JPH01224396A

JPH01224396A - 新規ステロイドサポニンおよびその製造法ならびにこれらの誘導体の新規用途

Info

Publication number: JPH01224396A
Application number: JP4916188A
Authority: JP
Inventors: Hiromichi Matsuura; 松浦　広道; Toshinobu Morita; 俊信森田; Takeshi Gokuchi; 後口　毅; Yoichi Itakura; 板倉　洋一; Norihiro Hayashi; 則博林
Original assignee: Wakunaga Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Wakunaga Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 1988-03-01
Filing date: 1988-03-01
Publication date: 1989-09-07
Anticipated expiration: 2012-07-16
Also published as: JP2631686B2

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】本発明はステロイドサポニンおよびその製造法ならびに
このステロイドサポニンから誘導されたスビロスタノー
ル誘導体の新規用途に関する。

茜、、ＭＪＬ肛ニンニクは、中国、朝鮮、日本その他各国において栽培
されている多年性草木で、一般に強精、強壮薬として知
られており、古くから健胃、発汗、利尿、整腸、殺菌お
よび駆虫薬として用いられている。

一方、アメリカなどで栽培されているニレファントガ−
リック（Ａｌｌｆｕｍ　ａｍｐｅｌｏｐｒａｓｕｍ　Ｌ
、）も同様に用いられているが、通常のニンニクに比較
して鱗茎が大きいことからジャイアントガーリックとも
呼ばれ、またニンニク臭も弱いことより、無臭ニンニク
とも呼ばれている。

ところで、サポニンは、その精製、単離の困難性と構造
の複雑さのため、研究の進展を見せたのは、ここ士数年
のことである。

サポニンの一般的特性は、水溶液中の気泡性と赤血球破
壊作用（溶血作用）、魚毒性、コレステロールとのコン
プレックス形成能で代表され７るが、去痰、鎮咳、抗炎
症、中枢抑制、抗疲労、抗潰瘍、脂質代謝の促進あるい
は抗腫瘍などの作用が見出されてる。

また、薬物吸収促進作用（特開昭５７−１４５８１６お
よび５８−５７４００号公報参照）薬物溶解補助作用（
特開昭６２−１３５４８８号公報参照）等も報告されて
いる。

ところで、ニンニクおよびその類縁化合物であるニレフ
ァントガ−リックの成分研究は、含硫化合物を中心とし
多数の報告が認められているが、今回得られたステロイ
ドサポニンおよびこの関連分野に関しては、全く報告さ
れてない。

発明の概要）１且本発明は、アリウム（Ａｌｌｉｕｍ）腐植物より収得さ
れたステロイドサポニンおよびその製造法ならびにこの
ステロイドサポニンから誘導されたスビロスタノール誘
導体の新規用途に関するものである。

すなわち、本発明によるステロイドサポニンは、下式（
１）で示されること、を特徴とするものである。

Ｈ式中Ｒ１は、水素原子または水酸基を示し、Ｒ２は、−
β−刀ラうトーズ４−β−グルコース、−β−ノｊラク
トーズ４−β−グルコーズ３−β−グルコーズま　たは
−β−カラケトース４−β−グルコース（３−β−グル
コーズ）２−β−グルコーズを示す。

また、上記式（１）で示されるステロイドサポニンの製
造法は、アリウム（Ａｌｌｉｕｍ）属稙物から取得する
こと、を特徴とするものである。

また、本発明における抗真菌剤は、上記式（１）で示さ
れるステロイドサポニンを酸または酵素処理して得られ
るスビロスタノール誘導体を有効成分とするものである
。

漿困本発明におけるステロイドサポニンは、新規化合物であ
り、前記した一般的なサポニンの薬効以外に、新たな生
理活性が期待できる。

また、これらのステロイドサポニンの製造法は、ＡＡｌ
１１ｕ属植物を原料とすることより、工業的製造が可能
で、かつ安全性が高いと考えられることより極めて有用
である。

また、これらのステロイドサポニンを酸または酵素処理
して得られるスビロスタノール誘導体は、抗真菌活性が
あることより、種々の感染症の治療に有用であるといえ
る。

名！Ｂλ技笠１扇１里本発明でいうステロイドサポニンとは、前記式（１）で
示される一連の化合物を言い、必要に応じて任意の化合
物と塩を形成していてもよい。

これらの化合物の一具体例を理化学的性試とともに示せ
ば下記の通りである。

Ｈ化合物１　（Ｒ１＝Ｈ，Ｒ２＝−Ｇａｌ’−Ｇｌｃ（３
−Ｇｌｃ）２−Ｇｌｃ　）外観：白色粉末元素分析’　Ｃ５７Ｈ９６０３０，５Ｈ２０旋光度　：
　［α　］　”？　　　−３８，５°（Ｃ＝０．７．ピ
リジン）Ｉ３ＣＮＭＲ（ピリジン−ｄ５）：後記表１．
２参照ＩＨＮＭＲ（ピリジン−ｄ、）’：ニアツメリッ
クプロトン、５８（ＩＨ，ｄ、Ｊニア、０Ｈｚ）、５．
３１（ＩＨ，ｄ、Ｊ＝７．６Ｈｚ）５．１６（ＩＨ，ｄ
、Ｊ＝７．６Ｈｚ）、４．９５（ＩＨ，ｄ、Ｊニア、３
Ｈｚ）４．８２（ＩＨ，ｄ、Ｊ＝７．９Ｈｚ）化合物２
　（Ｒ１”０ＨＪ２＝−Ｇａｌ’−Ｇｌｃ　）外観：白
色粉末元素分析：　Ｃ４５Ｈ７６０２ｔ、３８２０旋光度　：
　［α　］　”１　　−４０．７°（Ｃ＝１．０３．ピ
リジン）１３ＣＮＭＲ（ピリジン−ｄ５）：後記表１，
２参照ＩＨＮＭＲ（ピリジン−６５戸アノメリックプロ
トン５．２７（ＩＨ，ｄ、Ｊニア、７Ｈｚ）、４．９９
（ＩＨ，ｄ、Ｊ＝７．７Ｈｚ）４．８２（ＩＨ，ｄ、Ｊ
＝７．７Ｈｚ）化合物３　（Ｒ１＝ＯＨ，Ｒ２＝−Ｇａ
ｌ’−ＧＩａ３−Ｇｌｃ　）外観：白色粉末元素分析”　Ｃ５１Ｈ８６０２６，２１／２Ｈ２０旋光
度　：　［α　］：１　　−２５．１°（Ｃ＝１．０５
．ピリジン）１３ＣＮＭＲ（ピリジン−ｄ５）：後記表
１，２参照ｉＨＮＭＲ（ピリジン−ｄ５）ニアツメリッ
クプロトン５．２６（ＩＨ，ｄ、Ｊ＝８．１Ｈｚ）、５
．２３（ＩＨ，ｄ、、Ｉ＝７．３Ｈｚ）４．９８　（Ｉ
Ｈ，ｄ、Ｊ＝７．３Ｈｚ）　、４．８１　（ＩＨ，ｄ、
Ｊ＝７．７Ｈｚ）なお、Ｇａｌはβ−刀ラクトース、Ｇ
Ｉａはβ−グルコーズを示す。

Ｃ−１３８，’＋　　　　４７．１　　４７．１　　３
８．９　　４７．２　　４７．２２　３０．０　　　７
０．４　　７０．４　　３０．０　　７０．！’＋　　
　７０．５３７７．０　　　８５．０　　８５．０　　
７７、’ｌｌ　　　’８５．２　　８５．＋４　３２．
８　　　３１．７　　３１．７　　３２．８　　３＋、
８　　３１．８５　４８．０　　　４７．８　　４７．
８　　４７．’ｌ　　　４７．９４７．９６　７０．８
　　　　（ｉ９．９　　　Ｔｉ９．９　　　？０．８　
　７０．０　　　？０．０？　　４０．３　　　４０．
７　　４０．７　　４０．２　　４０．８　　４０．８
８　３０．６　　　２９．８　　２９．８　　３０．６
　　３０．０　　３０．０９　５４．７　　　５４．５
　　５４．５　　５４．６　　５４．６　　５４．６１
０３＋３．１　　　　：Ｔｉ、９　　３６．９　　３６
．１　　３７．０　　３７．０１１　２１．３　　　２
１．３　　２１．３　　２１．２　　２１．／ｌ　　　
２１．４１２４０．８　　　４０．１　　　４０．１　
　　４０．８　　４０．１　　　４０．１１３４１．２
　　４１．１　　４１．１　　４０．８　　４０．９　
　４０．８１４　５６．３　　　５６．０　　５６．０
　　５６．３　　５６．３　　５６．２１５　３２．５
　　　３２．４　　３２．３　　３１．８　　３２．２
　　３２．２１Ｇ８＋、１　　　８１．０　　８１．０
　　８１．１　　　８１．＋　　　　８１．１１７　６
４．０　　　６３．８　　６３．７　　６３．１’　　
６３．１　　　６３．０１８　１Ｇ、７　　　１７．１
　　　１？、１　　　１６．０　　　１０．（＋　　　
　１６．６Ｈ１１Ｇ、４　　　１６．３　　１６．３　
　１６．０　　１”／、３　　１？、３２０４０．６　
　　４０．５　　４０．５　　４２．０　　４２．０　
　４２．０２１　１６．０　　　１６．６　　　１６．
６　　１５．０　　１５．０　　　１５．０２２：１０
．６　　１１０．６　　１１０．５　　１０９．２　　
１０９．２　　１０９．２２３　３７．２　　　３６．
９　　３６．９　　３２．２　　３１．９　　３１．８
２４　２８．４　　　２８．３　　２８．２　　２９．
２　　２９．２　　２’１．２２５３４．２　　　３４
．１　　　３４．１　　　３０．６　　　３０．６　　
　３０．６２６７５．３　　　７５．２　　７５．２　
　６６．８　　６６．９　　６６．９２７　１７．５　
　　１７．４　　１７．４　　１７．３　　１７．２　
　　１７．２表−２糖部の１３ＯＮＭＩ？化−゛、シフ
ト化合物１　化合物２　化合物３　化合物４　化合物「
）化合物６−ＧａｌＣ−１１０２，３１０３，３１０３，２＋０２．３　　
１０３．３　　　］０：Ｌ３２　　　７３．２　　　７
２．’＋　　　　７２．Ｐ、　　　　７３．２　　　７
３．０　　　　？２．’１３　　　７５．６”’　　　
７５．７”　　　７５．４”　　　７５．６”　　　７
５．７”　　　７５．５”／Ｉ　　　　８０．３　　　
７９．９　　　７９，８　　　８０．２　　　８０．１
　　　８０．０５　　　７６．１　　　７５．８”　　
　７５．６”　　　？６．１　　　７５．９”　　　７
５．７”６　　　■、０　　　６０．０　　　６０．９
　　　６０．ｆｉ　　　　（ｉｏ、９　　　６０．９１
ｃＣ−１１０５，０”　　　１０Ｇ、９　　１０６．２　
　１０５．０”　　１０７．１　　１０６．４２　　　
８１．５　　　７５．０　　　７４．５”　　　８１．
４　　　７５．２　　　７４．６”３　　　８８．５　
　　７８．３”　　　８ｇ、１　　　８８．５　　　７
８．５”　　　８８．３４　　　７０．８”　　　７２
．１　　　７０．２　　　７０．０”　　　７２．２　
　　７０．３５　　　７８．０”　　　７８．３”　　
　７８．４”　　　７７．９″′７８．７”　　　７８
．５”６　　　６３．０ｆ）（ｉ２．７ｃ）６２．４”
　　　６３．１”　　　６３．１　　　６２．５”１ｃＣ−１１０４，９”　　　　　　　　１０５．４　　１
０４．９”　　　　　　　１０５．５２　　　７５．３
”　　　　　　　　７５．０ａ１７５．３”　　　　　
　　　７５．１”３　　　７８．６”　　　　　　　　
７８．２ｂ・　　７８．６　　　　　　　　７８．０”
４　　　７１．７ｂ＋　　　　　　　　７１．５”　　
　７０．８”　　　　　　　　７１．６５　　　７７．
５ｃ′７８．４”　　　７７．５Ｃ）７８．２ｂ１６　
　　６２．３”　　　　　　　　６２．７ｃ）６２．３
”　　　　　　　　６２．８ｃｌ１ｃＣ−１１０４，５”　　　　　　　　　　　　　１０４
．５”２　　　７５．２”　　　　　　　　　　　　　
７５．３”３　　　７８．６”　　　　　　　　　　　
　　７８．６４　　　７１．６”　　　　　　　　　　
　　　７１．６ｂ）５　　　７８．６”　　　　　　　
　　　　　　７８．６６　　　６２．３”　　　　　　
　　　　　　　６２．３”２ｆｌ−ＧｌｃＣニー１　　　　１０４．９”　　　１０４．７　　　
　＋０４．７２　　　　７５．２”　　　　７５．０　
　　　？４．９″′３　　　　７８．４’１　　　７８
．４”　　　７８．１”４　　　　７１．７”　　　　
７１．６　　　７１．６”５　　　　７８．４”　　　
　７８．５”　　　７７．８”６　　　　６２．８ｒ１
６３．０″６２．７”復」Ｂ徂漏」１撫本発明でいうＡＡｌ１１ｕ属植物とは、ユリ科（Ｌ　ｉ
　ｌ　１ａｃｅａｅ）　、アリュウム（Ａｌｌｉｕｍ）
属に属する植物をいい、具体的には通常オオニンニクと
呼ばれているアリュウム、サティバム、リン中（Ａｌｌ
ｉｕｍ　　ｓａｔｉｖｕｍ　　Ｌ、）および通常ニレフ
ァントガ−リックと呼ばれているアリヱム　アンペロブ
ラスム　リンｉ（Ａｌｌｉｕｍａｍｐｅｌｏｐｒａｓｕ
ｍ　Ｌ、）をいう。

目的物質を取得すべく材料となりえる部分とは、とりわ
け鱗茎部（内部に分裂してできた割球状の小鱗茎が入っ
ている）が好ましく、これを凍結するか、またはそのま
まの状態で抽出に供することができる。

Ｕ夾本発明における製造法は、アリュウム（Ａｌｌｉｕｍ）
属に属する植物から取得すること、を特徴とするもので
ある。すなわち、水あるいは含水または亦含水であって
水と混和可能な有機溶媒に浸漬して抽出を行うことによ
り、取得することができる。

（イ）抽出抽出は、生薬の分野において通常用いられている任意の
方法により行なうことができる。このとき、抽剤として
使用すべき有機溶媒は、低級アルコール（炭素数１〜３
の１価アルコールが普通である）、アセトンあるいはア
セトニトリルなどの水と混和可能なものがあり、特に好
ましいのは炭素数１〜３の１価アルコールである。

抽出は、加温下でも常温下でも行うことができるが、５
０〜８０℃で２〜４時間時間部漫に付すのがよい。また
、抽出効率を上げるためには、対象植物体は破砕したも
のであることが好ましいのは言うまでもない。

（ロ）分画上記抽出液は、抽出溶媒を留去した後、ポリスチレン−
ジビニルベンゼン系共重合体樹脂によるカラムクロマト
グラフィーに付して、水で、次いで含水または非含水で
あって水と混和可能な有機溶媒で、順次溶出させ、含水
または非含水であって水と混和可能な有機溶媒で溶出す
る分画採取する。

なお、ここでいう有機溶媒とは、前記と同様低級アルコ
ール（炭素数１〜３の１価アルコールが普通である）、
アセトンあるいはアセトニトリルなどの水と混和可能な
ものがあり、特に好ましいのは炭素数１〜３の１価アル
コールである。

（ハ）順相および逆相カラムクロマトグラフィーによる
精製上記分画の溶媒を留去後、順相カラムクロマトグラフィ
ーで精製し、次いで逆相カラムクロマトグラフィーで精
製することにより目的物質であるステロイドサポニンを
得ることができる。

ここでいつ順相カラムクロマトグラフィーは、ケイ酸、
シリカゲル等の極性の大きい樹脂を固相担体に用いたカ
ラムクロマトグラフィーをいい、移動相としては通常、
クロロホルム、ジクロロメタン、ヘキサンあるいは酢酸
エチルなどの非極性溶媒と含水または非含水の低級アル
コールとの混合液などの固相担体に比べて極性の小さい
溶媒を用いることができる。上記方法の一具体例として
は、後記実施例に示すようにシリカゲルクロマトグラフ
ィー［展開溶媒：クロロホルム−メタノール−水（６：
４：１）］を用いて精製することができる。

一方、逆相カラムクロマトグラフィーは、上記シリカゲ
ルなどに、ジメチルシラン、オクタデシルシラン、オク
チルシラン等の炭素数１〜１８の炭化水素残基を持つシ
ランを化学結合させたものや前記スチレン−ジビニルベ
ンゼン系共重合体あるいはゲル濾過剤など、極性の小さ
い樹脂な固相担体に用いたカラムクロマトグラフィーを
いい、移動相としては上記固相担体より極性の大きい任
意の溶媒を用いることができる。

例えば、含水または非含水の低級アルコールあるいはア
セトン、アセトニトリルなどの水と混和可能な有機溶媒
と水との混合液などが使用できるが、前者の含水または
非含水の低級アルコールを用いるのが好ましい。ここで
いう低級アルコールとは、前記と同様炭素数１〜３の１
価アルコールが普通である。

スビロスタノール誘導゛本発明によるスビロスタノール誘導体は、前記式（１）
で示されるステロイドサポニンを酸または酵素処理して
得られるものである。これらの化合物の具体例を示せば
、下式で示されるスビロスタノール誘導体がある。

Ｈ式中Ｒ１は、水素原子または水酸基を示し、Ｒ２は、　
−β−カラクトース４−β−グルコース、−β−カラク
トーズ４−β−グルコーズ３−β−グルコースま　たは
−β−刀ラクトース４−β−グルコーズ（３−β−グル
コース）２−β−グルコースを示す。

さらに、上記一連の化合物の具体例を理化学的性状とと
もに示せば、下記の通りである。

化合物４　（Ｒ１”ＨＪ２ニーＧａｌ’−Ｇｌｃ（３−
Ｇｌｅ）２−Ｇｌｃ　）外観：白色粉末旋光度　：　［α　］　　ニア　　　−６２，６°（Ｃ
＝０．４．クロロホルム−メタノール（１０：１））１３ＣＮＭＲ（ピリジン−ｄ５）：前記表１，２参照Ｉ
ＨＮＭＲ（ピリジン−ｄ５）ニアツメリックプロトン５
．５９（ＩＨ，ｄ、Ｊ＝７．３Ｈｚ）、５．３１（ＩＨ
，ｄ、Ｊ＝７．６Ｈｚ）５．１６（ＩＨ，ｄ、Ｊ＝７．
９Ｈｚ）、４．９５（ＩＨ，ｄ、Ｊ＝７．６Ｈｚ）化合
物５　（Ｒ，＝ＯＨ，Ｒ２＝−Ｇａｌ’−Ｇｌｃ　）外
観：無色針状結晶融点：２４９〜２５１℃ 旋光度　：　［α］ム７　　−４８．３°（Ｃ＝１．１
０．ピリジン）１３ＣＮＭＲ（ピリジン−ｄ５）：前記
表１．２参照ＩＨＮＭＲ（ピリジン−ｄ５）ニアツメリ
ックプロトン５．２６（ＩＨ，ｄ、Ｊ＝７．７Ｈｚ）、
４．９８（ＩＨ，ｄ、Ｊ＝７．７Ｈｚ）化合物Ｑ　（Ｒ
１＝ＯＨ，Ｒ２＝−Ｇａｌ’−Ｇｌｃ３−Ｇｌｃ　）外
観：無色針状結晶融点：　＞３００℃ 旋光度　：　［α］’？　　　−５２，５°（Ｃ＝１．
１２．ピリジン）１３ＣＮＭＲ（ピリジン−ｄ５）：前
記表１，２参照１ＨＮＭＲ（ピリジン−ｄ５戸アノメリ
ヮクプロトン５．２６（ＩＨ，ｄ、Ｊ＝７．７Ｈｚ）、
５．２３（ＩＨ，ｄ、Ｊ＝７．７Ｈｚ）、４．９７（Ｉ
Ｈ，ｄ、Ｊ＝７．７Ｈ２）以上示した一連の化合物は、
必要に応じて任意の化合物と塩を形成してもよいことは
、言うまでもない。

なお、ここで用いる酸は、塩酸、硫酸、酢酸、ギ酸、フ
タール酸など任意の無機および有機酸であり、酵素は、
β−クリコシダーゼあるいはβ−グルコシダーゼなどを
用いることができる。

且皇星Ｍ本発明による、抗真菌剤は上記した一連のスビロスタノ
ール誘導体を有効成分とするものである。

この抗真菌剤は、ヒトを含む哺乳動物において特にカン
ジダ属、トリコフィトン属、ミクロスポラム属またはエ
ピデルモフィトン属の菌種による局所性真菌感染、ある
いはカンシタ、アルビカンスによりおこる粘膜感染の治
療、にも用いることができる。また、例えばカンジダ、
アルビカンス、クリブトコッカッス、ネオホルマンス、
アスベリギルス、フラバス、アスベエリギルス、フミガ
ータス、コクシジオイデス属、パラコクシジオイデス属
、ヒストプラズマ属またはプラストミセス属の菌による
全身性真菌感染の治療に用いることができる。

本発明による抗真菌剤は動物の真菌感染の治療に有用で
あるばかりでなく、抗臭菌類により引き起こされる植物
カビ病などにも有用である。

この抗真菌剤は上記化合物単独またはこれらと液体また
は固体の製剤上の補助成分、例えば賦形剤、結合剤、希
釈剤、と混合してなるものであり、粉末、顆粒、カプセ
ル剤、注射剤、軟膏、エアゾール剤、液剤などの任意の
網形で経口的または非経口的に投与することができる。

また、必要に応じて他の薬剤を調合させてもよい。投与
量は、年齢、体重、症状により適宜増減するが、経口的
には、成人１日あたり１０ｍｇ〜１０ｇ、・このましく
は５０ｍｇ〜５ｇ程度である。

遺」（霞ニンニク鱗茎４Ｋｇを凍結しメタノール６ｅ中にて破砕
した後、浴温的７０℃にて加温抽出し、濾過後、残渣は
更にメタノール２ンにて加熱抽出した。抽出液を合わせ
た後、メタノールを留去し、水を加え全量的３２とした
。

この抽出液をＭＣＩ　ＧＥＬ＠　ＣＨＰ　２０Ｐ（三菱
化成）によるカラムクロマドグラフイーに付し、水、２
０％メタノール、メタノールで７１次溶出を行い、メタ
ノールで溶出される画分から粗サポニン画分８．６８を
得た。この混合物についてシリカゲルクロマドグラフイ
ー［展開溶媒：りａロホルムーメタノールー水（６：４
：１）］を行ない、目的化合物１を含有する粗画分を得
た（０．６ｇ）。さらに、本画分につき、ＭＣＩ　ＧＥ
Ｌ＠　ＣＨＰ　２０Ｐによる逆相カラムクロマトグラフ
ィーを行い（展開溶媒＝８ｏｚメタノール）、得られた
画分（０，４９ｇ）をアセトン：水（２：５）の溶液と
し、９５℃にて４時間加熱後、溶媒を留去して化合物１
を得た（０．４５ｇ）。

夫１」胆ニンニク鱗茎２Ｋｇを水３Ｊ！中にて破砕した後、室温
にて−晩抽出し、この抽出液を実験例１と同様にＭＣＩ
ＧＥＬ”　　によるクロマトグラフィーにふし、粗サポ
ニン画分５．０ｇを得た。この混合物について、シリカ
ゲルクロマトグラフィー［展開溶媒：クロロホルム−メ
タノール−水（７：３：０．５）］、さ　らにＭＣＩ　
　ＧＥＬ＠　　ＣＨＰ　　２０Ｐによる逆相クロマトグ
ラフィー（展開溶媒：　９０％メタノール）にふし、化
合物４　（２６ｍｇ）を得た。

天鷹」Ｉエレファントカーリツク鱗茎５Ｋｇを凍結し、メタノー
ル３ｅ　中にて破砕した後、浴温的８０℃にて加温抽出
し、濾過後、残液は更に２回メタノール３ｅにて加熱抽
出した。抽出液を合わせた後、メタノールを留去した。

この抽出物をアンバーライト　ＸＡＤ−２（オル刀）社
）によ　るカラムクロマトグラフィーに１寸し、３０％
メタノール、メタノール、クロロホルムで順次溶出し、
メタノールで溶出される画分から粗サポニン画分１２．
９８を得た。この両分について、シリカゲルクロマトグ
ラフィー［展開溶媒：クロロホルム−メタノール−水（
７：３：０．５→６：４：１）］を行い、フラクション
Ｎ［１１〜３に分割した。このうち階３はシｌＪ：ＩＩ
Ｉゲルクロマトグラフィー　［展開溶媒：クロロホルム
ーメタノールー水（７：３：０．５）］に付し、２つの
画分を得た。

さらに、それぞれの画分についてシリカゲルリマトグラ
フイー及びＭＣＩ　ＧＥＬ＠ＣＨＰ　２０Ｐによるクロ
マトグラフィーを繰り返し、アセトン−水（１：２）の
溶液とし、１００℃にて加熱後、溶媒を留去し、化合物
２　（０，１３ｇ）および化合物３（０，５３ｇ）を得
た。

実験例４エレファント２ｉ−リック２．９Ｋｇを酢酸エチル２．
５１！中にて破砕した後、酢酸エチル層を除去し、得ら
れる残液はメタノール３ｅにて、３回加熱抽出した。抽
出液を合わせた後、溶媒を減圧留去し、実験例３と同様
、アンバーライト＠ＸＡＤ−２にふし、粗サポニン画分
（ａ、ｏａＢ）を得た。本画分は、シリカゲルクロマト
グラフィーイあるいは６：４：１）］およびリクロブレヮブ（Ｌｉｃ
ｈｒｏｐｒｅｐ）　＠Ｒｐ−８（メルク社）によるクロ
マトグラフィー（展開溶媒：８０％メタノール）を繰り
返し、化合物５　（１，２８ｇ）および化合物６　（０
，１５ｇ）を得た。

実験例５化合物１　　（０，２５ｇ）はβ−グルコシダーゼ（０
，２５ｇ、アーモンド由来、Ｐ、Ｌ、Ｂｉｏ　Ｃｈｅｍ
ｉｃａｌ）の０．１Ｍ酢酸緩衝液（ｐＨ４，３）５０　
ｍｌ中３７℃にて約二時間反応後、反応液に水５０ｍ１
を加え）４ＣＩ　ＧＥＬ＠’　　ＣＩ（Ｐ　２０Ｐを加
え充填したカラムに液を通じ、水、５０％メタノール、
メタノールにて順次溶出し、メタノールにて溶出だ両分
を減圧留去し化合物４を得た（０．１７ｇ）。

盪潅夏豊塁化合物Ｉは、Ｉ−’Ｊッヒ反応陽性であり酸加水分解お
よびＮＭＲよりグルコーヌ４分子カラクトース１分子か
らなるフロスタノールサボニンと推定される。既に報告
されているように、フロズタノールサボニンはβ−グル
コシダーゼにてズピロスタノールサボニンに変換される
ことより、実験例５に示した通り、化合物１から得られ
た化合物４は、酸加水分解およびＮＭＨの結果より、グ
ルコ−２３分子、ガラクト−２１分子よりなるスピ０ス
タノールサボニンと考え　られる。

化合物４の５％硫酸による部分加水分解物として、β−
グロロゲニン、β−クロロゲニン３−０−β−ガラクト
ピラノシドおよびβ−クロロゲニシ３−０−グルコピラ
ノシル（１→４）−β−ガラクトピラノシドが同定され
、さらに化合物４より誘導されたアルシト−ルア上テー
ト対のＧＣ−ＭＳによる糖結合様式の検討より、化合物
４の構造をβ−りａロゲニンの３位に［β−Ｇｌｃ（１
→２）］−［β−Ｇｌｃ（１→３）］−β−Ｇｌｃ（１
−＋４）−β−Ｇａｌの糖ユニットが結合したサポニン
と決定した。

従って、化合物１は、化合物４のプロト休であり、その
２６位にβ−グルコビラノースが結合したフロスタノー
ルサボニンと決定した。

同様な手法にて化合物２．３．５および６についても構
造解析を行ない、同様に構造を決定した。

抗菌活性本発明によるステロイドサポニン誘導体４〜６について
Ｃａｎｄｉｄａ　ａｌｂｉｃａｎｓに対する増殖阻害作
用を常法（液体希釈法）に従い検討した結果、下表−３
に示す通りであった。

表−３特許ｍ　　１人　　湧水製票株式会社

Claims

【特許請求の範囲】１、下式で示されるステロイドサボニン。 ▲数式、化学式、表等があります▼ 式中Ｒ＿１は、水素原子または水酸基を示し、Ｒ＿２は
、−β−ガラクトース＾４−β−グルコース、−β−ガ
ラクトース＾４−β−グルコース＾３−β−グルコース
または−β−ガラクトース＾４−β−グルコース（＾３
−β−グルコース）＾２−β−グルコースを示す。２、アリウム（Ａ１１ｉｕｍ）属植物から取得すること
、を特徴とする下式で示されるステロイドサボニンの製
造法。 ▲数式、化学式、表等があります▼ 式中Ｒ＿１は、水素原子または水酸基を示し、Ｒ＿２は
、−β−ガラクトース＾４−β−グルコース、−β−ガ
ラクトース＾４−β−グルコース＾３−β−グルコース
または−β−ガラクトース＾４−β−グルコース（＾３
−β−グルコース）＾２−β−グルコースを示す。３、下式で示されるステロイドサボニンを酸または酵素
処理して得られるスピロスタノール誘導体を有効成分と
する抗真菌剤。 ▲数式、化学式、表等があります▼ 式中Ｒ＿１は、水素原子または水酸基を示し、Ｒ＿２は
、−β−ガラクトース＾４−β−グルコース、−β−ガ
ラクトース＾４−β−グルコース＾３−β−グルコース
または−β−ガラクトース＾４−β−グルコース（＾３
−β−グルコース）＾２−β−グルコースを示す。４、スピロスタノール誘導体が下式で示される特許請求
の範囲第３項記載の抗真菌剤 ▲数式、化学式、表等があります▼ 式中Ｒ＿１は、水素原子または水酸基を示し、Ｒ＿２は
、−β−ガラクトース＾４−β−グルコース、−β−ガ
ラクトース＾４−β−グルコース＾３−β−グルコース
または−β−ガラクトース＾４−β−グルコース（＾３
−β−グルコース）＾２−β−グルコースを示す。