JPH023661A

JPH023661A - 血圧降下活性を有するグアニジン誘導体

Info

Publication number: JPH023661A
Application number: JP1045003A
Authority: JP
Inventors: Giuliano D Monache; ギウリアノ　デレ　モナシェ; Franco D Monache; フランコ　デレ　モナシェ; Marco Carmignani; マルコ　カルミグナニ; Stella C Bonnevaux; ステラ　カスティロ　ボネバウクス; Romulo Espinal; ロムロ　エスピナル; Luca Carlo De; カルロ　デ　ルカ; Bruno Botta; ブルノ　ボッタ
Original assignee: Consiglio Nazionale delle Richerche CNR
Current assignee: Consiglio Nazionale delle Richerche CNR
Priority date: 1988-02-24
Filing date: 1989-02-23
Publication date: 1990-01-09
Also published as: DE330629T1; EP0330629A2; GR900300066T1; IT8847665A0; EP0330629A3; US5059624A; ES2013585A4; IT1219846B

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】本発明は血圧降下活性を有する新規なグアニシン誘導体
およびこの誘導体を含有する組成物に関し、本発明＆工
また、植物材料からこの化合物を抽出し、精製すること
よりなるそれらの製造方法に関する。さらに特に、本発
明はその分子中にグアニシン基を有し、格別の血圧降下
活性を示ア新規な化合物に関する。

高血圧症の治療処置の分野において、グアニジンの群に
属するかなりの活性成分が丁でに仰られており、これら
の成分の中で最も一般的な化合物は、その分子が、１個
の窒素原子を含む８員の複素環状飽和環からなり、この
窒素原子が２個のメチレン基を有し、かつグアニジン基
で終っている鎖に結合している、グアネチジンである。

抗高血圧剤として知られている他のグアニシン化合物に
はグアンファシン（ｇｕａｎｆａｃｉｎｅ）およびグア
ニジン基（ｇｕａｎａｂｅｎｇ）があり、これらの化合
物は両方ともに、一端に、２個の塩素原子で置換されて
いるベンゼン環を有し、かつまた他の一端にグアニジン
基な有する構造を有でることを特徴とするものである。

しかしながら、これらの化合物ヲ工いずれも、化学合成
によって得られるものであり、最終生成物中に痕跡量の
反応剤、中間化合物および（または）反応副生成物が存
在する可能性があることから、天然産生の物質に比べて
毒性に係る高い危険性を一役に有することが当業者に良
く知られている。

さらにまた、合成によって得られる医薬は一般に、天然
源から得られる医薬よりもさらに高価で、さらに複雑な
製造方法を必要とすることがまた良く知られている。

従って、本発明の目的は丁でに公知の化合物の活性九匹
敵するかあるいはそれより高い血圧降下活性を有するが
、大ｔＫ入手できる天然源から、単純で、経済的な慣用
の抽出および精製方法によって得ることができるグアニ
シン化合物を提供することにある。

本発明の目的に対して研究および実験が行なわれた結果
として、植物ベルベシナ　力２カサナ（ｖｅｒｂｅｓｉ
ｎａ　ｃａｒａｃａａａｎａ）　（キク科（Ｏｏｍｐｏ
ａｉｔａす〕のエキスから一連のグアニジン化合物が単
離された。こ扛らの化合物は格別の血圧降下活性を示し
た。前記の種属に関してだけ研究が行なわれたが、特に
、このような種属の植物に関して文献に報告されている
従来の植物化学的研究がいずれの場合も脂浴注成分に限
られていることを考慮すれば、ベルベシナの他の独に見
い出すことができる類似の化合物（水浴性の化合物ンを
除外することはできない。

新しく単離されたグアニシン化合物に加えて、多くの構
造的に類似する化合物が合成され、試験され、その結果
として、格別の血圧降下活性ン示す新規な詳のグアニジ
ン誘導体の定義が確立された。

従って、本発明は下記の一般式：％式％または置換されていてもよいシンナモイル、丁すわち、（式中、Ｒは水素または１個あるいは２個以上の置換基
であるンであり、Ｒ２は水素、アルキルまたはアルケニ
ルであるが　Ｒ１およびＲ２は両方ともに水素であるこ
とはできない、モしてｎは１〜８の整数であり、また、
Ｒ３＆工それぞれ置換されていてもよいトルキシノイル
またはトルキジロイ（式中、Ｒは前記と同じ意味を有す
るンである。

好ましくは、アルキルまたはアルケニル基Ｒ２は５個ま
での炭素原子を有し、特に好ましくは、Ｒ”ｔニジレニ
ル、すなわち、３−メチル−２−ブテニルである。

さらに特に、本発明はベルペシナ　力２カサナのエキス
から単離され、同定された、下記の四種の化合物を包含
する：Ｕ口６化合物（３）はグアニド−Ｉ（ｇｕａｎｉｄｏ　−Ｉ）
と称する。この化合物（３）は一般式（１１において、
Ｒ１＝３ｓ４−ジメトキシシンナモイル、ｎ＝４および
Ｒ２＝フェニルである化合物に相当する。化合物（４）
はグアニド−■と便宜上体することにするがフェニルア
グマチンである〔アグマチンは既知化合物であり、４−
（アミノブチル）グアニジンである〕。

化合物（５）はグアニド−■と称する。この化合物は実
際よ、グアニシン基土にプレニル基を有していないグア
ニド−■から誘導することができる。化合物（６）（ニ
一般式（２）に含まれ、Ｒ３がビス（３，４−ジメトキ
シ）β−トルキシノイルであり、ｎが４でありセしてＲ
にがプレニルである化合物であり、ジグアニド−■と称
する。

化合物（４）および（５）（グアニド−■およびグアニ
ド−Ｖ）かグアニド−■の分子の一部分であること、お
よびジグアニド−■が二重結合の付加によってグアニド
−■の二置体化から誘導される構造な有することは容易
に認識できることである。

本発明の好ましい化合物の化学的特ａは的によりさらに
示し、またこれらの化合物の高い血圧降下活性を証明す
る薬理学的資料ヲマた、下記に示す。

本＃、明は！！た、活性成分として、式（ｌ）または式
（２）で示されるグアニジン化合物Ｑ〕−棟、あるいは
これらの化合物の二ａＩまたは三種以上の混合物、ある
いはまた、ベルベシナ、特にペルペシナカ２カサナの未
分留エキスを含有する高血圧症処置用の医薬組成物を包
含する。

本発明はさらにまた、上記化合物を植物材料から得るた
めの抽出および精製方法を提供し、この方ｉ　を１− イ）植物材料を、抽出のためのアルコール系溶剤を用い
て小片に処理するか、または粉砕し、ａ）溶剤を減圧で
除去し、ハ）抽出残留物を酢酸エチルと水とに分配させ、二）水
部分を真空凍結乾燥（凍結乾燥）させる、工程よりなる
。

好ましくを工、生成物の純度を増すために、上記工程の
最終工程からの未精製凍結乾燥エキスを無水アルコール
系溶剤中に再懸濁し、次いで濾過して、王として無機塩
類よりなる、残留する不＊ａ物質をいずれも除去し、次
いで溶剤を蒸発により除去し、新規な精製された天然エ
キスを得る。このような生成物の純度をさらに増重ため
Ｋは、この処理操作を、アルコール性溶剤の量を減じな
がら、多数回繰返すことができる。

本発明の化合物な高収率で得るためには、また工程ハ）
で使用された酢酸エチル溶液中に残存できる活性化合物
部分を水抽出により回収でると好ましい上記方法の別法として、工程イ）　　　ｏ）およびハ）
の代りに、室温において水で抽出することができ、実質
的に同様の収率な得ることができる。

工程品）（あるいは好適方法により得られる精製生成物
）から得られる天然エキスは次いで、シリカカラム上で
、増加する斂のメタノールを含有するクロロホルムを用
いて溶出して、各成分に分離させる処理を行なう。この
分離はまた、セファデックｘ　（８ｅｐｈａｄｅｘ）　
Ｉ、Ｈ−２０を用い、メタノールで溶出して行なうこと
ができる。

本発明のグアニジン化合物′１ｇ１：ａ造するための簡
単で経済的な方法の代表的列である、上記に提案した抽
出法に加えて、たとえは植物細胞培養、接種、不動化ａ
廁あるいを工微生物（バクテリア、イ−スト）からのバ
イオチクノミシイ法のような他の製造技法を使用するこ
ともできる。

さらにまた、本発明の化合物は化学合成により、周知の
方法、たとえば下記の数例で説明されているような方法
を適用することによって製造することができる。

本発明をここで例示の目的で、次的によりその好適態様
を特に引用して説明するが、本発明はこれらに制限され
るものではない。

ガ１抽出方法バレンシア（ベネズエラ、力２ボざ州）附近で採取Ｌ　
７．：。ベルベシナ　カ２カサナ（新鮮な植物全体）１
０に９を全体的に小片にし、メタノールを用いて、１５
〜２０時間、連続法により（ソックスレー装置を使用す
る）、抽出する。溶剤を６０〜６５℃で減圧の下で除去
した後に、残留物（約７００＃）を水と酢酸エチルとに
分配させる。

この操作は望まれない化合物（トリテルペン類、りｏｏ
フィルなど）の大部分の除去を可能にし、これらの望ま
れない化合物は有機溶剤中に残される。所望の化合物の
大部分に水相（７２クシヨンＡ）中に分離される。酢酸
エチルにより抽出される残りの活性成分はさらに水で抽
出する（７ラクシヨンＢ）ことにより回収する。水溶性
部分（Ａ十Ｂ）を減圧の下で、３５〜４０℃で濃縮し、
次いで凍結乾燥させ、天然エキスＣ（約３８０〜４００
、！？）を得る。

連続抽出操作（ソックスレー）でメタノールの代りにエ
タノールを使用することにより、あるいは植物を室温で
水で抽出することにより、実質的に同様の収率で天然エ
キスＣが得られる。

次いで、この天然エキスＣを無水メタノールまたはエタ
ノール中に懸濁し、次いで濾過する。上記で丁でに説明
したように、この操作により、大部分の無機塩類（約７
０ｙ）が除去される。この無機塩類の存在は後続のりａ
マドグラフィ分離操作を複雑にする。アルー−ル可溶部
分をさらに蒸発させると、天然エキス（３１０〜ｓｔＯ
＆）が得られる。この操作をアルコールの量を少しにし
て反復丁やと追加敞の塩類を除去することができる。

ガ２成分の分離方法Ａ前記例に示されているエキスＤの一部分（約８０、？　
）（Ｌかしながら、得られる結果は充分ではないが、こ
の操作は天然エキスＯＫ対してモ行なうことができるこ
とが指摘される）をメタノール中に溶解／ａ濁し、シリ
カ１００〜１５０Ｉに吸着させる。溶剤を除去した後に
、混合物（シリカ＋天然エキスＤ）’４１：、りａａホ
ルム中で調製したシリカカラムの頂上部に装入する。ク
ロａホルム３．５Ｌで溶出すると、痕跡量のりｃＩａフ
ィルおよびその他の望まれない化合物を除去することが
できる。増加する量（１０〜５０％ンでメタノールを含
有するりａａホルム混合物で反復溶出し、化合物、ジグ
アニド−…、グアニド−１１グアニド−■、グアニド−
■（未同定ン、グアニド−■、アグマチンおよびがレジ
ン（この化合物は丁でに知られており、プレニルグアニ
ジンと定義することができる）を比較的純粋な物質とし
て得る。

天然エキスＤ約８０Ｉから得られる各化合物の大体の麓
は次のとおりである：グアニｐ−ｘ：６〜６ｊｌ、　’
＃’７二Ｖ−Ｍ　：　３〜５ＩＩ、　り７＝１＆−ＩＩ
Ｉ：　ｏ、ｓ　〜ｉ　ｙ、　り７＝ドーＩＶ：１〜２！
ｉ％グア＝ドーＶ：０．５〜１ｇ、７り−ｖ＋ン：　０
．５〜ｉ　＆ｅ各成分の収緻は、たとえば収穫時機また
は天然エキスＤの製造方法などの種々の因子に依存する
。

夏の終９に植物を収穫すると、ジグアニ）”−■の収址
が高くなり、グアニド−Ｉの収ｔは減少することが見い
出された。これはグアニド−■の光分解によるものと予
想される。同様に、蒸発工程中に高温を使用するか、あ
るいは長期間加熱すると、グアニド−■およびグアニド
−■の収ｔは高くなり、グアニド−■の収１１ｔは少な
くなる。これは多分、グアニド−■の部分的加水分解に
よるものである。

上記化合物をそれらの純粋な形で得ようとする揚会には
、退ｕ口のクロマトグラフィによる精製を行なう必要が
あることが見い出される。

方法Ｂベルペシナ　カラカサナの天然エキスをまた、セファデ
ックスＩ、Ｈ−２０による主要精製法によって得る。メ
タノール抽すにより、分子量によって３つのフラクショ
ンに部分的に分離することができる。第一のフラクショ
ンは化合物ジグアニド−ｎを含有し、他方、第二のフラ
クションは化合物グアニド−■、グアニド−■およびグ
アニド−■の混合物よりなり、そして第三の７２クシヨ
ンヲエグアニドー■、アグマチンおよびガレシンよりな
る。セファデックスＩＩＨ−２０カラムによる精製を使
用して、各成分をそれらの純粋な形で得ることができる
。

例６グアニ）Ｆ−Ｉの化学的特徴式（３）により示されている構造はスペクトル吸収デー
タおよびアルカリ卯水分解により得られた結果にもとづ
き決定した。

高解潅力における質麓スペクトル二Ｍ＋３８８　、２４
７２　：　０２１Ｈ３２０３Ｎ４に対する計算値＝Ｍ”
　３８８　、２４７４゜買置スペクトル：６８８（５）
　　　３０１　　（１２）　　　２（Ｊ７　　（４５）
σｖスペクトル（ＭｅＯＨ）、２９１および６６０ｎｍ
　、ｌＨＮＭＲスペクトル（Ｄ２０　：シス形優勢）δ
、７．１５−６．９５（３Ｈ，ｍ、Ｈ−２，Ｈ−５゜Ｈ
−６）：　６．７８　（Ｉ　Ｈ，ｔ、Ｊ＝７Ｈｚ、０Ｈ
＝）。

６．５２　（Ｉ　Ｈ，（１，Ｊ＝＝１３Ｈｚ、Ｈａ〕、
　５．９８（ＩＨ，ｄＬ、Ｊ＝１３ｔｌｚ、Ｈｐ）、５
．１８（ＩＨ。

広イ”　＊　Ｊ　＝７　ｔｌｚ、　ｕａ　＝＝す、５．
８５および６．８２Ｃ５Ｈそれぞれ２　ｓ　、　２ｘ　
ｏＭｅ）、　３．７４　（２Ｈ−ｔ、Ｊ＝７Ｈｚ、０Ｈ
２）ｓ　３．５−２．９（４Ｈ，ｍ。

２ｘ　０Ｈ２）、　１−７６　（６Ｈ＝広イ、　、　２
　ｘ　Ｍｅ）、１．６−１−６（４Ｈ−”＊　２　””
ｚＬＩＨ−ＮＭＲスペクトル（ＯＤＣ１３−ＯＤ３０Ｄ、　
３−　ｊ　；シス形とトランス形とのｌ／１混合物）δ
、７．５５−６．９０　（３１１，ｍ、Ｈ−２，ｎ−５
，ａ−６）。

７−５２　（”／２Ｈ，ｄ−Ｊ＝１６Ｈｚ、）ランスＨ
−α、６．７１　（”／２Ｈ１（１，Ｊ＝１５Ｈｚ、シ
スＨ−α　６．６２　（”／２　ＩＩ　−”　−Ｊ：１
６　Ｈｚ　ｍ　−）ランス■−β＝　５−９６　（ｌ／
２　Ｈ，ｄ、ｆｆ＝１３Ｖｉｚ。

シスＨ−β、５．２５（ＩＨ，広いｔ、Ｊ＝７［１ｚｓ
ＯＨ＝　）、５．７５　（６ＨＩ　　ａ、２ｘｏＭｅ）
、３．７３（２１１，ｄＬ、　　　１＝７１１ｚ）、　
　　！１．５−３．０　　（４１１，ｍ。

２　Ｘ　ＯＨ，）、１．７５（６Ｈ，広、、、　、　、
　２　ｘ　ｍｅ）ｓ　１．７５−１−３５　（４Ｈ、ｍ
　、　　２・ｘ　ＯＨＭ）。

”ＯＮＭＲスペクトル（ｃｎ３ｏｎ）、δ、　１７０．
１　。

１６９．１　　（ｃｏ）、　　１　５７．４　（０＝Ｎ
Ｈ）、　　１　５２．３゜１５０．８（０−３，０−４
）、１４１．７．１４ＤＪ３゜（Ｃ−αン、１５９．１
３８．２（０−１）。

１２９．３（０＝）、１２４．６．１２２．６（０−６
）。

１２３．３：（（Ｈ＝）、　　１１９．７．　１１９．
４（０−βン。

１１４．３．１１２．９（ａ−２，ン、１１２．４゜１
１１、＜５（０−２）、５６．５（２ＸＯＭす、４２．
５゜４０．５　、３９．８　（３Ｘ　Ｎ−ＣＨ２）、　
２７．７　、２ス２（２”０Ｈｘ）＊　　２５−８＊　
　１８−１　　（２”Ｈ５Ｌ化合物（３）はＴＪＱ水分
解（０，−２５Ｎ　Ｂａ（ＯＨ）ｇを使用し、還流下に
４時間）Ｋより、シス−およびトランス−３，４−ジメ
トキシケイ皮酸の混合物ならびに下記に示す化合物（７
）〜（９）を生成した：）１２Ｍ−（Ｃ１（２）４−Ｎ
Ｈ−０−ＩＨ２化合物（７）：融点：２００〜２０１℃
、０１６Ｈ２３Ｎ３０４　：計算値３２１．１　＜５８
８；Ｍ＋３２１．１６７５（ＨＲＭ８）。［ＴＶ、ＩＲ
，ＨｌＮＭＲスペクトｋＴＬらびに質重スペクトル分析
の結果は構造と一致する。

化合物（９）：融点：１０２〜１０６℃、Ｃ１！５Ｈ１
３Ｎ３０（分子３１１３１）、ＣＭ＋Ｈ］”１３２（Ｍ
８゜化学イオン化）　；　１３ｃ　ＮＭＲ（Ｄ２０）　
１６８　（０＝　Ｏ）、６９．９および３９．８　（Ｎ
＝ＯＨ３ｘ　２）、２６．８および２４−８　（（’Ｈ
２Ｘ　２）　＃　ｌＨＮＭＲおよび質量スペクトル分析
は構造と一致する。

列４ジグアニド−■の化学的特徴式（６）で示される化合物を示唆する構造はスペクトル
吸収データおよびアルカリ加水分解および酸加水分解の
結果にもとづいて決定した。

０４ｇＨ６４Ｎ”ｓＯ６（Ｍ、Ｗ、　７７６　）　＋質
量スペクトル（ＩＰＡＢ）、７７７（Ｍ＋１　）”　（
１００）、７６１（４）　　　７４７　（６）、７０９
　（１１）　　　６６７（２）　　　５９６　（３）、
５．７９　　（２５）　　　５５１（１１）、３８９　
（４６）　　　１９１　　（５７）ｌＨＮＭＲスペクト
ル（ＣＤＣｌ３−ＣＤ３０Ｄ、　３−１　）：δ。

７．３（２Ｘ　１ａ、ａ）、６．７−６．４Ｃ２１２Ｈ
。

ｍ）、５．２（２ＸＯＨ，広イｔ　）　＊　４．４−６
．５　（２Ｘ８　Ｈ，ｍ　）、、　５．７５　（２ｘ　
３Ｈ，８）、　６．６．２（２ｘ３Ｈ，８）、　３．３
−、！１．０　（２Ｘ　４Ｈ，ｍ　）、　１．７０（２
Ｘ　６Ｍ、広い８）。

１３０　ＮＭＲスペクトル（ＣＤ３０Ｄ　）　：δ、　
１７４．８（Ｃｏ）　　、　　１　５　７．８　　（０
＝ＮＨン　、　　１　５０．４．　　１　４９．４（０
−３，０−４）、　　１３４．３（０＝）、１３０．９
（０−１）、１２２．０．　１２０．０（０−６゜０Ｈ
＝）、１　１　４．２，１　１　３．０（０＝５．０−
２）−５７，０，５６，９（２ｘｏｍｅ）、　４６．４
．４５．６　Ｃ２ｘＯＨ）　、　　４２．９　、　４１
．１　　、　４０．４　（５ｘ　Ｎ−０１ｈ）−２８，
１，２７，８（２ＸＯＨ２）、２６．４．１　８．７　
　（２ＸＯＨ３）・化合物（６）は７１Ｄ水分解（２Ｎ・ＮａＯＨを使用し
て、室＠５日間ンにより、化合物（４）（グア＝ｐ一種
）、（８）およびα１１与えた、化合物（ＩＱを下記に
示す：化合物ＤＩ　：　’ＨＮＭＲ（ＯＤＣｌ、−ＣＤ
３０Ｄ）；δ、６．８５（２！　２Ｈ，ａ　）　、　６
．４５　（２Ｘ　ＩＨ，広い８）。

５．２　（１！　Ｏ＝　、広イｔ）　＋　４．４−４．
２　（２ｘ　ＯＨ。

ｍ）、３．９−２．８（１２Ｈ，ｍ）、３．７０（２１
ｏＭｅ、　　ａ　）、　　３．６　（２ｘｏｕｅ、　　
ａ　）、　　１．７５　（６Ｌ広いｅ）。

１３０　ＮＭＲ（ＯＤＣｌ６−ＣＤ３０Ｄ）；　’　、
１７９−Ｏｅ　１７３−７Ｃｏｏ）、　１５８　（０＝
ＮＨ）、　１４８．０．１４７．９゜１４６．８，１４
６．６　（Ｃ−６，０−４）、１ｉ、３（Ｑ＝　　ン　
、　　１　３３．２．　１　５２．８．　　（０−１）
。

１１９．７．１１９．６．１１８．５　（０−６，、ａ
＝ン１１８．８．１１１．５．１１０．５．１１０．４
（ｃ−５゜０−２　Ｌ　５５．３．５５．２　（４ＩＯ
Ｍ８　）、　４６．７゜４ｂ、５．４４．３，４０．７
　（４ｘａＨ）、４２．９゜３９．１　、３８．１　（
３Ｘ　Ｎ−Ｃ！［２）、　２６．２　、２４．８（２”
　Ｏｈ　）−２５ｓ　１７−３　（２”　ＣＨ３）−化
合物ｕ１は酸加水分解（ＮａＯＨ中の２　Ｎ　ＨＣ’ｌ
を使用して、還流下ＶＣ３Ｃ３時間上り下記の化合物Ｉ
を生成した：ｃｎ３化合物（１１）　：　ｌＨＮＭＲ（ＯＤＣｌ３）；δ、
６．６７Ｃ２ＸＩ　Ｈ，ｄ）、６．５７（２ｚｌＨ，ｄ
）、６．２２　　（２ＸＩ　Ｈｌｄ）、４．３［］（２
ｚ　１Ｈ，ｄ）、６．７９Ｃ２ｘ３Ｈ＝　　’　）−５
，７７（２Ｘ　　ｉｎ、ｄ）　、　　３．７５　（２：
１Ｃ６Ｈ，ｕ）、５６５Ｃ２Ｘ　　３Ｈ，ａ）。

工３０　ＲＭＮ　（７４）　ン−’ｉ６）：δ、　１７
　！１．７　Ｃ０＝Ｏ）。

１　５１．４，１　４８．８　　（０−３’、Ｏ−４’
ン、１６２．６（０−１’　）　、　　１２０．８　（
０−６’ン、　　１１３．２（０−２’）、　　１　１
２．０（０−５’）、　　５５．９１　。

５５．８９　（ＯＭす＊　５２．１　（ｃｏｏｎｓ〕、
　４５．６　（ａ−β）。

４３．９　（Ｃ−αン質ｉｉｘベクトル：　Ｍ”４４４．ｍ／ｚ３００　。

グアニｙ一種の化学的特徴式（４）で示される化合物を示唆する構造はスペクトル
吸収データおよびアルカリ加水分解の結果にもとづいて
決定された。

ＯｘｏＨ２ａＮ４（Ｍ−Ｗ、　１９８　）　ｅ質量スペ
クトル（ＦＡＢ）　１９９　（Ｍ　＋１　）“”ＨＮＭ
Ｒスペクトル（ＯＤＣ１３−（’Ｄ３０Ｄ、　３−１　
）　：δ。

５．２　（Ｉ　Ｈ，ｍ、　＝ＣＨ）、　４．０−３．６
０　（１０Ｈ。

ｍ　＊５ｘ　０Ｈ３）、　１−７５　（６Ｈｓ　ａ＠　
２　”　ＣＨｓ）　。

１３（）スペクトル（４・ムｃｏｎ）　Ｃ０Ｄ３０１）
）：δ、１８１（ａｎ、　ｈａｏＨ）　１５５．６　（
Ｃ＝’ＨＨ）、　１３９　ＣＱ＝）。

１１７．５　（０Ｈ＝）、　４０．５．３９，１　、３
９．０　Ｃ３ｘＮ−ＣＢ２）−２５−１ｅ　２４−１　
（２”　ＣＨ２）＊　２４−７　（ＣＨ３ｓＡＣＯＨ）
、　２３．３　、１７．１　（２：　０Ｈ３）。

化合物（４）はＩＪＯ水分解（０，２５Ｎ　Ｎａ（ＯＨ
）２を使用して、還流下に２時間）により、化合物（８
）および（９）（これらの化合物についてはガロに丁で
記載されている〕ならびに尿素な生成させた。

同６グアニド−Ｖの化学的特徴式（５）で示される化合物を示唆する構造はスペクトル
吸収データおよび温和な加水分解の結果から決定された
。

０１６Ｈａ４Ｎ４０５（Ｍ、Ｗ−５２０）　ｅ質量スペ
クトル（ＩＦＡＢ）３２１　［：Ｍ＋１　］“ＡＨＮＭ
Ｒ（ＣＤ３０Ｄ）；　　δ　、７．５ＣＨ−２ン　、　
　７．２（Ｈ−６）、７．０（Ｈ−５）、６．８（Ｈｒ
）、６．ＩＣＨｐ）、　４．０　（２Ｘ　ＯＭＢ）、　
　３．５５−３．３　（２Ｘ　０Ｈ２）−１，９−１−
７（２ｚ　０Ｈ２）。

１３０　ＮＭＲ（ＣＤ３０Ｄ）：　δ、　　１６９．２
　（ｃｏ）、　　１　５７（ａ＝ＮＨ）、１５０．１４
８．９（ｏ−３，ｏ−４）。

１４１．３（Ｃ−α）、１２８．７（ｏ−１）。

１２２．２　（ａ−β）、１２１．９（０−６Ｊ。

１　１５．２，１　１　１．３（０−５，０−２）、５
５．４゜５５−３　（２ｘ　ＯＭθ）−３９−８−５９
（２”　Ｎ−０Ｈ２）　＊２６．８　、２６．３　（２
Ｘ　ＯＨｇ）。

化合物ｔ５）　’ｌ　７１］　水分％　（０，２５Ｎ　
Ｎａ（ｏｎ）ｇを用−１で、還流下に２時間フすると、
シス−およびトランス−３，４−ゾメトキシケイ皮酸の
混合物および９１１３ですでに前記した化合物（７）お
よび（９）が得られる。

例７グアニド−■、すなわち４−［（３，４−ジメトキシシ
ンナモイル）アミノ〕デチルグアニシンの化学合成ジーｔａｒｔ−ブチル　ジカルポネートＵ３５．８９を
５−メトキシチオ尿１ｇ　Ｈ２ＢＯ３（丁なわち、２−
メチル−２−チオシソイド尿素硫酸塩）　（１３２，５
＆に加え、混合物をＣ’Ｈ２Ｃ１２−ＮａＨＯＯｒ３＝
相系（それぞれ５０ｄ＋５０ｍ　）中で、攪拌しながら
、２日間放置し、２個のアミノ基のｔｅｒｔ−ブトキシ
カルボニル（ｔ−Ｂｏｏ　）化を達成する。

この反応式は次の通りである：化合物（１４）２００１１ｖをＴＨＩ！’　５−および
Ｂ２０　［１，ｉ　ｍ中で１．４−ジアミノブタン（テ
トラメチレンジアミン）ＩＡＳ６３ｗｉと反応させる。

反応混合物は５０℃に６時間加熱すると、下記の反応が
生じる：ｔｔｓ　　　　　　　　　ｕｓ　　　　　　　
　　　　　霞溶剤を蒸発させた後に、残留物を５％Ｎａ
ＨＯＯ３で洗浄し、次いで０ＨＣ１３で抽出でる。シリ
カ上で精製した後に、化合物αｆ９１２０ｑが得られる
。

化合物α１５００ｑヲＴａｐ−ＤＭｐ　（５ｓｔ　−５
ｄ　）中で６．４−ジメトキシシンナモイル　クロライ
Ｐ徂η６７０■と１６時間、室温において、下記の反応
式に従い反応させる：（１３圓　　　　　　　　　　Ｉ２相を分離した後に、水フラクションをＯＨｇＣ１２で
さらに抽出する。精製した後に、化合物ａ４３．４Ｉが
得られる。

（１′０（ｌＩ鱈シリカ上で、酢酸エチル−へ＄す：’（１０−９０）に
よる溶出によって８製し′ｆＳ後に、化合物（Ｌ０３０
０■を得る。

次いで、ＴＰＡｌ、５−を化合物２６キに加え、混合物
を室温で４６分間攪拌する。次いで、混合物をＰ２Ｏ３
上で乾燥させ、次にセファデックスＩＪＨ−２０上で、
溶出液としてメタノールを用いてｆ＃製し、グア＝ｙ−
ｖ、丁なわち、化合物（５）１２ｍｇを得る。

ガ８グアニドーエ、すなわち１−（４−Ｃ（ｔ、４−ジメト
キシシンナモイルンアミノ〕ブチル）−６−プレニルグ
アニジンの化学合成プレニル　ブロマイド（ｒ、ど−ジメチルアリルプロマ
イＦ）（ｌ場１．５ｇを、無水ＴＨＦ　１０−中にグア
ニド−ｖ１丁なわち化合物（５）（この化合物は、たと
えば例７の方ｔ、により得られる）１１および触媒有効
緻のＮ、Ｎ’−ジメチルアミノピリジンを含有する溶液
に加える。

反応混合物を攪拌しながら、室温で６時間、保持する。

ｒＩＩ製後に、化合物（３）、すなわちグアニド−Ｉ７
５０ｑが得られる。

この反応式は次の通りである：十列１０１−（３−（（３，４−ジメトキシシンナモイル）アミ
ノ〕ゾａビル）−６−プレニルグアニジンの的８に記載
の方法と同一の方法で、ガ９の化合物のアルキル化によ
り、標題の化合物が得られる。

ＡＵ１１６−［（３，４−ジメトキシシンナモイル）アミＲＩ　
９３−（（３，４−ジメトキシシンナモイル）７ミノ〕デ
ｏぎルグアエゾンの化学合成ガフと同一の方法によるが、化合物（至）（１，４−ジ
アミノデタンノの代りに、１．６−ジアミツプロパンを
使用する。

例７１Ｃ記載の方法を繰返すが、化合物α３の代りに、
ヘキサメチレンジアミン（１，６−ヘキサメチレンジを
使用する。

例１２１−（６−［（！１．４−ジメトキシシンナモイル）ア
ミン〕ヘキシル）−６−プレニルグアニジンの例１１の
化合物を原料として、例８に記載の方法を反復する。

ベルベシナカラカサナの天然エキスの活性を評価するために、このエキスの０．９　％塩化ナトリウ
ム溶液を、クロ２ａ−メで全身麻酔した犬の静脈に「急
速」投与した。（平均）全身的動脈血圧、呼吸数および
引続く両側頚動脈閉塞のレベルに見い出される応答を評
価した。次表１に示されている結果は血圧降下活性が投
与量に比的することを証明しており、最高血圧降下活性
値は２　ｑ／＃の投与量で達成される。

表１動物の　投与量　　　　　ＢＰ　　　　−Δｐ　　　　
−Δｐ５　　　０．５　　　　１６２±１０　２３±１
０　　１６６　　　１　　　　　　１５４±８　　４８
±１８　　６１６２１５９±７　　９２±１４　　５８
４４１５５±６　　８５±８　　　５５ＢＰ＝動脈基礎
血圧一Δｐ；血圧の減少マ９スにこのエキスを投与すると、起毛、刺激および引
続く呼吸停止による致死が生じた。

グアニド−■ その活性を試験するために、０．９％塩化ナトリウム溶
液に溶解したグアニド−■〔化合物（３）〕を、１０係
エチルウレタン（１ｄ／ｈｇ）で麻酔した雄のＷｉｓｔ
ｏｒラットに静脈内「急速」投与（”　ｒａｐｉｄ”ｒ
ｏｕｔθ）により投与した。

グアニ）Ｆ−７を種々の投与量で投与した場合に関して
評価し、次表２に示したパラメーターは次の通りである
：収縮期（ＳＹ８Ｔ）および拡張期（Ｄ工ＡＳＴ）の全
身性動脈血圧の変化（ΔＡＰ）、心拍数の変化（ΔＨＲ
）、心臓変力性の指数としての左心室定積圧（ｉａｏｖ
ｏｌｕｍａｔｒｉｃ　ｐｒｅｓａｕｒｅ）の増加の最高
比（Δｄｐ　／　ｄｔ　）および呼吸数の変化（ΔＲＩ
Ｐ）。

表２に示されている結果はグアニド−■が投与量に直線
状に依存して、ＡＰ値を低下させ、他方ＨＲ、ｄｐ　／
　ｄｔおよびＢＰ値を増１７０させることを示している
。−過性容ｔ（ｔｉｄａｌ　ｖｏｌｕｍｅ）　（ＴＶ）
の場合に、投与されたグアニド−■の投与量に従う直線
状依存性が見られる。このような心臓血管系作用は末梢
アドレナリン受容体のレベル（α１−α２：βｌ−βｚ
）Ｋおける活性成分の有意の作用に相関関係を有するも
のとは見られず、むしろ中枢神経メカニズムに対して〔
これはスビナリゼーション（ａｐｉｎａｌｉｚａｔｉｏ
ｎンの実験およびガングリオン　ブロック（ｇａｎｇｌ
ｉｏｎｉｃ　ｂｌｏｃｋ）の実験により証明することが
できる〕、および末梢作用（ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ−ｅ
ｆｆｅｃｔｏｒｉａｌ）メカニズム、たとえば筋肉収縮
のプロセス、心筋細胞および血管筋細胞九対して相関関
係を有するものと見做される。

将に、心拍数（ＨＲ）は試験した全部の投与量において
、直接的作用（心臓レベルおよび（または）中枢レベル
で】により、そしてまた引続（動脈血圧陣下罠反射して
、増加する。（１１）　／　ｄｔ　Ｋ関しても罹災に同
様のことが考えられるが、化合物の投与量に依存し、試
験した全部の投与量で見い出される呼吸数（ＲＦ）の増
７１０は中枢呼吸センターに対して一定の刺激作用を有
することを明らかに示している。

マウスにおける腹腔内投与（１，ｐ）によるグアニｖ−
１の致死ｔ　５０　（ＬＤ５０）は５７ｑ±３．６／に
９であることが見い出された。

ジグアニド−■ その活性を評価するために、ジグア＝）？−［を０．９
係塩化す）　ＩＪウム溶液に溶解し、１０％エチル　ウ
レタン（１ｖ／ｈｇ）で全身麻酔した、雄のＷｉａｔｅ
ｒラットに静脈内「急速」投与により投与した。

化合物′ｌｔ８＆Ｉ々の投与量で用いて得られた結果を
表６に示す。この表において、腸骨分枝部（ｉｌｉａｃ
ｌ）ｉｆｕｒｃａｔｉｏｎ）における大動脈血流の変化
（／ＡＴ）および拍出址の菱化（／ＳＶ）を前記したパ
２メーメに加えて示す。

表４にはまた、表６に示されている数値に相当するパー
センテージ値を示し、さらにまた、−過性容欺の変化パ
ーセンテージ（ΔＴＶ）を示す。

化合物ジグアニｐ−ｎはＡＰ　、　ＡＰ　、％ＲＦおよ
びＴＶに対して二面性作用′ｌｔ有する。丁なわち、５
０〜１００μｇ／ｍの投与針でＡＰ、ＡＰを増加させ、
あるいは５　（）−２００ｐｇ／に９ｆ）投与ｚでｓｖ
、ＲｐおよびＴＶを増加させ、このようなパラメーター
〇増７ＪＯ′４を示し、一方同一パラメーターをさらに
高い投与ｔ（３２００μｇ　／　＃　１で）では減少さ
せる。

ジグアニド−■で予め処置すると、ノルアドレナリンお
よびアドレナリンの血圧上昇投与量の投与により誘発さ
れた心臓血管応答が減少され、またアセチルコリンおよ
びイソプロテレノールの静脈内投与に対する心臓血管系
の応答が、問題のアビニストの投与量に対して直線状に
増加される。

ヘキサメトン（Ｈｅｘａｍｅｔｏｎ）　（神経節麻酔剤
）で予め処置すると、前記したように、ジグアニド−■
に対する心臓血管系応答が増大され、他方、迷走神経作
用（ｖａｇｏｔｏｎｉｓｍ）はジグアニド−■に対する
応答における如何なる変化にも応じなかった。

災際問題として、低投与１におけるＲＩＦおよびＴＶの
増加は呼吸センターに対する中枢刺激作用によるものと
言うことができる。この化合物の中枢作用はまた、心臓
血管系の場合にも作用を及ぼす。高投与量では、これと
は逆に、呼吸センターに対して抑圧作用を生じ、この作
用は心臓血管系には関連しない。このような作用が末梢
血管抵抗の減少によるものであると言うことができるこ
とは確かである。

この化合物の全投与数における心拍数（ＨＲ）の減少作
用は反射メカニズム［圧力受容メカニズム（ｂａｒｏｒ
ｅａｅｐｔｏｒｉａｌ　ｍｅｃｈａｎｉｓｍＪ］である
と言５ことはできない。このような減少はｄｐ　／　ｄ
　ｔの一定の増加およびＡＩＦ　、　ＢＶ　ｂよびＲ１
１’の応答の相反が存在することによるものである。従
つ【、化合物ジグアニド−■により誘発された心拍数減
少はグアニド−１により発現される作用とは異なり、中
枢メカニズムでは説明することはできないものである。

ジグアニド−■の致死量５０　（ＬＤｓｏ）　を工、マ
ウスにおける腹腔内投与で、７ＩＩｆ±０．６／Ｉ’４
であることが判った。

グアニド−ＩＩＩ、−ＩＶ、−Ｖ、アグマチンおよびガ
れぞれ、表５〜表９に示す。

グアニド一種、−ＩＶ、−Ｖならびにアグマチンおよび
ガレシンと称される活性成分をまた試験した。これらの
化合物は１０係エチルウレタン（１−／ｈｇ１１．ｐ、
）による全身麻酔下の雄のＷｉａｔａｒ２ット（平均体
重２８０±５ｇ）に静脈内「急速」投与により投与した
。−船釣実験条件はグア＝ｙ−Ｉおよびジグア＝）Ｆ−
１１に関して前記した条件と正確に同一であり、心臓血
管系作用および呼吸系作用を比較した。

測定パラメーターは次の通りである：収縮期および拡張
期全身動脈血圧（ＡＰ）　、心拍数（ＨＲ）　、左心室
定積血圧の最大増７ＪＩＩＩ率（ｄｐ／　”）　、呼吸
数（ＲＦ）および−過注容鷺（ＴＶ）。投与皺（体ｆｆ
１ｋｇ当りの活性物質μｇ）は５０μｇ／ゆ〜６４００
μｇ／ゆ（比率＝２．０）で変え、成る場合には、さら
に高い投与敏を採用した。

グアニｐ−ｔｎ、グアニド−■、グアニド−ｖ１アグマ
チンおよびガレジンに係る実験データなそ化合物グアニ
Ｐ−ｉｔ（表５）は収縮期および拡張期動脈血圧降下（
これは８００μｇ／に９の投与量から始まって良好に証
明されている）、心拍数減少、ｄｐ　／　ｄｔ　（１）
増１ｘＪ（３２００’ｐｇ１ｋｇｆ）投与ｉまで）、Ｒ
ＦおよびＴＶの増１ｘＪ（１６００ｐｇ／にの投与量ま
で）を生じさせた。ＲＦおよび品は６２００μｇ／ｍの
投与量で減少した。６４００μｇ／に９の投与量は試験
動物を死亡させた。初期の呼吸ブロックの後に、動脈血
圧降下が生じ、次いでＨＲおよびｄｐ　／　ｄｔの減少
の増２１１０が生じた。

ＴＶはＲＦより前に関係を示した。

５０〜６４００μｇ／ｋＩＩの投与量で試験した化合物
グアニド−ＩＶ（表６）はグアニド−■と同様の作用を
示したが、その効力は弱い。収縮期および拡張期の動脈
血圧降下、心拍数減少、ｄｐ　／　ｄ　ｔの増ＤＯが見
られ、ＲＦおよびＴＶは１６００μｇ／ユの投与ｔｔで
増ＤＯシ、さらに高い投与量では減少した。試験した最
高投与量でも動物の致死は生じなかった。

化合物グアニド−■（表７）は収縮期および拡張期の動
脈血圧降下を生じさせ、これは３２００ｐｇ／匈の投与
量から一層明白になる。心拍数減少に１６４００μｇ／
ゆの投与量から始まって見られた。ｄｐ　／　ｄｔおよ
びＲＦの僅かな減少は最高投与ｔｇで見られる。ＴＶは
類似の傾向を示した。

アゲメチン（表８）により生じたＡＰおよびＨＲの変化
はグアニド−■により生じた変化と同様であった。さら
にまた、この活性成分はｄｐ　／　ｄｔ　。

ＲＩＦおよびＴＶの一定の増加を生じさせた。

ガレシン（表９）を工ｄｐ／改ｔＳＲ？およびＴＶの一
定の増加を伴なって、５０μｇ／ｋｆの投与量から丁で
に、収縮期および拡張期の動脈血圧降下および心拍数減
少を生じさせた。極めて高い投与量（２５６００および
５１２００μｇ／ｍ）でだけ、−次性呼吸抑圧（ＲＦお
よびＴＶの減少ンおよび引続く動脈血圧降下、心拍数減
少および心臓変力性（ｄｐ　／　ｄりの減少を生じさせ
、試験動物を死亡させた。

グアニジンとの比較前記活性成分と比較するために、グアニシンな静脈内「
急速」投与により投与したが（５０〜８００ｐｇ／＃）
、被験う７トニオＩ、’て、ＲＦＳＴＶおよび皿の有意
の変化は生じなかった。他のパラメーターは６４００〜
１２６００μｇ／ｍのグアニシン投与量で僅かな変化を
示した。５０〜８００μｇ／に９の投与量範囲で、グア
ニシンは血圧降下応答を僅かに上昇させたが、有意では
なく、またｄｐ　／　ａｔの少しの減少を示した。さら
に高い投与量では、グアニジンは全身性動脈血圧に関す
るかぎりにおいて、心臓変力性（ｄｐ　／　（Ｌりの僅
かな増加およびＲＦおよびＴＶの減少と組合されている
僅かに自主的な二面性応答（血圧降下−血圧上昇）を、
採用された投与量とは直線状関係を有することなく１．
生じさせた。

既知活性化合物との比較従来技術の化合物の活性と本発明の化合物の活性とを比
較するために、既知の抗高血圧医薬、血圧降下性医薬お
よび血管作用性医薬を種々の投与量で、ナトリウムチオ
ベンタール（５０ｍｇ／！Ｋｇ、ｉ、ｐ、）により全身
麻酔した雄のＷｌｓｔｅｒ　？ットに投与した。投与は
「急速」静脈内投与により、あるいは５分間にわたる静
脈内潅流（ｉｎｆ、）　Ｋ・より行なった。

収縮期および拡張期の全身性動脈血圧の変化（ΔＡＰ）
　、心拍数の変化（ΔＨＲ）および左心室定積血圧比の
最大増加の変化（Δｄｐ／ｄｔ）４Ｃついての応答を次
表１０に示す。

表１０には最高応答が示されている。各化合物の投与量
は塩基によるものであり、注射量は１．ｖ。

投与の場合に、１００ｍｃＪであり、潅流投与の場合に
は、全体で肌１７　ｍａＪ−である（　０．９　％塩化
ナトリウム溶液）、種々のバクメーターは前記実験と同
一の方法で評価した。

表１０のデータから見ることができるように、−次性お
よび二次性動脈高血圧症の治療剤および多様の症状の血
管系障害の治療剤（グアニチゾン、クロニシン、レゼル
ビン、パパペリンなど〕として、はとんどおよびまた主
として使用されている血圧降下剤、抗高血圧剤または血
管系作用剤は通常、種々の血行力学的パラメーターに対
して、−投的「抑制」作用を有することを特徴とするも
のである。

血圧降下応答を示すことができるとともに、心拍数およ
び変力性、ならびに呼吸数（およびまた、従って末梢動
脈血流）を増加させることができるグアニ）Ｆ−７のよ
うな医薬が利用できるということは、前記医薬に比較し
て、明らかに有利な治療上の助けになる（多くの明白な
観点からンことは明らかである。

グアニド−■に対して血圧降下作用の点でさらに高い薬
理学的効力を有することを特徴とする化合物、ジグアニド−■は心臓変力性に対して一定の刺激作用を
示す。さら疋また、この化合物は全ての投与量において
、如何なる反射性頻脈も生じさせない。反射性頻脈は市
販されている大部分の血圧降下用医薬（たとえば、動脈
血管拡張作用を有する医薬およびゾ２ゾシン、ヒト２シ
ノーフタラジン誘導体などの選択的α１−ブロッキング
剤を除く全てのα−デロッキング剤）の代表的な望まし
くない作用である。末梢動脈血流の増加（低投与級で見
られるンは虚血状態の場合に有利であることができ、こ
の効果は心臓血管系および呼吸系のパラメーターに対し
て僅かな変化を生じさせるだけである。

従って、たとえば、末梢血管抵抗により発症した動脈高
血圧症（「本態性」高血圧症、血管硬化症など）の処１
１にゾグアエｖ−■の採用が奨められる。

Claims

【特許請求の範囲】

（１）式（１） ▲数式、化学式、表等があります▼（１）（式中、Ｒ＾１は水素または場合により置換されている
シンナモイルであり、Ｒ＾２は水素、アルキルまたはアルケニルであり、ただ
し、Ｒ＾１およびＲ＾２は両方ともに水素であることは
できない、そしてｎは１〜８の整数である）あるいは式（２） ▲数式、化学式、表等があります▼（２）（式中、Ｒ＾３はトルキシノイルまたはトルキシロイル
であり、これらの基はそれぞれ、置換されていてもよく
、そしてＲ＾２およびｎは前記定義のとおりである）で示される
グアニジン誘導体。
（２）Ｒ＾２が炭素原子１〜５個を有するアルキルまた
はアルケニルである、請求項１に記載のグアニジン誘導
体。
（３）Ｒ＾２がプレニルである、請求項２に記載のグア
ニジン誘導体。
（４）式（３） ▲数式、化学式、表等があります▼（３）で示される、請求項３に記載のグアニジン誘導体。
（５）式（４） ▲数式、化学式、表等があります▼（４）で示される、請求項３に記載のグアニジン誘導体。
（６）式（５） ▲数式、化学式、表等があります▼（５）で示される、請求項１に記載のグアニジン誘導体。
（７）式（６） ▲数式、化学式、表等があります▼（６）で示される、請求項２に記載のグアニジン誘導体。
（８）医薬的に許容される担体中に、有効量の請求項１
〜７に記載の化合物の一種または二種以上を含有する、
高血圧症処置用の医薬組成物。
（９）医薬的に許容される担体中に、ベルベシナ種（Ｖ
ｅｒｂｅｓｉｎａ）の植物のエキスを含有する、高血圧
症処置用の医薬組成物。
（１０）上記植物がベルベシナカラカサナ（Ｖｅｒｂｅ
ｓｉｎａｃａｒａｃａｓａｎａ）である、請求項９に記
載の医薬組成物。
（１１）請求項１〜７に記載の化合物を植物材料から抽
出し、そして精製する方法であつて、イ）植物材料を抽出用のアルコール系溶剤を用いて小片
に処理するか、または粉砕し、ロ）この溶剤を減圧で除去し、ハ）抽出残留物を酢酸エチルと水とに分配させ、ニ）生成する水部分を真空凍結乾燥（凍結乾燥）させる
、操作を含むことを特徴とする方法。
（１２）上記操作ハ）から生成する酢酸エチル部分をさ
らに水で抽出し、このようにして得られた水抽出液を上
記操作ハ）から生成する水部分に加える、請求項１１に
記載の方法。
（１３）請求項１〜７に記載の化合物を植物材料から抽
出し、そして精製する方法であつて、ｉ）植物材料を、室温において水を用いて小片に処理す
るか、または粉砕して、抽出を行ない、ｉｉ）生成する水溶液を真空凍結乾燥（凍結乾燥）させ
る、操作を含むことを特徴とする方法。
（１４）上記操作ニ）またはｉｉ）から生成する凍結乾
燥させた天然エキスを無水アルコール系溶剤中に再懸濁
し、次いでこの溶剤を蒸発により除去し、このようにし
て、精製された天然エキスを得る、請求項１１〜１３の
いずれか一つに記載の方法。
（１５）上記天然エキスを再溶解し、懸濁液を濾過し、
次いで溶剤を蒸発させることよりなる上記操作をさらに
繰返す、請求項１４に記載の方法。
（１６）上記天然エキスをシリカカラムに通し、増加す
る量でメタノールを含有するクロロホルムにより溶出す
ることによつて、その成分を分離させる、請求項１１〜
１３のいずれか一つに記載の方法。
（１７）上記天然エキスを、セフアデツクスＬＨ−２０
を用い、メタノールで溶出して、その成分を分離させる
、請求項１１〜１５のいずれか一つに記載の方法。
（１８）上記植物材料をベルベシナカラカサナ（Ｖｅｒ
ｂｅｓｉｎａｃａｒａｃａｓａｎａ）から得る、請求項
１１〜１７のいずれか一つに記載の方法。