JPS602193A - 多糖類およびその製造法 - Google Patents
多糖類およびその製造法Info
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- JPS602193A JPS602193A JP10795583A JP10795583A JPS602193A JP S602193 A JPS602193 A JP S602193A JP 10795583 A JP10795583 A JP 10795583A JP 10795583 A JP10795583 A JP 10795583A JP S602193 A JPS602193 A JP S602193A
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- glucose
- mannose
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は、常温でゲルを形成する新規な多糖類およびそ
の製造法に関する。
の製造法に関する。
微生物の生産する多糖類に関しては、これまでアルカリ
土類金属、キサントモナス属、アースロバフタ−属ある
いはバチルス属に属する細菌(ハンゼヌラ属等の酵母類
、プルラリア属等のカビ類の生産するものが知られてい
る。
土類金属、キサントモナス属、アースロバフタ−属ある
いはバチルス属に属する細菌(ハンゼヌラ属等の酵母類
、プルラリア属等のカビ類の生産するものが知られてい
る。
しかし、とnら多糖類のうち、常温で高い粘度を示しゲ
ルを形成するようなものは意外に少ながった。
ルを形成するようなものは意外に少ながった。
本発明者らは、特に粘度の高い多糖類を得る目的で広く
土壌菌を採取し、その多糖類生産能全検索した。その結
果、本発明者らが5−13と仮に表示したバチルス属に
属する細菌が、培養物中に極めて粘度の高い多糖類様物
質を蓄積することを見出した。
土壌菌を採取し、その多糖類生産能全検索した。その結
果、本発明者らが5−13と仮に表示したバチルス属に
属する細菌が、培養物中に極めて粘度の高い多糖類様物
質を蓄積することを見出した。
本発明は、かかる知見に基き、さらにこうした粘稠物、
5−13菌、さらにその培養条件等について鋭意研究の
結果完成されたもので、その要旨は、主要構成成分がグ
ルコース、マン/−ス、ガラクトース、グルクロン酸が
らなシ、常温でゲルを形成する多糖類、および該多糖類
生産能を有する細菌を培地に培養して前記多糖類を生成
せしめ、これを採取する多糖類の製造法でちる。
5−13菌、さらにその培養条件等について鋭意研究の
結果完成されたもので、その要旨は、主要構成成分がグ
ルコース、マン/−ス、ガラクトース、グルクロン酸が
らなシ、常温でゲルを形成する多糖類、および該多糖類
生産能を有する細菌を培地に培養して前記多糖類を生成
せしめ、これを採取する多糖類の製造法でちる。
以下、本発明について詳しく述べる。
本発明においては、主要構成成分がグルコース、マンノ
ース、ガラクトース、グルクロン酸からなシ、常温でゲ
ルを形成する多糖類生産菌を培養する。このような菌と
しては、本発明者らが土壌よシ採取した5−16菌がち
シ、その菌学的諸性質は次のとおりである。
ース、ガラクトース、グルクロン酸からなシ、常温でゲ
ルを形成する多糖類生産菌を培養する。このような菌と
しては、本発明者らが土壌よシ採取した5−16菌がち
シ、その菌学的諸性質は次のとおりである。
く1〉形態的性質
■、顕微鏡による観察
栄養細胞
形態:桿菌
運動性:あシ
大きさ:0.6〜0.8 X−2,0〜5.0μ胞 子
:楕円形の内生胞子 大きさは1.0〜1.2 X 1.5〜2.5゜胞子篩
はふくらむ ■、染 色 ダラム染色:陰 性 抗酸性染色:陰 性 ■、培地における生育状況 (11肉汁寒天平板培養 生育は不良。不規則状または仮根状にひろがる。
:楕円形の内生胞子 大きさは1.0〜1.2 X 1.5〜2.5゜胞子篩
はふくらむ ■、染 色 ダラム染色:陰 性 抗酸性染色:陰 性 ■、培地における生育状況 (11肉汁寒天平板培養 生育は不良。不規則状または仮根状にひろがる。
(2)グルコース寒天平板培養
生育は良好。もシあがり粘稠性あシ。表面はなめらかで
光沢あシ。
光沢あシ。
(3)肉汁液体培養
表面生育ちシ。わずかに混濁する。少量の粘質性沈澱を
生じる。
生じる。
(4)グルコース肉汁液体培養
一様に良好に生育し、粘質性の沈澱を多量に生じる。被
膜は形成し々い。
膜は形成し々い。
(5)肉汁ゼラチン穿刺培養
上部に生育、ゆるやかに液化する。
(6)リドマスミルクにおける生育
酸およびガスを発生し、凝固しペプトン化する。リドマ
スを還元する。
スを還元する。
く2〉生理的性質
1、生育温度=8〜41U
2、生育最適温度:35〜37[
3、生育pH: 5゜0〜9゜0
4、生育最適p l(: 6.0〜6.55、酸素要求
性:通性嫌気性 6、硝酸塩の還元性:あり 7、脱窒反応:なし 、8.メチルレッド反応:陽性 9、フオーゲスプロスカウエル反応:陽性10、インド
ールの生成:なし 11、硫化水素の生成:なし 12、澱粉の加水分解能:あシ 15、クエン酸の利用性:あシ 14、無機窒素源の利用性:あシ 15、色素の生成:なし 16、ウレアーゼの生成:なし 17、オキシダーゼの生成:なし 1B、、カタラーゼの生成:あシ 19.0−Fテスト:発酵 く6〉炭水化物の発酵性 第1表に示したような結果が得られた。
性:通性嫌気性 6、硝酸塩の還元性:あり 7、脱窒反応:なし 、8.メチルレッド反応:陽性 9、フオーゲスプロスカウエル反応:陽性10、インド
ールの生成:なし 11、硫化水素の生成:なし 12、澱粉の加水分解能:あシ 15、クエン酸の利用性:あシ 14、無機窒素源の利用性:あシ 15、色素の生成:なし 16、ウレアーゼの生成:なし 17、オキシダーゼの生成:なし 1B、、カタラーゼの生成:あシ 19.0−Fテスト:発酵 く6〉炭水化物の発酵性 第1表に示したような結果が得られた。
第 1 表
以上の諸性状にしたがい、バージイズ・マニュアル・オ
ブ・デターミネーテイプ0バクテリオロジ−(Berg
eya Manual of Determinatt
ve9aeteriology )第8版によシ検索し
fc結果、本菌はバチルス・ポリミキサ(Bacill
us polymyxa )と同定された。
ブ・デターミネーテイプ0バクテリオロジ−(Berg
eya Manual of Determinatt
ve9aeteriology )第8版によシ検索し
fc結果、本菌はバチルス・ポリミキサ(Bacill
us polymyxa )と同定された。
多糖類全生産する菌として、バチルス・ポリミキサがあ
ることは、すでに公知にガっている(特公昭42−7’
600号、農化鍜−43巻第8号)。
ることは、すでに公知にガっている(特公昭42−7’
600号、農化鍜−43巻第8号)。
上記公知の菌はバチルス・ポリミキサM271と命名さ
れているが、この陽271と本発明のバチルス・ポリミ
キサ5−13菌とは以下の点で相違している。すなわち
、前者は「肉汁培地二表面生育なし」であるのに対し、
後者は「肉汁液体培地二表面生育ちシ」である。また、
前者は「ゼラチン穿刺培地:ゆるやかに液化する」ので
ある。また、前者は「生育温度二適温25〜66C」で
あるのに対し、後者は「生育最適温度=35〜37C」
でちる。さらに、「クエン酸の利用性」は、前者が「あ
シ」であるのに対し後者は「なし」で以上の理由から、
本発明者は、バチルス・ポリミキサ5−16菌を新規な
菌であると認定し、工業技術院微生物工業技術研究所に
微工研菌寄第7066号として寄託している。
れているが、この陽271と本発明のバチルス・ポリミ
キサ5−13菌とは以下の点で相違している。すなわち
、前者は「肉汁培地二表面生育なし」であるのに対し、
後者は「肉汁液体培地二表面生育ちシ」である。また、
前者は「ゼラチン穿刺培地:ゆるやかに液化する」ので
ある。また、前者は「生育温度二適温25〜66C」で
あるのに対し、後者は「生育最適温度=35〜37C」
でちる。さらに、「クエン酸の利用性」は、前者が「あ
シ」であるのに対し後者は「なし」で以上の理由から、
本発明者は、バチルス・ポリミキサ5−16菌を新規な
菌であると認定し、工業技術院微生物工業技術研究所に
微工研菌寄第7066号として寄託している。
本発明においては、かかるバチルス属に属する多糖類生
産菌を培地で培養する。培地には使用する微生物が資化
できる炭素源、窒素源、生育に必要な各種無機塩等の栄
養源を含むものが用いられる。より具体的には、炭素源
として、デンプン、ブドウ糖、蔗楯、アラビノース、マ
ンニットなどがあり、窒素源としては尿素、肉エキス、
ペプトン、コーンステイープリカー、酵母エキス、硫酸
アンモニウム、硝酸アンモニウム、その他の有機物ある
いは無機物が用いられ、無機物としては塩化ナトリウム
まだはマグネシウム、マンガン、カリウム、鉄、カルシ
ウムなどの@酸塩、硫酸塩、炭酸塩などがあげられる。
産菌を培地で培養する。培地には使用する微生物が資化
できる炭素源、窒素源、生育に必要な各種無機塩等の栄
養源を含むものが用いられる。より具体的には、炭素源
として、デンプン、ブドウ糖、蔗楯、アラビノース、マ
ンニットなどがあり、窒素源としては尿素、肉エキス、
ペプトン、コーンステイープリカー、酵母エキス、硫酸
アンモニウム、硝酸アンモニウム、その他の有機物ある
いは無機物が用いられ、無機物としては塩化ナトリウム
まだはマグネシウム、マンガン、カリウム、鉄、カルシ
ウムなどの@酸塩、硫酸塩、炭酸塩などがあげられる。
培養はp Hs、o〜9.0好ましくは6.0〜8.5
、温度10〜40C好ましくは15〜37Cで行うのが
適当であシ、通常数日程度の培養でよい。
、温度10〜40C好ましくは15〜37Cで行うのが
適当であシ、通常数日程度の培養でよい。
このようにして得られた培養物から、本発明の目的の多
糖類が得られる。多糖@は大部分培養液中に生成するの
で、精製に先立って培養物中の菌体その他の固形分全除
去し、得られた液から多糖類を回収するのがよい。
糖類が得られる。多糖@は大部分培養液中に生成するの
で、精製に先立って培養物中の菌体その他の固形分全除
去し、得られた液から多糖類を回収するのがよい。
F#農には、加熱、遠心分離、洗浄、乾燥、溶媒による
分別沈澱や抽出等、多糖類を不純物よシ回収するために
通常用いられる手段を単独に、または適宜組み合わせる
ことによって行う。例えば、上記固形分全除去して得ら
れた溶液に、アセトン等の溶媒を添加して多糖類を析出
せしめ、析出した多糖類を水に溶解させ、再びアセトン
等の溶媒によシ多糖類を析出させる。この処理を繰シ返
した後、透析、凍結乾燥するととにより精製多糖類が得
られる。
分別沈澱や抽出等、多糖類を不純物よシ回収するために
通常用いられる手段を単独に、または適宜組み合わせる
ことによって行う。例えば、上記固形分全除去して得ら
れた溶液に、アセトン等の溶媒を添加して多糖類を析出
せしめ、析出した多糖類を水に溶解させ、再びアセトン
等の溶媒によシ多糖類を析出させる。この処理を繰シ返
した後、透析、凍結乾燥するととにより精製多糖類が得
られる。
本発明の多糖類の性質は下記のとおシである。
fi+構成成分
本多糖類の加水分解物〔加水分屏条件:5%(V/V
)(i酸100 t:” 10Lt間’) ’fcDt
mシ、8層タロマドグラフィー、液体クロマトグラフィ
ー、ガスクロマトグラフィー、カルバゾール硫酸比色法
によシ分析定量した。その結果、グルコース、マンノー
ス、カラクトース、グルタロン酸が主要構成成分である
ことがわかった。そして、それぞれの成分はモル比5:
4:3:5で構成されている。また、本多糖類の加水分
m物をエルノン−モルガン法によシ比色定量すると、微
量のへキソサミンが検出された。
)(i酸100 t:” 10Lt間’) ’fcDt
mシ、8層タロマドグラフィー、液体クロマトグラフィ
ー、ガスクロマトグラフィー、カルバゾール硫酸比色法
によシ分析定量した。その結果、グルコース、マンノー
ス、カラクトース、グルタロン酸が主要構成成分である
ことがわかった。そして、それぞれの成分はモル比5:
4:3:5で構成されている。また、本多糖類の加水分
m物をエルノン−モルガン法によシ比色定量すると、微
量のへキソサミンが検出された。
+21−膜組成分析(乾物指たり)
粗蛋白質(6,25XN): 4.8% 灰分:5.2
%粗脂肪:0.0% 炭水化物: 89.1%F31分
子量 200.000以上(5ephadex G −200
によるゲル濾過法で測定) (4)融点 融点は認められない。220〜230 t?テ炭化しは
じめ、2807:付近で完全に炭化する。
%粗脂肪:0.0% 炭水化物: 89.1%F31分
子量 200.000以上(5ephadex G −200
によるゲル濾過法で測定) (4)融点 融点は認められない。220〜230 t?テ炭化しは
じめ、2807:付近で完全に炭化する。
(5)赤外線吸収スペクトル
第1図のとおシである。
(6)溶剤に対する溶解性
水に可溶、メタノール、エタノール、アセトン等有機溶
媒に不溶である。
媒に不溶である。
(7)呈色反応
アンスロン反応、硫酸カルバゾール反応、エルンンーモ
ルガン反応に陽性である。
ルガン反応に陽性である。
(8)塩基性、酸性、中性の区別
セチルトリメチルアンモニウムブロマイドによシ沈澱を
生ずることから酸性多糖である。
生ずることから酸性多糖である。
(9)物質の色
白色である。
(1(It粘度
常温で水に溶け、粘性の高い中性溶液になる。
粘度と濃度との関係は第2図に示すとおシである。なお
、第2図において、ビ)は本発明の多糖類の粘度、(ロ
)はグアグムの粘度全示す。
、第2図において、ビ)は本発明の多糖類の粘度、(ロ
)はグアグムの粘度全示す。
αD酸およびアルカリに対する安定度
PH2〜12の範囲で比較的安定した粘度を示す。
(121塩に対する安定度
カリウム、ナトリウム等の一価の金属塩およびカルシウ
ム等の二価の金属塩の存在下で粘度の低下は認められず
、高粘性を示す。
ム等の二価の金属塩の存在下で粘度の低下は認められず
、高粘性を示す。
(13)熱に対する安定度
907:、30分間の加熱で安定である。
0滲その他の特徴的性質
本多糖類は、比較的低濃度(0,7チW/V)で加熱溶
解、冷却凝固の性質を有することはもちろんのこと、室
温で水と接触させるたけで流動性を全く失ない、ゼリー
状になるという特徴的性質を有する。また、ゲル形成の
ために架橋剤を必要としたり、pHの調整等をする必要
がなく、塩類等の水溶性物質が共存してもゲルを形成す
る。
解、冷却凝固の性質を有することはもちろんのこと、室
温で水と接触させるたけで流動性を全く失ない、ゼリー
状になるという特徴的性質を有する。また、ゲル形成の
ために架橋剤を必要としたり、pHの調整等をする必要
がなく、塩類等の水溶性物質が共存してもゲルを形成す
る。
本多糖類は、その特異的な性質を考慮して、増粘剤、ゲ
ル化剤、賦形剤等として食品加工の分野において利用す
ることができる。また、サイジング剤、凝集剤等として
各種工業分野において利用することができ、土壌改良剤
、肥料粒化剤等として層重の分野において利用すること
ができる。
ル化剤、賦形剤等として食品加工の分野において利用す
ることができる。また、サイジング剤、凝集剤等として
各種工業分野において利用することができ、土壌改良剤
、肥料粒化剤等として層重の分野において利用すること
ができる。
実施例
50ロー用坂ロフラスコに次の組成の培地を100−入
れて滅菌した。
れて滅菌した。
培地fIfl成ニ
ゲルコース4%、酵母エキス1.5%、リン酸−カリウ
ム0.2%、硫酸マグネシウム(7水塩)0.1%、炭
酸fJk’/ウム0.25%、p H8,00この培地
にバチルス・ポリミキサ5−13菌(微工研菌寄第70
33号)を接種し、20c96時間振盪培養を行った。
ム0.2%、硫酸マグネシウム(7水塩)0.1%、炭
酸fJk’/ウム0.25%、p H8,00この培地
にバチルス・ポリミキサ5−13菌(微工研菌寄第70
33号)を接種し、20c96時間振盪培養を行った。
培養液100mf!に6〜4倍量の水を加えて希釈し、
80c10分訓熱した後、直ちに遠心分離(14,00
0Q120分)音節して、菌体その他不溶成分を除き、
上澄液に倍量のアセトンk hI拌しながら江別して多
糖を繊維状に析出させる。これを濾過し、アセトンで充
分に洗浄し乾燥すると、粗多糖o、69グが得られた。
80c10分訓熱した後、直ちに遠心分離(14,00
0Q120分)音節して、菌体その他不溶成分を除き、
上澄液に倍量のアセトンk hI拌しながら江別して多
糖を繊維状に析出させる。これを濾過し、アセトンで充
分に洗浄し乾燥すると、粗多糖o、69グが得られた。
この粗多糖を再び水に溶解させ、上記した方法と同一の
方法でアセトン沈澱処理上2回繰シ返し行った後、通常
のセルロースチューブに入れ、流水で6日間、脱イオン
水で2日間透析會行った後、凍結乾燥して綿状の精製多
糖類0.612を得た。
方法でアセトン沈澱処理上2回繰シ返し行った後、通常
のセルロースチューブに入れ、流水で6日間、脱イオン
水で2日間透析會行った後、凍結乾燥して綿状の精製多
糖類0.612を得た。
第1図はバチルス・ボ+) ミキサ5−13菌多糖類の
赤外線吸収スベタトルのパターンであシ、第2図は本発
明の多糖類の温度と粘度との関係を示す片対数グラフで
ある。 第2 +’d 棟人C%)
赤外線吸収スベタトルのパターンであシ、第2図は本発
明の多糖類の温度と粘度との関係を示す片対数グラフで
ある。 第2 +’d 棟人C%)
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 11)、主要構成成分がグルコース、マンノース、ガラ
クトース、グルクロン酸からなシ、常温でゲル全形成す
る多糖類。 +21 、 クルコース、マンノース、カラスドース、
グルクロン酸の構成モル比が5:4:3:3である特許
請求の範囲第1項記載の多糖類。 (31,バチルス属に属し、主要構成成分がグルコース
、マンノース、ガラクトース、グルクロン酸からなる常
温でゲルを形成する多1?21類生産能を有する細菌全
培地に培養して上記多糖類を生成せしめ、これを採取す
ること全特徴とする多糖類の製造法。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP10795583A JPH0227362B2 (ja) | 1983-06-17 | 1983-06-17 | Tatoruioyobisonoseizoho |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP10795583A JPH0227362B2 (ja) | 1983-06-17 | 1983-06-17 | Tatoruioyobisonoseizoho |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPS602193A true JPS602193A (ja) | 1985-01-08 |
JPH0227362B2 JPH0227362B2 (ja) | 1990-06-15 |
Family
ID=14472292
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP10795583A Expired - Lifetime JPH0227362B2 (ja) | 1983-06-17 | 1983-06-17 | Tatoruioyobisonoseizoho |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JPH0227362B2 (ja) |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH01211492A (ja) * | 1988-02-18 | 1989-08-24 | Agency Of Ind Science & Technol | 微生物凝集剤noc−1の生産増強法 |
JPH10195794A (ja) * | 1996-12-27 | 1998-07-28 | Sanei Gen F F I Inc | 紙 |
-
1983
- 1983-06-17 JP JP10795583A patent/JPH0227362B2/ja not_active Expired - Lifetime
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH01211492A (ja) * | 1988-02-18 | 1989-08-24 | Agency Of Ind Science & Technol | 微生物凝集剤noc−1の生産増強法 |
JPH10195794A (ja) * | 1996-12-27 | 1998-07-28 | Sanei Gen F F I Inc | 紙 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JPH0227362B2 (ja) | 1990-06-15 |
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