JPH022881B2 - - Google Patents
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Landscapes
- Separation Of Suspended Particles By Flocculating Agents (AREA)
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- General Preparation And Processing Of Foods (AREA)
- Jellies, Jams, And Syrups (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は新規多糖類さらに詳しくは、エンテロ
バクター属（Enterobacter）に属する細菌から
産生される新規な多糖類に関する。
バクター属（Enterobacter）に属する細菌から
産生される新規な多糖類に関する。
本発明者らは微生物による多糖類の生産につい
て研究を重ねた結果、エンテロバクター属に属す
る細菌が極めて水溶性であり、塩の存在下におい
ても粘度が低下しないという興味のある多糖類を
産生することを見出し、本発明を完成した。
て研究を重ねた結果、エンテロバクター属に属す
る細菌が極めて水溶性であり、塩の存在下におい
ても粘度が低下しないという興味のある多糖類を
産生することを見出し、本発明を完成した。
本発明の多糖類は、たとえば次のような方法で
製造することができる。
製造することができる。
エンテロバクター属に属し、該多糖類を生産す
る能力を有する細菌を栄養培地に培養し、その
液から、生成した多糖類を常法に従つて沈澱、精
製して製造することができる。
る能力を有する細菌を栄養培地に培養し、その
液から、生成した多糖類を常法に従つて沈澱、精
製して製造することができる。
本発明において用いることのできる微生物とし
ては、エンテロバクター・ニチデニイ
（Enterobacter nichidenii）（微工研菌奇第5928
号）が典型的な例として挙げられる。上記の、微
工研菌受理番号は工業技術院微生物工業技術研究
所の受理番号を表わす。
ては、エンテロバクター・ニチデニイ
（Enterobacter nichidenii）（微工研菌奇第5928
号）が典型的な例として挙げられる。上記の、微
工研菌受理番号は工業技術院微生物工業技術研究
所の受理番号を表わす。
本菌の菌学的性質は以下のとおりである。
１ 形態的性質
形 態 ：単桿菌 胞子を形成しない
運 動 性：あり
大 き さ：1.0〜1.5×1.5〜2.0μ
グラム染色：陰性
抗 酸 性：陰性
鞭 毛 ：周毛
２ 各培地における生育状態
(1) 肉汁液体培養 白濁する
(2) リトマスミルク 赤変する
(3) 肉汁寒天板培養 円形、縁辺entire平滑、
少しもり上がる白色 (4) 肉汁寒天斜面培養 糸状、平滑、白色 (5) グルコース肉汁寒天培養 円形、平滑、白
色 (6) 肉汁ゼラチン穿刺培養 液化せず (7) ゼラチン穿刺培養 液化せず ３ 生理学的性質 (1) 最適生育温度 37℃ (2) 生育PH５〜10 最適生育PH７〜８ (3) 酵素要求性 通性嫌気的 (4) インドール生成 陰性 (5) 硫化水素生成 陰性 (6) 硝酸塩の還元 陽性 (7) 脱 窒 反 応 陽性 (8) メチルレツド試験 陰性 (9) Ｖ−Ｐ反応 陽性 (10) でんぷんの分解 陰性 (11) カタラーゼ 陽性 (12) オキシダーゼ 陰性 (13) クエン酸の利用 陽性 (14) 無機窒素源の利用 （NH4）2SO4、
NaNO3を利用する (15) ウレアーゼ 陽性 (16) Ｏ−Ｆテスト 醗酵的 (17) 色素の生成 キングＡ培地で色素生成せ
ず キングＢ培地で蛍光色素生成せず (18) 炭素化合物の利用 マンノース（＋）、
ラムノース（＋）、ソルビツト（＋）、フラク
トース（＋）、マルトース（＋）、ラフイノー
ス（＋）、グリセリン（＋）、キシロース
（＋）、でんぷん（＋）、ガラクトース（＋）、
アラビノース（＋）、グルコース（＋）、リボ
ース（＋）、シヨ糖（＋）、乳糖（＋）、マン
ニツト（−）、マロン酸（＋）イノシツト
（＋）、トレハロース（＋）（＋：生育する、
酸・ガス発生する、−：生育せず） (19) フエニルアラニン脱アミノ反応 陰性 (20) KCN存在下の生育 陰性 （以上の菌学的諸性質をもとにして、バージーの
マニユアル・オブ・デイタミネテイブ・バクテリ
オロジー（Bergey′s Manual of determinative
bacteriology）第８版により検策した。） 本菌株はグラム陰性桿菌、発酵的、カタラーゼ
陽性、オキシターゼ陰性、硝酸塩の還元陽性によ
りエンテロバクテリアシー科
（Enterobacteriaceae）に属する。
少しもり上がる白色 (4) 肉汁寒天斜面培養 糸状、平滑、白色 (5) グルコース肉汁寒天培養 円形、平滑、白
色 (6) 肉汁ゼラチン穿刺培養 液化せず (7) ゼラチン穿刺培養 液化せず ３ 生理学的性質 (1) 最適生育温度 37℃ (2) 生育PH５〜10 最適生育PH７〜８ (3) 酵素要求性 通性嫌気的 (4) インドール生成 陰性 (5) 硫化水素生成 陰性 (6) 硝酸塩の還元 陽性 (7) 脱 窒 反 応 陽性 (8) メチルレツド試験 陰性 (9) Ｖ−Ｐ反応 陽性 (10) でんぷんの分解 陰性 (11) カタラーゼ 陽性 (12) オキシダーゼ 陰性 (13) クエン酸の利用 陽性 (14) 無機窒素源の利用 （NH4）2SO4、
NaNO3を利用する (15) ウレアーゼ 陽性 (16) Ｏ−Ｆテスト 醗酵的 (17) 色素の生成 キングＡ培地で色素生成せ
ず キングＢ培地で蛍光色素生成せず (18) 炭素化合物の利用 マンノース（＋）、
ラムノース（＋）、ソルビツト（＋）、フラク
トース（＋）、マルトース（＋）、ラフイノー
ス（＋）、グリセリン（＋）、キシロース
（＋）、でんぷん（＋）、ガラクトース（＋）、
アラビノース（＋）、グルコース（＋）、リボ
ース（＋）、シヨ糖（＋）、乳糖（＋）、マン
ニツト（−）、マロン酸（＋）イノシツト
（＋）、トレハロース（＋）（＋：生育する、
酸・ガス発生する、−：生育せず） (19) フエニルアラニン脱アミノ反応 陰性 (20) KCN存在下の生育 陰性 （以上の菌学的諸性質をもとにして、バージーの
マニユアル・オブ・デイタミネテイブ・バクテリ
オロジー（Bergey′s Manual of determinative
bacteriology）第８版により検策した。） 本菌株はグラム陰性桿菌、発酵的、カタラーゼ
陽性、オキシターゼ陰性、硝酸塩の還元陽性によ
りエンテロバクテリアシー科
（Enterobacteriaceae）に属する。
さらにメチルレツド陰性、Ｖ−Ｐ反応陽性、フ
エニルアラニン脱アミノ反応陰性、硝酸塩の還元
陽性、ウレアーゼ陽性、最適生育温度37℃、
KCN存在下の生育陰性、である特徴を有する。
これらの特徴をすべて満足する族はないがKCN
存在下の生育を除き、族クレブシラエ
（Klebsielleae）に合致する。本菌が族に包含
されるものとして検策を行なうと、本菌ともつと
も近い性質を有する属は、運動性あり、ソルビツ
ト利用陽性、赤色色素の生成陰性などの性質から
エンテロバクター属と考えられる。
エニルアラニン脱アミノ反応陰性、硝酸塩の還元
陽性、ウレアーゼ陽性、最適生育温度37℃、
KCN存在下の生育陰性、である特徴を有する。
これらの特徴をすべて満足する族はないがKCN
存在下の生育を除き、族クレブシラエ
（Klebsielleae）に合致する。本菌が族に包含
されるものとして検策を行なうと、本菌ともつと
も近い性質を有する属は、運動性あり、ソルビツ
ト利用陽性、赤色色素の生成陰性などの性質から
エンテロバクター属と考えられる。
以上述べた通り、本菌はエンテロバクター属の
既知種およびその他の既知種とも重要な細菌学的
性質において異なる。よつて本菌はエンテロバク
ター属の新種として認めることが妥当であり、ニ
チデニイ（Nichidenii）という種形容名を与え
る。
既知種およびその他の既知種とも重要な細菌学的
性質において異なる。よつて本菌はエンテロバク
ター属の新種として認めることが妥当であり、ニ
チデニイ（Nichidenii）という種形容名を与え
る。
本菌を培養する場合、栄養培地の炭素源として
は一般に用いられている物質（たとえばグルコー
ス、シヨ糖、でん粉分解物など）を約20〜100
ｇ／、窒素源としては、酵母エキス、ペプト
ン、デイステイラーズゾルブル、硫酸アンモニウ
ム、硝酸ナトリウムなどを窒素源として約１〜10
ｇ／、さらに、無機塩類としてリン酸塩源約
0.3〜２ｇ／、マグネシウム源約0.1〜２ｇ／
、カリウム源約0.3〜２ｇ／、カルシウム源
約0.05〜10ｇ／、硫酸塩源約0.1〜２ｇ／を
処方する。これらの無機塩類の例としては
KH2PO4、K2HPO4、MgSO4、CaCO3などが挙
げられる。これら成分を水道水に加えてなる培地
に上記微生物を接種し、常法により好気的に震盪
培養する。
は一般に用いられている物質（たとえばグルコー
ス、シヨ糖、でん粉分解物など）を約20〜100
ｇ／、窒素源としては、酵母エキス、ペプト
ン、デイステイラーズゾルブル、硫酸アンモニウ
ム、硝酸ナトリウムなどを窒素源として約１〜10
ｇ／、さらに、無機塩類としてリン酸塩源約
0.3〜２ｇ／、マグネシウム源約0.1〜２ｇ／
、カリウム源約0.3〜２ｇ／、カルシウム源
約0.05〜10ｇ／、硫酸塩源約0.1〜２ｇ／を
処方する。これらの無機塩類の例としては
KH2PO4、K2HPO4、MgSO4、CaCO3などが挙
げられる。これら成分を水道水に加えてなる培地
に上記微生物を接種し、常法により好気的に震盪
培養する。
培養終了後、蓄積された多糖類は使用目的によ
り種々の方法で採取することができる。例えば、
培養液を過あるいは遠心分離などして菌体を分
離し、その液からイソプロパノールのようなア
ルコール添加により生成した多糖類を沈澱させ、
これを水に溶解後、第４級アンモニウム塩による
再沈澱、イオン交換樹脂による吸着のような方法
で精製して目的とする多糖類を得る。
り種々の方法で採取することができる。例えば、
培養液を過あるいは遠心分離などして菌体を分
離し、その液からイソプロパノールのようなア
ルコール添加により生成した多糖類を沈澱させ、
これを水に溶解後、第４級アンモニウム塩による
再沈澱、イオン交換樹脂による吸着のような方法
で精製して目的とする多糖類を得る。
エンテロバクテリアシー科に属するいくつかの
細菌が多糖類を産生することが知られており、渡
辺敏幸・瀬口正晴等（昭和45年日本農芸化学会大
会要旨集（1970）281頁）は、エシエリヒア
（Esherichia）がグルコース：マンノース：ラム
ノース＝５：３：２（モル比）からなる多糖類を
産生することを報告している。また三崎旭等（生
化学、39巻（1967年）542頁）はアエロバクター
（Aerobacter）がガラクトース：グルクロン酸：
マンノース＝2.5：0.8：１（モル比）からなる多
糖類を産生することを報告している。
細菌が多糖類を産生することが知られており、渡
辺敏幸・瀬口正晴等（昭和45年日本農芸化学会大
会要旨集（1970）281頁）は、エシエリヒア
（Esherichia）がグルコース：マンノース：ラム
ノース＝５：３：２（モル比）からなる多糖類を
産生することを報告している。また三崎旭等（生
化学、39巻（1967年）542頁）はアエロバクター
（Aerobacter）がガラクトース：グルクロン酸：
マンノース＝2.5：0.8：１（モル比）からなる多
糖類を産生することを報告している。
本発明の多糖類は構成糖、化学的物理的性質に
おいて、これら公知の多糖類と異なりつぎの特徴
を有する。
おいて、これら公知の多糖類と異なりつぎの特徴
を有する。
(1) 構成糖はグルコース、マンノース、グルクロ
ン酸およびマンヌユロン酸でその組成比（モル
比）はグルコース：マンノース：グルクロン
酸：マンヌロン酸＝１：0.7〜1.0：0.5〜0.7：
0.1〜0.3である。
ン酸およびマンヌユロン酸でその組成比（モル
比）はグルコース：マンノース：グルクロン
酸：マンヌロン酸＝１：0.7〜1.0：0.5〜0.7：
0.1〜0.3である。
(2) アセチル化度約０〜1.0でアセチル化されて
おり、加水分解物のエーテル抽出物をガスクロ
マトグラフイーに付して有機酸の分析を行うと
酢酸が検出される。
おり、加水分解物のエーテル抽出物をガスクロ
マトグラフイーに付して有機酸の分析を行うと
酢酸が検出される。
(3) ゲル過法による分子量測定で103〜107の分
子量を示す。
子量を示す。
(4) モーリツシユ反応、フエノール硫酸反応、ア
ンスロン硫酸反応の各呈色反応において陽性を
示す。
ンスロン硫酸反応の各呈色反応において陽性を
示す。
(5) メタノール、エタノール、アセトン、エーテ
ルなどの有機溶媒には不溶、水には可溶（この
水溶液は無色透明である）である。
ルなどの有機溶媒には不溶、水には可溶（この
水溶液は無色透明である）である。
(6) 赤外線吸収スペクトルは下記にピークを有す
る。
る。
790cm-1、860cm-1、1250cm-1、1400cm-1、
1600cm-1、1710cm-1 (7) ５％ｗ／ｖ水溶液の30℃における粘度はBM
型粘度計、30r.p.m.にて測定した場合、102〜
105cpである。
1600cm-1、1710cm-1 (7) ５％ｗ／ｖ水溶液の30℃における粘度はBM
型粘度計、30r.p.m.にて測定した場合、102〜
105cpである。
(8) 10％ｗ／ｖ塩化ナトリウム、又は10％ｗ／ｖ
塩化カルシウム水溶液の存在下において、粘度
は低下しない。粘度計および測定条件は(7)のも
のと同じである。
塩化カルシウム水溶液の存在下において、粘度
は低下しない。粘度計および測定条件は(7)のも
のと同じである。
本発明の多糖類は食品および工業用途の各種分
野において、増粘剤、賦型剤、ゲル化剤、エマル
ジヨン安定剤、捺染用糊剤、サイジング用糊剤、
凝集剤などとして広く利用することができる。
野において、増粘剤、賦型剤、ゲル化剤、エマル
ジヨン安定剤、捺染用糊剤、サイジング用糊剤、
凝集剤などとして広く利用することができる。
つぎに実施例を挙げて、本発明をさらに詳しく
説明する。
説明する。
実施例 １
培地１当りシヨ糖50ｇ、酵母エキス５ｇ、
K2HPO40.5ｇ、KH2PO40.5ｇ、MgSO4・
7H2O0.3ｇ、CaCO31ｇを含む液体培地（PH7.0オ
ートクレブ中、120℃20分間滅菌）100mlを入れた
500ml坂口フラスコにエンテロバクターニチデニ
イ（微工研菌奇第第5928号）を１白金耳接種し、
軌道シエーカー上、200r.p.m.で震盪し、37℃で
96時間培養した。培養終了後、培養液を遠心分離
して菌体を除去しこれにイソプロパノールを加え
て沈でんを生じさせた。沈澱を取し、105℃で
24時間乾燥して、多糖８ｇ／を得た。
K2HPO40.5ｇ、KH2PO40.5ｇ、MgSO4・
7H2O0.3ｇ、CaCO31ｇを含む液体培地（PH7.0オ
ートクレブ中、120℃20分間滅菌）100mlを入れた
500ml坂口フラスコにエンテロバクターニチデニ
イ（微工研菌奇第第5928号）を１白金耳接種し、
軌道シエーカー上、200r.p.m.で震盪し、37℃で
96時間培養した。培養終了後、培養液を遠心分離
して菌体を除去しこれにイソプロパノールを加え
て沈でんを生じさせた。沈澱を取し、105℃で
24時間乾燥して、多糖８ｇ／を得た。
上記多糖類を、90％ギ酸にて100℃16時間加水
分解し、さらに2Nトリフルオロ酢酸にて100℃５
時間加水分解して得た糖をペーパクロマトグラフ
イーおよびガスクロマトグラフイーに付したとこ
ろ、そのRf値および保持時間から、構成糖は、
グルコース：マンノース：グルクロン酸：マンヌ
ロン酸＝１：0.73：0.65：0.13であつた。またア
セチル化度は０、ゲル過法による分子量は103
であつた。
分解し、さらに2Nトリフルオロ酢酸にて100℃５
時間加水分解して得た糖をペーパクロマトグラフ
イーおよびガスクロマトグラフイーに付したとこ
ろ、そのRf値および保持時間から、構成糖は、
グルコース：マンノース：グルクロン酸：マンヌ
ロン酸＝１：0.73：0.65：0.13であつた。またア
セチル化度は０、ゲル過法による分子量は103
であつた。
実施例 ２
培地１当りシヨ糖50ｇ、ポリペプトン２ｇ、
K2HPO40.5ｇ、KH2PO40.5ｇ、MgSO4・
7H2O0.3ｇ、CaCO31ｇ含む液体培地（PH7.0オー
トクレーブ中、120℃、20分間滅菌）３を入れ
た５容ジヤーフアーメンターにエンテロバクタ
ーニチデニイ（微工研菌奇第5928号）を無菌的に
接種し、温度37℃、回転数600r.p.m.、通気量
1VVMの通気撹拌条件下で96時間好気培養を行
つた。培養中、培地のPHを1N NaOHの添加によ
つて7.0に保持した。
K2HPO40.5ｇ、KH2PO40.5ｇ、MgSO4・
7H2O0.3ｇ、CaCO31ｇ含む液体培地（PH7.0オー
トクレーブ中、120℃、20分間滅菌）３を入れ
た５容ジヤーフアーメンターにエンテロバクタ
ーニチデニイ（微工研菌奇第5928号）を無菌的に
接種し、温度37℃、回転数600r.p.m.、通気量
1VVMの通気撹拌条件下で96時間好気培養を行
つた。培養中、培地のPHを1N NaOHの添加によ
つて7.0に保持した。
培養後、実施例１と同様にして多糖20ｇ／を
得た。
得た。
上記多糖類を実施例１と同様にして加水分解し
て得た糖をペーパークロマトグラフイーおよびガ
スクロマトグラフイーに付したところ、その構成
糖はグルコース：マンノース：グルクロン酸：マ
ンヌロン酸＝１：0.94：0.53：0.27でアセチル化
度は0.86、分子量は107であつた。
て得た糖をペーパークロマトグラフイーおよびガ
スクロマトグラフイーに付したところ、その構成
糖はグルコース：マンノース：グルクロン酸：マ
ンヌロン酸＝１：0.94：0.53：0.27でアセチル化
度は0.86、分子量は107であつた。
第１図は本発明の多糖類の赤外線吸収スペクト
ルである。
ルである。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １ 下記の性質を有する多糖類。 (イ) 構成糖がグルコース、マンノース、グルクロ
ン酸およびマンヌユロン酸で、そのモル比がグ
ルコース：マンノース：グルクロン酸：マンヌ
ユロン酸＝１：0.7〜1.0：0.5〜0.7：0.1〜0.3で
ある、 (ロ) アセチル化度が０〜1.0である、 (ハ) ゲル濾過法による分子量測定で103〜107の分
子量を示す、 (ニ) モーリツシユ反応、フエノール硫酸反応、ア
ンスロン硫酸反応の各呈色反応において陽性を
示す、 (ホ) メタノール、エタノール、アセトン、エーテ
ルなどの有機溶媒に不溶、水には可溶である。 (ヘ) 赤外線吸収スペクトルは下記にピークを有す
る、 790cm-1、860cm-1、1250cm-1、1400cm-1、
1600cm-1、1710cm-1 (ト) ５％ｗ／ｖ水溶液の30℃における粘度はBM
型粘度計、30r.p.m.にて測定した合、102〜
105cpである。 (チ) 10％ｗ／ｖ塩化ナトリウム、または10％ｗ／
ｖ塩化カルシウムの水溶液の存在下において、
粘度は低下しない。粘度計および測定条件は(ト)
と同条件である。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP56120823A JPS5821402A (ja) | 1981-08-01 | 1981-08-01 | 新規多糖類 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP56120823A JPS5821402A (ja) | 1981-08-01 | 1981-08-01 | 新規多糖類 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS5821402A JPS5821402A (ja) | 1983-02-08 |
| JPH022881B2 true JPH022881B2 (ja) | 1990-01-19 |
Family
ID=14795840
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP56120823A Granted JPS5821402A (ja) | 1981-08-01 | 1981-08-01 | 新規多糖類 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS5821402A (ja) |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP3246245B2 (ja) | 1994-12-30 | 2002-01-15 | 株式会社村田製作所 | 抵抗体 |
| KR100501584B1 (ko) | 2000-02-03 | 2005-07-18 | (주)케이비피 | 저분자 폴리만유로네이트의 제조방법, 혈청지질개선제로서의 이의 신규 용도 및 이를 함유하는 기능성식품 및 건강 보조 식품 |
-
1981
- 1981-08-01 JP JP56120823A patent/JPS5821402A/ja active Granted
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS5821402A (ja) | 1983-02-08 |
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