸、ペプチド、ポリペプチドおよびタンパ ク質から選択される基を表す。ただしＸ２が水素でＸ３が水素またはアミノイミ ノメチルのとき、Ｘ１はＯＨでないことを条件とする。ｎは０−２を表す。ただ しＸ３が水素のとき、ｎは１または２であることを条件とする。） で示されるペプチド。 ６）式３： ▲数式、化学式、表等があります▼３ ｛式中、Ｒ１は水素；Ｃ１−Ｃ８アルカノイル；Ｃ６−Ｃ１２アロイル：Ｄまた はしα−アミノ酸；および２−２０アミノ酸のペプチドから選択される基； Ｒ２およびＲ３は同一または異なる基であって、水素；分枝鎖または直鎖状の置 換または置換されていないＣ１−Ｃ６アルキル［置換基は、水素、Ｃ６−Ｃ１２ アリール［アリールは、ＮＯ２、ＯＨ、ハロ（Ｆ、Ｃ１、Ｂｒ、Ｉ）、Ｃ１−Ｃ ６アルキル、ハロ−Ｃ１−Ｃ６アルキル、アミノ、フェニルオキシ、フェニル、 アセトアミド、ベンズアミド、ジ−Ｃ１−Ｃ６アルキルアミノ、Ｃ１−Ｃ６アル キルアミノ、Ｃ６−Ｃ１２アロイル、Ｃ１−Ｃ６アルカノイル、ヒドロキシ−Ｃ １−Ｃ６アルキル、Ｃ６−Ｃ１２アリールオキシ（アリールはニトロ、ヒドロキ シ、ハロ（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ 、アミノ、フェニルオキシ、アセトアミド、ベンズアミド、ジ−Ｃ１−Ｃ６アル キルアミノ、Ｃ１−Ｃ６アルキルアミノ、Ｃ６−Ｃ１２アロイル、およびＣ１− Ｃ６アルカノイルからなる群から選択される１またはそれ以上の基で置換されて いてもよい）から選択される１またはそれ以上の基で置換されていてもよい〕か ら選択される〕；イソチオウレイド；Ｃ４−Ｃ６シクロアルキル；ウレイド；ア ミノ；Ｃ１−Ｃ６アルキルアミノ；ジ−Ｃ１−Ｃ６アルキルアミノ；ヒドロキシ ；アミノＣ２−Ｃ６アルキルチオ；アミノＣ２−Ｃ６アルコキシ；アセトアミド ；ベンズアミド［フェニル環はニトロ、ヒドロキシ、ハロ（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ ）、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、アミノ、フェニルオキシ、ア セトアミド、ベンズアミド、ジ−Ｃ１−Ｃ８アルキルアミノ、Ｃ１−Ｃ６アルキ ルアミノ、Ｃ６−Ｃ１２アロイルおよびＣ１−Ｃ６アルカノイルから選択される １またはそれ以上の基で置換されていてもよい］；Ｃ６−Ｃ１２アリールアミノ ［アリール基はニトロ、ヒドロキシ、ハロ（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）、Ｃ１−Ｃ６ アルキル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、アミノ、フェニルオキシ、アセトアミド、ベ ンズアミド、ジ−Ｃ１−Ｃ６アルキルアミノ、Ｃ１−Ｃ６アルキルアミノ、Ｃ６ −Ｃ１２アロイルおよびＣ１−Ｃ６アルカノイルから選択される１またはそれ以 上の基で置換されていてもよい］；グアニジノ；フタルイミド；メルカプト；Ｃ １−Ｃ６アルキルチオ；Ｃ６−Ｃ１２アリールチオ；カルボキシ；カルボキサミ ド；カルボ−Ｃ１−Ｃ６アルコキシ；およびＣ６−Ｃ１２アリール［アリール基 はニトロ、ヒドロキシ、ハロ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、ア ミノ、フェニルオキシ、アセトアミド、ベンズアミド、ジ−Ｃ１−Ｃ６アルキル アミノ、Ｃ１−Ｃ６アルキルアミノ、ヒドロキシ−Ｃ１−Ｃ６アルキル，Ｃ６− Ｃ１２アロイルおよびＣ１−Ｃ６アルカノイルから選択される１またはそれ以上 の基で置換されていてもよい］；芳香性ヘテロ環基（ヘテロ環は５−１０個の環 原子を有し、最高２個のＯ、ＮまたはＳヘテロ原子を含有する）から選択される ；Ｒ４はヒドロキシ；Ｃ１−Ｃ６アルコキシ；Ｃ２−Ｃ１２アルケノキシ；Ｃ５ −Ｃ１２アリールオキシ；ジ−Ｃ１−Ｃ６アルキルアミノ−Ｃ１−Ｃ６アルコキ シ；アセチルアミノエトキシ、ニコチノイルアミノエトキシおよびスクシンアミ ドエトキシからなる群から選択されるアシルアミノＣ１−Ｃ６アルコキシ；ピバ ロイルオキシエトキシ：Ｃ６−Ｃ１２アリール−Ｃ１−Ｃ８アルコキシ〔アリー ル基は非置換またはニトロ、ハロ（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）、Ｃ１−Ｃ４アルコキ シおよびアミノから選択される１またはそれ以上の基で置換されている］；ヒド ロキシ−Ｃ２−Ｃ６アルコキシ：ジヒドロキシＣ３−Ｃ６アルコキシ；置換ヘテ ロ原子ＮＲ５Ｒ６［Ｒ５およびＲ６は同一または異なる基であって、水素；Ｃ１ −Ｃ６アルキル；Ｃ３−Ｃ６アルケニル；Ｃ６−Ｃ１２アリール［アリール基は ニトロ、ハロ（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ、アミノ、Ｃ６− Ｃ１２アリール−Ｃ１−Ｃ６アルキル（アリール基はニトロ、ハロ（Ｆ、Ｃｌ、 Ｂｒ、Ｉ）、Ｃ１−Ｃ４アルコキシおよびアミノから選択される１またはそれ以 上の基で置換されていてもよい）から選択される１またはそれ以上の基で置換さ れていてもよい］；ＤまたはＬα−アミノ酸；および２−２０アミノ酸からなる ペプチドからなる群から選択される；Ｘ３は水素またはアミノイミノメチル；ｎ は０、１または２を表す〕 で示されるペプチドまたはその薬学的に許容し得る塩。 ７）Ｒ１は水素；Ｃ１−Ｃ６アルカノイル；Ｃ６−Ｃ１２アロイル；およびＤお よびＬα−アミノ酸から選択される基；Ｒ２およびＲ３は同一または異なる基で あって、水素；分枝鎖または直鎖状のＣ１−Ｃ４アルキル；フェニルメチル［フ ェニル基は非置換またはヒドロキシ、ハロ（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）、Ｃ１−Ｃ４ アルキル、およびＣ１−Ｃ４アルコキシから独立して選択される１〜３個の置換 基で置換されている］から選択される；Ｒ４はヒドロキシ；ＮＨ２；Ｃ１−Ｃ４ アルコキシ；およびベンジルオキシから選択される基； Ｘ３は水素またはアミノイミノメチル；ｎは１または２； で示される請求項６のペプチドまたはその薬学的に許容し得る塩。 ８）式４： ▲数式、化学式、表等があります▼４ ｛式中、Ｒ４はヒドロキシ；Ｃ１−Ｃ６アルコキシ；Ｃ２−Ｃ１２アルケノキシ ；Ｃ５−Ｃ１２アリールオキシ；ジ−Ｃ１−Ｃ８アルキルアミノ−Ｃ１−Ｃ６ア ルコキシ；アセトアミノエトキシ、ニコチノイルアミノエトキシ、スクシンアミ ドエトキシから選択されるアシルアミノ−Ｃ１−Ｃ８アルコキシ；ピバロイルオ キシエトキシ；Ｃ６−Ｃ１２アリール−Ｃ１−Ｃ６アルコキシ［アリール基は、 ニトロ、ハロ（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）、Ｃ１−Ｃ４アルコキシおよびアミノから 選択される１またはそれ以上の基で置換されていてもよい］；ヒドロキシ−Ｃ２ −Ｃ８アルコキシ；ジヒドロキシ−Ｃ３−Ｃ６アルコキシ；置換ヘテロ原子ＮＲ ５Ｒ６［Ｒ５およびＲ６は同一または異なる基であって、水素；Ｃ１−Ｃ６アル キル：Ｃ３−Ｃ５アルケニル；Ｃ６−Ｃ１２アリール［アリール基はニトロ、ハ ロ（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ；アミノ；Ｃ６−Ｃ１２アリ ール−Ｃ１−Ｃ６アルキル（アリール基はニトロ、ハロ（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ） 、Ｃ１−Ｃ４アルコキシおよびアミノから選択される１またはそれ以上の基で置 換されていてもよい）から選択される１またはそれ以上の基で置換されていても よい］；Ｄまたはしα−アミノ酸；および２−２０アミノ酸からなるペプチドか らなる群から選択される］；Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０は同一または異なる基で あって、水素；分枝鎖または直鎖状の置換または置換されていないＣ１−Ｃ６ア ルキル［置換基は、水素；Ｃ６−Ｃ１２アリール［アリール基は、ニトロ、ヒド ロキシ、ハロ（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）、Ｃ１−Ｃ６アルキル、ハロ−Ｃ１−Ｃ６ アルキル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、アミノ、フェニルオキシ、フェニル、アセト アミド、ベンズアミド、ジ−Ｃ１−Ｃ６アルキルアミノ、Ｃ１−Ｃ６アルキルア ミノ、Ｃ６−Ｃ１２アロイル、Ｃ１−Ｃ６アルカノイル、およびヒドロキシ−Ｃ １−Ｃ６アルキルから選択される１またはそれ以上の基］；ハロ（Ｆ、Ｃｌ、Ｂ ｒ、Ｉ）：Ｃ１−Ｃ６アルコキシ；Ｃ６−Ｃ１２アリールオキシ［アリール基は 、ニトロ、ヒドロキシ、ハロ（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ １−Ｃ８アルコキシ、アミノ、フェニルオキシ、アセトアミド、ベンズアミド、 ジ−Ｃ１−Ｃ６アルキルアミノ、Ｃ１−Ｃ８アルキルアミノ、Ｃ６−Ｃ１２アロ イルおよびＣ１−Ｃ８アルカノイルから選択される１またはそれ以上の基で置換 されていてもよい］；イソチオウレイド；Ｃ４−Ｃ６シクロアルキル：ウレイド ：アミノ；Ｃ１−Ｃ６アルキルアミノ；ジ−Ｃ１−Ｃ６アルキルアミノ：ヒドロ キシ；アミノＣ２−Ｃ５アルキルチオ；アミノＣ２−Ｃ５アルコキシ；アセトア ミド；ベンズアミド［フェニル環はニトロ、ヒドロキシ、ハロ（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ 、Ｉ）、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ５アルコキシ、アミノ、フェニルオキシ 、アセトアミド、ベンズアミド、ジ−Ｃ１−Ｃ５アルキルアミノ、Ｃ１−Ｃ８ア ルキルアミノ、Ｃ６−Ｃ１２アロイルおよびＣ１−Ｃ６アルカノイルから選択さ れる１またはそれ以上の基で置換されていてもよい］；Ｃ６−Ｃ１２アリールア ミノ［アリール基はニトロ、ヒドロキシ、ハロ（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）、Ｃ１− Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、アミノ、フェニルオキシ、アセトアミド 、ベンズアミド、ジ−Ｃ１−Ｃ６アルキルアミノ、Ｃ１−Ｃ６アルキルアミノ、 Ｃ８−Ｃ１２アロイルおよびＣ１−Ｃ８アルカノイルから選択される１またはそ れ以上の基で置換されていてもよい］：グアニジノ；フタルイミド；メルカプト ：Ｃ１−Ｃ６アルキルチオ；Ｃ６−Ｃ１２アリールチオ；カルボキシ：カルボキ サミド：カルボ−Ｃ１−Ｃ６アルコキシ：およびＣ６−Ｃ１２アリール［アリー ル基はニトロ、ヒドロキシ、ハロ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ 、アミノ、フェニルオキシ、アセトアミド、ベンズアミド、ジ−Ｃ１−Ｃ８アル キルアミノ、Ｃ１−Ｃ８アルキルアミノ、ヒドロキシ−Ｃ１−Ｃ８アルキル，Ｃ ８−Ｃ１２アロイルおよびＣ１−Ｃ６アルカノイルから選択される１またはそれ 以上の基で置換されていてもよい］；および芳香性ヘテロ環基（ヘテロ環は５− １０個の環原子を有し、最高２個のＯ、ＮまたはＳヘテロ原子を含有する）から 選択される基；Ｑは（ＣＨ２）ｋ（ｋは０−５の整数）；Ｏ；Ｓ：１個または２ 個のＯ原子を有するＳ；ＮＲ１１［Ｒ１１は水素；Ｃ１−Ｃ６アルキル；Ｃ３− Ｃ８アルケニル：Ｃ６−Ｃ１２アリール；Ｃ８−Ｃ１２アリール−Ｃ１−Ｃ６ア ルキル；Ｃ１−Ｃ８アルカノイルおよびＣ６−Ｃ１２アロイルから選択される］ から選択される基； ＡＡはＤまたはＬα−アミノ酸； Ｘ３は水素またはアミノイミノメチル；ｎは０、１または２を表す｝ で示される環状ペプチドまたはその薬学的に許容し得る塩。 ９）Ｒ４はＯＨ：ＮＨ２：Ｃ１−Ｃ４アルコキシおよびベンジルオキシからなる 群から選択される基； Ｒ７およびＲ８は独立して、水素；および分枝鎖または直鎖状の、非置換の、ま たはヒドロキシ、ハロ（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）およびＣｌ−Ｃ４アルコキシから 選択される１〜３個の置換基で置換されたＣ１−Ｃ４アルキルから選択される基 ； Ｒ８およびＲ１０は独立して、水素；分枝鎖または直鎖状の、非置換の、または アミノ、ヒドロキシ、メルカプト、カルボキシ、カルボキサミド、グアニド、フ ェニル、４−ヒドロキシフェニル、４−メトキシフェニル、３−インドイル、４ −イミダゾイルから選択される基で置換されたＣ１−Ｃ８アルキル；非置換の、 またはニトロ、ヒドロキシ、ハロ（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）、Ｃ１−Ｃ４アルキル 、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ、アミノ、フェニルオキシ、フェニル、アセトアミド、 ベンズアミド、ジ−Ｃ１−Ｃ４アルキルアミノ、ハロ（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）− Ｃ１−Ｃ４アルキル，Ｃ６−Ｃ１２アロイルおよびＣ１−Ｃ４アルカノイルから 選択される１〜３個の置換基で置換されたフェニル；１−ナフチル；２−ナフチ ル：２−チエニル；２−ピリジル；３−ピリジル；および４−ピリジルから選択 される基；ＡＡはＴｙｒ、Ｐｈｅ、Ａｌａ、Ｖａｌ、ｎｏｒＶａｌ、Ｌｅｕ、ｌ ｌｅ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｙｓ、およびＡｒｇから選択されるＤまたはＬα−ア ミノ酸；Ｑは（ＣＨ２）ｋ（ｋは０−５の整数）；Ｏ；非置換のＳ、または１個 または２個のＯ原子で置換されたＳ；およびＮＲ８［Ｒ８は水素；Ｃ１−Ｃ４ア ルキル；ベンジル；フェニル；Ｃ１−Ｃ４アルカノイルおよびベンゾイルから選 択される基］から選択される基；Ｘ３は水素またはアミノイミノメチル；で示さ れる請求項８の環状ペプチドまたはその薬学的に許容し得る塩。 １０）Ｒ７およびＲ８は両方ともメチルであるか、置換基の一方が水素であり他 方が水素；分枝領または直鎖状のＣ１−Ｃ４アルキル；またはヒドロキシ、ハロ （Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）、Ｃ１−Ｃ４アルキル、Ｃ１−Ｃ４アルコキシから独立 して選択される１〜３個の置換基で置換されていてもよいフェニル； Ｒ８およびＲ１０は両方とも水素； Ｘ３はアミノイミノメチル； ｎは１； ＱはＳまたはＳＯ； で示される請求項９の環状ペプチドまたはその薬学的に許容し得る塩。 １１）薬学的に許容し得る賦形剤と請求項６のペプチドとを含有する医薬組成物 。 １２）線維素溶解剤をも含有する請求項１１の医薬組成物。 １３）線維素溶解剤がストレプトキナーゼ、ウロキナーゼ、組織プラスミノーゲ ン活性化因子、およびそれらの変異体および誘導体から選択される請求項１２の 医薬組成物。 １４）請求項１２の医薬組成物を同一の、または別々の容器に含有するキット。 １５）血栓形成の増大傾向を有する哺乳類の治療法であって、請求項１１の医薬 組成物の薬学的有効量を哺乳類に投与することからなる方法。 １６）血栓形成の増大傾向を有する哺乳類の治療法であって、請求項１２の医薬 組成物の薬学的有効量を哺乳類に投与することからなる方法。 １７）薬学的に許容し得る賦形剤と請求項８の環状ペプチドとを含有する医薬組 成物。 １８）線維素溶解剤をも含有する請求項１７の医薬組成物。 １９）線維素溶解剤がストレプトキナーゼ、ウロキナーゼ、組織プラスミノーゲ ン活性化因子、およびそれらの変異体および誘導体から選択される請求項１８の 医薬組成物。 ２０）請求項１８の医薬組成物を同一の、または別々の容器に含有するキット。 ２１）血栓形成の増大傾向を有する哺乳類の治療法であって、請求項１７の医薬 組成物の薬学的有効量を哺乳類に投与することからなる方法。 ２２）血栓形成の増大傾向を有する哺乳類の治療法であって、請求項１８の医薬 組成物の薬学的有効量を哺乳類に投与することからなる方法。 ２３）請求項１の化合物の使用法であって、化合物をアミノ酸、アミノ酸類似体 、ペプチド、ポリペプチド、ペプチドフラグメント、およびその誘導体からなる 群から選択される第１反応物に接触させて化合物と第１反応物との共有結合コン ジュゲートを形成させることからなる方法。 ２４）さらにコンジュゲートから、なんらかの保護基を選択的に除去することを 含む請求項２３の方法。 ２５）さらに、所望によりＰ１、Ｐ２、Ｐ３、Ｐ４、Ｘ、Ｎ−末端アミン、Ｃ− 末端カルボキシ、およびコンジュゲート上のアミノ酸側鎖からなる群から選択さ れる官能基を活性化し、次いで該コンジュゲートをアミノ酸、アミノ酸類似体、 ペプチド、ポリペプチド、ペプチドフラグメントおよびその活性化誘導体からな る群から選択される第２反応物と反応させることを含む請求項２３の方法。