JPH03198783A

JPH03198783A - 新規抗生物質ｓｆ２６９５ａ物質およびｓｆ２６９５ｂ物質ならびにその製造法

Info

Publication number: JPH03198783A
Application number: JP1336290A
Authority: JP
Inventors: Shuichi Gomi; 修一五味; Hiromi Watabe; 渡部　宏臣; Junko Yoshida; 吉田　順子; Yoshiyo Ajito; 味戸　佳代; Shinji Miyaji; 宮道　慎二; Masao Koyama; 小山　正夫
Original assignee: Meiji Seika Kaisha Ltd
Current assignee: Meiji Seika Kaisha Ltd
Priority date: 1989-12-27
Filing date: 1989-12-27
Publication date: 1991-08-29
Anticipated expiration: 2009-05-02
Also published as: JPH0633301B2

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】［産業上の利用分野ｊ本発明は新規抗生物質ＳＦ２６９５Ａ物質およびＳＦ２
６９５Ｂ物質ならびにその製造法に関する。

［従来の技術１本発明による抗生物質ＳＦ２６９５Ａ物質およびＳＦ２
６９５Ｂ物質と理化学的性状が類似する化合物として、
アルボフンギン（ａｌｂｏｆｕｎｇｉｎ）　Ｂよびクロ
ロアルボフンギン（ｃｈｌｏｒｏａｌｂｏｆｕｎｇｉｎ
）［Ｇｕｒｅｖｉｃｈら、　Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ　
Ｌｅｔｔ、　　１９７２　：　１７５１−１７５４、１
９７２コ、リゾリビンエおよびＸ　（Ｉｙｓｏｌｉｌ）
ｉｎ　ｌ　ａｎｄ　Ｘ）　　［Ｄｒａｕｔｚら、　　Ａ
ｒｃｈ、　Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ、　　１０６：１７５〜
１９０．１９７５］　、セルヒノマインンＡ１およびＡ
２　　（ｃｅｒｖｉｎｏｍｙｃｉｎ　Ａｌ　ａｎｄ　Ａ
２）　　［ＯｍｕｒａらＪ、Ａｍ、Ｃｈｅｍ、Ｓｏｃ、
１０８　：　６０８８−６０８９．１９８６］ＬＬ−Ｄ
４２０６７　ａおよびβ　［Ｌｅｅら、　Ｐｒｏｇｒａ
ｍ　ａｎｄ　Ａｂｓｔｒａｃｔｓ　　ｏｆ　　ｔｈｅ　
　２６ｔｈ　　Ｉｎｔｅｒｓｃｉ、Ｃｏｎｆ、ｏｎ　　
Ａｎｔｉｍｉｃｒａｂ、Ａｇｅｎｔｓ　　Ｃｈｅｍｏｔ
ｈｅｒ、、Ｎｏ、２２２．ｐ、１３６．ＮｅｗＯｒｌｅ
ａｎｓ、　５ｅｐｔ、　２８−Ｏｃｔ、　１．１９８６
］　、　４１８１−ＡおよびＢ　［０ｔａｎｉら、　Ｊ
、　Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ　４１　：　２７５−２８
１１９８８１　、アクチップラノン（ａｃｔｉｎｏｐｌ
ａｎｏｎｅｓ）［Ｋｏｂａｙａｓｈｉ　ら　、　　Ｊ、
　　Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ　　４１　　二　５０２−
５１１゜７４１−７５０．　１９８８］　　、　　ＬＬ
−Ｅ１９０８５α［Ｍａｉｅｓｅら、Ｊ。

Ａｒ＋ｔｉｂｉｏｔｉｃｓ　４２　：　８４６−８５１
．１９８９］等が知られているが、抗生物質ＳＦ２６９
５Ａ物質およびＳＦ２６９５Ｂ物質はこれらの物質とは
理化学的性状が異なり明確に区別される。

［発明が解決しようとする課題］従来、微生物が生産する種々の抗生物質が知られている
が、臨床において有用な抗腫瘍性抗生物質はそれ程多く
見出されていないため、新規な抗腫瘍性抗生物質の出現
が常に要望されている。本発明の目的は、新規抗腫瘍性
抗生物質ＳＦ２６９５Ａ物質およびＳＦ２６９５Ｂ物質
ならびにその製造法を提供することにある。

［課題を解決するための手段１第１と第２の本発明の要旨とするところは、新規抗生物
質ＳＦ２６９５Ａ物質およびＳＦ２６９５Ｂ物質および
それらの塩にある。本発明によるＳＦ２６９５Ａ物質お
よびＳＦ２６９５Ｂ物質の理化学的および生物学的性状
は１次の通りである。

１．ＳＦ２６９５Ａ物質の理化学的性状（１）色および
形状：黄色粉末（２）元素分析：Ｃ３６Ｈ３５ＮＯ１３，・０．５　Ｈ
２Ｏとして実測値Ｃ６１，８０％、　ＨＬ、９８％。

Ｎ　１．９８％計算値Ｃ６１，８９％、　８５．１９％Ｎ　２．００％（３）マススペクトル（ＦＤ−ＭＳ）　＋　ｍ／ｚ　６
８９（Ｍ　）（４）融点　　＝２１８〜２２２℃（分解
）（５）比旋光度：〔α〕８４−−９４．９°（ｃ　Ｏ
，５，ＣＨＣｌ２３）４（６）紫外部および可視部吸収スペクトルλ。８゜。。

（Ｅ１％。）［ＭｅＯＨ］　　＋　２１１（８９９）、　２３７（５
８５）２４５（ｓｈ　５４２）、　２６３（５０８）。

２９２（ｓｈ　２４８）、　３１７（ｓｈ　１７８’）
。

３３５（ｓｈ　１３４）、　３９９（１１５）［０，１
Ｎ　ＨＣＩ−ＭｅＯ旧　：　２１０（８８０）、　２３
９（５７４）。

２４７（ｓｈ　５４７）、　２６２（５４７）。

２９３（２５５）、　３１７（ｓｈ　１８３）。

３３５（ｓｈ　１４２）、　３９８（１１７）［０，Ｉ
Ｎ　ＮａＯＨ−ＭｅＯＨ］　　＋　２１３（１２３１）
、　２３３（ｓｈ　７２７）。

２７０（３７６）、２９２（ｓｈ　２２８）３４７（１
５５）、　４１４（１６９）（７）赤外部吸収スペクト
ル１（ＫＢｒ　ｃｍ　　）　：　３４３０，２９１０，２８
２０，１６５５，１６３０゜１６１０．１５５０．１４
８０，１４４５，１４００１３７０．１３５５，１３３
０，１３２０，１２８５１２４５．１１９５，１１６５
．１１４５１１２０１０９５．１０８０，１０６０，１
０２０，１０００゜９８０、９３０．．８６０．８２５
．８００゜（８）’Ｈ（９）１３Ｃ７５５，７４ＯＮＭＲスペクトル（４００ＭＨ２，ＣＤＣＱ３）δ（ｐ
ｐｍ）：　１．９４（ＩＨ，ｄｄｄ）、２．１９（ＩＨ
，ｄｄｄ）。

２．２５（３Ｈ，ｓ）、２．２５（ＬＨ，ｍ）。

２．４８（ＩＨ，ｂｒ　ｄｄｄ）、　　２．．５６（Ｉ
Ｈ。

ｄ）、　　２．５７（ＩＨ，ｂｒ　ｄ）、２．８０（Ｉ
Ｈ。

ｄｄ）、　　３．０８（ＩＨ，ａｄ）、　　３．３１（
３Ｈ。

ｓ）、　　３．４８（ＬＨ，ｄｄｄ）、　　３．５０（
３Ｈ。

ｓ）、　　３．５１（３Ｈ，ｓ）、４．６６（ＬＨ，ｄ
）。

４−７４（ＬＨ，ｄｄ）、４．８０（ＬＨ，ｂｒ　ｓ）
。

５．００（ＬＨ，ｂｒ　ｄｄ）、５．１２（ＩＨ。

ａｄｄｄ）、　　５．２１（ｉＨ，ｄ）、５．５１（Ｉ
Ｈ。

ｄ）、　　６．７６（ＩＨ，ｄｄ）、　　７．０１（Ｌ
Ｈ。

ｂｒ　ｓ）、７．３１（ＩＨ，ｂｒ　ｄ）。

７．６２（１１（、ｄｄ）、　　１０．９１（１１（、
ｓ）。

１ｌ−９１（ＬＨ，ｓ）、　　１３．０７（ＬＨ，ｓ）
ＮＭＲスペクトル（１００ＭＨｚ、　ＣＤＣｆｆ３）δ
（ｐｐｍ）　：　１９８．３　ｓ、　　１６９．７　ｓ
、　　１６８．４　ｓ。

１６０．２　ｓ、　　１５８．２　ｓ、　　１５２−４
　ｓ。

１４７−７　ｓ、　　１４１．Ｏｓ、　　１３９．３　
ｓ。

１３６．７　　ｄ、１３３−３　　ｓ、１３１．９　　
ｓ。

１２７．３　ｄ、１２６．６　　ｓ、１１９．０　　ｓ
。

１１８．５　ｄ、１１５．Ｏｄ、１１１．３　　ｓ。

１１０．３　　ｓ、１０８．３　　ｓ、１０６．７　ｓ
。

９２．１　　ｄ、　　９０．８　　ｔ、　　７６．９　
ｄ。

７５．１　　ｄ、　　７２．９　ｄ、　　６９．６　　
ｄ。

６７．８　　ｄ　　　５８．１　　ｑ、　　５７．Ｏｑ
。

４３．７　ｄ、　　３６．５　　ｔ、　　３６．４　ｑ
。

３１、Ｏｔ、　　２８．５　　ｔ、　　１５．６　ｑ（
１０）溶解性：クロロホルム、アセトン、酢酸エチルに
溶け易く、メタノール、ヘキサンに溶け難く、水に溶けない。

（１１）塩基性、酸性、中性の区別：弱酸性物質２．Ｓ
Ｆ２６９５Ｂ物質の理化学的性状（１）色および形状：
黄色粉末（２）元素分析：　Ｃ３５Ｈ３３ＮＯ１３’　０−５　
Ｈ２０トシテ実測値Ｃ６０，９８％、　Ｈ４，７６％。

Ｎ　　２．０２％計算値Ｃ６１，４０％、　Ｈ５，０１％。

− Ｎ　　２．０５％（３）マススペクトル（ＦＤ−ＭＳ）　：　ｍ／ｚ　６
７５（Ｍ　）（４）融点　　＝２１５〜２１８℃（分解
）（５）比旋光度：　Ｃａ　）：４＝　　１０６．７°
（ｃ　Ｏ，５，ＣＩ（Ｃ（２ａ）（６）紫外部および可
視部吸収スペクトルλｍａｘｎｍ（Ｅ凰）［ＭｅＯＨ］　　：　２１１（９１６）、　２３８（５
９８）。

２４５（ｓｈ　５４０）、　２６３（５１１）。

２９６（２４５）、　３１６（ｓｈ　１７９）。

３３７（ｓｈ　１２６）、　３９９（１１７）［０，１
Ｎ　ＨＣＩ−ＭｅＯＨ］　　：　２１１（８９１）、　
２３８（５９５）。

２４８（ｓｈ　５５９）、　２６２（５６０）。

２９５（２５５）、　３１７（ｓｈ　１８２）。

３３５（ｓｈ　１４０）、　３９７（１２０）［０，１
Ｎ　ＮａＯＨ−ＭｅＯＨ］　　：　２１５（１３０１）
、　２３３（ｓｈ　７３４）。

２７０（３６７）、　２９３（ｓｈ　２１４）。

３４６（１７０）、　４１４（１７２）（７）赤外部吸
収スペクトル（ＫＢｒ　ｃｍ’）　　：　３３８０，２９２０，２８
２０．１６４５．１６３０゜１５５５．１４８０，１４
５０，１４００，１３７５゜８− （８）’Ｈ１３６０，１３３５，１３２０，１２９０，１２５０゜
１２１０．１１７０，１１５５，１０９０，１０５０゜
１０２０．１００５．　９８０．　９１５．　８６５゜
８３０．７９５，７６０，７０ＯＮＭＲスペクトル（，４００ＭＨｚ、　ＣＤＣＱ３）δ
（ｐｐｍ）　：　１．９６（ＬＨ，ｄｄｄ）、　２．２
０（ＩＨ。

ｄｄｄ）、　　２．２６（３Ｈ，ｓ）、　　２−２６（
ＬＨ，ｍ）、　２．４９（ＬＨ，ｂｒ　ｄｄｄ）。

２．５９（Ｉｎ、ａａａ）、　　２．６３（ＬＨ，ａ）
。

２．８３（ＩＨ，ｄｄ）、　３．１２（ＬＨ，ｄｄ）。

３．４３（３Ｈ，ｓ）、　　３．４９（ＬＨ，ｄｄｄ）
。

３．５１（３Ｈ，ｓ）、　４．６４（ＩＨ，ｄｄ）。

４．７６（ｉＨ，ｄｄ）、　４．８３（ＩＨ，ａｄ）。

５．００（ＩＨ，ｄｄｄ）、　５．１５（ＩＨ。

ｄｄａｄ）、　　５．２３（Ｉｎ、ｄ）、　　５．５３
（ＬＨ，ｄ）、６．７６（ＩＨ，ｄｄ）、　７．０９（
ＩＨ，ｂｒ　ｓ）、　７．２６（ＬＨ，ｂｒ　ｄ）。

７．３２（ＩＨ，ｂｒ　ｄ）、７．６３（ＩＨ，ｂｒｄ
ｄ）、　　１０．９２（ＩＨ，ｓ）、　　１１．９５（
ＬＨ，ｓ）、　１２−６６（ｌＨ，ｓ）９− １０− アルカリ金属塩、カルシウム塩の如きアルカリ土δ（ｐ
ｐｍ）：１９８．４　ｓ、１６９．７　ｓ、１６９．５
　ｓ。

１６０．２　ｓ、１５８．６　ｓ、１５２．５　ｓ。

１４７．８　ｓ、１４１９　ｓ、１３９．９　ｓ。

１３６．７　ｄ、１３３．３　　ｓ、１３２．０　ｓ。

１２７．４　ｄ、１２６．７　　ｓ、１１９．１　　ｓ
。

１１８．６　ｄ、１１５．８　　ｄ、１１１．４　　ｓ
。

１１０．１　　ｓ、１０７．９　　ｓ、１０６．７　ｓ
。

９０．９　ｔ、　　８４．Ｏｄ、　　７７、Ｏｄ。

７５．１　　ｄ、　　７２．９　　ｄ、　　６９．６　
ｄ。

６７．７　ｄ、　　５７．１　　ｑ、　　５５．６　ｑ
。

４３．８　ｄ、　　３６．６　　ｔ、　　３１．１　　
ｔ。

２８．６　　ｔ、　　１５．６　ｑ（１０）溶解性：クロロホルム、アセトン、酢酸エチル
に溶け易く、メタノール、ヘキサンに溶け難く、水に溶けない。

（１１）塩基性、酸性、中性の区別：弱酸性物質ＳＦ２
６９５Ａ物質およびＳＦ２６９５Ｂ物質の塩としては、
金属塩、特にナトリウム塩の如き類金属塩およびアンモ
ニウム塩等がある。

３．ＳＦ２６９５Ａ物質およびＳＦ２６９５Ｂ物質の生
物活性本発明によるＳＦ２６９５Ａ物質およびＳＦ２６９５Ｂ
物質のマウスリンパ性白血病Ｐ３８８細胞に対する５０
％発育阻止濃度（＋ＣＳＯ値）はＳＦ２６９５Ａ物質が
２．ｌｏｇ／ｍ（２，Ｓ　Ｆ　２６９５　Ｂ物質が２．
９ｎｇ／ｍＱであった。

本発明によるＳＦ２６９５Ａ物質およびＳＦ２６９５Ｂ
物質の各種細菌および各種マイクプラズマに対する最小
発育阻止濃度を第１表および第２表に示した。

１１− ２− 第１表第２表第３の本発明の要旨とするところは、放線菌に属する抗
生物質ＳＦ２６９５Ａ物質およびＳＦ２６９５Ｂ物質生
産菌を培養し、その培養物から抗生物質ＳＦ２６９５Ａ
物質およびＳＦ２６９５Ｂ物質あるいはそれらの何れか
一方を採取する抗生物質ＳＦ２６９５Ａ物質およびＳＦ
２６９５Ｂ物質の展進法にある。以下、ＳＦ２６９５Ａ
物質およびＳＦ２６９５Ｂ物質をＳＦ２６９５物質と呼
ぶ場合がある。

本発明に使用されるＳＦ２６９５物質生産菌の一例とし
ては、静岡系の土壌から分離されたＳＦ２６９５株があ
る。

１．ＳＦ２６９５株の菌学的性状１、形態基土菌糸は長く伸長し、良く分岐し１通常の条件下では
分断しない。試験した各種寒天培地上での気菌糸は、い
ずれも極めて僅かかあるいは全く認められなかった。イ
ースト・スターチ寒天上で僅かに着生した気菌糸にはカ
ール状ないしフック状を呈する短い胞子連鎖が観察され
た。気菌糸の１３− １４分岐は単純分岐であり、車軸分岐は見られない。

電子顕微鏡による観察では、胞子はほぼ球形で。

直径１．０〜１．５μｍの大きさを有し１表面は平滑で
通常２〜５個連鎖する。胞子のう、運動性胞子、菌核等
は観察されない。

■、各種培地上の生育状態ＳＦ２６９５株の各種培地上の生育状態は次表に示す通
りである。色の記載について（）内に示す標準はコンテ
イナー・コーポレーション・オブ０アメリカ（Ｃｏｎｔ
ａｉｎｅｒ　Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ａｍｅｒ
ｉｃａ）社製の［カラー・ハーモニー・マニュアル（Ｃ
ｏｌｏｒ　Ｈａｒｍｏｎｙ　Ｍａｎｕａｌ）　Ｊに記載
のものを用いた。観察は２８℃で１４〜２１日培養後に
行った。

１５１６− ■、生理学的性質（１）生育温度範囲：イースト・麦芽寒天において２８
〜４２℃の温度範囲で生育し。

３７℃付近で良好に生育する。

（２）ゼラチンの液化：陰性（３）スターチの加水分解：陽性（４）硝酸塩の遡性：陰性（５）脱脂乳のペプトン化：陽性脱脂乳の凝固：陽性（６）耐塩性：１．５％ＮａＣ１含有培地では生育する
が。

３％以上では殆ど生育しない。

（７）メラニン様色素の生成：陰性、ただしチロシナー
ゼは陽性 ■、炭素源の利用性（Ｌｕｅｄｅｍａｎの培地使用）（
１）利用する：Ｄ−グルコース、Ｄ−キシロース。

Ｄ−フラクトース、Ｄ−マンニトール、Ｌ−ラムノース、シュクロース、Ｌ−アラビノース、　ｍｙｏ　−イノシトール（２）利用しない：グリセロール（３）利用が疑わしい：ラフィノース ■、菌体分析ベラカー（Ｂｅａｋｅｒ）らの方法（Ａｐｐｌ、　Ｍｉ
ｃｒｏｂｉｏｌ。

１３　：　２３６，１９６５）により分析した全菌体加
水分解物中のジアミノピメリン酸はｍｅｓｏｆｆｉであ
り、糖としてはマジュロースが検出された。主たるメナ
キノンはＭＫ−９（Ｈ６）と（Ｈ８）であった。また菌
体脂肪酸としてはｉｓｏ　　１６が３６％、　ａｎｔｅ
ｉｓｏ−１７が２４％、１０メチル−１７が１３％など
であった。

以上の性状より、ＳＦ２６９５株は放線菌の中でアクチ
ノマジュラ属に属すると判定した。従って２本発明者ら
はＳＦ２６９５株をアクチノマジュラ・エスピー・Ｓ　
Ｆ　２６９５　（Ａｃｔｉｎｏｍａｄｕｒａ　ｓｐ。

ＳＦ２６９５）と命名した。なお１本菌株は工業技術院
微生物工業技術研究所に、微工研菌寄第１１１４４号（
ＦＥＲＭ　Ｐ−１１１４４）として受託されている。

Ｓ　Ｆ　２６９５株は、他の放線菌に見られるようにそ
の性状が変化し易い。例えば、この株に由来する突然変
異株（自然発生または誘発性）、形質接合体または遺伝
子組換え体であっても、ＳＦ２８６９５Ａ物質およびＳＦ２６９５Ｂ物質あるいはそれら
の何れか一方を生産するものは全て本発明に使用できる
。

２．ＳＦ２６９５物質生産菌の培養法放線菌に属するＳＦ２６９５物質生産菌を通常の微生物
が利用しうる栄養物を含有する培地で培養する。栄養源
としては、従来放線菌の培養に利用されている公知のも
のが使用できる。例えば。

炭素源としては、グルコース、水飴、デキストリン、Ｒ
粉、糖蜜、動・植物油等を使用しうる。また、窒素源と
しては、大豆粉、小麦胚芽、コーン・ステイープ・リカ
ー、綿実粕、肉エキス、ペプトン、酵母エキス、硫酸ア
ンモニウム、硝酸ナトリウム、尿素等を使用しうる。そ
の他必要に応じ。

ナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム、コ
バルト、塩素、燐酸、硫酸およびその他のイオンを生成
することができる無機塩類を添加することは有効である
。また、菌の発育を助け、ＳＦ２６９５物質の生産を促
進するような有機および無機物を適当に添加することが
できる。

培養法としては、好気的条件での培養法、特に深部培養
法が最も適している。培養に適当な温度は２８〜４５℃
であるが、多くの場合３２℃付近で培養する。ＳＦ２６
９５物質の生産は培地や培養榮件により異なるが、振盪
培養、タンク培養のいずれにおいても通常２〜１０日間
でその蓄積が最高に達する。培養中のＳＦ２６９５物質
の蓄積量が最高になった時に培養を停止し、培養液から
目的物質を単離精製する。

３．３Ｆ２６９５物質の精製法本発明によって得られるＳＦ２６９５物質の培養物から
の採取に当たっては、その性状を利用した通常の分離手
段１例えば、溶剤抽出法、イオン交換樹脂法、吸着また
は分配カラムクロマト法。

ゲルろ適法、透析法、沈澱法等を単独でまたは適宜組み
合わせて抽出精製することができる。例えば、ＳＦ２６
９５物質は、培養菌体中からはアセトン−水、メタノー
ル−水または酢酸エチル等で抽出される。また、培養液
中に蓄積されたＳＦ２６９５物質は、水と混ざらない有
機溶剤９例えば。

９− プタノール、酢酸エチル等で抽出すればＳＦ２６９５物
質は有機溶剤層に抽出される。

ＳＦ２６９５物質を更に精製するには、シリカゲル（ワ
コーゲルＣ−２００、和光純薬工業製等）、アルミナ等
の吸着剤やセファデックスＬＨ−２０（ファルマシア製
）、トヨパールＨＷ−４０（東ソー製）等を用いるクロ
マトグラフィーを行うとよい。

このようにして培養物中に生産されたＳＦ２６９５物質
は遊離の形、すなわちＳＦ２６９５物質それ自体として
分離することができ、またＳＦ２６９５物質を含有する
溶液またはその濃縮液を塩基、すなわち例えば水酸化ナ
トリウム、水酸化カリウム等のアルカリ金属化合物、水
酸化カルシウム、水酸化マグネシウム等のアルカリ土類
金属化合物、アンモニウム塩等のような無機塩基、エタ
ノールアミン、トリエチルアミン、ジシクロヘキシルア
ミン等の有機塩基により、各工程の操作中例えば抽出９
分離または精製の各工程の操作中に処理した場合、ＳＦ
２６９５物質は対応するその塩類の形に変化し分離され
る。また別にこのよう０にして製造されたＳ、Ｆ２６９５物質の塩類は、常法に
より遊離の形、ＳＦ２６９５物質それ自体に変化させる
ことができる。更に遊離の形で得られたＳＦ２６９５物
質を前記塩基により常法で対応するその塩類に変化させ
てもよい。従ってＳＦ２６９５物質と同様に前記のよう
なその塩類も、この発明の範囲内に包含されるものとす
る。

以下に本発明の実施例を示すが、ＳＦ２６９５物質の性
状が本発明によって明らかにされたので。

それらの性状にもとすきＳＦ２６９５物質の製造法を種
々考案することができる。従って本発明は実施例に限定
されるものではなく、実施例の修飾手段は勿論１本発明
によって明らかにされたＳＦ２６９５物質の性状にもと
ずいて公知の手段を施してＳＦ２６９５物質を生産、濃
縮、抽出、精製する方法をすべて包括する。

ス亙μ 種培地として、スターチ２．０％、グルコース１．０％
、小麦胚芽０．６％、ポリペプトン帆５％、大豆粉２１
− ２０．２％、酵母エキス０．３％、炭酸カルシウム０．１
％の組成からなる培地を用いた。また生産培地として、
水飴２．４％、大豆粉１．２％７大豆油０．１５％ファ
ーマメディア０．６％、サングレイン０．３％、炭酸カ
ルシウム０．１％の組成からなる培地を用いた。

なお、殺菌前ｐＨはすべてｐＨ７，０に調整して使用し
た。

前記の種培地２０ｍｆｆを分注した１００ｍ１２容三角
フラスコを１２０℃で３０分間殺菌し、これにアクチノ
マジュラ・エスピー・ＳＦ２６９５株（ＦＥＲＭ　Ｐ−
１１１４４）の斜面寒天培養の２〜３白金耳を接種し、
２８℃で４日間振盪培養して第１種培養とした。次いで
９種培地８０ｍαを分注した５００ｍ１２容三角フラス
コを１２０℃で３０分間殺菌し、前記の第１種培養３ｍ
ｆ２を接種し、２８℃で２０間振盪培養して第２種培養
とした。予め１２０℃で３０分間殺菌した８０ｍｇの生
産培地を分注した５００ｍα容三角フラスコ１００本に
、前記の第２種培養を３ｍＱ接種し　２８℃で５日間振
盪培養した。培養終了後、濾過助剤として珪藻土を加え
て濾過し、濾液と菌体を得た。

この培養ろ液（６，５Ｌ）から酢酸エチル（６，５Ｌ）
で活性物質を抽出し、酢酸エチル層を濃縮すると油状物
質（１，８ｇ）が得られた。この油状物質をシリカゲル
カラム（１，１ｋｇ）の上部に載せ、クロロホルムメタ
ノール（１００：　ｌ〜４０：１）を展開溶媒とするク
ロマトグラフィーを行った。溶出液を５００ｇずつ分画
するとフラクション番号６〜７と１０〜１２に２つの活
性画分を得た。フラクション番号６〜７を濃縮乾固する
とＳＦ２６９５Ａ物質を含む粗粉末（４４４ｍｇ）が得
られた。次いで、この粗粉末を再度シリカゲルカラム（
４４ｇ）の上部に載せ、クロロホルム−メタノール（１
００：　ｌ）を展開溶媒とするクロマトグラフィーを行
い、溶出液を６ｇずつ分画するとフラクション番号２９
〜４６にＳＦ２６９５Ａ物質を含む活性画分を得た。こ
の活性画分を濃縮乾固し、得られた粗粉末（１８２ｍｇ
）を更にメタノールを展開溶媒とするセファデックスＬ
Ｈ−２０（８６０ｍ４）カラムクロマトグラフィーを行
って精製すると、ＳＦ２６９５Ａ物質が黄色粉末（１０
９ｍｇ）として得られた。

＝２３最初のシリカゲル・カラムクロマトグラフィーで得られ
たフラクション番号１０〜１２を濃縮乾固するとＳＦ２
６９５Ｂ物質を含む粗粉末（１６２ｍｇ）が得られた。

次いで、この粗粉末を再度シリカケルカラム（２０ｇ）
の上部に載せ、クロロホルム−メタノール（１００：　
１）を展開溶媒とするクロマトグラフィーを行い、溶出
液を５ｇずつ分画するとフラクション番号２３〜３９に
ＳＦ２６９５Ｂ物質を含む活性画分を得た。この活性画
分を濃縮乾固し、得られた粗粉末（１００ｍｇ）を更に
メタノールを展開溶媒とするセファデックスＬＨ−２０
（８６０ｍ４）カラムクロマトグラフィーを行って精製
すると、ＳＦ２６９５Ｂ物質が黄色粉末（６７ｍｇ）と
して得られた。

［発明の効果１、本発明のＳＦ２６９５Ａ物質およびＳＦ２６９５Ｂ物
質はマウス白血病Ｐ３８８細胞に対して強い細胞障害活
性を示し、また第１表および第２表に示した如く抗グラ
ム陽性菌および抗マイコプラズマ活性を有している。こ
れらの性質に基づき本発明のＳＦ２６９５Ａ物質および
ＳＦ２６９５Ｂ物質４を制癌剤、抗菌剤、抗マイコプラズマ剤あるいはそれら
への変換用素材として用いることができる。

【図面の簡単な説明】

第１図：ＳＦ２６９５Ａ物質のメタノール中（２０ｇｇ
／ｍ（１，実線）、酸性メタノール中（２０ｇｇ／ｍＱ
、破線）および塩基性メタノール中（２（１ｇｇ７ｍ（
：ｌ、−点鎖線）での紫外部および可視部吸収スペクト
ルを示す。第２図：ＳＦ２６９５Ａ物質の臭化カリウム錠での赤外
部吸収スペクトルを示す。第３図：ＳＦ２６９５Ａ物質の重クロロホルム溶液中で
の４００ＭＨｚ　　’ＨＮ　Ｍ　Ｒスペクトルを示す。第４図：ＳＦ２６９５Ａ物質の重クロロホルム溶液中で
のｌｏＯＭＨｚ　１３ＣＮ　Ｍ　Ｒスペクトルを示す。第５図：ＳＦ２６９５Ｂ物質のメタノール中（２０ｇｇ
／ｍρ、実線）、酸性メタノール中（２０ｇｇ／ｍ１２
．破線）および塩基性メタノール中（２０２５− ２６ μｇ７ｍ（１，−点鎖線）での紫外部および可視部吸収
スペクトルを示す。第６図：ＳＦ２６９５Ｂ物質の臭化カリウム錠での赤外
部吸収スペクトルを示す。第７図：ＳＦ２６９５Ｂ物質の重クロロホルム溶液中で
の４００ＭＨｚ　　ＩＨＮ　Ｍ　Ｒスペクトルを示す。第８図：ＳＦ２６９５Ｂ物質の重クロロホルム溶液中で
のｌｏＯＭＨｚ　１３ＣＮＭＲスペクトルを示す。

Claims

【特許請求の範囲】１、下記の特性を有する抗生物質ＳＦ２６９５Ａ物質お
よびその塩（１）色および形状：黄色粉末（２）元素分析：実測値Ｃ６１．８０％、Ｈ４．９８％
、Ｎ１．９８％（３）マススペクトル（ＦＤ−ＭＳ）：ｍ／ｚ６８９（４）融点：２１８〜２２２℃（分解）（５）比旋光度：〔α〕＾２＾４＿Ｄ＝−９４．９゜（
ｃ０．５、ＣＨＣｌ＿３）（６）紫外部および可視部吸収スペクトル：第１図に示
す。（７）赤外部吸収スペクトル：第２図に示す。（８）１ＨＮＭＲスペクトル：第３図に示す。（９）１３ＣＮＭＲスペクトル：第４図に示す。（１０）溶解性：クロロホルム、アセトン、酢酸エチル
に溶け易く、メタノール、ヘキサンに溶け難く、水に溶
けない。（１１）塩基性、酸性、中性の区別：弱酸性物質２、下
記の特性を有する抗生物質ＳＦ２６９５Ｂ物質およびそ
の塩（１）色および形状：黄色粉末（２）元素分析：実測値Ｃ６０．９８％、Ｈ４．７６％
、Ｎ２．０２％（３）マススペクトル（ＦＤ−ＭＳ）：ｍ／ｚ６７５（４）融点：２１５〜２１８℃（分解）（５）比旋光度：〔α〕＾２＾４＿Ｄ＝−１０６．７゜
（ｃ０．５、ＣＨＣｌ＿３）（６）紫外部および可視部
吸収スペクトル：第５図に示す。（７）赤外部吸収スペクトル：第６図に示す。（８）１ＨＮＭＲスペクトル：第７図に示す。（９）１３ＣＮＭＲスペクトル：第８図に示す。（１０）溶解性：クロロホルム、アセトン、酢酸エチル
に溶け易く、メタノール、ヘキサンに溶け難く、水に溶けない。（１１）塩基性、酸性、中性の区別：弱酸性物質３．ア
クチノマジュラ属に属する、抗生物質ＳＦ２６９５Ａ物
質およびＳＦ２６９５Ｂ物質生産菌を培養し、その培養
物から抗生物質ＳＦ２６９５Ａ物質およびＳＦ２６９５
Ｂ物質あるいはそれらの何れか一方を採取することを特
徴とする抗生物質ＳＦ２６９５Ａ物質およびＳＦ２６９
５Ｂ物質の製造法。