JPH0424328B2

JPH0424328B2 -

Info

Publication number: JPH0424328B2
Application number: JP59141176A
Authority: JP
Inventors: Toshio Wakabayashi; Makoto Takai; Junichiro Arai; Hideji Ichikawa; Seiitsu Murota
Original assignee: Terumo Corp
Current assignee: Terumo Corp
Priority date: 1984-07-06
Filing date: 1984-07-06
Publication date: 1992-04-24
Also published as: JPS6122057A

Description

【発明の詳細な説明】発明の背景技術分野本発明は、アミド誘導体を有効成分とする５−
リポキシゲナーゼ作用阻害剤に関するものであ
る。本発明によつて提供されるアミド誘導体は酵
素である５−リポキシゲナーゼの作用を阻害する
活性を有する。アレルギー、炎症および痛風の発
症因子であるロイコトリエンC₄（LTC₄）、ロイコ
トリエンD₄（LTD₄）と云つたロイコトリエン類
は生体内でアラキドン酸から５−リポキシゲナー
ゼの作用によつて生合成される。従つて５−リポ
キシゲナーゼの作用阻害活性を有する本発明のア
ミド誘導体は前記アレルギーの発症因子の生合成
を抑制し、抗アレルギー剤、抗炎症剤および抗痛
風剤として有用である。先行技術最近、アラキドン酸から５−リポキシゲナーゼ
の作用によりロイコトリエン類が生成し、これら
のロイコトリエン類がアレルギー発症因子である
ことが解明された〔サイエンス（Science）第220
巻、568ページ、1983年、ザアメリカンアソ
シエーシヨンフオアジアドバンスメント
オブサイエンス（The American Association
for the advancement of Science）社発行〕。さらに上記ロイコトリエン類がリウマチのよう
な炎症性疾患に関与し（ジヤーナル・オブ・クリ
ニカル・インベステイゲーシヨン、66、11月号、
1980、p.1166〜1170）、また痛風の発症因子であ
ること（ザ・ランセツト、1982年11月20日号、
p.1122〜1123）も報告されている。前述のようにアレルギー性の疾患であるアレル
ギー性喘息、アレルギー性鼻炎、リウマチのよう
な炎症性疾患および痛風の発症にはアラキドン酸
の５−リポキシゲナーゼ生成物であるロイコトリ
エン類（LTC₄、LTD₄）が重要な因子として関
与しているので、５−リポキシゲナーゼを失活さ
せ、その作用を阻害する活性を有する薬剤の出現
が強く望まれている。本発明者らはアミド誘導体を種々合成し、それ
らの５−リポキシゲナーゼの作用阻害活性を鋭意
研究した結果、本発明に係るアミド誘導体が強力
に５−リポキシゲナーゼの作用阻害活性を有する
ことを見い出し本発明を完成するに至つた。発明の目的本発明は、アミド誘導体を有効成分として含有
する５−リポキシゲナーゼ作用阻害剤を提供する
ことを目的とする。上記目的に沿う本発明は、一般式（）〔式中、（Ｒ）^mは３，５−ジメトキシ−４−ヒド
ロキシ基を表わす。ｎはトランス配置の二重結合
の数を表わし、１または２の整数である。Ｙは（式中、Ｘは水素原子、ハロゲン原子またはメト
キシ基、ｐは２または３を示す）なる基（）を
表わす〕で示されるアミド誘導体を有効成分とし
て含有する５−リポキシゲナーゼ作用阻害剤であ
る。本発明における前記式（）で示されるハロゲ
ン原子としては、フロル、クロルもしくはブロム
が好ましい。尚、本発明において５−リポキシゲ
ナーゼ作用阻害剤とは５−リポキシゲナーゼの作
用を抑制する作用を有する製剤を意味する。発明の具体的説明本発明の前記式（）で示されるアミド誘導体
は、実施例に示す如く下記式（）で示されるカ
ルボン酸誘導体、（式中、（Ｒ）^mは３，５−ジメトキシ−４−ヒド
ロキシ基を表わす。ｎはトランス配置の二重結合
の数を表わし、１または２の整数である。）または、例えばその反応性誘導体（）（式中、（Ｒ）^m、ｎの定義は式（）の定義と同
一である）について縮合反応及び脱保護基反応を
行うことにより得られる。本発明のアミド誘導体は５−リポキシゲナーゼ
作用阻害剤として使用され、投与量は症状により
異なるが一般に成人１日量30〜2000mg、好ましく
は50〜600mgであり、症状に応じて必要により１
〜３回に分けて投与するのがよい。投与方法は投
与に適した任意の形態をとることができ、特に経
口投与が望ましいが静注も可能である。本発明の化合物は単独又は通常の方法で製剤担
体あるいは賦形剤と混合され、錠剤、糖衣錠、散
剤、カプセル剤、顆粒剤、懸濁剤、乳剤、注射液
等に製剤化された種々の形態で適用できる。担体
あるいは賦形剤の例としては炭酸カルシウム、リ
ン酸カルシウム、でんぷん、ブドウ糖、乳糖、デ
キストリン、アルギン酸、マンニトール、タル
ク、ステアリン酸マグネシウム等があげられる。次に実施例および試験例を示して本発明をさら
に具体的に説明するが、本発明はこれらに何ら限
定されるものではない。実施例１アルゴン雰囲気下、３，５−ジメトキシ−４−
ヒドロキシケイ皮酸3.00ｇ（13.4ｍmol）を硫酸
−エタノール（１：115、50ml）溶液に懸濁させ、
5.5時間還流させた。反応液に水を加え、塩化メ
チレンにて抽出を行つた。有機層は炭酸水素ナト
リウム水溶液にて洗浄、有機層を減圧濃縮し、
３，５−ジメトキシ−４−ヒドロキシ−ケイ皮酸
エチル3.34ｇ（13.24ｍmol）を得た。アルゴン雰囲気下、該エステル化合物2.00ｇ
（7.9ｍmol）の乾燥ジクロルエタン（60ml）溶液
に、β−メトキシエトキシメチルクロライド1.82
ml（15.9ｍmol）、ジイソプロピルエチルアミン
2.77ml（15.9ｍmol）を加え、1.5時間還流させ
た。反応液に水を加え、クロロホルムにて抽出を
行つた。有機層を減圧濃縮し、得られた残渣をシ
リカゲルカラムクロマトグラフイーに付し、クロ
ロホルム溶出画分より、３，５−ジメトキシ−４
−（β−メトキシエトキシメトキシ）ケイ皮酸エ
チル2.60ｇ（7.6ｍmol）を得た。アルゴン雰囲気下、該エステル化合物2.6ｇ
（7.6ｍmol）の水−メタノール（１：４、40ml）
に水酸化ナトリウム3.04ｇ（76ｍmol）加え、室
温にて1.5時間反応させた。反応液に水を加え、
6N塩酸にてPH３とし、クロロホルムにて抽出を
行つた。有機層を減圧濃縮し、3.5−ジメトキシ
−４−（β−メトキシエトキシメトキシ）ケイ皮
酸2.148ｇ（6.9ｍmol）を得た。アルゴン雰囲気下、該酸化合物2.015ｇ（6.45
ｍmol）の乾燥ジクロルエタン（65ml）溶液に、
２−メルカプトチアゾリン846mg（7.10ｍmol）、
Ｎ、N′−ジシクロヘキシルカルボジイミド1.46ｇ
（7.10ｍmol）、４−ジメチルアミノピリジン0.08
ｇ（0.65ｍmol）を加え、室温にて12.5時間反応
させた。反応液を濾過、瀘液を減圧濃縮し、得ら
れた残渣に水を加え、塩化メチレンにて抽出を行
つた。有機層を1N水酸化ナトリウム水溶液、水
に洗浄後、有機層を減圧濃縮し、得られた残渣を
シリカゲルカラムクロマトグラフイーに付し、Ｎ
−〔３−〔３，５−ジメトキシ−４−（β−メトキ
シエトキシメトキシ）フエニル〕プロペノイル〕
−２−チオチアゾリン2.50ｇ（6.05ｍmol）を得
た。一方、アルゴン雰囲気下、ｐ−クロロベンズヒ
ドリルピペラジン5.73ｇ（20ｍmol）およびＮ−
（２−ブロムエチル）フタルイミド4.57ｇ（18ｍ
mol）をベンゼン50mlに溶解したのち、15時間加
熱還流した。反応液を減圧濃縮し、得られた残渣
をシリカゲルカラムクロマトグラフイーに付し、
クロロホルム−メタノール（100：１）混合溶媒
で分離し、エタノールより再結晶を行い、Ｎ−
（ｐ−クロロベンズヒドリル）−N′−（２−フタリ
ルアミノエチル）ピペラジン3.80ｇ（8.26ｍmol）
を得た。アルゴン雰囲気下、該ピペラジン誘導体103mg
（0.22ｍmol）のエタノール溶液（４ml）に80％
ヒドラジンヒドレート水溶液29mg（0.46ｍmol）
を加え、２時間還流させた。反応液を減圧濃縮
し、得られた残渣に乾燥ジメチルホルムアミド３
mlを加えた。この溶液にＮ−〔３−〔３，５−ジメ
トキシ−４−（β−メトキシエトキシメトキシ）
フエニル〕プロペノイル〕−２−チオチアゾリン
109mg（0.26ｍmol）の乾燥ジメチルホルムアミ
ド（３ml）溶液を加えた。13.5時間反応させた
後、溶媒を減圧留去し、得られた残渣にクロロホ
ルムを加え、不溶物を濾過、瀘液を減圧濃縮し、
得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフ
イーに付し、酢酸エチル溶出部より、Ｎ−〔２−
〔３−〔３，５−ジメトキシ−４−（β−メトキシ
エトキシメトキシ）フエニル〕−２−プロペノイ
ル〕アミノエチル−N′−ｐ−クロルベンズヒド
リルピペラジン33mg（0.05ｍmol）を得た。該アミド化合物33mg（0.05ｍmol）のメタノー
ル（４ml）溶液にｐ−トルエンスルホン酸−水和
物20mg（0.11ｍmol）を加え、6.5時間還流させ
た。反応液を減圧濃縮し、得られた残渣に水を加
え、クロロホルム抽出を行つた。有機層を減圧濃
縮し、得られた残渣をセフアデツクスカラムクロ
マトグラフイーに付し、メタノール溶出画分より
Ｎ−〔２−〔３−（３，５−ジメトキシ−４−ヒド
ロキシフエニル）−２−プロペノイル〕アミノエ
チル−N′−ｐ−クロルベンズヒドリルピペラジ
ン14mg（0.03ｍmol）を得た。このものの分光学
的データは下記式（）の構造を支持する。 IRν^CHCl3 _naxcm^-1：3530、1665、1620¹ H−NMR（重クロロホルム）δ： 2.43（10H、brs）、3.83（6H、ｓ）、4.18（1H、
ｓ）、6.10（1H、ｄ、Ｊ＝15Hz）、6.63（2H、ｓ）、
7.10−7.65（5H、ｍ）実施例２アルゴン雰囲気下、３，５−ジメトキシ−４−
ヒドロキシベンズアルデヒド10.01ｇ（55ｍmol）
の乾燥塩化メチレン（100ml）溶液に氷冷下、β
−メトキシエトキシメチルクロライド7.6ml（67
ｍmol）、ジイソプロピルアミン12.4ml（71ｍ
mol）を加え、室温にて14.5時間反応させた。反
応液を塩化メチレンにて希釈後、水洗、有機層を
減圧濃縮し得られた残渣をシリカゲルカラムクロ
マトグラフイーに付し、ベンゼン−酢酸エチル
（９：１〜２：１）溶出画分より３，５−ジメト
キシ−４−（β−メトキシエトキシメトキシ）ベ
ンズアルデヒド14.5ｇ（53.7ｍmol）を得た。アルゴン雰囲気下、水素化ナトリウム60％含有
鉱油210mg（5.25ｍmol）の乾燥テトラヒドロフ
ラン（20ml）溶液にトリエチル４−ホスホノクロ
トネート1.3ml（5.86ｍmol）を加え、０℃にて１
時間反応させた後、３，５−ジメトキシ−４−
（β−メトキシエトキシメトキシ）ベンズアルデ
ヒド1.01ｇ（3.74ｍmol）の乾燥テトラヒドロフ
ラン（４ml）溶液を加え、室温にて２時間反応さ
せた。反応液に飽和塩化アンモニウム水溶液を加
え、クロロホルムにて抽出を行つた。有機層を減
圧濃縮し得られた残渣をシリカゲルカラムクロマ
トグラフイーに付し、ベンゼン−酢酸エチル
（５：１〜２：１）溶出画分より５−〔３，５−ジ
メトキシ−４−（β−メトキシエトキシメトキシ）
フエニル〕−２，４−ペンタジエン酸エチル910mg
（2.49ｍmol）を得た。アルゴン雰囲気下、該エステル化合物880mg
（2.40ｍmol）のメタノール（10ml）溶液に、水
酸化ナトリウム962mg（24.1ｍmol）の水−メタ
ノール（１：４、40ml）溶液を加え、室温にて
23.5時間反応させた。反応液に水を加え、1N塩
酸にてPH3.5とした後、クロロホルム抽出を行つ
た。有機層を減圧濃縮し、５−〔３，５−ジメト
キシ−４−（β−メトキシエトキシメトキシ）フ
エニル〕−２，４−ペンタジエン酸790mg（2.34ｍ
mol）を得た。アルゴン雰囲気下、該酸化合物890mg（2.63ｍ
mol）の乾燥ジクロルエタン（30ml）溶液に、２
−メルカプトチアゾリン345mg（2.90ｍmol）、ジ
メチルアミノピリジン32mg（0.26ｍmol）、Ｎ、
N′−ジシクロヘキシルカルボジイミド596mg
（2.89ｍmol）を加え、室温にて1.5時間反応させ
た。反応液を濾過し、瀘液を減圧濃縮、得られた
残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフイーに付
し、塩化メチレン−酢酸エチル（９：１）溶出画
分よりＮ−〔５−〔３，５−ジメトキシ−４−（β
−メトキシエトキシメトキシ）フエニル〕−２，
４−ペンタジエノイル〕−２−チオチアゾリン
1.056ｇ（2.4ｍmol）を得た。アルゴン雰囲気下、Ｎ−（ｐ−クロロベンズヒ
ドリル）−N′−（２−フタリルアミノエチル）ピ
ペラジン120mg（0.28ｍmol）のエタノール水溶
液（４ml）に80％ヒドラジンヒドレート水溶液35
mg（0.56ｍmol）を加え2.5時間還流させた。反応
後、溶媒を減圧留去し、得られた残渣に乾燥ジメ
チルホルムアミド（４ml）を加えた。この溶液に
Ｎ−〔５−（３，５−ジメトキシ−４−（β−メト
キシエトキシメトキシ）フエニル〕−２，４−ペ
ンタジエノイル〕−２−チオチアゾリン147mg
（0.33ｍmol）の乾燥ジメチルホルムアミド（４
ml）溶液を加えた。室温にて4.2時間反応させた
後、溶媒を減圧留去し、得られた残渣にクロロホ
ルムを加え、不溶物を濾過、瀘液を減圧濃縮し、
得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフ
イーに付し、塩化メチレン−酢酸エチル（10：１
〜１：１）溶出画分より、Ｎ−〔２−〔５−〔３，
５−ジメトキシ−４−（β−メトキシエトキシメ
トキシ）フエニル〕−２，４−ペンタジエノイル〕
アミノエチル〕−N′−ベンズヒドリルピペラジン
113mg（0.18ｍmol）を得た。該アミド化合物110mg（0.18ｍmol）のメタノ
ール（８ml）溶液にｐ−トルエンスルホン酸一水
和物34mg（0.18ｍmol）を加え、5.6時間還流させ
た。反応液を減圧濃縮し、得られた残渣に水を加
え炭酸ナトリウム水溶液にてPH９とした。クロロ
ホルムで抽出を行い、有機層を減圧濃縮し、Ｎ−
〔２−〔５−（３，５−ジメトキシ−４−ヒドロキ
シフエニル）−２，４−ペンタジエノイル〕アミ
ノエチル〕−N′−ベンズヒドリルピペラジン90mg
（0.16ｍmol）を得た。このものの分光学的デー
タは下記式（XI）の構造を支持する。 IRν^KBr _naxcm^-1：3400、1650、1580¹ H−NMR（メタノール−d₄）δ： 2.47（10H、br、ｓ）、3.77（6H、ｓ）、4.17（1H、
ｓ）、6.02（1H、ｄ、ｊ＝14Hz）、6.60−7.60
（15H、ｍ）、7.80（1H、ｓ）実施例３アルゴン雰囲気下、Ｎ−（ｐ−クロロベンズヒ
ドリル）−N′−（２−フタリルアミノエチル）ピ
ペラジン206mg（0.44ｍmol）のエタノール溶液
（４ml）に80％ヒドラジンヒドレート水溶液60mg
（0.92ｍmol）を加え、２時間還流させた。反応
液を減圧濃縮し、得られた残渣に乾燥ジメチルホ
ルムアミド５mlを加えた。この溶液にＮ−〔５−
｛３，５−ジメトキシ−４−（β−メトキシエトキ
シメトキシ）フエニル｝−２，４−ペンタジエノ
イル〕−２−チオチアゾリン220mg（0.5ｍmol）
の乾燥ジメチルホルムアミド（４ml）溶液を加え
た。室温にて２時間反応させた後、溶媒を減圧留
去し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマト
グラフイーに付し、クロロホルム−メタノール
（50：１）溶出画分よりＮ−（ｐ−クロロベンズヒ
ドリル）−N′−〔２−〔５−｛３，５−ジメトキシ
−４−（β−メトキシエトキシメトキシ）フエニ
ル｝−２，４−ペンタジエノイル〕アミノエチル〕
ピペラジン185mg（0.31ｍmol）を得た。該アミド化合物150mg（0.25ｍmol）のメタノ
ール（10ml）溶液にｐ−トルエンスルホン酸一水
和物52mg（0.27ｍmol）を加え、２時間加熱還流
させた。反応液を減圧濃縮し、得られた残渣に水
を加え、炭酸ナトリウム水溶液にてPH９とした。
クロロホルムで抽出を行い、有機層を減圧濃縮
し、Ｎ−（ｐ−クロロベンズヒドリル）−N′−〔２
−｛５−（３，５−ジメトキシ−４−ヒドロキシフ
エニル）−２，４−ペンタジエノイル｝アミノエ
チル〕ピペラジン118mg（0.23ｍmol）を得た。
このものの分光学的データは下記式（XII）の構造
を支持する。 IRν^KBr _naxcm^-1：3400、1660、1620 実施例４アルゴン雰囲気下、Ｎ−（ベンズヒドリル）−
N′−（３−フタリルアミノプロピル）ピペラジン
220mg（0.5ｍmol）のエタノール溶液（５ml）に
80％ヒドラジンヒドレート水溶液60mg（１ｍ
mol）を加え、２時間加熱還流させた。反応液を
減圧濃縮し、得られた残渣に乾燥ジメチルホルム
アミド（５ml）を加えた。この溶液にＮ−〔５−
｛３，５−ジメトキシ−４−（β−メトキシエトキ
シメトキシ）フエニル｝−２，４−ペンタジエノ
イル〕−２−チオチアゾリン220mg（0.5ｍmol）
の乾燥ジメチルホルムアミド（４ml）溶液を加え
た。室温にて２時間反応させた後、溶媒を減圧留
去し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマト
グラフイーに付し、クロロホルム−メタノール
（50：１）溶出画分よりＮ−（ベンズヒドリル）−
N′−〔３−〔５−｛３，５−ジメトキシ−４−（β
−メトキシエトキシメトキシ）フエニル｝−２，
４−ペンタジエノイル〕アミノプロピル〕ピペラ
ジン204mg（0.35ｍmol）を得た。該アミド化合物204mg（0.35ｍmol）のメタノ
ール（10ml）溶液にｐ−トルエンスルホン酸一水
和物76mg（0.4ｍmol）を加え、２時間加熱還流
させた。反応液を減圧濃縮し、得られた残渣に水
を加え、炭酸ナトリウム水溶液にてPH９とした。
クロロホルムで抽出を行い有機層を減圧濃縮し、
Ｎ−（ベンズヒドリル）−N′−〔２−｛５−（３，５
−ジメトキシ−４−ヒドロキシフエニル）−２，
４−ペンタジエノイル｝アミノプロピル〕ピペラ
ジン173mg（0.35ｍmol）を得た。このものの分
光学的データは下記式（）の構造を支持す
る。 IRν^KBr _naxcm^-1：3350、1660、1615 試験例５−リポキシゲナーゼの作用阻害活性マウス由来マストサイトーマ細胞株Ｐ−815を
イーグル（Eagle）の基本培地（キブコラボラト
リーズ（Gibco Laboratories）社製）を90％含
む培養液中に５×10⁴個／mlとなるように希釈す
る。希釈液を空気中、37℃で48時間振盪培養した
後、培養液を氷冷し遠心分離し細胞を集める。該
細胞をPH7.4のリン酸緩衝液に再浮遊し濃度２×
10⁷個／mlとする。該浮遊液を超音波細胞破砕機
で処理したあと、10分間10000rpmで遠心分離し、
上清を５−リポキシゲナーゼ酵素液とする。放射
性標識アラキドン酸（10μキユリー／ml）を20μ
、インドメタシン（２×10^-8モル）および試験
する本発明に係るアミド誘導体をそれぞれ試験管
に入れ、これにリン酸緩衝液0.45ml、上記酵素液
0.45ml、８ｍMCaCl₂（塩化カルシウム）溶液0.1
mlを加え、37℃で５分間反応させる。氷冷後IN
−HCl（塩酸）60μを加え、酢酸エチルエステル
８mlで抽出する。抽出後を濃縮して得られる濃縮
液をシリカゲル薄層プレート（Merck 60 F₂₅₄）
にスポツトし展開する。阻害活性の測定は、ラジ
オ薄層クロマトスキヤナー（Dunnschicht−
Scanner LB 2723、ベルスオルド
（Berthold）社製）で検出される５−リポキシゲ
ナーゼ生成物である５−HETE（５（ｓ）−ヒドロ
キシ−６，８，11，14−エイコサテトラエン酸）、
LTB₄（ロイコトリエンB₄）に相当する部分を集
め、液体シンチレーシヨンカウンターで放射能を
測定することによつて行う。前記５−リポキシゲ
ナーゼ生成物の産生量の減少により５−リポキシ
ゲナーゼの作用阻害活性が確認される。試験の結
果、下記の表に示す如く著明な５−リポキシゲ
ナーゼ作用阻害活性を見い出した。また、表に
示さない本発明に係るアミド誘導体についても同
様な５−リポキシゲナーゼ作用阻害活性を有する
ことが確認された。

【表】尚、表中50％阻害濃度若しくは30％阻害濃度と
はアミド誘導体を導入しない場合の５−HETE
及びLTB₄の産生量を100％とした場合、該アミ
ド誘導体の導入により前記５−リポキシゲナーゼ
生成物の産生量を50％若しくは30％まで抑制する
為に要したアミド誘導体濃度を意味する。急性毒性 ICR系雄性マウス（５週令）を用いて経口投与
による急性毒性試験を行つた。本発明の化合物の
LD₅₀値はいずれも100mg／Kg以上であり、有効量
に比べて高い安全性が確認された。発明の効果本発明によれば、新規なアミド誘導体を有効成
分として含有する５−リポキシゲナーゼ作用阻害
剤が提供される。本発明の上記化合物は、５−リポキシゲナーゼ
の作用阻害活性を有することが明らかにされた。
即ち、上記化合物は５−リポキシゲナーゼの作用
を阻害することにより、５−リポキシゲナーゼの
作用によつて生成されるアレルギー発症因子であ
るLTC₄、LTD₄と云つたロイコトリエン類の産
性を抑制することができる。従つて、該アミド誘
導体は５−リポキシゲナーゼ作用阻害剤としてア
レルギー性喘息、アレルギー性鼻炎等に対して有
効に使用することができる。

Claims

【特許請求の範囲】１一般式（）〔式中、（Ｒ）^mは３，５−ジメトキシ−４−ヒド
ロキシ基を表わす。ｎはトランス配置の二重結合
の数を表わし、１または２の整数である。Ｙは（式中、Ｘは水素原子、ハロゲン原子またはメト
キシ基、ｐは２または３を示す）なる基（）を
表わす〕で示されるアミド誘導体を有効成分として含有す
る５−リポキシゲナーゼ作用阻害剤。