JPH04279569A - ロフィン誘導体 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、新規なロフィン誘導体
又はその過酸化物誘導体からなり、更に詳しくは、アル
カリの存在下、酸素と反応して化学発光するロフィン誘
導体に関する。

【０００２】

【従来の技術】ロフィンは、式

【０００３】

【化３】

【０００４】で表される２，４，５−トリフェニルイミ
ダゾールであり、アルカリの存在下、酸素と反応して化
学発光することが知られ、その誘導体もいくつか知られ
ている（Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｐｈｏｔｏｃｈｅｍｉ
ｓｔｒｙ　ａｎｄ　Ｐｈｏｔｏｂｉｏｌｏｇｙ，ｖｏ１
４，ｐｐ１１２９−１１５５（１９６５））。

【０００５】式　ＩＩＩで表されるロフィンは、酸素と
反応して、式

【０００６】

【化４】

【０００７】で表されるロフィン過酸化物になり、更に
アルカリによって、式

【０００８】

【化５】

【０００９】で表される中間体を経て化学発光すること
が前述の文献に記載されている。

【００１０】また、ロフィン（ＩＩＩ）　のフェニル基
に種々の置換基を有するロフィン誘導体も、アルカリの
存在下、酸素と反応して化学発光する。それらの発光収
量は置換基により異なり、ロフィンよりも高い発光収量
を示すものも前述の文献にいくつか知られている。

【００１１】これらの化学発光物質は、極微量でも発光
するため、放射線同位元素を使用しない新しい分析試薬
として、最近注目を浴びている。

【００１２】

【発明が解決しようとする課題】本発明の目的は、従来
知られているロフィンより、高い発光収量を持つロフィ
ン誘導体を提供することにあり、発光収量が大きいため
、生体における各種ホルモンの血中濃度の体外診断、或
いは血痕の鑑識などに利用され、発光収量が大きいほど
検出感度を高めることができる。

【００１３】

【課題を解決するための手段】本発明者のロフィン誘導
体においては、化学発光機構において律速となる酸素の
オフィンへのアタックを容易にするため、イミダゾール
環の４、５位に強い電子吸引基であるｐ−フルオロフェ
ニル基を導入した。その結果、これまでに知られている
最も高い化学発光収量を示すロフイン誘導体［２−（ｐ
−ジメチルアミノフェニル）−４，５−ジ（ｐ−メトキ
シフェニル）−イミダゾール］に比べて、７倍という高
い発光収量を持つことがわかった。

【００１４】すなわち、本発明の新規化合物は、次式　
（Ｉ）

【００１５】

【化６】

【００１６】のロフィン誘導体並びに化合物　（Ｉ）と
酸素が反応した次式　（ＩＩ）

【００１７】

【化７】

【００１８】で示されるロフィン過酸化物誘導体である
。

【００１９】本発明の化合物は、次の工程により合成す
ることができる。まず、第一の工程は、次式：

【００２
０】

【化８】

【００２１】で示される４，４’−ジフルオロベンジル
と、次式：

【００２２】

【化９】

【００２３】で示される４−ジメチルアミノベンズアル
デヒドを、過剰の酢酸アンモニウムとともに酢酸中で加
熱還流させ、反応終了後、氷水中へ反応物を注ぎ、得ら
れる結晶物をメタノール、エタノールのようなアルコー
ル溶媒で再結晶することにより、式　（Ｉ）の化合物を
容易に製造することができる。

【００２４】得られたロフィン誘導体　（Ｉ）を塩化メ
チレンとエタノールの混合溶媒に溶解することにより、
式　（ＩＩ）　ロフィン過酸化物誘導体を製造できる。 この化合物　（ＩＩ）　は熱に対して不安定なため−７
８℃以下で処理し、単離する。

【００２５】

【実施例】実施例１ ２−（ｐ−ジメチルアミノフェニル）−４，５−ジ（ｐ
−メトキシフェニル）−イミダゾールの合成

【００２６
】４，４−ジフルオロベンジル１２０ｍｇ（０．４９ｍ
ｍｏｌ）、４−ジメチルアミノベンズアルデヒド９８ｍ
ｇ（０．６５ｍｍｏｌ）及び酢酸アンモニウム２４０ｍ
ｇ（３．１１ｍｍｏｌ）を酢酸中５ｍｌ中に添加し、１
２０℃で２時間反応させた。冷却後、反応物を氷水中へ
注ぎ、析出する結晶物を吸引濾過した。得られた粗成物
をメタノールから再結晶し、吸引濾過、減圧乾燥して黄
色粉末の標記化合物を得た。収量９２ｍｇ（収率５０％
）。この融点、ＮＭＲを測定した結果を次に示す。 融点：２２６−２２７℃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）　ｐｐｍ：３．０１（ｓ，６Ｈ）
，　６．７１（ｓ，２Ｈ），　６．９９（ｔ，４Ｈ），
７．４５（ｓ，４Ｈ），　７．８３（ｓ，２Ｈ）

【００
２７】化学発光収量の測定 上記の方法で得られた化合物（Ｉ）３０ｍｇ（８．０×
１０−５ｍｍｏｌ）を塩化メチレンに溶解して濃度１．
１×１０−３ｍｏｌ／ｌの溶液を調製した。調製した溶
液１ｍｌに、１Ｎ　のアルコール性水酸化カリウム１ｍ
ｌを添加後、発光させ波長４９０ｎｍに最大ピークを持
つ蛍光が観察された。発光量の測定は、光ダイオードア
レイによる瞬間マルチ測光法を利用した。この蛍光スペ
クトルを図１に示した。

【００２８】比較例１ また、上記と同様な方法で得られるロフィン（２，４，
５−トリフェニル−イミダゾール）を塩化メチレンに溶
解した濃度２．０×１０−２ｍｏｌ／ｌの溶液１ｍｌに
、１Ｎ　のアルコール性水酸化カリウム１ｍｌを添加後
、最大ピーク波長５３０ｎｍを有する蛍光スペクトルを
図２に示した。

【００２９】比較例２ 従来最も高い化学発光収量を示す２−（ｐ−ジメチルア
ミノフェニル）−４，５−ジ（ｐ−メトキシフェニル）
−イミダゾールを、同様に１．１×１０−３ｍｏｌ／ｌ
　の塩化メチレン溶液を調製し、１Ｎ　の水酸化カリウ
ムで発光させた蛍光スペクトルを図３に示した。

【００３０】図１、図２、図３のスペクトル面積比（発
光量）から、比較例２の化合物の化学発光収量はロフィ
ンに対して３０倍であるのに対して、実施例１の化合物
の化学発光収量は、比較例１のロフィンに対して２００
倍、比較例２のロフィン誘導体に対して７倍という非常
に大きな発光を示すことが判明した。

【００３１】実施例２ ２−（ｐ−ジメチルアミノフェニル）−４，５−ジ（ｐ
−フルオロフェニル）ハイドロパーオキシ−４Ｈ−イソ
イミダゾールの合成

【００３２】２−（ｐ−ジメチルアミノフェニル）−４
，５−ジ（ｐ−フルオロフェニル）−イミダゾール５０
ｍｇを塩化メチレン１８ｍｌと無水メタノール２ｍｌの
混合溶媒中に素早く溶解し、酸素を吹き込みながら−７
８℃に冷却し、太陽灯を２〜３時間照射した。次に、減
圧下で溶媒を除去し、淡黄色結晶の表記化合物を得た。 析出した結晶物を凍結乾燥した。収量３７ｍｇ（収率６
９％）。この融点、ＮＭＲを測定した結果を次に示す。 融点：１０５−１０６℃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）　ｐｐｍ：３．０６（ｓ，６Ｈ）
，　６．７０（ｄ，２Ｈ），　７．００（ｔ，２Ｈ），
　７．１７（ｔ，２Ｈ），７．４３（ｔ，２Ｈ），　７
．８９（ｓ，２Ｈ），８．３５（ｄｄ，２Ｈ）

【００３
３】化学発光収量の測定 上記の方法で得られた化合物３０ｍｇ（７．４×１０−
５ｍｍｏｌ）を塩化メチレンに溶解した濃度１．１×１
０−３ｍｏｌ／ｌ　の溶液及びロフィンの塩化メチレン
溶液（２．０×１０−２）を実施例１と同様に化学発光
させ、それぞれの蛍光スペクトルを測定した。両スペク
トル面積比（発光量）から、実施例２の化合物の化学発
光収量は、ロフィンに比べ３００倍と非常に大きいこと
が判明した。

【００３４】

【発明の効果】式　（Ｉ）及び式　（ＩＩ）　で表され
るロフィン誘導体及びその過酸化物誘導体は、高い化学
発光収量を示した。それ故、本発明の化合物は高い測定
感度が要求される生体分野の分析において、放射線同位
元素に代わる新しい分析試薬として有用である。

【図面の簡単な説明】

【図１】実施例１の化合物の蛍光スペクトル図

【図２】
標準物質の２，４，５−トリフェニルイミダゾールの蛍
光スペクトル図

【図３】比較の２−（ｐ−ジメチルフェニル）−４，５
−ジ（ｐ−メトキシフエニル）−イミダゾールの蛍光ス
ペクトル図

Claims (2)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】　　式 【化１】 で示されるロフィン誘導体。
2. 【請求項２】　　式 【化２】 で示されるロフィン過酸化物誘導体。