JPH0361644B2

JPH0361644B2 -

Info

Publication number: JPH0361644B2
Application number: JP5533384A
Authority: JP
Inventors: Nobutaka Takahashi; Kenichi Asahi; Tomoko Takuma
Original assignee: RIKEN Institute of Physical and Chemical Research
Current assignee: RIKEN Institute of Physical and Chemical Research
Priority date: 1984-03-23
Filing date: 1984-03-23
Publication date: 1991-09-20
Also published as: JPS60199817A

Description

【発明の詳細な説明】

本発明は、アピゲニン及びモノグリセライドを
有効成分として含有することを特徴とする制癌剤
に関するものである。従来、癌化学療法剤として、アルキル化剤（ナ
イトロジエンマスタード類、エチレンイミン類、
スルホン酸エステル類）、代謝拮抗物質（葉酸拮
抗剤、プリン拮抗剤、ピリミジン拮抗剤）、植物
性核分裂毒（コルセミド、ビンブラスチン等）、
抗生物質（ザルコマイシン、カルチノフイリン、
マイトマイシン等）、ホルモン類（副腎ステロイ
ド、男性ホルモン、女性ホルモン）及びポルフイ
リン錯酸（マーフイリン、copp）等が用いられ
ている。しかしながら、その殆んどは、細胞毒型
の物質であり、重大な副作用を呈するため、低毒
性で優れた制癌活性を有する制癌剤の開発が強く
望まれている。そこで、本発明者らは、上記の趣旨に鑑み、低
毒性で制癌活性を有する物質について探索、鋭意
研究の結果、前記化合物が動物の腫瘍細胞に対し
て分化誘導活性を有することを新たに見出し、且
つ該物質が著しく低毒性で、優れた制癌活性を有
することの新たな知見を得て、本発明の制癌剤を
完成するに至つた。本発明の制癌剤の有効成分
は、人、家畜、犬、猫等の混血動物に対する優れ
た癌化学療法剤となり得るものである。本発明の有効成分である化合物としては、例え
ば、次の化合物を挙げることができる。アピゲニンは、フラボノイド化合物に属し、次
式で表される。又、他方の有効成分であるモノグリセライドは
次式で表される。（ただし、式中、R₁₀は炭素数10〜30の脂肪酸
残基を示す。）その具体例としては、次の化合物を挙げること
ができる。グリセリンモノオレート（glycerine
monooleate）（R₁₀＝オレイン酸）グリセリンモノリノレート（glycerine
monolinolate）（R₁₀＝リノレン酸）本発明の制癌剤は、経口及び非経口投与のいず
れも使用可能であり、経口投与する場合は、軟・
硬カプセル剤又は錠剤、顆粒剤、細粒剤、散剤と
して投与され、非経口投与する場合は、水溶性懸
濁液、油性製剤などの皮下或いは静脈注射剤、点
滴剤及び固体状又は懸濁粘稠液状として持続的な
粘膜吸収が維持できるように坐薬のような剤型で
投与され得る。本発明の有効成分の製剤化は、界面活性剤、賦
形剤、滑沢剤、佐剤、及び必要に応じて腸溶性製
剤とするために医薬的に許容し得る皮膜形成物
質、コーテイング助剤等を用いて適宜行うことが
でき、その具体例を挙げれば、次のとおりであ
る。本発明の組成物の崩壊、溶出を良好ならしめる
ために、界面活性剤、例えばアルコール、エステ
ル類、ポリエチレングリコール誘導体、ソルビタ
ンの脂肪酸エステル類、硫酸化脂肪アルコール類
等の１種又は２種以上を添加することができる。また、賦形剤として、例えば蔗糖、乳糖、デン
プン、結晶セルロース、マンニツト、軽質無水珪
酸、アルミン酸マグネシウム、メタ珪酸アルミン
酸マグネシウム、合成珪酸アルミニウム、炭酸カ
ルシウム、炭酸水素ナトリウム、リン酸水素カル
シウム、カルボキシメチルセルロースカルシウム
等の１種又は２種以上を組合せて添加することが
できる。滑沢剤としては、例えばステアリン剤マグネシ
ウム、タルク、硬化油等を１種又は２種以上添加
することができ、また矯味剤及び矯臭剤として、
食塩、サツカリン、糖、マンニツト、オレンジ油
カンゾウエキス、クエン酸、ブドウ糖、メントー
ル、ユーカリ油、リンゴ酸等の甘味剤、香料、着
色料、保存料等を含有させてもよい。懸濁剤、湿潤剤の如き佐剤としては、例えばコ
コナツト油、オリーブ油、ゴマ油、落下生油、乳
酸カルシウム、ベニバナ油、大豆リン脂質等を含
有させることができる。また皮膜形成物質としては、セルロース、糖類
等の炭水化物誘導体として酢酸フタル酸セルロー
ス（CAP）、またアクリル酸系共重合体、二塩基
酸モノエステル類等のポリビニル誘導体としてア
クリル酸メチル・メタアクリル酸共重合体、メタ
アクリル酸メチル・メタアクリル酸共重合体が挙
げられる。また、上記皮膜形成物質をコーテイングするに
際し、通常使用されるコーテイング助剤、例えば
可塑剤の他、コーテイング操作時の薬剤相互の付
着防止のための各種添加剤を添加することによつ
て皮膜形成剤の性質を改良したり、コーテイング
操作をより容易ならしめることができる。なお、
有効成分を皮膜形成物質を用いてマイクロカプセ
ル化してから賦形剤等と混合した剤型としても良
い。特に代表的な剤型における配合比は下記の通り
である。なお、本発明の有効成分の混合比は、アピゲニ
ン：モノグリセライド＝１：25〜５：１が適当で
ある。

【表】特に好ましい賦形剤は、乳糖、結晶セルロー
ズ、カルボキシメチルセルロースカルシウムであ
る。また、投与量は、対象腫瘍を有効に治療するに
十分な量であり、腫瘍の症状、投与経路、剤型な
どによつて左右されるが、一般に、経口投与の場
合、大人では１日当り、約0.01〜100mg／Kg体重
（小人では、0.01〜60mg／Kg体重）の範囲で、そ
の上限は好ましくは約50mg／Kg体重、更に好まし
くは約10mg／Kg体重程度であり、非経口投与の場
合、その上限は約10mg／Kg体重程度であり、好ま
しくは５mg／Kg体重、更に好ましくは２mg／Kg体
重が適当である。次に、本発明の化合物の制癌活性を確認した制
癌性試験について述べる。〇フレンド白血病細胞（mouse erythroid
leukemia cell，B8細胞）に対する試験 GIBCO製HAMのＦ−12培地に、15％の牛胎
児血清及び60mg／のカナマイシンを加えたもの
に、25×10⁴cell／mlとなるようにB8細胞を接種
し、これに所定量の被験化合物を加える（最終容
量５ml）。 7.5％CO₂中、37℃７日間培養した後、オルキ
ン（Orkin）のベンジジン染色法により染色し、
染色された細胞数、すなわち、赤血球への分化に
よりヘモグロビンを生成するようになつた細胞数
を測定し、分化誘導率を求める。分化誘導率（％）＝染色された細胞数／全細胞数×10
0 なお、後述の試験例では、分化誘導作用をもつ
て、制癌活性を示した。以下に、本発明を製剤例及び試験例によつて具
体的に説明する。製剤例１（注射・点滴剤）アピゲニン５mg及びグリセリンモノオレート５
mgを含有するように粉末ぶどう糖５ｇを加えてバ
イアルに無菌的に分配し、密封した上、窒素、ヘ
リウム等の不活性ガスを封入して冷暗所に保存す
る。使用前にエタノールに溶解し、0.85％生理的
食塩水100mlを添加して静脈内注射剤とし、１日、
10〜100mlを症状に応じて静脈内注射剤又は点滴
で投与する。製剤例２（注射・点滴剤）アピゲニン５mg及びグリセリンモノリノレート
５mgを用いて、製剤例１と同様の方法により軽症
用静脈内注射剤とし、１日、10〜100mlを症状に
応じて静脈内注射剤又は点滴で投与する。製剤例３（腸溶性カプセル剤）アピゲニン2.5ｇ、グリセリンモノオレート2.5
ｇ、乳糖2.46ｇ及びヒドロキシプロピルセルロー
ス0.04ｇを各々とり、よく混合した後、常法に従
つて粒状に成形し、これをよく乾燥して篩別して
ピン、ヒートシール包装などに適した顆粒剤を製
造する。次に、酢酸フタル酸セルロース0.5ｇ及
びヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレー
ト0.5ｇを溶解して被覆基材となし、前記顆粒を
浮遊流動させつつこの基材を被覆して腸溶性の顆
粒剤とする。この組成物をカプセルに充填して腸
溶性カプセル製剤100個を製造する。試験例アピゲニンをピリジンに溶解し、１〜125μg／
mlの濃度範囲で使用し、モノグリセライドは、モ
ノオレート及びモノリノレートを、それぞれそれ
単独では細胞の分化に対し影響を与えない濃度
（25μg／ml）で使用し、前記試験法により、赤血
球性白血病細胞に対する分化誘導活性を調べた。
その結果、第１図，第２図，第３図及び第４図の
如き結果が得られた。これを詳述すると、B8細胞におけるアピゲニ
ン（Api）とモノグリセライド（グリセリンモノ
オレート：MO，グリセリンモノリノレート：
ML）の分化に対する効果（第１図）では、モノ
グリセライド併用の方がApi単独の場合よりも1/
２〜1/4のApiの濃度で同等の分化誘導活性を示し
た。又併用することによつて細胞増殖の阻害が緩
和された。第２図は、Apiの増加に伴つて、B8細胞の増殖
が抑えられていることが分る。又Api16μg／mlを用い、MO，MLを添加
（25μg／ml）したものの経時変化を調べた。第３
図は、B8細胞の経時変化、又第４図は、ベンチ
ジン・ポジテイブ・セルの割合、すなわち分化誘
導率を示すものである。この結果、ポジテイブ・コントロールの
DMSO（ジメチルスルホキシド）による分化誘導
が、細胞増殖の静止期に入る４日目からみられる
のに対し、アピゲニンによる分化誘導は、２日目
よりみられ、さらに、本発明のアピゲニンとモノ
グリセライド併用群では、３日目以降大きくあが
り、アピゲニン単独のものに対し、極めて顕著な
差を示していることが解つた。上記試験例の結果から明らかなように、本発明
の有効成分の混合有効成分化合物は、癌細胞に対
して、正常細胞への分化誘導作用を示すことか
ら、毒性の少ない優れた制癌活性を示すことが立
証された。

【図面の簡単な説明】

第１図は、本発明の有効成分であるアピゲニン
とモノグリセライド（グリセリンモノオレート，
グリセリンモノリノレート）の分化誘導に対する
効果を示す図であり、第２図は、B8細胞に対す
る増殖抑制効果を示す図であり、第３図及び第４
図は、それぞれ細胞増殖抑制及び分化誘導に対す
る効果を示す図である。

Claims

【特許請求の範囲】１アピゲニン及びモノグリセライドを有効成分
として含有することを特徴とする制癌剤。２非経口投与形態による特許請求の範囲第１項
記載の制癌剤。３経口投与形態による特許請求の範囲第１項記
載の制癌剤。