JPH0474357B2

JPH0474357B2 -

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Publication number: JPH0474357B2
Application number: JP60263227A
Authority: JP
Priority date: 1985-11-22
Filing date: 1985-11-22
Publication date: 1992-11-26
Also published as: JPS62123194A

Description

【発明の詳細な説明】（産業上の利用分野）本発明は、新規物質No.8345−Ｃに関する。この
物質は、植物生長抑制活性及び抗生物質活性を有
し、農薬及び医薬の分野で利用される。（従来の技術）従来より知られている抗生物質作用と、植物生
長抑制作用を併せ持つ物質としては、シクロヘキ
シミド（特公昭45−22754）、アニソマイシン、ト
ヨカマイシン（Agric，Biol.Chem.，36，2013
（1970））、ハービサイジンＡ，Ｂ（J.Antibict.，
29，863（1976））、ハービマイシン（J.Antibict.，
32，255（1979））、サイトバリシン（第５回国際農
薬学会講演要旨、ｂ−３，1982）、ビアラホス
（第５回国際農薬学会講演要旨、ａ−19，1982）
などが知られており、このうち、ピアラホスが除
草剤として実用化されている。又、担子菌の生産する抗生物質としてはポリア
セチレン化合物、テルペノイド化合物、芳香族化
合物、核酸アナログなど（発酵と工業、Vol.34，
No.11P843）の他、非蛋白性アミノ酸が知られて
いる（化学と生物14，205（1976）が、これらの物
質の植物生長抑制作用に関する報告例は無い。（本発明が解決しようとする問題点）本発明が解決しようとする問題点は、新規で有
用な植物生長抑制作用と抗生物質作用を併せ持つ
物質を提供することにある。（問題点を解決するための手段）本発明者らは、上述の問題点を解決するために
新規な植物生長抑制作用と抗生物質作用を併せ持
つ物質を探索を目的として、多数の担子菌の培養
液を探索した結果、ペレニポリア属
（Perenniporia）に属する菌株の菌糸のメタノー
ル抽出物中に、Daviaの最小培地でバチルス・ズ
ブチリス（Bacillus subtilis）AJ1316の生育阻害
作用を有し、同時に植物の生長を抑制する物質で
あるペレニポリンＣが生産されていることを見出
した。そして、この有効物質を培養液から純粋に
単離し、理化学的性質を調べ、既知物質との比較
検討を行つた結果、ペレニポリンＣは、理化学的
性質において、既知物質と異なつていることを見
出した。本発明は、これらの知見に基づいてなされたも
のである。なお、本発明者らは、先にPerenniporia
medullaepanis AJ8345株の生産する新規物質ペ
レニポリンＡ及びペレニポリンＢを出願している
（特公平４−15788号、特開昭62−22594号）。本発明のペレニポリンＣはペレニポリア
（Perenniporia）属に属する担子菌により生産さ
れる。その一例として挙げられるペレニポリア・
メデユラエパニス（Pereniporia
medullaepanis）AJ8345，FERM−P8181（以下
AJ8345菌という。）は、本発明のペレニポリンＣ
を有利に生産する特性を有している。本発明のペレニポリンＣを得るには、ペレニポ
リア属に属するペレニポリンＣ生産菌を、本物質
を生産する通常の方法で培養することが出来る。
工業的に有利に生産するには、ペレニポリンＣ生
産菌を好気的条件下で各種栄養物質を含む培地で
通気攪拌培養を行えばよい。培養条件および培地の組成は、一般の担子菌が
生育するものであればよい。すなわち培地は原則
として炭素源、窒素源、無機塩を含み、必要に応
じて、ビタミン類、先駆物質などを加えても良
い。炭素源としては、例えば、グルコース、アラ
ビノース、キシロース、澱粉、デキストリン、グ
リセリン、マンニトール、有機酸、糖蜜、馬鈴薯
などが、単独で又は、混合物として使用され、窒
素源としては、例えばペプトン、大豆粉、コー
ン・スチープ・リカー、麦芽抽出物、アミノ酸、
米糠、麦芽、尿素、アンモニウム塩など又はこれ
らの混合物が用いられる。又必要に応じて、シリ
コーン油、大豆油、界面活性剤等の消泡剤を加え
ても良い。培地は液体培地が好ましく、培地のPHは約6.0
〜約8.0が良く、培養温度は、約20〜約35℃に調
節するのが良い。培養終了後、培養物からペレニポリンＣを分
離、採取する方法は、通常の発酵生産物を培養物
から分離採取する方法に準じて行えば良い。すな
わち、各種有機溶媒による抽出法、各種活性吸着
剤によるクロマトグラフイーなどを適宜組み合せ
て、ペレニポリンＣを採取する。次に実施例によりペレニポリンＣの製造例を示
すが本実施例は、本発明の範囲をなんら限定する
ものではない。実施例１ペレニポリンＣの製造ならびに製造解析ポテト・デキストロース寒天斜面に生育した
AJ8345菌を可溶性デンプン１％、グルコース２
％、硫酸アンモニウム0.5％、リン酸第一カリウ
ム0.05％、硫酸マグネシウム0.05％、塩化ナトリ
ウム0.05％、ポテトエキス70ｇ／、微量金属^*
１ml／の割合で含む発酵培地（500ml容坂口フ
ラスコに100mlずつ分注）に植菌し、27℃で20〜
30日間振盪又は、静置培養した。＊微量金属 CuSO₄・5H₂Ｏ 0.64ｇ FeSO₄・7H₂Ｏ 0.11ｇ MnCl₂・4H₂Ｏ 0.79ｇ ZnSO₄・7H₂Ｏ 0.15ｇ蒸留水 100ml 得られた培養液６から、ろ過により、菌体を集
め、２のメタノールで２回抽出し、メタノール
溶液を減圧濃縮、乾固した後、少量のメタノール
に溶解させた。次にシリカゲルカラムクロマトグ
ラフイー（ローバーカラムSi60、サイズＢ、メル
ク社製）により精製した。展開溶媒はメタノール
−酢酸エチル（５：95）を用いた。活性区分を集
め、減圧濃縮乾固の後、少量のメタノールに溶解
し、Sephadex LH−20を用いたゲルクロマトグ
ラフイーにより精製した（カラム容積300ml）。展
開には、メタノールを用いた。活性区分を集め、
減圧濃縮後、セミ分取用μBondapak C₁₈（登録商
標、日本ウオータース製）カラムを用いたHPLC
により、活性成分の精製、単離を行つた。移動相
には、30％CH₃CN水溶液を用いた。保持時間約
40分に、ペレニポリンＣを分取した。本法によ
り、最終的に６の培養液から、ペレニポリンＣ
を約５mg単離した。この様にして得られた抗生物質ペレニポリンＣ
は、以下に述べるとおりの理化学的性質を有す
る。 (1) 外観：白色針状結晶 (2) 元素分析値：炭素63.0％、水素7.5％、窒素
4.1％（重量比） (3) 分子量：高分解能EI−MS ｍ／ｚ：
323.17327（M⁺） (4) 分子式：C₁₇H₂₅NO₅ (5) 比旋光度：〔α〕²⁴ _D＋17.3°（Ｃ 0.075、メタ
ノール） (6) 融点：212〜214℃ (7) 溶解性：メタノール、酢酸エチルに可溶。水
にわずかに溶ける。 (8) 紫外部吸収スペクトル：UVλ^MeOH _naxnm：211 (9) 赤外線吸収スペクトル：臭臭化カリウム錠剤
で測定したスペクトルIRν^KBr _nax（cm^-1）：1730，
1720，1680，1362，1250，1030（第１図参照）。 (10) 水素核磁気共鳴スペクトル：重メタノール中
で測定したスペクトルδ_H（ppm）：1.02，1.07，
1.18，1.31，1.49，1.53，1.56，1.66，1.83，
2.04，2.59，4.14，5.44，5.56（第２図参照）。 (11) 炭素核磁気共鳴スペクトル：重メタノール
中で測定したスペクトルδ_C（ppm）：19.6，21.4，
21.7，23.6，33.8，34.4，37.1，37.9，44.3，
50.2，64.8，74.5，78.2，144.2，151.1，172.1，
173.4（第３図参照）。 (12) 呈色反応：過マンガン酸カリ陽性、ニンヒ
ドリン陰性高分解能のEI−MS ｍ／ｚ：323.17327より分
子式C₁₇H₂₅NO₅が導かれた。更に紫外部吸収ス
ペクトル（UVλ^MeOH _nax211nm）、赤外部吸収スペク
トル（IRλ^KBr _nax1730，1720，1680cm^-1）のデータよ
り、分子内にα，β−不飽和γ−ラクトン
【式】の存在と、【式】の存在が推定された。一方、1H−¹³Ｃシフト相関二
次元NMRのデータ（第４図）より炭素原子に直
接結合したプロトンの数は、22個である（第一
表）。従つて、残りの交換性のプロトンの数は３
個である。これらは、酸素原子又は窒素原子に結
合していると考えられる。５個存在する酸素原子
のうち、13C−NMRのケミカルシフトより（第
１表参照）、Ｃ＝Ｏ（δc172.1）【式】（δc173.4）の存在が知られ、又、ニンヒドリン
陰性と、先の赤外部吸収スペクトルのデータより
導かれた【式】の部分構造を加え、３個の交換性のプロトンは、窒素原子に１個、残りの
２個は、酸素原子に−OHとして結合すると考え
られる。一方分子式から計算した不飽和数は、５
で、二重結合１個と、Ｃ＝Ｏを１個含むことに
より、三環性の化合物である。更に、1H，13C
−NMRスペクトルより部分構造として、
【式】CH₃−Ｃ，−CH₂−CH₂−CH₂ −を含むことも合せて、本化合物をdrimane型の
骨格を有するセスキテルペン系の化合物と推定し
た。以上の理化学的性質を有する化合物は、他に
該当する物は無く、ペレニポリンＣは、新規物質
である。【表】／

Claims

【特許請求の範囲】１下記の理化学的性質を有する新規物質ペレニ
ポリンＣ (1) 外観：白色針状結晶 (2) 元素分析値：炭素63.0％、水素7.5％、窒素
4.1％（重量比） (3) 分子量：EI−MS ｍ／ｚ：323（M⁺） (4) 分子式：C₁₇H₂₅NO₅（高分解能EI−MSm／
ｚ：323.17327より） (5) 比旋光度：〔α〕²⁴ _D＋17.3°（C0.075、メタノー
ル） (6) 融点：212−214℃ (7) 溶解性：メタノール、酢酸エチルに可溶、水
にわずかに溶ける。 (8) 紫外線吸収スペクトル：UVλ^MeOH _nax（nm）：211 (9) 赤外線吸収スペクトル：IRν^KBr _nax（cm^-1）：
1730，1720，1680，1362，1250，1030（臭化カ
リウム錠剤で測定） (10) 水素核磁気共鳴スペクトル：δ_H（ppm）：
1.02，1.07，1.18，1.31，1.49，1.53，1.56，
1.66，1.83，2.04，2.59，4.14，5.44，5.56（重メ
タノール中で測定） (11) 炭素核磁気共鳴スペクトル：δ_C（ppm）：
19.6，21.4，21.7，23.6，33.8，34.4，37.1，
37.9，44.3，50.2，64.8，74.5，78.2，144.2，
151.1，172.1，173.4（重メタノール中で測定） (12) 呈色反応：過マンガン酸カリ陽性、ニンヒ
ドリン陰性。