JPH05294952A

JPH05294952A - 抗生物質ｗａｐ−４０６８および誘導体ならびにそれらの製造法

Info

Publication number: JPH05294952A
Application number: JP12109392A
Authority: JP
Inventors: Haruhisa Hirata; 晴久平田; Seigo Nakatani; 清吾中谷; Azusa Katou; あずさ加藤; Takeshi Aiba; 勇志相場; Yoshitami Ohashi; 良民大橋; Masayoshi Goto; 正義後藤
Original assignee: Wakamoto Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Wakamoto Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 1992-04-16
Filing date: 1992-04-16
Publication date: 1993-11-09

Abstract

(57)【要約】（修正有）【目的】カンジダ症及びアスペルギルス症などの真菌
感染症の治療に有用な新規抗生物質ならびに該抗生物質
を産生する微生物の探索。【構成】一般式〔Ｉ〕で示される新規抗生物質ＷＡＰ
−４０６８、該ＷＡＰ−４０６８を加水分解して得られ
る一般式〔II〕で示される化合物および一般式〔Ｉ〕の
化合物または一般式〔II〕の化合物をエステル化して得
られる誘導体ならびに、該抗生物質を産生するシュード
モナス属に属する生産菌および該抗生物質、該化合物な
らびに誘導体を有効成分とする抗真菌剤。〔式中、Ｒ_１はＣＨ_３−ＣＨ_２−ＣＨ＝ＣＨ−（Ｃ
Ｈ_２）_２−，ＣＨ_３−（ＣＨ_２）_５−，ＣＨ_３−ＣＨ_２
−ＣＨ＝ＣＨ−（ＣＨ_２）_４−，ＣＨ_３−（ＣＨ_２）_４
−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ_２−またはＣＨ_３−（ＣＨ_２）_７−
を示す〕【効果】カンジダ・アルビカンスおよびアスペルギル
ス・フミガタスに対し強い抗菌活性を示した。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、新規抗生物質ＷＡＰ−
４０６８およびその誘導体、それらの製造法ならびにそ
の用途に関する。本発明の化合物は抗真菌活性を有し、
真菌の感染症に対する化学療法剤に期待される。

【０００２】

【従来の技術】従来、真菌感染症の治療剤としてはアン
ホテリシンＢ，ナイスタチン，ミコナゾール，フルコナ
ゾール，ピロールニトリン等の化学療法剤が使用されて
いる。

【０００３】

【発明が解決しようとする課題】しかし、これらの化学
療法剤は毒性や効力などにおいて満足すべきものではな
く、また度重なる使用による耐性菌の出現が問題となっ
てきている。この問題を解決するため、より低毒性すな
わち選択毒性の優れた臨床上有用な新規抗生物質が必要
とされている。

【０００４】

【課題を解決するための手段】本発明者らは新規な抗生
物質の探索を目的として主に土壌中から多数の微生物を
分離し、生物学的性質を調べたところ、シュードモナス
属に属する細菌の培養濾液中にカンジダ・アルビカンス
をはじめその他の病原性微生物に対し抗菌活性を示す文
献末記載の５種類の新規抗生物質が生産されることを見
出した。これらの抗生物質を該培養液から単離・精製
し、その物理化学的性質を調べた結果、当該物質が新規
化合物であることを確認し、これらをＷＡＰ−４０６８
Ａ₁，Ａ₂，Ａ₃，Ａ₄およびＡ₅とそれぞれ称するこ
とにした。

【０００５】本発明者らは、これらの知見に基づいてさ
らに研究を重ねた結果、本発明を完成した。すなわち本
発明は、（１）（Ｉ）式

【０００６】

【化５】〔式中、Ｒ₁はＣＨ₃−ＣＨ₂−ＣＨ＝ＣＨ−（Ｃ
Ｈ₂）₂−、ＣＨ₃−（ＣＨ₂）₅−、ＣＨ₃−ＣＨ₂
−ＣＨ＝ＣＨ−（ＣＨ₂）₄−、ＣＨ₃−（ＣＨ₂）₄
−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ₂−またはＣＨ₃−（ＣＨ₂）₇−
を示す〕で表される化合物またはその塩、

【０００７】（２）化合物（Ｉ）を加水分解して得られ
る（II）式

【０００８】

【化６】〔式中、Ｒ₁はＣＨ₃−ＣＨ₂−ＣＨ＝ＣＨ−（Ｃ
Ｈ₂）₂−、ＣＨ₃−（ＣＨ₂）₅−、ＣＨ₃−ＣＨ₂
−ＣＨ＝ＣＨ−（ＣＨ₂）₄−、ＣＨ₃−（ＣＨ₂）₄
−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ₂−またはＣＨ₃−（ＣＨ₂）₇−
を示す〕で表される化合物またはその塩、

【０００９】（３）化合物（Ｉ）または（II）またはそ
の塩をエステル化して得られる（III ）式または（IV）
式

【００１０】

【化７】

【００１１】

【化８】〔式中、Ｒ₁はＣＨ₃−ＣＨ₂−ＣＨ＝ＣＨ−（Ｃ
Ｈ₂）₂−、ＣＨ₃−（ＣＨ₂）₅−，ＣＨ₃−ＣＨ₂
−ＣＨ＝ＣＨ−（ＣＨ₂）₄−、ＣＨ₃−（ＣＨ₂）₄
−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ₂−またはＣＨ₃−（ＣＨ₂）
₇を、−ＣＯＯＲ₂はエステル化されたカルボキシル基
を示す〕で表される化合物、

【００１２】（４）シュードモナス属に属し、化合物
（Ｉ）のうち少なくとも１種を生産する能力を有する生
産菌を培地で培養し、培養物中に該化合物を生成蓄積せ
しめ、これを採取することを特徴とする該化合物または
その塩の製造法、

【００１３】（５）式（Ｉ）、（II）、（III ）及び
（IV）で示される化合物またはその塩からえらばれる少
なくとも１種の化合物を有効成分とする抗真菌剤、及び
化合物（Ｉ）のうち少なくとも１種を生産する能力を有
するシュードモナス属生産菌に関する。

【００１４】なお、本明細書においてＷＡＰ−４０６８
Ａ₁，Ａ₂，Ａ₃，Ａ₄及びＡ₅は次の化合物を意味す
るものとする。ＷＡＰ−４０６８Ａ₁：式（Ｉ）においてＲ₁がＣＨ₃
−ＣＨ₂−ＣＨ＝ＣＨ−（ＣＨ₂）₂−。ＷＡＰ−４０６８Ａ₂：式（Ｉ）においてＲ₁がＣＨ₃
−（ＣＨ₂）₅−。ＷＡＰ−４０６８Ａ₃：式（Ｉ）においてＲ₁がＣＨ₃
−ＣＨ₂−ＣＨ＝ＣＨ−（ＣＨ₂）₄−。ＷＡＰ−４０６８Ａ₄：式（Ｉ）においてＲ₁がＣＨ₃
−（ＣＨ₂）₄−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ₂−。ＷＡＰ−４０６８Ａ₅：式（Ｉ）においてＲ₁がＣＨ₃
−（ＣＨ₂）₇−。

【００１５】またＷＡＰ−４０６８Ｂ₁，Ｂ₂，Ｂ₃，
Ｂ₄及びＢ₅は次の化合物を意味するものとする。ＷＡＰ−４０６８Ｂ₁：式（II）においてＲ₁がＣＨ₃
−ＣＨ₂−ＣＨ＝ＣＨ−（ＣＨ₂）₂−。ＷＡＰ−４０６８Ｂ₂：式（II）においてＲ₁がＣＨ₃
−（ＣＨ₂）₅−。ＷＡＰ−４０６８Ｂ₃：式（II）においてＲ₁がＣＨ₃
−ＣＨ₂−ＣＨ＝ＣＨ−（ＣＨ₂）₄−。ＷＡＰ−４０６８Ｂ₄：式（II）においてＲ₁がＣＨ₃
−（ＣＨ₂）₄−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ₂−。ＷＡＰ−４０６８Ｂ₅：式（II）においてＲ₁がＣＨ₃
−（ＣＨ₂）₇−。

【００１６】またＷＡＰ−４０６８Ｃ₁，Ｃ₂，Ｃ₃，
Ｃ₄及びＣ₅は次の化合物を意味するものとする。ＷＡＰ−４０６８Ｃ₁：式（III ）においてＲ₁がＣＨ
₃−ＣＨ₂−ＣＨ＝ＣＨ−（ＣＨ₂）₂−、Ｒ₂がメチ
ル。ＷＡＰ−４０６８Ｃ₂：式（III ）においてＲ₁がＣＨ
₃−（ＣＨ₂）₅−。Ｒ₂がメチル。ＷＡＰ−４０６８Ｃ₃：式（III ）においてＲ₁がＣＨ
₃−ＣＨ₂−ＣＨ＝ＣＨ−（ＣＨ₂）₄−、Ｒ₂がメチ
ル。ＷＡＰ−４０６８Ｃ₄：式（III ）においてＲ₁がＣＨ
₃−（ＣＨ₂）₄−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ₂−、Ｒ₂がメチ
ル。ＷＡＰ−４０６８Ｃ₅：式（III ）においてＲ₁がＣＨ
₃−（ＣＨ₂）₇−、Ｒ₂がメチル。

【００１７】またＷＡＰ−４０６８Ｄ₁，Ｄ₂，Ｄ₃，
Ｄ４及びＤ₅は次の化合物を意味するものとする。ＷＡＰ−４０６８Ｄ₁：式（IV）においてＲ₁がＣＨ₃
−ＣＨ₂−ＣＨ＝ＣＨ−（ＣＨ₂）₂−、Ｒ₂がメチ
ル。ＷＡＰ−４０６８Ｄ₂：式（IV）においてＲ₁がＣＨ₃
−（ＣＨ₂）₅−、Ｒ₂がメチル。ＷＡＰ−４０６８Ｄ₃：式（IV）においてＲ₁がＣＨ₃
−ＣＨ₂−ＣＨ＝ＣＨ−（ＣＨ₂）₄−、Ｒ₂がメチ
ル。ＷＡＰ−４０６８Ｄ₄：式（IV）においてＲ₁がＣＨ₃
−（ＣＨ₂）₄−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ₂−、Ｒ₂がメチ
ル。ＷＡＰ−４０６８Ｄ₅：式（IV）においてＲ₁がＣＨ₃
−（ＣＨ₂）₇−、Ｒ₂がメチル。

【００１８】本発明で使用されるＷＡＰ−４０６８生産
菌としては、ＷＡＰ−４０６８を産生する微生物であれ
ばどのような微生物でも良いが、一例として本発明者ら
が岐阜県岐阜市の土壌より分離したシュードモナス属に
属するＷＡＰ−４０６８株が挙げられる。

【００１９】（生産菌の菌学的性質）ＷＡＰ−４０６８
株の菌学的性質を以下に示す。（ａ）形態肉汁寒天平板上で２５℃、１日間培養後の観察では、細
胞は直径０．６〜１．２μｍ、長さ０．８〜２．０μｍ
の桿状であり、極毛の鞭毛を有し、運動性を示す。胞子
を形成せず、またグラム染色は陰性である。

【００２０】（ｂ）各種培地における生育状態２５℃で培養し、３ないし７日間にわたって観察した。肉汁寒天平板培養：コロニーは不透明な黄色で、良好
な光沢を有し、円形でかつ表面は円滑、凸状に隆起し、
周縁は全円状である。培地へ黄色の色素拡散が認められ
る。肉汁寒天斜面培養：拡布上に生育し、不透明な黄色
で、良好な光沢を有する。培地へ黄色の色素拡散が認め
られる。肉汁液体培養：混濁状に生育し、黄色の菌膜、沈殿を
形成する。肉汁ゼラチン穿刺培養：主として上部で生育し、液化
する。リトマス・ミルク：リトマスの還元能は認められな
い。ペプトン化能が認められた。

【００２１】（ｃ）生理学的性質１硝酸塩の還元：＋２脱窒反応： − ３ＭＲテスト： − ４ＶＰテスト： − ５インドールの生成： − ６硫化水素の生成： − ７デンプンの加水分解：＋８クエン酸の利用：（１）コーゼル＋（２）クリステンセン＋９無機窒素源の利用：（１）硝酸ナトリウム − （２）硫酸アンモニウム − １０色素の生成：（１）キングＡ培地拡散性色素の産生（２）キングＢ培地拡散性色素の産生１１ウレアーゼ：＋１２オキシダーゼ：＋１３カタラーゼ：＋１４生育温度：１５−４０℃ １５生育ｐＨ：５−８１６酸素に対する態度：好気性１７Ｏ−Ｆテスト：酸化

【００２２】１８糖類から酸、ガスの生成および利用性： ────────────────────────────────── 酸の生成ガスの生成利用性（ペプトン水）（肉汁寒天）（デービス培地） ────────────────────────────────── Ｌ−アラビノース − − ＋Ｄ−キシロース − − ＋Ｄ−グルコース＋ − ＋Ｄ−マンノース − − ＋Ｄ−フラクトース − − ＋Ｄ−ガラクトース＋ − ＋麦芽糖 − − ＋ショ糖＋ − ＋乳糖 − − ＋トレハロース − − ＋Ｄ−ソルビット − − ＋Ｄ−マンニット − − ＋イノシット − − ＋グリセリン − − ＋デンプン − − ＋ ──────────────────────────────────

【００２３】以上の菌学的性質を有するＷＡＰ−４０６
８株をバージーズ・マニュアル・オブ・システマティッ
ク・バクテリオロジー（Ｂｅｒｇｅｙ’ｓＭａｎｕａ
ｌｏｆＳｙｓｔｅｍａｔｉｃＢａｃｔｅｒｉｏｌｏ
ｇｙ）第１巻（１９８４年）に記載の種と照合すると、
グラム陰性桿菌で、鞭毛による運動性を示し、胞子を形
成せず、好気性で、カタラーゼ陽性、オキシダーゼ陽性
で、グルコースより酸を生成し、Ｏ−Ｆテストが酸化的
であることから、シュードモナス属に属すると考えられ
た。しかし、既知菌種のうち、本菌株と性質の一致する
ものがないため、本菌株をシュードモナス・エスピー
ＷＡＰ−４０６８（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｓｐ・Ｗ
ＡＰ−４０６８）と称することにした。シュードモナス
・エスピーＷＡＰ−４０６８は工業技術院微生物工業
技術研究所に受託番号ＦＥＲＭＰ−１２９１７として寄
託されている。

【００２４】シュードモナス属細菌の一般的性状として
その菌学的性質は極めて変異しやすく、ＷＡＰ−４０６
８株も例外ではない。従って、どのような変異株であっ
ても抗生物質ＷＡＰ−４０６８を生産する能力を有する
生産菌はすべて本発明方法において使用することができ
る。

【００２５】（培養と生産）本発明の抗生物質ＷＡＰ−
４０６８Ａ₁〜Ａ₅は、上記生産菌を栄養源含有培地に
接種し、好気的に培養することによって製造される。抗
生物質ＷＡＰ−４０６８Ａ₁〜Ａ₅の生産菌の培養に際
しては、炭素源として例えば、グルコース，フラクトー
ス，デンプン，デキストリン，グリセリン，糖蜜，水
飴，油脂類，有機酸類などの資化し得る有機炭素化合物
が利用され、一方、窒素源としては、例えば、大豆粉，
綿実粉，コーンスチープリカー，カゼイン，ペプトン，
酵母エキス，肉エキス，胚芽，尿素，アミノ酸類，アン
モニウム塩などの有機窒素化合物や無機窒素化合物が利
用できる。また、塩類としては例えば、ナトリウム塩，
カリウム塩，カルシウム塩，マグネシウム塩，リン酸塩
などの無機塩類が単独あるいは適宜組合わせて使用する
ことができる。さらに必要に応じて、鉄塩，銅塩，亜鉛
塩，コバルト塩などの重金属や、微生物の生育に必要な
ビオチン，ビタミンＢ₁などのビタミン類をはじめ、そ
の他生産菌の生育を促進し、ＷＡＰ−４０６８Ａ₁〜Ａ
₅を著量生産することができる有機物や無機物を適宜添
加することが望ましい。また、シリコーンオイル、ポリ
アルキレングリコールエーテルなどの消泡剤や界面活性
剤を培地に加えても良い。

【００２６】培養法としては、一般に抗生物質の生産に
用いられている方法が採用されるが、液体培養法では、
特に好気性に保つために深部通気撹拌培養が好ましく、
実験室的にはフラスコによる通常の振盪培養が適してい
る。培養温度は通常２０〜４０℃で可能であるが、好ま
しくは２５〜３０℃に保つことが望ましい。培養のｐＨ
は６〜８付近で可能であるが、好ましくは７付近に保つ
ことが望ましい。培養物中のＷＡＰ−４０６８Ａ₁〜Ａ
₅生産は２〜６日間位で充分達成される。

【００２７】（単離・精製）以上のごとく、培養物中に
蓄積されたＷＡＰ−４０６８Ａ₁〜Ａ₅を培養物中から
採取するためには、後記する本抗生物質の物理化学的性
質を利用することによって有利に行い得る。すなわち、
ＷＡＰ−４０６８Ａ₁〜Ａ₅は培養濾液中に含有されて
いるので、まず培養物にセライトやラジオライトなどの
濾過助剤を加えて減圧濾過を行うか、遠心分離すること
によって菌体を除去して培養濾液を得る。得られた培養
濾液から粗物質を得るには培養濾液を適宜の担体に接触
させて有効成分を吸着させ、次いで適宜の溶媒で脱着さ
せ、分別採取するクロマトグラフィー法あるいは培養濾
液を水と混合しない有機溶媒で有効成分を抽出する抽出
法が有利に利用される。クロマトグラフィーの担体とし
ては吸着性樹脂、シリカゲルなど化合物の吸着性の差を
利用するものが有利に用いられる。これら担体から目的
とする化合物を溶出するためには担体の種類、性質によ
って組み合せが異なるが、たとえば有機溶媒や水溶性有
機溶媒の水溶液などが適宜用いられる。またこれらのク
ロマトグラフィーによって得られた本化合物の粗物質を
逆相系シリカゲルカラムクロマトグラフィーに付しさら
に精製することもできる。

【００２８】さらに詳しく述べるならば、担体として吸
着性樹脂たとえばダイヤイオンＨＰ２０、セパビーズＳ
Ｐ２０７（三菱化成社製）、アンバーライトＸＡＤ−２
（ロームアンドハース社製）などを用いると、培養濾液
中の活性物質は吸着され、有機溶媒と水溶液の混合液例
えば、アセトンあるいはメタノールなどと水または塩類
あるいはアルカリ含有の水溶液もしくは緩衝液などとの
混合液で溶出される。

【００２９】またＷＡＰ−４０６８Ａ₁〜Ａ₅は酸性水
溶液中から水と分別し得る有機溶媒たとえばｎ−ブタノ
ール，酢酸エチル，クロロホルムなどで抽出される。さ
らにＷＡＰ−４０６８Ａ₁〜Ａ₅はシリカゲル６０（エ
ーメルク社製）などの担体に吸着せしめ、適当な有機溶
媒たとえばクロロホルム、酢酸エチル、アセトン、エー
テルあるいはこれらの混合溶媒によって溶出される。逆
相系シリカゲルカラムクロマトグラフィーに用いられる
担体としてはたとえばＹＭＣゲル（山村化学研究所製）
が挙げられ、溶媒としてはメタノールあるいはアセトニ
トリルなどと水あるいは緩衝液などとの混合液が用いら
れる。ＷＡＰ−４０６８Ａ₁〜Ａ₅の精製には以上述べ
た方法の組み合せの他に濃縮、晶出、凍結乾燥など通常
の実験室で用いられる方法が随時組み合わされる。ＷＡ
Ｐ−４０６８Ａ₁〜Ａ₅は遊離体として単離されるが、
遊離体から薬理学的に許容される塩（たとえば、ナトリ
ウム塩、カリウム塩など）を調製するには公知の方法に
よって行われる。

【００３０】（物理化学的性質）後記する実施例３で得
られるＷＡＰ−４０６８Ａ₁〜Ａ₅（遊離体）の物理化
学的性質を以下に示す。

【００３１】ＷＡＰ−４０６８Ａ₁（遊離体）１）外観：無色シロップ２）分子量：２５２（ＥＩ−ＭＳ法によるｍ／ｚ２５
２（Ｍ⁺））３）分子式：Ｃ₁₃Ｈ₁₆Ｏ₅ ４）紫外線吸収スペクトル：エタノール中 λ_max＝２４６_nm（肩、Ｅ_1cm ^1%＝１００）５）赤外線吸収スペクトル（ＩＲ）：ＮａＣｌ法、主な
吸収を示す（波数、ｃｍ^-1）２９２８，１８４０，１７６９，１７１５，１４４１，
１２６７，１０８１，９１１，８０３，７５０６）¹ＨＮＭＲスペクトル：２７０ＭＨｚ，ＣＤＣ
ｌ₃中、下記のシグナルが認められる（δ ｐｐｍ）０．８６（３Ｈ、ｔ、Ｊ＝７．４Ｈｚ），１．９２（２
Ｈ、ｑｕｉｎｔ、Ｊ＝７．４Ｈｚ），２．３１（２Ｈ、
ｑ、Ｊ＝７．４Ｈｚ），２．５１（２Ｈ、ｔ、Ｊ＝７．
４Ｈｚ），２．６９（４Ｈ、ｂｒｏａｄｓ），５．２
１（１Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝７．４、１７．８Ｈｚ），５．３
８（１Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝７．４、１７．８Ｈｚ）７）¹³ＣＮＭＲスペクトル：６７．９ＭＨｚ、ＣＤ
Ｃｌ₃中、下記のシグナルが認められる（δｐｐｍ）１７５．０，１６５．６，１６５．４，１４５．４，１
４２．１，１３４．５，１２５．７，３０．７，２５．
２，２４．７，２０．５，１９．７，１４．２８）溶解性：可溶：メタノール，アセトン，酢酸エチル，クロロホル
ム，エーテル難溶：水，石油エーテル，ｎ−ヘキサン９）物質区分：酸性物質１０）薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）：担体溶媒系Ｒｆシリカゲル６０Ｆ₂₅₄ ^*クロロホルム：酢酸（５０：１）０．２２ＲＰ−１８Ｆ_254S ^* アセトニトリル：水（７：３）０．５９ ^*エーメルク社製１１）呈色反応陽性：ヨードベーパー，過マンガン酸カリウム，ＵＶ
₂₅₄によるクエンチング陰性：ニンヒドリン，モーリッシュ，エルソンモルガ
ン，ドラーゲンドルフ

【００３２】ＷＡＰ−４０６８Ａ₂（遊離体）１）外観：無色シロップ２）分子量：２５４（ＥＩ−ＭＳ法によるｍ／ｚ２３
６（Ｍ⁺−１８））３）分子式：Ｃ₁₃Ｈ₁₈Ｏ₅ ４）紫外線吸収スペクトル：メタノール中 λ_max＝２５１_nm（Ｅ_1cm ^1%＝１５３）５）赤外線吸収スペクトル：ＮａＣｌ法、主な吸収を示
す（波数、ｃｍ^-1）２９３０，１８４０，１７６９，１７１５，１２７２，
１０７９，９０９，７５２，５９０６）¹ＨＮＭＲスペクトル：２７０ＭＨｚ，ＣＤＣ
ｌ₃中、下記のシグナルが認められる（δ ｐｐｍ）０．８２（３Ｈ、ｔ、Ｊ＝６．４Ｈｚ），１．３１（６
Ｈ、ｍ），１．５０（２Ｈ、ｑｕｉｎｔ、Ｊ＝７．５Ｈ
ｚ），２．４３（２Ｈ、ｔ、Ｊ＝７．５Ｈｚ），２．７
０（４Ｈ、ｂｒｏａｄｓ），７．２０（１Ｈ、ｂｒｏ
ａｄ）７）¹³ＣＮＭＲスペクトル：６７．９ＭＨｚ、ＣＤ
Ｃｌ₃中、下記のシグナルが認められる（δ ｐｐｍ）１７６．９，１６５．６，１６５．４，１４６．３，１
４１．４，３１．３，３０．９，２９．２，２７．８，
２４．６，２２．４，１９．６，１４．０８）溶解性：可溶：メタノール，アセトン，酢酸エチル，クロロホル
ム，エーテル難溶：水，石油エーテル，ｎ−ヘキサン９）物質区分：酸性物質１０）薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）：担体溶媒系Ｒｆシリカゲル６０Ｆ₂₅₄ ^-クロロホルム：酢酸（５０：１）０．２２ＲＰ−１８Ｆ_254S ^- アセトニトリル：水（７：３）０．５８１１）呈色反応陽性：過マンガン酸カリウム，ＵＶ₂₅₄によるクエンチ
ング陰性：ニンヒドリン，モーリッシュ，エルソンモルガ
ン，ドラーゲンドルフ

【００３３】ＷＡＰ−４０６８Ａ₃（遊離体）１）外観：無色シロップ２）分子量：２８０（ＥＩ−ＭＳ法によるｍ／ｚ２６
２（Ｍ⁺−１８））３）分子式：Ｃ₁₅Ｈ₂₀Ｏ₅ ４）紫外線吸収スペクトル：メタノール中 λ_max＝２４７_nm（Ｅ_1cm ^1%＝９１）５）赤外線吸収スペクトル：ＮａＣｌ法、主な吸収を示
す（波数、ｃｍ^-1）２９３４，２８６２，１８４５，１７６９，１７１５，
１４３７，１２７４，１０７３，９１１，７４８６）¹ＨＮＭＲスペクトル：２７０ＭＨｚ，ＣＤＣ
ｌ₃中、下記のシグナルが認められる（δ ｐｐｍ）０．８８（３Ｈ、ｔ、Ｊ＝７．４Ｈｚ），１．３１（２
Ｈ、ｑｕｉｎｔ、Ｊ＝７．４Ｈｚ），１．５２（２Ｈ、
ｑｕｉｎｔ、Ｊ＝７．４Ｈｚ），１．９８（４Ｈ、ｑ×
２、Ｊ＝６．９Ｈｚ），２．４３（２Ｈ、ｔ、Ｊ＝７．
４Ｈｚ），２．６９（４Ｈ、ｂｒｏａｄｓ），５．２
３（１Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝６．９、１７．８Ｈｚ），５．３
０（１Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝６．９、１７．８Ｈｚ），９．５
（１Ｈ、ｂｒｏａｄ）７）¹³ＣＮＭＲスペクトル：６７．９ＭＨｚ、ＣＤ
Ｃｌ₃中、下記のシグナルが認められる（δ ｐｐｍ）１７７．３，１６５．５，１６５．３，１４６．１，１
４１．５，１３２．５，１２８．０，３１．０，２９．
５，２７．４，２６．６，２４．５，２０．５，１９．
６，１４．３８）溶解性：可溶：メタノール，アセトン，酢酸エチル，クロロホル
ム，エーテル難溶：水，石油エーテル，ｎ−ヘキサン９）物質区分：酸性物質１０）薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）：担体溶媒系Ｒｆシリカゲル６０Ｆ₂₅₄ クロロホルム：酢酸（５０：１）０．２２ＲＰ−１８Ｆ_254S アセトニトリル：水（７：３）０．５３１１）呈色反応陽性：ヨードベーパー，過マンガン酸カリウム，ＵＶ
₂₅₄によるクエンチング陰性：ニンヒドリン，モーリッシュ，エルソンモルガ
ン，ドラーゲンドルフ

【００３４】ＷＡＰ−４０６８Ａ₄（遊離体）１）外観：無色シロップ２）分子量：２８０（ＥＩ−ＭＳ法によるｍ／ｚ２６
２（Ｍ⁺−１８））３）分子式：Ｃ₁₅Ｈ₂₀Ｏ₅ ４）紫外線吸収スペクトル：メタノール中 λ_max＝２４６_nm（肩、Ｅ_1cm ^1%＝１２０）５）赤外線吸収スペクトル：ＮａＣｌ法、主な吸収を示
す（波数、ｃｍ^-1）２９３０，２８６２，１８４１，１７６９，１７１５，
１４３５，１２７２，１２１２，１０８１，９１３，７
３５６）¹ＨＮＭＲスペクトル：２７０ＭＨｚ，ＣＤＣ
ｌ₃中、下記のシグナルが認められる（δ ｐｐｍ）０．８２（３Ｈ、ｔ、Ｊ＝６．７Ｈｚ），１．２４（６
Ｈ、ｍ），２．１０（２Ｈ、ｑ、Ｊ＝６．９Ｈｚ），
２．７０（４Ｈ、ｔ×２），３．２０（２Ｈ、ｄ、Ｊ＝
６．９Ｈｚ），５．２５（１Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝６．９、１
７．８Ｈｚ），５．５０（１Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝６．９、１
７．８Ｈｚ），８．８０（１Ｈ、ｂｒｏａｄ）７）¹³ＣＮＭＲスペクトル：６７．９ＭＨｚ、ＣＤ
Ｃｌ₃中、下記のシグナルが認められる（δ ｐｐｍ）１７７．９，１６６．０，１６５．６，１４４．９，１
４２．０，１３５．１，１２１．５，３１．９，３１．
４，２９．３，２７．８，２３．２，２２．９，２０．
０，１４．４８）溶解性：可溶：メタノール，アセトン，酢酸エチル，クロロホル
ム，エーテル難溶：水，石油エーテル，ｎ−ヘキサン９）物質区分：酸性物質１０）薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）：担体溶媒系Ｒｆシリカゲル６０Ｆ₂₅₄ クロロホルム：酢酸（５０：１）０．２２ＲＰ−１８Ｆ_254S アセトニトリル：水（７：３）０．４６１１）呈色反応陽性：ヨードベーパー，過マンガン酸カリウム，ＵＶ
₂₅₄によるクエンチング陰性：ニンヒドリン，モーリッシュ、エルソンモルガ
ン，ドラーゲンドルフ

【００３５】ＷＡＰ−４０６８Ａ₅（遊離体）１）外観：白色針状結晶２）分子量：２８２（ＥＩ−ＭＳ法によるｍ／ｚ２８
２（Ｍ⁺））３）分子式：Ｃ₁₅Ｈ₂₂Ｏ₅ ４）紫外線吸収スペクトル：メタノール中 λ_max＝２４６_nm（肩、Ｅ_1cm ^1%＝１０９）５）赤外線吸収スペクトル：ＮａＣｌ法、主な吸収を示
す（波数、ｃｍ^-1）（図１）２９２８，１８４０，１７６７，１７１５，１４３５，
１２６７，１０８５，９１１６）¹ＨＮＭＲスペクトル：２７０ＭＨｚ，ＣＤＣ
ｌ₃中、下記のシグナルが認められる（δ ｐｐｍ）
（図２）０．９７（３Ｈ、ｔ、Ｊ＝６．５Ｈｚ），１．３６（１
０Ｈ、ｍ），１．６５（２Ｈ、ｑｕｉｎｔ、Ｊ＝７．８
Ｈｚ），２．５８（２Ｈ、ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ），２．
８５（４Ｈ、ｂｒｏａｄｓ），１０．４０（１Ｈ、ｂ
ｒｏａｄ）７）¹³ＣＮＭＲスペクトル：６７．９ＭＨｚ、ＣＤ
Ｃｌ₃中、下記のシグナルが認められる（δ ｐｐｍ）
（図３）１７７．７，１６５．６，１６５．４，１４６．３，１
４１．４，３１．７，３１．１，２９．５，２９．１，
２９．０，２７．８，２４．５，２２．６，１９．５，
１４．０８）溶解性：可溶：メタノール，アセトン，酢酸エチル，クロロホル
ム，エーテル難溶：水，石油エーテル，ｎ−ヘキサン９）物質区分：酸性物質１０）薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）：担体溶媒系Ｒｆシリカゲル６０Ｆ₂₅₄ クロロホルム：酢酸（５０：１）０．２２ＲＰ−１８Ｆ_254S アセトニトリル：水（７：３）０．４１１１）融点：３８℃ １２）呈色反応陽性：過マンガン酸カリウム，ＵＶ₂₅₄によるクエンチ
ング陰性：ニンヒドリン，モーリッシュ、エルソンモルガ
ン，ドラーゲンドルフ

【００３６】（誘導体の調製と物理化学的性質）次にＷ
ＡＰ−４０６８Ａ₁〜Ａ₅の誘導体について述べる。Ｗ
ＡＰ−４０６８Ａ₁〜Ａ₅を加水分解すると分子内に存
在する環状無水物が開環した前記式（II）で表される誘
導体ＷＡＰ−４０６８Ｂ₁〜Ｂ₅が得られる。加水分解
の方法としては、酸あるいは塩基による方法が有利に用
いられる。酸による方法の場合には酸として、たとえば
塩酸、硫酸などの無機酸、ギ酸、酢酸などの有機酸など
が使用される。塩基による方法の場合には塩基として、
たとえばナトリウム，カリウムなどのアルカリ金属もし
くはカルシウム，マグネシウムなどのアルカリ土類金属
の水酸化物、炭酸塩などの無機塩基などが使用される。
酸または塩基による方法において反応温度は通常冷却下
ないし加温程度で行われ、反応時間は３０分ないし２４
時間である。

【００３７】後記する実施例４で得られるＷＡＰ−４０
６８Ｂ₁〜Ｂ₅（３ナトリウム塩）の物理化学的性質を
以下に示す。ＷＡＰ−４０６８Ｂ₁（３ナトリウム塩）ＩＲ（ＫＢ_r）：３４４８，２９３０，２８６６，１５
６４，１４１７ｃｍ^-1 ¹ ＨＮＭＲ（Ｄ₂Ｏ）：δ ｐｐｍ０．９９（３Ｈ、ｔ），２．１４（４Ｈ、ｍ），２．３
１（４Ｈ、ｍ），２．５０（２Ｈ、ｍ），５．５４（２
Ｈ、ｍ）。ＴＬＣＲｆＲＰ−１８Ｆ_254S アセトニトリル：水（１：１）０．５８ＷＡＰ−４０６８Ｂ₂（３ナトリウム塩）

【００３８】ＩＲ（ＫＢ_r）：３４６６，２９３０，２
８６４，１５７２，１４６２，１４１９，８６４，８２
０，７９１ｃｍ^-1 ¹ ＨＮＭＲ（Ｄ₂Ｏ）：δ ｐｐｍ０．９１（３Ｈ、ｔ），１．３２（８Ｈ、ｍ），２．２
９（４Ｈ、ｍ），２．４９（２Ｈ、ｍ）。ＴＬＣＲｆＲＰ−１８Ｆ_254S アセトニトリル：水（１：１）０．５４ＷＡＰ−４０６８Ｂ₃（３ナトリウム塩）

【００３９】ＩＲ（ＫＢ_r）：３４７８，２９３０，２
８６２，１５６８，１４６２，１４１９ｃｍ^-1 ¹ ＨＮＭＲ（Ｄ₂Ｏ）：δ ｐｐｍ０．９０（３Ｈ、ｔ），１．３７（４Ｈ、ｍ），２．０
５（４Ｈ、ｍ），２．２２（４Ｈ、ｍ），２．４２（２
Ｈ、ｍ），５．４３（２Ｈ、ｍ）。ＴＬＣＲｆＲＰ−１８Ｆ_254S アセトニトリル：水（１：１）０．５３ＷＡＰ−４０６８Ｂ₄（３ナトリウム塩）

【００４０】ＩＲ（ＫＢ_r）：３４２４，２９２８，２
８６０，１５６２，１４６２，１４１９，８６２，７９
１ｃｍ^-1 ¹ ＨＮＭＲ（Ｄ₂Ｏ）：δ ｐｐｍ０．９３（３Ｈ、ｔ），１．３７（６Ｈ、ｍ），２．１
２（２Ｈ、ｑ），２．３２（２Ｈ、ｍ），２．５５（２
Ｈ、ｍ），３．０９（２Ｈ、ｄ），５．４４（１Ｈ、ｄ
ｄ），５．５５（１Ｈ、ｄｄ）。ＴＬＣＲｆＲＰ−１８Ｆ_254S アセトニトリル：水（１：１）０．５０ＷＡＰ−４０６８Ｂ₅（３ナトリウム塩）

【００４１】ＩＲ（ＫＢ_r）：３４８０，２９２８，２
８５６，１５７０，１４６２，１４１９，８６４，８２
０，７９１ｃｍ^-1 ¹ ＨＮＭＲ（Ｄ₂Ｏ）：δ ｐｐｍ０．９１（３Ｈ、ｔ），１．３４（１２Ｈ、ｍ），２．
２９（４Ｈ、ｍ），２．５３（２Ｈ、ｔ）。ＴＬＣＲｆＲＰ−１８Ｆ_254S アセトニトリル：水（１：１）０．４６

【００４２】次にＷＡＰ−４０６８Ａ₁〜Ａ₅のエステ
ル誘導体について述べる。ＷＡＰ−４０６８Ａ₁〜Ａ₅
をエステル化した前記式（III ）又は（IV）で表される
エステル誘導体におけるエステル化されたカルボキシル
基としては、たとえばメトキシカルボニル、エトキシカ
ルボニル、プロポキシカルボニル、ｎ−ブトキシカルボ
ニル、ベンジルオキシカルボニル、ｐ−ニトロベンジル
オキシカルボニル、ｐ−メトキシベンジルオキシカルボ
ニルなどが挙げられる。

【００４３】エステル化の方法としては、公知の方法た
とえば下記の方法が用いられる。１）化合物をジアゾメタンやトリメチルシリルジアゾメ
タンなどジアゾアルカンとメタノール、ベンゼンなど溶
媒の中で約０℃ないし還流温度で約２分から５時間反応
させる。２）化合物を鉱酸たとえば塩酸、硫酸やｐ−トルエンス
ルホン酸などを縮合剤としてアルコール類たとえばメタ
ノールなどと反応させる。反応は約０℃ないし還流温度
で、１５分から２４時間行う。溶媒はアルコールやベン
ゼン、トルエンなどが用いられる。３）化合物を活性化アルキルハライドたとえばメチルヨ
ーダイド、ベンジルブロミド、ｐ−ニトロベンジルブロ
ミドなどと反応させる。反応は約０℃ないし６０℃で約
２分から５時間反応させる。溶媒はジメチルホルムアミ
ド、ジメチルアセトアミドなどが用いられる。

【００４４】後記する実施例５、実施例６で得られるＷ
ＡＰ−４０６８Ａ₁〜Ａ₅のモノメチルエステル体ＷＡ
Ｐ−４０６８Ｃ₁〜Ｃ₅および開環トリメチルエステル
体ＷＡＰ−４０６８Ｄ₁〜Ｄ₅の物理化学的性質を以下
に示す。

【００４５】ＷＡＰ−４０６８Ｃ₁ 分子量２６６（ＥＩ−ＭＳｍ／ｚ２６６（Ｍ⁺））分子式Ｃ₁₄Ｈ₁₈Ｏ₅ ＵＶ（ＥｔＯＨ） λ_max ２４８_nm （Ｅ_1cm ^1% ８２）ＩＲ（ＮａＣｌ）２９２８，２８６０，１７７１，１７４２，１４３７，
１２７０，９０５ｃｍ^-1。¹ ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃） δ ｐｐｍ０．８７（３Ｈ、ｔ、Ｊ＝７．４Ｈｚ），１．９８（２
Ｈ、ｑｕｉｎｔ、Ｊ＝７．４Ｈｚ），２．２８（２Ｈ、
ｑ、Ｊ＝６．９Ｈｚ），２．５２（２Ｈ、ｔ、Ｊ＝７．
４Ｈｚ），２．６２（２Ｈ、ｍ），２．６８（２Ｈ、
ｍ），３．６２（３Ｈ、ｓ），５．２０（１Ｈ、ｍ），
５．３８（１Ｈ、ｍ）。ＴＬＣＲｆシリカゲル６０Ｆ₂₅₄ クロロホルム：酢酸（５０：１）０．５０ＲＰ−１８Ｆ_254S アセトニトリル：水（７：３）０．３８

【００４６】ＷＡＰ−４０６８Ｃ₂ 分子量２６８（ＥＩ−ＭＳｍ／ｚ２６８
（Ｍ⁺））分子式Ｃ₁₄Ｈ₂₀Ｏ₅ ＵＶ（ＥｔＯＨ） λ_max ２５１_nm （Ｅ_1cm ^1% ２２１）ＩＲ（ＮａＣｌ）２９３２，２８６２，１８４５，１７６９，１７４２，
１６７１，１４３７，１２７２，１２０３，１１７６，
１０７９，９０９ｃｍ ^-1。¹ ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃） δ ｐｐｍ０．７６（３Ｈ、ｔ），１．１８（６Ｈ、ｍ），１．４
１（２Ｈ、ｑｕｉｎｔ），２．３７（２Ｈ、ｔ），２．
５６（２Ｈ、ｍ），２．６２（２Ｈ、ｍ），３．５６
（３Ｈ、ｓ）。ＴＬＣＲｆシリカゲル６０Ｆ₂₅₄ クロロホルム：酢酸（５０：１）０．５０ＲＰ−１８Ｆ_254S アセトニトリル：水（７：３）０．３８

【００４７】ＷＡＰ−４０６８Ｃ₃ 分子量２９４（ＥＩ−ＭＳｍ／ｚ２９４（Ｍ⁺））分子式Ｃ₁₆Ｈ₂₂Ｏ₅ ＵＶ（ＥｔＯＨ） λ_max ２５０_nm （Ｅ_1cm ^1% ９９）ＩＲ（ＮａＣｌ）２９２８，２８６０，１７７１，１７４２，１４３７，
１２７６，１１７４，９０７ｃｍ^-1。¹ ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃） δ ｐｐｍ０．８９（３Ｈ、ｔ、Ｊ＝７．４Ｈｚ），１．３５（２
Ｈ、ｍ），１．５１（２Ｈ、ｍ），１．９９（４Ｈ、
ｍ），２．４４（２Ｈ、ｔ、Ｊ＝７．４Ｈｚ），２．６
２（２Ｈ、ｍ），２．６７（２Ｈ、ｍ），３．６２（３
Ｈ、ｓ），５．２４（１Ｈ、ｍ），５．３１（１Ｈ、
ｍ）。ＴＬＣＲｆシリカゲル６０Ｆ₂₅₄ クロロホルム：酢酸（５０：１）０．５０ＲＰ−１８Ｆ_254S アセトニトリル：水（７：３）０．２８

【００４８】ＷＡＰ−４０６８Ｃ₄ 分子量２９４（ＥＩ−ＭＳｍ／ｚ２９４
（Ｍ⁺））分子式Ｃ₁₆Ｈ₂₂Ｏ₅ ＵＶ（ＥｔＯＨ） λ_max ２５０_nm （Ｅ_1cm ^1% ７６）ＩＲ（ＮａＣｌ）２９２２，２８５４，１７７１，１７４２，１５６０，
１２０３ｃｍ^-1。¹ ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃） δ ｐｐｍ０．８１（３Ｈ、ｔ），１．１９（６Ｈ、ｍ），２．０
６（２Ｈ、ｍ），２．６１（２Ｈ、ｍ），２．７０（２
Ｈ、ｍ），３．２０（２Ｈ、ｄ、Ｊ＝６．４Ｈｚ），
３．６２（３Ｈ、ｓ），５．２６（１Ｈ、ｄｄ），５．
５１（１Ｈ、ｄｄ）。ＴＬＣＲｆシリカゲル６０Ｆ₂₅₄ クロロホルム：酢酸（５０：１）０．５０ＲＰ−１８Ｆ_254S アセトニトリル：水（７：３）０．２３

【００４９】ＷＡＰ−４０６８Ｃ₅ 分子量２９６（ＥＩ−ＭＳｍ／ｚ２９６
（Ｍ⁺））高分解能ＥＩ−ＭＳ実測値ｍ／ｚ２９６，１６９６理論値ｍ／ｚ２９６，１６２４分子式Ｃ₁₆Ｈ₂₄Ｏ₅ ＵＶ（ＥｔＯＨ） λ_max ２４０_nm （肩Ｅ_1cm ^1% １００）ＩＲ（ＮａＣｌ）２９３０，２８６０，１８４５，１７６９，１７４２，
１４３７，１３７１，１２６７，１１７６，１０７９，
９０７ｃｍ^-1。¹ ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃） δ ｐｐｍ０．８１（３Ｈ、ｔ、Ｊ＝６．４Ｈｚ），１．２０（１
０Ｈ、ｍ），１．５０（２Ｈ、ｍ），２．４３（２Ｈ、
ｔ、Ｊ＝７．４Ｈｚ），２．６２（２Ｈ、ｍ），２．６
８（２Ｈ、ｍ），３．６２（３Ｈ、ｓ）。ＴＬＣＲｆシリカゲル６０Ｆ₂₅₄ クロロホルム：酢酸（５０：１）０．５０ＲＰ−１８Ｆ_254S アセトニトリル：水（７：３）０．２１

【００５０】ＷＡＰ−４０６８Ｄ₁ 分子量３１２（ＥＩ−ＭＳｍ／ｚ３１２
（Ｍ⁺））分子式Ｃ₁₆Ｈ₂₄Ｏ₆ ＩＲ（ＮａＣｌ）２９２０，２８５４，１７３６，１４３７，１２６５，
１１６６，１０８１，７６０ｃｍ^-1。¹ ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃） δ ｐｐｍ０．８９（３Ｈ、ｔ、Ｊ＝７．３Ｈｚ），１．９６（２
Ｈ、ｑｕｉｎｔ），２．１２（２Ｈ、ｑ），２．３７
（４Ｈ、ｍ），２．６２（２Ｈ、ｔ），３．６１（３
Ｈ、ｓ），３．６８（３Ｈ、ｓ），３．７０（３Ｈ、
ｓ），５．２８（１Ｈ、ｄｄ），５．３４（１Ｈ、ｄ
ｄ）。ＴＬＣＲｆシリカゲル６０Ｆ₂₅₄ クロロホルム：酢酸（５０：１）０．２８ＲＰ−１８Ｆ_254S アセトニトリル：水（７：３）０．４６

【００５１】ＷＡＰ−４０６８Ｄ₂ 分子量３１４（ＥＩ−ＭＳｍ／ｚ２８３（Ｍ⁺−
３１））分子式Ｃ₁₆Ｈ₂₆Ｏ₆ ＩＲ（ＮａＣｌ）２９５８，２９３２，２８６２，１７３８，１６３８，
１４３７，１２６７，１１９９，１１６６，１０７９ｃ
ｍ^-1。¹ ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃） δ ｐｐｍ０．８３（３Ｈ、ｔ、Ｊ＝６．４Ｈｚ），１．２３（６
Ｈ、ｍ），１．３８（２Ｈ、ｍ），２．３３（２Ｈ、
ｔ、Ｊ＝６．４Ｈｚ），２．４４（２Ｈ、ｔ），２．６
２（２Ｈ、ｔ），３．６３（３Ｈ、ｓ），３．６９（３
Ｈ、ｓ），３．７１（３Ｈ、ｓ）。ＴＬＣＲｆシリカゲル６０Ｆ₂₅₄ クロロホルム：酢酸（５０：１）０．２８ＲＰ−１８Ｆ_254S アセトニトリル：水（７：３）０．３４

【００５２】ＷＡＰ−４０６８Ｄ₃ 分子量３４０（ＥＩ−ＭＳｍ／ｚ３０９（Ｍ⁺−
３１））分子式Ｃ₁₈Ｈ₂₈Ｏ₆ ＩＲ（ＮａＣｌ）２９５６，２９３０，２８６０，１７６５，１６３６，
１４３５，１２６５，１１９９，１１６４，１０８３ｃ
ｍ^-1。¹ ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃） δ ｐｐｍ０．８７（３Ｈ、ｔ、Ｊ＝７．４Ｈｚ），１．３２（２
Ｈ、ｍ），１．４８（２Ｈ、ｍ），１．９４（４Ｈ、
ｍ），２．３０（２Ｈ、ｔ），２．４１（２Ｈ、ｔ），
２．６０（２Ｈ、ｔ），３．６０（３Ｈ、ｓ），３．６
６（３Ｈ、ｓ），３．６８（３Ｈ、ｓ），５．２４（１
Ｈ、ｄｄ），５．２６（１Ｈ、ｄｄ）。ＴＬＣＲｆシリカゲル６０Ｆ₂₅₄ クロロホルム：酢酸（５０：１）０．２８ＲＰ−１８Ｆ_254S アセトニトリル：水（７：３）０．３１

【００５３】ＷＡＰ−４０６８Ｄ₄ 分子量３４０（ＥＩ−ＭＳｍ／ｚ３０９（Ｍ⁺−
３１））分子式Ｃ₁₈Ｈ₂₈Ｏ₆ ＩＲ（ＮａＣｌ）２９５８，２９３０，２８６０，１７３８，１６３８，
１４３７，１２６７，１１９９，１１６６，１０８１，
９６９ｃｍ^-1。¹ ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃） δ ｐｐｍ０．８４（３Ｈ、ｔ、Ｊ＝６．９Ｈｚ），１．２８（６
Ｈ、ｍ），２．０２（２Ｈ、ｑｕｉｎｔ、Ｊ＝６．９Ｈ
ｚ），２．４５（２Ｈ、ｔ），２．６５（２Ｈ、ｔ），
３．１２（２Ｈ、ｄ、Ｊ＝６．９Ｈｚ），３．６３（３
Ｈ、ｓ），３．６９（３Ｈ、ｓ），３．７０（３Ｈ、
ｓ），５．１８（１Ｈ、ｄｄ），５．４５（１Ｈ、ｄ
ｄ）。ＴＬＣＲｆシリカゲル６０Ｆ₂₅₄ クロロホルム：酢酸（５０：１）０．２８ＲＰ−１８Ｆ_254S アセトニトリル：水（７：３）０．２９

【００５４】ＷＡＰ−４０６８Ｄ₅ 分子量３４２（ＥＩ−ＭＳｍ／ｚ３１１（Ｍ⁺−
３１））分子式Ｃ₁₈Ｈ₃₀Ｏ₆ ＩＲ（ＮａＣｌ）２９５６，２９３０，２８５８，１７３８，１６３８，
１４３７，１２６７，１１９９，１１６６，１０７９，
９８４ｃｍ^-1。¹ ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃） δ ｐｐｍ０．８３（３Ｈ、ｔ、Ｊ＝６．４Ｈｚ），１．２２（１
０Ｈ、ｍ），１．３６（２Ｈ、ｍ），２．３３（２Ｈ、
ｔ、Ｊ＝７．４Ｈｚ），２．４４（２Ｈ、ｔ），２．６
２（２Ｈ、ｔ），３．６３（３Ｈ、ｓ），３．６９（３
Ｈ、ｓ），３．７１（３Ｈ、ｓ）。ＴＬＣＲｆシリカゲル６０Ｆ₂₅₄ クロロホルム：酢酸（５０：１）０．２８ＲＰ−１８Ｆ_254S アセトニトリル：水（７：３）０．２３

【００５５】（生物学的性質）次にＷＡＰ−４０６８お
よびその誘導体の生物学的性質について述べる。ＷＡＰ
−４０６８およびその誘導体の１，０００μｇ／ｍｌ溶
液に浸漬したペーパーディスク（東洋濾紙社製、直径８
ｍｍ）を各種真菌含有の寒天平板にはりつけ、３７℃で
２４時間培養後、ペーパーディスクのまわりに生じた生
育阻止円の直径を表１に示す。表中の０は阻止円の認め
られなかったことを示す。用いた培地はイースト・ニト
ロゲン・ベース・ウイズアウト・アミノアシッズ培地
（ディフコ社製）にグルコース０．５％、寒天１．５％
を添加したものである。用いた試験菌−１はアスペルギ
ルス・フミガタス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓｆｕｍｉ
ｇａｔｕｓ）ＩＡＭ２００４、試験菌−２はカンジタ・
アルビカンス（Ｃａｎｄｉｄａａｌｂｉｃａｎｓ）Ｔ
ＩＭＭ０２３９である。表１から明らかなようにＷＡＰ
−４０６８Ａ₁〜Ａ₅、Ｂ₁〜Ｂ₅、Ｃ₁〜Ｃ₅は真菌
に対して抗菌活性を示す。またＷＡＰ−４０６８Ｄ₁〜
Ｄ₅はｉｎｖｉｔｒｏでは抗菌活性を示さないが、ｉ
ｎｖｉｖｏではエステラーゼによってＷＡＰ−４０６
８Ｂ₁〜Ｂ₅に加水分解され、抗菌活性を示すものと期
待される。

【００５６】

【表１】

【００５７】また、ＷＡＰ−４０６８Ａ₅はマウスを用
いた急性毒性試験において５００ｍｇ／１ｋｇ経口投与
しても毒性は全く認められなかった。以上の結果からＷ
ＡＰ−４０６８およびその誘導体は抗真菌作用を示し、
低毒性である。したがって、これらの化合物は真菌感染
症の治療に用いることができる。本発明の化合物を医薬
として投与する場合、本発明化合物はそのまま、または
医薬上許容される無毒性かつ不活性の担体中に例えば、
０．１％〜９９．５％、好ましくは０．５％〜９０％含
有する医薬組成物として人を含む動物に投与される。担
体としては、固形、半固形、または液状の希釈剤、充填
剤、およびその他の処方用の助剤の一種以上が用いられ
る。医薬組成物としては、投与単位形態で投与すること
が望ましい。本発明の医薬組成物は経口投与、組織内投
与、局所投与（経皮投与など）または経直腸に投与する
ことができる。したがって、これらの投与方法に適した
剤形に公知の製剤化技術で製剤化投与することが好まし
い。

【００５８】抗真菌剤としての用量は、年令、体重等の
患者の状態、投与経路、病気の性質と罹患程度等を考慮
した上で調整するのが望ましいが、通常は成人に対して
本発明の有効成分量として、１日当り１０〜２０００ｍ
ｇの範囲が一般的である。場合によっては、これ以下で
足り得るし、また逆にこれ以上の用量を必要とする場合
もある。（必要に応じて）多量に投与するときには、１
日数回に分割して投与することが望ましい。

【００５９】

【実施例】次に実施例をもって詳細に本発明を説明する
が、これによって本発明が限定されるものではない。実施例１５００ｍｌ容の三角フラスコにグルコース２．５％、脱
脂大豆粉２．０％、大豆油０．４％、塩化ナトリウム
０．２５％、炭酸カルシウム０．５％からなる培地（ｐ
Ｈ７．２）１００ｍｌを注入後減菌した培地を３本用意
し、これにシュードモナス・エスピーＷＡＰ−４０６
８株の斜面寒天培地から１白金耳づつ接種したのち、ロ
ータリーシェーカーで１８０往復／分、３０℃、２日間
培養を行った。上述の培地を１００ｍｌ注入後減菌した
５００ｍｌ容三角フラスコ１００本を用意し、先に培養
した三角フラスコの培養液をそれぞれに２ｍｌづつ接種
して、ロータリーシェーカーで１８０往復／分、３０
℃、４日間培養を行った。なお、抗真菌活性をアスペル
ギルス・フミガタスの寒天平板法で測定した。

【００６０】実施例２実施例１で得られた培養液にセライト５４５を濾過助剤
として加え、減圧濾過を行って培養濾液９．５ｌを得
た。培養濾液を水で２倍に希釈後、塩酸でｐＨを４．５
に調整し、ダイヤイオンＨＰ２０（三菱化成社製、１．
４ｌ）のカラムクロマトグラフィーに付した。ｐＨ４．
５の水５ｌ、ｐＨ８．０の水５ｌで洗浄後、活性物質を
８０％アセトン水（ｐＨ８．０）１０ｌで溶出した。溶
出液を２．５ｌまで濃縮し、塩酸でｐＨ５．０に調整
後、酢酸エチル２ｌで２回抽出した。酢酸エチル層を濃
縮し、１８．８ｇの粗物質を得た。

【００６１】実施例３実施例２で得られた粗物質５ｇをシリカゲル（エーメル
ク社製、４５０ｍｌ）のカラムクロマトグラフィーに付
し、クロロホルム：ｎ−ヘキサン：酢酸（１５０：５
０：１）の溶媒系で溶出、分画した。活性画分（８２０
ｍｌ）を集め、２００ｍｌまで濃縮後、クロロホルムで
抽出した。クロロホルム層を濃縮し、３．１ｇのＷＡＰ
−４０６８Ａ₁〜Ａ₅混合物を得た。そのうちのＷＡＰ
４０６８Ａ₁〜Ａ₅混合物２．７ｇをＯＤＳ−シリカゲ
ル（山村化学研究所製、ＹＭＣＧｅｌＯＤＳ−Ａ、
４００ｍｌ）のカラムクロマトグラフィーに付し、アセ
トニトリル：水（４５：５５）の溶媒系で溶出分画し
た。３つの活性画分を濃縮し、ＷＡＰ−４０６８Ａ₁，
Ａ₂混合物（９００ｍｇ），ＷＡＰ−４０６８Ａ₃，Ａ
₄混合物（６５０ｍｇ），ＷＡＰ−４０６８Ａ₅粗結晶
（９８０ｍｇ）を得た。ＷＡＰ−４０６８Ａ₅粗結晶は
クロロホルム−ｎ−ヘキサンより再結晶化し、ＷＡＰ−
４０６８Ａ₅白色針状結晶８００ｍｇを得た。ＷＡＰ−
４０６８Ａ₁、Ａ₂混合物は再度ＯＤＳ−シリカゲルの
カラムクロマトグラフィー（カラムは上記と同じ、溶媒
系はアセトニトリル：水（４０：６０））に付し、Ａ₁
（２０ｍｇ），Ａ₂（４５４ｍｇ）をシロップとして単
離した。またＷＡＰ−４０６８Ａ₃，Ａ₄混合物を同様
に処理してＡ₃（３０ｍｇ），Ａ₄（１２０ｍｇ）をシ
ロップとして得た。

【００６２】実施例４実施例３で得られたＷＡＰ−４０６８Ａ₅５ｍｇに水１
ｍｌと３倍モル量の水酸化ナトリウムを加え、室温で２
時間放置した。濃縮、乾固し、ＷＡＰ−４０６８Ｂ
₅（３ナトリウム塩、６．１ｍｇ）を白色粉末として得
た。ＷＡＰ−４０６８Ａ₁，Ａ₂，Ａ₃，Ａ₄について
も同様に処理して、ＷＡＰ−４０６８Ｂ₁（６．５ｍ
ｇ），Ｂ₂（６．３ｍｇ），Ｂ₃（６ｍｇ），Ｂ₄（６
ｍｇ）の３ナトリウム塩を白色粉末として得た。

【００６３】実施例５実施例３で得られたＷＡＰ−４０６８Ａ₅５ｍｇをベン
ゼン１ｍｌに溶解し、メタノール０．５ｍｌとトリメチ
ルシリルジアゾメタン（東京化成社製）１滴を加え、室
温で３０分間放置した。濃縮後、反応物をシリカゲル６
０（エーメルク社製、蛍光剤入り）の薄層クロマトグラ
フィー（８×１０ｃｍ）に付し、クロロホルム：酢酸
（５０：１）で展開した。２５４ｎｍのＵＶランプ下、
Ｒｆ値０．５０のバンドを切り出し、酢酸エチルで抽出
した。濃縮、乾固し、ＷＡＰ−４０６８Ｃ₅（１．３ｍ
ｇ）をシロップとして得た。ＷＡＰ−４０６８Ａ₁，Ａ
₂，Ａ₃，Ａ₄についても同様の方法で処理し、ＷＡＰ
−４０６８Ｃ₁（１．２ｍｇ），Ｃ₂（１．２ｍｇ），
Ｃ₃（１．５ｍｇ），Ｃ₄（１．６ｍｇ）をシロップと
して得た。

【００６４】実施例６実施例３で得られたＷＡＰ−４０６８Ａ₅５ｍｇをベン
ゼン１ｍｌに溶解し、メタノール０．５ｍｌとトリメチ
ルシリルジアゾメタン１０滴を加え、室温で３０分間放
置した。濃縮後ＷＡＰ−４０６８Ｄ₅（６．０ｍｇ）を
シロップとして得た。ＷＡＰ−４０６８Ａ₁，Ａ₂，Ａ
₃，Ａ₄についても同様の方法で処理し、ＷＡＰ−４０
６８Ｄ₁（６．１ｍｇ），Ｄ₂（６．２ｍｇ），Ｄ
₃（６．１ｍｇ），Ｄ₄（６．１ｍｇ）をシロップとし
て得た。

【００６５】

【発明の効果】上述のとおり本発明により新規抗生物質
ＷＡＰ−４０６８およびその誘導体ならびにそれらの製
造法が提供される。本抗生物質ＷＡＰ−４０６８および
その誘導体は真菌に抗菌活性を示すことから、真菌感染
症の治療に有用である。

【図面の簡単な説明】

【図１】新抗生物質ＷＡＰ−４０６８Ａ₅主成分のＦＴ
−ＩＲスペクトル（食塩板による測定）

【図２】新抗生物質ＷＡＰ−４０６８Ａ₅主成分の２７
０ＭＨｚ¹ＨＮＭＲスペクトル（ＣＤＣｌ₃による測
定）

【図３】新抗生物質ＷＡＰ−４０６８Ａ₅主成分の６
７．９ＭＨｚ ¹³ＣＮＭＲスペクトル（ＣＤＣｌ₃によ
る測定）

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁵ 識別記号庁内整理番号ＦＩ技術表示箇所Ｃ０７Ｃ 69/604 8018−4ＨＣ１２Ｎ 1/20 Ａ 7236−4ＢＣ１２Ｐ 17/04 8931−4Ｂ //(Ｃ１２Ｎ 1/20 Ｃ１２Ｒ 1:38） 7804−4Ｂ (Ｃ１２Ｐ 17/04 Ｃ１２Ｒ 1:38） 7804−4Ｂ (72)発明者後藤正義神奈川県伊勢原市東成瀬４−２−５−408

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】一般式（Ｉ）【化１】〔式中、Ｒ₁はＣＨ₃−ＣＨ₂−ＣＨ＝ＣＨ−（Ｃ
Ｈ₂）₂−、ＣＨ₃−（ＣＨ₂）₅−、ＣＨ₃−ＣＨ₂
−ＣＨ＝ＣＨ−（ＣＨ₂）₄−、ＣＨ₃−（ＣＨ₂）₄
−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ₂−またはＣＨ₃−（ＣＨ₂）₇−
を示す〕で表される化合物またはその塩。
【請求項２】請求項（１）記載の化合物またはその塩
を加水分解して得られる（II）式【化２】〔式中、Ｒ₁はＣＨ₃−ＣＨ₂−ＣＨ＝ＣＨ−（Ｃ
Ｈ₂）₂−、ＣＨ₃−（ＣＨ₂）₅−、ＣＨ₃−ＣＨ₂
−ＣＨ＝ＣＨ−（ＣＨ₂）₄−、ＣＨ₃−（ＣＨ₂）₄
−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ₂−またはＣＨ₃−（ＣＨ₂）₇−
を示す〕で表される化合物またはその塩。
【請求項３】請求項（１）または（２）記載の化合物
をエステル化して得られる（III ）式または（IV）式【化３】【化４】〔式中、Ｒ₁はＣＨ₃−ＣＨ₂−ＣＨ＝ＣＨ−（Ｃ
Ｈ₂）₂−、ＣＨ₃−（ＣＨ₂）₅−、ＣＨ₃−ＣＨ₂
−ＣＨ＝ＣＨ−（ＣＨ₂）₄−、ＣＨ₃−（ＣＨ₂）₄
−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ₂−またはＣＨ₃−（ＣＨ₂）₇−
を、ＣＯＯＲ₂はエステル化されたカルボキシル基を示
す〕で表される化合物。
【請求項４】シュードモナス属に属し、請求項（１）
記載の化合物のうち、少なくとも１種を産生する能力を
有する生産菌を培地で培養し、培養物中に該化合物を生
成蓄積せしめ、これを採取することを特徴とする該化合
物またはその塩の製造法。
【請求項５】請求項（１）に記載の化合物の中、少な
くともその１種を生産する能力を有するシュードモナス
属に属する生産菌。
【請求項６】請求項（１）、（２）及び（３）に記載
の化合物又はその塩からえらばれる少なくとも１種の化
合物を有効成分とする抗真菌剤。