JPS61112099A - 新規ポリペプチド及びその製造法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】

［発明の技術分野］ 本発明は、新規ポリペプチド及びその製造法に関し、更
に詳しくは、血中Ｃａ’◆濃度を低下させる作用を有す
る新規ポリペプチド及びその製造法に関するものである
。 ［従来技術及びその問題点］ 従来より、血中Ｃａ２“濃度低下作用を有するポリペプ
チドとして、カルシトニン（Ｃａｌｃｉｊｏｎｉｎ；以
下ｒ　ＣＴＪ　という）が公知である。　ＣＴは、ヒト
などの各種哺乳動物の甲状腺から、あるいは、魚類、門
口類、鳥類の鯰後体から抽出採取され、そのアミノ酸−
次配列が明らかにされており、この配列に基づき類似構
造の合成ＣＴも多く報告されている。 これら動物由来ＣＴは、いずれも３２個の構成アミノ酸
からなるポリペプチドであって、その１番目と７番目の
アミノ酸がＬ−システィンであり、両者のメルカプト基
がジスルフィド結合を形成し、カルボキシル基末端（以
下「Ｃ末端」という）がプロリンアミドである点で全て
共通している。 最近１本発明者らはニワトリ！！後体から、ＣＴを抽出
精製し、その構造決定を行なったところ。 次式（Ｉ）： ＋（−（ｙｓ−Ａｌａ−９ｅｒ−Ｌｅｕ−Ｓｓｒ−Ｔｈ
ｒ−Ｃｒｓ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ｇｌｒ−Ｌｙｇ−Ｌｅｕ
−９ｓｒ−Ｇｌｒ＋−Ｇｌｕ−Ｌｅｕ−旧ｓ−Ｌｙｇ−
Ｌｅｕ−Ｇｌｎ−（Ｉ　）Ｔｈｒ−Ｔｙｒ−Ｐｒｏ−＾
ｒｇ−τｈｒ−Ａｓｐ−Ｖａ　１−Ｇｌｙ−＾１ａ−Ｇ
ｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｒｏ−ＮＨ２ （式中、　Ｃｐｍはシスティンを、Ａｌａはアラニンを
、　Ｓｅｒはセリンを、Ｌｓｕはロイシンを、Ｔｈｒは
スレオニンを、Ｖａｌはバリンを、　Ｇｌｙはグリシン
を、Ｌｙｘはリジンを、Ｇｌｎはグル　　　　　［タミ
ンを、　Ｇｌｕはグルタミン酸を、旧Ｓはヒスチジンを
、Ｔｙｒはチロシンを、　Ｐｒｏはプロリフ七、Ａｒｇ
はアルギニンを、　Ａｓｐはアスパラギン酸を表わす、
） で示される。従来既知のＣＴとは全く異なる構造を有す
ることを見い出した。このＣＴは、門口類及びｆｈ、１
１のＣＴと同等又はそれ以上の生物活性を有するもので
あり、°特願昭５８−２３０５９３号として既に出願さ
れている。 このニワトリＣＴは、骨ベージェット病や骨粗眩症また
血液中のＣａ”濃度が異常に高い高Ｃａ血症なとの諸症
状に有用な新規医薬品となることが期待される。しかし
ながら、これを医薬品とするためには、ニワトリＣＴの
有するジスルフィド結合が溶液中で極めて不安定である
と推定され、生理活性か低下するおそれがあるなどの問
題がある。そこで１本発明者らは、このニワトリＣＴの
構造をもとに、溶液状態においても安定なＣＴ誘導体を
得ることを目的として鋭意研究を行なった結果、ニワト
リＣＴの１及び７番目のシスティンの代りに。 次式（１１）＋ ％式％： （式中　１は３〜７の整数を表わす、）で示されるα−
アミノ酸を用い、該アミノ酸の側鎖カルボキシル基と、
アミノ基末端（以下「Ｎ末端」という）のアミノ酸、即
ちアラニンのアミノ基との間で閉環せしめることにより
、前記目的を達成できることを見い出し、本発明を完成
するに２つた。 ［ＩＡ明の構成］ 本発明は、 次式（ｍ）： 「−（ｃＨ２）・−一−−−］ ＧＯ−Ａｌａ−Ｓｉｒ−Ｌａｕ−Ｓｓｒ−Ｔｈｒ−ＮＨ
ＣＨＣＯ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−Ｌｅｕ−
９ｅｒ−Ｇｌｎ−Ｇｌｕ−Ｌｅｕ−）１ｉｓ−Ｌｙｓ（
ｅｕ−（Ｉｎ’−Ｔｈｒ−丁２ｒ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｔ
ｈｒ−Ａｓｐ−Ｖａｔ−Ｇ１７−Ａｌａ−０１７−Ｔｈ
ｒ−Ｐｒｏ−ＮＯ３（式中、Ａｌａ　、　Ｓｅｔ　、　
Ｌｅｕ　、　Ｔｈｒ　、　Ｖａｌ　。 Ｇｌｙ　、　Ｌｙｓ　、　Ｇｌｎ　、　Ｇｌｕ　、　Ｈ
ｉｓ　、　Ｔｙｒ　、　Ｐｒｏ　。 Ａｒｇ　、　Ａｓｐ及びｎは、前記と同義である。以下
回様、） で示される新規ポリペプチド又はその酸付加塩若しくは
錯体及びその！ｖ造法に関するものである。 本発明の新規ポリペプチド又はその酸付加塩若しくは錯
体は１次のようにして製造することができる。 即ち、前記式（ｍ）で示されるアミノ酸配列を有するペ
プチド又はポリペプチドを形成せしめ。 反応あ任意の過程で生成された次式： ％式％ （式中、Ｒは活性エステル残基を表わす、以下同様） で示されるペプチド残基を含む構成単位を環化反応に付
すことにより製造することかでさる。 本製造法は、通常、活性基を適当な保ｇ／ｌ基で保護し
て１反応の任意の過程で保護基を脱離することにより行
なう。 本発明に用いる前記式（ＩＩ）で示されるα−７ミノ酸
としては、その反応の容易性の点から、式中のｎが４〜
６のものが好ましく　ｎか５のものが更に好ましい、ま
た、このα−７ミノ醜としては、ｄ一体又はｄｌ一体を
用いてもよいが、ｌ一体を用いることが好ましい。 反応それ自身はペプチド合成の常法ｐ　Ｉｔに従って保
護基の脱着、縮合反応を繰り返すことにより行なう０ｗ
Ｊち、；（発明の製造法の原料及び全ての中間体の製造
において使用される各種保護基としては、ペプチド合成
で既知なもの。 即ち、加水分解、酸分解、還元、アミノリンス又はヒド
テジノリシスのような既知子役によって容易に脱離する
ことのできる保護基が用いられる。 例えば、アミ７基に使用する保ａ基としては。 ホルミル基、トリプルオロアセチル基、フタロイル基、
べ／ゼンスルホニル基、トシル（ｒＴａｇ」という）Ｍ
、０−ニトロフェニルスルフェニル基。 ２．４−ジニトロフェニルスルフェニル基などのアシル
基；ベンジル（以下ｒＢｚｌＪという）基、ノフェニル
メチル基、トリフェニルメチル基（これらの基は０−メ
トキシ基、Ｐ−メトキシ基などの低級アルコキシ基によ
って置換することもできる）などの７ラルキル基：ベン
ジルオキシカルボニル（以下ｒｃｂｚＪという）基、〇
−又はｐ−ブロモベンジルオキシカルボニル基、０−ク
ロロベンジルオキシカルボニル（以下ｒ　Ｃｂｚ＜ａ−
ＣＩ）という）基、１−又はｐ−クロロベンジルオキシ
カルボニル基、ｐ−二トｏべ／ジルオキシカルボニル基
、ｐ−メトキシベンジルオキシカルボニル基、ｐ−フェ
ニルアゾーベンジルオキシカルボニル基、　ｐ−（ｐ’
−メトキシフェニルアゾ）−ベンジルオキシカルボニル
基などのベンジルオキシカルボニル誘導体基；シクロペ
ンチルオキシカルボニル基、トリクロロエチルオキシカ
ルボニル基、ｔ−アミルオキシカルボニル（以下ｒＡＯ
ｃＪという）基、トブトキシ力ルポニル（以下「ＢＯＣ
」　という）基、ジインプロピルメトキシカルボニル基
などの脂肪族オキシカルボニル基；２−フェニルイソプ
ロポキシカルボニル基、２−トリルイソプロポキシカル
ボニル基、２−、−ジフェニルイソプロポキシカルボニ
ル基などの７ラルキルオキシカルボニル基；などがある
。 カルボキシル基は、通常、７ミド化、ヒドラジド化又は
エステル化によって保護される。アミド基は、通常、３
．トリメトキシベンジル基、ビス−（Ｐ−メトキシフェ
ニル）メチル基などによって置換される。ヒドラジド基
は１通常、　Ｃｂｚ基、トリクロロエチルオキシカルボ
ニル基、トリフルオロアセチル基、ＢＯＣ基、トリチル
基、ジフェニルイソプロポキシカルボニル基などによっ
て置換される。エステル化には、通常、メタノール、エ
タノール、ｔ−ブタノール、シアノメチルアルコールな
どのフルカノール；ベンジルアルコール、ρ−ブロモベ
ンジルアルコール、ｐ−クロロベンジルアルコール、ｐ
−メトキシベンジルアルコール、ｐ−二トロベンジルア
ルコール、　２，４．８−）リメチルベンジルアルコー
ル、ベンズヒドリルアルコール、ベンゾイルメチルアル
コール、ｐ−ブロモベンゾイルメチルアルコール、ｐ−
クロロベンゾイルメチルアルコールなどの７ラルカノー
ル；２，４．８−）リクロ口フェノール、　２．４．５
−トリクロロフェノール、ペンタクロロフェノール、ｐ
−ニトロフェノール、２．４−ジニトロフェノール、ｐ
−シアノフェノール、Ｐ−メタンスルホニルフェノール
などのフェノール類：チオフェノール、チオクレゾール
、ρ−ニトロチオフェノールなどのチオフェノール類；
などを用いる。 次に、各種アミノ酸の保護について述べる。前記Ｓｓｒ
、　Ｔｈｒ及びＴ７ｒの水酸基は１例えばエステル化又
はエーテル化によって保護できる。このエステル化に適
する基としては、例えば、アセチル基などの低級アルカ
ノイル基、ベンゾイル基などのアロイルｇ、ｃｂｚＴｓ
、エトキシカルボニル基などの炭醜から誘導される基が
挙げられる。また。 エーテル化に適する基としては、例えば、　Ｂｚｌ基、
テトラヒドロピラニル１．　ｔ−ブチル基などが挙げら
れる。これらの水酸基の保護には、２．２．２−トリプ
ルオロー１−ｔ−ブトキシカルボニルアミノエチル基、
２．２．２−　）リフルオロ−１−ペンジルオキン力ル
ポニル７ミノエチル基も適する。しかしながら、これら
の水酸基は必ずしも保護する必要はない。 前記Ｌｙｓのε−アミノ基は、Ｃｂｚ　Ｘ、ｏ、ｍ、ｐ
−クロロベンジルオキン力ルポニルＪＪｉ、Ｔｏｓノ、
（なとによって保護できる。前記Ｇｌｕ及びＡｓｐの側
鎖のカルボキシル基はベンジルエステル（以下ｒＯＢｚ
ｌＪという）１＆によって保護できる。前記旧Ｓのイミ
ノ基は、例えば、　８ｚｌ　ＪＪ、トリチル基、　Ｃｂ
ｚ基、Ｔａ５ＪＪ、アダマンチルオキシ力ルポニルノ、
シ２．２．２−　）リフルオロ−１ｔ−ブトキシカルボ
ニルアミノエチル基、２．２．２−トリフルオロ−１−
ベンジルオキシカルボニルアミノエチル基などによって
保護できる。しかしながら、このイミノ基は必ずしも保
護する必要はない、前記Ａｒｇのグアニジノ、！、１；
の保護基としては、例えば、ニトロ基、　Ｔｏｓ基。 Ｃｂｚ基が挙げられるが、このグアニジノ基は必ずしも
保護する必要はない。 本発明において、アミノ酸の縮合は、アミノ酸を１個ず
つ順次縮合させてもよく、２個以上のア　　　　　　［
ミノ酸からなるペプチド又はポリペプチドを縮合させて
もよい、かかる縮合は、例えば、保護されたα−７ミノ
基及び活性化末端カルボキシル基をもつアミノ酸又はペ
プチド若しくはポリペプチドと遊離のα−７ミノ基及び
保護された末端カルボキシル基をもつアミノ酸又はペプ
チド若しくはポリペプチドとを反応させるか、あるいは
活性化α−７ミノ基及び保護された末端カルボキシル基
をもつアミノ酸又はペプチド若しくはポリペプチドとＭ
ｍの末端カルボキシル基及び保護されたα−アミツノふ
をもつアミノ酸又はペプチド若しくはポリペプチドを反
応させることにより実施することができる。 この場合、カルボキシル基は、例えば、酸アジド、酸無
水物、酸イミダゾリド又は活性エステル、例えば、シア
ノメチルエステル、チオフェニルエステル、ｐ−ニトロ
チオフェニルエステル、ｐ−メタンスルホニルフェニル
エステル、チオジエステル、ｐ−ニトロフェニルエステ
ル（以下ｒＯＮＰＪという）　、　２．４−ジニトロフ
ェニルエステル、２，４．５−トリクロロフェニルエス
テル、　２．４．８−トリクロロフェニルエステル、ペ
ンタクロロフェニルエステル、Ｎ−ヒドロキシコハク醜
イミドエステル（以下「Ｏ５υ」という）、Ｎ−ヒドロ
キシフタル酸イミドエステル、８−ヒドロキシキノリン
エステルスはＮ−ヒドロキシピペリジンエステルなどに
変換することによって、あるいはカルボジイミド、Ｎ、
Ｎ’−カルボニル−ジイミダゾール又はインオキゾリウ
ム塩、例えば、ウッドワード反応剤などで処理すること
によって活性化することができる。 本発明において好ましい縮合方法は、カルボジイミド法
、アンド法、活性エステル法及び混合酸無水物法である
。このうち、縮合の各段階でのラセミ化が最小になる方
法、例えば、アンド法、活性エステル法、Ｎ−ヒドロキ
ンコハク酩イミド（以下ｒ　ＨＯ５ｕＪという）　−Ｎ
、Ｎ’−シンクロへキシルカルボジイミド（以下ｒＤｃ
ｃＪという）法又は１−ヒドロキシベンゾトリアゾール
（以下ｒ　ＨＯＢＴＪという）　−０ＣＣ法を用いるこ
とが更に好ましい。 かくして得られるペプチドの （にＨ２）ｎＣＯＯＲ ■ Ｈ−Ａｌａ−Ｓｅｔ−Ｌａｕ−Ｓｅｒ−丁ｈｒ−ＮＨＣ
Ｈ（：０−を含む構成単位を合成の任意の段階で環化反
応に付すのであるが、この環化は前述の方法で活性化さ
れたｉｉｉ記式（１１）で示されるα−アミノ酸の側鎖
力ルポキンル基とＮ−末端アミノ酸（Ａｌａ）のＭ離ア
ミ７基との縮合反応により行なわれる。その際、Ｓｅｒ
及びＴｈｒの水酸基は保護しておくことが好ましい。 本発明の望ましい方法は前記式（ＩＩ　）で示されるα
−アミノ酸を含む活性基の保護された、又は保護されて
いない環状ペプチド若しくはポリペプチドと、それ以外
の活性基の保護された。又は保護されていないポリペプ
チドを縮合させ、引続き保！１基のある場合には、保護
基を脱離させることにより行なわれる。即ち、　Ｎ末端
の１番から６〜９番までのアミノ酸からなるＮ−末端フ
ラグメントに、残りの全配列７〜ｌＯ番から３１番まで
のポリペプチドを縮合させるのであるが、この場合、フ
ラグメントの縮合における反応性及びラセミ化防止の点
をＪ５慮すればｓｔｙがＣ−末端アミノ酸であることが
イｆ利である。 従って、本発明においては、１〜１４のアミノ酸配列か
らなるペプチドと１０〜３１番の７ミノ醜配列からなる
ポリペプチドを縮合させるのが蛙も好ましい、この縮合
は、アジトス゛シ＜はヒドラジドから出発する７ジド法
又は活性エステル法。 混合醜態水物法等の方法によって行なうことができる。 次に、Ｎ−末端フラグメントの製造をノナペプチド１−
３の合成に関して更に詳細に説明するが、ヘキサペプチ
ド１−６．ヘプタペプチド１−７、オクタペプチド１−
８も全く同様の方法によって製造することができる。 このノナペプチドの形成は、Ｃ−末端アミ／＃（Ｇｌｙ
）又はＣ−末端フラグメントにそのアミノ酸配列に従っ
て個々のアミノ酸又は２個以上のアミノ酸からなる低級
ペプチドを順次縮合させて行なわれる０個々のアミノ酸
１例えばｃｌｙ　、　Ｌｓｕ、Ｖａｌ　、　　（ＩＩ−
カルボキン−ａ−アミノ＃、　Ｔｈｒ　。 Ｓｅｔ　、Ａｌａは活性エステル法により縮合させるの
が有利である。低級ペプチド、例えば、ジペプチド２−
３はＨＯＢＴ−ＤＣ：Ｃ法で縮合させるのが有利である
。また、ヘキサペプチド１Ｂはトリペプチド１−３　と
今一つのトリペプチド４−８をアジド法によって縮合さ
せるのが有利である。 このノナペプチドの合成に際して、その末端カルボキシ
ル基は、必ずしも保護する必要はない。 例えば、アジド法、活性エステル法又は混合醜態水物法
によって縮合させる場合には９その末端カルボキシル基
を保護Ｏなくてもよいが、これらの）、（を前述したよ
うなエステル化によって保護することが望ましい０例え
ば、メタノール、ベンジルアルコールでエステル化する
ことによって保護することができる。これらのエステル
基１例えばメチルエステル基は希薄な水酸化ナトリウム
溶液、好ましくは、　１〜２Ｎの水酸化ナトリウム溶液
により短時間で分解され、又はヒドラジドに変換した後
４分解することができる。また、ベンジルエステル基は
、水素添加によって分解することができる。これらの中
間体の７ミノ基は１通常の保護基、例えばＣｂｚ基、ト
リチル基、ｓｏｃ！！ｌｉ、ジフェニルイソプロポキン
カルボニル基で保護する。また、これらの中間体のカル
ボキシル基フは、必要であれば常法によってエステル化
する。そのＳｅｔ、Ｔｈｒ及びＴ７ｒの水酸基は、必要
であればｔ−ブタノール、ベンジルアルコールなどでエ
ーテル化することによって保護することができる。 前記のＣｂｚ基、ｐ−ニトロへンジルエステル基及びＯ
Ｂｚ　ｌ基はパラジウム／炭素の存在下で水素添加する
ことによって、脱離又は分解され、トトリチル基は酢酸
水溶液によって脱離され、　ＳａＣ基はトリフルオロ酸
ｍ（以下ｒＴＦＡＪという）によって脱離され、０−ニ
トロフェニルスルフェニル基は塩化水素を含む有機溶媒
によって、又はａｍ若しくは亜硫酸によって脱離され、
ジフェニルイソプロポキンカルボニル基は氷酢酸−ギ酸
−水（？：１：２）の混液によって脱離される。また、
ドブチルエステルはｔ−ブチルエーテルと同様にＴＦＡ
によって分解される。 更に、前記ト末端フラグメントと縮合する第７〜ｌＯ番
から第３１番までのＣ−末端フラグメント・の合成に関
して詳細に説明する。 Ｃ−末端アミノ酸（第３１番の７ミノ＃）（Ｐｒｏ）又
はＣ−末端フラグメント１例えばペプチド３０−３１　
。 ２８−３１　、２８−３１　、２５−３１　、２４−３
１又は２３−３１に。 そのアミノ酸配列に従って個々のアミノ酸又は２〜４個
のアミノ酸からなる低級ペプチドを順次縮合させること
が好ましい０例えば、Ｃ−末端フラグメ：、；　）　１
０−３１　は、Ｃ−末端側よリイー々のアミノ酸又は低
級ペプチド、例えばジペプチド２８−２９　、ジペプチ
ド２６−２７、トリペプチド２Ｇ−２２、ジペプチド１
７−１８　、ジペプチド＋５−Ｉｌｌ　、　　）　ＩＪ
ペプチド１０−１２を活性エステル法、　ＨＯ８Ｔ−Ｄ
ＣＩＩ：法などによって縮合させることにより合成でき
る。ここで、各アミノ酸のα−７ミノ基及び官能基の保
護は前述の通りである。 前記の保護されたα−７ミノ基をもつ第７〜１゜番から
第３１番までのＣ−末端フラグメント、例えばドコサペ
プチド７ミド１０〜３１の保護基は前述の方法により＋
’ｍａｉされる。 得られた２つのペプチド、即ち、第１番から第６〜９番
までのに一末端フラグメントと第７〜１０１８から第３
１番までのＣ−末端フラグメントを前述の方法により縮
合し、前記式（ＩＩＩ）で示されるポリペプチドの保護
体が得られる。この保護体中の保護基は、前述の方法、
好ましくは醸分解による方法、例えば無水弗化水漏によ
る方法によって脱離され、前記式（ＩＩＩ）で示される
目的物質が得られる。 本発明の新規（ジペプチドはその方法の条件により塩基
又はその塩の形で得られる。この塩基及びその塩は、公
知の方法によって相互変換可能である。また、この塩基
を薬学的に許容される塩の形成に適する醸１例えば塩酸
、５Ｌ化木漏酸。 硫酸、リン酸、過塩素酸などの無機ｍ：ギＭ、酢醸、プ
ロピオン酸、グリコール酸、乳離、ピルビン酸、シュウ
醸、コハク酸、リンゴ酸、酒石酸。 クエン酸、安９香酸、サリチル酸、低級アルカンスルホ
ン酸、ベンゼンスルホン醜、トルエンスルホノ醜（以下
ｒ　ＴｏｓＯＨＪという）などの有機酸と反応させるこ
とによって相当する塩を形成することがで３る。 前記の新規ペプチドは、ある種の無機物質又は有機物質
を付加して錯体を形成し得る。このような物質としては
１例えばカルシウム、マグネシウム、アルミニウム、コ
バルト又は亜鉛のような金属から誘導される無機化合物
、特にこれら金属のリン酸基、ピロリン酸塩又はポリリ
ン酸塩のような僅かに水溶性の塩及び水酸化物並びにア
ルカリ金属のポリリン酸塩を挙げることができる。また
、その作用を持続させる有機物質としては１例えば非抗
原性ゼラチン、カルボキシメチルセルロース、アルギン
醜のスルホン酸エステル又は９ノ酸エステル、デキスト
ラン、ポリエチレングリコールなどのポリアルコール、
フィチン酩、ポリグルタミン酸、プロタミンが挙げられ
る。 ［発明の効果〕 本発明によれば、溶液状態においても安定なＣＴ誘導体
を供給することができる。 ［発明の実施例］ 次に、実施例を挙げて本発明を更に具体的に説明するが
１本発明はこれにより制限されるものではない。 尚、以下の実施例で使用した血ｆ青カルシウＬ、低下作
用の生物活性測定法、薄層クロマトグラフィーの担体及
び溶媒系並びにアミノ酸分析の条件は次の通りである。 （生物活性測定法） 被検体を１ｚ酢酸ナトリウム（ＰＨ４，０：　０．Ｈ牛
面清フルブミ／含有）溶液を用いて適当に希釈後、更に
希釈した液数種を雄幼若うッ）　（１００ｇ前後）ｌ四
当り０．１閣文を尾静脈に注射し、注射１時間後に心臓
より血液を採取し、遠心分離して血清を採取し、ｍ清中
の（：ａ”ｅｆｆｆを分光学的方法（試薬：フコ−カル
シウム測定用キット）にて測定し。 Ｃ＆２＋濃度をｌｏｔ低下させるのに必要なｊりをｌｏ
ｗＭＲＣ（Ｍｓｄｉｃａｌ　Ｒｅ５ｅａｒｃｈ　Ｃｏｕ
ｎｃｉｌ）Ｕと定義する。 （薄層クロマトグラフィー（以下ｒＴＬＣＪ　という）
）担体ニジリカゲルＧ　（メルク社製） 溶媒系 １．クロロホルム−メタノール−酢酸 ９５：５：３ ２、クロロホルム−メタノール−酢酸 ８５・１０：５ ３、クロロホルム−エタノール−酢酸エチル５：２：５ ４　クロロホルム−メタノール−酢酸−水ＩＱ：　１０
：　　Ｉ　：　１０の水層５、　ｎ−ブタノール−酢醜
−水 ８０：２０：２０の上層 （アミノ酸分析） 被検体約５．０終ｇを５０延交の６Ｎ塩酸−０，１％フ
ェノールを用いて　１１０℃で２２時間加水分解し１次
に、クエン酸溶液（ＰＨ２，２５）　３００蓚見に溶解
し。 アミノ酸分析計（ＨＩＴＡＣＩ（Ｉ　８３５Ｆ型）にて
分析した。 実施例 Ｌ７ｓ−Ｌｅｕ−３ｅｒ−Ｇｌｎ−Ｇｌｕ−Ｌｅｕ−Ｈ
ｉｓ−Ｌ７ｓ−Ｌｅｕ−Ｇｌｎ−τｈｔ−↑ｒ　ｒ−Ｐ
ｒｏ−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ａｓｐ−Ｖａ　ｌ−Ｇ　Ｉｔ−
Ａ　１ａ−Ｇ　ｌ　７−Ｔｈ　ｒ−Ｐ　ｒｏ−ＮＯ３の
製造 ＢＯｆｌニー［、！５（Ｃｂｚ）−Ｌｅｕ−５ｅｔ（Ｂ
ｚｌ）−Ｇｌｎ−Ｇｌｕ（ＣＩＢｚｌ）−Ｌｓｕ−）１
ζ＊−Ｌｙｘ（Ｃｂｚ（ｏ−ＣＩ）Ｉ−Ｌｅｕ−Ｇｌｉ
−Ｈ＋ｒ（［ｌｚｌ）−Ｔｙｒ（Ｂ２１）−Ｐｒｏ−Ａ
ｒｇ（↑ｏｇ）−Ｔｈｒ（Ｂｚ　１）−Ａｓｐ（ＯＢｚ
　１）−Ｖａ　１−Ｇ１！−＾１ａ−ＧＩ７づｈｒ（Ｂ
ｚｌ）−Ｐｒｏ−Ｎ）１２３０３ｍｇ（８３，５ｈ　Ｍ
）を、ん却下、　ＴＦＡ　３■交を加えて溶解し、攪拌
下室温で４０分撹拌した０反応後、減圧濃縮してＴＦＡ
を留去し、残渣にジエチルエーテルを加え、生成する沈
殿物をデカンテーシ、ンにより採取し。 水醜化ナトリウム上デシケーター中で一夜乾燥した。 次いで、これをジメチルホルムアミド（以下「口ＮＦ　
Ｊ　という）２膳文に溶解せしめ、トリエチルアミン（
以下ｒＴＥＡＪ　という）でｐＨ約７に１繁した後、こ
れに 一’／ａｌ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−ＯＨ１００，３ｍｇ（８
７，７６Ｍ）及びｏｏｓｕ１９０履ｇを加え冷却攪拌下
、更にＤＣＧ　３４．ｈｇを加え、２日間攪拌し！。 これに１Ｍ酢酸２０−文を加え、生ずる沈殿物をか取し
、　ＩＭ酢醜で２回、水で３回洗浄し、乾燥して縮合粗
生成物３３３厘ｇを得た。 この粉末３９３ｍｇをフッ化水素２０ｍ１と７二ソ一ル
１ｍ文の混合液中において、０℃で８０分反応させた１
反応後、フフ化水素を留太し、残渣を＃酸エチルで洗浄
し、乾燥して粉末２７０鳳８を得た。 このうち、粉末１０ｍｇをＩＮ酢酸１腸見に溶解し、セ
ファデックスＧ−５０カラム（１，８Ｘ　８３ｃｍ）を
用いて溶出（８ｍ見／時間）シ、溶出液を３−見ずつ分
画し　活性画分（２８〜３０本目）を集め、凍結乾燥し
て活性粉末２．２ｍｇ（２４００ＭＲＣＵ／ｍｇ）を得
た。 この活性粉末２．２ｍｇをＩＮ酢酸に溶解し、高速液体
クロマトグラフィー（以下ｒ　）ＩＰＬ（：Ｊ　という
）（逆相）にて精製し、活性粉末１．７ｍｇ（８５００
ＮＲＣＬＩ／ｓｇ）を得た。ここで、ＨＰＬＣの条件は
、以Ｆの通りである。 カ　　ラ　　ム　：　　　　ｃｈｅｍｃｏｓａｒｂ　　
５　０ＤＳ−Ｈ（４，８Ｘ　　１５０１１＠）溶出方法
：　直線型濃度勾配溶出（４０分間）溶出液：　水ニア
セトニトリル：　ＩＯＸ　ＴＦＡ１００二Ｏ：Ｉ（Ａ液
）〜４０：８Ｑ：１（Ｂ液）流　速：１ｍ交／■１ｎ 得られた活性粉末の一部をｃｈｅｍｃ、ｏｓｏｔｂ　３
０ｒＪＳ−Ｈカラム（４，８Ｋ　７５＠ＩＩ）を用いて
前記と同様にＨＰＬＣ（逆相）操作を行ない、純度を検
定し、アミノ酸分析より本発明のポ・リペプチトである
ことを確認した。 アミノ醜分析値 り、ｒｓ　　　Ｈａｓ　　　Ａｒｇ　　　Ａｓｐ　　　
Ｔｈｒ　　’Ｓｅｒ　　　Ｇｌｕ　　　ρ「０１゜９３
（２）　０．８８（１）　０．９６（＋）　０．９９（
１）　３．８４（４）　３．００（３）　３．０８（３
）　２．１２（２）ＧＩＦ’　　Ａｌａ　　　　Ｖａｌ
　　　　Ｌｅｕ　　　　Ｔｙｒ　　　ａ−７ミノスベリ
Ｚ醜３．０２（３）　１．８１（２）　２．００（２）
　５．１０（５）　０．９０（’ｌ）　　　　１．０１
（＋）前記の原料は次のようにして製造した。 ポリペプチド１０−３１：日０Ｃ−Ｌｙｓ（Ｃｂｚ）−
Ｌｅｕ−５ｅｒ（８ｚｌ）−Ｇ　Ｉｎ−Ｇ　ｌ　ｕ　（
ＯＢｚ　１）−Ｌｅｕ−Ｈ１ｓ−Ｌｔｓ　［Ｃｂｚ　（
ａ−Ｃ：　Ｉ　）］　−Ｌｅｕ−Ｇ　Ｉｎ−Ｔｈｒ（Ｂ
ｚｌ）−Ｔｙｒ（Ｂｚｌ）−Ｐｒｏ−Ａｒｇ（↑ｏｓ）
−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ａｓｐ（ＯＢｚ　Ｉ　）　−Ｖａ
　ｌ−Ｇ　ｌ！−Ａ　１ａ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ　（Ｈｚ　
１）−Ｐｒｏ−Ｎ）１２の製造 （＋）　８０（ニーＴｈｒ（Ｂｚｌ）−Ｐｒｏ−ＮＨ２
ノ製造ＢＯＣ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−０Ｈ３，９９ｇ、　
　）Ｉ−Ｐｒｏ−Ｎ）１２ｓ　ｏｃ文２．０３ｇ及びＨ
ＯＢＴ　１．３５ｇをテトラヒドロフラン（以下ｒＴ）
ＩＦＪ　という）　　３０ｔａｌに溶解し、−５℃に冷
却下、Ｎ−エチル−Ｎｏ−ジメチルアミノプロピルカル
ボジイミド（以下ｒＷｓにＪ　という）　　１．８２５
Ｍと滴下し、−５℃で１時間、室温で一夜攪拌した。 反応液を減圧濃縮し、残渣に酢酸エチルを加え。 ＩＮ塩酸で２回、’５Ｘｔ曹水で２回、水の順で洗浄し
た。無水硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧濃縮した。残
渣の油状物を酢酸エチル−ｎ−ヘキサンより結晶化しテ
ＢＯＣ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ｐｒａ−Ｎ１３の白色粉末
３．８０ｇ（収”１１８５．３％　）　ヲ得た。 Ｒｆ２　＝　０．８３ 元素分Ｕｉ　［Ｇ２１Ｈ３１Ｎ３０５としてＩＣｍ　　
　　　　　Ｈ％　　　　　　　Ｎ！測定イ１ｆｉ８２．
１０８．０５１０．Ｑｌｌ；１算イ直６２．２０７．７
１１０．３８（２）　８０ｆｌニーＡｌａ−Ｇｌｙ−Ｏ
Ｂｚｌノ製造ＢＯＣ−Ａｌａ−ＯＨ５，６８ｇ；　　Ｈ
−Ｇｌｙ−０８ｚｌ　・　Ｔａ５ＯＨｌＯ，１２ｇ及び
１０８丁４．０ｇを　ＴＨＦ　５０−文に溶解し、−５
℃に冷却下りＳＯ５，５−見を加え、−５°Ｃで１時間
、室温で一夜撹拌した０反応液を減圧濃縮し、残渣を酢
酸エチルに溶解した。酢酸エチル層をＩＮ塩醜で２回、
５駕改言水で２回、水で順次洗浄した０％水硫醜マグネ
シウムで乾燥後、減圧濃縮した。残渣をｎ−へキサンで
結晶化し、酢酸エチル−ｎ−へキナ／で２回再結晶して
融点８５〜８７℃の８０Ｃ−Ａｌａ−Ｇ１７−０８ｚｌ
　９．３２ｇ　（収ＩＮ　９２．３１）を得ｆ＝、　Ｒ
ＦＩ　＝０．５４（３）　８０１１ニーＡｌａ４１ｙ−
ＯＨノ製造ＢＯＣ−Ａｌａ−Ｇｌｙ−ＯＢｚｌ　８．０
０ｇを　ＴＨＦ　［ｉｏｍ、１１　ニ溶解し、　５％パ
ラジウム／炭素の存在下、水素添加した。　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　［２４時間
後、触媒を除去して減圧濃縮し、残液をｎ−へキサンで
処理して固化し、融点　１２０−　１２２℃（１）　８
０（ニーＡｌａ−Ｇｌｙ−ＯＨ５，７１ｇ　（収率１１
７．４＄）ヲ得た。 元素分析［（’１ＯＨ１８Ｎ２０５として］Ｃ１）１％
　　　　Ｎ！ 測定値　　　４８．７０　　　？、１５　　１１．３２
計算値　　　４８．７７　　７．３７　　１１．３８（
４）　ＢＯＧ−Ａｌａ−Ｇｌｔ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ｐ
ｒｏ−Ｎ１３の製造ＢＯＧ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ｐｒｏ
−Ｎ）１２２．０Ｑｇに一５℃に冷却下、　ＴＦＡ　８
ｍ文を加え、　３０分間攪拌した後、減圧濃縮した。残
渣をジエチルエーテルで処理し、析出した生成物を枦取
し、水酸化ナトリウム上で一夜真空乾燥してＨ−Ｔｈｒ
（Ｂｚｌ）−Ｐｒｏ−Ｎ）１２　＠ＴＦＡを得た。 前記の生成物並びニＢＯＧ−＾Ｉａ−ＧＩ７−ＯＨ１，
２１ｇ及びＨＯＢＴ　ｏ、ｓｔ＋ｇを　ＯＭＦ１５ｓｊ
ｊ　ニ加え、−５℃に冷却下、ＷＳＣ１，０６ｍｊＪを
添加した。−５℃で１時間。 室温で一夜攪拌後、減圧濃縮した。残液を酢酸エチルに
溶解し、飽和食塩水、５℃重方水で２回、ＩＮ１！！酸
（食塩飽和）、ｆｆｌ和食塩水で順次洗浄した。 酢酸エチル層を無水硫酸ナトリウムで乾燥後、溶媒を減
圧留去し、残渣にｎ−ヘキサンを加えて結晶化させ、融
点１１０〜１２０℃＋７）　８０ｃｍＡｌａ−Ｇｌｙ−
Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ｐｒｏ−Ｎ１３１．８４ｇ（収、Ｊ
　８２．４＄）を得た。 Ｒｆ３　＝０．２１．　Ｒｆ４　＝０．４５元Ｚ　分析
［Ｇ２６Ｈ３３Ｎ５０７　・’Ｈ２０トＬ　テ］Ｃχ　
　　Ｈ％　　　　Ｎ！ 測定値　　　５８．１７　　７．２８　　１２．７６計
算値　　　５８．０３　　７．４０　　１３．０１アミ
ノ酸分析値： Ｔｈｒ　Ｏ，９１（１）、Ｃ１０１，０１（＋）、Ａｌ
ａ　１．０Ｑ（１）。 Ｐｒｏ　０．９８（１） （５）　Ｂｏｃ−Ｖａｌ−Ｇ１７−ＯＥＬの製造１ｌ−
Ｇｌ、−０ＥＬ−ＨＣＩ　　３．２１ｇを　ＤＭＦ　１
Ｏ１ｌｌ　ニ溶解し　−５℃に冷却下、Ｂｏａ−Ｖａｌ
−ＯＨ５，ＯＯｇ、　ＨＯＢＴ３、ｌＯｇ、ＷＳＣｅＨ
Ｃ文　４．７９ｇを加えて、−５℃で１吟間、室温で一
夜撹拌した０反応液を減圧Ｃ縮し、残渣に酢酸エチルを
加え溶解し、ＩＮ塩酸で３回、飽和食塩水で１回、５℃
重作木で３回、飽和食まム木で３回順次洗炸し、無水硫
酩ナトリウムで乾燥後、減圧ｃ！Ｉｉｉシた。残渣を酢
酸エチル−ｎ−ヘキサンで１１結晶して融点９１．５〜
３３℃のＢｏｃ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−ＯＥｔ　５．８：Ｉ
ｇ（収率８５．２Ｋ）を得た。 （８）　８０ＧニーＶａｌ−Ｇｌｙ−ＯＨ＋７）製造Ｂ
ＯＧ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−ＯＥｔ　５．８０ｇをメタ／−
ノ１ｚｌＯ−ｆｉに溶解し、冷却下、　ＩＮ水酸化ナト
リウム水溶液２３　ｍ文を加え、１時間攪拌した後、　
ＩＮ塩酸でＰＨ８，０に調整した０反応液を減圧濃縮し
てメタノールを留去し、水層をジエチルエーテルで洗浄
後。 水層のｐＨをＩＮ塩酸で２．０に調整した。この水層を
ＭＪ！エチルで抽出し、抽出液を無水硫醜ナトリウムで
乾燥後、減圧褒縮した。残液をｎ−ヘキサンで処理し、
酢酸エチル−ｎ−へキサンから再結晶して融点　１０１
〜１０７℃のＥＩＯＣ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−０１（４，７
６ｇ　（収率ａｏ、５Ｋ）ヲ得ｆ−０Ｒｆ１＝０．２０
元素分析［Ｃｌ２Ｈ１２Ｎ２０５として］ＣＺ　　　　
）１％　　　　Ｎ！ 測定値　　　５２，２４　　７．９４　　１０．０５計
算値　　　５２．５４　　８．０８　　１Ｇ、２１（７
）ＢＯＣ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ（
Ｂｚｌ）−Ｐｒｏ−ＮＯ３の製造 ８０（ニーＡｌａ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ｐｒｏ
−ＮＯ３１，５３ｇに冷却下゛。 ＴＦＡ　７ｍ文を加え、５０分間撹拌した後、減圧濃縮
した。残渣をジエチルエーテルで処理し、析出した生成
物をかなし、水酸化ナトリウムＬで真空乾燥してＨ−Ａ
ｌａ−ＧＩＹ−Ｔｈｒ（日ｚｌ）−Ｐｒｏ−ＮＯ３拳丁
ＦＡ　を得た。 前記の生成物にＤＭＦ　１５ｍ文を加え、−５℃に冷却
下、ＴＥＡを加えてｐＨ約７．０に調整した。これにＢ
ＯＣ−Ｖａｌ−Ｃｌ７−ＯＨ０，７９ｇ及び）ＩＯＢＴ
　Ｏ，３９ｇを加えた後、　　ＷＳＣ：＠ＨＣＪＪ　　
Ｏ，８１ｇ、　　ＴＥＡ　０．４４ｍ文をｈｎえ、−５
℃で１時間、室温で一夜撹拌した０反応液を減圧濃縮し
、残渣をクロロホルムに溶解した。この溶液を食塩飽和
ｌＮｌ１！酸で２回５食１１！飽和５ｚ重曹水で２回、
飽和食塩水で順次洗浄し。 無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧濃縮した。 残渣ヲメタノールージエチルエーテルで２回再結晶し、
融点目８℃（分解）　（７）　ＢＯＣ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ
−Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ｐｒｏ−Ｎ）１
２１．４１ｇ　（収＝１１．２ｍ）を１また。　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　［元
素分析［０３３８５１Ｎ７０９拳之Ｈ２０として］ＣＺ
　　　　　　Ｋ％　　　　　　　Ｎ％Ｊｌｌｌ定イーｆ
ｆ５８，５９７．３３１３．８４計算イ１０５Ｇ、７２
７．５０１４．０３アミノ酸分析値： Ｔｈｒ　Ｏ，８２（１）Ｊｌｙ　＋、９８（２）、Ａｌ
ａ　１．００（１）。 Ｖａｔ　Ｏ，１１１Ｂ（１）、Ｐｒｏ　１．０８（１）
（８）　ＢＯＣ−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）−Ｖａｉ（＋１７
−Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ｐｒｏ−ＮＯ３
の製造 Ｂｏｌｌ；−Ｖａｌ−Ｇｌｔ−Ａｌａ−Ｇｌｔ−Ｔｈｒ
（Ｂｚｌ）−Ｐｒｏ−ＮＯ３１，４１ｇに冷却下、　Ｔ
ＦＡ　７ｓ文を加え、３０分間撹拌した後。 減圧濃縮した。残渣にジエチルエーテルを加えて処理し
　析出した生成物を水酸化ナトリウム上で−・夜真空乾
燥した。＠記の生成物にＯＭＦ　＋５■見を加え、これ
にＴＥＡを加えてｐＨを約７．０に調整し。 ＴＥＡ　とＢＯＣニーＡｓｐ（ＯＢｚｌ）−０ＳＵ　０
．８８ｘを加えた後。 ＴＥＡでｐＨを再び約７．０にｍ＝し、２日間攪拌した
。その間、　ＴＥＡでｐＨを約７．０に調整した。多量
の水を加え、析出した粘稠物をデカントして分離し　／
エチルエーテルで処理して結晶化させた。 水層をクロロホルムで抽出し、抽出液を減圧濃縮し、残
渣に水を加えた。析出した粘稠物を７エチルエーテルで
処理して結晶化させた。前の結晶と合せてメタノ−ルー
ツエチルエーテルで４回再結晶し、熱酢醜エチルーノエ
チルエーテルで洗浄し、乾燥後１日ＱＣ−Ａｓｐ　（Ｏ
Ｂｚｌ）−Ｖａｔ−Ｇｌｒ−Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ（
Ｂｚｌ）−Ｐｒｏ−ＮＨ＋　　１．４８ｇ（収率８０．
９％）を得た。融ａ　１９０〜２ｏｏ℃、　Ｒｔ４＝　
０．４４ 元Ｎ分析［Ｃ４４ＨＣ４４Ｈ６２Ｎ　・２Ｈ２０トＩ、
　Ｔ：　］ＩＪ　　　ＨＸ　　　　Ｎ＄ 測定値　　　５８．４８　　８−９５　　１２．３”Ｊ
計算値　　　５８．４８　　７．０２　　　＋２．４０
アミノ醜分析値： Ａｓｐ　１．０２（１）、Ｔｈｒ　Ｏ，９０（１）、Ｇ
Ｉｙ　ｔ、９Ｂ（２）。 Ａｌａ　０．９２（１）、Ｖａｌ　１．００（Ｉ）、Ｐ
ｒｏ　０．９９０）（３）　ＢＯＣ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）
−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）−Ｖａｌ−Ｃｌ７−Ａｌａ−Ｇｌ
ｙ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ｐｒｏ−ＮＯ３の製造ＢＯＣ−
Ａｓｐ（０８ｚｌ）−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｃｌ７
−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ｐｒ。 −Ｎ）１２１．４６ｇニ冷却下、ＴＦＡ　ｓｍｉを加え
、６０分間撹拌した後、減圧濃縮した。残渣にノエチル
エーテルを加えて処理し、析出した生成物を水酸化ナト
リウム上で一夜真空乾燥した。前記の生成物に　ＯＭＦ
　１０ｓ交を加え、−５℃に冷却下、ＴＥＡでｐＨを７
．０に調整した。これにＢＯＣ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−０
ＳＵ０．８６ｇを加えた後、ＴＥＡ　’ｔ’Ｐ）ｌを７
０に調整し、室温で２日間攪拌した。 反応終了後１反応液に多着の水を加え、析出した沈殿物
をかなし、メタノール−ジエチルエーテルで３回再結晶
して融点１７４〜１８２℃のＢＯ（ニーＴｈｒ（Ｂｚ　
ｌ　）−Ａｓｐ（ＯＢｚ　＋）　−Ｖａ　１−Ｇｌｙ−
Ａ　１ａ−Ｇ　Ｉ　ｒ−Ｔｈｒ　（Ｈｚ　１）−Ｐｒ。 −ＮＯ３１，１８ｇ（収率８５．５％）元素分析［Ｃ５
５Ｈ７５Ｎ９０１４・桑８２０として］０％　　　　Ｈ
％　　　　Ｎ駕 測定値　　　８０．２０　　　Ｂ、８８　　１１．５４
計算値　　　８０．３１　　８．９９　　１１．５１ア
ミノ故分析値： Ａｓｐ　１．０１（１）、Ｔｈｒ　１．８８（２）、Ｇ
ｌｙ　２．００（２）。 Ａｌａ　１．０１（１）、Ｖａｌ　１．０（ＤＩ）、Ｐ
ｒｏ　１．０８（１）（１０）　　ＡＯ（ニーＡｒｇ（
Ｔｏｓ）−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）−Ｖ
ａｌ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ｐ
ｒｏ−Ｎ）１２の製造ＢＯＣ−↑ｈｒ（Ｂｚｌ）−Ａｓ
Ｐ（ＯＢｚｌ）−Ｖａｌ−０１７−Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ｔ
ｈｒ（Ｂｚｌ）−Ｐｒｏ−ＮＯ３１，ｌｏｇに冷却下、
　ＴＦＡ　５ｍｉを加え。 ３０分間攪拌した後、減圧Ｗｗｊした。残渣にジエチル
エーテルを加えて処理し、析出した生成物を水酸化ナト
リウム上で一夜真空乾燥した。前記の生成物にＤＭＦ　
５■文を加え、−５℃番こ冷却下、ＴＥＡでｐＨを７．
０に調整した。これに１（０８τ１６０ｍｇとＡＯＣ−
Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−０ＨＯ，５７ｇを加え、冷却下、　
　ｗｓｃ−ＨＣ立　０．２３ｇ、　　ＴＥＡ　Ｏ，１７
ｍＭを加えて一５℃で１時間、室温で一夜攪拌した。 反応終了後５反応液を減圧濃縮し、残渣に酢酸エチルを
加え、析出した生成物を熱メタノール−ジエチルエーテ
ルで２回処理し、融点　１９８℃（分解）のＡＯＣ−Ａ
ｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ
）−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｇｌｔ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ
）−Ｐｒｏ−ＮＯ３１，０７ｇ　（収率７４．８２）を
得た。 Ｒｆ２　＝ｏ、ｔａ 元素分析［Ｃ６９Ｈ９５Ｎ１３０１７Ｓ”　Ｈ２Ｏとし
て］ＩＪ　　　　）ＩＪ　　　　Ｎ％　　　　　　　　
　。 測定値　　　５８．３０　　　Ｇ、７［ｉ　　　１２．
８３計算値　　　５８，０１　　６．８４　　１２．７
５アミノ酸分析値： Ａｓｐ　１．００（１）、Ｔｈｒ　１．８５（２）、Ｇ
ｌｙ　１．９８（２）。 Ａｌａ　Ｏ，９１（１）、Ｖａｌ　１．００（１）、Ａ
ｒｇ　１．０１（１）。 Ｐｒｏ　Ｏ，Ｈ（＋） （１１）　　８０（ニーＴ７ｒ（Ｂｚｌ）−Ｐｒｏ−Ｏ
Ｂｚｌの製造ＢＯＣ−Ｔ７ｒ（Ｂｚｌ）−０Ｈ１０，０
０ｇをジクロロメタン５０鵬文に溶解し、　Ｈ−Ｐｒｏ
−ＯＢｚｌ・ＨＣＩ　　８．５３ｇを加えた。この混合
物に一５℃に冷却下、ＷＳＣ４，９３ｍ１を加え、−５
℃で１時間、室温で一夜攪拌した０反１４；混合物を減
圧濃縮し、残渣に酢酸エチルとＩＮ塩酸を加えて振り混
ぜ分液し、酢酸エチル層をＩＮ塩酸で２回、飽和食塩水
で２回、５［ｒ　ｆｆ水で３回。 飽和食塩水で２回順次洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾
燥した後、減圧濃縮して油状のＢＯＣ−７７ｒ（Ｂｚｌ
）−Ｐｒｏ−ＯＢｚｌ　１４．４８ｇ　　（収率９８．
１りを得た。 Ｒｆｌ　＝　０．７１ （＋２）　　ＢＯＧ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ｔｙｒ（Ｂｚ
ｌ）−Ｐｒｏ−ＯＢｚｌの製造ＢＯＧ−Ｔ７ｒ（Ｂｚｌ
）−Ｐｒｏ−ＯＢｚｌ　７．０８ｇに冷却下１丁ＦＡ２
０■文を加え、室温で１時間撹拌した後、減圧濃縮した
。残渣の油状物を水酸化ナトリウム上で一夜真空乾燥し
、　ＤＭＦ　＋５■交を加えた後、−５℃に冷却下、Ｔ
ＥＡでｐＨを約７．０に調整した。これにＨＯ８Ｔ　１
．７６ｇ、　ＢＯＣニーＴｈｒ（Ｂｚｌ）−０８４，０
２ｇ　、　　ＷＳＣ・ＨＣ交　２．７４ｇ及びＴＥＡ　
２．００■交を加え、−５℃で１時間、室温で一夜攪拌
した６反応後、反応液を減圧濃縮し、残渣を水、酢酸エ
チルで振り混ぜ分液し、水層を酢酸エチルで再抽出した
０両酢酸エチル層を１つに集め、　ＩＮ塩酸、飽和食塩
水、５ｚ＠曹水で３回、飽和食塩水で順次洗浄し　隼木
硫酸ヤグネシウムで乾燥後、減圧濃縮した。残渣をジエ
チルエーテル−ｎ−へキサンで処理して結晶化し、ジエ
チルエーテル−ｎ−へキサ／で再結晶してＢＯＣニーＴ
ｈｒ（Ｂｚｌ）づｙｒ（Ｂｚｌ）−Ｐｒｏ−ＯＢｚｌ　
７．７５ｇ　（収率８１．８％）ヲ得ｆ−、Ｒｆ２　　
＝　０．７９（＋３）　　ＢＯＧ−Ｔｈｒ（８ｚｌ）−
Ｔｙｒ（Ｂｚｌ）−Ｐｒｏ−ＯＨ＋７）製造ＢＯＣ−Ｔ
ｈｒ（Ｂｚｌ）−Ｔｙｒ（Ｂｚｌ）−Ｐｒｏ−ＯＢｚｌ
　　３．８０ｇをＴＨＦ２０腸愛に溶解し、冷却攪拌下
、ＩＮ水酸化ナトリウム５．８：ｌ５ｌｌを加えて室温
で３時間撹拌した後１Ｎｉｉ！酸を加えてｐＨを７に調
整し、減圧濃縮して〒ＨＦを留去した。残水溶液に水を
加え、ジエチルエーテルで洗浄後、水層にＩＮ塩酸を加
えてｐＨを２に調整し、酢酸エチルで２回抽出した。酢
酸エチル層を水洗し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後。 減圧濃縮した。残渣をジエチルエーテル−ｎ−ヘキサン
より結晶化して粗生成物を得た。これを酢酸エチル−ジ
エチルエーテル−ｎ−ヘキサンで再結晶して融点　１３
４〜１３７℃ノＢＯＣ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ｔｙｒ（Ｂ
ｚｌ）−Ｐｒｏ−０１１２，１５ｇ　（収率［１７，８
Ｋ）を得た。　Ｒｆ１＝Ｑ、４８Ｒｆ３　＝　０．２４ 元素分析［”３？Ｈ４５Ｎ３０８として］ＩＪ　　　　
ＨＸ　　　　ＮＫ 測定値　　　８７．２９　　６．９１　　６．３７計３
−

【イー口［８７，３８ε１．８７８．３７（＋４）　
　Ｈｏｅ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ｔｔｒ（８ｚｌ）−Ｐｒ
ｏ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ａｓｐ（Ｏ
Ｂｚｌ）−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｇｌｙ−ｆｈｒ（
Ｂｚｌ）−Ｐｒｏ−Ｎ）１２の製造 ＡＯＣ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ａｓｐ
（ＯＢｚｌ）−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ａｌ
ａ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ｐｒｏ−Ｎ）１２１．
００ｇに冷却下　ＴＦＡ　５ｍ文を加え、３０分間攪拌
した後、減圧濃縮した。残液をジエチルエーテルで処理
した後、水酸化ナトリウム上で真空乾燥した。この生成
物に口ＭＦ　５脂見を加え、−５°Ｃに冷却下、　ＴＥ
ＡでｐＨを４．５に調整した後、これにＨｏｅ７１２０
ｍｇとＢＯＣ−Ｔｈｒ（８ｚｌ）−Ｔｙｒ（８ｚｌ）−
Ｐｒｏ−ＯＨｏ、ｓｓｇを加え、−５℃に冷却下、　ｗ
ｓｃ　０．１８鳳１を滴下した。−５℃で１時間、室温
で一夜攪拌した０反応液を減圧！Ｉ縮し、残液にメタノ
ールとジエチルエーテルを加え　析出した生成物をかな
した。これをメタノールーレエチルエーテルで３回、０
にＦ−ジエチルエーテル、メタノール−ジエチルエーテ
ルで順次再結晶して融点　１１１５−　１９１’Ｏの日
ＯＣ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−７７ｒ（Ｂｚｌ）−Ｐｒａ−
Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｔｈｒ（８２ｌ　）−Ａｓｐ（ＯＢ
ｚ　ｌ　）−Ｖａ　１−Ｇｌ　７−Ａ　１ａ−Ｇ　ｌ　
１−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ｐｒｏ−ＮＯ３０，９９ｇ　（
収率７１．７＄）を得た。 元素分析［Ｃ１００Ｈ１２８Ｎ１８０２２Ｓとして］Ｃ
＄　　　　ＨＸ　　　　Ｈ 測定値　　　８１．９１　　６．８４　　　目、５５計
　コ【コ［ｆ−〇［１１１１，９７８，８８１１，５６
アミン醜分析値＝　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　［Ａｓｐ　１．０１（１）、Ｔｈｒ　２．８Ｇ
（３）、Ｇｌｙ　１．９１（２）。 Ａｌａ　　Ｏ，８９（１）、Ｖａｌ　　１．００（＋）
、↑２ｒ　　Ｑ、９Ｂ（Ｌ）。 Ａｒｇ　　１．Ｇ３（１）、Ｐｒｏ　　２．０８（２）
（１５）　　　ＢＯｆｌニーＧｌｎ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）
−Ｔｙｒ（Ｂｚｌ）−Ｐｒｏ−Ａｒｇ（Ｔａｓ）−Ｔｈ
ｒ（Ｂｚｌ）−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−
Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ｐｒｏ−ＮＯ３の
製造 ＢＯＣ−Ｔｈｒ（Ｈｚ　ｌ）−Ｔｙｒ（８ｚｌ）−Ｐｒ
ｏ−Ａｒｇ（Ｔａｇ）−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ａｓｐ（Ｏ
Ｂｚｌ）−Ｖａ　１−Ｇｌｒ−Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ
（Ｂｚｌ）−Ｐｒｏ−ＮＯ３Ｑ、９０ｇに冷却下、　Ｔ
Ｆｌ　５ｍ文を加え。 ３０分間撹拌した後、減圧ｍ縮した。残液をジエチルエ
ーテルで処理した後、水酸化ナトリウム上で一夜真空乾
燥した。前記の生成物にＤＭＦ　５ｍ文を加え、−５℃
に冷却下、　ＴＦＡを加えテＰＨを７．０に調整し、　
Ｈｏｅ７１７ｍｇとＢＯＣ−Ｇｌｎ−ＯＮＰ　Ｏ，２０
ｇを加え、室温で２日間攪拌した。 途中、ＴＥＡでｐｏを７．０に調整した０反応終了後、
減圧ｅ縮し、反応液に多量の水を加え、析出した生成物
をかなし、メタノール−ジエチルエーテルで３回再結晶
して融点　１７４〜１８０℃の８０（ニーにＩ＋＋−↑
ｈｒ（Ｂｚｌ）−Ｔｙｒ（８ｚｌ）−Ｐｒｏ−Ａｒｇ（
Ｔｏｓ）−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）−Ｖ
ａｔ−Ｇｌ；−Ａｌａ４１ｔづｈｒ（Ｂｚｌ）−Ｐｒｏ
−Ｍ）１２０．８５ｇ（収率８８．！Ｊ）を得た。 Ｒｆ２　　＝　０．８１ 元素分析［”１０５ＨＬ３８８１８０２４５として］Ｃ
％　　　　　　１１２　　　　　　８％測定値　　　８
０．９１１　　８．８２　　１２．１３計算値　　　８
１．０３　　　［ｉ、Ｈ１２，２０アミン醜分析値： Ａｓｐ　１．０２（１）、４ｈｒ　２．６８（３）、Ｇ
ｌｕ　１．０２（＋）。 Ｇ１７　１．９７（２）、Ａｌａ　　０．９１（１）、
Ｖａｌ　　１．００（１）。 Ｔｔｒ　Ｏ，＋１７（１）、Ａｒｇ　１．ＯＧ（＋）、
Ｐｒｏ　２．１０（２）（１６）　　Ｂｅｅ−Ｌｙｓ［
（：ｂｚ（ｏ−Ｃ１）］−Ｌｅｕ−ＯＥｔの％２＋［１
ｏｃ−Ｌｌｓ［（：ｂｚ（ｏ−１：１）ｌ−ＯＨ・（Ｌ
−ブチルアミン）８．００ｇを酢酸エチル５０ｍ　ｌに
９．′ＦＡせしめ、ｌＮｌ１ｉ酸でｐＨを２に調整し、
更に飽和食塩水で３回洗浄後、硫酸マグネシウムで乾燥
し、酢酸エチルを留去した０次いで、ジクロロメタン５
〇−見に溶解せしめ、−５℃に冷却下、　ＨＣＩ　・Ｌ
ｅｕ−ＯＥＬ　２．４０ｇ　。 １（０日Ｔ　１．８２ｇを加え、冷却下、　ｗＳＣ會Ｈ
Ｃ！Ｌ２．５７ｇ。 ＴＥＡ　　３．５９ｍＭを加えた。１時間後　室温にも
どし、−・夜撹拌した０反応読了後、減圧孟縮して）ク
ロロメタンを留去し、残液を酢酸エチルに溶解し、　ｌ
Ｎｆ！［１，５＄ｆｆＥ！水、　水１？ＩＩＩＩｌｉ次
洗ＩＬり、　ｆｉ水硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧濃
縮し、酢酸エチル−ｎ−へ牛サンから再結晶してＢＯＣ
−Ｌｙｓ［Ｃｂｚ（ｏ−Ｃ：ｌ）］−Ｌｅｕ−ＯＥｔ　
５．４７ｇ（収率８０．７％）を得た。 融点７７〜８０℃。 （１７）　　ＢＯ（ニーＬｙｉ［Ｃｂｚ（ｏ−ＣＩ）］
−Ｌｅｕ−ＯＨの製造ＢＯ（ニーＬｙｓ［Ｃｂｚ（ｏ−
Ｃ１）］−Ｌｅｕ−ＯＥｔ　３．７０ｇをエタノール　
２０ｍＭに溶解し、０℃でＩＮ水酸化ナトリウム７．９
８　ｍ愛を加え、室温で３時間攪拌した。ＩＮ塩酸でｐ
Ｈを７にＪ！１して減圧ｌａ縮し、残渣をジエチルエー
テルで洗外し、水層をｐＨ３に調整した０次いで、酢酸
エチルで３回抽出し、酢酸エチル層を水で１回洗浄後、
無水硫酸マグネシウムで乾燥し。 減圧濃縮した残液をジエチルエーテルに転溶した０次い
でジエチルエーテルを減圧留去し、乾燥してＢＯＣ；−
Ｌ！３　［（：ｂｚ（ｏ−ＣＩ）］−Ｌａｕ−ＯＨの粉
末３．５０ｇ（収率９９．７罵）を得た。融点４５〜６
５℃。 元素分析［Ｃ２５Ｈ３ＢＮ３０７Ｃｌとして］Ｃｍ　　
　　　　Ｈ＄　　　　　　Ｎ駕測定　イー電　　　　　
　　５８．７５　　　　　　？、１８　　　　　８．０
７、；＋’ｎイー１５８．８７７．２５７．！１Ｂ（＋
８）　　ＢＯＣ−Ｌｅｕ−Ｈｉｓ−ＯＨの製造Ｈｉｓｅ
Ｈ２０・ＨＣＩ　　３．００ｇ（目、３ｓＭ）を水３０
ｍ文に溶解し、冷却下、ＴＥＡ　２ｍ文を加えてｐＨを
７．０に調整した後、　ＢｏＣ−Ｌｅｕ−ＯＳＵ　８．
５７ｇを加えた０反応液が常に均一となるようにＴＨＦ
、水を加えて調節した。室温で２日間攪拌した後、反応
液を減圧Ｃ縮して、水層に析出した結晶を炉別し、炉液
を減圧濃縮した。残渣を水飽和のｎ−ブタノール溶液に
溶解し、ｎ−ブタノール飽和の水で３回洗浄後、ｎ−ブ
タノール溶液（水飽和）を減圧濃縮した。 残渣にジエチルエーテルを加えて結晶化し、メタノール
−ジエチルエーテルより再結晶を繰り返し、目的物４．
４８ｇ（収率８５．８％）を得た。融点　１７３〜１７
４．５℃。 元素分析［Ｃ１７”２８Ｎ４０５として］ＣＺ　　　　
ＩＩＸ　　　　　８％　　　　　　　　　　　　　。 測定値　　　５５．５２’　　７．６２　　１５．１２
計算値　　　５．５，４２　　７．６８　　１５．２１
（１３）　　８０（ニーＬｅｕ−５ｅｔ（Ｂｚｌ）−０
Ｈの製造ＢＯＣ−５ｅｒ（Ｂｚｌ）−０）１４．５３ｇ
（１５，３ｍＭ）に冷却下、ＴＦＡ　　１５ｍ文を加え
て溶解し、室温で３０分間攪拌した後、減圧ＨＷＵした
。残液を水酸化ナトリウムとで一夜真空乾燥した。前記
の生成物に水１００■文を加えて溶解し、＋１＠却下、
ＴＥＡを加えてｐｏを約７．０に調整した。これに、Ｔ
ＨＦ　２００厘見に溶解したＢＯＣ−Ｌｅｕ−ＯＳＵ　
４．２０ｇ（１２，３ｍＭ）を加えて、室温で２日間攪
拌した。途中、ｐＨが約７．０になるようにＴＥＡを加
えて調整した０反応後１反応液を減圧濃縮し、残渣を酢
酸エチルに溶解し、ＩＮ塩酸で２回、飽和食塩水で３回
洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。酢酸エチル
を減圧留去し、残渣を酢酸エチルーｎ−ヘキサンより再
結晶を繰り返して、ＢＯＣ−Ｌｅｕ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）
−０Ｈ３，２５ｇ（収率８４’、７りを得だ、融点７８
〜８２℃。 元素分析［Ｃ２１Ｈ３２Ｎ２０Ｂとして］ＣＺ　　　　
Ｈ＄　　　　Ｎ＄ 測定値　　　８１．９３　　７，８７　　８．８８二ｔ
　１＝【　イーｉ　　　　　　　　　６１．７５　　　
　　７．８０　　　　　６．８６（２０）　　ＢＯＧ−
Ｌ７ｓ（Ｃｂｚ）−Ｌｅｕ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）イ■の製
造ＢＯ（ニーＬｅｕ−５ｅｔ（Ｂｚｌ）−０Ｈ３，２０
ｇ（７，８３ｍＭ）を冷却下、ＴＥＡ１２ｍ見に加え、
５０分間攪拌後１ｇ圧濃縮した。残渣にジエチルエーテ
ルを加え、生じた結晶を枦取し、水酸化ナトリウム上、
デシケータ−中で一夜真空乾燥した。これを水　１０ｍ
１に溶解し、冷却下、Ｔ）ｌＦ５Ｇ肩見に溶解した８０
（ニーＬｙｓ（Ｃｂｚ）−Ｏ５Ｕ３．１０ｇ（８，５３
ｍＭ）を加え、ＴＥＡでｐＨを７に調整して室温で２日
間撹拌した０反応終了後１反応液を減圧濃縮し、クロロ
ホルムに溶解し、　１１！酸で３回、飽和食塩水で１回
、５＝重冑水で３回、飽和食塩水で３同順次洗浄して無
水硫酸マグネシウムで乾燥した１次いで、クロロホルム
層を５１１見まで減圧濃縮し、シリカゲルを充填したカ
ラムに注入した。溶出溶媒として、酢酸エチル：ベンゼ
ン（２：ｌ）の混合溶媒、次いで酢酸エチルを用い、酢
酸エチル溶出液を減圧濃縮し、残渣を酢酸エチル−ｎ−
へキサンより再結晶しテ８０１ニーＬｙｓ（Ｃｂｚ）−
Ｌｅｕ−Ｓｅｒ（日ｚｌ）−０Ｈｃ７）粉末２．８４ｇ
（収率８０．３％）を得た、融点５０〜５８℃。 丸太分析［Ｃ３５”５ＯＮ４０９としてＩＣ％　　　　
　　ＨＸ　　　　　　Ｎ％測定値　　　８２．８０　　
７．５５　　８．１０計算（ｆＪ　　　　Ｂ　２　、８
　！３　　７　、４８　　８　、３８（２１）Ｒｏｅ−
Ｌｙｓ［（：ｂｚ（ｏ−ＣＩ）］−］Ｌｅｕ−１１；Ｉ
ｎ−ＴｈｒＢｚｌ）−Ｔｙｒ（Ｂｚｌ）−Ｐｒｏ−Ａｒ
ｇ（Ｔｏｓ）−Ｔｈｒ（８ｚｌ）−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）
−ＶａｌＧｌｙ−Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ（８ｚｌ）−
Ｐｒｏ−ＮＨ２ノ製造ＢＯＧ−Ｇｌｎ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ
）−Ｔ２ｒ（Ｂｚｌ）−Ｐｒｏ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｔ
ｈｒ（Ｂｚ　ｌ　）−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）−Ｖａ　ｌ−
Ｃｌｙ−ＡＩａ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ（Ｈｚｌ）−Ｐｒ。 −ＮＯ３０，８０ｇ（０，３９ｍＭ）を冷却下、　ＴＦ
Ａ　ｆｆ５ｓ＋見に溶解し、３０分間攪拌後、減圧濃縮
した。残液をジエチルエーテルで処理し、析出した生成
物をかなし、水酸化ナトリウム上で真空乾燥した。これ
をＤにＦ　５ｓＪＬに溶解せしめ、−５℃にてＨＯＢＴ
［１４ｍｇ、　８０（ニーＬｙｓ［Ｃｂｚ（ａ−Ｇｌ）
］−Ｌｓｕ−ＯＨ０，２５ｇ及び’ｄｓｃ　０．０７２
脂文を加え、−５℃で１時間、次いで室温で一夜攪拌し
た０反応終了？＆（ＴＬＣ，溶媒系２でチェック）１反
応液にｌＮ１！！酸を加え、生ずる沈殿物をかなし、メ
タノール−ジエチルエーテルより再沈殿を　２回繰り返
して、前記目的化合物０．８０ｇ（収率８３．３％）！
得た。融点　１６３〜１７２　　℃。 元素分析［Ｃ１２５８１６４Ｎ２１０２８ＳＣ’・ＨＣ
Ｉ　として１ｆＪ　　　　）１ｍ　　　　Ｎ＄ 測定値　　　５９．８５　　６．５８　　１＋。７３計
算偵　　　５９．７５　　８．６２　　１１．７１アミ
ノ酸分析値： Ａｓｐ　１．０２（１）、Ｔｈｒ　２．７３（３）、Ｉ
Ｉ；Ｉｕ　１．０４（１）。 Ｃｌｙ　１．９５（２）、Ａｌａ　Ｏ，８９（＋）、Ｖ
ａｌ　１．００（１）。 しｓｕ　　Ｏ，９＋（１）、Ｔｙｒ　　Ｏ，８？（１）
、Ｌｙｓ　　Ｏ，９４（１）。 Ａｒｇ　１．００（＋）、Ｐｒｏ　２．０７（２）（２
２）　ＢＯＧ−Ｌｅｕ−旧５−Ｌ１ｓ　［Ｃｂｚ（ａ−
（：Ｉ）　ｌ−Ｌｅｕ−Ｇｌｎ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ｔ
ｙｒ（Ｂｚｌ）−Ｐｒｏ−Ａｒｇ（Ｔａｓ）−Ｔｈｒ（
Ｂｚｌ）−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）−Ｖａ１４１ｙ−Ａｌａ
−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ｐｒｏ−ＮＯ３の製造 ＢＯＧニーＬｔｓ［（（：ｂｚ（ｏ−ＣＩ）］−］Ｌａ
ｕ−Ｇｌｎ−ＴｈｒＢｚｌ）−Ｔｙｒ（Ｂｚｌ）−Ｐｒ
ｏ−Ａｒｇ（Ｔａｓ）−Ｔｈｒ（日ｚｌ）−Ａｓｐ（Ｏ
Ｂｚｌ）−Ｖａｌ−Ｃｌｙ−Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ（
Ｂｚｌ）−Ｐｒｏ−Ｎ）１２０．７０ｇ（０，２８ｍＭ
）を　　　　　　　　１冷却下、ＴＥＡ　５膓見に溶解
し、３０分間攪拌後、減圧濃縮した。残渣をジエチルエ
ーテルで処理し、析出した生成物をかなし、水酸化ナト
リウム上で減圧乾燥した。これをＤＩ’ｌＦ　５ｚｌに
溶解し、冷却下、ＴＥＡでｐＨを７．０に調整し、１（
ＯＢ？　４８脂ｇを添加後、ＢＱ（ニーＬｅｕ−Ｈｉｓ
−Ｑ）ｌ　１２５ｍｇを加え、更に一５℃に冷却下、　
ＷＳＣ：　ｌｌＨｅ　Ｉ　８５ｍｇ及びＴＥＡ　０．０
４８■交先加えて１時間攪拌し、室温にもどして一夜攪
拌した０反応終了後（↑ＬＣ，溶媒系４でチェック）、
反応液に１Ｍ１３１酸を加え、生ずる沈殿物をかなし、
メタノール−ジエチルエーテルより再沈殿せしめ、更に
ＤにＦ−ジエチルエーテルより再沈殿を繰り返し、採取
した沈殿物を乾燥して前記目的化合物の粉末０．７０．
Ｋ（収率９２．ｌχ）を得た。融点　１６０〜１７０℃
。 元素分析［Ｃ１３７８１８２Ｎ２５０３０Ｓ”ｌ　”　
４）１２０として１１Ｊ　　　　ＨＸ　　　　Ｎ＄ 測定値　　　５８．Ｈ８，５５１２，３５計算値　　　
５８．８０　　８．８４　　１２．５１アミノ酸分析値
： Ａｓｐ　　１．０１（＋）、Ｔｈｒ　　２．８０（３）
、Ｇｌｕ　　Ｏ，９８（１）。 Ｇｌｙ　　１．９２（２）、ＡＩａ　　Ｏ，８９（１）
、Ｖａｌ　　１．００（１）。 Ｌｅｕ　　１．７５（２）、Ｔｙｒ　　Ｏ，８４（１）
、Ｌｙｓ　　Ｏ，９５←日。 Ｈｉｓ　　Ｏ，８７（１）、Ａｒｇ　　１．０１（１）
、Ｐｒｏ　　２．ＩＱ（２）（２３）　　ＢＯ（ニーＧ
ｌｕ（Ｏ［１ｚｌ）−Ｌａｕ−）１ｉｓ−Ｌ５ｓ（Ｃｂ
ｚ（ｏ−ＣＩ）ｌ−Ｌｅｕ−Ｇｌｎ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）
−Ｔｙｒ（Ｂｚｌ）−Ｐｒｏ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｔｈ
ｒ（８ｚｌ）−Ａｓｐ（（ｌＢｚｌ）−Ｖａｌ−Ｇｌｙ
−Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ｐｒｏ−Ｎ）１
２ノ製造 ＢＯＣ−Ｌｅｕ４ｉｓ−Ｌｙｓ［（（：ｂｚ（ａ−ＩＣ
Ｉ）ｌ−Ｌｅｕ−Ｇｌｎ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ｔｙｒ（
Ｂｚｌ）−Ｐｒｏ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ
）−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｃ
Ｉ２−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ｐｒｏ−ＮＯ３０，６５ｇ（
０，２４ｍＭ）　を冷ＪｉＤ　下−、ＴＦＡ　５ｚｌ　
ニ溶解り、４０分間攪拌後、減圧濃縮した。残渣をジエ
チルエーテルで処理し、析出した生成物をノル取して木
酢化ナトリウム上で真空乾燥し、これをＤＭＦ　５膓見
に溶解し、ＴＥＡでｐＨを７に調整後、冷却ド、　ＢＯ
Ｃ−Ｇｌｕ（ＯＢｚｌ）−０ＳＬＩ　Ｏ，１６ｇを加え
、１ｆびＴＥＡでｐＨを７に調整し、室温で２「１間攪
拌した９反応終了後ＣＴＬＣ。 溶媒系４でチェ２フ９１反応液にＩＮｑｊ酸を加え。 生ずる沈殿物をかなし、メタノールージエチルエーテル
より再沈殿を２回繰り返し、採取した沈殿物を乾燥して
粉末０．５５．（収＊７３．３＄）を得た。融点１６９
〜１７５℃。 元素分析［ＣＩ３”１９５Ｎ２８０３３ｓＣ１争４Ｈ２
０としてｌＩＪ　　　　　ＨＥ　　　　ＮＸ 測定値　　　５９．５７　　８．５７　　１２．０４計
３＝【イＩ＋１Ｊ５９．３０８．７８１２．０７アミノ
酸分析値： Ａｓｐ　１．０３（１）、Ｔｈｒ　２．９０（３）、Ｇ
ｌｕ　２．０２（２）。 Ｇｌ＋　２．００（２）、Ａｌａ　Ｏ，９０（１）、Ｖ
ａｌ　１．００（＋）。 Ｌｅｕ　１．８６（２）、Ｔｙｒ　Ｑ、８９（１）、Ｌ
ｙｓ　Ｏ，９７（１）。 Ｈｉｓ　Ｏ，８８（１）、Ａｒｚ　１．１）３（＋）、
Ｐｒｏ　２．０４（２）（２４）　ＢＯＣｌＩｎ−Ｇｌ
ｕ（ＯＢｚｌ）−Ｌｅｕ−Ｈｉｓ−ＬＹｓ［（：ｂｚ（
ａ−Ｃ１）］−］Ｌｅｕ−Ｇｌｓ−ＴｈｒＢｚｌ）−Ｔ
ｙｒ（Ｂｚｌ）−Ｐｒｏ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｔｈｒ（
ａｚｌ）−Ａｇｐ（ＯＢｚｌ）−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ａｌ
ａ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ｐｒｏ−Ｎ）１２の製
造Ｂ０１ニーＧｌｕ（ＯＢｚｌ）−Ｌｅｕ−Ｈｉｓ−Ｌ
７ｇ［（Ｃｂｚ（ｏ−（：ｌ）］　−］Ｌｅｕ−Ｇｌｎ
−Ｔｈｒ日ｚｌ）−Ｔｒｒ（Ｂｚｌ）−Ｐｒｏ−Ａｒｇ
（Ｔａｓ）−Ｔｈｒ（［１ｚｌ）−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）
−Ｖａｊ−Ｇｌｒ−Ａｌａ−Ｇｌｒ−丁ｈｒ（８ｚｌ）
−ρｒｏ−Ｎｌ（２０，５０ｇ（０，１７ｍＭ）を冷却
下、ＴＦＡ　５ｍＪＬに溶解し、４５分間攪拌後、減圧
濃縮した。残渣をジエチルエーテルで処理し、析出した
生成物を枦取し、水酸化ナトリウム上で真空乾燥し、こ
れをＤＭＦ　５１１１に溶解し、　ＴＥＡ　テｐＨを７
に調！Ｊ後、　Ｒｏｅ−Ｇｉｎ−０８０９８ｍｇを加え
、室温で２日間撹拌した１反応路ｒ後、反応液に１Ｎｌ
ｉ！酸を加え、生ずる沈殿物をか取し、水洗後、メタノ
ール−ジエチルエーテルより＾沈殿を３回繰り返した。 採取した沈殿物を乾燥Ｌ［粉末０．４８ｇ（収率９２．
３＄）ヲ得た。融点２１２〜２１６　℃　（分解）。 元素分析［Ｃ１５４Ｈ２ｏ３Ｎ２４０３５ＳＣ：ｌ　”
　４Ｈ２０としてＨＣＩ　　　　Ｈ％　　　Ｎ篤 測定値　　　５１１．８２　　８．４９　　１２．３０
計算値　　　５８．７９　　　Ｂ、７６　　１２．４７
アミノ酸分析値： Ａｓｐ　１．０２（１）、Ｔｈｒ　２．８３（３）、Ｇ
ｌｕ　２．９５（］）。 Ｇｌ！　１．９８（２）、ＡＩａ　Ｏ，１Ｊ２（１）、
Ｖａｌ　１００（＋）。 Ｌｓｕ　　１．８０（２）、Ｔｙｒ　　Ｏ，７？（１）
、ＬＹｓ　　Ｏ，９３（ｔ）。 ＨｉｓＯ，８８（１）、Ａｒｇ　１．００（１）、Ｐｒ
ｏ　２．１５（２）（２５）　　Ｒｏｅ−Ｌｙｓ（Ｃｂ
ｚ）−Ｌｅｕ−３ｅｒ（Ｂｚｌ）−Ｇｌｎ−Ｇｌｕ（Ｏ
Ｂｚｌ）−Ｌｅｕ−Ｈ１ｓ−Ｌｔｓ　［Ｃｂｚ（ｏ−Ｃ
Ｉ）］−］Ｌｅｕ−Ｇｉｎ−ＴｈｒＢｚｌ）−Ｔｙｒ（
８ｚｌ）−Ｐｒｏ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ
）−Ａｇｐ（ＯＢｚｌ）−Ｖａｌ−Ｇｌｒ−Ａｌａ−Ｇ
ｌｒ−Ｔｈｒ（８ｚｌ）−Ｐｒｏ−Ｎｌ（２の製造ＢＯ
Ｃ−ＧｌｎＪｌ；１ｕ（ＯＢｚｌ）−Ｌｓ＋ｕ−）１ｉ
ｓ−Ｌｔｓ［（Ｇｂｚ（ｏ−ＣＩ）１−Ｌｅｕ−Ｇｌｎ
−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ｔｙｒ（Ｂｚｌ）−Ｐｒｏ−Ａｒ
ｇ（Ｔａｓ）−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ａｓｐ（ＯＦｌｚｌ
）−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−＾１ａ−Ｇｌｒ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ
）−Ｐｒｏ−ＮＨ２Ｑ、４５ｇ（０，１５ｇＭ）を冷却
下、　ＴＦＡ　３ｓｕに溶ＭＬ、更ニ４８１１！ｍ　／
　ジオキサ７０．２ｓｕを加え、室温にて４５分間攪拌
した０反応柊了後　反応液を減圧１＝縮し、残渣をジエ
チルエーテルを加えて生ずる沈殿物を枦取し、ジエチル
エーテルで充分洗炸後、水酸化ナトリウム上デシケータ
−中で一夜真空乾燥した０次いで、これをＤＭＦ　４４
文に溶解し。 ＝５℃ニ８　イテＴＥＡ　テｐＨヲ７．０ニａｌ　９！
　Ｌ、Ｉ（ＯＢＴ２ｈｇ、　　ＢＯＣ−Ｌｙｓ（Ｃｂｚ
）−Ｌｅｕ−５ｅｒ（Ｂｚｌ）−０）＋　０．ｌＯｇを
加え、更に　ＷＳＣ・ＨＣＩ　３２Ｂ、　　ＴＥＡ　０
．０２３　ｍｌを加え、　１時間攪拌後、室温にもどし
て一夜攪拌した０反応終了後５反応液を減圧濃縮し、Ｉ
ＮＩＩＪ醜を加え、生ずる沈殿物を枦取した。メタノー
ルージエチルエーテルニリ再沈殿を３回繰り返し、採取
される沈殿物を乾燥して粉末０．３７ｇ　（収率［ｉ９
．８りを得た。融点１７０〜　ｔａＯ℃（分解）。 元素分析［Ｃ＋８４Ｈ２４３Ｎ３２０４１ＳＣ＋２・）
ＩｃＩ　・５Ｈ２０として】ＣＸ　　　　１１％　　　
　Ｎｘ 測定値　　　５８．７４　　８．５８　　１２．２２計
算値　　　５８．８８　　６．８２　　１１．９４アミ
ノ酸分析値： Ａｇｐ　１．０１（１）、Ｔｈｒ　２．６１１（３）、
Ｓｅｒ　Ｏ，１ｌａ（＋）。 Ｇｌｕ　２．７？（３）Ｊｌｙ　２．（１０（２）、Ａ
ｌａ　Ｏ，９１（１）。 Ｖａｔ　１．０Ｑ（１）、Ｌｅｕ　２．９５（３）、Ｔ
７ｒ　Ｏ，８５（１）。 Ｌ７ｇ　１．９２（２）、旧ｓ　Ｏ，９０（１）、Ａｒ
ｇｌ、００（１）。 Ｐｒｏ　２．１８（２） ペプチド１−９＝ 一−１ Ｎ）１（：Ｈ（：０−Ｖａｌ−Ｌｓｕ−１１；１ｙ−０
）１は次のようにして製造される。 （＋）　（：ｂｚ−ＮＨ（Ｈ（００ＣＨ３］製造（ＣＨ
２）５ＣＯＯＨ Ｃｂｚ−ＮＨＣＨ（：００Ｍ　１０．０ｇ（０，０３Ｍ
）　、パラホルムアルデヒド１．３８ｇ　、　ＴｏｓＯ
Ｈ０，３ｇ、ベンゼｙ　１３０ｍＱをナス型フラスコ中
で４時間加熱環流した０反応終了後、室温迄放冷し、こ
のベンゼン溶液を３回水洗し、無水硫酸マグネシウムに
て屹燥後、ベンセンを減圧留去して油状残渣を得た。 この油状物をメタノール８０ｍ１に溶解し、冷却しなが
ら金属ナトリウム０．７ｇをメタノールｌｌｏｍＭに溶
解して生成するナトリウムメチラートを加え、室温で一
夜攪拌した。 塩酸にてｐＨ５とした後、メタノールを減圧留去して得
られる油状残渣を酢酸エチルに溶解した。 これを１Ｎ塩酸で洗浄し１次いで４回水洗し、無水硫酸
ナトリウムにて乾燥後、酢酸エチルを減圧留去して前記
目的物より成る油状物１０．２ｇを得た。 （（：１１２）５１１：００Ｍ （２）　　ＢＯＣ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−ＮＨ（：Ｉｌｌ
：００（：Ｈ３〕製造（ＣＨ２）５ＣＯＯＨ ■ Ｃｂｚ−ＮＨ（：ＨＣＯＯ（Ｈ３よりなる油状物１０．
２．をメタノール６〇−見、水３０腸交に溶解し、パラ
ジウム−変人を加え、４８時間水素添加を行なった。触
媒炉別後、炉液を減圧濃縮した。残渣にメタノール１０
０ｓｊＬを加え、不溶物を炉別し、炉液を減圧［１ａし
た。残渣にジエチルエーテルを加えて結晶化（Ｃ）＋２
）５ＣＯＯＨ し、融点１１７〜１１８℃の）１２ＮＧＨＣ：００ＣＨ
３４，１２Ｋ（収率８７．Ｈ）ヲ得ｆ−，ｍＪｔｔＤＮ
Ｆ８０ｍｌニＦＪｆｆ＋セＬ／＋。 冷却ド、ＴＥＡ２．８４露見を加えてｐ、Ｈを約７．０
に調整して、　ＢＯＣ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−０ＳＵ　９
．０８ｇを加え、室温ニテ２日間攪拌した。 反応後１口ＭＦを減圧留去し、酢酸エチルで抽出した。 　ＩＮ塩酸で２回、飽和食塩水で１回、２ｇ重灯水で２
回、飽和食塩水で３回順次洗浄後、無水硫酸マグネシウ
ムで乾燥した。酢酸エチルを減圧留去して得られた油状
物をジエチルエーテル２０１見に溶解し、　５％重曹水
で抽出した。これをＩＮ塩酸で　　　　　　［ｐＨを７
．０に調整後、酢酸エチルで抽出した。酢酸エチル層を
飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。 酢酸エチルを減圧留去して目的物よりなる油状物５．９
０ｇを得た。 （ｆｌ：Ｈ２）５ＣＯＯＨ （３）　ＢＯＣ−５ｅｔ（８ｚｌ）−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）
−ＮＨ（：）１０００１１：Ｈ３・Ｃ６ＪＩＮＨ２の製
造 （ＣＨ２）　５ＣＯＯＨ Ｒｏｅ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−ＮＨ（ＨＣＯＯ（Ｈ３ｓ、
ｓｏｇ　ニ冷却下。 ＴＦＡ　　１８ｓＪｌを加えて溶解し、室温で３０分間
攪拌した後、　ＴＦＡを減圧留去し、残液を水醸化ナト
リウム上デシケーター中で一夜真空乾燥させた。 この油状物をＤＭＦ１５腸文に溶解し、冷却下。 ＴＥＡ　　１．６７ｍ１　ｒｅ加え、　ｐＨ７，０，ｉ
−し、　８０Ｃ−５＋ｒ（Ｂｚｌ）−ＯＳＩ＋　４．６
８．を加え、室温で２日間撹拌した０反応後、ＯＭＦを
減圧留去し、酢酸エチルで抽出した。 この酢酸エチル層をＩＮ塩酸、飽和食塩水、Ｄ重曹水、
飽和食塩水で順次洗浄後、無水ｖｉａナトリウムで乾燥
させた。 次いで、酢酸エチル抽出液を約１０閣文まで減圧濃縮し
、冷却下、当量のシクロヘキシルアミン（（：６Ｈ１１
ＮＨ２）を加えた後、減圧濃縮し、得られる油状物ヲジ
エチルエーテル、ｎ−ヘキサンにより固化させ、酢酸エ
チル−ジエチルエーテル−ｎ−ヘキサンで再沈殿して融
点７１〜７４℃の目的物５．５８ｇ（収率５１．１Ｋ）
を得た。 （４）　ＢＯＣ−５ｅｔ（Ｂｚｌ）−Ｌｅｕ−ＯＥｔの
製造Ｈ−Ｌｅｕ−ＯＥｔ＠［１４，３０ｇを　Ｔ）ＩＦ
　？Ｏｍｌに懸濁し、−５℃に冷却下、当量のＴＥＡを
加えて中和した。これにＢＯＣニー５ｅｒ（Ｂｚｌ）−
０）１５．８０ｇ　、　ＨＯＢ７２．７０ｇを加えた。 更に、　ＴＨＦ　３０ｇ見に溶解した口ＣＣ４，３３ｇ
を加え、そのまま１時間、次いで室温で一夜攪拌した０
反応終了後、　０ＣＵ（ジシクロへキノルウレア）を除
去し丁ＨＦを減圧留去した。残渣を酢酸エチルで抽出し
、酢酸エチル層を水、　ＩＮクエン醜温溶液飽和食塩水
、５ｇ重曹水、飽和食塩水で順次洗浄し、無水硫酸ナト
リウムで乾燥した０次いで、酢酸エチルを減圧留去し、
残渣を酢酸エチルーｎ−ヘキサンより再結晶して融点７
５〜７７℃の目的物７．１０ｇ（収率８１．３１）を得
り。 （５）　８０（ニーＡｌａ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−Ｌｅｕ
−ＯＥｔ＋７）　％造８０（ニー５ｅｒ（Ｂｚｌ）−Ｌ
ｅｕ−ＯＥｔ　８．００ｇ（１３，７４ｍＭ）に冷却下
、ＴＦＡＩＯ■交を加え、室温で３０分間反応せしめた
後、ＴＦＡを減圧留去し、残渣を水酸化ナトリウム上デ
シケータ−中で一夜真空乾燥させた。これを　ＤＭＦ　
２０１交に溶解し、ＴＥＡでｐ）Ｉ約７．０にＪｌ整し
たｓ、ＢＯＣニーＡｌａ−ＯＳＵ　４．３３ｇを加え、
室温で一夜攪拌した。 反応終了後、　ｆｌＭＦを減圧留去し、残渣を酢酸エチ
ルで抽出した。ｈ酸エチル層をＩＮ珈酸、飽和食塩水、
５ｚ重１水、飽和食塩水で順次洗浄した。無水Ｆ＆酸ナ
トリウムで乾燥し、酢酸エチルを減圧留去後、残渣にジ
エチルエーテル−ｎ−ヘキサンを加えて結晶化し融点１
１８−９９℃の目的物８．４３ｇ（収率９２、Ｈ）を得
た。 （８）　ＲｏＣ−Ａｌａ−５ｅｒ（Ｂｚｌ）−Ｌｅｕ−
ＮＨＮＨ２の製造ＢＯＧ−Ａｌａ−Ｓｅｒ（８ｚｌ）−
Ｌｅｕ−ｔｌＥｔ　１０．９８ｇ（２２，０ｍＭ）ヲ）
９／　−Ａｔ　４０ｍ１ニ溶解り、　、　　８０ｍＭ）
１２ＮＨ２拳８２０１３．８　ｍ愛を加え、室温で一夜
放置した。これにジエチルエーテルを加えて沈殿物を完
全に析出させ、これをＩＰ取し、ジエチルエーテルで洗
浄後。 メタ／−ルージエチルエーテルで１１沈殿して融点＋７
４−１７６℃の前記目的物９．６１ｇ（収８９０．Ｏり
　ヲ得た。 元素分析［”２４Ｈ３’９Ｎ５０６　・ｊｌ（２０とし
てｊＣＸ　　　　　１％　　　　Ｎ駕 測定値　　　５７．８８　　７．８７　　１３．９５計
算値　　　５７．８７　　　？、！９９　　１４．１１
８（７）ＢＯＣ−Ａｌａ−９ｅｒ（Ｂｚｌ）−Ｌｅｕ−
Ｓｅｔ（Ｂｚｌ）−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−（ＣＨ２）５（
ＯＯＨ 奪 ＮＨＣＨＣＯＯＣ）１３の製造 （ＣＨ２）５ＣＯＯＨ ＢＯＣ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ｍｌｌ
（：ＨＣＯＯＣＨ３＠（：６ＪＩＮＨ２３，８７ｇを酢
酸エチル中ＩＮ塩酸で処理して遊離酸とし、無水硫酸ナ
トリウムで乾燥後、減圧濃縮した。油状残渣に冷却化、
ＴＦＡＩＯ■免を加え、室温にて３０分間攪拌後、ＴＦ
Ａを減圧留去して残液をＮａＯＨ上デシケータ−中で一
夜真空乾燥した。 ＢＯＧ−Ａｌａ−Ｓｓｒ（Ｂｚｌ）−Ｌａｕ−Ｎ１１ｊ
ｌｉ１２２．７３ｇを　［ＩＮＦ　　２Ｇ騰見に溶解し
、−１５℃に冷却し、６Ｎｆａｆｉ／ジオキ　　　　　
［サン２．７６−見を加え、同温度を維持させつつイソ
アミルニトリッ）　　０．７４ｍＪ１を加え、アジド化
した。 ・一方、前記で得た乾燥ＴＦＡ　ｌｉｉを０にＦ　３０
■見に溶解し、ＴＥＡで中和後、これを前記アジド化物
を含む溶液中に、−２０℃に冷却化、徐々に加えた。添
加終了後、ＴＥＡ　’ｔ’Ｐ）１約７に［ＦＬ、そ１７
）１１４℃で一夜反応した。 反応終了後、　ＤＭＦを減圧留去し、残渣を酢酸エチル
で抽出した。酢酸エチル層を１に塩酸、飽和食塩水で順
次洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。酢酸エチル
を減圧留去後、ｎ−ヘキサンを加えて結晶化シ、目的物
４．３１ｇ（収＊８３．１ｍ）　ヲ得り、融点　＋７（
１〜１７７℃（分解）。 元素分析［Ｃ５４”７８Ｎ８０１４として］ＩＪ　　　
　Ｈ罵　　　Ｎ！ Ｊ１１足値　　　８２．５８　　７．３２　　８．２４
計算値　　　８２．７７　　７．４１　　８．１３（Ｃ
Ｈ２）５ （８）　［１Ｏ−Ａｌａ−Ｓｅｔ（Ｂｚｌ）−Ｌｅｕ−
３＠ｒ（Ｂｚｌ）−Ｔｈｒ（８ｚｌ）−ＮＨｆｌ：ＨＣ
００ｉ３の製造 ＢＯ（ニーＡｌａ−３ｅｔ（Ｂｚｌ）−Ｌｅｕ−５ｅｔ
（Ｂｚｌ３−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−（ＣＨ２）５ＣＯＯＨ ＮＨＣＨＧＯＯＣＨ３２，２１ｇ（２，１４ｍＭ）を乾
燥ピリジン２０ｍ文に溶解し、　ＴＦＡ−ＯＮＰ　３．
５ｇを加え、４５℃で４時１ｔｌｌ攪拌した０反応後、
減圧濃縮し、残渣にジエチルエーテルを加え、生ずる沈
殿物をｔｐ取し、ジエチルエーテルで洗浄後、乾燥せし
めて黄褐色の粉末２．１ｇを得た。 この粉末に冷却下、　　ＴＥＡ１４．５−見を加え、室
温にて３０分間攪拌後、　ｆＦＡを減圧留去し、残渣を
水酸化ナトリウム上デシケータ−中で一夜真空乾燥した
。これをＯＭＦ　ＩＣ５ｍ交に溶解し、４５℃の乾燥ピ
リジン　１．８見に攪拌下、１時間かけて滴下した１滴
下終了後、液温を５０℃にして一夜撹拌し、更に室温で
２日間攪拌した０反応終了後。 約　１０ｓｉ迄減圧濃縮し、これをクロロホルム５００
■愛に溶解後、飽和食塩水、ＩＮ＃！酸、飽和食塩水、
５１ｔ水、飽和食塩水で順次洗浄後、無水硫酸マグネシ
ウムで乾燥し、クロロホルムをＮ圧留去した。これにｎ
−ヘキサンを加え、生ずる沈４物をかなし、融点１８５
℃（分解）の前記目的物１．８０ｇ（収率８１．９＄）
ヲ得た。 元素分析［Ｃ４８）１８８Ｎ８０１１としてＩＩＪ　　
　　）１％　　　　Ｎ罵 １１−１定イ糎ｉ８３．９９７．２０１１．０５計３＝
〔イａ８４．３１７．２７９．１８ＮＨＣ）１００００
Ｍ３０．８５１をＤＭＦ　８ａＲ１）　夕／　−Ａ／　
３０ｍＪｌに溶解し、　８０＄ＮＨ２ＮＨ２ａ）１２０
　１３．３−１　を加え、室温で一夜攪拌した。 反応終了後、水を加え、生ずる沈殿物をかなし、水洗後
、メタノール２０■文を加えて加熱還流した１次いで、
室温迄放冷後、沈殿物をかなして融点　２４５〜２５０
℃　（分解）の前記目的物０．５１ｇ（収′−ＪＡ８０
％）を得た。 元素分析（（”４８）１６８８８０１０　”　’ｊＨ２
０としてＪｆＪ　　　　　　　　ｌ（Ｘ　　　　　　Ｎ
＄測定値　　　　　８２．５８　　　　７．３２　　　
１２．１３計算値　　　８２．３９　　７．３１　　１
２．１３アミ／醜分析値： Ｔｈｒ　Ｏ，８！１（１）、Ｓｅｔ　１．７５（２）、
＾Ｉａ　Ｏ，８９（１）。 Ｌｅｕ　１．００（１）、α−７ミノスベリン＄１．０
８（１）（１０）　ＢＯＣ−Ｌｅｕ−Ｇｌｒ−０８ｚｌ
　ｆ）　製造Ｈｏｅ−Ｌｅｕ−０）１ｅＨ２０Ｂ、ＯＯ
ｇ　、　　ＨＯＢＴ　３．４９ｇ及びＨ−Ｇｌｙ−ＯＢ
ｚｌ　１ＩＴａｓＯＨ９，５９ｇをＤＭＦ　３０ｍ１に
溶解し、−５℃に冷却攪拌下、　　ＤＭＦ　ｌｏｍｉに
溶解した留ＳＣ４，９７ｙｇ見の溶液を滴下し、　１時
間後、室温に戻し一夜攪拌した０反応液を減圧１ｇ１ｌ
ｉｌｌ、て０ＩＩＦを留去し、残液に酢酸エチルを加え
て溶解した。 酪酸エチル層をＩＮ塩酸、木、５ｇ重曹水、水で順次洗
浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧ｃ縮して油状
のＢＯＣ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−ＯＢｚｌ　９．２ｇを得た
。 Ｒｆｌ弓、５３゜ 元素分析［Ｃ２０Ｈ２０Ｎ２０５として］ＩＪ　　　　
）ＩＸ　　　　Ｎ％ 測定値　　　８５．５０　　５．４０　　７．５８　　
　　　　　　　１計算値　　　８５．２１　　５．４７
　　７．８０（＋１）　ＢＯ（ニーＶａｌ−Ｌｅｕ−Ｇ
ｌｙ−ＯＢｚｌの装造ＢＯｆｌニーＬｇｕ−Ｇｌｙ−Ｏ
Ｂｚｌ　９．２ｇに冷却下、ＴＦＡ　４５ｍＡを加え、
３０分間撹拌した後、減圧濃縮した。残液を水酸化ナト
リウム上で真空乾燥した。これに　ＤＭＦ　２５ｍ１を
加え、−５℃に冷却下、　ＴＥＡ−Ｑ　ｐＨ？、ｏ　ニ
調整Ｌ　、　ＢＯＧ−Ｖａｌ−０）１５．５４ｇ、　Ｈ
ＯＢＴ３．４５ｇ　、　　ＷＳＣ・）Ｉ（：Ｉ　５．３
７ｇ　及ｔｌ　ＴＥＡ　３．９３ａｎ　ヲ）ｍえて１時
間反応し、更に室温で一夜攪拌した０反応終了後、反応
液を減圧濃縮し、酢酸エチルで抽出した。飽和食塩水、
ＩＮ塩酸、５ｇ重會水、舊和食塩水で順次洗浄し、無水
硫酸マグネシウムで乾燥した。酢酸エチルを留去して、
ｎ−へキサンで結晶化シテ融点　１２５〜＋２！Ｉｔ℃
（１）　ＢＯＧ−Ｖａｌ−Ｌｓｕ−Ｇ１２−０８ｚ＋１
０．２ｇ（収率ａｏ、３＄）を得た。 元素分析［Ｃ：２５Ｈ３ＢＮ３０ｇとしてｌＩＪ　　　
　Ｈ＄　　　　８％ ａ　定　イー１　　　　　　　　８２．８７　　　　　
　８，２１　　　　　８．７９計算値　　　８２．８７
　　８．２３　　８．８０（１２）　ＢＯＧ−Ｖａｌ−
Ｌｓｕ−Ｇｌｙ−ＯＨの製造ＢＯＣ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ−
Ｇｌｙ−ＯＢｚｌ　５ｇ（ｌｏａＭ）をメタノール２５
■見に溶解し、冷犀下、２Ｎ水酸化ナトリウムＢａ！Ｌ
を加え、室温で３時間撹拌した。 次いで、１８４　醜でｐ）ｌ約７として酢酸エチルで抽
出し、この酢酸エチル層をＩＮｆＪｉ　＠及び水で洗浄
後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した１次いで。 酢酸エチルを減圧留去し、残液をジエチルエーテル−ｎ
−へキサンから再結晶して融点　１０６〜１１５℃の曲
記目的物３．５９ｇ（収率９２．５＄）を得た。 元素分析［Ｃ１１ｌｌ”３３’３０８　”　４”２０と
してｌＩＪ　　　　Ｈ＄　　　　８％ ＩＮ　２　（＃　　　　５４．９８　　８．４８　　１
０．５８計算値　　　５５．１８　　８．８１　　１０
．７２（＋３）　Ｈ−Ｖａｌ−Ｌａｕ−Ｇｌｙ−０）１
の製造ＥＩＯＣ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−０）１１．
４０ｇ（３，８１ｍＭ）を＃酸エチルー７ｍ見に溶解し
、冷却攪拌下、　３．５Ｎ塩〜を含む酢酸エチル９−文
を加え、室温で２蒔ｍ１反応させた０反応終了後、酢酸
エチルを減圧留去し、その残渣を水：メタノール（１：
５）　３．５ｍ文に溶解し。 ＴＥＡで中和後、ジエチルエーテルを加えて冷蔵沖中に
放置した。析出する結晶を枦取して融点２３３〜２４ピ
Ｃ（分解）の１）１１記目的物０．７８ｇ（収＋７５．
０駕）を得た。 元素分析［Ｃ１３Ｈ２５Ｎ３０４としてＩＩＪ　　　　
　）１ｍ　　　　Ｎ％ 測定値　　　５４．１１　　８．７４　　１４．４１計
算値　　　５４，３４　　８．７？　　　１４．８２Ｎ
ＨＣ）Ｉ（０−Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−ＯＨの製造濁
し、−５℃に冷却下、　８Ｎｆｆｉ酸／ジオキサン０．
１４　ａｎを加え、　１０℃迄温度を上げて完全に溶解
せしめた。 次いで−５〜−１０℃に冷却し、インアミルニトリ、　
ト０．０３８５Ｍを徐々に加え、同温度で２０分間反応
を行なった。 反応終了後、−５０℃迄冷却してＨ−Ｖａｌ−Ｌｓｕ−
ＣＩＦ−０）１０．２３ｇを加え、更にＴＥＡでｐＨ約
７に調整して水浴中で２０間反応を行なった。この反応
液を冷却下、　０．５Ｎｉｌ酸２０１１見中に徐々に加
え、生ずる沈殿物を枦取し、　０．５Ｎ１ｉ１酸、水で
洗浄後、乾燥して融点２５５〜２８４℃（分解）の前記
目的物ｏ、２２ｇ（収１８１１．６Ｋ）を得た。 元素分析［ＣＨ３８７Ｎ１０目・８２０として］ＣＬ　
　　　）ＩＳ　　　　Ｎ％ 測定値　　　８１．３１　　７．１１　　１０．５１計
算値　　　８１．８５　　７．５５　　１０．６１アミ
ノ酸分析値： Ｔｈｒ　Ｏ，８Ｂ（１）、Ｓｅｔ　１．７７（２）、Ｇ
ｌ！　１．０１（＋）。 Ａｌａ　０．９１（１）、Ｖａｌ　１．００（１）、Ｌ
ｅｕ　２．００（２）。 α−７ミノスベリン酸　１．０５（１）手続補正書 昭和５８年１２月４日 特許ｌｉ長官　志賀　学殿 ｔ、−Ｂｌの表示 昭和５９年特許願第２３２４７８号 ２、発明の名称 新規ポリペプチド及びその製造法 ３．７＋ｌｉ正をする者 事件との関係　特許出願人 ４、代理人 住所　〒１０７東京都港区赤坂２−１０−８　　第−信
相ビル５、補正命令の日付　自発 ６、補正の対象　明細書の発明の詳細な説明の欄＼、−
／ （１）　　明細１第８頁下から４〜３行目のｒ　（ｒＴ
ｏｓ　Ｊという）」を「（以ドｒＴｏｓＪ　という）」
と袖＋ｌ−する・ （２）明細、１）第２４頁ドからｌ　Ｏ（「［１の「攪
拌ド、」を削除する。 （３）明細、！−コ第２７頁１２？１１１の「１８２層
楚と」をｒ　　１．８２−見を」と補正する。 （４）明細書第４１頁１２行目の「（収率６５，５ｚ）
」を「（収率ｓ５．５％）を得た。」と補正する。 （５）明細書第４１頁１２行１」のｒＴＦＡＪを「↑Ｅ
Ａ　Ｊ　と補正する。 （６）明細書第４１頁１行目の「１６９〜１７５℃」を
「ＩＢ９〜１７５℃（分解）」と補正する。 （７）明細書第５４負４行目の ｒＣ１８４１（２４３’３２０４１”２’　ヲ「Ｃ１８
４Ｈ２４３”３２’４１”　’　と補正する。 （８）明細書第５４負４行目の「炉別」を「炉別」と補
正する。 （９）明細書第６０頁下から６行目及び同第６１丁 ［５行目の「冷却化」を「冷却下」と補正する。 （１０）明細書第６０頁下から３〜１行目のｒ　　　　
　　　　　　　（Ｃ）Ｉ２）５ＧＯ−Ａｌａ−Ｓｅｔ（
Ｂｚｌ）−Ｌｓｕ−３ａｒ（Ｂｚｌ）−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ
）−ＮＨＣＨＣＯＯＣＩ（３゜ を ＮＨＣＨＣＯＯＣ）Ｉ３Ｊ と補正する。 ｆ続補ｉＥ方 昭和８０年ｌθ月１７日 特許庁長官　　宇　賀　道　部　殿 １、事件の表示 昭和５９年特許願第２３２４７８号 ２、発明の名称 新規ポリペプチド及びその製造法 ３、補正をする者 事件との関係　特許出願人 名称　　（８０５）三菱油化株式会社 ４、代理人 ５、補正命令の日付　自発 ６、補正の対象　明細書の発明の詳細な説明の欄７、補
正の内容 明細書第３９頁下から３〜２行目に記載のｒ　ＡＯＣニ
ーＡｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ａｓｐ（ＯＢ
ｚｌ）−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｇ
１７−Ｔｂｒ（Ｂｚｌ）−Ｐｒｏ−ＮＨ２Ｊをｒ　ＡＯ
Ｃ−Ａ　ｒｇ　（Ｔｏｓ）−Ｔｈ　ｒ　（Ｂｚ　Ｉ　）
−Ａｓｐ（ＯＢｚ　Ｉ）−Ｖａ　１−Ｇｌ　ｙ−Ａ　１
ａ−Ｇ　ｌ　ｙ−Ｔｈｒ（Ｂｚ　１）−Ｐｒｏ−ＮＪＪ
　と補正する。

Claims (2)

【特許請求の範囲】
1. （１）次式： 【遺伝子配列があります】 （式中、Ａｌａはアラニンを、Ｓｅｒはセリンを、Ｌｅ
   ｕはロイシンを、Ｔｈｒはスレオニンを、Ｖａｌはバリ
   ンを、Ｇｌｙはグリシンを、Ｌｙｓはリジンを、Ｇｌｎ
   はグルタミンを、Ｇｌｕはグルタミン酸を、Ｈｉｓはヒ
   スチジンを、Ｔｙｒはチロシンを、Ｐｒｏはプロリンを
   、Ａｒｇはアルギニンを、Ａｓｐはアスパラギン酸を表
   わし、ｎは３〜７の整数を表わす。） で示される新規ポリペプチド又はその酸付加塩若しくは
   錯体。
2. （２）次式： 【遺伝子配列があります】 （式中、Ａｌａはアラニンを、Ｓｅｒはセリンを、Ｌｅ
   ｕはロイシンを、Ｔｈｒはスレオニンを、Ｖａｌはバリ
   ンを、Ｇｌｙはグリシンを、Ｌｙｓはリジンを、Ｇｌｎ
   はグルタミンを、Ｇｌｕはグルタミン酸を、Ｈｉｓはヒ
   スチジンを、Ｔｙｒはチロシンを、Ｐｒｏはプロリンを
   、Ａｒｇはアルギニンを、Ａｓｐはアスパラギン酸を表
   わし、ｎは３〜７の整数を表わす。） で示される新規ポリペプチド又はその酸付加塩若しくは
   錯体の製造法において、前記式で示されるアミノ酸配列
   を有するペプチド又はポリペプチドを形成せしめ、反応
   の任意の過程で生成された次式： 【遺伝子配列があります】 （式中、Ｒは活性エステル残基を表わし、 Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｌｅｕ、Ｔｈｒ及びｎは前記と同義で
   ある。） で示されるペプチド残基を含む構成単位を環化反応に付
   すことを特徴とする新規ポリペプチド又はその酸付加塩
   若しくは錯体の製造法。