JPH04270299A

JPH04270299A - ホスホペプチド

Info

Publication number: JPH04270299A
Application number: JP3146476A
Authority: JP
Inventors: Kazunori Sato; 一紀佐藤; Masamitsu Tsukamoto; 正満塚本
Original assignee: Mitsubishi Kasei Corp
Current assignee: Mitsubishi Kasei Corp
Priority date: 1991-02-25
Filing date: 1991-02-25
Publication date: 1992-09-25
Anticipated expiration: 2014-07-05
Also published as: JP2916296B2

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は新規なホスホペプチドに
関するものである。

【０００２】

【従来の技術】近年、老化した人の脳、とくにアルツハ
イマ−痴呆患者の脳には、ＰＨＦ（ｐａｉｒｅｄｈｅｌ
ｉｃａｌ　ｆｉｌａｍｅｎｔｓ）と称される繊維蛋白質
の蓄積が認められ、このＰＨＦ中に高度にリン酸化され
たタウ（τ）蛋白質が検出されることが明かにされてい
る［Ｊｏｕｒｎａｌｏｆ　Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ（
Ｔｏｋｙｏ），９９，１８０７〜１８１０（１９８６）
］。このリン酸化されたタウ蛋白質をプロテア−ゼで分
解すると種々のホスホペプチドが得られ、これらのホス
ホペプチドの検討が今後のアルツハイマ−疾患を解明す
る一助となることが期待される。

【０００３】

【発明が解決しようとする課題】本発明はタウ蛋白質の
リン酸化とアルツハイマ−疾患との関連を明らかにする
ことを目的とするものである。

【０００４】

【課題を解決するための手段】上記の課題を達成するた
めには、特定の部位がリン酸化されたペプチドを合成し
、それを用いて抗体を作製することが必要である。この
ため、本発明者等はタウ蛋白質中の特定のリン酸化部位
を含むいくつかのホスホペプチドの製造を試み本発明に
到達した。即ち、本発明の要旨は請求項１における式（
１）で表される新規なホスホペプチドに存する。

【０００５】以下、本発明を詳細に説明する。なお以下
の説明で用いる記号は、夫々次のものを示す。ＭＢＨＡ
樹脂：ｐ−メチルベンツヒドリルアミン樹脂；Ｂｏｃ：
ｔ−ブチルオキシカルボニル基；Ｂｚｌ：ベンジル基；
Ｒ：炭素数１〜４のアルキル基で置換されていてもよい
フェニル基；Ｔｏｓ：ｐ−トルエンスルホニル基；２−
ＣｌＺ：２−クロロベンジルオキシカルボニル基。

【０００６】本発明の新規なホスホペプチドは、請求項
１における式（１）に示す順序に配列した１３のアミノ
酸からなり、該配列中６番目のＬ−セリン（Ｓｅｒ）及
び９番目のＬ−スレオニン（Ｔｈｒ）の少なくとも一方
のＯＨ基にＰＯ（ＯＨ）２基が結合した構造を有する。これらのホスホペプチドを製造するには周知の固相法に
よるペプチド合成法が適用される。例えば、式（１）の
ＸがＰＯ（ＯＨ）２基であり、Ｙが水素原子であるホス
ホペプチドを製造するには、ＭＢＨＡ樹脂を自動ペプチ
ド合成機にセットし、これに予め製造されたＢｏｃ−Ａ
ｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−Ｏ
Ｈ、Ｂｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｐｒｏ−ＯＨ、Ｂ
ｏｃ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ
、Ｂｏｃ−Ｐｒｏ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｓｅｒ［ＰＯ（ＯＲ
）２］−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｐｒｏ
−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｓ
ｅｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ及びＢｏｃ−Ｌｙｓ（２−ＣｌＺ
）−ＯＨを供給して順次縮合させる。次いで、得られる
側鎖が保護されているＨ−Ｌｙｓ（２−ＣＩＺ）−Ｓｅ
ｒ（Ｂｚｌ）−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｓ
ｅｒ［ＰＯ（ＯＲ）２］−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ（Ｂ
ｚｌ）−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−Ａｒｇ（
Ｔｏｓ）−ＭＢＨＡ樹脂を、フツ化素と反応させてペプ
チドをＭＢＨＡ樹脂と切り離した後、加水素分解してＰ
Ｏ（ＯＲ）２基をＰＯ（ＯＨ）２基に変えればよい。

【０００７】また、式（１）のＸ及びＹが共にＰＯ（Ｏ
Ｈ）２基であるホスホペプチドを製造するには、上記の
０００６項において用いたＢｏｃ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−
ＯＨの代りにＢｏｃ−Ｔｈｒ［ＰＯ（ＯＲ）２］−ＯＨ
を使用する以外は０００６項と同様に処理すればよい。更に、式（１）のＸが水素原子であり、ＹがＰＯ（ＯＨ
）２基であるホスホペプチドを製造するには、上記の０
００６において用いたＢｏｃ−Ｓｅｒ［ＰＯ（ＯＲ）２
］−ＯＨの代わりにＢｏｃ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨを
使用し、かつＢｏｃ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨの代わり
にＢｏｃ−Ｔｈｒ［ＰＯ（ＯＲ）２］−ＯＨを使用する
以外は０００６項と同様に処理すればよい。

【０００８】なお、本発明で使用したＢｏｃ−Ｓｅｒ［
ＰＯ（ＯＲ）２］−ＯＨ及びＢｏｃ−Ｔｈｒ［ＰＯ（Ｏ
Ｒ）２］−ＯＨで示されるアミノ酸誘導体は、例えば、
ＨＯ−Ｒで示されるフェノ−ル類にホスホリルクロライ
ド（ＰＯＣｌ３）を反応させてＣｌ−ＰＯ（ＯＲ）２と
し、これにＢｏｃ−Ｓｅｒ−ＯＢｚｌ又はＢｏｃ−Ｔｈ
ｒ−ＯＢｚｌを反応させた後、ベンジル基を加水素分解
することにより除去して、Ｂｏｃ−Ｓｅｒ［ＰＯ（ＯＲ
）２］−ＯＨ又はＢｏｃ−Ｔｈｒ［ＰＯ（ＯＲ）２］−
ＯＨとすることにより容易に製造することができる。

【０００９】

【発明の効果】本発明の新規なホスホペプチドは、これ
に対する抗体を用いてＰＨＦを検出することにより、ア
ルツハイマ−型老年痴呆症の診断薬としての用途が期待
される。

【００１０】

【実施例】以下本発明を実施例について更に詳細に説明
するが、本発明はその要旨を超えない限りこれ等の実施
例に限定されるものではない。

【００１１】実施例１Ｃｌ−ＰＯ（ＯＲ）２の製造：（ａ）　ホスホリルクロライド１７．５　ｍｌ（１８８
　ｍｍｏｌ）、マグネシウム切屑０．１６　ｇ（６．６
ｍｍｏｌ）及び２−メチルフェノ−ル３１　ｍｌ（３０
０　ｍｍｏｌ）を混合して１２０℃の油浴中で還流下加
熱した。１２０℃で１時間加熱した後、油浴の温度を１
８０℃に上昇して３時間加熱を続行した。こうして得た
粘稠な油状物を蒸留し、沸点１４５〜１５０℃／０．０
３　ｍｍＨｇのビス［（２−メチルフェニル）オキシ］
ホスホリルクロライドを６７％の収率で得た。

【００１２】（ｂ）　上記実施例１の（ａ）において使
用した２−メチルフェノ−ルの代りに２−ｔ−ブチルフ
ェノ−ルを使用した外は、（ａ）と同様に処理して沸点
１８５〜１９０℃／０．２　ｍｍＨｇのビス［（２−ｔ
−ブチルフェニル）オキシ］ホスホリルクロライドを４
３％の収率で得た。（ｃ）　上記実施例１の（ａ）において使用した２−メ
チルフェノ−ルの代りに２，６−ジメチルフェノ−ルを
使用した以外は、（ａ）と同様に処理して沸点１７３℃
／０．２　ｍｍＨｇのビス［（２，６−ジメチルフェニ
ル）オキシ］ホスホリルクロライドを５３％の収率で得
た。

【００１３】実施例２Ｂｏｃ−Ｓｅｒ［ＰＯ（ＯＲ）２］−ＯＢｚｌ及びＢｏ
ｃ−Ｔｈｒ［ＰＯ（ＯＲ）２］−ＯＢｚｌの製造：（ａ）　５　ｇ（１６．９　ｍｍｏｌ）のＢｏｃ−Ｓｅ
ｒ−ＯＢｚｌを含むピリジン溶液に、実施例１の（ａ）
で得たビス［（２−メチルフェニル）オキシ］ホスホリ
ルクロライド１．１当量を０℃で加え室温で１２〜２０
時間攪拌した。反応混合物を酢酸エチル２００　ｍｌで
希釈した後、２Ｍ塩酸（２００　ｍｌ×２）及び食塩水
（２００　ｍｌ×３）で逐次洗浄した。分液して有機層
を採取し無水芒硝で乾燥したのち溶媒を除去し、残留油
を酢酸エチル−ヘキサンを溶媒としてシリカゲルを用い
たカラムクロマトグラフィ−により精製し、ヘキサンで
再結晶してＢｏｃ−Ｓｅｒ［ＰＯ（ＯＲ）２］−ＯＢｚ
ｌ（Ｒ：２−メチルフェニル）で示されるセリン誘導体
を６９％の収率で得た。この物質のマススペクトル（Ｍ
Ｓ）及びＮＭＲは次の通りであった。ＭＳ４５４（１０
０％），５５５（Ｍ＋，１７．９％）；１Ｈ−ＮＭＲ（
ＣＤＣｌ３），１．４２（ｓ，９Ｈ），２．２０（ｓ，
６Ｈ），４．５４（ｄｄｄ，Ｊ＝９．５，６．０，２．
９　Ｈｚ，１Ｈ），４．５８（ｄｔｄ，Ｊ＝８．０，２
．９，２．８　Ｈｚ，１Ｈ），４．６５（ｄｄｄ，Ｊ＝
９．５，６．０，２．９　Ｈｚ，１Ｈ），５．０５（ｄ
，Ｊ＝１２．２　Ｈｚ，１Ｈ），５．１５（ｄ，Ｊ＝１
２．２　Ｈｚ，１Ｈ），５．３５（ｄ，Ｊ＝８．０　Ｈ
ｚ，１Ｈ），７．０６−７．２７（ｍ，８Ｈ），７．３
１（ｍ，５Ｈ）

【００１４】（ｂ）　上記実施例２の（
ａ）において使用したビス［（２−メチルフェニル）オ
キシ］ホスホリルクロライドの代りにビス［（２−ｔ−
ブチルフェニル）オキシ］ホスホリルクロライドを使用
し、かつ触媒量のジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）
を添加した以外は（ａ）と同様に処理して、油状のＢｏ
ｃ−Ｓｅｒ［ＰＯ（ＯＲ）２］−ＯＢｚｌ（Ｒ：２−ｔ
−ブチルフェニル）で示されるセリン誘導体を６８％の
収率で得た。この物質のＭＳ及びＮＭＲは次の通りであ
った。ＭＳ　４８２（１００％），５８３（Ｍ＋，０．
３％）；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３），１．３７（ｓ，
９Ｈ），１．３８（ｓ，９Ｈ），１．４０（ｓ，９Ｈ）
，４．５３（ｍ，２Ｈ），４．６３（ｄｄｄ，Ｊ＝９．
６，５．１，２．６　Ｈｚ，１Ｈ），４．９２（ｄ，Ｊ
＝１２．２　Ｈｚ，１Ｈ），５．１１（ｄ，Ｊ＝１２．
２　Ｈｚ，１Ｈ），５．２８（ｄ，Ｊ＝７．９　Ｈｚ，
１Ｈ），７．１１（（ｄｄｄｄ，Ｊ＝７．９，６．２，
５．０，１．８　Ｈｚ，２Ｈ），７．１６（ｄｄｄｄ，
Ｊ＝７．９，６．２，６．２，１．８　Ｈｚ，２Ｈ），
７．２３（ｍ，２Ｈ），７．３（ｍ，３Ｈ），７．３６
（ｄｄｄｄ，Ｊ＝７．９，４．６，１．８，１．８　Ｈ
ｚ，２Ｈ），７．５０（ｄｄ，Ｊ＝１６．７，７．９　
Ｈｚ，２Ｈ）

【００１５】（ｃ）　上記実施例２の（ａ）において使
用したビス［（２−メチルフェニル）オキシ］ホスホリ
ルクロライドの代りにビス［（２，６−ジメチルフェニ
ル）オキシ］ホスホリルクロライドを使用し、かつ触媒
量のＤＭＡＰを添加した以外は（ａ）と同様に処理して
、油状のＢｏｃ−Ｓｅｒ［ＰＯ（ＯＲ）２］−ＯＢｚｌ
（Ｒ：２，６−ジメチルフェニル）で示されるセリン誘
導体を７６％の収率で得た。この物質のＭＳ及びＮＭＲ
は次の通りであった。ＭＳ　４８２（１００％），５８
３（Ｍ＋０．３％）；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３），１
．４２（ｓ，９Ｈ），２．２８（ｓ，６Ｈ），２．２９
（ｓ，６Ｈ），４．４６（ｍ，２Ｈ），４．５５（ｄｄ
ｄ，Ｊ＝９．３，５．８，２．５　Ｈｚ，１Ｈ），５．
０２（ｄ，Ｊ＝１２．３　Ｈｚ，１Ｈ），５．０５（ｄ
，Ｊ＝８．６　Ｈｚ，１Ｈ），５．１２（ｄ，Ｊ＝１２
．３　Ｈｚ，１Ｈ），７．０６（ｍ，６Ｈ），７．３１
（ｍ，５Ｈ）

【００１６】実施例３Ｂｏｃ−Ｓｅｒ［ＰＯ（ＯＲ）２］−ＯＨの製造：（ａ
）　酢酸エチル中に実施例２の（ａ）で得たセリン誘導
体と、活性炭に担持したパラジウム触媒（Ｐｄ／Ｃ）を
加えて水素気流中で室温で２時間攪拌した。反応混合物
をセライトを用いて濾過し、濾液を減圧下濃縮して油状
のＢｏｃ−Ｓｅｒ［ＰＯ（ＯＲ）２］−ＯＨ（Ｒ：２−
メチルフェニル）で示されるセリン誘導体を定量的収率
で得た。このもののＭＳ及びＮＭＲは次の通りであった
。ＭＳ　２７６（１００％），４６５（Ｍ＋，２．８％
）；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３），１．４２（ｓ，９Ｈ
），２．１９（ｓ，３Ｈ），２．２１（ｓ，３Ｈ），４
．５５（ｍ，２Ｈ），４．６７（ｍ，１Ｈ），５．５４
（ｄ，Ｊ＝７．６　Ｈｚ，１Ｈ），６．３０（ｂｒ．ｓ
，１Ｈ），７．０７（ｍ，２Ｈ），７．１３（ｔ，Ｊ＝
７．３　Ｈｚ，２Ｈ），７．１８（ｔ，Ｊ＝７．３　Ｈ
ｚ，２Ｈ），７．２５（ｄ，Ｊ＝５．６　Ｈｚ，２Ｈ）

【００１７】（ｂ）　上記実施例３の（ａ）において使
用したセリン誘導体の代りに、Ｂｏｃ−Ｓｅｒ［ＰＯ（
ＯＲ）２］−ＯＢｚｌ（Ｒ：２−ｔ−ブチルフェニル）
で示されるセリン誘導体を使用した以外は実施例３の（
ａ）と同様に処理して、Ｂｏｃ−Ｓｅｒ［ＰＯ（ＯＲ）
２］−ＯＨ（Ｒ：２−ｔ−ブチルフェニル）で示される
セリン誘導体を定量的収率で得た。本品のＭＳ及びＮＭ
Ｒは次の通りであった。ＭＳ　４７５（１００％），５
４９（Ｍ＋，２．５％）；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）
，１．３１（ｓ，９Ｈ），１．３６（ｓ，９Ｈ），１．
３８（ｓ，９Ｈ），４．２８（ｂｒ．ｓ，１Ｈ），４．
３６（ｍ，１Ｈ），４．６７（ｍ，１Ｈ），５．２０（
ｂｒ．ｓ，１Ｈ），５．５４（ｄ，Ｊ＝６．７　Ｈｚ，
１Ｈ），７．０５（ｄｔ，Ｊ＝７．６，７．５　Ｈｚ，
２Ｈ），７．１２（ｄｔ，Ｊ＝１４．０，７．５　Ｈｚ
），７．３２（ｄｄ，Ｊ＝１６．０，７．６　Ｈｚ，２
Ｈ），７．４６（ｄｄ，Ｊ＝２５．８，７．５　Ｈｚ，
２Ｈ）

【００１８】（ｃ）　上記実施例３の（ａ）において使
用したセリン誘導体の代りに、Ｂｏｃ−Ｓｅｒ［ＰＯ（
ＯＲ）２］−ＯＢｚｌ（Ｒ：２，６−ジメチルフェニル
）で示されるセリン誘導体を使用した以外は実施例３の
（ａ）と同様に処理して、Ｂｏｃ−Ｓｅｒ［ＰＯ（ＯＲ
）２］−ＯＨ（Ｒ：２，６−ジメチルフェニル）で示さ
れるセリン誘導体を定量的収率で得た。本品のＭＳ及び
ＮＭＲは次の通りであった。ＭＳ　３９２（１００％）
，４９３（Ｍ＋，６％）；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）
，１．４２（ｓ，９Ｈ），２．２６（ｓ，３Ｈ），２．
２７（ｓ，３Ｈ），４．３７（ｍ，１Ｈ），４．４５（
ｍ，１Ｈ），４．５３（ｍ，１Ｈ），５．２３（ｄ，Ｊ
＝７．５　Ｈｚ，１Ｈ），６．９８（ｍ，６Ｈ），７．
８９（ｂｒ．ｓ）

【００１９】実施例４（イ）　Ｈ−Ｌｙｓ（２−ＣｌＺ）−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）
−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ［ＰＯ（
ＯＲ）２］−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ｐｒ
ｏ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｍ
ＢＨＡ樹脂の製造：ＭＢＨＡ樹脂０．９４　ｇ（アミン
含量０．６４　ｍｍｏｌ／ｇ樹脂）をバイオサ−チ社製
９５００型自動ペプチド合成機にセットし、これにＢｏ
ｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ
）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｐｒｏ−Ｏ
Ｈ、Ｂｏｃ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｇｌｙ
−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｐｒｏ−ＯＨ、実施例３の（ａ）で得
たＢｏｃ−Ｓｅｒ［ＰＯ（ＯＲ）２］−ＯＨ（Ｒ：２−
メチルフェニル）、Ｂｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｐ
ｒｏ−ＯＨ、Ｂｏｃ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ、Ｂｏｃ
−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ及びＢｏｃ−Ｌｙｓ（２−Ｃ
ｌＺ）−ＯＨを供給して順次縮合させて上記の側鎖保護
ペプチド−ＭＢＨＡ樹脂２．５　ｇを得た。

【００２０】（ロ）　フツ化素処理：上記（イ）で得た
側鎖保護ペプチド−ＭＢＨＡ樹脂中の０．５　ｇを採取
し、これを蛋白質研究奨励会ペプチド研究所製のフツ化
素反応装置にセットし、１　ｍｌのアニソ−ルの存在下
で１０　ｍｌのフツ化素と０℃で１時間反応させた。反
応終了後、フツ化素を減圧下留去し、残留物を酢酸エチ
ルで洗浄した後、２Ｍ酢酸１００　ｍｌで抽出処理して
、Ｈ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｓｅ
ｒ［ＰＯ（ＯＲ）２］−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｒ
ｏ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ａｒｇ−ＮＨ２で表されるリン酸
基を保護した粗ペプチド１３５　ｍｇを得た。

【００２１】これを３０％酢酸２０　ｍｌに溶解してセ
ファデックスＧ−２５のカラム（内径５　ｃｍ、長さ１
００　ｃｍ）にかけ、同じ溶媒を用いて溶出して目的物
を含む画分を集めた。次いでこれを小量の蒸留水に溶解
し、ＯＤＳ（オクタデシルシラン）をシリカに結合した
逆相系のカラム（内径２　ｃｍ、長さ２５　ｃｍ）を用
いたＨＰＬＣ（高速液体クロマトグラフィ−）により精
製した。溶出は０．１％トリフルオロ酢酸中３０分で５
％から６５％までのアセトニトリルの濃度勾配をかける
ことにより行った。精製物の収量は６５　ｍｇであった
。本物質のマススペクトル（ＦＡＢ−ＭＳ）及び酸加水
分解物中のアミノ酸比率は次の通りであった。ＦＡＢ−
ＭＳ［Ｍ＋Ｈ］＋　１４７４，計算値（Ｃ６３Ｈ９７Ｎ
１８Ｏ２１Ｐ＋Ｈ）　１４７４；　Ｔｈｒ０．９３（１
），　Ｓｅｒ　３．１　（４），　Ｐｒｏ　２．７　（
３），　Ｇｌｙ　３．０　（３），　Ｌｙｓ　０．９８
　（１），　Ａｒｇ　１．０　（１）

【００２２】（ハ）　加水素分解：上記（ロ）で得たリ
ン酸基を保護したペプチド６０　ｍｇ及び酸化白金１０
０　ｍｇ（触媒）を１　ｍｌの酢酸と混合して５〜６気
圧の水素圧下、室温で１２時間攪拌した後、触媒を濾去
した。濾液を凍結乾燥し、分取ＨＰＬＣにより精製して
最終目的物であるＨ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｐｒｏ
−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ［ＰＯ（ＯＨ）２］−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ
−Ｔｈｒ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ａｒｇ−ＮＨ２で
表されるホスホペプチド３５　ｍｇを得た。本物質の構
造は、以下に示すＦＡＢ−ＭＳ、アミノ酸分析及び配列
分析により確認された。ＦＡＢ−ＭＳ［Ｍ＋Ｈ］＋　１
２９４，計算値（Ｃ４９Ｈ８５Ｎ１８Ｏ２１Ｐ＋Ｈ）１
２９４；　Ｔｈｒ　１．１０　（１），　Ｓｅｒ　３．
３　（４），　Ｐｒｏ　３．４　（３），　Ｇｌｙ　２
．９　（３），　Ｌｙｓ　１．０２　（１），Ａｒｇ　
１．０６　（１）

【００２３】実施例５実施例４の（イ）で使用したＢｏｃ−Ｓｅｒ［ＰＯ（Ｏ
Ｒ）２］−ＯＨ（Ｒ：２−メチルフェニル）の代わりに
Ｂｏｃ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨを使用し、かつＢｏｃ
−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨの代わりに公知のＢｏｃ−Ｔ
ｈｒ［ＰＯ（ＯＲ）２］−ＯＨ（Ｒ：フェニル）を使用
した以外は、実施例４の（イ）と同様に処理した後、引
続いて実施例４の（ロ）及び（ハ）と同様に処理してＨ
−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−
Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ［ＰＯ（ＯＨ）２］−Ｐｒｏ−
Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ａｒｇ−ＮＨ２で表されるホスホペプ
チドを得た。本物質の構造は、以下に示すＦＡＢ−ＭＳ
、アミノ酸分析及び配列分析により確認された。ＦＡＢ
−ＭＳ［Ｍ＋Ｈ］＋１２９４，計算値（Ｃ４９Ｈ８５Ｎ
１８Ｏ２１Ｐ＋Ｈ）　１２９４；Ｔｈｒ　０．９７　（
１），　Ｓｅｒ３．９５（４），　Ｐｒｏ　２．９０　
（３），　Ｇｌｙ　２．９４　（３），　Ｌｙｓ　１．
０８　（１），　Ａｒｇ　１．００　（１）

【００２４】実施例６実施例４の（イ）で使用したＢｏｃ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）
−ＯＨの代わりにＢｏｃ−Ｔｈｒ［ＰＯ（ＯＲ）２］−
ＯＨ（Ｒ：フェニル）を使用した以外は、実施例４の（
イ）と同様に処理した後、引続いて実施例４の（ロ）及
び（ハ）と同様に処理してＨ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ
−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ［ＰＯ（ＯＨ）２］−Ｐｒｏ
−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ［ＰＯ（ＯＨ）２］−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ
−Ｓｅｒ−Ａｒｇ−ＮＨ２で表されるホスホペプチドを
得た。本物質の構造は、以下に示すＦＡＢ−ＭＳ、アミ
ノ酸分析及び配列分析により確認された。ＦＡＢ−ＭＳ
［Ｍ＋Ｈ］＋　１３７３，計算値（Ｃ４９Ｈ８６Ｎ１８
Ｏ２４Ｐ２＋Ｈ）　１３７４；　Ｔｈｒ　０．７３　（
１），　Ｓｅｒ　３．１２（４），　Ｐｒｏ　２．６０
　（３），　Ｇｌｙ　３．００　（３），Ｌｙｓ　１．
１６　（１），　Ａｒｇ　１．００　（１）

【配列表】

配列番号：１配列の長さ：１３配列の型：アミノ酸トポロジ−：直鎖状配列の種類：ペプチド配列の特徴：配列中６番のＳｅｒ及び９番のＴｈｒのう
ち少なくとも一方は、ＰＯ（ＯＨ）２基と結合している
。

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】　　下記の式（１）【化１】［式中、Ｘ及びＹはＰＯ（ＯＨ）２基又は水素原子を示
し、かつＸ及びＹのうち少なくとも一方はＰＯ（ＯＨ）
２基を示す］で表される新規ホスホペプチド。