JPH04112889A - Ｋｓ―５０５誘導体 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 産　土の１ この発明は新規化合物ＫＳ−５０５の誘導体に関する。

本化合物はサイクリックヌクレオチドホスホジェステラ
ーゼ阻害作用を有するので医薬品およびそれらの中間体
として有用である。

」米立返ｌ サイクリックヌクレオチドホスホジェステラーゼ（以下
ＰＤＥという）は、サイクリックアデノシン−３°、５
°−モノリン酸（以下ｃＡＭＰという）及びサイクリッ
クグアノシン−３°５°−モノリン酸（以下ｃＧＭＰと
いう）を分解して、それぞれアデノシン−５°−モノリ
ン酸及びグアノシン−５゛−モノリン酸を生成する酵素
である。

ｃＡＭＰ及びｃＧＭＰは重要な生理活性物質で、例えば
気管支、血管などの平滑筋や心筋の収締、血小板の凝集
、細胞の増殖等に関与するといわれている。

このＰＤＥを団害する物質は、生体内のｃ　Ａ　Ｍ　Ｐ
　及Ｕ　ｃ　Ｇ　Ｍ　Ｐの濃度を上昇させ、その結果、
例えば気管支拡張作用、平滑筋弛緩作用、強心作用、ホ
ルモン分泌促進作用、血小板の凝集抑制作用等を生じる
ことが知られており、医薬品として有用である。

明が解　しようとする課題 先に本発明者は、次式（Ｉｌ＋で表される微生物起源の
新規物質ＫＳ−５０５を開示した（特願昭６３−３１１
４４１号、特願平１−３１９９２２号）。

本発明は、ＫＳ−５０５がら、よりすくれたＰＤＥ朋害
作用をもつ物質を銹導することができるという知見に基
づいている。故に、この発明の目的は、新規物質ＫＳ−
５０５の銹導体を提供することにある。本誘導体はＰＤ
Ｅ阻害作用をもつので、医薬品またはその中間体として
有用である。

課題を解゛するための手段 本発明により、式（１）で表されるＫＳ−５０５の銹導
体が提供される。

ｃ式中Ｒ’は水素原子またはメチル基を表し、Ｒ２は水
素原子または式　（ＩＩ）の化合物を表す。

Ｘ、Ｙ、ＺＬｔ、ＸがＯＣＨ，（７）ときＹとＺとは一
体になって二〇を表し、ＺがＯＣＨ３のときＸとＹとは
一体になって一〇−を表す。ただしＲ１が水素原子のと
きＲ２は水素原子を表す。］式（［）の化合物の例を下
記の第１表および第２表に示す。

第　　１　　表 ■ ＣＩ　。

　Ｈｓ 式ｆｉｌｌ 第　　２ 表 ＣＨ。

式（目） ＣＨ。

ｌ」 本発明による誘導体の理化学的性質は、後記第３表及び
第４表に示される。

本発明による誘導体を、例えば次の方法で製造すること
ができる。

原料となる化合物ＫＳ−５０５は前記式（ＩＩＩ）で表
わされる。ＫＳ−５０５は後記蚕考例によって得ること
ができる。ＫＳ−５０５は、γ−ヒドロキシーγ−ラク
トン型の構造を有しており、化学的に等価の下記式（Ｉ
ＶＩで表される構造をとることもできる。溶液中で両者
は平衡の関係を保っているが、混合比は、例えば溶媒の
酸性度によって変化する。

以下の記載においてＫＳ　　５０５を引用する場合、と
くに規定しない限り、式（［１）　、式（［Ｖ）又は式
（ＩＩＩ）　と式（ＩＶＩの混合物を引用するものとす
る。

化合物（ｌｌ　は、以下の工程に従って製造することが
できる。

（工程ｌ） 式　［１）において、Ｒ１がＣＨ，で、Ｒ２が式ｆＩＩ
）である化合物Ｔａは、ＫＳ−５０５を酸存在下、ジア
ゾメタンと反応させることにより得ることができる。酸
としては一塩化水素、酢酸、パラトルエンスルホン酸、
メタンスルホン酸等が用いられる。酸はＫＳ−５０５に
対して０００１〜１０等量、ジアゾメタンはＫＳ−５０
５に対して１０〜１０００等量用いられる。反応は０〜
３０℃で行なわれ、１０分〜１５時間で終了する。

（工程２） 式　（Ｉ）において、Ｒ１及びＲ２がともにＨである化
合物１ｂは、ＫＳ−５０５をメタノール中、酸で処理す
ることにより得ることができる。酸としては塩化水素、
硫酸、リン酸等が用いられる。

反応液中の酸の濃度は０．１〜２Ｎである。反応は３０
〜７０℃で行なわれ、１５分〜１５時間で終了する。

（工程３） 式　（Ｉｌにおいて、Ｒ’がＣＨ，で、Ｒ２がＨである
化合物Ｉｃは、ＫＳ−５０５の代わりに、工程２で得ら
れる化合物１ｂを用いる以外は、工程ｌと同様の方法で
得ることができる。

（工程４） 化合物１ｃは、ＫＳ−５０５の代わりに工程ｌで得られ
る化合物Ｉａを用いる以外は工程２と同様の方法で得る
こともできる。

上記工程においで、ＫＳ−５０５として式（ＩＩＩ）で
表わされる化合物を用いる場合は、化合物１ａ、Ｉｂ及
びＩｃはいずれもＸとＹとが一体になって二〇であり、
２がＯＣＲ，であるγ−ヒドロキシーγ−ラクトン型の
構造を有する化合物が得られる。また、ＫＳ−５０５と
して式（ＩＶ）で表わされる化合物を用いる場合は、化
合物１ａ、Ｉｂ及びＩｃは、いずれもＸがＯＣＨ、であ
り、ＺとＹとが一体になって＝Ｏであるγ−ケトカルホ
ン酸メチルエステル型の構造を有する化合物が得られる
。さらに、ＫＳ−５０５として式（ＩＩＩ）と式（ＩＶ
）で表わされる化合物の混合物を用いる場合は、γ−ヒ
ドロキシーγ−ラクトン型の構造を有する化合物とγ−
ケトカルボン酸メチルエステル型の構造を有する化合物
の混合物が得られる。

上記各工程の終了後、必要に応じて反応液を中和後、濃
縮し、酢酸エチル、クロロホルム、ジエチルエーテル等
の非水溶性溶媒で抽出する。抽出層を水、炭酸水素ナト
リウム水溶液、飽和食塩水等で洗浄後、無水硫酸ナトリ
ウム等で乾燥した後、溶媒を留去する。又は反応液をそ
のまま濃縮して、シリカゲルによるカラムクロマトグラ
フィー、薄層クロマトグラフィー、分取用高速液体クロ
マトグラフィー、再結晶等により精製することができる
。

次に、実施例及び試験例により、本発明を説明する。

大溝ｄ引± 化合物１の製造法 Ｋ　Ｓ　−５０５、（２９６ｍ　ｇ、０．２７ｍｍａｌ
ｌを９０ｍｊ２のメタノールに溶解し、酢酸１μ℃を加
えて撹拌した。この溶液に、２５ｍｇのジアゾメタン−
エーテル溶液［ビス（Ｎ−メチル−Ｎ−ニトロソ）テレ
フタルアミド（１８ｇ）／エーテル（８０ｍｇ）］を加
え、２５℃で３０分間撹拌した。溶媒を減圧下留去し、
得られた残漬をシリカゲルカラムクロマトグラフィー［
シリカゲル１５０ｍｆｌ、展開溶媒はクロロホルム・メ
タノールの組成比を２０＝１から１０：１（ｖ／ｖ）ま
で徐々に変化させる］により精製し、無色粉末の化合物
ｌを２１６ｍｇ　（７０％）得た。

友爽史ユ 化合物４及び化合物ｌの製造法 ３０６ｍｇ　（０，２８ｍｍｏ　ｌ）のＫ　Ｓ　−５０
５を４５ｍｊ２の０３％塩酸−メタノールに溶解した。

この溶液に、実施例１と同様に調製したジアゾメタン−
エーテル溶液３０ｍｊ２を加え、２５℃て２時間撹拌し
た。実施例１と同様に精製し、無色粉末の化合物４を１
０７ｍｇ　（３３％）及び無色粉末の化合物ｌを４９ｍ
ｇ　（１５％）得た。

及亙勇Ａ 化合物５及び化合物２の製造法 ５１．２ｍｇ　（０，０４５ｍｍｏｌ）の化合物ｌを３
０ｍｆｆのＯ，ＩＮ塩酸−メタノールに溶解し、１４時
間加熱還流した。溶媒を減圧下留去して得られた残漬を
分取シリカゲル薄層クロマトグラフ−ｔ−［Ａｒｔ　　
５７４４　　（２０ｘ２０ｘＯ，２５ｃｒｎ、メルク社
製）、展開溶媒：クロロホルム：メタノール＝２０　：
　１　（ｖ／ｖ）コにより精製し、無色粉末の化合物５
を２１．６ｍｇ（５１％）、及び無色粉末の化合物２を
６８ｍｇ（１６％）得た。

（１区 化合物５及び化合物２の製造法 ４．２ｍｇ　（３，１μｍｏ　１）の化合物４を２ｍＡ
の１０％塩酸−メタノールに溶解し、１３時間加熱還流
した。実施例３と同様に精製し、化合物５を２．６ｍｇ
　（７５％）及び化合物２を０．５ｍｇ　（１５％）得
た。

割Ｐ胆 化合物５及び化合物２の製造法 ７７ｍｇ　（０，０６８ｍｍｏ　ｌ）の化合物ｌ及び化
合物４の混合物を１０％塩酸−メタノール１０ｍｌに溶
解し５時間加熱還流した。実施例３と同様に精製し、化
合物５を３４．６ｍｇ　（５５％）及び化合物２を１３
．９ｍｇ　（２２％）得た。

大Ｊ１江旦 化合物６及び化合物３の製造法 ２００ｍｇ　（０，１８ｍｍｏｌ）のＫＳ−５０５を２
０ｍＡの１０％塩酸−メタノールに溶解し、７時間加熱
還流した。溶媒を減圧下留去して得られた残漬をシリカ
ゲルカラムクロマトグラフィー［シリカゲル１００ｍβ
、展開溶媒はクロロホルム：メタノールの組成比を２０
＝１から１０：ｌ（ｖ／ｖ）まで徐々に変化させる］に
より精製し、無色粉末の化合物６を７２．９ｍｇ（４４
％）、及び無色粉末の化合物３を２３８ｍｇ（１４％）
得た。

Ｋ嵐廻ユ 化合物５の製造法 ３．２ｍｇ　（３，５％ｍｏ　１）の化合物６を１ｍｇ
のメタノールに溶解し、実施例１と同様に調製したジア
ゾメタン−エーテル溶液１ｍρを加え２５℃で４０分間
撹拌した。実施例３と同様に精製し、化合物５を２．７
ｍｇ　（８３％）得た。

実施例で得られた化合物の物理化学的性質を第３表及び
第４表に示す。各化合物の物理化学データは次の機器に
よってｉｊ、１１定した。

Ｎ　Ｍ　Ｒプルツカ−ＡＭ−４００ ＭＳ　：日立Ｍ−８０Ｂ　（ＳＩＭＳ法、ポジティブ及
びネガティブモート） ＩＲ：動性ＩＲ−２７Ｇ、　　ＣＨＣβ、溶液性融点　
：柳本ミクロ融点測定装置 ＴＬＣ：薄層クロマトグラフィー［Ａｒｔ５７４４、メ
ルク社、展開溶媒：クロ ロホルム：メタノール（２０：ｌ）コ 第３表 第４表 注）＊ ネ＄ ［＋１３４＋ ｍ／ｚ　１１３５　（Ｍ”＋（イ） ｍ／ｚ　９３１　　（Ｍ”＋Ｈ） （９＋６） ｍ／ｚ　９１７　（Ｍ”＋Ｈ） ｍ／ｚ　１ｌ１０ ）／ｚ　８９９ Ｒｆ＝Ｏ，］９ Ｒｆ＝０．３９ 計＝０．２９ Ｒｆ　＝０．２５ Ｒｆ＝０．４７ ＋ＴＬ／２８８５　　　　　　　　Ｒｆ　＝０．３２（
Ｍ”＋Ｈ−ＭｅＯＨ） ｍ／ｚ　９１５　（Ｍ−−Ｈｌ” ネガティブモートで測定。

ＫＢｒ錠剤法で測定。

１５８５、　１４４０．　１３８５．　１３５０゜＋３
２０．　１２８０．　１１６５．　１０４５゜＋４４０
．　１３９０．　１３５０．　　＋３２０゜１２８０、
　１＋６０．　１１４０．　１０９５゜１５８０、　１
４６４．　　＋４４０．　１３２０゜１２８０、　１１
６０．　　＋１３５．　１０９５゜１４４０、　１３９
０．　１３５０．　１３２０゜１２８０、　１１６０．
　１１４０．　１０９５゜１４８５、　１４５０．　１
３８５．　１３１０゜＋２７０．　　Ｉ２４０．　１１
９０．１１５５゜１４８０、　１４４５．　１３ｇ５．
１３２０゜１２７０、　１１６０．　１１３０．　１０
５０゜１０３５、　１０＋０．９５０．９００■ １０．７゜ ２１．４ ４９．６ ６１．９ ＋４．２．　１５．６　１６．６　１６，８　１７，６
　１８．０　１９．０２２．１．　２２，２　２４，２
　２８，１　３２．９．　３３，５　３５，１３８．４
．　３８．６．４］、６　ｘ３．　　４１．７．　４１
．８．４２．１゜５０．９．５＋、８．　５＋、９．　
５２．６．　５２．７．　５７．７．６０，３６２．０
．６２．８．６３．２．６３．４．　７＋、５．７３．
９．７５．３１（１５，８，１１７，６１２０，８，１
２７，１，＋２８．７．　　＋３６．０゜１９．６　２
０，６ ３６．８．　３７．２゜ ４２．７．４２９ ６０．７　Ｘ２ ８０．５　８２．５ １５６．７　１６９．６ ２１．５．２２．０．２２．２゜２３．８．２８．１．
３２．９．３３．６．３５．１．３６．８．３７．２゜
３８．２．３８．６．４０．４．４１，６　４１．７　
４１．８　ｘ２．　４１．９．４２．５，４２．８ｘ２
゜４９．１．５＋、１．　５＋、８．　５１．９．５２
．６．　５７．５．６０．２．６０．４．６＋、９．６
２，１６２．９．　６３，３　６３．４．　７７．０　
８０．６　１１７．６　１２０．９．　１２７．２．　
１２８．７２１．４．２２．０．２２．２．２４．２．
２８．２．３３．０．３３．６．３５．２．３６．８．
３７．２゜３８．２．３ｇ、７．　４０．４．　４１．
７　ｘ２．　　４＋、９．　４２．Ｏｘ２．　　４２．
４．　４２．８゜４２．９．４８．７．５＋、９　Ｘ２
．　　５２．７．　５７．６．６０．３　Ｘ２．　　６
２．０．６２，１６２．９．６３．２．６３．３．７６
．７．８０．６．　１１７．’５．　１２０．９．　　
＋２７．１．　１２８．７＋３６．０．　　＋５６．８
．　１６９．８．　　＋７３．３．　　＋７９．７，１
９６．７４　　１０．７．　　＋４．２．　１５．６．
　　＋６．６　ｘ２．　　１７．６．　１８．０．　１
８．６．　　＋９．６．２０．６２１．５．２２．１．
２２．２．２４．２．２８．４．３２．９．３４．１．
３５．２．３６．６．３７．２゜３ｇ、１．３８．４．
３ｇ、６．　４１．６　ｘ２．　　４１．７　ｘ２．　
　４１．８．４２．１．４２．８゜４２．９．４９．６
．５０．９．　５０．９”、　５１．１”、　５１．６
．　５＋、７．５２．７．５７．８．５９．９゜６０．
７　ｘ２．　　６２．０．６２．２．６２．９．　６３
．３．６３．４．７１．５．７３．７．７５．３゜８Ｄ
、４．８２．５．８７．３．　　＋０５．８．　１０８
．６．　１２１．１．　１２３．２．　　＋２３．７．
　１２６．１１３８．５”、　　１３８．６’、　　＋
５４．４１．　１５４．５”、　　＋６７．８．　１７
０．０．　　＋７３．１．　１７４．２第　４　表（続
き） ３６．８ ４２、５゜ ６００゜ ７７０゜ ３７．３．３８．２．３８．６．４０．４．４＋、７　
Ｘ２．　　４１．８．４＋、９　Ｘ２゜４２．８　ｘ２
．　　４９．０．５０．９．５＋、１．５１．７　ｘ２
．　５７．６．５９．９’。

６０．２．６２．０”、　６２．１’、６２．２”、　
６２．３”、　６２．９．６３．３．６３，４８０．４
”、　８０．５″、１０８．７．１２１．１”、　１２
１．２”、　１２３．２．１２３．７”。

２０．７　２１．５．２２．０．２２．２．２４．１．
２８．４．３３．０．３４．２．３５．３゜３７．３．
３Ｂ、２．３８．７．４０．３．４１．７．４１．９．
４２．０．４２．４．４２．８゜４８．８．５０．９．
５＋、１．５＋、７．５１．８．５７．６．５９．９．
６０．３．６２．１゜６２．３”、　６２．９．６３．
３ｘ２．６９．３．７７．４．８０．４．　１０８．７
．１２１．２゜１２３．８．　１２６．１．１３８．５
”、　１３８．６”、　１５４．５”、　１５４．６”
、　１６７．８’。

３６．８゜ ６２、２”。

１２３、２゜ １６７、９″。

詰」（例 代表的な化合物のＰＤＥ朋害活性を次の方法により試験
した。

ＰＤＥは、堤内らの方法［バイオケミカル・ジャーナル
（Ｂｉｏｃｈｅ＋＋＋、　Ｊ、）　１４６．１０９−１
２０ｆ１９７５）］に従い、牛大脳皮質から部分精製し
た標品を用いた。ジメチルスルホキシドに溶解した被検
化合物溶液５０μ氾を、８０ｍＭイミダゾール塩酸緩衝
液（ｐＨ６，９）　、３ｍＭ硫酸マグネシウム、０．３
ｍＭジチオスライトール、１００ｍＭ塩化ナトリウム−
１５０μＭの塩化カルシウム、１２ｍＭのｃＡＭＰ、４
　Ｕ　／　ｍ　Ｑ　（７）カルモデユリン（ｌＵ＝２６
ｍＬｌ／ｍｊ２のＰＤＥ存在下でＰＤＥの最大活性の５
０％を活性化するｌｉ）、２６ｍＬＪ／　ｍ　１のＰＤ
Ｅ　（ｌＵ＝１分間にＩμｍｏｌのｃＡＭＰを分解する
量）を含む反応混合液５００μΩに添加し、３０℃で３
０分間反応させた。

１００℃で５分間加熱することにより反応を停止させ、
次に塩化マンガン６μｍｏｌと５”−ヌクレオチダーゼ
０．２Ｕ　（ｌＵ＝１分間に１４ｔＬＩ＋ｏｌのリン酸
を生成する量）とを添加した後、３０℃で３０分間反応
させた。ｌＯ％過塩素酸３ｍρを添加して反応を停止さ
せた後、生成した無機リン酸をエイムス（Ａｍｅｓｌ　
の方法Ｃメソッド・イン・エンザイモロジー（Ｍｅｔｈ
ｏｄ　ｉｎ　Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙｌ　８巻、１１５−
１１６頁、１９６６年、アカデミツク・プレス（Ａｃａ
ｄｅｍｉｃ　Ｐｒｅｓｓ）　］に従って定量した。

次の式によって算出したＰＤＥ阻害率（１％）を第５表
に示す。

阻害率＝　（Ａ−Ｂ）／ＡＸ　１００　（％）Ａ、被検
化合物非存在下の無機リン酸生成量Ｂ、被検化合物存在
下の無機リン酸生成量第　　５　　表 Ａ−１％（９μ／ｎ＋ｉ！。

ＫＳ−５０５７０％ 化合物１　　　　４８％ 化合物３　　　　７０％ 八　６　　　　５４％ 髪ＪＬ例 種菌としてストレプトミセス・アルゲンテオルス　　（
Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ　　ａｒｇｅｎｔｅｏｌｕｓ
ｌ　　Ａ　　−２（ＦＥＲＭ−ＢＰ−２０６５）株を用
いる６種培地として、グルコース１．Ｏｇ／ｄ氾、可溶
性澱粉１．０ｇ／ｄＱ、肉エキス（極東製薬工業社製）
０．３ｇ／ｄＱ、酵母エキス（大五栄養化学社製）０．
５ｇ／ｄρ、ペプトン（デイフコ社製）０．５ｇ／ｄＱ
、炭酸カルシウム０．２ｇ／ｄβの組成を有する培地（
ｐＨ７，２）を用いた。

種培地１−０ｍβを入れた試験管に菌株を植菌し、２８
℃で５日間振盪培養した。この培養液４ｍＱを上記組成
の種培地４０ｍβを入れた３００ｍβ容量三角フラスコ
に植菌し、２８℃で２日間振盪培養した。さらにこの培
養液４０ｍ１２を上記組成の種培地３６０ｍｊ２に植菌
し、２８℃で２日間振盪培養した。こうして得られた種
培養液１８βを下記組成の発酵培地１８氾を入れた３０
βジャーファーメンタ−に植菌した。

発酵培地の組成ニ ゲルコース０．５ｇ／ｄ℃、マルトース４．０ｇ／ｄ　
ｆｆ、３−（Ｎ−モルホリノ）プロパンスルホン酸１．
Ｏｇ／ｄ℃、硫酸マグネシウム７水塩０．０５ｇ／ｄ氾
、大豆粉１．５ｇ／ｄ氾、ファーマメディア（ブロクタ
ー・アンド・ギャンブル社、米国）１．５ｇ／ｄｆ２、
炭酸カルシウム０　、５　ｇ　／　ｄ　１２　（ｐ　Ｈ
７、０）。

培養は２８℃で５日間通気撹拌下に行なった（通気ｉｔ
：　１８ρ／分、回転数：　３００　ｒｐｍ）。

培養終了後、培養液の遠心分離（７０００ｒｐｍｌによ
って得られた上清液を吸着樹脂ダイヤイオンＨＰ−２０
（三菱化成社製）を充填した２Ｑのカラムに通塔し、６
４２の水、６βの５０％メタノール、１０℃のメタノー
ルを順次に用いて洗浄した後、１０Ｊ２の１％アンモニ
アを含むメタノールで溶出した。１％アンモニアを含む
メタノール画分を集めて減圧下に濃縮すると約２．７ｇ
の褐色油状物が得られた。この褐色油状物をｌｏｍρの
クロロホルム／メタノール／エタノール／水（１０：４
：４：ｌ）の混合溶媒に溶解し、同一組成の混合溶媒で
充填した５００ｒｒ＋１２のシリカゲル（ワコーゲルＣ
−２００、和光純薬工業社製）カラムの上端に供給し、
同一組成の混合溶媒１５００ｍｊ２を用いて展開し、次
いでメタノール１０００ｍｇを用いで展開した。

得られた液を集めて減圧下で濃縮すると１５ｇの褐色油
状物が得られた。この褐色油状物を４ｍ℃のクロロホル
ム／メタノール／エタノール／水（１０・４：４：ｌ）
の混合溶媒に溶解した後、同一組成の混合溶媒を用いて
充填した２００ｒｎＪ２のシリカゲル（ワコーゲルＣ−
２００、和光純薬工業社製）カラムの上端に供給し、同
一組成の混合溶媒を用いて展開した。溶出液を１０ｍβ
ずつ分取し、活性画分１７から４２番を集めて減圧下で
濃縮すると約４６０ｍｇの褐色油状物が得られた。この
褐色油状物を約５０ｍβの１０％メタノールに懸濁し、
２Ｎ塩酸を用いてｐＨ２に調整した後、４００ｍｇずつ
の酢酸エチルを用いて３回抽出し、酢酸エチル層を集め
て減圧下で濃縮乾固すると２６６ｍｇの褐色固体が得ら
れた。

この褐色固体を１ｍρのクロロホルム／メタノール／エ
タノール／水（１０：４：４：ｌ）の混合溶媒に溶解し
た後、同一組成の混合溶媒で充填した５０ｍｊ２のシリ
カゲル（ワコーゲルＣ−３００、和光純薬工業社製）カ
ラムの上端に供給し、同一組成の混合溶媒を用いて展開
した。溶出液を５ｍｌずつ分取し、ＫＳ−５０５を含む
画分番号１３から２５の両分を集めて減圧下で濃縮する
と約２５６ｍｇの淡褐色固体が得られた。この淡褐色固
体を１ｍρのクロロホルム／メタノール／エタノール／
水（１０：４：４：ｌ）の混合溶媒に溶解した後、同一
組成の混合溶媒を用いて平衡化したローパーカラム　（
Ｌｉｃｈｒｏｐｒｅｐ　５ｉ６０　；サイズＢ、メルク
社製）の一端に供給した。

同一組成の混合溶媒１０００ｍβで展開し、次いでクロ
ロホルム／メタノール／エタノール／水（１０：　４　
：　４　：　２）の混合溶媒９００ｍ氾を用いて展開し
た。クロロホルム／メタノール／エタノール／水の混合
溶媒で溶出した溶出液を１０ｍｇずつ分取し、ＫＳ−５
０５を含む両分番号１４か６３４の両分を集めて′ａ縮
乾固すると５６ｍｇの淡黄色粉末が得られた。

この淡黄色粉末をメタノール／水／酢酸の混合液２８ｍ
ｇ、に溶解し、下記の条件で分取用高速液体クロマトグ
ラフィーを繰り返し行なった。

装＠：ＬＣ６Ａシステム（動性製作所）カラム：加圧カ
ラム分離システムＲＣＭ８ｘ１０を用い、ラジアルパッ
ク（８φ× １００ｍｍ）にツバパックＣ，８（ＯＤ３４μｍ）を充
填した［共に商品名、ウ ォーターズ社製（米国〉コ。

？８ｆｉ液：メタノール１０．２Ｍ酢酸アンモニウム緩
衝液（ｐＨ７，０）＝７　：　３ サンプル量：１ｍｇ／回 流　量：３．０ｍβ／分 保持時間３分から４３分の画分を分取し、減圧下で濃縮
後、凍結乾燥させることにより白色粉末を４０ｍｇ得た
。これを１規定塩酸２０ｍＪＩＬに溶解し、酢酸エチル
各６０ｍβを用い３回抽出を行なった。有機層を合わせ
飽和食塩水で洗浄後、硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧
上溶媒を留去することにより、ＫＳ−５０５の白色粉末
を３３ｍｇ得た。

なお、精製工程中のＫＳ−５０５の検出は、蛍光剤入り
のシリカゲルプレート［シリカゲル６０Ｆ２１Ｉ４プレ
ート、アルド５７１５（メルク社製）］　とクロロホル
ム／メタノール／エタノール／水（１０：　４　：　４
　：　２）の溶媒系とを用いて薄層クロマトグラフィー
を行なった後、２５４ｎｍの紫外線を照射することによ
り行なった。

肛胛曳力Ｉ ＫＳ−５０５誘導体は、サイクリックヌクレオチドホス
ホジェステラーゼを阻害することから、強心剤、血管拡
張剤として有用であり、またサイクリックアデノシン−
３°、５°−モノリン酸やサイクリックグアノシン−３
°、５°−モノリン酸の研究用試薬としても有用である
。

特許出願人　協和醗酵工業株式会社

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. （１）式（ I ）で表されるＫＳ−５０５誘導体。 ▲数式、化学式、表等があります▼（ I ） ［式中、Ｒ＾１は水素原子又はメチル基を表し、Ｒ＾２
   は水素原子又は式（II）の化合物を表す。 ▲数式、化学式、表等があります▼（II） Ｘ、Ｙ、Ｚは、ＸがＯＣＨ＿３のときＹとＺとは一体に
   なって＝Ｏを表し、ＺがＯＣＨ＿３のときＸとＹとは一
   体になって−Ｏ−を表す。ただしＲ＾１が水素原子のと
   きはＲ＾２は水素原子を表す］