JPH05262790A - 新規ペプチド - Google Patents
新規ペプチドInfo
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- JPH05262790A JPH05262790A JP3157355A JP15735591A JPH05262790A JP H05262790 A JPH05262790 A JP H05262790A JP 3157355 A JP3157355 A JP 3157355A JP 15735591 A JP15735591 A JP 15735591A JP H05262790 A JPH05262790 A JP H05262790A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- peptide
- formula
- ace
- amino acid
- leu
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
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-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
- Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
- Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
- Y02P20/52—Improvements relating to the production of bulk chemicals using catalysts, e.g. selective catalysts
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
(57)【要約】 （修正有）
【目的】 食品由来の新規ペプチド及びそれを有効成分
とするアンジオテンシンＩ変換酵素阻害剤とその製法を
提供する。 【構成】 配列１、配列２、又は式： Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−Ｌｅｕ で表されるアミノ酸配列をもつ３種のポリペプチド。そ
の少なくとも１種を含有するアンジオテンシンＩ変換酵
素阻害剤。アクチン系タンパク質を加水分解することに
よる該阻害剤の製造方法。 【効果】 各種食品や医薬品に血圧降下剤及び／又は血
管拡張剤として有用である。
とするアンジオテンシンＩ変換酵素阻害剤とその製法を
提供する。 【構成】 配列１、配列２、又は式： Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−Ｌｅｕ で表されるアミノ酸配列をもつ３種のポリペプチド。そ
の少なくとも１種を含有するアンジオテンシンＩ変換酵
素阻害剤。アクチン系タンパク質を加水分解することに
よる該阻害剤の製造方法。 【効果】 各種食品や医薬品に血圧降下剤及び／又は血
管拡張剤として有用である。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、新規ペプチド、それを
有効成分とするアンジオテンシンＩ変換酵素阻害剤、及
びその製造方法に関するものであり、生化学、タンパク
化学の技術分野のみでなく、血圧降下剤、その他の医療
の技術分野においても非常に重要な役割を果たすもので
ある。
有効成分とするアンジオテンシンＩ変換酵素阻害剤、及
びその製造方法に関するものであり、生化学、タンパク
化学の技術分野のみでなく、血圧降下剤、その他の医療
の技術分野においても非常に重要な役割を果たすもので
ある。
【０００２】
【従来の技術】アンジオテンシンＩ変換酵素（以下ＡＣ
Ｅと略記する）は、アンジオテンシンＩを強力な昇圧ペ
プチドであるアンジオテンシンIIに変換すると共に降圧
ペプチドであるブラジキニンを不活化する反応を触媒す
る。したがってＡＣＥを特異的に阻害する物質は血圧上
昇を抑制する作用を有し、この観点からの血圧降下剤の
開発が進められている。一方、食品工業においては、Ａ
ＣＥ阻害活性を有するペプチドを、各種生物資源のタン
パク質に求め、これを食品として摂取することで高血圧
予防に役立てようとする研究開発が注目されている。既
に大豆タンパク質分解物、カゼイン分解物、魚肉タンパ
ク質分解物等から分離抽出された新規ペプチドの報告等
は多いが、しかし充分に実用化にまで至っていないのが
現状である。
Ｅと略記する）は、アンジオテンシンＩを強力な昇圧ペ
プチドであるアンジオテンシンIIに変換すると共に降圧
ペプチドであるブラジキニンを不活化する反応を触媒す
る。したがってＡＣＥを特異的に阻害する物質は血圧上
昇を抑制する作用を有し、この観点からの血圧降下剤の
開発が進められている。一方、食品工業においては、Ａ
ＣＥ阻害活性を有するペプチドを、各種生物資源のタン
パク質に求め、これを食品として摂取することで高血圧
予防に役立てようとする研究開発が注目されている。既
に大豆タンパク質分解物、カゼイン分解物、魚肉タンパ
ク質分解物等から分離抽出された新規ペプチドの報告等
は多いが、しかし充分に実用化にまで至っていないのが
現状である。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】近年各種生物資源の成
分の人体への生理機能に対する作用に注目した機能性物
質についての研究が行われている。まだまだ未知の部分
も多い中で、本発明の技術分野における新規ペプチドの
発見、及びこれを有効成分とするＡＣＥ阻害剤や食品開
発等が注目されている。殊に、医薬品や食品の分野にお
いて、最近は、化学的合成品が安全性や消費者感情など
から忌避される傾向にあり、従来から食経験が豊富であ
る天然資源からの有効成分の利用は重要な課題となって
いる。本発明の目的は食品由来の新規ペプチド及びそれ
を有効成分とするＡＣＥ阻害剤とその製法を提供するこ
とにある。
分の人体への生理機能に対する作用に注目した機能性物
質についての研究が行われている。まだまだ未知の部分
も多い中で、本発明の技術分野における新規ペプチドの
発見、及びこれを有効成分とするＡＣＥ阻害剤や食品開
発等が注目されている。殊に、医薬品や食品の分野にお
いて、最近は、化学的合成品が安全性や消費者感情など
から忌避される傾向にあり、従来から食経験が豊富であ
る天然資源からの有効成分の利用は重要な課題となって
いる。本発明の目的は食品由来の新規ペプチド及びそれ
を有効成分とするＡＣＥ阻害剤とその製法を提供するこ
とにある。
【０００４】
【課題を解決するための手段】本発明を概説すれば、本
発明の第１の発明は３種の新規ペプチドに関する発明で
あって、配列表の配列番号１、配列番号２、又は下記式
（化１）：
発明の第１の発明は３種の新規ペプチドに関する発明で
あって、配列表の配列番号１、配列番号２、又は下記式
（化１）：
【化１】Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−Ｌｅｕ で示されるアミノ酸配列で表されることを特徴とする。
また、本発明の第２の発明はＡＣＥ阻害剤に関する発明
であって、第１の発明のペプチドの少なくとも１種を含
有していることを特徴とする。そして、本発明の第３の
発明は第２の発明のＡＣＥ阻害剤の製造方法に関する発
明であって、アクチン系タンパク質を加水分解すること
を特徴とする。
また、本発明の第２の発明はＡＣＥ阻害剤に関する発明
であって、第１の発明のペプチドの少なくとも１種を含
有していることを特徴とする。そして、本発明の第３の
発明は第２の発明のＡＣＥ阻害剤の製造方法に関する発
明であって、アクチン系タンパク質を加水分解すること
を特徴とする。
【０００５】各種生物資源を原料とするＡＣＥ阻害ペプ
チドについては、より実用化に沿った物質及び抽出方法
の研究や食品開発が進められる必要があったが、本発明
はかかる従来技術の課題を基に、鋭意研究された結果完
成されたものである。
チドについては、より実用化に沿った物質及び抽出方法
の研究や食品開発が進められる必要があったが、本発明
はかかる従来技術の課題を基に、鋭意研究された結果完
成されたものである。
【０００６】本発明における新規ペプチドはイワシを原
料としてタンパク質分解酵素を用いることにより見出し
たものであり、新規ペプチドの安全性に何ら問題はな
い。またこの理由からもこのアミノ酸配列からなるペプ
チドであれば他の生物資源から得られたものであっても
あるいは合成手法によるペプチドであっても安全に人体
に供することができる。すなわち本発明では、生物資源
としてイワシすり身を用い、これを市販のタンパク質分
解酵素によってペプチド化したものである。これらペプ
チドのＡＣＥ阻害活性をカッシュマン アンド チュン
グ（ Cushman & Cheung ) の手法に従って検討すること
により優れたＡＣＥ阻害活性を有するペプチド画分を得
ることができた。これを更に各種クロマトグラフィーを
用いることにより、ＡＣＥ阻害活性を発現する新規ペプ
チドを見出したものである。また、自然界に広くかつ大
量に存在するアクチン系タンパク質を、同様に加水分解
することによっても、ＡＣＥ阻害活性を発現する前記３
種の少なくとも１つを含有する新規ペプチドを見出し
た。
料としてタンパク質分解酵素を用いることにより見出し
たものであり、新規ペプチドの安全性に何ら問題はな
い。またこの理由からもこのアミノ酸配列からなるペプ
チドであれば他の生物資源から得られたものであっても
あるいは合成手法によるペプチドであっても安全に人体
に供することができる。すなわち本発明では、生物資源
としてイワシすり身を用い、これを市販のタンパク質分
解酵素によってペプチド化したものである。これらペプ
チドのＡＣＥ阻害活性をカッシュマン アンド チュン
グ（ Cushman & Cheung ) の手法に従って検討すること
により優れたＡＣＥ阻害活性を有するペプチド画分を得
ることができた。これを更に各種クロマトグラフィーを
用いることにより、ＡＣＥ阻害活性を発現する新規ペプ
チドを見出したものである。また、自然界に広くかつ大
量に存在するアクチン系タンパク質を、同様に加水分解
することによっても、ＡＣＥ阻害活性を発現する前記３
種の少なくとも１つを含有する新規ペプチドを見出し
た。
【０００７】この優れたＡＣＥ阻害活性を有する新規ペ
プチドの利用方法としては、血圧降下剤及び／又は血管
拡張剤として医薬に利用できるほか、高血圧予防を目的
とする健康食品、機能性食品などと称される各種食品と
しても大いに利用できる。
プチドの利用方法としては、血圧降下剤及び／又は血管
拡張剤として医薬に利用できるほか、高血圧予防を目的
とする健康食品、機能性食品などと称される各種食品と
しても大いに利用できる。
【０００８】次に本発明を実験例を示しながら具体的に
説明する。 （ＡＣＥ阻害活性測定）試料を試験管に５０μｌ入れ、
これに１００μｌのＡＣＥ（シグマ社製、２．５mM）溶
液を添加し、３７℃で５分間保温後、基質として、１０
０μｌのＢｚ−Ｇｌｙ−Ｌ−Ｈｉｓ−Ｌ−Ｌｅｕ（ペプ
チド研究所製、最終濃度５mM、ＮａＣｌ４００mMを含
む）を添加し、３７℃で６０分間反応させた。その後
０．５Ｎ塩酸０．２５mlを添加して反応を停止させた
後、１．５mlの酢酸エチルを加え、１５秒間激しくかく
はんした。その後３０００rpm で１０分間遠心して、酢
酸エチル層を１４０℃で２０分間加熱し、溶媒を除去し
た。溶媒除去後、３mlの１ＭＮａＣｌ水溶液に溶解さ
せ、抽出された馬尿酸の吸収（２２８nmの吸光度）を測
定し、これを酵素活性とした。 阻害率＝〔（Ａ−Ｂ）／Ａ〕×１００（％） Ａ；阻害剤を含まない場合の２２８nmの吸光度 Ｂ；阻害剤添加の場合の２２８nmの吸光度 そして、阻害率５０％の時の試料濃度をＩＣ50とする。
説明する。 （ＡＣＥ阻害活性測定）試料を試験管に５０μｌ入れ、
これに１００μｌのＡＣＥ（シグマ社製、２．５mM）溶
液を添加し、３７℃で５分間保温後、基質として、１０
０μｌのＢｚ−Ｇｌｙ−Ｌ−Ｈｉｓ−Ｌ−Ｌｅｕ（ペプ
チド研究所製、最終濃度５mM、ＮａＣｌ４００mMを含
む）を添加し、３７℃で６０分間反応させた。その後
０．５Ｎ塩酸０．２５mlを添加して反応を停止させた
後、１．５mlの酢酸エチルを加え、１５秒間激しくかく
はんした。その後３０００rpm で１０分間遠心して、酢
酸エチル層を１４０℃で２０分間加熱し、溶媒を除去し
た。溶媒除去後、３mlの１ＭＮａＣｌ水溶液に溶解さ
せ、抽出された馬尿酸の吸収（２２８nmの吸光度）を測
定し、これを酵素活性とした。 阻害率＝〔（Ａ−Ｂ）／Ａ〕×１００（％） Ａ；阻害剤を含まない場合の２２８nmの吸光度 Ｂ；阻害剤添加の場合の２２８nmの吸光度 そして、阻害率５０％の時の試料濃度をＩＣ50とする。
【０００９】（実験例）イワシすり身を加水後必要であ
れば細砕したあとタンパク質分解酵素を用いて加水分解
する。このとき原料と酵素剤との混合を良くする工夫が
あれば更に良い。適当な条件下で加水分解した後、加温
し、酵素活性を失活させたものを、遠心分離やその他の
ろ過方法によって分解液と残渣とに区分する。この分解
液をＯＤＳ樹脂を充てんしたカラムに通液する。次に
水、及び濃度の異なるエタノール溶液によって順次ペプ
チド区分を分画し、分取することによって、ＡＣＥ阻害
活性の高いペプチド部分を得る。
れば細砕したあとタンパク質分解酵素を用いて加水分解
する。このとき原料と酵素剤との混合を良くする工夫が
あれば更に良い。適当な条件下で加水分解した後、加温
し、酵素活性を失活させたものを、遠心分離やその他の
ろ過方法によって分解液と残渣とに区分する。この分解
液をＯＤＳ樹脂を充てんしたカラムに通液する。次に
水、及び濃度の異なるエタノール溶液によって順次ペプ
チド区分を分画し、分取することによって、ＡＣＥ阻害
活性の高いペプチド部分を得る。
【００１０】このペプチド部分を得る方法は、用いてい
る原材料がイワシすり身、タンパク質分解酵素、エタノ
ールとすべて食品として長く用いられてきた物質ばかり
で構成される特長があり、分解手法としてもＯＤＳ樹脂
を用いたことにより、ペプチドの鎖長を主たる要因に分
画したものであり、特殊なフラグメントを特殊な溶媒を
用いて収集したものではない。すなわちペプチド部分は
このまま直ちに食品として、あるいは食品原料として人
に供与されても全く問題ないものである。
る原材料がイワシすり身、タンパク質分解酵素、エタノ
ールとすべて食品として長く用いられてきた物質ばかり
で構成される特長があり、分解手法としてもＯＤＳ樹脂
を用いたことにより、ペプチドの鎖長を主たる要因に分
画したものであり、特殊なフラグメントを特殊な溶媒を
用いて収集したものではない。すなわちペプチド部分は
このまま直ちに食品として、あるいは食品原料として人
に供与されても全く問題ないものである。
【００１１】このペプチド部分から常法に従って、イオ
ン交換クロマトグラフィー、ゲルろ過クロマトグラフィ
ー、逆相分配クロマトグラフィーなどの手法によって、
ペプチドフラグメントを得たのち、アミノ酸シークエン
サーを用いて構造決定し、アミノ酸分析機によって確認
する。
ン交換クロマトグラフィー、ゲルろ過クロマトグラフィ
ー、逆相分配クロマトグラフィーなどの手法によって、
ペプチドフラグメントを得たのち、アミノ酸シークエン
サーを用いて構造決定し、アミノ酸分析機によって確認
する。
【００１２】このようにして得られたペプチドフラグメ
ントは、全く新規な構造を有しており、過去に公知であ
るとの証拠は見当らない。またＡＣＥ阻害活性は優れた
力価を示し、前述の応用分野における特長ある原料とし
て使用することが可能である。
ントは、全く新規な構造を有しており、過去に公知であ
るとの証拠は見当らない。またＡＣＥ阻害活性は優れた
力価を示し、前述の応用分野における特長ある原料とし
て使用することが可能である。
【００１３】
【実施例】以下本発明を実施例を用いて更に具体的に説
明するが、本発明はこれら実施例に何ら限定されるもの
ではない。
明するが、本発明はこれら実施例に何ら限定されるもの
ではない。
【００１４】実施例１ イワシすり身５０ｇに水５００mlを加えた後、ホモゲナ
イザー／ポリトロン〔スイスのキネマチカ社（ Kinemat
ica-mbH ）〕で２分間ホモゲナイズした。このホモジネ
ート液を９８℃で１５分間インキュベートし、pHを３に
調整した。これにペプシン（ベーリンガーマンハイム
社）５００mgを加え、ポリトロンで１分間更にホモゲナ
イズした。次に振とう下４０℃で５時間加水分解した
後、pH７に調整し、９８℃１５分間の加熱により酵素を
失活させ、加水分解を終了した。この加水分解液は１０
０００rpm 、１５分間遠心し、更に上清をろ紙ろ過する
ことにより、酵素分解液５００mlを得た。この酵素分解
液をＯＤＳ樹脂（ＹＭＣ社製 ＯＤＳ−ＡＱ120 −Ｓ５
０）を充てんしたカラム（３．５cm×１４cm）に通し、
水５００ml（Ｆ−１）と１０％エタノール溶液（Ｆ−
２）、２５％エタノール溶液（Ｆ−３）、５０％エタノ
ール溶液（Ｆ−４）、９９．５％エタノール溶液（Ｆ−
５）それぞれ５００mlを用いて分画分取した。それぞれ
の分画は表１に示すように高いＡＣＥ阻害活性を有し、
分画前より優位に力価は上っている。
イザー／ポリトロン〔スイスのキネマチカ社（ Kinemat
ica-mbH ）〕で２分間ホモゲナイズした。このホモジネ
ート液を９８℃で１５分間インキュベートし、pHを３に
調整した。これにペプシン（ベーリンガーマンハイム
社）５００mgを加え、ポリトロンで１分間更にホモゲナ
イズした。次に振とう下４０℃で５時間加水分解した
後、pH７に調整し、９８℃１５分間の加熱により酵素を
失活させ、加水分解を終了した。この加水分解液は１０
０００rpm 、１５分間遠心し、更に上清をろ紙ろ過する
ことにより、酵素分解液５００mlを得た。この酵素分解
液をＯＤＳ樹脂（ＹＭＣ社製 ＯＤＳ−ＡＱ120 −Ｓ５
０）を充てんしたカラム（３．５cm×１４cm）に通し、
水５００ml（Ｆ−１）と１０％エタノール溶液（Ｆ−
２）、２５％エタノール溶液（Ｆ−３）、５０％エタノ
ール溶液（Ｆ−４）、９９．５％エタノール溶液（Ｆ−
５）それぞれ５００mlを用いて分画分取した。それぞれ
の分画は表１に示すように高いＡＣＥ阻害活性を有し、
分画前より優位に力価は上っている。
【００１５】
【表１】
【００１６】本発明により見出された新規ペプチドは２
５％エタノール（Ｆ−３）溶出画分に存在する。すなわ
ち２５％エタノール（Ｆ−３）溶出画分は濃縮後、ＳＰ
−セファデックス Ｃ−２５（Ｈ+ 型）カラム（１．５
cm×３３cm）に通し、ギ酸アンモニウムのステップワイ
ズグラジエントで溶出し、４つの主要なＡＣＥ阻害活性
画分を集めた。次に各々画分を４０％メタノールを溶出
液としてトヨパールＨＷ−４０カラム（１．５cm×１０
０cm）クロマトグラフィーにより脱塩し、活性画分をＯ
ＤＳ逆相液体クロマトグラフィーで更に分離した。それ
ぞれの分離したペプチドフラグメント画分は、ＡＣＥ阻
害活性を確認し、アミノ酸シークエンサー（ＡＢＩ社製
４７７Ａ型）を用いて構造解析し、アミノ酸配列を求
めると共にアミノ酸分析機（日立製作所製 Ｌ−８５０
０型）を用いてアミノ酸組成を求めることにより、アミ
ノ酸一次構造を決定した。本発明による新規ペプチド
は、ＳＰ−セファデックス Ｃ−２５カラムクロマトグ
ラフィーのＢ画分から得られたものであり（図１）、各
画分のＡＣＥ阻害率を図１に、またＢ画分の脱塩後のＯ
ＤＳ逆相液体クロマトグラフィーの結果、及びＡＣＥ阻
害率をそれぞれ図２、図３に示した。なお、図１におい
て横軸はフラクション番号（各１１ml）、縦軸は２８０
nmにおける吸光度（Ａ280 、黒丸印）、ＡＣＥ阻害率
（％、白丸印）を示す。図２において、横軸は時間
（分）、縦軸は２２０nmにおける吸光度（Ａ220 、実
線）、ＣＨ3 ＣＮ（％、点線）を示す。このＣＨ3 ＣＮ
％は展開溶媒として用いたアセトニトリルの濃度変化を
示す。図３において、横軸は時間（分）、縦軸はＡＣＥ
阻害率（％）を示す。
５％エタノール（Ｆ−３）溶出画分に存在する。すなわ
ち２５％エタノール（Ｆ−３）溶出画分は濃縮後、ＳＰ
−セファデックス Ｃ−２５（Ｈ+ 型）カラム（１．５
cm×３３cm）に通し、ギ酸アンモニウムのステップワイ
ズグラジエントで溶出し、４つの主要なＡＣＥ阻害活性
画分を集めた。次に各々画分を４０％メタノールを溶出
液としてトヨパールＨＷ−４０カラム（１．５cm×１０
０cm）クロマトグラフィーにより脱塩し、活性画分をＯ
ＤＳ逆相液体クロマトグラフィーで更に分離した。それ
ぞれの分離したペプチドフラグメント画分は、ＡＣＥ阻
害活性を確認し、アミノ酸シークエンサー（ＡＢＩ社製
４７７Ａ型）を用いて構造解析し、アミノ酸配列を求
めると共にアミノ酸分析機（日立製作所製 Ｌ−８５０
０型）を用いてアミノ酸組成を求めることにより、アミ
ノ酸一次構造を決定した。本発明による新規ペプチド
は、ＳＰ−セファデックス Ｃ−２５カラムクロマトグ
ラフィーのＢ画分から得られたものであり（図１）、各
画分のＡＣＥ阻害率を図１に、またＢ画分の脱塩後のＯ
ＤＳ逆相液体クロマトグラフィーの結果、及びＡＣＥ阻
害率をそれぞれ図２、図３に示した。なお、図１におい
て横軸はフラクション番号（各１１ml）、縦軸は２８０
nmにおける吸光度（Ａ280 、黒丸印）、ＡＣＥ阻害率
（％、白丸印）を示す。図２において、横軸は時間
（分）、縦軸は２２０nmにおける吸光度（Ａ220 、実
線）、ＣＨ3 ＣＮ（％、点線）を示す。このＣＨ3 ＣＮ
％は展開溶媒として用いたアセトニトリルの濃度変化を
示す。図３において、横軸は時間（分）、縦軸はＡＣＥ
阻害率（％）を示す。
【００１７】このＢ−１、Ｂ−２、及びＢ−３フラクシ
ョンは、再びＯＤＳカラムクロマトグラフィーにより精
製し、それぞれ一次構造を決定することにより、Ｂ−１
は配列表の配列番号１、Ｂ−２は配列表の配列番号２、
Ｂ−３は式（化１）で表される構造であることを確認し
た。これらのペプチドは新規ペプチドである。それぞれ
のアミノ酸組成、ＡＣＥ阻害活性を下記表２に示す。
ョンは、再びＯＤＳカラムクロマトグラフィーにより精
製し、それぞれ一次構造を決定することにより、Ｂ−１
は配列表の配列番号１、Ｂ−２は配列表の配列番号２、
Ｂ−３は式（化１）で表される構造であることを確認し
た。これらのペプチドは新規ペプチドである。それぞれ
のアミノ酸組成、ＡＣＥ阻害活性を下記表２に示す。
【００１８】
【表２】 表２ イワシすり身酵素分解物由来のＡＣＥ阻害物質の分析データ ──────────────────────────────────── 阻害剤 酸加水分解物中のアミノ酸比 ＩＣ50（μＭ） ──────────────────────────────────── Ｂ−１ Ｖａｌ １．００， Ｌｙｓ １．０３， ８３ Ａｌａ １．２７， Ｇｌｙ １．１４， Ｐｈｅ ０．８０ ──────────────────────────────────── Ｂ−２ Ｌｙｓ １．００， Ｖａｌ １．１３， １５ Ｌｅｕ １．４８， Ａｌａ １．０１， Ｇｌｙ １．１２， Ｍｅｔ ０．５３ ──────────────────────────────────── Ｂ−３ Ｌｅｕ １．９９， Ｌｙｓ １．００ ９６ ────────────────────────────────────
【００１９】表２より、本発明で得られた新規ペプチド
は優れたＡＣＥ阻害活性を示すことが判明した。なお、
表２におけるＢ−３の式（化１）で表されるペプチド
は、本発明者等が先に特許出願した特開平３−１１０９
７号のペプチドの１つである下記式（化２）：
は優れたＡＣＥ阻害活性を示すことが判明した。なお、
表２におけるＢ−３の式（化１）で表されるペプチド
は、本発明者等が先に特許出願した特開平３−１１０９
７号のペプチドの１つである下記式（化２）：
【００２０】
【化２】Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ｌｅｕ−Ｌ
ｙｓ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ
ｙｓ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ
【００２１】で表されるペプチド中にアミノ酸配列とし
て含まれているが、式（化２）で表されるペプチドのＩ
Ｃ50は１０９（μＭ）であり、本発明の式（化１）で表
されるペプチドの方が、ＡＣＥ阻害活性が高いことが判
明した。
て含まれているが、式（化２）で表されるペプチドのＩ
Ｃ50は１０９（μＭ）であり、本発明の式（化１）で表
されるペプチドの方が、ＡＣＥ阻害活性が高いことが判
明した。
【００２２】実施例２ 市販アクチン（シグマ社製、ニワトリ筋肉由来）１００
mgに、水１mlを加え、実施例１と同様に加水分解、分画
を行った。得られた新規ペプチドの一次構造は、配列表
の配列番号１で表されるアミノ酸配列であり、そのＩＣ
50は８３μＭで、優れたＡＣＥ阻害活性を示した。
mgに、水１mlを加え、実施例１と同様に加水分解、分画
を行った。得られた新規ペプチドの一次構造は、配列表
の配列番号１で表されるアミノ酸配列であり、そのＩＣ
50は８３μＭで、優れたＡＣＥ阻害活性を示した。
【００２３】
【発明の効果】本発明により得られる新規ペプチドは優
れたＡＣＥ阻害活性を有し、しかもイワシより得られた
安全性の高い物質であるので、各種食品や医薬品に血圧
降下剤及び／又は血管拡張剤として利用可能である。
れたＡＣＥ阻害活性を有し、しかもイワシより得られた
安全性の高い物質であるので、各種食品や医薬品に血圧
降下剤及び／又は血管拡張剤として利用可能である。
【配列表】配列番号：１ 配列の長さ：５ 配列の型：アミノ酸 鎖の数：１本鎖 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド 配列番号：２ 配列の長さ：６ 配列の型：アミノ酸 鎖の数：１本鎖 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド
【図１】本発明に係るイワシすり身酵素分解物をＯＤＳ
樹脂処理で分画したＦ−３画分を、更にＳＰ−セファデ
ックス Ｃ−２５（Ｈ+ 型）カラムで再分画した時のク
ロマトグラフィーの結果と、それらのＡＣＥ阻害率を示
すグラフである。
樹脂処理で分画したＦ−３画分を、更にＳＰ−セファデ
ックス Ｃ−２５（Ｈ+ 型）カラムで再分画した時のク
ロマトグラフィーの結果と、それらのＡＣＥ阻害率を示
すグラフである。
【図２】Ｆ−３画分を再分画した時のＢ画分の脱塩後の
ＯＤＳ逆相液体クロマトグラフィーの結果と、アセトニ
トリルの濃度変化を示すグラフである。
ＯＤＳ逆相液体クロマトグラフィーの結果と、アセトニ
トリルの濃度変化を示すグラフである。
【図３】Ｂ画分の脱塩後の画分のＡＣＥ阻害率を示すグ
ラフである。
ラフである。
─────────────────────────────────────────────────────
【手続補正書】
【提出日】平成４年１０月８日
【手続補正１】
【補正対象書類名】図面
【補正対象項目名】全図
【補正方法】変更
【補正内容】
【図３】
【図１】
【図２】
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.5 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 Ｃ１２Ｎ 9/99 Ｃ１２Ｐ 21/06 8214−4Ｂ // Ｃ０７Ｋ 99:00
Claims (3)
- 【請求項１】 配列表の配列番号１、配列番号２、又は
下記式（化１）： 【化１】Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−Ｌｅｕ で示されるアミノ酸配列で表されることを特徴とする３
種の新規ペプチド。 - 【請求項２】 請求項１に記載のペプチドの少なくとも
１種を含有していることを特徴とするアンジオテンシン
Ｉ変換酵素阻害剤。 - 【請求項３】 アクチン系タンパク質を加水分解するこ
とを特徴とする請求項２に記載のアンジオテンシンＩ変
換酵素阻害剤の製造方法。
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| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP3157355A JP3056543B2 (ja) | 1991-06-03 | 1991-06-03 | 新規ペプチド |
Applications Claiming Priority (1)
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| JP3157355A JP3056543B2 (ja) | 1991-06-03 | 1991-06-03 | 新規ペプチド |
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| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2000055118A Division JP3115569B2 (ja) | 2000-03-01 | 2000-03-01 | 新規ペプチド |
| JP2000055119A Division JP3118236B2 (ja) | 2000-03-01 | 2000-03-01 | アンジオテンシンｉ変換酵素阻害剤の製造方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH05262790A true JPH05262790A (ja) | 1993-10-12 |
| JP3056543B2 JP3056543B2 (ja) | 2000-06-26 |
Family
ID=15647865
Family Applications (1)
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|---|---|---|---|
| JP3157355A Expired - Lifetime JP3056543B2 (ja) | 1991-06-03 | 1991-06-03 | 新規ペプチド |
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| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP3056543B2 (ja) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1996019494A1 (en) * | 1994-12-19 | 1996-06-27 | Biochem Pharma Inc. | Peptides having immunomodulatory activity |
| WO2010082367A1 (ja) | 2009-01-19 | 2010-07-22 | キッコーマン株式会社 | アンジオテンシン変換酵素阻害ペプチド |
Families Citing this family (1)
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|---|---|---|---|---|
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-
1991
- 1991-06-03 JP JP3157355A patent/JP3056543B2/ja not_active Expired - Lifetime
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1996019494A1 (en) * | 1994-12-19 | 1996-06-27 | Biochem Pharma Inc. | Peptides having immunomodulatory activity |
| WO2010082367A1 (ja) | 2009-01-19 | 2010-07-22 | キッコーマン株式会社 | アンジオテンシン変換酵素阻害ペプチド |
| KR20110105761A (ko) | 2009-01-19 | 2011-09-27 | 기꼬만 가부시키가이샤 | 안지오텐신 변환 효소 저해 펩티드 |
| US9006171B2 (en) | 2009-01-19 | 2015-04-14 | Kikkoman Corporation | Angiotensin converting enzyme inhibitory peptide |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP3056543B2 (ja) | 2000-06-26 |
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