JPS62270544A - ジヒドロカルコン化合物及び制癌剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 （技術分野） 本発明は、新規なジヒドロカルコン化合物及び該化合物
を有効成分として含有する制癌剤に関する。

（発明の背景） 従来、癌化学療法剤として、アルキル化剤（ナイトロン
エンマスタード類、エチレンイミン類、スルホン酸エス
テル類）、代謝拮抗物質（葉酸拮抗剤、プリン拮抗剤、
ピリミジン拮抗剤）、植物性核分裂前（コルヤミド、ビ
ンブラスチン等）、抗生物質（ザルコマイシン、カルチ
ノフイリン、マイトマイシン等）、ホルモン類（副腎ス
テロイド、男性ホルモン、女性ホルモン）及びポルフィ
リン錯塩くマーフィリン、Ｃ０ＰＰ）等が用いられてい
る。しかしながら、その殆んどは、細ｌ抱毒型の物質で
あり、重大な副作用を呈するため、低毒性で優れた制癌
活性を有する制癌剤の開発が強く望まれている。

本発明者らは、１−記趣旨に鑑み、低毒性で制癌性を有
する物質を動・植物、微生物界の広い生物範囲から探索
を行ってきたが、アルトカルプス・コミュニス（八ｒｔ
ｏｃａｒｐｕｓ　ｃｏｍｍｕｎｉｓ）　（インドネシア
名Ｋ　ｕ　ｌ　ｕ　ｒ　）より抽出された新規なジヒド
ロカルコン化合物が、優れた制癌活性を有することを見
出し、本発明を完成したものである。

アルトカルプス・コミュニスは、インドネシア各地に自
生する植物であり、その集合孔の部分は古来より蚊取り
線香の代用品として用いられていたといわれている。

しかしながら、本植物の成分研究についての報告は未だ
なされていない。今回、本発明者らは、」−記アルトカ
ルプス・コミュニスの花弁の成分について、その生理活
性を探索したところ、本発明の新規なジヒドロカルコン
化合物を得、この化合物が、優れた制癌活性を示すこと
の新たな知見を碍た。

（発明の目的） 本発明の目的は、より制癌活性を有する新規なジヒドロ
カルコン化合物を抽出・単離することにある。又、本発
明の［１的は、−］−記新規なジヒドロカルコン化合物
を有効成分とする制癌剤を提供することにある。

（発明の構成） 本発明の新規なジヒドロカルコン化合物、２−ゲラニル
−３，４，２’　　、　４’　　−テトラｊニトロキシ
カルコンは、後述の物理的性質を有］７、アルキル化剤
・コミユニ又より抽出・単離される。以下、その抽出・
単離方法の一例を示す。

インドネシア・ジャワ島にて採取したアルトカルプス・
コミュニスの花の部分を９０％エタノール溶液にて数回
抽出し、減圧濃縮して粗抽出物を得る。

次いで、得られた粗抽出物を吸着クロマトグラフィーに
付し、含水メタノール、メタノール、アセトンにて順次
溶出する。メタノール溶出分画とア七トン溶出分画を合
わせ、減圧濃縮すると褐色油状物を得る。

このものは、吉川肉腫培養細胞に対して、顕著な生育阻
害作用を示す。

そこで、」１記油状物を更にシリカゲルカラムクロマト
グラフィー（溶媒：ヘキサン／酢酸エチル＝　Ｉ　Ｏ＋
　１〜（］　：　１００　＞に付し、１１の両分（ＡＣ
１〜１１）を得る。得られた各分画について、吉川肉腫
培養細胞に対する生育阻害作用を調べた。

次に、これらの分画のうち、活性が強いＡＣ−５及びＡ
、　Ｃ−６の分画を集め、更に高速液体クロマトグラフ
ィー（溶媒：ヘキサン／酢酸エチル−２：１）にて分離
すると、本発明の新規なジヒドロカルコン化合物を得る
。

本発明のジヒドロカルコン化合物は、下記の構造式及び
物理的性質を有する。

２−ゲラニル−３，４，２’、４’−テトラヒドロキシ
カルコン（２−ｇｅｒａｎｙｌ−３、４、２’　。

４　’　−ｔ、ｅｔｒａｈｙｄｒｏｘｙｃｈａｌｃｏｎ
ｅ）〔物理的性質〕 ＭＳ　：　ｍ／ｅ　４１０（Ｍ＋）、　Ｃ２５ｌＬ＋ｏ
ＯｓＩＲ（ＫＢｒ）　：　３４５０（Ｆｉｌｌ）、　１
６２０　（水素結合したＣ＝０）ｃｍ　’’　Ｉ＝ＮＭ
Ｉ（＜９０Ｈｚ、　Ｃ［１α３．δ）　＋　１．５６Ｆ
ｌｌ、　ｂｓ）、　１．６５（３Ｈ，ｂｓ）、　　１．
７８（３１１，ｂｓ）、　　２．０４（４１１，ｉｓ）
、　２．８０−３．２０（４ｔ（、ｍＬ　　：３．４０
（２１１，＋ｌ、　Ｊ＝６．６１ｉｚ）、　　４．８８
−５．３０（２１１，ｍ）、　　６．３２（］−１ｆ、
　ｄｄ、　Ｊ＝２．４．９．５１１ｚ＞。

６．３７（１１（、ｂｓ）、　　　６．６２．　６．７
３（２１Ｌ　　八Ｂｑ、　　Ｊ＝９．２１１ｚ）Ｉ３Ｃ
−ＮＭＲ（２２，５Ｍｔｌｚ、ＣＤα３．　ｅ　）　：
　１６．１（ｑ）、　１７．４（ｑ＞。

２５．４（ｑ）、　２６．３（ｔ）、　２７．７（Ｌ）
、：（９，４（ｔｗｏ　ｃａｒｂｏｎ、ｔ）。

５８．６（ｔ）、　　１．０３．４（ｄ＞、　　１０８
．１（ｄ）、　　］、］１２．９ｄ）。

１１３．３（ｓ）、　　１．．２１．旧ｄ）、　　１２
１．Ｂ（ｄ）、　　１２３．７（ｄ）。

］、２６．３（ｓ）、　　１３１．３（ｓ）、　　１．
３１．７（ｓ）、　　１３２．２（ｄ）。

１３７．７（、ｓ）、　　１４２．２（ｓ）、　　］、
］４２．４ｓ）、　　１．６３．２（Ｓ）。

１６４．８（Ｓ）、　　２０４．３（９）なお、本化合
物は、マウスに対し、５０ｍＢ／ｋｇ連続投与しても何
ら毒性を認めない。

本発明の制癌剤は、経口及び非経口投与のいずれも使用
可能であり、経口投与する場合は、軟・硬カプセル剤又
は錠剤、顆粒剤、細粒剤、散剤として投与され、非経口
投与する場合は、水溶性懸濁液、油性製剤などの皮下或
いは静脈注射剤、点滴剤及び固体状又は懸濁粘稠液状と
して持続的な粘膜吸収が維持できるように生薬のような
剤型で投与され得る。

本発明の有効成分の製剤化は、界面活性剤、賦形剤、滑
沢剤、佐剤、及び必要に応じて腸溶性製剤とするために
医薬的に許容し得る被膜形成物質、コーティング助剤等
を用いて適宜行うことができ、その具体例を挙げれば、
次のとおりである。

本発明の組成物の崩壊、溶出を良好ならしめるために、
界面活性剤、例えばアルコール、エステル類、ポリエチ
レングリコール誘導体、ソルビタンの脂肪酸エステル類
、硫酸化脂肪アルコール類等の１種又は２種以上を添加
することができる。

また、賦形剤として、例えば蔗糖、乳糖、デンプン、結
晶セルロース、マンニット、軽質無水珪酸、アルミン酸
マグネシウム、メタ珪酸アルミン酸マグネシウム、合成
珪酸アルミニウム、炭酸カルシウム、炭酸水素ナトリウ
ム、リン酸水素カルシウム、カルボキシメチルセルロー
スカルシウム等の１種又は２種以」−を組合せて添加す
ることができる。

滑沢剤としては、例えばステアリン酸マグネシウム、ク
ルク、硬化油等を１種又は２種以上添加することができ
、また矯味剤及び矯臭剤として、食塩、サッカリン、糖
、マンニット、オレンジ油カンソ′ウニキス、クエン酸
、ブドウ糖、メントール、ユーカリ油、リンゴ酸等の１
才味剤、香料、着色料、保存料等を含有させてもよい。

懸濁剤、潤滑剤の如き佐剤としては、例えばココナツト
油、オリーブ油、ゴマ油、落花生油、乳酸カルシウム、
ベニバナ油、大豆リン脂質等を含有させることができる
。

また被膜形成物質としては、セルロース、糖類等の炭水
化物誘導体として酢酸フタル酸セルロース（ＣＰＡ）、
またアクリル酸系共重合体、二基基酸モノエステル類等
のポリビニル誘導体としてアクリル酸メチル・メタアク
リル酸共重合体、メタアクリル酸メチル・メタアクリル
酸共重合体が挙げられる。

また、上記皮膜形成物質をコーティングするに際し、通
常使用されるコーティング助剤、例えば可塑剤の他、コ
ーティング操作時の薬剤相互の付着防止のだめの各種添
加剤を添加することによって皮膜形成剤の性質を改良し
たり、コーティング操作をより容易ならしめることがで
きる。なお、有効成分を皮膜形成物質を用いてマイクロ
カプセル化してから賦形剤等を混合した剤型としても良
い。

次に代表的な剤型における配合比は下記の通りである。

有　効　成分　０．１〜９０　　重量％　０．３〜１５
　　重量％賦　　形　　剤　　１０〜９９．８　　　ノ
ア８５〜９９．４　　　ｌｌ滑　　沢　　剤　　　θ〜
５０　　　〃　　　　　０〜２０１１界面活性剤　　　
Ｏ〜５０〃０〜２０１１皮膜形成物質　０．１〜５Ｑ　
　　／／　　　Ｑ、３〜２ｏ〃特に好ましい賦形剤は、
乳糖、結晶セルローズ、カルボキシメチルセルロースカ
ルシウムである。

また、投与量は、対象師瘍を有効に治療するに十分な景
であり、腫瘍の症状、投与経路、剤型などによって左右
されるが、一般に、経口投与の場合、大人では１１１当
り、約０．０１〜１．００ｍｇ／ｋｇ体重く小人では０
．０１〜６０ｎ＋ｇ／　ｋｇ体重）の範囲で、その上限
は好ましくは約５０ｍｇ／ｋｇ体重、更に好ましくは約
１（１ｍｇ／ｋｇ体重程度であり、非経口投与の場合、
その１ユ限は約］、Ｏｍｇ／ｋｇ体重程度であり、好ま
しくは５ｍｇ／ｋｇ体重、更に好ましくは２ｍｇ／ｋｇ
体重が適当である。

次に、本発明化合物の制癌活性を確認した制癌性試験法
について述べる。

１５％の子牛血清を含有するＭＥＭ培地（ニッスイ製）
に、ラットの腹水から取り出した書出肉腫細胞（Ｙｏｓ
ｉｄａ　ｓａｒｃｏｍａ　ｃｅｌｌｓ）を接種して培養
し、細胞数が約］　ＯＸ　１０５ｃｅｌｌｓ／ｍｉ’に
なった時点で」１記培地で５倍に希釈（２０Ｘ　１０’
ｃｅｌｌｓ／ｍｌ）し、ｉ、　ｍｌ！づつバイアルビン
に分注する。次いで、各濃度の本発明化合物のメタノー
ル又はアセトン溶液を加え、ゴム栓をして３７℃で培養
し約３日後にトリパンブルーにて染色後、生細胞数を４
測する。供試細胞増殖の抑制率は、次式により求めた。

以下に本発明を実施例、製剤例及び試験例によって具体
的に説明する、。

実施例 インドネシア産薬用植物アルトカルプス・コミュニスの
花の部分約５００ｇを９０％エタノールで数回抽出し、
抽出液を減圧濃縮して油状物質約２０ｇを得る。次いで
、この油状物質を旧ａｉｏｎ１−Ｉ　Ｐ　−２０を充填
したカラムクロマトグラフィーに付し、４０％含水メタ
ノール、６０％含水メタノール、８０％含水メタノール
、メタノール及びアセトンにて順次溶出する。次にメタ
ノール溶出分画とアセトン溶出分画を合せ、減圧濃縮す
ることにより１５．７　ｇの褐色油状物を得る。このも
のは、吉川肉腫培養細胞に対して顕著な阻害作用を示す
。

次いで、」−配油状物を、更にシリカゲルカラムクロマ
トグラフィー（溶媒：ヘキサン／酢酸エチル−１０：１
〜Ｏ：　１００、メタノール）に付し、１１の分画（Ａ
Ｃ−Ｉ　：　２．Ｏｇ、　ＡＣ−２：　０．６ｇ１ΔＣ
−３：０．８ｇ、ＡＣ−４＋０．３ｇ５ＡＣ−５：１．
０ｇ、ＡＣ−６：３．Ｏｇ、ＡＣ−７：０、３　ｇ　、
ＡＣ−８：２１ｇ、ＡＣ−９：０．２ｇ。

ＡＣ−１，０：　３．　Ｏｇ、ＡＣ−１１＋１．０ｇ＞
を得る。

得られた各分画について、吉川肉腫培養細胞に対する生
育阻害作用を調べ、これらの分画のうち、活性が特に強
かったＡ　Ｃ−５及びＡＣ，６の分画（ヘキサン：酢酸
エチル−５：２）を更に高速液体り０７トグラフイー（
ＮＩＩｃ１ｅｏｓ１１５０−５、溶媒；ヘキサン：酢酸
エチル−２：１、流速９ｍＺ／１　ン 分）にて分画し、保持時間２８分付近のピークを分取し
、濃縮することにより２−ゲラニル−３゜／ｌ、２’　
　、／ｌ’　　−テトラヒドロキシカルコン（９５０ｍ
ｇ＞を得た。

製剤例１（注射・点滴剤） 本発明化合物１０ｍｇを含有するように粉末ぶどう糖５
ｇを加えてバイアルに無菌的に分配し、密封した」二、
窒素、ヘリウム等の不活性ガスを封入して冷暗所に保存
した。使用前にエタノールに溶解し、０．８５％生理的
食塩水１００ｍ１を添加して静脈内注射剤とし、１日、
１０〜１００ｍ１！を症状に応じて静脈内注射又は点滴
で投与する。

製剤例２（注射・点滴剤） 本発明化合物２ｍｇを用いて、製剤例１と同様の方法に
より軽症用静脈内注射剤とし、１日、１０〜１００−を
症状に応じて静脈内注射又は点滴で投与する。

製剤例３（腸溶性カプセル剤） 本発明化合物５ｇ、乳糖２．４６　ｇ及びヒドロキシプ
ロピルセルロース０．０４　ｇを各々とり、ヨ＜混合し
た後、常法に従って粒状に成形し、これをよく乾燥して
篩別してビン、ヒートシール包装などに適した顆粒剤を
製造した。次に、酢酸フタル酸セルロース０．５　ｇ及
びヒドロキシプロピルセルロースフクレート０，５ｇを
溶解して被覆基材となし、前記顆粒を浮遊流動させつつ
この基材を被覆して腸溶性の顆粒材とした。この組成物
をカプセルに充填して腸溶性カブセル製剤１００個を製
造する。

試験例（制癌活性試験） 本発明化合物を用い、前記試験法により吉川肉腫細胞の
増殖抑制率（％）を算出したところ、第１表に示す結果
が得られた。

第　　１　　表 １ｒ＋ 手続補正書 特許庁長官　宇　賀　道　部　殿 ３、補正をする者 事件との関係　　　出願人 名称　（６７９）理化学研究所 ４、代理人 ５、補正命令の日付　　自　　発 ６、補正の対象　　　　明細書の特許請求の範囲の欄お
よび発明の詳細な説明の欄 １、特許請求の範囲を別紙のとおり訂正する。

２、　明細書第６真下から１行目の式を次のとおり訂正
する。

特許請求の範囲 （］）　　構造式： で示されるジヒドロカルコン化合物。

（２）構造式：

Claims (2)

【特許請求の範囲】
1. （１）構造式： ▲数式、化学式、表等があります▼ で示されるジヒドロカルコン化合物。
2. （２）構造式： ▲数式、化学式、表等があります▼ で示されるジヒドロカルコン化合物を有効成分とする制
   癌剤。