JPH0458896A - 光学活性３―フェニル―１，３―プロパンジオールの製造法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 本発明は光学活性３−フェニル−１，３−プロパンジオ
ールの製造方法に関する。更に詳しくは、３−フェニル
−１，３−プロパンジオールのエナンチオマー混合物に
、微生物或いはその処理物を作用させ、残存する光学活
性３−フェニル−１，３−プロパンジオールを採取する
ことを特徴とする光学活性３−フェニル−１，３−プロ
パンジオールの製造方法に関する。

光学活性３−フェニル−１，３−プロパンジオールは種
々の医薬品の重要合成中間体である。

〔従来の技術及び発明が解決しようとする課題〕従来、
光学活性３−フェニル−１，３−プロパンジオールを製
造する方法としては、２，３−エボキシシンナミールア
ルコールの位置選択的な化学的還元方法（Ｊ、　Ｏｒｇ
、　Ｃｈｅｍ、、　５３（１７）、　４０８１（１９８
８）や、光学活性な３−フェニル−３−ヒドロキシプロ
ピオン酸の化学的還元による方法（Ｔｅｔｒａｈｅｄｒ
ｏｎ　Ｌｅｔｔ、＋　２６（３）、　３５Ｈ１９８５）
などが知られている。しかし前者の方法は位置選択性が
不十分であり、化学純度が不十分であること、後者の方
法は該光学活性有機酸を光学分割剤で分割せねばならな
いこと、得られたものの光学純度が低いことなどの欠点
がある。これらの実情により、経済的に優れ、且つ、簡
便な手段により光学純度の高い光学活性３−フェニル−
１３−プロパンジオールを得る方法の確立が望まれてい
る。

〔課題を解決する為の手段〕

本発明者らは経済的に優れ、かつ簡便な方法で、光学純
度の高い光学活性３−フェニル−１゜３−プロパンジオ
ールを得る方法として微生物を作用させる方法に着目し
この目的に適した微生物を検索した結果、キャンディダ
（Ｃａｎｄｉｄａ）属　、ハンセヌラＣＨａｎｓｅｎｕ
　Ｉａ）属、又はロドトルラ（Ｒｏｄｏｔｏｒｕｌａ）
属に属する微生物群から選ばれた微生物が、３−フェニ
ル−１，３−プロパンジオールのエナンチオマー混合物
に作用して（Ｒ）−３−フェニル−１，３−プロパンジ
オールを残存させること、及びキャンディダ（Ｃａｎｃ
ｌｉｄａ）属、ゲオトリカム（Ｇｅｏｔｒｉｃｈｕｍ）
属、ロイコスポリディウム（Ｌｅｕｃｏｓｐｏｒｉｄｉ
ｕｍ）属、ピキア（Ｐｉｃｈｉａ）属、トルラスポラ（
Ｔｏｒｕ　１ａｓｐｏｒａ）属、又はトリコスポロン（
Ｔｒｉｃｈｏｓｐｏｒｏｎ）属に属する微生物群から選
ばれた微生物が３−フェニル−１，３−プロパンジオー
ルのエナンチオマー混合物に作用して（Ｓ）−３−フェ
ニル−１，３−プロパンジオールを残存させることを見
出し、本発明を完成したものである。

本発明に使用する＠仕初としては、キャンディダ（Ｃａ
ｎｄｉｄａ）属　、ハンセヌラ（Ｈａｎｓｅｎｕｌａ）
属、又はロドトルラ（Ｒｏｄｏｔｏｒｕｌａ）属に属す
る微生物で３−フェニル−１，３−プロパンジオールの
エナンチオマー混合物に作用し、（Ｒ）−３フェニル−
１，３−プロパンジオールを残存させうる能力を存する
微生物、或いはキャンディダ（Ｃａｎｄｉｄａ）属、ゲ
オトリカム（Ｇｅｏｔｒｉｃｈｕｍ）属、ロイコスポリ
ディウム（Ｌｅｕｃｏｓｐｏｒｉｄｉｕｍ）属、ピキア
（Ｐｉｃｈｉａ）属、トルラスポラ（Ｔｏｒｕｌａｓｐ
ｏｒａ）属、又はトリコスポロン（Ｔｒｉｃｈｏｓｐｏ
ｒｏｎ）属に属する微生物で３−フェニル−１，３−プ
ロパンジオールのエナンチオマー混合物に作用し、（Ｓ
）＝３−フェニル−１，３−プロパンジオールヲ残存さ
せうる能力を有する微生物であればいずれも使用可能で
ある。

具体的には３−フェニル−１，３−プロパンジオールの
エナンチオマー混合物に作用し、（Ｒ）３−フェニル−
１，３−プロパンジオールヲ残存させうる能力を有する
微生物としては、キャンディダ・ランビカ（Ｃａｎｄｉ
ｄａ　ｌａｍｂｉｃａ）ＤＳＭ　７００９０、ハンセヌ
ラ・ミヌタ　（Ｈａｎｓｅｎｕｌａ　ｍ１ｎｕｔａ）　
０３Ｍ７０２７４、ロドトルラ・ルブラ（Ｒｈｏｄｏｔ
ｏｒｕｌａ　ｒｕｂｒａ）Ａ）ＩＵ　３９４５．　Ａ）
Ｉｌｌ　３９４８等を挙げることができる。

また、３−フェニル−１，３−プロパンジオールのエナ
ンチオマー混合物に作用し、（Ｓ）−３フェニル−１，
３−プロパンジオールを残存させうる能力を有する微生
物としては、キャンディダ・ピントロペシイ・ヴア・ピ
ントロベシイ（Ｃａｎｄｉｄａ　ｐｉｎｔｏｌｏｐｅｓ
ｉｉ　ｖａｒ、　ｐｉｎｔｏｌｏｐｅｓｉｉ）ＩＦＯ０
７２９、ゲオトリカム・カンデイダム（Ｇｅｏｔｒｉｃ
ｈｕｍｃａｎｄｉｄｕｍ）ＩＦＯ４５９７，ＩＰｏ　４
５９Ｂ、　ＩＦＯ５３６８，ＩＦＯ３１８１０、ＪＣ？
Ｉ　１７４７．　ＪＣＭ　５２２２　、ゲオトリカム・
ファメンタンス（Ｇｅｏｔｒｉｃｈｕｍ　ｆｅｒｍｅｎ
ｔａｎｓ）ＪＣＭ２４６７、　ＪＣＭ　２４６８、ゲオ
トリカム・クレバニイ（Ｇｅｏｔｒｉｃｈｕｍ　ｋｌｅ
ｂａｈｎｉｉ）ＪＣＭ　２１７１％ロイコスポリディウ
ム・スコツティ（Ｌｅｕｃｏｓｐｏｒｉｄｉｕｍ　ｓｃ
。

ｔｔｉｉ）ＩＦＯ１９２３、ピキア・フラニルカム（Ｐ
ｉｃｈｉａｑｕｅｒｃｕｕｍ）ＤＳＭ　７０３８６、ト
ルラスポラ・デルブルッキイ（Ｔｏｒｕｌａｓｐｏｒａ
　ｄｅｌｂｒｕｅｃｋｉｉ）ＩＦＯ０９５５、トリコス
ポロン・キャピタタム（Ｔｒｉｃｈｏｓｐｏｒｏｎｃａ
ｐｉｔａｔｕｍ）ＩＰｏ　１１９７等を挙げることがで
きる。

これらの微生物は、野生株、変異株、又は細胞融合もし
くは遺伝子操作法などの遺伝的手法により誘導される組
み替え株等、いずれの株でも好適に用いることができる
。

尚、ＩＦＯ番号の付された微生物は、（財）醗酵研究所
（ＩＦＯ）発行のＬｉ５ｔ　ｏｆ　Ｃｕ１ｔｕｒｅｓ、
第８版、第１巻（１９８８）に記載されており、該ＩＦ
Ｏから入手することができる。ＡＨ［１番号の付された
微生物は、日本微生物株保存連盟（ＪＦＣＣ）発行のＣ
ａｔａｌｏｇｕｅ　ｏｆ　Ｃｕ１ｔｕｒｅｓ　、第４版
（１９８７）に記載されており、北海道大学農学部から
入手することができる。ＪＣＭ番号の付された微生物は
、理化学研究所微生物系保存施設発行の微生物株カタロ
グ第４版（１９８９年）に記載されており、該施設から
入手することができる。ＤＳＭ番号の付された微生物は
Ｄｅａｔｓｃｈｅ　Ｓａｍｍｌｕｎｇ　ｖｏｎＭｉｋｒ
ｏｏｒｇａｎｉｓｍｅｎ（ＤＳＭ）発行のＣａｔａｌｏ
ｇ　ｏｆ　５ｔｒａｉｎｓ（１９８９）に記載されてお
り、該ＤＳＭから入手することができる。

本発明に用いる微生物を培養する為の培地はその微生物
が増殖し得るものであれば特に制限はない。例えば、炭
素源としては、上記微生物が利用可能であればいずれも
使用でき、具体的には、グルコース、フルクトース、シ
ュクロース、デキストリン等のＦｉ類、ソルビトール、
エタノール、グリセロール等のアルコール類、フマール
酸、クエン酸、酢酸、プロピオン酸等の有機酸類及びそ
の塩類、パラフィン等の炭化水素類等或いはこれらの混
合物を使用することができる。窒素源としては例えば、
塩化アンモニウム、硫酸アンモニウム、リン酸アンモニ
ウム等の無機酸のアンモニウム塩、フマル酸アンモニウ
ム、クエン酸アンモニウム等の有機酸のアンモニウム塩
、肉エキス、酵母エキス、コーンステイープリカー、カ
ゼイン加水分解物、尿素等の無機有機含窒素化合物、或
いはこれらの混合物を使用することができる。他に無機
塩、微量金属塩、ビタミン類等、通常の培養に用いられ
る栄養源を適宜、混合して用いることができる。また必
要に応じて微生物の増殖を促進する因子、本発明の目的
化合物の生成能力を高める因子、あるいは培地のｐＨ保
持に有効な物質も添加できる。

培養方法としては培地ｐｎは３．０〜９．５、好ましく
は４〜８、培養温度は２０〜４５°Ｃ１好ましくは２５
〜３７°Ｃで、嫌気的或いは好気的に、その微生物の生
育に適した条件下５〜１２０時間、好ましくは１２〜７
２時間程度培養する。

３−フェニル−１，３−プロパンジオールのエナンチオ
マー混合物から光学活性な３−フエニ）Ｌｔ−１，３−
プロパンジオールを生成させる方法としては、培養液を
そのまま用い該培養液に３フェニル−１，３−プロパン
ジオールのエナンチオマー混合物を添加する方法、遠心
分離等により菌体を分離し、これをそのまま或いは洗浄
した後、緩衝液、水等に再懸濁したものに３−フェニル
−１，３−プロパンジオールのエナンチオマー混合物を
添加し反応させる方法等がある。

この反応の際、グルコース、シュクロース等の炭素源を
エネルギー源として添加したほうが良い場合もある。ま
た、菌体は生菌体のままでも良いし、菌体破砕物、アセ
トン処理、凍結乾燥等の処理をほどこしたものでも良い
。また、これらの菌体或いは、菌体処理物を、例えば、
ポリアクリアミドゲル法、含硫多糖ゲル法（カラギーナ
ンゲル法等）、アルギン酸ゲル法、寒天ゲル法等の公知
の方法で固定化して用いることもできる。更に、菌体処
理物から、公知の方法を組み合わせて精製取得した酵素
も使用できる。

３−フェニル−１，３−プロパンジオールのエナンチオ
マー混合物はそのまま、或いは水に溶解し、又は反応に
影響を与えないような有機溶媒に溶解したり、界面活性
剤等に分散させたりして、反応始めから一括に或いは分
割して添加しても良い。

反応はｐＨ３〜１０、好ましくはｐＨ５〜９の範囲で、
温度は１０〜６０°Ｃ１好ましくは２０〜４０℃の範囲
で、１〜１２０時間程度、撹拌下あるいは静置下で行う
。反応時間を長（すると３−フェニル−１，３−プロパ
ンジオールの残存量は減少する場合が多いが、光学純度
の高い光学活性３−フェニル−１，３−プロパンジオー
ルを得ることが可能である。基質の使用濃度は特に制限
されないが、０．１〜２０％程度が好ましい。

反応によって残存生成した光学活性３−フェニル−１，
３−プロパンジオールの採取は反応液から直接或いは菌
体分離後、有機溶媒による抽出、蒸留、カラムクロマト
グラフィー等の通常の精製方法を用いれば容易に得られ
る。

〔実施例］ 以下、本発明を具体的に実施例にて説明するが、本発明
はこれらの実施例のみに限定されるものではない。

なお、実施例に於ける反応液中の３−フェニル−１，３
−プロパンジオールの定量及び光学純度は反応により得
られた光学活性３−フェニル１．３−プロパンジオール
を直接、光学分割カラムを用いた高速液体クロマトグラ
フィー（カラム：ダイセル化学工業製キラルセル○Ｂ、
？８媒：ｎ−ヘキサン／２−プロパノ−ルー１９／１、
波長２５４ｎｍ　、流速１．０ｄ／分、カラム温度４０
°Ｃ１注入量１０〃）により測定した（保持時間；（Ｓ
）体１３．１分、（Ｒ）体１６．４分）。

実施例１ く菌体調製用培地〉 グルコース　　　　　　　　　　２．０％酵母エキス　
　　　　　　　　０．３％６１トン　　　　　　　　　
　〇、５％麦芽エキス　　　　　　　　　０．３％ｐＨ
６，０ 上記の菌体調製用培地５０　ＴｒＬｌを５００ａｆ容坂
ロフラスコに入れ、滅菌後、第１表に示した微生物をそ
れぞれ植菌し、３０″Ｃで４８時間振盪培養を行った。

次に上記培養終了液に、３−フェニル−１，３プロパン
ジオールのラセミ体を０．２５ｇ添加し、３０°Ｃで９
６時間往復振盪反応させた。

反応終了後、遠心分離にて除菌し、得られた上澄液を、
酢酸エチル５０＋ｎＺを用いて抽出を行い、酢酸エチル
を無水芒硝で脱水後、脱溶媒を行いシロップを得た。

このシロップをヘキサン／イソプロピルアルコール（５
０１５０）溶液５Ｑｍ／に溶解させ、高速液体クロマト
グラフィーにて分析して得られた３−フェニル−１，３
−プロパンジオールの量、絶対配置及び光学純度を測定
した。

得られた結果を第１表に示す。

第　　１ 表 第１表（続き） ［発明の効果］ 本発明の微生物を用いた光学活性３−フェニル−１，３
−プロパンジオールの製造方法は、簡便に光学純度の高
い光学活性３−フェニル−１３−プロパンジオールを製
造することを可能にさせるものであり工業的に極めて有
利である。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、３−フェニル−１，３−プロパンジオールのエナン
   チオマー混合物に、微生物或いはその処理物を作用させ
   、残存する光学活性３−フェニル−１，３−プロパンジ
   オールを採取することを特徴とする光学活性３−フェニ
   ル−１，３−プロパンジオールの製造法。 ２、微生物が、キャンディダ（Ｃａｎｄｉｄａ）属、ハ
   ンセヌラ（Ｈａｎｓｅｎｕｌａ）属、又はロドトルラ（
   Ｒｏｄｏｔｏｒｕｌａ）属に属する微生物群から選ばれ
   、３−フェニル−１，３−プロパンジオールのエナンチ
   オマー混合物に作用して（Ｒ）−３−フェニル−１，３
   −プロパンジオールを残存させうる能力を有する微生物
   である請求項１記載の光学活性３−フェニル−１，３−
   プロパンジオールの製造法。 ３、微生物が、キャンディダ（Ｃａｎｄｉｄａ）属、ゲ
   オトリカム（Ｇｅｏｔｒｉｃｈｕｍ）属、ロイコスポリ
   ディウム（Ｌｅｕｃｏｓｐｏｒｉｄｉｕｍ）属、ピキア
   （Ｐｉｃｈｉａ）属、トルラスポラ（Ｔｏｒｕｌａｓｐ
   ｏｒａ）属、又はトリコスポロン（Ｔｒｉｃｈｏｓｐｏ
   ｒｏｎ）属に属する微生物群から選ばれ、３−フェニル
   −１，３−プロパンジオールのエナンチオマー混合物に
   作用して（Ｓ）−３−フェニル−１，３−プロパンジオ
   ールを残存させうる能力を有する微生物である請求項１
   記載の光学活性３−フェニル−１，３−プロパンジオー
   ルの製造法。