JPS58127701A - 多糖類及びその製造方法 - Google Patents
多糖類及びその製造方法Info
- Publication number
- JPS58127701A JPS58127701A JP57010654A JP1065482A JPS58127701A JP S58127701 A JPS58127701 A JP S58127701A JP 57010654 A JP57010654 A JP 57010654A JP 1065482 A JP1065482 A JP 1065482A JP S58127701 A JPS58127701 A JP S58127701A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- polysaccharide
- culture medium
- gel
- genus rhizobium
- producing
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
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- Jellies, Jams, And Syrups (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は熱可逆性ゲル形成能の特性ケ有する多糖類及び
その製造方法に関する。
その製造方法に関する。
黙ｉｊＪ迎註グル形欣能を有する多糖類としては天然に
介在する寒天、刀うヤーナンか知られているが、それら
の供給倉に制限があるうえに、これらの天然多糖類はい
ずれもｐＨ値の低い酸性領域ではゲル形成能がないとい
う欠点がある。
介在する寒天、刀うヤーナンか知られているが、それら
の供給倉に制限があるうえに、これらの天然多糖類はい
ずれもｐＨ値の低い酸性領域ではゲル形成能がないとい
う欠点がある。
又、微生物を利用して熱可逆性ゲル形成能を有する多糖
類を生産する方法も提案されているが（例えは特公昭５
２−１２７９８号並びに持分昭５６−５４４４号公微参
照）、これらの方法はいずれもパルチル属に属するａｉ
＊を利用するものであり、これらの細菌は耐熱性胞子全
形成するため完全に加熱殺菌することが困難であるとこ
ろから製品中に増熾能を有する胞子が残存する可能性が
ある。
類を生産する方法も提案されているが（例えは特公昭５
２−１２７９８号並びに持分昭５６−５４４４号公微参
照）、これらの方法はいずれもパルチル属に属するａｉ
＊を利用するものであり、これらの細菌は耐熱性胞子全
形成するため完全に加熱殺菌することが困難であるとこ
ろから製品中に増熾能を有する胞子が残存する可能性が
ある。
したがって、このような方法で得られる多糖類は食品に
利用するには不虐当であると言える。
利用するには不虐当であると言える。
本発明者は上述した椀状に鑑み、耐熱性胞子全形成しな
くて、熱可逆性ゲル形成能金有する多糖類を生産し得る
微生物金検累した結果、リゾビウム属に属する菌が上記
多糖類の生産能を有することの知見葡辱て本発明τｌす
に至った。
くて、熱可逆性ゲル形成能金有する多糖類を生産し得る
微生物金検累した結果、リゾビウム属に属する菌が上記
多糖類の生産能を有することの知見葡辱て本発明τｌす
に至った。
以下本発明の詳細な説明する。
本発明で利用する微生物ｅユリゾビウム属（Ｒｈｉｚｏ
ｂｉｕｍ）に属するものであって、リゾビウム・メＩノ
ロツテイ（Ｒｈｌｏｂｉｕｍ ｍｅｌｉｌｏｔｉ ）
ｆ例示し得る。このリゾビウム・メソロツテイは財団
法人−＃研究所にＩ Ｆ Ｏ１３３３６の番号で保管さ
れている。
ｂｉｕｍ）に属するものであって、リゾビウム・メＩノ
ロツテイ（Ｒｈｌｏｂｉｕｍ ｍｅｌｉｌｏｔｉ ）
ｆ例示し得る。このリゾビウム・メソロツテイは財団
法人−＃研究所にＩ Ｆ Ｏ１３３３６の番号で保管さ
れている。
本発明の多糖類は上記菌を栄養培地中で培養することに
より生産される。ここで栄養培地としてハ、クルコース
、シュクロース、ラクトース、マルトース、マンニトー
ルのごとき炭素源、塩化アンモニウム、硫酸アンモニウ
ム、リン酸アンモニウム、硝酸アンモニウム、尿素のご
とき窒素源、リン酸カルシウム、リン酸ナトリウム、敏
酢マグ不シワム、塩化ナトリウム、塩化カルシウム、塩
化マンカン、硫酸マンガン、誠酸第−鉄のごとき無機項
類、及び必要に応じて塩酸チアミン、ビオチンのような
ビタミン類や＃母エスキのような生−３＝ 長促進物負金ざむ液体培地が有利に使用し得る。
より生産される。ここで栄養培地としてハ、クルコース
、シュクロース、ラクトース、マルトース、マンニトー
ルのごとき炭素源、塩化アンモニウム、硫酸アンモニウ
ム、リン酸アンモニウム、硝酸アンモニウム、尿素のご
とき窒素源、リン酸カルシウム、リン酸ナトリウム、敏
酢マグ不シワム、塩化ナトリウム、塩化カルシウム、塩
化マンカン、硫酸マンガン、誠酸第−鉄のごとき無機項
類、及び必要に応じて塩酸チアミン、ビオチンのような
ビタミン類や＃母エスキのような生−３＝ 長促進物負金ざむ液体培地が有利に使用し得る。
又、培誉乗件はｐＨ５−８及０２０〜４０℃の温度下で
１〜６日間辿気撹拌培誉もしくは振盪培養する。
１〜６日間辿気撹拌培誉もしくは振盪培養する。
上述のようにして増養（７て培地中に生産蓄積された多
糖類紫分離、採取するには従来の手法紫適用するとよく
、例えに培養液を虐倉の７Ｘで希釈後、遠心分離丑たは
ｔ過によって菌体および不浴物を分Ｓｉｌ′除云し、必
要に応じては、ｌ＃縮し／このちメタノール、エタノー
ル、イングロノ４ノール、アセトンのような有機溶媒ま
たはセチルトリメチルアンモニウムブロマイドまたはセ
チルピリジニウムクロライドのような四教アンモニウム
項？加えて多糖類を沈殿させ、この沈賊物をエタノール
、アセトンなどで洗浄したのち、真空乾燥、凍結乾燥あ
るいはＩＩａ岐乾燥ｌどにより多糖類？隼層することが
でさる。なあ・、このようにして得られる多糖類中・ニ
タンパク質が先任することが好１しくない場合４− には、上述した多糖類の沈殿処理の耐重たは後にクロロ
ホルム−イソアミルアルコール混液またはトリクロル酢
酸を添加して上記タンパク質を除去する。
糖類紫分離、採取するには従来の手法紫適用するとよく
、例えに培養液を虐倉の７Ｘで希釈後、遠心分離丑たは
ｔ過によって菌体および不浴物を分Ｓｉｌ′除云し、必
要に応じては、ｌ＃縮し／このちメタノール、エタノー
ル、イングロノ４ノール、アセトンのような有機溶媒ま
たはセチルトリメチルアンモニウムブロマイドまたはセ
チルピリジニウムクロライドのような四教アンモニウム
項？加えて多糖類を沈殿させ、この沈賊物をエタノール
、アセトンなどで洗浄したのち、真空乾燥、凍結乾燥あ
るいはＩＩａ岐乾燥ｌどにより多糖類？隼層することが
でさる。なあ・、このようにして得られる多糖類中・ニ
タンパク質が先任することが好１しくない場合４− には、上述した多糖類の沈殿処理の耐重たは後にクロロ
ホルム−イソアミルアルコール混液またはトリクロル酢
酸を添加して上記タンパク質を除去する。
本発明でリゾビウム属に属する多糖類生産−を上記のよ
うにして培養することによって生産される多Ｓ類は、熱
可逆性ゲル形成能の特注？有し、１記のような性質を有
する。
うにして培養することによって生産される多Ｓ類は、熱
可逆性ゲル形成能の特注？有し、１記のような性質を有
する。
（１） 元素分析値
灰分勿除いた可燃性部分の元素分析値は、炭素：３８２
％、水素：５．６係、蟹素二０．１％以下でｔらる。
％、水素：５．６係、蟹素二０．１％以下でｔらる。
（２）融点
融点は誌められず、加熱すると２４０’Ｃ附近で炭化が
始まり一２８０℃附近で完全に炭化する。
始まり一２８０℃附近で完全に炭化する。
（３）赤外線吸収スペクトル
（４）溶剤に対する溶解性
メクノールーエタノール、アセトン、イソプロパノニル
などの有機溶媒には不溶であり、水には溶解する。
などの有機溶媒には不溶であり、水には溶解する。
（５）色及び形状
凍結乾燥したものは白色の綿状金量し、真壁乾燥したも
（１）Ｉｉ白色の粉末状であって、水浴液σ無色透明で
ある。
（１）Ｉｉ白色の粉末状であって、水浴液σ無色透明で
ある。
（６）塩基件、中性、酸性の区別
水浴液にセチルトリメチルアンモニウムブロマイドを添
加すると沈殿を生じることから酸性でろる。
加すると沈殿を生じることから酸性でろる。
（７）比旋光度
〔αＪ２０−＋ ５〜＋１０°（０＝０．１）（８）分
子首 ＴＳＫ−ゲＡ、ＰＷ タイプ（束＃’ｌｉＦ堆に、に
製）を用いてゲルパーミェーションクロマトクラフィー
により測道すると、ｌＸｌ０’以上の分子倉全ボし、約
Ｉ Ｘ １０’にピークがみられる。
子首 ＴＳＫ−ゲＡ、ＰＷ タイプ（束＃’ｌｉＦ堆に、に
製）を用いてゲルパーミェーションクロマトクラフィー
により測道すると、ｌＸｌ０’以上の分子倉全ボし、約
Ｉ Ｘ １０’にピークがみられる。
（９）構成成分
本多糖類の加水分解物（加水分解条件：多糖濃１誌０．
１ｄｌ）、Ｉ ＮＨ，ＳＯ２，１００℃で６時間）を炭
酸バリウムで中オロ後、上澄区分についてペーパークロ
マトグラフィー、奎びにトリメチルシリル化物について
ガスクロマトグラフィー、冒速液体クロマトクラフィー
などで分析した結果、グルコース、ガラクトース、クル
クロン酸及びリブロン酸を主要構成成分としており、そ
れらの組成比はモル比で５：１：１：１であった。
１ｄｌ）、Ｉ ＮＨ，ＳＯ２，１００℃で６時間）を炭
酸バリウムで中オロ後、上澄区分についてペーパークロ
マトグラフィー、奎びにトリメチルシリル化物について
ガスクロマトグラフィー、冒速液体クロマトクラフィー
などで分析した結果、グルコース、ガラクトース、クル
クロン酸及びリブロン酸を主要構成成分としており、そ
れらの組成比はモル比で５：１：１：１であった。
（１０）呈色反応
アンスロン反応により＊緑色を呈する。
ｔｌｌｌ 粘性
水浴液は￥温で粘稠であり、ｐＨ１２附近で者しく粘度
が増加する。例えは、１％の水浴液の粘度ケＢ型回転粘
度肘（東墓計器に、に製）ケ用いて３０℃で３７ｐｍの
回転数で測定すると２２６ ｃｐでめり、上ｄ己水溶液
全６ Ｎ ｏｆ性ソーダでｐＨを１２．５に調整してそ
のｒａ度＊回様に測定すると９５１ｃｐであった。
が増加する。例えは、１％の水浴液の粘度ケＢ型回転粘
度肘（東墓計器に、に製）ケ用いて３０℃で３７ｐｍの
回転数で測定すると２２６ ｃｐでめり、上ｄ己水溶液
全６ Ｎ ｏｆ性ソーダでｐＨを１２．５に調整してそ
のｒａ度＊回様に測定すると９５１ｃｐであった。
次に、本発明の多糖類の熱可逆性ゲル形成能の特性につ
いて説明する。
いて説明する。
（ｆ）熱可逆性ゲル化挙動
本多糖類の水浴液を９０℃以上に加熱後冷却するとゲル
化し、このゲルヶ再び加熱すると融解していわゆる熱可
逆性を示す。又、本多糖類は０．５％以上の濃度の水溶
液であれは、上記によりゲル形成を示し、その場合塩化
ナトリウムのごとき塩の存在により強固なゲルを形成す
る。更に１本多糖類は広＠囲なｐＨ領域でゲル形成能全
示し、表１に示すごとく、特に寒天の工うな天然多糖類
ではケル化し得ないｐＨ２，５〜４の酸性領域でもゲル
を形成する。
化し、このゲルヶ再び加熱すると融解していわゆる熱可
逆性を示す。又、本多糖類は０．５％以上の濃度の水溶
液であれは、上記によりゲル形成を示し、その場合塩化
ナトリウムのごとき塩の存在により強固なゲルを形成す
る。更に１本多糖類は広＠囲なｐＨ領域でゲル形成能全
示し、表１に示すごとく、特に寒天の工うな天然多糖類
ではケル化し得ないｐＨ２，５〜４の酸性領域でもゲル
を形成する。
表１
（ロ） ゲルの性質
本多糖類のゲルは寒天のゲルより弾力に冨み、凍結後解
凍しても離水現象がみられず、完全にもとのゲルに回復
する。
凍しても離水現象がみられず、完全にもとのゲルに回復
する。
本発明シニよる多糖類は上述したごとき良好な熱可逆性
ゲル形成能を有するｋので、従来の天然多糖類に代えて
種々のゲル化食品（例えばプリン、コーヒーゼリー等）
の製造に用い得るほか、それ単独でもしくは他の多糖類
と混合して食品加工における増粘剤、その地固型賦香剤
、可賞性フィルム。
ゲル形成能を有するｋので、従来の天然多糖類に代えて
種々のゲル化食品（例えばプリン、コーヒーゼリー等）
の製造に用い得るほか、それ単独でもしくは他の多糖類
と混合して食品加工における増粘剤、その地固型賦香剤
、可賞性フィルム。
ゲル状爆楽、蛛歯磨の基材などの広範囲な用途に供する
ことかできる。
ことかできる。
以下に実施１８１１を示して本発明ケ更に具体的に説明
する。
する。
実施例１
リゾビウム・メリロツテイ（Ｒｈｉｚｏｂｉｕｍｍｅｌ
ｉｌｏｔｉ ） ＩＦＯ１３３３６ｆ、下記組成の種菌
用液俸培地１００ｍ’ｚ収容した５００ｍ／！容坂ロフ
ラスコに１白金４接種し、３０℃で４８時間の往復振盪
培養を行なった。
ｉｌｏｔｉ ） ＩＦＯ１３３３６ｆ、下記組成の種菌
用液俸培地１００ｍ’ｚ収容した５００ｍ／！容坂ロフ
ラスコに１白金４接種し、３０℃で４８時間の往復振盪
培養を行なった。
グルコース １％
に、 ＨＰｏ、 ０．０５％ＭｙＳＯ，・
’７Ｈ２００，０２％ ＮｅＬａ１ Ｏ，０２％酵母エキス
０．５ ％ ｐＨ７，２ 上述のようにして調製した種間１００−紫下記組成の生
産ｇ体培地１．２ｔ？収谷した３を容醗酵槽に接楯し、
３０Ｃで６日間の通気攪拌培誉を行なった。
’７Ｈ２００，０２％ ＮｅＬａ１ Ｏ，０２％酵母エキス
０．５ ％ ｐＨ７，２ 上述のようにして調製した種間１００−紫下記組成の生
産ｇ体培地１．２ｔ？収谷した３を容醗酵槽に接楯し、
３０Ｃで６日間の通気攪拌培誉を行なった。
グルコース ３．５％
（ＮＨ３）、ＨＰＯ４０，１５％
ＫＨ，ｐｏ、 ０．１％
ＭｇＢＯ，・７Ｈ，ＯＯ，０５％
ＮａＯノ ０．００１％
０ａＯＪ２ ｔ：１．００１％Ｍｎ０ｊ２
・４Ｂ２０ ０．００１％塩酸チアミン ０
．００００２％ ビオチン ０．０００００２％培養中は２ Ｎ
Ｎ、ＯＨにより培養液のｐＨ１７，２に保った。この
ようにして得られた培養液の５００２採取し、これを水
で６培に希釈したのち遠心分離により函体および不溶分
を除去した。得られた上澄液に３倍容のエタノールを加
えて多糖類全沈殿させ、沈殿ｔＰ別して７５％エタノー
ルで洗浄した。この沈殿を水に丹溶解しセルロースチュ
ーブに入れて流水中で２日間透析した。次いで透析内液
を凍結乾燥し、６．６８ｆの多糖類を得た。この多糖類
は前記した（１）〜（１１）の諸性質及び熱可逆性ゲル
形成能を示した。
・４Ｂ２０ ０．００１％塩酸チアミン ０
．００００２％ ビオチン ０．０００００２％培養中は２ Ｎ
Ｎ、ＯＨにより培養液のｐＨ１７，２に保った。この
ようにして得られた培養液の５００２採取し、これを水
で６培に希釈したのち遠心分離により函体および不溶分
を除去した。得られた上澄液に３倍容のエタノールを加
えて多糖類全沈殿させ、沈殿ｔＰ別して７５％エタノー
ルで洗浄した。この沈殿を水に丹溶解しセルロースチュ
ーブに入れて流水中で２日間透析した。次いで透析内液
を凍結乾燥し、６．６８ｆの多糖類を得た。この多糖類
は前記した（１）〜（１１）の諸性質及び熱可逆性ゲル
形成能を示した。
実施例２
リゾビウム・メリロッティＩＦＯ１３３３６ｉ実施例１
に記載と同様の組成の種属培地１．２ｔを収容した３を
容醗酵槽にて３０℃で４８時間の通気攪拌培養を行なっ
た。このようにして得られた種菌１ｔを実施例１に記載
と同様の組成の生産培地２０を全収容した３０を容醗酵
槽にて３０℃で通気攪拌培養？！：行なった。培養液の
ｐＨは６ Ｎ ＮａＯＨにより７．２に維持した。培養
開始後６日間で培養を終了し、１９ｔの培養液を得た。
に記載と同様の組成の種属培地１．２ｔを収容した３を
容醗酵槽にて３０℃で４８時間の通気攪拌培養を行なっ
た。このようにして得られた種菌１ｔを実施例１に記載
と同様の組成の生産培地２０を全収容した３０を容醗酵
槽にて３０℃で通気攪拌培養？！：行なった。培養液の
ｐＨは６ Ｎ ＮａＯＨにより７．２に維持した。培養
開始後６日間で培養を終了し、１９ｔの培養液を得た。
この培養液に胡ｔの水を加えｔ４過により函体を除いた
後、ｆ液に６４０ｇ！の塩化ナトリウム全溶解させ、更
に１３０ｔのイソプロパツールを加えた。生成した沈殿
をト過により集め、ｌＯｔの水に溶解し、セルロースチ
ューブに入れて流水中で２日間の透析を行なった。次い
で透析内液にアセトン３０ｔを加えて生成した沈殿を集
め、アセトンで洗浄したのち真空乾燥し、１１１．２
ｆの多糖類を得た。この多糖類は前記した（１）〜（１
１）の諸性質及び熱可逆性ゲル形成能を示した。
後、ｆ液に６４０ｇ！の塩化ナトリウム全溶解させ、更
に１３０ｔのイソプロパツールを加えた。生成した沈殿
をト過により集め、ｌＯｔの水に溶解し、セルロースチ
ューブに入れて流水中で２日間の透析を行なった。次い
で透析内液にアセトン３０ｔを加えて生成した沈殿を集
め、アセトンで洗浄したのち真空乾燥し、１１１．２
ｆの多糖類を得た。この多糖類は前記した（１）〜（１
１）の諸性質及び熱可逆性ゲル形成能を示した。
添附図面は本発明の多糖の赤外線吸収スペクトルである
。 代理人 川 口 義 雄 ａ ３０００ ２０００ ＋６ω １２００
８００ ４００２度 数 （Ｃｍ’）
。 代理人 川 口 義 雄 ａ ３０００ ２０００ ＋６ω １２００
８００ ４００２度 数 （Ｃｍ’）
Claims (2)
- （１） 熱可逆性ゲル形成能の特性を有し、グルコー
ス、ガラクトース、グルクロン酸及びリブロン酸の主要
構成成分とからなり一且つこれら谷成分の構成比がモル
比で５：１：１：１である多糖類。 - （２）リゾビウム属に属する多糖類生産函を、栄養培地
中で培養して特許請求の範曲第１項に記載の多糖類？生
成せしめ、これを採取することを＊徴とする上記多糖類
の製造方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP57010654A JPS58127701A (ja) | 1982-01-26 | 1982-01-26 | 多糖類及びその製造方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP57010654A JPS58127701A (ja) | 1982-01-26 | 1982-01-26 | 多糖類及びその製造方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS58127701A true JPS58127701A (ja) | 1983-07-29 |
| JPS6133841B2 JPS6133841B2 (ja) | 1986-08-05 |
Family
ID=11756205
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP57010654A Granted JPS58127701A (ja) | 1982-01-26 | 1982-01-26 | 多糖類及びその製造方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS58127701A (ja) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GB2223503A (en) * | 1988-09-03 | 1990-04-11 | Agricultural & Food Res | Gel-forming polysaccharides |
| FR2759377A1 (fr) * | 1997-02-12 | 1998-08-14 | Ard Sa | Polysaccharide, micro-organisme et procede pour son obtention, composition le contenant et application |
-
1982
- 1982-01-26 JP JP57010654A patent/JPS58127701A/ja active Granted
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GB2223503A (en) * | 1988-09-03 | 1990-04-11 | Agricultural & Food Res | Gel-forming polysaccharides |
| GB2223503B (en) * | 1988-09-03 | 1992-10-07 | Agricultural & Food Res | Gel-forming materials |
| FR2759377A1 (fr) * | 1997-02-12 | 1998-08-14 | Ard Sa | Polysaccharide, micro-organisme et procede pour son obtention, composition le contenant et application |
| WO1998035993A1 (fr) * | 1997-02-12 | 1998-08-20 | Agro Industrie Recherches Et Developpement (A.R.D.) Societe Anonyme | Polysaccharide, micro-organisme et procede pour son obtention, composition le contenant et application |
| US6344346B1 (en) * | 1997-02-12 | 2002-02-05 | Agro Industrie Recherches Et Developpement (Ard) | Polysaccharide, micro-organism and method for obtaining same, composition containing it and application |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS6133841B2 (ja) | 1986-08-05 |
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