JPH0319694A

JPH0319694A - ドコサヘキサエン酸グリセリドの濃縮法

Info

Publication number: JPH0319694A
Application number: JP1152200A
Authority: JP
Inventors: Ron Hashizume; 橋爪　論; Yukihisa Tanaka; 幸久田中; Tadashi Funada; 船田　正
Original assignee: Nippon Oil and Fats Co Ltd
Current assignee: NOF Corp
Priority date: 1989-06-16
Filing date: 1989-06-16
Publication date: 1991-01-28

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】（産業上の利用分野）本発明は、長鎖高度不飽和脂肪酸グリセリドの濃縮法に
関し、詳しくは特にドコサヘキサエン酸グリセリトの濃
縮法に関する。

（従来の技術）長鎖高度不飽和脂肪酸は近年、その生理活性などが注目
されている。特にα−リノレン酸（ＡＬＡ．　　ＣＩｌ
＋＋３）　、エイコサベンクエン酸（ＥＰＡＣｚｏ＋ｓ
）　、ドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ，Ｃ２２：６）など
のω−３系列の長鎖高度不飽和脂肪酸（メチル末端より
数えて３つ目のＣ−Ｃ結合が二重結合の脂肪酸）が注目
を浴びている。つまり現代の日本人を含め欧米型の肉を
中心とする食生活ではωδ長鎖高度不飽和脂肪酸（メチ
ル末端より数えて６つ目のＣ−Ｃ結合が二重結合の脂肪
酸、例えばアラキドン酸（ＡＡ，Ｃ２Ｇ＋４）　、’ｒ
−リノレン酸（ＧＬＡ，Ｃ＋ａ＋＋）なと）が完全に摂
取過多の状態であり、このω−６脂肪酸とω−３脂肪酸
の摂取ハランスがくずれ、様々な戒人病（ガン、高血圧
、心臓病など）の原因になっていると報告されている。

従って早急に、このバランスの回復が必要となっている
。

ヒトの小腸ではグリセリド型の油脂が、エチルエステル
やメチルエステルに比べて圧倒的に吸収が有利であると
報告されている。このような有利な点を利用すると、戒
人病に悩む現代人が高濃度の長鎖高度不飽和脂肪酸を効
果的に摂取することが可能になる。

従来より、長鎖高度不飽和脂肪酸の濃縮は、クロマトグ
ラフィーによる方法、低温分別による結晶化法、溶剤を
用いた液々分配法、分別蒸留法、尿素付加法などによっ
て行われてきた。

（発明が解決しようとする課題）しかし、これらの方法では長鎖高度不飽和脂肪酸を事前
に、エチルエステル化、メチルエステル化などの前処理
を行う必要が必須であり、グリセリ］・として濃縮する
ことは殆ど効果が期待できなかった。また、溶剤を用い
るために工程が増えたり、収率が非常に低かったり、さ
らに高温状態で処理された長鎖高度不飽和脂肪酸グリセ
リドやエステルの熱による変性などの問題があった。

酵素による選択加水分解を利用して長鎖高度不飽和脂肪
酸を含有する油脂から長鎖高度不飽和脂肪酸を高濃度に
含有する油脂を方法として、キャンディダ・シリンドラ
セ（Ｃａｎｄｉｄａ　ｃｙｌｉｄｒａｃｅａ）由来のリ
パーゼを使用する方法が知られている（特開昭５８−１
６５７９６号）。この方法で得られる油脂は、原料中に
存在する数種類の長鎖高度不飽和脂肪酸（例えば２０：
４ω６、２０：５ω３、２２：５ω６、２２：５ω３．
．２２：６ω３など）の全てが濃縮された油脂である。

ω３系列の脂肪酸としてその生理活性が注目されている
のはエイコサベンクエン酸とドコザヘキサエン酸である
が、それらの生理的作用および、その利用用途にそれぞ
れの特異性が見られることが分かってきており、それら
の脂肪酸を特異的に高濃度に含有した油脂の製造法の確
立が望まれていた。

本発明の目的は、グリセリ］・の状態のドコザヘキサエ
ン酸を安定にかつ効果的に濃縮する方法を提供するもの
である。

（課題を解決するための手段〉本発明のドコサヘキサエン酸グリセリ１−の濃縮法は、
長鎖高度不飽和脂肪酸を含有する泊脂を、キヤンデイダ
・ルゴーサ（Ｃａｎｄｉｃｌａ　ｒｕｇｏｓａ）より得
られたリパーゼにより選択加水分解し、グリセリド画分
を分取することを特徴とする。

各種リパーゼの基質特異性を検討していくと、キャンデ
ィダ・ルゴーザ（Ｃａｎｄｉｄａ　ｒｕｇｏｓａ）より
得られたリバーゼが、ドコサヘキサエン酸とグリセロー
ルのエステル結合には殆ど作用しないか、あるいは極く
わずかしか作用しない。本発明はこの知見に基づくもの
である。

以下に本発明のドコサヘキサエン酸グリセリドの濃縮法
について詳述する。

本発明で用いる長鎖高度不飽和脂肪酸を含有する油脂と
しては、魚油、鯨油、貝油などの海産生物由来の油脂や
、微生物、植物由来の油脂などが挙げられるが、その起
源については特に限定されるものではない。

本発明に用いられるキヤンデイダ・ルゴーサ由来のリバ
ーゼは、市販のものを用いることができる。

ドコザヘキサエン酸含有油脂を、キャンデイダ・ルゴー
サ由来のリパーゼにより加水分解する反応は、リパーゼ
の活性を発現するに十分な量の水の存在下で行われる必
要があり、その水は、例えば油脂に対して１〜２００％
であり、望ましくは、３０〜１００％程度を用いる。ま
た前記のリバーゼの使用量はいずれもその活性や希望す
るドコサヘキサエン酸の濃度により異なるが、通常、油
脂１ｇ当たり１０〜２，　０００ユニソトであり、望ま
しくは２００〜５００ユニソト程度である。

本発明では、リバーゼの加水分解の程度は反応終了後に
水層を除いて得られる画分の水酸化ナトリウムーエタノ
ール溶液などにより滴定を行って、酸価を測定すること
によって知ることができる。

リパーゼの使用量や反応時間により酸価はさまざまな価
に設定でき、それにより希望の長鎖高度不飽和脂肪酸の
濃度を得ることができる。油脂の種類にもよるが反応の
終了は酸価５０〜１５０程度が適当である。例えば魚油
を用いた場合など酸価１３０程度で反応を終了すること
が望ましい。反応は２０〜７０℃、好ましくは３０〜６
０゜Ｃ″？：：１〜４８時間反応させる。

本発明の濃縮法によれば、油脂中の構或脂肪酸であるド
コサヘキサエン酸とグリセロールのエステル結合は前記
のリパーゼにより、殆どあるいは、極くわずかしか加水
分解されない。その一方でドコサヘキサエン酸以外の構
成脂肪酸とのエステル結合は、容易に加水分解されるた
め、ドコサヘキザエン酸以外の脂肪酸は遊離脂肪酸画分
に濃縮される。従って、上記のグリセリド画分と遊離脂
肪酸画分を含む分解反応物から、グリセリド画分のみを
分取すればドコサヘキサエン酸のグリセリドの濃縮物が
得られる。

上記の分解油よりグリセリド画分を分取する方法として
は、通常行われているアルカリ脱酸法、水葬気蒸留法、
イオン交換樹脂による分取などがあるが、その方法は問
わない。

（発明の効果）本発明の方法によれば、キャンディダ・ルゴサ由来の特
定のリパーゼを用いるので、選択的に加水分解されて、
ドコサヘキザエン酸トリグリセリドを高濃度に含有する
油脂を得ることができる。

（実施例）本発明について以下に実施例を以て具体的に説明する。

実施例１イワシ魚油（構戒脂肪酸中のドコサヘキサエン酸８．０
％、エイコザペンクエン酸１３％）５０ｇにキヤンデイ
ダ・ルゴーサより得られたリパーゼ（シグマ社製）を魚
油１ｇにつき２００ユニソトになるように蒸留水５０ｇ
に溶かして、撹拌しながら室温で１０時間反応させた。

反応終了後、リパーゼを含む水層を除去して、分解油を
得た。この分解油の酸価は１２５であった。

上記の分解油から脂肪酸部分をアルカリ脱酸法により除
いた。ドコサヘキザエン酸含有グリセリト”の収量は９
．１ｇ，酸価は０．２、構或脂肪酸中のドコサヘキサエ
ン酸含量は３２．０％、エイコサベンクエン酸含量は６
％であった。

実施例２カツオ頭部より採取した力・ンオ魚油（構或脂肪酸中の
ドコザヘキサエン酸２５％、エイコサペンクエン酸９％
）５０ｇにキヤンデイダ・ルゴーサより得られたリバー
ゼを魚油１ｇにつき１．００ユニソトになるように蒸留
水５０ｇに熔かして、撹拌しながら室温で８時間反応さ
せた。反応終了後、リパーゼを含む水層を除去して、分
解油を得た。この分解油の酸価は、１３０であった。

」二記の分解泊から脂肪酸部分をアルカリ脱酸法により
除いた。ドコサヘキサエン酸グリセリドの収量は１．１
．６ｇ、酸価は０．１、構戊脂肪酸中のドコサヘキサエ
ン酸含量は５８．７％、エイコサペンクエン酸含量は５
％であった。

実施例３カツオ魚油１００ｇにキヤンデイダ・ルゴーサより得ら
れたリパーゼを魚油１ｇにつき１００ユニソトになるよ
うに蒸留水５０ｇに溶かして、撹拌しながら室温で５時
間反応させた。反応終了後、リパゼを含む水層を除去し
て、分解油を得た。この分解油の酸価は１００であった
。

上記の分解油から脂肪酸部分をアルカリ脱酸法により除
いた。ドコサヘキサエン酸含有グリセリドの収量は３７
．７ｇ、酸価は０．１、構戒脂肪酸中のドコサヘキサエ
ン酸含量は４５．４％、エイコサペンクエン酸含量は６
％であった。このように反応終了時の酸価に変化を与え
ることにより、希望のドコサヘキサエン酸の含有量を得
ることができる。

比較例１カ゛ンオ魚油５０ｇにキャンディダ・シリンドラ・ノセ
より得られたリパーゼを魚油１ｇにつき２００ユニノト
になるように華留水５０ｇに溶かして、撹拌しながら室
温で１０時間反応させた。反応終了後、リパーゼを含む
水層を除去して、分解油を得た。

この分解油の酸価は、１２６であった。

上記の分解油から脂肪酸部分をアルカリ脱酸法により除
いた。ドコサヘキサエン酸含有グリセリドの収量は１２
．４．ｇ，酸価は０．２、構成刀旨肪酸中のドコサヘキ
サエン酸含量は４０．９％、エイコサペンクエン酸含量
は１８％であり、ドコサヘキサエン酸のみが特異的に濃
縮されることはなかった。

比較例２魚油（構戒脂肪酸中のドコサヘキサエン酸８％、エイコ
サベンクエン酸１３％）５０ｇにアスベルギルス・ニガ
ーより得られたリパーゼを魚油１ｇにつき２００ユニソ
トになるように萬留水５０ｇに溶かして、撹拌しながら
室温で１０時間反応させた。反応終了後、リバーゼを含
む水層を除去して、分解油を得た。この分解油の酸価は
１２５であった。

１０上記の分解油から脂肪酸部分をアルカリ脱酸法により除
いた。長鎖高度不飽和脂肪酸グリセリドの収量は１０．
１ｇ、酸価は０．２、構戒脂肪酸中のドコザヘキサエン
酸含量はｌＯ％、エイコサペンクエン酸含量は１２％で
あった。

１ ■ 一６２０−

Claims

【特許請求の範囲】

（１）長鎖高度不飽和脂肪酸を含有する油脂を、キヤン
デイダ・ルゴーサ（Ｃａｎｄｉｄａ　ｒｕｇｏｓａ）よ
り得られたリパーゼにより選択加水分解し、グリセリド
画分を分取することを特徴とするドコサヘキサエン酸グ
リセリドの濃縮法。