JPH01500004A - 光学活性１，２―ジヒドロ―３Ｈ―ピロロ［１，２ａ］ピロール―１―カルボン酸誘導体の調製方法 - Google Patents

光学活性１，２―ジヒドロ―３Ｈ―ピロロ［１，２ａ］ピロール―１―カルボン酸誘導体の調製方法

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JPH01500004A JP62502393A JP50239387A JPH01500004A JP H01500004 A JPH01500004 A JP H01500004A JP 62502393 A JP62502393 A JP 62502393A JP 50239387 A JP50239387 A JP 50239387A JP H01500004 A JPH01500004 A JP H01500004A
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シー，チャールス　ジェー．
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ウイスコンシン　アラムナイ　リサーチ　フォンデーション
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Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 学活　ｌ　２−ジヒドロ−３Ｈ−ピロロ１．２ａ　ビロール−１−カルボン酸誘 導体Δ貫１方羞 瑳五欠Ｖ 本発明は光学活性１．２−ジヒドロ−３Ｈ−とロロ［１，２ａ］ピロール−１− カルボン酸エステル訪導体を製造する新規な方法に関する。より詳しくは、本発 明は光学活性１．２−ジヒドロ−３Ｈ−ピロロ［１，２ａ］ピロール−１−カル ボン酸を得るためラセミ体の１．２−ジヒドロ−３Ｈ−ピロロ［１，２ａｌビロ ール−１−カルボン酸エステルを酵素により鏡像体特異的加水分解する方法に関 する。
１一旦 ケトロラック（ｋｅｔｒｏｌａｃ）、すなわち５−ベンゾイル−１，２−ジヒド ロ−３Ｈ−ピロロ［１，２ａ］ピロール−１−カルボン酸８０）］、動物モデル に対する強力な抗炎症剤及び鎮痛剤である［Ｗ、Ｈ，ブックスはか、エイジエン ツ・アクションズ、１１．６８４　（１９８２）］、人間に対しては手術後の鎮 痛剤としてモルフアーマコロシー・セラビューティクス、１旦、２８５　（１９ ８４）］、ごく最近動物モデル研究においてケトロラツク（１）の（−）一旦一 異性体が（＋）一旦一興性体よりも約６０−２３０倍才ブ・メディカル・ケミス トリー、且、５８９　（１９８６）］。
（＋）　−（旦）−１，Ｒ，＝Ｃ０ＯＨ；　Ｒ２＝Ｈ（−１）−（Ｓ）−１，Ｒ ＝Ｈ；Ｒ２＝Ｃ０Ｏ）１最近、（−）一旦一興性体が高価なシンコニジンアルカ ロイドを用い時間のかかる化学的ラセミ分割法により得られている［Ａ。
グツラマンはか、ジャーナル・オブ・メディカル・ケミストリー。
且、５８９　（１９８６）］。
発明の開示 広くは、本発明はリパーゼ及びプロテアーゼからなる群から選ばれる細胞外微生 物酵素を触媒として使用することからなり、下記のように特定されるラセミ体の １．２−ジヒドロ−３Ｈ−ピロロ［１，２ａ］ピロール−１−カルボン酸エステ ルを鏡面体特異的な加水分解することからなる。
ここに、Ｒ１は、Ｃ−２’に電気陰性の置換基を有するか又は有しない１〜約１ ２個の炭素原子を有するアルカン基、約５〜約７個の炭素原子を有するシクロア ルカン基、約６〜約８個の炭素原子を有するフェニル及びベンジル基（上記アル カン基の電気陰性置換基の例はハロゲン原子、ニトロ基、ニトリル基及びカルボ ン酸などの基がある）からなる類から選ばれる直鎖状、枝分れ鎖状又は環状構造 の基であり、 Ｒ２は約２〜約１２個の炭素原子を有する直鎖状、枝分れ鎖状又は環状構造のア シル基、約５〜約７個の炭素原子を有するシクロアルカン基、芳香族環にニトロ 、ハロゲン、メチル、又はアルコキシ基を含有するベンゾイル、ナフトイル、ビ フェノイル、及びカルボベンゾキシ基である０本発明の目的に著しく好適なアロ イル基の例はベンゾイル及びメトキシベンゾイルである。
光学活性１．２−ジヒドロ−３Ｈ−ピロロ［１，２ａ］ビロール−１−カルボン 酸誘導体を酵素的なラセミ分割法を用い高収率で製造することが本発明の目的で ある。
本発明のもう１つの目的は細胞外の廉価な微生物リパーゼ及びプロテアーゼを用 い光学活性の（−）−Ｓ−Ｓ−ベンゾイル−１，２−ジヒドロ−３Ｈ−ピロロ［ １，２ａ］ビロール−１−カルボン酸（１）を調製する改良方法を提供すること にある。
本発明のこれら及びその他の目的及び利点は以下の詳細な説明からより明らかに される。
本発明方法は前記１，２−ジヒドロ−３Ｈ−ピロロ［１，２ａｌビロール−１− カルボン酸エステルを微生物リバー（／　（ＥＣ３，１、ｌ、３）又はプロテア ーゼの加水分解作用に処し、そして光学活性の１．２−ジヒドロ−３Ｈ−ピｏｏ ［１，２ａ］ビロール−ｌ−カルボン酸誘導体を回収することからなる。
細胞外微生物リパーゼ及びプロテアーゼが所望の鏡像体特異的加水分解に触媒的 機能を有することができることが発見された。特に適したものはカンジダ（Ｃａ ｎｄｉｄａ、リゾーブス（ＲｈｉｚＯｕＳ、△ラム（Ｃｈｒｏｍｏｂａｃｔｅｒ ｉｕ璽）の各属微生物から得られるリパーゼである。特に適したプロテアーゼは ストレプトミセス（Ｓｔｒｅｐｔｏｓｙｃｅｓ）、アルベルギルス、リゾープス の各属から得られるものである。
細胞外微生物リパーゼはよく知られており、それらの多くは市販品として入手で きる（Ｂ、ベルゲストローム及びＨ，Ｌ、ブロックマン編集「リパーゼ」、エル セピア、Ｎ、Ｙ、１９８４のＭ、イワイ及びＹ、ツジサカ、第４４３ページ及び Ｍ、スギウラ、第５０５ページ参照）０例えば、これらは工業的に脂肪のエステ ル交換反応に用いられており、油状汚染物除去用として洗たく用洗剤に併用され ていた。細胞外バクテリア、かび、酵母のプロテアーゼは文献（Ｐ、Ｄボイヤー 編「エンザイムス」、第ｍ巻アカデミツクブレス、Ｎ、Ｙ、１９７１のＨ，マツ バラ及びＪ、フェダー、第７２１ページ参照）によく記載されている。これらの 微生物リパーゼ及びプロテアーゼの微生物そのものから酵素と区別される顕著な 特徴は基質及び生成物の濃度を高濃度にできることである０例えば、明らかな基 質及び生成物阻害は報告されていない、したがフて、これらの酵素的加水分解反 応は鏡像体特異的反応としては異常に高い程度の高濃度（０，１−５Ｍ）で行う ことができる。さらにそれらは所望の反応条件下で非常に安定であり、したがっ て再使用することができる。
１．２−ジヒドロ−３Ｈ−ピロロ［１，２ａ］ビロール−１−カルボン酸エステ ル基質は固体又は液体状で０．１−５モルの濃度になるようリパーゼを含有する 適切な緩衝液に添加して鏡像体特異的加水分解を効果的にすることができる。別 の方法として、基質な四塩化炭素、シクロヘキサン、二硫化炭素又はヘキサンな ど酵素を変性させない限りの適切な有機溶媒中に溶解することができる。さらに 基質はポリビニルアルコール又はプロピレングリコールを用いて乳化することも できる。もちろん、エステル基質とリパーゼが接触状態になる温度及び圧力条件 は当業者には明らかなように相互依存するものである。一般に、大気圧下で、温 度は約ｌＯ℃から約４０℃の範囲に、媒質のｐＨは３から約８．５の範囲にする ことができる。
＆舅ヱｌり町【罠里 以下の例は本発明の説明のために示されるものであり、これによフて別記の請求 の範囲を限定するものではない０分割されるべき（±）−１，２−ジヒドロ−３ Ｈ−ピロロ［１，２ａ］ビロール−１−カルボン酸エステルはＪ、Ｍ、ムユウス キーなど、ジャーナル・オブ・メディカル・ケミストリー、２８．１０３７　（ １９８５）及びＨ，カスビオなど、カナデアン・ジャーナル・オブ・ケミスト以 二、１旦、２２９５　（１９８２）により報告された方法によって調製される。
残存するメチルエステル及び酸（ジアゾメタンによる処理後）の鏡像体過剰比（ ｅｎａｎｔｏｍｅｒｉｃ　ｅｘｃｅｓｓ）　（ｅ　ｅ　）はＥｕ（ｈｆｃ）　３ 　を用いるＰＭＲ測定により定量した。スペクトルはパリアン（Ｖａｒｉａｎ） ＥＭ　Ｓ　９０分光計により記録した。操作としては、０．５ｍｌのｃＤｃｕ３ 中に１５ｍｇのケトロラックメチルエステルを溶解し、それに５０ｍｇのＥ　ｕ 　（ｈｆｃ）　３を添加することからなるものであった。
イトウサンギョウ　ＯＦ　３６０，０ＯＯｕ／ｇ）（１００ｍｇ）を含有し、Ｐ Ｈ８，０，０，２Ｍリン酸塩緩衝液からなる懸濁液１ｍｌに２６８ｍｇの（±） −５−ベンゾイル−１，２−ジヒドロ−３Ｈ−ビロロ［１，２ａ］ビロール−１ −カルボン酸メチルエステル（ＩＭ）を添加した。この反応混合物は２４℃で２ 日間マグネチックスターラーで攪拌した６次いで、内容物をＨＣＪＩにより酸性 にし、酢酸エチルを用い３回徹底的に抽出した。この有機溶媒抽出液は統合して 硫酸ナトリウム上で乾燥した後、蒸発乾固させた。残留物を５％のＮ　ａ　ＨＣ Ｏ３液中に懸濁させ、ヘキサンを用いて抽出し、（−）−５−ベンゾイル−１， ２−ジヒドロ−３Ｈ−とロロ［１，Ｚａｌビロール−１−カルボン酸メチルエス テル（且至＝ロロメタンによる抽出て（＋）−Ｓ−ベンゾイル−１，２−ジヒド ロ−３Ｈ−ピロロ［１，２ａ］ピロール−１−カルボン酸（見！＝０．６８）を 得た。
鉄−１ 基質としｒ　（ｆ）　−１，２−ジヒドロ−３Ｈ−ピロロ［１，２ａ］ピロール −１−カルボン酸メチルエステルを用いる以外は例１と同じ操作を繰返し、光学 活性１．２−ジヒドロ−３Ｈ−ピロロ［１゜２ａ］ピロール−１−カルボン−酸 を良好な収率で得る。
江−１ 基質として（±）−５−［４−メトキシベンゾイル］−１，２−ジヒドロ−３Ｈ −ピロロ［１，２ａ］ピロール−１−カルボン酸メチルエステルを用いる以外は 例１と同じ操作な綴返し、（＋）　−Ｓ−［４−メトキシベンゾイル］−１，２ −ジヒドロ−３Ｈ−ピロロ［１，２ａ］ピロール−１−カルボン酸（アニロラッ ク）を良好な収率で得る。
性−Ａ 基質として（±）−５−ベンゾイル−１，２−ジヒドロ−３Ｈ−ピロロ［１，２ ａ］ピロール−１−カルボン酸クロロエチルエステルを用いる以外は例１と同じ 操作を繰返し、（＋）−５−ベンゾイル−１，２−ジヒドロ−３Ｈ−ピロ０［１ ，２ａ］ピロール−１−カルボン酸を得る。
仮−二 基質として（±）−１，２−ジヒドロ−３Ｈ−ピロロ［１，２ａ］ピロール−１ −カルボン酸クロロエチルエステルを用いる以外は実施例１と同じ操作を繰返し 、光学活性１．２−ジヒドロ−３Ｈ−ピロロ［１，２ａｌビロール−１−カルボ ン酸を得る。
扛一旦 基質として（±）−５−［４−メトキシベンゾイル］−１，２−ジヒドロ−３Ｈ −ピロロ［１，２ａ］ピロール−１−カルボン酸クロロエチルエステルを用いる 以外は例１と同じ操作を繰返し、（＋）−５−［４−メトキシベンゾイル］−１ ，２−ジヒドロ−３Ｈ−ピロロ［１，２ａ］ピロール−１−カルボン酸を得る。
江−ユ 基質として（±）−５−ベンゾイル−１，２−ジヒドロ−３Ｈ−ピロロ［１，２ ａ］ピロール−１−カルボン酸ドデシルエステルを用いる以外は例１と同じ操作 を繰返し、（＋）＝Ｓ−ベンゾイルー１．２−ジヒドロ−３Ｈ−ピロロ［１，２ ａ］ピロール−１−カルボン酸を得る。
性−互 酵素としてムコール・メイヘイ（Ｍｕｃｏｒ■ｅｉｈｅｉ）リパーゼ（アマノ、 １０，０ＯＯＩＬｕ／ｇｍ、ＭＡＰ）３０ｍｇを用いる以外は例１と同じ操作を 繰返し、（＋）−５−ベンゾイル−１，２−ジヒドロ−３Ｈ−ピロロ−１−カル ボン酸（ｅｅ＝０．９４）及び（−）−５−ベンゾイル−１，２−ジヒドロ−３ Ｈ−ピロロ［１゜２ａ］ピロール−１−カルボン酸メチルエステル（ｅｅ＝０． ９０）を得た。
（アマノ、７５０，０ＯＯＩＬｕ／ｇｍ、ＦＡＰ）２０ｍｇを用いる以外は例２ と同じ操作を繰返し、光学活性−１，２−ジヒドロ−３Ｈ−ピロロ［１，２ａ］ ピロール−１−カルボン酸を得る。
例１Ｏ 酵素として２５００ユニツトのクロモバクテリウム・ビオラジウム（Ｃｈｒｏｍ ｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ　Ｖｉｏｌａｃｅｕｍ）リパーゼ（タイプ■、シグマ）を 用い例２の操作を繰返して光学活性５−ベンゾイル−１，２−ジヒドロ−３Ｈ− ピロロ［１，２ａ］ピロール−１−カルボン酸を得る。
例−１１ 酵素としてシュードモナス（Ｐｓｅｕｄｏ■ｏｎａｓ）リポタンパク質リパーゼ ８０（アマノ、８００ｕ／ｇｍ）ｌＯｍｇを用い例１の操作を繰返して、光学活 性（＋）−Ｓ−ベンゾイル−１，２−ジヒドロ−３Ｈ−ピロロ［１，２ａ］ピロ ール−１−カルボン酸（見！＝０．９０）及び（−）−５−ベンゾイル−１，２ −ジヒドロ−３Ｈ−ピロロ［１，２ａ］ピロール−１−カルボン酸メチルエステ ル（見！＝Ｑ、９３）を得た。
ｃａｎｄｉｄｕｍ）（ＡＴＣＣ３４６１４）リパーゼ［Ｙ、ツジサヵなど、アグ リカルチエラル・エンド・バイオロジカル・ケミストリー、３７．１４５７　（ １９７３）］　１１０ｍを用い例１の操作を繰返して光学活性５−ベンゾイル− １，２−ジヒドロ−３Ｈ−ピロロ［１，２ａｌビロール−１−カルボン酸を得る 。
１０６３　（１９７５）２００ｍｇを用い例１の操作を繰返して、光学活性５− ベンゾイル−１，２−ジヒドロ−３Ｈ−ピロロ［１゜２ｇ］ビロールー１−カル ボン酸を得る。
ゼ（アマノ）２００ｍｇを用い例１の操作を繰返して、光学活性５−ベンゾイル −１，２−ジヒドロ−３Ｈ−ピロロ［１，２ａ］ピロール−１−カルボン酸を得 る。
ゼ（アマノに−１０，１０，０００１Ｌｕ／ｇｍ）１００ｍｇを用い例１の操作 を繰返して、光学活性（＋）−５−ベンゾイル−１゜２−ジヒドロ−３Ｈ−ピロ ロ［１，２ａｌビロール−カルボン酸（見！＝０．８８）及び（−）−５−ベン ゾイル−１，２−ジヒドロ−３Ｈ−ピロロ［１，２ａ］ピロール−１−カルボン 酸メチルエステル（ｅｅ＝０．３０）を得た。
例　１６ （アマノ、４５０，０ＯＯＩＬｕ／ｇｍ、Ｎ）５０ｍｇを用い例１の操作を繰返 して、光学活性（＋）−５−ベンゾイル−１，２−ジヒ）ＣＯ−３）１−ピロロ ［１，２ａ］ピロール−１−カルボン酸（ｅｅ＝０．０８）及び（−）−５−ベ ンゾイル−１，２−ジヒドｃｒ−３８−ピロロ［１，２ａ］ピロール−１−カル ボン酸メチルエ酵素としてムコール・メイへイリバーゼ（アマノ）２００ｍｇを 用い例２の操作な繰返して、光学活性１．２−ジヒドロ−３Ｈ−ピロロ［１，２ ａ］ピロール−１−カルボン酸を得る。
例　１８ 酵素として２，０００ユニツトのリゾーブス・デレマー（Ｒｈｉｚｏ−匹ｓ　ｄ ｅＩｅｍａΩリパーゼ（ケミカル・ダイナミクス・コーポレーション、ｓ、ｏｏ ｏユニット／ｍｇ）を用い例２の操作を繰返して、光学活性１，２−ジヒドロ− ３Ｈ−ピロロ［１，２ａ］ピロール−ｌ−カルボン酸を得る。
（１００ｍ　ｇ　）を用い例２の操作を繰返して、光学活性１．２−ジヒドロ− ３Ｈ−ピロロ［１，２ａ］ピロール−１−カルボン酸を得る。
例２０ 酵素としてシュードモナスリパーゼ（アマノＬＰＬ−８０）３０ｍｇを用い例２ の操作を繰返して、光学活性１．２−ジヒドロ−３Ｈ−ピロロ［１，２ａ］ピロ ール−１−カルボン酸を得る。
例２１ 酵素としてリゾーブス・ニベウスリパーゼ（アマノ、Ｎ）１００ｍｇを用い例３ の操作を繰返して、光学活性５−［４−メトキシベンゾイル］−１，２−ジヒド ロ−３Ｈ−ピロロ［１，２ａｌビロール−１−カルボン酸を得る。
例２２ 酵素としてアスペルギルス・ニガーリパーゼ（アマノＡＰ、１２０．０ＯＯＬｕ ／ｇｍ）を用い例３の操作な繰返して、光学活性（＋）−５−［４−メトキシベ ンゾイル］−１，２−ジヒドロ−３Ｈ−ピロロ［１，２ａ］ピロール−１−カル ボン酸を得る。
３０　ｍ　ｇを用い例６の操作を繰返して、光学活性（＋）−５−［４−メトキ シベンゾイル］−１，２−ジヒドロ−３Ｈ−ピロロ［１゜２ａ］ピロール−１− カルボン酸を得る。
例２４ 酵素としてムコール・メイへイリバーゼ（アマノ、ＭＡＰ）５０ｍｇを用い例４ の操作を繰返して、光学活性（＋）−Ｓ−ベンゾイル−１，２−ジヒドロ−３Ｈ −ピロロ［１，２ａｌピロール−１−カルボン酸を得る。
例　２５ 酵素としてムコール・メイへイリバーゼ（アマノ、ＭＡＰ）５０ｍｇを用い例５ の操作を繰返して、光学活性１．２−ジヒドロ−３Ｈ−ピロロ［１，２ａ］ピロ ール−１−カルボン酸を得る。
ロチアーゼ（シグマ、タイプｘｘ１１５〜２０ｕ／固形物ｍｇ、ＰＯ６５２）（ ６ｍｇ）を含有し、ｐＨ８，０，０，２Ｍリン酸カリウム緩衝液からなる、懸濁 液２ｍ文に９６　ｍ　ｇの（±）−５−ベンゾイル−１，２−ジヒドロ−３Ｈ− ピロロ［１，２ａ］ピロール−１−カルボン酸メチルエステルを添加した。この 反応混合物は２５℃で７４時間マグネチックスターラーで攪拌した０次いで、内 容物なＨＣ！Ｌにより酸性にし、ＣＨ２Ｃ交２を用い３回徹底的に抽出した。こ の有機溶媒抽出液は統合して硫酸ナトリウム上で乾燥したせ、ヘキサン抽出によ り４０　ｍ　ｇの（＋）−Ｓ−ベンゾイル−１゜２−ジヒドロ−３Ｈ−ピロロ［ １，２ａ］ピロール−１−カルボン酸メチルエステル（■＝０．９６）を得た。
水性Ｎ　ａ　ＨＣ０３層をＨＣｆｆｉによりｐＨ２，０に酸性化した後ＣＨ２Ｃ ５Ｌ２を用いる抽出により３９　ｍ　ｇの（−）−５−ベンゾイル−１，２−ジ ヒドロ−３Ｈ−ピロロ［１，２ａコピロール−１−カルボン（見！＝０．９６） を得た。
例２７ ２４ｍｇのストレプトミセス・グリセウスプロテアーゼ（シグマ、タイプＸＩＶ 　、プロナーゼＥ、Ｐ５１４７）及び１１０ｍｇ（７）（±）−５−ベンゾイル −１，２−ジヒドロ−３Ｈ−ピロロ［１゜２ａ］ピロール−１−カルボン酸メチ ルエステルを用い、例２６の操作を繰返した。装置混合物は２５℃で３１２時間 マグネチックスターラーで攪拌した。前記と同じ仕上げ操作を用い、５８ｍｇの （＋）−５−ベンゾイル−１，２−ジヒドロ−３Ｈ−ピロロ［１゜２ａ］ピロー ル−１−カルボン酸メチルエステル（ｅｅ＝Ｏ−４６）及び２８　ｍ　ｇの（− ）−５−ベンゾイル−１，２−ジヒドロ−３Ｈ−ピロロ［１，２ａ］ピロール− １−カルボン酸（見ｅ＝０．９６）を得た。
テアーゼ（シグマ、タイプ店、Ｏ，，３ｕ／固形物ｍｇ、Ｐ２１４３）及び基質 として１１４ｍｇの（±）−５−ベンゾイル−１，２−ジヒドロ−３Ｈ−ピロロ ［１，２ａ］ピロール−カルボン酸メチルエステルを用い、例２６の操作を繰返 した０反応混合物は２５°Ｃで３１２時間攪拌温置装て同じ仕上げ操作を行った 。５２ｍｇの（−）−５−ベンゾイル−１，２−ジヒドロ−３Ｈ−ピロロ［１， ２ａ］ピロール−１−カルボン酸メチルエステル（ｅｅ＝０．８０）及び４０　 ｍ　ｇの（＋）−Ｓ−ベンゾイル−１，２−ジヒドロ−３Ｈ−ピロロ［１，２ａ ］ピロール−１−カルボン酸（ｅｅ＝０．９６）を得た。
例２９ ４９　ｍ　ｇのアスペルギルス・ソジャエ（＾ｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ　ｓｏｊａ ｅ）プロテアーゼ（シグマ、タイプＸ！Ｘ　、０．４ｕ／固形物ｍｇ、Ｐ７０２ ６）及び基質として１４７ｍｇの（±）−５−ベンゾイル−１，２−ジヒド０− ３Ｈ−ピロｏ［１，２ａｌビロール−１−カルボン酸メチルエステルを用い、例 ２６の操作を繰返した０反応混合物は２５℃て２３時間攪拌した。同じ仕上げ操 作によって、６０ｍｇの（＋）−Ｓ−ベンゾイル−１，２−ジヒドロ−３Ｈ−ヒ °ロロ［１，２ａ］ビロール−１−カルボン酸メチルエステル（且至＝０．９２ ）及び６８ｍｇの（−）−５−ベンゾイル−３Ｈ−ピロロ［１，２ａ］ビロール −１−カルボン酸（ｅｅ＝０．７６）を得た。
例３０ ６２　ｍ　ｇのりゾーブスｓ　ｐ　、　（Ｒｈｉｚｏｐｕｓ　ｇｐ）プロテアー ゼ（シグマ、タイプｘｖｍ、０．５ｕ／固形物ｍｇ、Ｐ５０２７）及び基質とし て１１７ｍｇの（±）−５−ベンゾイル−１，２−ジヒドロ−３Ｈ−ピロロ［１ ，２ａ］ビロール−１−カルボン酸メチルエステルを用い、例２６の操作を繰返 した０反応混合物は２５℃で１６５時間ゆるやかに攪拌した。同じ仕上げ操作に より、９０　ｍ　Ｋの（−）−５−ベンゾイル−１，２−ジヒドロ−３Ｈ−ピロ ロ［ｌ、２ａ］とロール−１−カルボン酸メチルエステル（ｅｅ＝０．１２）及 び１３ｍｇの（＋）−５−ベンゾイル−１，２−ジヒドロ−３Ｈ−ピロロ［１， ２ａ］ビロール−１−カルボン酸（ｅｅ＝０．６２）を得た。
例３１ ７５　ｍ　ｇのアスペルギルス・オリーゼ（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ　ｏｒｙｚ ａｅ）プロテアーゼ（シグマ、タイプＸＸｍ、４ｕ／固形物ｍｇ、ｐ−４０３２ ）及び基質として８７　ｍ　ｇの（±）−５−ベンゾイル−１，２−ジヒドロ− ３Ｈ−ビ００［１，２ａ］ビロール−１−カルボン酸メチルエステルを用い、例 ２６の操作を繰返した６反応混合物は２５℃で２３時間ゆるやかに攪拌した。同 じ仕上げ操作により、５　ｍ　ｇの（＋）−５−ベンゾイル−１，２−ジヒド０ −３Ｈ−ピロロ［１，２ａ］ビロール−１−カルボン酸メチルエステル（ｅｅ＝ ０．９２）及び７２　ｍ　ｇの（−）−５−ベンゾイル−１゜２−ジヒドロ−３ Ｈ−ピロロ［１，２ａ］ビロール−１−カルボン酸（且ｅ＝０．０８）を得た。
アーゼ（アマノ、プロテアーゼＮ、１８００ノースロップ単位／ｇ）及び基質と して７７　ｍ　ｇの（±）−５−ベンゾイル−１，２−ジヒトロ−３Ｈ−ピロロ ［１，２ａ］ビロール−１−カルボン酸メチルエステルを用い１例２６の操作を 繰返した０反応混合物は２５℃で７４時間ゆるやかに攪拌した。同じ仕上げ操作 により、４８ｍｇの（＋）−Ｓ−ベンゾイル−１，２−ジヒドロ−３Ｈ−ピロロ ［１，２ａ］ビロール−１−カルボン酸メチルエステル（ｅｅ＝０．４４）及び １９ｍｇの（−）−５−ベンゾイル−１，２−ジヒドロ−３Ｈ−ピロロ［１，２ ａ］ビロール−１−カルボン酸（ｇｅ＝０．９６）を得た。
例３３ アスペルギルス・オリーゼプロテアーゼ［アマノ、２Ａかびプロテアーゼ（中性 ）、２０，０ＯＯｕ／ｇｍ］及び基質として８５ｍｇの（±）−５−ベンゾイル −１，２−ジヒドロ−３Ｈ−ピロロ［１，２ａ］ビロール−１−カルボン酸メチ ルエステルを用い、例２６の操作を繰返した０反応混合物は２５℃で７４時間ゆ るやかに攪拌した。同じ仕上げ操作によりて、３２ｍｇの（＋）−５−ベンゾイ ル−１，２−ジヒドロ−３Ｈ−ピロロ［１，２ａ］ビロール−１−カルボン酸メ チルエステル（ｅｅ＝０．９６）及び４１ｍｇの（−）−５−ベンゾイル−１， ２−ジヒドロ−３Ｈ−ピロロ［１゜２ａ］ビロール−１−カルボン酸（ｅｅ＝０ ．７０）を得た。
例３４ ストレプトミセス・グリセウスプロテアーゼ（シグマ、タイプＸＸＩ　、１５〜 ２０ｕ／固形物ｍｇ　Ｐ−０６５２）（３ｍｇ）を含有し、ｐＨ９，８，０，３ Ｍホウ酸カリウム緩衝液からなる懸濁液１ｍ文に３０ｍｇの（±）−５−ベンゾ イル−１，２−ジヒドロ−３Ｈ−ピロロ［１，２ａｌピロール−１−カルボン酸 エチルエステルを添加した０反応混合物は２５℃で４８時間マグネチックスター ラーで攪拌した０次いで、内容物をＨＣ見によりｐＨＩ　Ｏに酸性化し、ＣＨ２ Ｃｌ　ｚを用い３回徹底的に抽出した。有機溶媒抽出液は統合して硫酸ナトリウ ム上で乾燥した後蒸発乾固させて２２ｍｇの（−）−５−ベンゾイル−１，２− ジヒドロ−３Ｈ−ピロロ［１，２ａ］ビロール−１−カルボン酸（見ｅ＝０．８ ０）を得た。得られた酸のヘキサン−酢酸エチルからの再結晶により鏡面体過剰 比（見！）は０．９６まて上昇した。融点１７０℃。
以上に記載した本発明方法は、当業者にとって自明であるように、種々の手段に よって変えたり、恐らく改良されたりすることかできよう。
例えば１本発明方法は酵素を固定化して連続運転したり、数回再使用してコスト を下げることができ、（＋）−エステルを回収し、ラセミ化し、再使用すること ができ、あるいは基質を微結晶の粉末の酵素で処理して良好な分散を得ることが できる。さらに、（±）−基質及びラセミ化剤を適切な溶媒中に溶解してエステ ル基の開裂を伴うことなくその場でエステルのみを連続的にラセミ化することが できる。この方法は生成物単離を促進するばかりでなく二次的な不斉変換に相当 するものである（Ｊ、Ｄ−モリス、Ｊ、Ｗ、スコツト編「アシンメトリツク・シ ンセシス」第１巻、アカデミツクブレス社、Ｎ、Ｙ、１９８３．第３〜６ページ ）、これは前記の例３４の操作において示される。また、リパーゼの活性化剤及 び安定化剤［Ｎ、トミズカなど、アグリカルチエラル・エンド・バイオロジカル ・ケミストリー、３０．５７６　（１９６６）を湿量混合物中に導入することも でき、種々のタイプの活性化エステル（ボダンスキーなと、ペプチド・シンセシ ス第２版、ライレイ、１９７６、第９９〜１８８ページを処理する基質の転化速 度を上げるために使用することができる。これに加えて、酵素の活性サイトに向 けられた突然変異生成又は化学変性もＶ■ａｘ／ｋｍ及び／又は安定性を改善し た酵素を調製するために用いることができる。
国際調査報告

Claims (22)

    【特許請求の範囲】
  1. １．１，２−ジヒドロ−３Ｈ−ピロロ［１，２ａ］ピロール−１−カルボン酸の ラセミ体のエステルを、微生物リパーゼ（ＥＣ３・１・１・３）及び微生物プロ テアーゼからなる群から選ばれる細胞外微生物酵素の加水分解酸素作用に付し、 そして所望の光学活性化合物を回収することからなる光学活性１，２−ジヒドロ −３Ｈ−ピロロ［１，２ａ］ピロール−１−カルボン酸を調製する方法。
  2. ２．ラセミエステルが構造式 ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中、Ｒ１はＣ−２′に電気陰性の置換基を有するか又は有しない１〜約１２ 個の炭素原子を有するアルカン基、約５〜約７個の炭素原子を有するシクロアル カン基、約６〜約８個の炭素原子を有するフェニル及びベンジル基からなる類か ら選ばれる直鎖状、枝分れ鎖状又は環状構造の基であり、Ｒ２は水素、又は約２ 〜約１２個の炭素原子を有する直鎖状、枝分れ鎖状又は環状構造のアシル基、約 ５〜約７個の炭素原子を有するシクロアルカン基、芳香族環にニトロ、ハロゲン 、メチル及びアルコキシ基からなる置換基を有するベンゾイル、ナフトイル、ピ ツエノイル及びカルボベンゾキシル基である。）を有する請求の範囲第１項に記 載の方法。
  3. ３．Ｒ２が水素、ベンゾイル、及びメトキシベンゾイル基からなる群から選ばれ る請求の範囲第２項に記載の方法。
  4. ４．ラセミエステルが活性化エステルである請求の範囲第１項に記載の方法。
  5. ５．リパーゼの活性化剤を存在させる請求の範囲第１項に記載の方法。
  6. ６．酵素が固定化酵素である請求の範囲第１項に記載の方法。
  7. ７．基質のラセミエステルが（±）−５−ベンゾイル−１，２−ジヒドロ−３Ｈ −ピロロ［１，２ａ］ピロール−１−カルボン酸クロロエチルエステルである請 求の範囲第１項に記載の方法。
  8. ８．基質のラセミエステルが（±）−５−ベンゾイル−１，２−ジヒドロ−３Ｈ −ピロロ［１，２ａ］ピロール−１−カルボン酸メチルエステルである請求の範 囲第１項に記載の方法。
  9. ９．基質のラセミエステルが（±）−１，２−ジヒドロ−３Ｈ−ピロロ［１，２ ａ］ピロール−１−カルボン酸クロロエチルエステルである請求の範囲第１項に 記載の方法。
  10. １０．基質のラセミエステルが（±）−１，２−ジヒドロ−３Ｈ−ピロロ［１， ２ａ］ピロール−１−カルボン酸メチルエステルである請求の範囲第１項に記載 の方法。
  11. １１．基質のラセミエステルが（±）−５−［４−メトキシベンゾイル］−１， ２−ジヒドロ−３Ｈ−ピロロ［１，２ａ］ピロール−１−カルボン酸クロロエチ ルエステルである請求の範囲第１項に記載の方法。
  12. １２．基質のラセミエステルが（±）−５−［４−メトキシベンゾイル］−１， ２−ジヒドロ−３Ｈ−ピロロ［１，２ａ］ピロール−１−カルボン酸メチルエス テルである請求の範囲第１項に記載の方法。
  13. １３．リパーゼがカンシダ（Ｃａｎｄｉｄａ）、リゾープス（Ｒｈｉｚｏｐｕｓ ）、ムコール（Ｍｕｃｏｒ）、アスペルギルス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ）、ペ ニシリウム（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ）、シュードモナス（Ｐｓｅｄｏｍｏｎａ ｓ）、クロモバクテリウム（Ｃｈｒｏｍｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、及びゲオトリ チウム（Ｇｅｏｔｒｉｃｈｉｕｍ）からなる属から選ばれる微生物から得られる 細胞外リパーゼである請求の範囲第１項に記載の方法。
  14. １４．リパーゼがムコール・メイヘイ（Ｍｕｃｏｒ　ｍｅｉｈｅｉ）から得られ るものである請求の範囲第８項に記載の方法。
  15. １５．リパーゼがカンジダ・シリンドラセア（Ｃａｎｄｉｄａ　ｃｙｌｉｎｄｒ ａｃｅａ）から得られるものである請求の範囲第９項に記載の方法。
  16. １６．リパーゼがメイトウサンキョウＯＦ−３６０，０００ｕ／ｇｍである請求 の範囲第１５項に記載の方法。
  17. １７．リパーゼがリゾーブス・デレマル（Ｒｈｉｚｏｐｕｓ　ｄｅｌｅｍａｒ） から得られるものである請求の範囲第１０項に記載の方法。
  18. １８．プロテアーゼがストレプトミセス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ）、バチル ス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）、アスペルギルス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ）、及びリ ゾープス（Ｒｈｉｚｏｐｕｓ）属から選ばれる微生物から得られる細胞外プロテ アーゼである請求の範囲第１項に記載の方法。
  19. １９．プロテアーゼがストレプトミセス・グリセウス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅ ｓｇｒｉｓｅｕｓ）から得られるものである請求の範囲第８項に記載の方法。
  20. ２０．プロテアーゼがアスペルギルス・ソジャエ（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓｓｏ ｊａｅ）から得られるものである請求の範囲第８項に記載の方法。
  21. ２１．プロテアーゼがバチルス・サブチリス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ　ｓｕｂｔｉｌ ｉｓ）から得られるものである請求の範囲第８項に記載の方法。
  22. ２２．プロテアーゼがアスペルギルス・オリーゼ（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓｏｒ ｙｚａｅ）から得られるものである請求の範囲第８項に記載の方法。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
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US5464609A (en) * 1990-03-16 1995-11-07 The Procter & Gamble Company Use of ketorolac for treatment of oral diseases and conditions
US5382591A (en) * 1992-12-17 1995-01-17 Sepracor Inc. Antipyretic and analgesic methods using optically pure R-ketorolac
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ES2101653B1 (es) * 1995-07-10 1998-04-01 Asturpharma S A (+)-6-(5-cloropirid-2-il)-7-oxo-viniloxicarboniloxi-5,6-dihidropirrolo(3,4b)pirazina y su uso para un procedimiento de preparacion de (+)-6-(5-cloropirid-2-il)-5-(4-metilpiperazin-1-il)-carboniloxi-7-oxo-5,6-dihidropirrolo(3,4b)pirazina.
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE3680132D1 (de) * 1985-04-01 1991-08-14 Kanegafuchi Chemical Ind Verfahren zur herstellung von optisch aktiver indolin-2-carbonsaeure.
JPH07108958B2 (ja) * 1993-09-01 1995-11-22 日本ペイント株式会社 撥水型防汚塗料組成物

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