JPS634557B2

JPS634557B2 -

Info

Publication number: JPS634557B2
Application number: JP10496579A
Authority: JP
Inventors: Ayako Nasu; Nobuyuki Yamatsugu; Motohiko Kato
Original assignee: Kikkoman Corp
Current assignee: Kikkoman Corp
Priority date: 1979-08-20
Filing date: 1979-08-20
Publication date: 1988-01-29
Also published as: JPS5629599A

Description

【発明の詳細な説明】

本発明は、一般式（式中Ｒは炭素数２〜４のアシル基、Ｘは水素
原子、アルカリ金属原子又はアンモニウム基を意
味する）で表わされる新規な２―フルオロ―
O²′―モノアシル―アデノシン―3′，5′―環状リ
ン酸、その製法及びそれを有効成分として含有す
る制癌剤に関する。本発明の新規化合物は、例えば下記のものであ
る。２―フルオロ―O²′―モノアセチル―アデノ
シン―3′，5′―環状リン酸、２―フルオロ―O²′
―モノプロピオニル―アデノシン―3′，5′―環状
リン酸、２―フルオロ―O²′―モノブチリル―ア
デノシン―3′，5′―環状リン酸等ならびにそれら
のアルカリ金属塩、例えばカリウム塩又はナトリ
ウム塩、アンモニウム塩好ましくは有機アンモニ
ウム塩、例えばトリエチルアンモニウム塩、トリ
ブチルアンモニウム塩等。式の新規化合物は、毒性が少なく優れた制癌
作用を有するため制癌剤として有用である。式の化合物は、一般式（式中Ｘは前記の意味を有する）で表わされる
２―フルオロ―アデノシン―3′，5′―環状リン酸
又はその塩を、一般式（式中Ｒは前記の意味を有する）で表わされる
酸無水物と反応させることにより製造することが
できる。式の出発化合物のうち、２―フルオロ―アデ
ノシン―3′，5′―環状リン酸（Ｘ＝Ｈ、ａ）
は、例えば２―フルオロ―アデノシン―5′―リン
酸（）をジシクロヘキシルカルボジイミドと反
応させて化合物（）のリン酸部を3′位において
閉環させるか（トーマスら著、ザ・ジヤーナル・
オブ・バイオロジカル・ケミストリイ、251巻
6757〜6766頁1976年参照）、あるいは２―アミノ
―アデノシン―3′，5′―環状リン酸（）に硼弗
化水素酸と亜硝酸化合物とを作用させ、シーマン
反応を行うこと（山次ら著、ケミカル・アンド・
フアーマシユーテイカル・ブルチン、26巻2391〜
2395頁1978年参照）により製造することができ
る。２―フルオロ―アデノシン―3′，5′―環状リン
酸（ａ）のリン酸部における塩も、本方法の出
発化合物として同様に用いることができ、これら
の塩は式ａの化合物にアルカリ金属化合物例え
ば水酸化ナトリウム又は水酸化カリウム、三級ア
ミン例えばトリエチルアミン、トリブチルアミン
等を作用させることにより得られる。式の化合物を製造するには、例えば次のよう
に操作することができる。２―フルオロ―アデノ
シン―3′，5′―環状リン酸又はその塩（）を有
機溶剤、例えばピリジン、ピコリン、ルチジン等
のアミン類、メタノール、エタノール、グリセリ
ン等のアルコール類、ジオキサン等のエーテル
類、ジメチルスルホキシド等又はそれらの混合物
に溶解し、これに式の酸無水物を加え、混合物
を通常は30〜110℃好ましくは50〜70℃で、必要
により撹拌下に約20分ないし24時間反応させる。酸無水物（）としては、例えば無水酪酸、無
水プロピオン酸、無水酢酸等が用いられ、その添
加量は化合物（）に対し通常は１〜50倍モル程
度である。目的化合物（）の単離、精製は常法により、
例えば活性炭、イオン交換樹脂、アルミナ、シリ
カゲル等を用いるカラムクロマトグラフイ法、あ
るいはエーテル、クロロホルム、ヘキサン等の有
機溶媒を用いる有機溶媒沈殿法などを適宜組合わ
せて用いることにより行うことができる。ＸがＨ
である式の化合物は、アルカリ金属化合物例え
ば水酸化ナトリウム、水酸化カリウム等、あるい
はアミン好ましくは三級アミンを作用させること
により環状リン酸部における対応する塩に導くこ
とができ、これらの塩に酸を作用させることによ
りＸがＨである式の遊離環状リン酸が得られ
る。またＸがアンモニウム基例えばトリエチルア
ンモニウム基である式の化合物は、アルカリ金
属型陽イオン交換樹脂で処理することにより、そ
のアルカリ金属塩に導くことができる。本発明方法によれば、式の化合物が約40〜50
％の良好な収率で得られる。式の新規化合物は、低い毒性において優れた
制癌作用を示すため、制癌剤として有用である。従つて本発明はさらに、式の化合物を有効成
分として含有する制癌剤である。本制癌剤は副作
用がほとんどない点でも優れている。式の有効成分は単独で又は２種以上の混合物
としてそのまま用いてもよいが、通常は賦形剤も
しくは希釈剤又は補助剤と混合して常法により製
剤化して用いられる。賦形剤、希釈剤及び補助剤
としては、有効成分に影響を及ぼさない普通の固
体ないし液状物、例えば水、植物油、乳化剤、界
面活性剤、ゼラチン、カカオ脂、ラウリン脂、グ
リセラチン、マクロゴール類、糖類、ステアリン
酸マグネシウム、保存剤等が用いられる。本制癌剤は静脈内注射、経口的投与、粘膜適用
等により適用することが好ましく、これらの投与
法に適する剤形の製剤としては、特に注射剤、カ
プセル剤、坐剤等があげられる。本制癌剤の投与
量は治療すべき症状、年令、投与形態等によつて
適宜選択されるが、通常は成人につき１日当たり
有効成分１〜200mg／Kg好ましくは10〜50mg／Kg
程度で、一度に又は数回に分けて投与される。式の化合物の制癌効果及び急性毒性を測定す
るため、下記の動物実験を行つた。実験例１（マウスに対する制癌作用）使用動物： ICR系マウス（雌）、５週令、体重20〜23ｇ、
１群６匹。実験方法： ICR系マウスにあらかじめザルコーマ180（Ｓ―
180）腹水癌を移植し、移植７日目に腹水を注射
器で抜き取つた。この腹水液0.1ml／匹（癌細胞
数：１×10⁶個）を実験動物（１群６匹）の腹腔
内にそれぞれ移植した。移植２日目から、有効成
分としての２―フルオロ―O²′―モノブチリル―
アデノシン―3′，5′―環状リン酸ナトリウム塩を
所定の投与量で１日１回５日間、腹水癌移植マウ
スに腹腔内投与した。有効成分は、カルボキシメ
チルセルロースを0.5％添加した生理食塩水に懸
濁して投与した。移植後７日目に各マウスから腹
水を取り、腹水重量と癌細胞重量との比を求め、
この比に腹水重量を乗じ、これより総癌細胞重量
を算出した。また腫瘍生成率（％）を次式総癌細胞重量／対照の総癌細胞重量×100 から求め、制癌活性を次のように判定した。制癌活性腫瘍生成率＋ 65〜41％ 40〜11％ 10〜０％次表に示す結果から明らかなように、本発明の
化合物は腹水癌細胞に対し極めて強い制癌効果を
示す。

【表】実験例２（急性毒性）使用動物： ICR系マウス（雌）、５週令、体重20〜23ｇ、
１群６匹。実験方法：被験化合物の１％（ｗ／ｖ）生理食塩溶液0.1
〜0.5mlを動物に腹腔内に一括投与した。LD₅₀値
はリツチフイールド―ウイルコクソン法により、
投与後２日目の動物の生死の数から算出した。２―フルオロ―O²′―モノブチリル―アデノシ
ン環状リン酸ナトリウム塩のLD₅₀は98mg／Kgで
あつた。実施例１２―フルオロ―アデノシン―3′，5′―環状リン
酸500mgに少量のトリエチルアミンを加え、２―
フルオロ―アデノシン―3′，5′―環状リン酸トリ
エチルアンモニウム塩となし、これをＮ，Ｎ―ジ
メチルホルムアミド10mlに溶解し、ピリジン10ml
及び無水酪酸10mlを加え、50〜70℃で５時間反応
させる。反応終了後、反応混合物にエーテル500mlを加
え、５℃に放置する。析出した結晶を過し、エ
ーテルで洗浄したのち乾燥すると、２―フルオロ
―O²′―モノブチル―アデノシン―3′，5′―環状
リン酸トリエチルアンモニウム塩の粗結晶607mg
が得られる。得られた粗結晶をシリカゲル0.2ｇと混合して
シリカゲルに付着させ、乾燥したのち、シリカゲ
ルカラム（直径1.7cm、長さ12cm）の上に載せ、
クロロホルム／メタノール（容量比80：20）で溶
出し、目的物質を含有する区分を蒸発乾固する
と、精製２―フルオロ―O²′―モノブチリル―ア
デノシン―3′，5′―環状リン酸トリエチルアンモ
ニウム塩が得られる。融点：166〜168℃（分解）紫外線吸収スペクトル： λPH^7.0 _nax（nm） 261.5，269.0（肩）赤外線吸収スペクトル（KBr法）： 1020，1090，1250，1375，1493，1590，1610，
1655，1743，2495，2675cm^-1に吸収極大を示
す。マススペクトル〔トリメチルシリル化法（ロー
ソンら著、ジヤーナル・オブ・アメリカン・ケミ
カル・ソサエテイ、93巻1014頁1971年参照）〕：分子イオンのピーク：Ｍ（TMS）₂561m／ｅ NMRスペクトル（D₂O）： δ（ppm） 0.68（ｔ）、1.32（ｍ）、2.26（ｔ）、
4.16（ｓ）、4.71（ｍ）、5.36(d)、5.84
（ｓ）、7.89（ｓ）紙クロマトグラフイ：東洋紙製No.51A使用展開溶媒：エタノール／0.5M―酢酸アンモニウ
ム（容量比５：２） Rf値＝0.70 薄層クロマトグラフイ： DEAEセルロース使用展開溶媒：クロロホルム／メタノール（容量比
１：１） Rf値＝0.46 実施例２２―フルオロ―アデノシン―3′，5′―環状リン
酸500mgを水８mlに懸濁し、これに少量のトリエ
チルアミンを滴加して溶解したのち過し、液
を濃縮乾固すると、２―フルオロ―アデノシン―
3′，5′―環状リン酸トリエチルアンモニウム塩が
得られる。この塩601mgをＮ，Ｎ―ジメチルホル
ムアミド10mlに溶解し、ピリジン10mlを加え、さ
らに無水酪酸10mlを加えて50〜70℃で５時間反応
させる。反応終了後、反応混合物にエーテル500mlを加
え、５℃に放置し、析出した結晶を過し、エー
テルで洗浄して乾燥する。得られた２―フルオロ
―O²′―モノブチリル―アデノシン―3′，5′―環
状リン酸トリエチルアンモニウム塩の粗結晶200
mgを水２mlに溶解し、弱酸性イオン交換樹脂IRC
―50（ローム・アンド・ハース社製）のカラム
（直径1.7cm、長さ25cm）に吸着させたのち、水で
溶出し、目的化合物を含有する区分を減圧濃縮す
る。得られた濃縮物をシリカゲル0.2ｇと混合し
てシリカゲルに付着させ、乾燥したのち、これを
シリカゲルカラム（直径1.7cm、長さ12cm）の上
に載せ、クロロホルム／メタノール（容量比80：
20）で溶出し、目的物質を含有する区分を蒸発乾
固すると、２―フルオロ―O²′―モノブチリル―
アデノシン―3′，5′―環状リン酸ナトリウム塩
167mgが得られる。融点：205〜207℃（分解）紫外線吸収スペクトル： λpH^7.0 _nax（nm） 261.5，269.0（肩）赤外線吸収スペクトル（KBr法）： 1020，1090，1250，1375，1493，1590，1610，
1655，1743cm^-1に吸収極大を示す。マススペクトル（トリメチルシリル化法）：分子イオンのピーク：Ｍ（TMS）₂561m／ｅ元素分析（C₁₄H₁₆O₇N₅PFNa・1.5H₂Oとし
て）：ＣＨＮ理論値（％） 36.06 4.11 15.02 実測値（％） 35.98 4.16 14.57 紙クロマトグラフイ：紙及び展開溶媒は実施例１と同じ Rf値＝0.70 薄層クロマトグラフイ：吸着剤及び展開溶媒は実施例１と同じ Rf値＝0.46 実施例３（注射剤）２―フルオロ―O²′―モノブチリル―アデノシ
ン―3′，5′―環状リン酸ナトリウム塩５ｇに食塩
4.1ｇ及び注射用蒸留水を加えて全量500mlとす
る。この溶液２mlをアンプルに分注したのち熔閉
し（１アンプル中に有効成分20mg含有）、次いで
高圧蒸気殺菌して注射剤とする。実施例４（坐剤）マクロゴール1000 150ｇ及びマクロゴール4000
45ｇを低温で水浴中で溶解し、２―フルオロ―
O²′―モノブチリル―アデノシン―3′，5′―環状
リン酸ナトリウム塩５ｇを加え、均一に分布する
まで撹拌し、これを100個の坐剤型に注入し、放
冷固化して坐剤とする。実施例５（カプセル剤）２―フルオロ―O²′―モノブチリル―アデノシ
ン―3′，5′―環状リン酸ナトリウム３ｇ、結晶セ
ルロース１ｇ、ステアリン酸マグネシウム50mg、
乳糖２ｇ及びばれいしよ殿粉2.5ｇをよく混和し、
これを100個のカプセルに充填してカプセル剤と
する。

Claims

【特許請求の範囲】１一般式（式中Ｒは炭素数２〜４のアシル基、Ｘは水素
原子、アルカリ金属原子又はアンモニウム基を意
味する）で表わされる２―フルオロ―O²′―モノ
アシル―アデノシン―3′，5′―環状リン酸又はそ
の塩。２一般式（式中Ｘは後記の意味を有する）で表わされる
２―フルオロ―アデノシン―3′，5′―環状リン酸
又はその塩を、一般式（式中Ｒは後記の意味を有する）で表わされる
酸無水物と反応させることを特徴とする、一般式（式中Ｒは炭素数２〜４のアシル基、Ｘは水素
原子、アルカリ金属原子又はアンモニウム基を意
味する）で表わされる２―フルオロ―O²′―モノ
アシル―アデノシン―3′，5′―環状リン酸又はそ
の塩の製法。３一般式（式中Ｒは炭素数２〜４のアシル基、Ｘは水素
原子、アルカリ金属原子又はアンモニウム基を意
味する）で表わされる２―フルオロ―O²′―モノ
アシル―アデノシン―3′，5′―環状リン酸又はそ
の塩を有効成分として含有する制癌剤。