JPH04234989A

JPH04234989A - 光学活性（ｓ）−２−クロロ−１−フェニルプロパノールの製造法

Info

Publication number: JPH04234989A
Application number: JP41831890A
Authority: JP
Inventors: Michio Ito; 美智夫伊藤; Yoshinori Kobayashi; 良則小林
Original assignee: Daicel Chemical Industries Ltd
Current assignee: Daicel Corp
Priority date: 1990-12-27
Filing date: 1990-12-27
Publication date: 1992-08-24
Anticipated expiration: 2015-07-10
Also published as: JP3061422B2

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は３−クロロプロピオフェ
ノンを、光学活性（Ｓ）−３−クロロ−１−フェニル−
１−プロパノールに不斉還元する能力を有するキャンデ
ィダ属、ゲオトリカム属、ハンセヌラ属、トルラスポラ
属、ロデロミセス属、ピキア属、ジゴサッカロミセス属
、ロドスポリジウム属、シゾブラストスポリン属、サッ
カロミセス属、シゾブラストスポリオン属、シュワニオ
ミセス属、ウインゲア属、ステリグマトミセス属、クル
イベロミセス属、メチュニコイア属、ラクトバチルス属
、ミクロコッカス属、ベーカーズイーストに属する微生
物群から選ばれた微生物に接触させ、生成する光学活性
（Ｓ）−３−クロロ−１−フェニル−１−プロパノール
を採取することを特徴とする光学活性（Ｓ）−３−クロ
ロ−１−フェニル−１−プロパノールの製造法に関する
ものである。光学活性（Ｓ）−３−クロロ−１−フェニ
ル−１−プロパノールは２種の官能基を有することから
、光学活性を必要とする医薬、農薬等の合成原料として
極めて有用な物質である。例えば、｛ジャーナル・オブ
・メディシナル・ケミストリー（Ｊｏｕｒｎａｌｏｆ　
　Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ　　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ）３１巻
、１４１２頁、１９８８年｝，｛ジャーナル・オブ・オ
ーガニック・ケミストリー（Ｊｏｕｒｎａｌｏｆ　　Ｏ
ｒｇａｎｉｃ　　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ）５３巻、２９１
６頁、１９８８年｝，特開平２−１９３９５１号におい
てはトモキセチン、フルオキセチン、ノルフルオキセチ
ン等のセロトニン摂取阻害剤の光学活性体の合成に用い
られている。

【０００２】

【従来の技術と問題点】従来、光学活性（Ｓ）−３−ク
ロロ−１−フェニル−１−プロパノールの製造法として
は、■３−クロロプロピオフェノンを化学的に不斉還元
する方法〔｛米国特許４８６８３４４号｝、｛テトラヘ
ドロン・レターズ（Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ　　Ｌｅｔ
ｔｅｒｓ）３０巻、５２０７頁、１９８９年｝、特開昭
６０−１６１９２７号〕や■ラセミ体３−クロロ−１−
フェニル−１−プロパノールを酵素により光学分割する
方法等が知られている。しかし、■は触媒の合成が困難
であること、■は得られる３−クロロ−１−フェニル−
１−プロパノールの光学純度が低い等の問題があるため
、経済的に優れ、且つ、簡便な手段で光学純度の高い光
学活性（Ｓ）−３−クロロ−１−フェニル−１−プロパ
ノールを得る方法の確立が望まれている。

【０００３】

【課題を解決するための手段】本発明者らは経済的に優
れ、且つ、簡便な手段で光学純度の高い光学活性（Ｓ）
−３−クロロ−１−フェニル−１−プロパノールを得る
方法として、微生物による３−クロロプロピオフェノン
の不斉還元法に着目し、この目的に適した微生物を検索
した結果、キャンディダ属、ゲオトリカム属、ハンセヌ
ラ属、トルラスポラ属、ロデロミセス属、ピキア属、ジ
ゴサッカロミセス属、ロドスポリジウム属、シゾブラス
トスポリン属、サッカロミセス属、シゾブラストスポリ
オン属、シュワニオミセス属、ウインゲア属、ステリグ
マトミセス属、クルイベロミセス属、メチュニコイア属
、ラクトバチルス属、ミクロコッカス属、ベーカーズイ
ーストに属する微生物が３−クロロプロピオフェノンを
不斉還元し、光学活性（Ｓ）−３−クロロ−１−フェニ
ル−１−プロパノールを生成することを見出だし本発明
を完成したものである。

【０００４】本発明に使用する微生物としては、キャン
ディダ属、ゲオトリカム属、ハンセヌラ属、トルラスポ
ラ属、ロデロミセス属、ピキア属、ジゴサッカロミセス
属、ロドスポリジウム属、シゾブラストスポリン属、サ
ッカロミセス属、シゾブラストスポリオン属、シュワニ
オミセス属、ウインゲア属、ステリグマトミセス属、ク
ルイベロミセス属、メチュニコイア属、ラクトバチルス
属、ミクロコッカス属、ベーカーズイーストに属する微
生物が３−クロロプロピオフェノンを不斉還元し、光学
活性（Ｓ）−３−クロロ−１−フェニル−１−プロパノ
ールを生成する能力を有する微生物であればいずれも使
用可能である。

【０００５】具体的には３−クロロプロピオフェノンか
ら光学活性（Ｓ）−３−クロロ−１−フェニル−１−プ
ロパノールを生成しうる微生物としては、キャンディダ
・ギルエルモンディ（Ｃａｎｄｉｄａ　　ｇｕｉｌｌｉ
ｅｒｍｏｎｄｉｉ）ＩＦＯ　　０５６６、キャンディダ
・ルゴサ（Ｃａｎｄｉｄａ　　ｒｕｇｏｓａ）ＩＦＯ　
　０５９１、ＩＦＯ　　１１５２、ＩＦＯ　　１３６４
、キャンディダ，パラプシロシス（Ｃａｎｄｉｄａ　　
ｐａｒａｐｓｉｌｏｓｉｓ）ＩＦＯ　　１０６８、キャ
ンディダ・エタノリカ（Ｃａｎｄｉｄａ　　ｅｔｈａｎ
ｏｌｉｃａ）ＩＦＯ　　１０２５３、キャンディダ・ア
ンタルクティカ（Ｃａｎｄｉｄａ　　ａｎｔａｒｃｔｉ
ｃａ）ＩＦＯ　　１０１８２、キャンディダ・シャタビ
イ（Ｃａｎｄｉｄａ　　ｓｃｈａｔａｖｉｉ）ＩＦＯ　
　１０２５８、キャンディダ・サケ（Ｃａｎｄｉｄａｓ
ａｋｅ）ＩＦＯ　　１１４９、キャンディダ・シュウド
インテルメディア（Ｃａｎｄｉｄａ　　ｐｓｕｄｏｉｎ
ｔｅｒｍｅｄｉａ）ＩＦＯ　　１６９３、キャンディダ
・パラルゴサ（Ｃａｎｄｉｄａ　　ｐａｒａｒｕｇｏｓ
ａ）ＩＦＯ　　０９６６、キャンディダ・ステアトリテ
ィカ（Ｃａｎｄｉｄａ　　ｓｔｅａｔｏｌｙｔｉｃａ）
ＩＦＯ１０１８４、キャンディダ・マグノリエ（Ｃａｎ
ｄｉｄａ　　ｍａｇｎｏｌｉａｅ）ＤＳＭ　　７０６３
８、ゲオトリカム・キャピタタム（Ｇｅｏｔｒｉｃｈｕ
ｍｃａｐｉｔａｔｕｍ）ＪＣＭ　　３９０８、ハンセヌ
ラ・ミヌタ（Ｈａｎｓｅｎｕｌａ　　ｍｉｎｕｔａ）Ｄ
ＳＭ　　７０２７４、ハンセヌラ・ホルスティ（Ｈａｎ
ｓｅｎｕｌａ　　ｈｏｌｓｔｉｉ）ＩＦＯ　　０９８６
、ハンセヌラ・アノマラ（Ｈａｎｓｅｎｕｌａ　　ａｎ
ｏｍａｌａ）ＤＳＭ　　７０１３０、ハンセヌラ・キャ
プスラタ（Ｈａｎｓｅｎｕｌａ　　ｃａｐｓｕｌａｔａ
）ＤＳＭ　　７０２６９、ハンセヌラ・グルコジマ（Ｈ
ａｎｓｅｎｕｌａ　　ｇｌｕｃｏｚｙｍａ）ＤＳＭ　　
７０２７１、トルラスポラ・デルブルエキ（Ｔｏｒｕｌ
ａｓｐｏｒａ　　ｄｅｌｂｒｕｅｃｋｉｉ）ＩＦＯ　　
０９５５、ロデロミセス・エロンギスポラス（Ｌｏｄｄ
ｅｒｏｍｙｃｅｓ　　ｅｌｏｎｇｉｓｐｏｒｕｓ）、Ｉ
ＦＯ　　１６７６、ピキア・リンドネリ（Ｐｉｃｈｉａ
　　ｌｉｎｄｎｅｒｉｉ）ＤＳＭ　　７０７１８、ピキ
ア・トレハロフィア（Ｐｉｃｈｉａ　　ｔｒｅｈａｌｏ
ｐｈｉｌａ）ＤＳＭ　　７０３９１ピキア・オメリ（Ｐ
ｉｃｈｉａ　　ｏｈｍｅｒｉ）ＤＳＭ　　７０８１５ピ
キア・カルソニ（Ｐｉｃｈｉａ　　ｃａｒｓｏｎｉｉ）
ＤＳＭ　　７０３９２、ジゴサッカロミセス・ルキシー
（Ｚｙｇｏｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ　　ｒｏｕｘｉ
ｉ）ＩＦＯ　　０５０５、ロドスポリジウム・ディオボ
バタム（Ｒｈｏｄｏｓｐｏｒｉｄｉｕｍ　　ｄｉｏｂｏ
ｖａｔｕｍ）ＩＦ０　　０６８８、シゾブラストスポリ
オン・コバヤシ（Ｓｃｈｉｚｏｂｌａｓｔｏｓｐｏｒｉ
ｏｎ　　ｋｏｂａｙａｓｉｉ）ＩＦＯ　　１６４４、サ
ッカロミセス・セレビシエ（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅ
ｓｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）ＩＦＯ　　０７１８、サッカ
ロミセス・バヤナス（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ　　
ｂａｙａｎｕｓ）ＩＦＯ　　０２０６、サッカロミセス
・ダイレンシス（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ　　ｄａ
ｉｒｅｎｓｉｓ）ＩＦ０　　０２８５、シゾブラストス
ポリオン・スタルケイ−ヘンリシイ（Ｓｃｈｉｚｏｂｌ
ａｓｔｏｓｐｏｒｉｏｎ　　ｓｔａｒｋｅｙｉ−ｈｅｎ
ｒｉｃｉｉ）ＤＳＭ　　７０５６９、シュワニオミセス
・オクシデンタリス（Ｓｃｈｗａｎｎｉｏｍｙｃｅｓｏ
ｃｃｉｄｅｎｔａｌｉｓ）ＩＦＯ　　１８４１、ウイン
ゲア・ロベルツィ（Ｗｉｎｇｅａ　　ｒｏｂｅｒｔｓｉ
ｉ）ＩＦＯ　　１２７７、ステリグマトミセス・エルビ
エ（Ｓｔｅｒｉｇｍａｔｏｍｙｃｅｓ　　ｅｌｖｉａｅ
）ＤＳＭ　　７０８５２、クルイベロミセス・ポリスポ
ラス（Ｋｌｕｙｖｅｒｏｍｙｃｅｓ　　ｐｏｌｙｓｐｏ
ｒｕｓ）ＤＳＭ７０２９４、メチュニコイア・リュカウ
フィ（Ｍｅｔｓｃｈｎｉｋｏｗｉａ　　ｒｅｕｋａｕｆ
ｉｉ）ＤＳＭ　　７０８８０、ラクトバチルス・フリギ
ダス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ　　ｆｒｉｇｉｄｕ
ｓ）ＮＲＩＣ　　１０７９、ミクロコッカス・ルテアス
（Ｍｉｃｒｏｃｏｃｃｕｓ　　ｌｕｔｅｕｓ）ＩＦＯ　
　１２７０８、ベーカーズ・イースト（Ｂａｋｅｒ´ｓ
　　ｙｅａｓｔ）ＩＦＯ　　２０４３、等を挙げること
ができる。

【０００６】これらの微生物は、野生株、変異株、又は
細胞融合もしくは遺伝子操作法等の遺伝子手法により誘
導される組み替え株等、いずれの株でも好適に用いるこ
とができる。

【０００７】尚、ＩＦＯ番号の付された微生物は、（財
）醗酵研究所（ＩＦＯ）発行のＬｉｓｔ　　ｏｆＣｕｌ
ｔｕｒｅｓ、第８版、第１巻（１９８８）に記載されて
おり、該ＩＦＯから入手することができる。ＪＣＭ番号
の付された微生物は、理化学研究所微生物系保存施設発
行の微生物カタログ第４版（１９８６）に記載されてお
り、該施設から入手することができる。ＤＳＭ番号の付
された微生物は、Ｄｅｕｔｓｃｈ　　Ｓａｍｍｌｕｎｇ
　　ｖｏｎＭｉｋｒｏｏｒｇａｎｉｓｍｅｎ）（ＤＳＭ
）発行のＣａｔａｌｏｇｕｅ　　ｏｆ　　ｓｔｒａｉｎ
ｓ（１９８９）に記載されており、該ＤＳＭから入手す
ることができる。ＮＲＩＣ番号の付された微生物は東京
農業大学総合研究所菌株保存室発行の菌株リスト（ＣＵ
ＬＴＵＲＥ　　ＣＯＬＬＥＣＴＩＯＮ　　ＯＦ　　ＮＯ
ＤＡＩ）Ｎｏ．１（１９８５）に記載されており、該施
設から入手することができる。

【０００８】本発明に用いる微生物を培養するための培
地は、その微生物が増殖し得るものであれば特に制限は
ない。例えば、炭素源としては、上記微生物が利用可能
なものであればいずれも使用でき、具体的には、グルコ
ース、フルクトース、シュクロース、デキストリン等の
糖類、ソルビトール、エノール、グリセロール等のアル
コール類、フマル酸、クエン酸、酢酸、プロピオン酸等
の有機酸類及びその塩類、パラフィン等の炭化水素類等
或いはこれらの混合物を使用することができる。窒素源
としては例えば、塩化アンモニウム、硫酸アンモニウム
、リン酸アンモニウム等の無機酸のアンモニウム塩、フ
マル酸アンモニウム、クエン酸アンモニウム等の有機酸
のアンモニウム塩、肉エキス、酵母エキス、コーンステ
ィープリカー、カゼイン加水分解物、尿素等の無機有機
含窒素化合物、或いはこれらの混合物を使用することが
できる。他に無機塩、微量金属塩、ビタミン類等、通常
の培養に用いられる栄養源を適宜、混合して用いること
ができる。また必要に応じて微生物の増殖を促進する因
子、本発明の目的化合物の生成能力を高める因子、或い
は培地のｐＨ保持に有効な物質も添加できる。

【０００９】培養方法としては培地ｐＨは２．０〜９．
５、好ましくは、３〜８、培養温度は２０〜４５℃、好
ましくは２５〜３７℃で、嫌気的或いは好気的に、その
微生物の成育に適した条件下５〜１２０時間、好ましく
は１２〜７２時間程度培養する。

【００１０】還元方法の方法としては、培養液をそのま
ま用いる方法、遠心分離等により菌体を分離し、これを
そのまま、或いは、洗浄した後、緩衝液、水等に再懸濁
したものに、３−クロロプロピオフェノンを添加し反応
させる方法等がある。この反応の際、グルコース、シュ
クロース等の炭素源をエネルギー源として添加したほう
が良い場合もある。また、菌体は生菌体のままでもよい
し、菌体破砕物、アセトン処理、凍結乾燥等の処理をほ
どこしたものでもよい。また、これらの菌体或いは、菌
体処理物を、例えば、ポリアクリルアミドゲル法、含硫
多糖ゲル法（カラギーナンゲル法等）、アルギン酸ゲル
法、寒天ゲル法等の公知の方法で固定化して用いること
もできる。更に、菌体処理物から、公知の方法を組み合
わせて精製取得した酵素も使用できる。

【００１１】３−クロロプロピオフェノンはそのまま、
或いは、水に懸濁・溶解し、又は反応に影響を与えない
ような有機溶媒に溶解したり、界面活性剤等に分散させ
たりして、反応始めから一括に或いは分割して添加して
もよい。

【００１２】反応はｐＨ３〜９、好ましくは、ｐＨ５〜
８の範囲で温度は１０〜６０℃、好ましくは２０〜４０
℃の範囲で、１〜１２０時間程度、攪拌下あるいは静置
下で行う。基質の使用濃度は特に制限されないが、０．
１〜１０％程度が好ましい。反応によって生成した光学
活性（Ｓ）−３−クロロ−１−フェニル−１−プロパノ
ールの採取は反応液から直接或いは菌体分離後、有機溶
媒による抽出、蒸留、カラムクロマトグラフィー等の通
常の精製方法を用いれば容易に得られる。

【００１３】

【実施例】以下、本発明を具体的に実施例にて説明する
が、本発明はこれらの実施例のみに限定されるものでは
ない。なお、実施例に於ける反応液中の（Ｓ）−３−ク
ロロ−１−フェニル−１−プロパノールの定量はガスク
ロマトグラフィー（カラム：ＦＡＬ−Ｍ，１０％，２ｍ
　　温度１８０℃）により行い、光学純度の測定は光学
分割カラムを用いた高速液体クロマトグラフィー（カラ
ム：ダイセル化学工業製キラルセルＯＤ、溶媒：ｎ−ヘ
キサン／２−プロパノール＝９５／５、温度：４０℃、
波長：２５４ｎｍ、流速：０．５ｍｌ／分）により行っ
た。（保持時間：Ｓ体１９．０分、Ｒ体２１．５分）

【
００１４】酵母に属する菌株の場合はＹＭ培地（酵母エ
キス１％、麦芽エキス１％、ペプトン１％、グルコース
５％、ｐＨ６．０）５ｍｌを、又細菌に属する菌株の場
合はＰＭ培地（グルコース１％、ペプトン０．５％、肉
エキス０．５％、ＮａＣｌ０．３％、ｐＨ７．０）５ｍ
ｌを直径２１ｍｍの試験管に入れ、減菌後、表１に記載
した微生物を植菌し、３０℃で２４時間往復振盪培養を
行った。続いて、３−クロロプロピオフェノンを２５μ
ｇ加え、３０℃で７２時間往復振盪反応させた。反応後
、反応液を２ｍｌの酢酸エチルで抽出し、酢酸エチル層
を分析して生成した（Ｓ）−３−クロロ−１−フェニル
−１−プロパノールの光学純度と反応率を測定した。その結果を表１に示す。

【００１５】

【表１】

【００１６】

【発明の効果】本発明の微生物を用いた光学活性（Ｓ）
−３−クロロ−１−フェニル−１−プロパノールの製造
法は、簡便に光学純度の高い光学活性（Ｓ）−３−クロ
ロ−１−フェニル−１−プロパノールの製造を可能にす
るものであり、工業的に極めて有利である。

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】　　３−クロロプロピオフェノンを、光学
活性（Ｓ）−３−クロロ−１−フェニル−１−プロパノ
ールに不斉還元する能力を有するキャンディダ属、ゲオ
トリカム属、ハンセヌラ属、トルラスポラ属、ロデロミ
セス属、ピキア属、ジゴサッカロミセス属、ロドスポリ
ジウム属、シゾブラストスポリン属、サッカロミセス属
、シゾブラストスポリオン属、シュワニオミセス属、ウ
インゲア属、ステリグマトミセス属、クルイベロミセス
属、メチュニコイア属、ラクトバチルス属、ミクロコッ
カス属、ベーカーズイーストに属する微生物群から選ば
れた微生物に接触させ、生成する光学活性（Ｓ）−３−
クロロ−１−フェニル−１−プロパノールを採取するこ
とを特徴とする光学活性（Ｓ）−３−クロロ−１−フェ
ニル−１−プロパノールの製造法。
【請求項２】　　微生物が、キャンディダ・ギルエルモ
ンディ、キャンディダ・ルゴサ、キャンディダ・パラプ
シロシス、キャンディダ・エタノリカ、キャンディダ・
アンタルクティカ、キャンディダ・シャタビイ、キャン
ディダ・サケ、キャンディダ・シュウドインテルメディ
ア、キャンディダ・パラルゴサ、キャンディダ・ステア
トリティカ、キャンディダ・マグノリエ、ゲオトリカム
・キャピタタム、ハンセヌラ・ミヌス、ハンセヌラ・ホ
ルスティ、ハンセヌラ・アノマラ、ハンセヌラ・キャプ
スラタ、ハンセヌラ・グルコジマ、トルラスポラ・デル
ブルエキ、ロデロミセス・エロンギスポラス、ピキア・
リンドネリ、ピキア・トレハロフィア、ピキア・オメリ
、ピキア・カルソニ、ジゴサッカロミセス・ルキシー、
ロドスポリジウム・ディオボバタム、シゾブラストスポ
リオン・コバヤシ、サッカロミセス・セレビシエ、サッ
カロミセス・バヤナス、サッカロミセス・ダイレンシス
、シゾブラストスポリオン・スタルケイ−ヘンリシイ、
シュワニオミセス・オクシデンタリス、ウインゲア・ロ
ベルツィ、ステリグマトミセス・エルビエ、クルイベロ
ミセス・ポリスポラス、メチュニコイア・リュカウフィ
、ラクトバチルス・フリギダス、ミクロコッカス・ルテ
ウス、ベーカーズ・イーストである特許請求の範囲第１
項記載の製造法