JPH02253551A - 電子顕微鏡検体調整法及び電子顕微鏡検体調整器具 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 本発明は、抗原抗体反応を利用した、ウィルス学や免疫
学並びに細胞工学等のバイオテクノロジーの技法に関す
るものである。

〔従来技術と発明が解決しようとする課題〕近年、後天
性免疫不全症候群、成人Ｔ細胞白血病、非Ａ非Ｂウィル
ス性肝炎等の輸血による感染が問題とされおり、これら
感染症の早期診断法が世界的規模で開発されている。従
来、感染症の診断は、主に抗体検査によって行われてい
た。その理由は感染直後ではウィルス粒子の数がきわめ
て少なく、この少ないウィルスを直接検出できる方法が
無かったからである。

例１えば、ウィルスを直接検出する方法として、従来よ
り血球凝集法等が知られている。しかしながら、この方
法では検出感度が不足するため、ウィルスを培養して１
子方個以上に増殖する必要があった。

またウィルスの存在確認のための形態観察が、電子顕微
鏡を用いて行われている。この観察によればウィルス群
を判定することができる。新しいウィルスを発見した場
合も最終的には電子顕微鏡下でのウィルスの確認が不可
欠である。しかしながら、ウィルスは大きさが２０〜２
００ｎ−程度であるため、超高倍率でなければ観察でき
ない。

このため電子顕微鏡で観察する領域は、μ烏合の極めて
狭い範囲となり、ウィルスが高濃度に存在していなけれ
ば観察は困難を極めることとなる。

このような理由から、従来は！−ｅ当たりウィルス粒子
が一億ないし十億個無ければ電子顕微鏡観察は事実上不
可能であった。

従ってウィルスを直接検出には、まずウィルスを培養す
る技術を確立しなければならなかった。

しかしウィルス培養に際しては、ウィルス毎に宿主が異
なるため培養に適した感受性細胞を見つける必要があっ
た。しかもその感受性細胞の検索に当たっては、動物の
細胞を使って人に感染するウィルスを培養することは出
来ないため、困難を極めている。このような事情のため
、人に感染するウィルス学の研究は動物の場合に比べる
と非常に遅れている。例えば、ウィルス性肝炎は感染力
が強いため、現在、医療従事者が患者から感染する事故
が多発し、社会問題となっている。しかし、非Ａ非Ｂの
ウィルス性肝炎については、以前から予想されているに
も関わらず、ウィルスの存在が確認されていないため、
的確な治療法が無い状態である。

また癌は最初１つの細胞が癌化し、長い年月を経て発症
にいたる。現在の診断法は内視鏡、ＣＴ。

病理検査等はとんどが医師の目で行われている。

そのため、癌と診断された時点では、目で診断できない
癌が方々に転移していて手術しても再発することが多い
。転移の無い時期に細胞レベルで診断できれば再発はな
くなり、手術無しに免疫療法だけで癌を治癒させること
も可能になるので、現在、腫瘍マーカ等の癌免疫診断法
が研究開発されているが、実用されているものは少ない
。

このような問題に対処するため本発明者らは、ウィルス
抗原や細胞を極めて高い感度で検出できるレーザ磁気免
疫測定法等の研究を行い、その成果を先に特願昭６１−
２２４５６７．６１−２５２４２７．６１−２５４１６
４．６２−２２０６３゜６２−１５２７９１．６２−１
５２７９２．６２１８４９０２．６２−２６４３１９．
８２−２６７４８１．６３−６０５０として特許出願し
ている。

これらの新しい免疫測定法は抗原抗体反応の有無の検出
にレーザ光を利用し、標識材料として磁性微粒子を用い
る点に特徴があり、ピコグラムの超微ｍ検出が出来る。

ところがウィルスなどの検体を直接電子顕微鏡で観察す
る技術については、検体を濃縮・精製する方法の技術革
新が今日までなく、従来の遠心沈降法に頼らざるを得な
いのが現状である。そのため、検体調整に多くの労力が
かかり、極めて効率が悪かった。そこで本発明者らは、
磁性微粒子をウィルス、癌細胞あるいはリンパ球などの
検体に標識することによってウィルスや細胞を捕捉・分
離する方法を研究し、その成果を先に特願昭６３−１０
２９１６．６３−１０２９１９として特許出願している
。これらの方法によれば効率的にウィルスや細胞を捕集
したり分離することが出来る。

また細胞融合技術によって得たハイブリドーマ細胞のス
クリーニングの際に、磁性微粒子を目的のモノクローナ
ル抗体を生産するハイブリドーマに標識し、これを外部
磁力によって選択的に回収する新しいスクリーニング方
法についても特許出願中である。

しかしながら捕集した検体を電子顕微鏡でより効率よく
観察するためには、−層の技術革新が望まれていた。そ
４で本発明者らは、１ｍ１２中１００個程度の希薄なイ
ンフルエンザウィルスを電子顕＠鏡観察する方法を確立
し、先に特願昭６３−２７２１０６　　ｒ電子顕微鏡検
体調整法及び電子顕微鏡検体調整器具」として特許出願
している。この特許は、磁気標識したウィルスを傾斜磁
界中で濃縮し、−旦毛細管中に回収した後、磁界を作用
させながら電子顕微鏡観察用メツシュ表面上に誘導・固
着する方法で、従来法に比べてＩＯ万倍程度検出感度を
向上できる。しかしながら、この方法では検体調整が少
し煩雑である不満があった。

また本発明に関連した特許として、最近、本発明者らは
「磁性微粒子を免疫反応の標識に用いる検体調整法及び
調整器具」に関する特許発明を出願中である。この特許
は、希薄なウィルスの電子顕微鏡観察のための検体調整
にも極めて有効な方法であって、ウィルスの精製・回収
機構を具備しているから、電子顕微鏡による観察を妨害
する各種タンパク質等の混雑物を効率的に除去すること
が出来る。しかしながらこの調整法でも、回収したウィ
ルス等の検体を例えば上述の特願昭６３−２７２１０６
で提案した器具を用いて電子顕微鏡観察用メツシュ表面
上に誘導・固着する必要があった。

本発明は、上記の事情に鑑みてなされたもので、検出感
度が高く、検出調整がより簡単な電子顕微鏡検体調整法
及び電子顕微鏡検体調整器具を提供することにある。

〔課題を解決するための手段〕

本発明の電子顕微鏡検体調整法では、検体に磁気標識す
る第１の工程と、前記第１工程で磁気標識された検体を
含む検体浮遊液に傾斜磁界を作用させて検体を局部濃縮
する第２の工程とを少なくとも含む電子顕微鏡検体調整
法において、前記第２の工程で検体を液面またはその近
傍に濃縮し、この局部濃縮点に電子顕微鏡観察用メッシ
：Ｌ（以下、メツシュと略称する）を挿入して、検体を
メツシュ上に回収することによって前記目的を達成した
。

本発明の第１工程は、例えば、抗原抗体反応で磁性体標
識抗体を検体に結合することによって行うことができる
。磁性体標識抗体に用いる磁性体粒子としては、マグネ
タイトのような鉄系酸化物、遷移金属あるいは希土類元
素からなる強磁性体が好ましく用いられる。

また本発明の調整法においては、前記メツシュの裏面側
からメツシュの位置で磁界が最も強くなるような傾斜磁
界を検体浮遊液に作用させることにより、磁気標識され
た検体をメツシュに誘導し固着することが望ましい。

検体をメツシュ上に回収する際には、検体浮遊液の収容
された容器の方を動かしてら良いが、メッンユ側を動か
しても良い。このようにしてメツツユ上に磁気吸引によ
って直接固着された検体を更に精製する必要がある場合
は、磁界を作用させた状態で、洗浄液を注入した容器に
メツシュを浸した後引き上げるといった操作を繰り返す
と良い。洗浄操作をこのように行えば、磁気標識された
検体をメツシュに固着したままで、磁気吸引されない不
純物を除去することが出来る。

このように濃縮・精製された検体は、必要に応じて電子
顕微鏡観察が容易なように染色される。

この染色操作は、検体が固着されたメツシュに磁界を作
用させた状態で、該メツシュをリンタングステン酸等の
染色液が注入された容器に一定時間浸し、引き上げこと
により行うことが望ましい。

このようにして検体調整を完了したメツシュは、電子顕
微鏡観察に供される。

前述の電子顕微鏡検体調整法を実施するには、傾斜磁界
を発生させる傾斜磁界発生機構と、メツシュを前記傾斜
磁界が集中する位置に保持する電子顕微鏡観察用メツシ
ュ保持部品（以下メツシュ保持部品と略称する）と、該
メツシュ保持部品を容器水面に誘導する機構とを少なく
とも具備する電子顕微鏡検体調整器具を用いると良い。

この調整器具を構成する傾斜磁界発生装置としては、例
えば、先に本発明者らが提案した特願昭６３−２７２１
−０６に記載した装置、すなわち、検体容器が電磁石の
上方に置かれ、検体容器の水面の真上にメツシュの直径
程度の先端径をもつ鉛筆状の磁極片が電磁石と対向して
鉛直状に配置された一装置を利用できる。電磁石から放
射された磁束は鉛筆状磁極片に集中するから、該磁極片
直下で磁界が最も高くなる。

前記メツシュ保持部品としては、非磁性体からなり前記
鉛筆状磁極片の先端に装着されるように構成されたメツ
シュ搭載台などが好適に用いられる。このメツシュ搭載
台にメツシュを搭載する方法としては、パラフィルム等
の両面粘着性フィルムを搭載台に貼付し、この粘着性フ
ィルムにメツシュを貼着する方法などがある。

〔作　用〕

本発明の電子顕微鏡検体調整法によれば、磁気標識され
た検体の浮遊液に傾斜磁界中が印加されると、磁気標識
された検体のみが磁界の最大点に誘導されて集まる。

検体浮遊液中には目的物体よりも目的物体以外に異物と
しての生物体が非常に多く含まれているのが生物体は外
部磁力には反応しないから、磁気標識された検体のみが
局部濃縮点に誘導される。

この局部濃縮点は、検体浮遊液の液面またはその近傍に
設定されているので、異物や沈澱した細胞の混入を避け
ることができ、目的物体以外の異物混入をより減少させ
ることができる。この結果、検体は精製されたのと同一
状態となる。

このように磁気標識された検体が局部濃縮された箇所に
電子顕微鏡観察用メツシュを挿入すると、メッンユ表面
に磁気標識された検体が付着するので、精製された検体
が多量にメツシュ上に回収固定される。

このように回収された磁気標識検体の磁性微粒子は生物
体よりも密度が高いから、電子顕微鏡視野では黒色に見
え、その存在を極めて容易に確認できる。

加えて本発明の電子顕微鏡検体調整法では、傾斜磁界を
作用させて磁気標識された検体を局部濃縮した所にメツ
シュを挿入して検体をメツシュ上に回収するので、この
回収操作に連続して検体をさらに精製したり染色する場
合、これらの操作をメツシュに傾斜磁界を印加した状態
で行うことが容易にできる。このように検体を回収した
メツシュに傾斜磁界を印加しておくと、回収された検体
が精製時あるいは染色時に失われるのを防止でき、検出
感度をより一層向上できる。

すなわち従来はホルムバール等の支持膜が張られた銅メ
ツシユ上に検体濃縮液を滴下して余剰分を濾紙で吸い取
ってメツシュに検体を付着し、ついでメツシュに染色液
を滴下して検体を染色し、その後再び染色液を濾紙で吸
い取り自然乾燥して電子顕微鏡観察に供するのが一般で
あった。このため濾紙により検体の大部分が吸い取られ
てしまっていた。　（前述のように、ウィルス粒子を観
察するために必要な実用上のウィルス濃度が１ｍ１２当
たり１億個以上であることの理由の１つは、上記操作で
ごく一部の検体しかメッシュ上に留まらないことにもあ
る。） 本発明の調整法に従えば、上述の検体回収後もメツシュ
に磁界を作用させて検体がメツシュ上に磁気吸引された
状態にしておくことが容易であるから、この状態で精製
・染色操作を行い、余分な洗浄液や染色液を除去する際
の検体の損失を防止することができる。このような精製
・染色操作を採用すると、検出感度をさらに向上でき、
例えばウィルス粒子観察の場合１ｍ１２当たり数十個程
度の希薄な検体でも検出可能となる。

〔実施例〕

以下に図面を参照して本発明をより１体的に詳述するが
、以下に示すものは本発明の一実施例に過ぎず、本発明
の範囲を同等制限するものではない。

（実施例１） 第１図は本発明に従う電子顕微鏡検体調整法の一実施例
を示す工程図である。この検体調整法は、検体を磁気標
識する第１工程！、磁気標識された該検体をメッシュ上
に傾斜磁界中で誘導・固着する第２工程２、傾斜磁界中
でネガティブ染色する第３工程３からなる方法である。

本実施例に用いた検体は、Ａ型インフルエンザウィルス
　（Ａ／石川／７／８２　　（８３Ｎ２））であって、
１−１２当たり百万個のウィルスが存在することが血球
凝集反応、及び血球計算板から確かめられている。

本実施例の第１工程を説明する。検体を磁気標識する第
１工程Ｉでは、まず前記ウィルスに対するウサギ高度免
疫血清を精製して得られたＩｇＧ抗体をデキストランで
コートした平均粒径１０ｎ　ｔｌのマグネタイトからな
る磁性微粒子に共有結合して、磁性体標識抗体を得た。

次に該磁性体標識抗体１０μ（Ｊと検体ｌｌｌＩ２とを
３５℃、２．５時間ツインキュベートの条件下で反応さ
せて検体を磁気標識した。

次に第２工程２を説明する。第２工程２は３つのサブ工
程２ａ　、２ｂ　、２ｃからなっている。第１のサブ工
程２ａは傾斜磁界中で検体を局部濃縮する工程、第２の
サブ工程２ｂは局部濃縮点にメツシュを接触する工程、
第３のサブ工程２ｃは磁界を作用させた状態でメツシュ
を液面から離脱する工程である。

第２図はこの第２工程２で用いられた電子顕微鏡検体調
整器具の構成を示す概略図であって、図中符号２６は電
磁石、ＩＯは容器、１１は容器支持台、１２は容器案内
面である。容器ｌＯは容器支持台２に設けられた容器案
内面！２にセットされ、高さ調節ステージ１６に取り付
けられている。容器支持台１１は高さ調節ステージ１６
によって、任意の高さに調節可能である。

また第２図中符号Ｉ３は磁極片２５を保持する継鉄Ａ％
　＋４は継鉄Ｂである。継鉄ＡＩ３は継鉄クランプねじ
１５によって継鉄Ｂと連結されており、任意の方向に固
定できるようになっている。

第３図に示すように、磁極片２５の先端は磁界が過度に
集中しないように切断されており、その先端面の直径は
２ｓ−である。電磁石２６からでた磁束は、容器１０を
貫通した後、磁極片２５で集束され、継鉄Ａ１３と継鉄
Ｂ１４を通って再び電磁石２６に戻るように磁気回路が
形成される。この実施例１で用いた調整器具では、電磁
石２６と磁極片２５の距離がｌ１ｍｍのとき、電磁石２
６にＩＡの電流を流すと磁極片２５直下０．５ｓｍの位
置での磁界が８ｋＧであった。

磁極片２５の先端部には、メツシュ搭載台２３が取り付
けられている。メツシュ搭載台２３はプラスチック製で
あって止めネジ２４によって磁極片２５にクランプされ
ている。このメツシュ搭載台２３には、直径約３−一の
銅８製メツシュ２１が粘着フィルム（パラフィルム）２
２によって粘着されている。磁極片２５の先端面とメツ
シュ２！の距離はできる限り接近していることが強い磁
界を発生させるのに有利であるから、本実施例ではその
距離をＩｍ−に設定した。

さて、このメツシュ搭載台２３にメツシュ２Ｉを粘着さ
せた後、メツシュ搭載台２３を磁極片２５に取り付けて
から第２工程２が開始される。上述した第１のサブ工程
２ａは、次の通り行われた。

まずＰＢＳ−Ｔｖｅｅｎからなる洗浄液を予め容器１０
にＩｓＱ入れておき、ここに前記第１工程１で磁気標識
された検体を含む液２５μｅを注入して検体浮遊液とし
た。そして次に電磁石２６に電流を流して傾斜磁界を発
生させ、磁極片２５の真下の液面に磁気標識された検体
を局部濃縮した。

第２のサブ工程２ｂでは、高さ調節ステージ１６を操作
して容器ＩＯを上方に移動させることにより前記メツシ
ュ２！を液面に接触させた。この操作によって磁気標識
された検体は該メツシュ２１の背面の磁極片２５に磁気
吸引され、メツシュ２１上に自然に誘導・固着される。

次に、第３のサブ工程２ｃでは、電磁石２６を励磁した
ままで、前記高さ調節ステージ１６を下げることにより
メツシュ搭載台２３を液面から離脱させた。以上の操作
によって磁気標識された検体がメツシュ２１上に回収さ
れる。

第３工程３は、次の３つのサブ工程３ａ、３ｂ、３Ｃか
らなる工程ある。この第３工程３を開始するに際しては
、まずｐＨ７の１％リンタングステン酸からなるネガテ
ィブ染色液を前記容器１０の別のウェルに入れて、容器
案内面Ｉ２に沿って、該染色液を前記メツシュ搭載台２
３の真下の位置に移動した。ついで第１のサブ工程３ａ
では、電磁石２６を励磁したままで、高さ調節ステージ
１６によって容器１０を上方に移動させ前記メツシュ２
１を液面に接触させた。ついで一定時間後、本実施例１
では３０秒後に、前記高さ調節ステージ＋６を下げメツ
シュ搭載台２３を液面から離脱さ仕る第２のサブ工程３
ｂを行った。この後事３のサブ工程３ｃで余分の該染色
液を吸い取り自然乾燥して、検体の染色を完了した。

以上説明した電子顕微鏡検体調整法を上述のインフルエ
ンザウィルスに適用して検出限界を調べた。インフルエ
ンザウィルスをＰＢＳ溶液で１０倍段階希釈をしていき
、ウィルスの電子顕微鏡観察限界を調べたところ、ウィ
ルス濃度千個／１１２程度でも倍率５万倍の電子顕微鏡
視野で非常に簡単にウィルスの検索ができた。

比較のために磁気標識しない従来の方法で電子顕微鏡ａ
察したところ、希釈されていないものでもウィルス粒子
の存在を確認できなかった。

なお、上記の説明では検体容器ｌＯを上下方向に移動す
る方法を説明したが、メツシュ搭載台２３を取り付けた
磁極片２５を上下方向に移動しても同様の結果が得られ
る。

（実施例２） 実施例１で説明した検体を磁気標識する第１工程の前に
、ウィルスを凝集させる工程を実施した。

即ち、実施例！で用いた検体１ｍｌ！に、同じ〈実施例
１で用いたＩｇＧ抗体を２０μＱ加え、３５’Ｃ，２，
５時間、引続き４℃−晩のインキュベーノヨンによって
、該ウィルス同士を凝集させた。この工程の後、実施例
１とほぼ同じ工程の検体調整を行った。実施例１と異な
るところは、検体を磁気標識する磁性体標識抗体として
、デキストランコート磁性微粒子にプロティンＡを結合
させたものを用いた点のみである。プロティンＡはＩｇ
Ｇ抗体をのみに結合するから、前記１ｇＧ抗体によって
凝集した該ウィルスが磁気標識されることになる。この
ように、予めウィルス団子を凝集させる前処理を施すこ
とによって電子顕微鏡の観察かいっそう容易になり、ウ
ィルス蟲度１００個／ＩＩＱ程度でも簡単に検索できた
。

本実施例２のように予め検体を凝集させ電子顕微鏡の観
察を容易にする方法は、従来から免疫電子Ｓ微鏡調整法
として公知であるが、検体を磁気標識する方法は本発明
が初めてであり、従来の免疫電子顕微鏡調整法よりも検
出感度が５桁以上改善された。

なお前記実施例では本発明をウィルスの電子顕微鏡観察
に適用した例を示したが、本発明は癌細胞、リンパ球等
の各種細胞の観察にも適用できることは勿論である。

また本発明は、メツシュ上に検体をネガティブ染色する
方法のみならず、検体を樹脂に埋め込み薄切片を透過電
子顕微鏡で観察する方法にも適用できる。すなわち従来
薄切片を作成する場合、検体を遠心沈降する操作を繰り
返しながら、検体を固定、脱水、埋め込みの過程を進め
る方法が取られていたが、本発明の検体調整法を適用す
れば、遠心沈降する代わりに、傾斜磁界中で検体を局所
に誘導、保持できるから、検体の固定、アルコールによ
る脱水が容易に行え、また埋め込みの際にも検体を局所
に集中できるから、ミクロトームで切断するのが容易に
なる。

〔発明の効果〕

以上説明したように本発明の電子顕微鏡検体調整法では
、傾斜磁界を印加して検体浮遊液の液面°またはその近
傍に検体を濃縮し、この局部濃縮点にメツシュを挿入し
て検体を回収するので、異物が非常１こ多く目的物質で
ある検体が微量しか含まれていないような検体浮遊液か
らも、精製されたのと同一の状態の検体をメツシュに効
率良く回収できる。従って本発明の電子顕微鏡検体調整
法によれば、電子顕微鏡による検出感度を飛躍的に向上
できる。しかも本発明の調整法は、操作が極めて簡略な
ので、一連の検体調整工程のより一層の効率化を実現で
きる。

またメツシュの裏面側からメツシュの位置で磁界が最も
強くなるような傾斜磁界を検体浮遊液に作用させて、磁
気標識された検体をメツシュに誘導し固着すると、調整
操作を円滑に行うことができる。

そして傾斜磁界を発生させる傾斜磁界発生機構と、メツ
シュを傾斜磁界が集中する位置に保持するメツシュ保持
部品と、該メツシュ保持部品を容器水面に誘導する機構
とを少なくとも具備する電子顕微鏡検体調整法興を用い
ることによって、本発明の検体調整法を効率良く行うこ
とができる。

以上説明したように本発明によれば、培養不能な未知の
ウィルスを微棗でも直接検出することが可能になり、ウ
ィルス学に貢献するところ大である。例えば、非Ａ非Ｂ
型肝炎ウィルスの発見に寄与できる。また癌細胞等の細
胞レベルの早期診断にも有効であり、癌から遊離して血
液等の体液中に転移しつつある極微量の癌細胞の観察が
可能となる。このように、ウィルスや癌細胞、さらには
エイズやＥＢウィルスに感染したリンパ球やモノクロー
ナル抗体を産出するハイブリドーマ等の各種細胞の観察
などを行う、医学・医療の分野、分子生物学等の理学分
野、細胞工学・遺伝子工学等のバイオテクノロジー分野
等で本発明が果たす効果は計り知れない。

【図面の簡単な説明】

第１図は東側１の電子顕微鏡検体調整法の工程図、第２
図は実施例１で用いた電子顕微鏡検体調整器具の構成を
示す概略図、第３図は同電子顕微鏡検体調整器具のメツ
シュ搭載台の部分を示す概略図である。 ０・・・・容器、　　　　ＩＩ・・・・・・容器支持台
、２・・・・容器案内面、Ｉ３・・・・・継鉄Ａ、４・
・・・・・継鉄ＢＳ　　　１５・・・・・・継鉄クラン
プねじ、６・・・・・・高さ調節ステージ、１７・・・
・・・台。 ｌ・・・・・・メツシュ（電子顕微鏡観察用メッシ：Ｌ
）、２・・・・・・粘着フィルム、２３・・・・・・メ
ツシュ搭載台、４・・・・・・止めネジ、　２５・・・
・・・磁極片、６・・・・・・電磁石。 出顆大　　日本電信電話株式会社

Claims (3)

【特許請求の範囲】
1. （１）検体に磁気標識する第１の工程と、前記第１工程
   で磁気標識された検体を含む検体浮遊液に傾斜磁界を作
   用させて検体を局部濃縮する第２の工程とを少なくとも
   含む電子顕微鏡検体調整法において、 前記第２の工程で検体を液面または液面近傍に濃縮し、
   この局部濃縮点に電子顕微鏡観察用メッシュを挿入して
   、検体を電子顕微鏡観察用メッシュ上に回収することを
   特徴とする電子顕微鏡検体調整法。
2. （２）電子顕微鏡観察用メッシュの裏面側から該電子顕
   微鏡観察用メッシュの位置で磁界が最も強くなるような
   傾斜磁界を検体浮遊液に作用させて、磁気標識された検
   体を電子顕微鏡観察用メッシュに誘導し固着することを
   特徴とする請求項１記載の電子顕微鏡検体調整法。
3. （３）傾斜磁界を発生させる傾斜磁界発生機構と、電子
   顕微鏡観察用メッシュを傾斜磁界が集中する位置に保持
   する電子顕微鏡観察用メッシュ保持部品と、該電子顕微
   鏡観察用メッシュ保持部品を容器水面に誘導する機構と
   を少なくとも具備する電子顕微鏡検体調整器具。