JPS6248633A - 抗アレルギ−剤及び気管支拡張剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 （産業上の利用分野） 本発明は抗アレルギー剤及び気管支拡張剤に関する。

（従来の技術） アシル基を有するペプチドの１例は例えば特開昭５９−
９５２５２に開示されている。

また、抗アレルギー剤としては抗ヒスタミン剤が、また
気管支拡張剤としては交感神経刺激剤（β−アドレナリ
ン受容体刺激剤）等が使用されている。

（発明の解決しようとする問題点） 従来アレルギー疾患特にＩ型アレルギー疾患に使用され
てきた抗ヒスタミン剤は重症の患者には無効であり、こ
のような患者にはステロイド剤が使用されてきた。しか
しステロイド剤には強い副作用があり、その使用には限
界があった。そこで同様な作用を示し、かつ副作用の無
い薬物が望まれている。

また、従来気管支拡張剤として使用されているβ−アド
レナリン受容体刺激剤等は薬剤に対する耐性が生じる事
などから新しい作用模作の気管支拡張剤の要望も強い。

（問題点を解決するだめの手段） 本発明は下記式 （式’ＰＲ１は一〇１５Ｈ２７または−Ｃ１４Ｈ２９、
Ｒ２はＡｌａ又はＶａｌを示し、　　Ｇｌｕ　、　Ｏｒ
ｎ　、　Ｔｙｒ　、　Ｔｈｒ　、　Ｐｒｏ　。

Ｇｉｎ　、工１θ、　Ａｌａ又はＶａｌはそれぞれグル
タミン酸、オルニチン、チロシン、トレオニン、プロリ
ン、グルタミン、インロイシン、アラニン。

またはバリンの各アミノ酸を示す。）で表わされる新生
理活性物質プリパスタチン（ＰｌｉＰａｓｔａ−ｔｉｎ
）　　又はその塩を有効成分として含有する抗アレルギ
ー剤及び気管支拡張剤に係る。

本発明の有効成分であるプリパスタテンは例えばバチル
ス・セレウスＢＭＧ　５　ｏ　２．−　ｆＦ６７　　（
微工研菌寄第７８４３号）株により生産される生理活性
物質で下記の４つの化合物があ抄、上記一般式（１）に
おいてＲ２がム１ａを示す場合の化合物をＡ群、Ｒ２が
Ｖａｌを示す化合物を３群とする。

（１）　　プリパスタテンＡ１ （２）　　プリパスタチンＡ２ （３）　　プリパスタテンＢ１ （４）　　プリパスタチンＢ２ 本発明の抗アレルギー剤及び気管支拡張剤は、一般式Ｃ
Ｄで表わされる誘導体またはその塩を製剤上許容される
担体と組み合わせて適当な投与剤形に調製される。投与
方法は経口または非経口いずれの方法でもよい。例えば
、プリパスタチンを常法を使用して製剤上許容される通
常の賦形剤および添加剤を用いて顆粒剤、カプセル剤１
錠剤。

火剤、粉末剤または経口用溶液剤等に製剤し、経口投与
することができる。また注射剤及び主剤などの非経口製
剤として使用することもできる。

更に吸入投与には鼻腔内または口腔内スプレーの形をと
ることができる。

また場合によっては外用剤としてはクリーム剤、軟膏剤
、ローション剤、貼布剤などでも使用で色る。

上記製剤に使用される一般的な担体を次に例示する：糖
類（例えば、乳塘、Ｒ糖、マンニトール。

ソルビトール）；澱粉（例えば、トウモロコシ澱粉、タ
ピオカ澱粉、バレイショ１ｌｉｌｌ））ｉセルロースお
よびその誘導体（例えば、カルボキシメチルセルロース
ナトリウム、エチルセルロース、メチルセルロース）；
燐酸カルシウム（例えば、燐酸二カルシウム、燐酸三カ
ルシウム）；硫酸ナトリウムｉ硫酸カルシウムｉポリビ
ニルピロリドン；ポリビニルアルコール；ステアリン酸
；ステアリン酸のアルカリ土類金属塩（例えば、ステア
リン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム）；植物
油（例えば、落花生油、綿実油、ゴマ油、オリーブ油、
コーン油）；非イオン、陽イオンおよび陰イオン界面活
性剤；エチレングリコールポリマー；ヘーターシクロデ
キストリン；脂肪アルコール；穀類の加水分解固形物；
および他の無毒性の適合する充填剤、結合剤、崩壊剤、
緩衝剤、防腐剤、抗酸化剤、滑沢剤、風味剤および医薬
組成物に常用されるもの。

本発明治療剤の投与量、投与回数および投与方法は患者
の年齢１体重および状態さらに治療される病気の程度な
どの諸要因を考慮して決定されるので一律に決めること
はできないが、一般的に成人１人１日当り０．０１〜２
０００■、好ましくは０．１〜１０００　ｆｆ１９の用
量で１〜４回の範囲で投与される。

（作　　用） 次に式〔Ｉ〕の化合物の薬効薬理試験について説明する
。

（１）　　抗アレルギー作用 プリパスタテンＡ１　　の抗アレルギー作用について　
Ｐ　　ＣＡ　　（Ｐａ５ｓｉｖｅ　　ｃｕｔ、ａｎｅｏ
ｕｅ　　ａｎａｐｈｙｌａｘｉｅ　　）　　反応抑制効
果を指標にした試験例を挙げて説明する。

試験例１ 本例はＰＣＡ反応に対するプリパスタチンＡ１の抑制効
果を示す。以下の実験は常法に従って行った（参考文献
　Ｊ、工ｍｍｕｎｏｌｏｇｙ、　１０６　、１００２〜
１０１１．１９７１）。すなわち、エラグアルブミンを
抗原として用いてラットを感作し抗血清を得た。この抗
エッグアルブミン血清５０μｍをＳ−Ｄ系ラット（雄、
８週令）の背部に皮肉注射して受身的に感作を行りた。

゛４８時間後、ラット毎にエラグアルブミン（２，５１
℃ｇ）トエバンスプルー（２・５η）とを含有する生理
的食塩水を静脈内注射してチャレンジを行い、６０分後
、感作部位にみられるエバンスブルー漏出による青色色
素斑出現の有無を判定した。

生理的食塩水に溶解した被検薬（１５０／ｊｌ）　　は
チャレンジ、０５分前に感作部位に皮肉投与した。

対照薬としてＤ　８　ＣＧ　（ｄｉｅｏｄｉｕｍ　ｃｒ
ｏｍｏｇｌｙｃａｔｅ）を用いた。試験結果を次表に示
す。

第　　４　　表 第４表に示す様に、プリパスタチンＡ１　　は５９０μ
Ｍ、５９μＭ　の局所皮肉投与により、　ＤＳＣＧと同
程度のＰＣＡ反応抑制作用が認められた。

また、プリパスタテンＡ１１０■／ＫＰをチャレンジの
１５分前に静脈内投与することによっても有意なｐｃム
反応抑制作用が認められた。

この結果から１本物質は喘息、花粉症及びアトピー性皮
膚炎などのｌ型アレルギーに対して抑制効果を示すこと
が認められた。

（２）　　気管平滑筋弛緩作用 プリパスタチンＡ１　　は強い気管平滑筋弛緩作用を有
している。プリパスタテンＡ１　　の摘出気管平滑筋弛
緩作用について、試験例を挙げて説明する。

試験例 本例は摘出気管平滑筋に対するプリパスタテンＡ１　　
の弛緩作用を示す。

以下の実験は常法に従って行った。

（参考文献、　Ｃｈｅｍ、　Ｐｈａｒｍ、　Ｂｕｌｌ、
　６．７１６．１９５８　）すなわち雄性Ｉ−−）レー
系モルモツ）（４００〜５Ｇ０Ｓｌ）を撲殺後、頚部気
管を摘出した。平滑筋が中央になるように軟骨を縦に切
り、ついで横に１４〜１６個に切り気管小片とした。こ
の気管小片６個を軟骨の部分で重ね糸でつなぎ合わせた
。

両端を糸で結び一方はオルガンパス（Ｏｒｇａｎ　ｂａ
ｔｃｈ）内に固定し一方はトランスジューサーに結んだ
。

オルガンパス（Ｏｒｇａｎ　ｂａｔ、ｈ）は３７℃のテ
ロード（Ｔｙｒｏｄｅ）液で満たし混合ガス（９５％０
２＋５％Ｃ０２）を通気した。

負荷は０．５りとし等張力性トランスジューサ（Ｍｌｎ
Ｃ，Ｍｌｌｉ−４０１２）を用いて自動平衡記碌計（高
車Ｒ−１２Ｍ）で記録した。気管平滑筋をヒスタミンで
収縮させ、生理食塩水に溶解したプリパスタテンＡ１　
　をバス（ｂａｔｈ）　　白濃度で１０　　Ｍとなるよ
うに加え弛緩作用やみた。弛緩作用の程度は、バパベリ
／をｓ　ｘ　ｔ　ａ−５Ｍ加えた時の弛緩を１ｏｏ％弛
緩として、それに対する割合で評価した。

その結果プリパスタテンＡ１を１０　　Ｍ添加すること
で８’４．８％の弛緩率が観察された。

この結果から本物質は、閉塞性肺疾患の治療に有効であ
ることが認め゛られた。

急性毒性 本発明化合物の毒性は比較的弱く１例えばマウスに対す
る急性毒性試験では、プリパスタチンＢ。

のＬＤ５ｏは腹腔内投与で２５０〜５００ｍ９７Ｋｐを
示した。

以下１本発明の実施例を示すが、これは単なる一例示で
あってなんら本発明を限定するものでなく１種々の変法
が可能である。

実施例１ 注射剤 プリパスタチンＢ１　　のカリウム塩５０重量部に対し
精製水９７０部を加え溶解後ミリポアフィルターＧＳタ
イプを用いて除菌濾過する。この炉液２ｄを１０ｄのバ
イアル瓶にとり凍結乾燥し、凍結乾燥注射剤を得た。

実施例２ 顆粒剤 プリパスタテンＡ１　　のカリウム塩５０重量部。

乳糖６００部、結晶セルロース３３０部及びヒドロキシ
プロビルセルロー２２０部をよ＜　［ｉ　Ｌ。

・−ル型圧縮機（・−ラー・ンバクター■）を用いて圧
縮し、破砕して１６メツンユと６０メツシユの間に入る
よう篩遇し、顆粒とした。

参考例 ５００ａｌ？容三角フラスコにグリセリン２．５％。

牛肉エキス（極東社製）０．５％、ポリベグトン０．５
％、酵母エキス（オリエンタル１ｌｌ）１．０％。

塩化ナトリウム０．２係、硫酸マグネシウム・７水塩０
．０５％、リン酸第２カリウム０．０５％、炭酸力ルン
ウム０．５２％、消泡剤としてンリコンＫＭ−７０（信
越化学社製）；大豆油（局法）（１：１）の混液Ｏ，Ｏ
Ｓ％、ｐＨ７，４，１２０℃、２０分間オートクレーブ
滅菌した培地１２０ｄを分注しこれにプリパスタチン生
産菌（微工研菌寄第７８４３号）１白金耳を接種し、２
７℃、１８０回転／分の回転式振盪機にて１日間培養し
た。この前培養液１ゴを前記培地１２０ｄを分注滅菌し
た５　００　ｇ／の三角フラスコへ移植し、前記同条件
下で１日間振盪培養した。培養液はｐＨ７・４で菌体を
戸別し、Ｐ液１８ｔを得た。このｐ液のホスフォリパー
ゼＤ阻害活性（ＩＣｓｏ）は３２μｍ／屑ｔであった。

このＦ液をアンバーライトＸＡＤ−７（２ｔ）を充填し
たカラムに通し、酵素阻害物質を吸着させ、水洗（８ｔ
）後、８０チメタノール（４ｔ）で溶出した。活性区分
を集め、減圧下で濃縮乾燥することにより茶褐色の粗粉
末２４−６ｙ′（工Ｃ５０””１８μｇ／ａｌ）を得た
。

次にこのｎ−プロパツール溶液を、予めｎ−プロパノー
ルで充填したシリカゲル（１ｔ）のカラムへ通し、順次
ｎ−プロパツール（８００ｍ　）　。

９０％ｎ−プロパツール水溶液（２ｚ）、ａｏチｎ−プ
ロパツール水溶液（Ｚ、ＳＺ）で溶出し、活性区分を集
め、減圧下で濃縮乾燥する。９０％プロパツール溶出区
分より本物質Ｂ群（Ｂ１及びＢ２）を含む黄褐色粉末ｚ
、１ｓ？（工Ｃ５０１５ｒｇ／ｄ）そして８０％プロパ
ツール溶出区分より本物質Ａ群（Ａ１及びＡ２）を含む
黄褐色粉末２．０ｒ（工Ｃ５゜９．５μｇ／＝）をそれ
ぞれ得た。得られた本物質Ａ群の黄褐色粉末を予めメタ
ノール：酢酸緩衝液（１％酢酸カリウム、３％酢酸、１
）Ｈ５）＝（６：４）の溶液で充填したシラナイズド７
り力ゲル（４ｏｏ４）のカラムへ通し、前記の溶液で溶
出した。得られた活性区分を集め濃縮乾燥後少量の８０
％メタノールに溶かし、セブァデソクスＬＨ−２００カ
ラム（８０％メタノール溶出）によって過剰の酢酸カリ
ウムを除く脱塩操作により活性区分を集め、減圧下で濃
縮乾燥し、淡黄色の粉末９９４■（工Ｃ５０？、５μｇ
／厚ｌ）を得た。次にこの粉末を予めアセトニトリル：
酢酸緩衝液（２φ酢酸カリウム、６％酢酸、ｐＨ４）＝
（１：　１）の溶液で平衡化した高速液体クロマトグラ
フィ（ＨＰＬＣ）用カラム（センシュー科学社製、マク
レオシ＃５Ｃ１Ｂ２０φＸ　３００　ｍ／ｍ　、流速８
　ｒａｔ　／　ｍ１ｎ）へ通し、前記平衡液で溶出した
。得られた活性区分Ａ１及びＡ２を集め、それぞれ濃縮
乾燥後、先のシラナイズドシリ力の溶出液で行った脱塩
操作と同じ方法により脱塩することにより無色粉末プリ
パスタチアＡ１５４２”ｇ（工Ｃ５０＝　２．１μｇ／
ｍｅ）及び無色粉末プリパスタチンＡ２１５２■（工Ｃ
３０＝３・８μｇ／ａｄ）を得た。

一方、先のシリカゲルの９０％ｎ０％ｎ−プルパノール
分より得られた本物質Ｂ群（Ｂ１及びＢ２）を含む黄褐
色粉末を予め４０％メタノールで充填したシラナイズド
シリカゲル（ｚｏｏａｘ）のカラムへ通し、４０％メタ
、ノール（１，５ｔ）、６０チメタノール（１，５ｔ）
で溶出した。得られた活性区分を集め濃縮乾燥後、少量
の８０％メタノールに溶かし、セファデックスＬＨ−２
０のカラムに通し、８０％メタノール溶液で溶出した。

得られた活性区分を集め濃縮乾燥し、淡黄色の粉末５４
５ｍ？　（工Ｃｓｏ　＝　８　μｇ／ｍｌ　）を得た。

次にコノ粉末ｔ−予めアセトニトリル・酢酸緩衝液（２
％酢酸カリウム、６％酢酸ｐＨａ）＝＝（６ｓ＝ｓｓ）
の溶液で平衡化し九ＨＰ　Ｌ　Ｃ用カラム（ヌクレオシ
ル５ＣＩＢ　２０φＸ　３０　ｏ　ｍ／ｍ　、流速８　
ｒａｔ　／　ｍ１ｎ）　ヘ通し、前記平衡液で溶出した
。得られた活性区分Ｂ１及びＢ２を集めそれぞれ濃縮乾
燥後、セファデック７、ＬＨ−２０のカラムから８０％
メタノールで溶出し脱塩することにより、無色粉末プリ
パスタテンＢ１１Ｂ１１５ｌ工Ｃ５ｏ＝２．８Ｑ／ｄ）
及び無色粉末プリパスタテンＢ２８９■（工Ｃｓｏ　＝
　３−５　ＰＦＥ／ｄ）を得た。

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. （１）次の一般式 ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中Ｒ＿１は−Ｃ＿１＿３Ｈ＿２＿７または−Ｃ＿１
   ＿４Ｈ＿２＿９、Ｒ＿２はＡｌａ又はＶａｌを示す。）
   で表わされる新生理活性物質プリパスタチン又はその塩
   を有効成分として含有する抗アレルギー剤及び気管支拡
   張剤。