JP7071994B2 - 前立腺がんを治療するための組成物および方法 - Google Patents
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Description
・アミノ酸配列が、全長プロガストリンのアミノ酸配列、特に、配列番号1の全長ヒトプロガストリンを含むまたはそれからなる、ペプチド、
・アミノ酸配列が、プロガストリンのアミノ酸配列の一部、特に、配列番号1の全長ヒトプロガストリンの一部に対応する、ペプチド、
・アミノ酸配列が、プロガストリンのN末端部分の一部または全体のアミノ酸配列に対応する、ペプチド、特に、アミノ酸配列:SWKPRSQQPDAPLG(配列番号2)を含むまたはそれからなる、ペプチド、並びに
・アミノ酸配列が、プロガストリンのC末端部分の一部または全体のアミノ酸配列に対応する、ペプチド、特に、アミノ酸配列:QGPWLEEEEEAYGWMDFGRRSAEDEN(配列番号3)を含むまたはそれからなる、ペプチド、
・アミノ酸配列が、プロガストリンのC末端部分の一部のアミノ酸配列に対応する、ペプチド、特に、プロガストリンのアミノ酸71~80に対応するアミノ酸配列FGRRSAEDEN(配列番号40)を含む、ペプチド
の中で選択されるペプチドを含む。
・配列番号4、5、および6のアミノ酸配列のそれぞれCDR-H1、CDR-H2、およびCDR-H3のうちの少なくとも1つ、優先的には少なくとも2つ、優先的には3つを含んでなる重鎖、または、配列番号4、5、および6の配列それぞれに対し、最適アラインメント後に少なくとも80%、好ましくは85%、90%、95%、および98%の同一性を有する配列を含んでなる重鎖と、配列番号7、8、および9のアミノ酸配列のそれぞれCDR-L1、CDR-L2、およびCDR-L3のうちの少なくとも1つ、優先的には少なくとも2つ、優先的には3つを含んでなる軽鎖、または、配列番号7、8、および9の配列それぞれに対し、最適アラインメント後に少なくとも80%、好ましくは85%、90%、95%、および98%の同一性を有する配列を含んでなる軽鎖とを含んでなる、モノクローナル抗体、
・配列番号10、11、および12のアミノ酸配列のそれぞれCDR-H1、CDR-H2、およびCDR-H3のうちの少なくとも1つ、優先的には少なくとも2つ、優先的には3つを含んでなる重鎖、または、配列番号10、11、および12の配列それぞれに対し、最適アラインメント後に少なくとも80%、好ましくは85%、90%、95%、および98%の同一性を有する配列を含んでなる重鎖と、配列番号13、14、および15のアミノ酸配列のそれぞれCDR-L1、CDR-L2、およびCDR-L3のうちの少なくとも1つ、優先的には少なくとも2つ、優先的には3つを含んでなる軽鎖、または、配列番号13、14、および15の配列それぞれに対し、最適アラインメント後に少なくとも80%、好ましくは85%、90%、95%、および98%の同一性を有する配列を含んでなる軽鎖とを含んでなる、モノクローナル抗体、
・配列番号16、17、および18のアミノ酸配列のそれぞれCDR-H1、CDR-H2、およびCDR-H3のうちの少なくとも1つ、優先的には少なくとも2つ、優先的には3つを含んでなる重鎖、または、配列番号16、17、および18の配列それぞれに対し、最適アラインメント後に少なくとも80%、好ましくは85%、90%、95%、および98%の同一性を有する配列を含んでなる重鎖と、配列番号19、20、および21のアミノ酸配列のそれぞれCDR-L1、CDR-L2、およびCDR-L3のうちの少なくとも1つ、優先的には少なくとも2つ、優先的には3つを含んでなる軽鎖、または、配列番号19、20、および21の配列それぞれに対し、最適アラインメント後に少なくとも80%、好ましくは85%、90%、95%、および98%の同一性を有する配列を含んでなる軽鎖とを含んでなる、モノクローナル抗体、
・配列番号22、23、および24のアミノ酸配列のそれぞれCDR-H1、CDR-H2、およびCDR-H3のうちの少なくとも1つ、優先的には少なくとも2つ、優先的には3つを含んでなる重鎖、または、配列番号22、23、および24の配列それぞれに対し、最適アラインメント後に少なくとも80%、好ましくは85%、90%、95%、および98%の同一性を有する配列を含んでなる重鎖と、配列番号25、26、および27のアミノ酸配列のそれぞれCDR-L1、CDR-L2、およびCDR-L3のうちの少なくとも1つ、優先的には少なくとも2つ、優先的には3つを含んでなる軽鎖、または、配列番号25、26、および27の配列それぞれに対し、最適アラインメント後に少なくとも80%、好ましくは85%、90%、95%、および98%の同一性を有する配列を含んでなる軽鎖とを含んでなる、モノクローナル抗体、
・配列番号28、29、および30のアミノ酸配列のそれぞれCDR-H1、CDR-H2、およびCDR-H3のうちの少なくとも1つ、優先的には少なくとも2つ、優先的には少なくとも3つを含んでなる重鎖、または、配列番号28、29、および30の配列それぞれに対し、最適アラインメント後に少なくとも80%、好ましくは85%、90%、95%、および98%の同一性を有する配列を含んでなる重鎖と、配列番号31、32、および33のアミノ酸配列のそれぞれCDR-L1、CDR-L2、およびCDR-L3のうちの少なくとも1つ、優先的には少なくとも2つ、優先的には3つを含んでなる軽鎖、または、配列番号31、32、および33の配列それぞれに対し、最適アラインメント後に少なくとも80%、好ましくは85%、90%、95%、および98%の同一性を有する配列を含んでなる軽鎖とを含んでなる、モノクローナル抗体、並びに
・配列番号34、35、および36のアミノ酸配列のそれぞれCDR-H1、CDR-H2、およびCDR-H3のうちの少なくとも1つ、優先的には少なくとも2つ、優先的には3つを含んでなる重鎖、または、配列番号34、35、および36の配列それぞれに対し、最適アラインメント後に少なくとも80%、好ましくは85%、90%、95%、および98%の同一性を有する配列を含んでなる重鎖と、配列番号37、38、および39のアミノ酸配列のそれぞれCDR-L1、CDR-L2、およびCDR-L3のうちの少なくとも1つ、優先的には少なくとも2つ、優先的には3つを含んでなる軽鎖、または、配列番号37、38、および39の配列それぞれに対し、最適アラインメント後に少なくとも80%、好ましくは85%、90%、95%、および98%の同一性を有する配列を含んでなる軽鎖とを含んでなる、モノクローナル抗体
からなる群において選択される、モノクローナル抗体である。
・配列番号41のアミノ酸配列の重鎖と、配列番号42のアミノ酸配列の軽鎖とを含んでなる、モノクローナル抗体、
・配列番号43のアミノ酸配列の重鎖と、配列番号44のアミノ酸配列の軽鎖とを含んでなる、モノクローナル抗体、
・配列番号45のアミノ酸配列の重鎖と、配列番号46のアミノ酸配列の軽鎖とを含んでなる、モノクローナル抗体、
・配列番号47のアミノ酸配列の重鎖と、配列番号48のアミノ酸配列の軽鎖とを含んでなる、モノクローナル抗体、
・配列番号49のアミノ酸配列の重鎖と、配列番号50のアミノ酸配列の軽鎖とを含んでなる、モノクローナル抗体、および
・配列番号51のアミノ酸配列の重鎖と、配列番号52のアミノ酸配列の軽鎖とを含んでなる、モノクローナル抗体
からなる群において選択される、モノクローナル抗体である。
・配列番号4、5、および6のアミノ酸配列のそれぞれCDR-H1、CDR-H2、およびCDR-H3のうちの少なくとも1つ、優先的には少なくとも2つ、優先的には3つを含んでなる重鎖、または、配列番号4、5、および6の配列それぞれに対し、最適アラインメント後に少なくとも80%、好ましくは85%、90%、95%、および98%の同一性を有する配列を含んでなる重鎖と、配列番号7、8、および9のアミノ酸配列のそれぞれCDR-L1、CDR-L2、およびCDR-L3のうちの少なくとも1つ、優先的には少なくとも2つ、優先的には3つを含んでなる軽鎖、または、配列番号7、8、および9の配列それぞれに対し、最適アラインメント後に少なくとも80%、好ましくは85%、90%、95%、および98%の同一性を有する配列を含んでなる軽鎖とを含んでなる、ヒト化抗体、
・配列番号10、11、および12のアミノ酸配列のそれぞれCDR-H1、CDR-H2、およびCDR-H3のうちの少なくとも1つ、優先的には少なくとも2つ、優先的には3つを含んでなる重鎖、または、配列番号10、11、および12の配列それぞれに対し、最適アラインメント後に少なくとも80%、好ましくは85%、90%、95%、および98%の同一性を有する配列を含んでなる重鎖と、配列番号13、14、および15のアミノ酸配列のそれぞれCDR-L1、CDR-L2、およびCDR-L3のうちの少なくとも1つ、優先的には少なくとも2つ、優先的には3つを含んでなる軽鎖、または、配列番号13、14、および15の配列それぞれに対し、最適アラインメント後に少なくとも80%、好ましくは85%、90%、95%、および98%の同一性を有する配列を含んでなる軽鎖とを含んでなる、ヒト化抗体、
・配列番号16、17、および18のアミノ酸配列のそれぞれCDR-H1、CDR-H2、およびCDR-H3のうちの少なくとも1つ、優先的には少なくとも2つ、優先的には3つを含んでなる重鎖、または、配列番号16、17、および18の配列それぞれに対し、最適アラインメント後に少なくとも80%、好ましくは85%、90%、95%、および98%の同一性を有する配列を含んでなる重鎖と、配列番号19、20、および21のアミノ酸配列のそれぞれCDR-L1、CDR-L2、およびCDR-L3のうちの少なくとも1つ、優先的には少なくとも2つ、優先的には3つを含んでなる軽鎖、または、配列番号19、20、および21の配列それぞれに対し、最適アラインメント後に少なくとも80%、好ましくは85%、90%、95%、および98%の同一性を有する配列を含んでなる軽鎖とを含んでなる、ヒト化抗体、
・配列番号22、23、および24のアミノ酸配列のそれぞれCDR-H1、CDR-H2、およびCDR-H3のうちの少なくとも1つ、優先的には少なくとも2つ、優先的には3つを含んでなる重鎖、または、配列番号22、23、および24の配列それぞれに対し、最適アラインメント後に少なくとも80%、好ましくは85%、90%、95%、および98%の同一性を有する配列を含んでなる重鎖と、配列番号25、26、および27のアミノ酸配列のそれぞれCDR-L1、CDR-L2、およびCDR-L3のうちの少なくとも1つ、優先的には少なくとも2つ、優先的には3つを含んでなる軽鎖、または、配列番号25、26、および27の配列それぞれに対し、最適アラインメント後に少なくとも80%、好ましくは85%、90%、95%、および98%の同一性を有する配列を含んでなる軽鎖とを含んでなる、ヒト化抗体、
・配列番号28、29、および30のアミノ酸配列のそれぞれCDR-H1、CDR-H2、およびCDR-H3のうちの少なくとも1つ、優先的には少なくとも2つ、優先的には3つを含んでなる重鎖、または、配列番号28、29、および30の配列それぞれに対し、最適アラインメント後に少なくとも80%、好ましくは85%、90%、95%、および98%の同一性を有する配列を含んでなる重鎖と、配列番号31、32、および33のアミノ酸配列のそれぞれCDR-L1、CDR-L2、およびCDR-L3のうちの少なくとも1つ、優先的には少なくとも2つ、優先的には3つを含んでなる軽鎖、または、配列番号31、32、および33の配列それぞれに対し、最適アラインメント後に少なくとも80%、好ましくは85%、90%、95%、および98%の同一性を有する配列を含んでなる軽鎖とを含んでなる、ヒト化抗体、並びに
・配列番号34、35、および36のアミノ酸配列のそれぞれCDR-H1、CDR-H2、およびCDR-H3のうちの少なくとも1つ、優先的には少なくとも2つ、優先的には3つを含んでなる重鎖、または、配列番号34、35、および36の配列それぞれに対し、最適アラインメント後に少なくとも80%、好ましくは85%、90%、95%、および98%の同一性を有する配列を含んでなる重鎖と、配列番号37、38、および39のアミノ酸配列のそれぞれCDR-L1、CDR-L2、およびCDR-L3のうちの少なくとも1つ、優先的には少なくとも2つ、優先的には3つを含んでなる軽鎖、または、配列番号37、38、および39の配列それぞれに対し、最適アラインメント後に少なくとも80%、好ましくは85%、90%、95%、および98%の同一性を有する配列を含んでなる軽鎖とを含んでなる、ヒト化抗体
からなる群において選択され、
ヒト抗体に由来する軽鎖および重鎖の定常領域も含んでなる、ヒト化抗体である。
・配列番号53のアミノ酸配列の重鎖可変領域と、配列番号54のアミノ酸配列の軽鎖可変領域とを含んでなる、ヒト化抗体、
・配列番号55のアミノ酸配列の重鎖可変領域と、配列番号56のアミノ酸配列の軽鎖可変領域とを含んでなる、ヒト化抗体、
・配列番号57、58、および59の間で選択されるアミノ酸配列の重鎖可変領域と、配列番号60、61、および62の間で選択されるアミノ酸配列の軽鎖可変領域とを含んでなる、ヒト化抗体、
・配列番号63、64、および65の間で選択されるアミノ酸配列の重鎖可変領域と、配列番号66、67、および68の間で選択されるアミノ酸配列の軽鎖可変領域とを含んでなる、ヒト化抗体、
・配列番号69および71の間で選択されるアミノ酸配列の重鎖可変領域と、配列番号70および72の間で選択されるアミノ酸配列の軽鎖可変領域とを含んでなる、ヒト化抗体、並びに
・配列番号75および76の間で選択されるアミノ酸配列の重鎖可変領域と、配列番号77および78の間で選択されるアミノ酸配列の軽鎖可変領域とを含んでなる、ヒト化抗体
からなる群において選択され、
ヒト抗体に由来する軽鎖および重鎖の定常領域も含む、ヒト化抗体である。
本発明は以下の通りである。
[1]前立腺がんの予防または治療における使用のための、プロガストリン結合抗体またはその抗原結合断片。
[2]上記[1]に記載の使用のためのプロガストリン結合抗体またはその抗原結合断片であって、前記プロガストリン結合抗体またはその抗原結合断片が、1本鎖抗体、ラクダ化抗体、IgA1抗体、IgA2抗体、IgD抗体、IgE抗体、IgG1抗体、IgG2抗体、IgG3抗体、IgG4抗体、およびIgM抗体から選択される、プロガストリン結合抗体またはその抗原結合断片。
[3]上記[1]または[2]に記載の使用のためのプロガストリン結合抗体またはその抗原結合断片であって、前記プロガストリン結合抗体またはその抗原結合断片が、N末端抗プロガストリン抗体およびC末端抗プロガストリン抗体から選択される、プロガストリン結合抗体またはその抗原結合断片。
[4]上記[1]~[3]のいずれかに記載の使用のためのプロガストリン結合抗体またはその抗原結合断片であって、前記プロガストリン結合抗体またはその抗原結合断片が、中和抗体である、プロガストリン結合抗体またはその抗原結合断片。
[5]上記[1]~[4]のいずれかに記載の使用のためのプロガストリン結合抗体またはその抗原結合断片であって、前記抗体が、
・配列番号4、5、および6のアミノ酸配列のそれぞれCDR-H1、CDR-H2、およびCDR-H3のうちの少なくとも1つ、優先的には少なくとも2つ、優先的には3つを含んでなる重鎖と、配列番号7、8、および9のアミノ酸配列のそれぞれCDR-L1、CDR-L2、およびCDR-L3のうちの少なくとも1つ、優先的には少なくとも2つ、優先的には3つを含んでなる軽鎖とを含んでなる、抗体、
・配列番号10、11、および12のアミノ酸配列のそれぞれCDR-H1、CDR-H2、およびCDR-H3のうちの少なくとも1つ、優先的には少なくとも2つ、優先的には3つを含んでなる重鎖と、配列番号13、14、および15のアミノ酸配列のそれぞれCDR-L1、CDR-L2、およびCDR-L3のうちの少なくとも1つ、優先的には少なくとも2つ、優先的には3つを含んでなる軽鎖とを含んでなる、抗体、
・配列番号16、17、および18のアミノ酸配列のそれぞれCDR-H1、CDR-H2、およびCDR-H3のうちの少なくとも1つ、優先的には少なくとも2つ、優先的には3つを含んでなる重鎖と、配列番号19、20、および21のアミノ酸配列のそれぞれCDR-L1、CDR-L2、およびCDR-L3のうちの少なくとも1つ、優先的には少なくとも2つ、優先的には3つを含んでなる軽鎖とを含んでなる、抗体、
・配列番号22、23、および24のアミノ酸配列のそれぞれCDR-H1、CDR-H2、およびCDR-H3のうちの少なくとも1つ、優先的には少なくとも2つ、優先的には3つを含んでなる重鎖と、配列番号25、26、および27のアミノ酸配列のそれぞれCDR-L1、CDR-L2、およびCDR-L3のうちの少なくとも1つ、優先的には少なくとも2つ、優先的には3つを含んでなる軽鎖とを含んでなる、抗体、
・配列番号28、29、および30のアミノ酸配列のそれぞれCDR-H1、CDR-H2、およびCDR-H3のうちの少なくとも1つ、優先的には少なくとも2つ、優先的には3つを含んでなる重鎖と、配列番号31、32、および33のアミノ酸配列のそれぞれCDR-L1、CDR-L2、およびCDR-L3のうちの少なくとも1つ、優先的には少なくとも2つ、優先的には3つを含んでなる軽鎖とを含んでなる、抗体、並びに
・配列番号34、35、および36のアミノ酸配列のそれぞれCDR-H1、CDR-H2、およびCDR-H3のうちの少なくとも1つ、優先的には少なくとも2つ、優先的には3つを含んでなる重鎖と、配列番号37、38、および39のアミノ酸配列のそれぞれCDR-L1、CDR-L2、およびCDR-L3のうちの少なくとも1つ、優先的には少なくとも2つ、優先的には3つを含んでなる軽鎖とを含んでなる、抗体
からなる群から選択される、プロガストリン結合抗体またはその抗原結合断片。
[6]上記[1]~[5]のいずれかに記載の使用のためのプロガストリン結合抗体またはその抗原結合断片であって、前記抗体が、
・配列番号41のアミノ酸配列の重鎖と、配列番号42のアミノ酸配列の軽鎖とを含んでなる、モノクローナル抗体、
・配列番号43のアミノ酸配列の重鎖と、配列番号44のアミノ酸配列の軽鎖とを含んでなる、モノクローナル抗体、
・配列番号45のアミノ酸配列の重鎖と、配列番号46のアミノ酸配列の軽鎖とを含んでなる、モノクローナル抗体、
・配列番号47のアミノ酸配列の重鎖と、配列番号48のアミノ酸配列の軽鎖とを含んでなる、モノクローナル抗体、
・配列番号49のアミノ酸配列の重鎖と、配列番号50のアミノ酸配列の軽鎖とを含んでなる、モノクローナル抗体、および
・配列番号51のアミノ酸配列の重鎖と、配列番号52のアミノ酸配列の軽鎖とを含んでなる、モノクローナル抗体
からなる群から選択される、プロガストリン結合抗体またはその抗原結合断片。
[7]上記[1]~[5]のいずれかに記載の使用のためのプロガストリン結合抗体またはその抗原結合断片であって、前記抗体がヒト化抗体である、プロガストリン結合抗体またはその抗原結合断片。
[8]上記[7]に記載の使用のためのプロガストリン結合抗体またはその抗原結合断片であって、前記抗体が、
・配列番号53のアミノ酸配列の重鎖可変領域と、配列番号54のアミノ酸配列の軽鎖可変領域とを含んでなる、ヒト化抗体、
・配列番号55のアミノ酸配列の重鎖可変領域と、配列番号56のアミノ酸配列の軽鎖可変領域とを含んでなる、ヒト化抗体、
・配列番号57、58、および59の間で選択されるアミノ酸配列の重鎖可変領域と、配列番号60、61、および62の間で選択されるアミノ酸配列の軽鎖可変領域とを含んでなる、ヒト化抗体、
・配列番号63、64、および65の間で選択されるアミノ酸配列の重鎖可変領域と、配列番号66、67、および68の間で選択されるアミノ酸配列の軽鎖可変領域とを含んでなる、ヒト化抗体、
・配列番号69および71の間で選択されるアミノ酸配列の重鎖可変領域と、配列番号70および72の間で選択されるアミノ酸配列の軽鎖可変領域とを含んでなる、ヒト化抗体、並びに
・配列番号75および76の間で選択されるアミノ酸配列の重鎖可変領域と、配列番号77および78の間で選択されるアミノ酸配列の軽鎖可変領域とを含んでなる、ヒト化抗体
からなる群において選択され、
前記抗体が、ヒト抗体に由来する軽鎖および重鎖の定常領域も含む、プロガストリン結合抗体またはその抗原結合断片。
[9]上記[7]または[8]に記載の使用のためのプロガストリン結合抗体またはその抗原結合断片であって、前記抗体が、配列番号71のアミノ酸配列の重鎖可変領域と、配列番号72のアミノ酸配列の軽鎖可変領域とを含み、前記抗体が、ヒト抗体に由来する軽鎖および重鎖の定常領域も含んでなる、プロガストリン結合抗体またはその抗原結合断片。
[10]上記[7]~[9]のいずれかに記載の使用のためのプロガストリン結合抗体またはその抗原結合断片であって、前記抗体が、配列番号73のアミノ酸配列の重鎖と、配列番号74のアミノ酸配列の軽鎖とを含む、プロガストリン結合抗体またはその抗原結合断片。
[11]前立腺がんの予防または治療のための、上記[1]~[10]のいずれかに記載のプロガストリン結合抗体またはその抗原結合断片並びに薬学的に許容される担体および/または賦形剤を含んでなる、医薬組成物。
[12]第2の治療剤をさらに含んでなる、上記[11]に記載の使用のための医薬組成物。
[13]上記[12]に記載の使用のための医薬組成物であって、前記剤が、生物学的剤または化学療法剤である、医薬組成物。
[14]上記[13]に記載の使用のための医薬組成物であって、前記生物学的剤が、抗EGFRモノクローナル抗体または抗VEGFモノクローナル抗体である、医薬組成物。
[15]上記[14]に記載の使用のための医薬組成物であって、前記化学療法剤が、アルキル化剤、代謝拮抗物質、抗腫瘍抗生物質、有糸分裂阻害物質、クロマチン機能阻害物質、抗血管新生剤、抗エストロゲン物質、抗アンドロゲン物質、および免疫調節物質の群において選択される、医薬組成物。
1.1.抗hPGモノクローナル抗体の中和活性
PGに対するモノクローナル抗体を、前立腺がんの研究に一般的に使用されプロガストリンを産生および分泌するいくつかの細胞株の増殖を阻害する能力について試験する。異なる抗hPGモノクローナル抗体を用いて、これらの細胞株の各々からの細胞の生存率を試験する。
・配列番号28、29、および30のアミノ酸配列のCDR-H1、CDR-H2、およびCDR-H3を含んでなる重鎖と、配列番号31、32、および33のアミノ酸配列のCDR-L1、CDR-L2、およびCDR-L3を含んでなる軽鎖とを含んでなる、抗体、
・配列番号34、35、および36のアミノ酸配列のCDR-H1、CDR-H2、およびCDR-H3を含んでなる重鎖と、配列番号37、38、および39のアミノ酸配列のCDR-L1、CDR-L2、およびCDR-L3を含んでなる軽鎖とを含んでなる、抗体
の中から選択される、C末端抗hPG抗体であるか、
または、
・配列番号4、5、および6のアミノ酸配列のそれぞれCDR-H1、CDR-H2、およびCDR-H3を含んでなる重鎖と、配列番号7、8、および9のアミノ酸配列のそれぞれCDR-L1、CDR-L2、およびCDR-L3を含んでなる軽鎖とを含んでなる、モノクローナル抗体、
・配列番号10、11、および12のアミノ酸配列のそれぞれCDR-H1、CDR-H2、およびCDR-H3を含んでなる重鎖と、配列番号13、14、および15のアミノ酸配列のそれぞれCDR-L1、CDR-L2、およびCDR-L3を含んでなる軽鎖とを含んでなる、抗体、
・配列番号16、17、および18のアミノ酸配列のそれぞれCDR-H1、CDR-H2、およびCDR-H3を含んでなる重鎖と、配列番号19、20、および21のアミノ酸配列のそれぞれCDR-L1、CDR-L2、およびCDR-L3を含んでなる軽鎖とを含んでなる、抗体、
・配列番号22、23、および24のアミノ酸配列のそれぞれCDR-H1、CDR-H2、およびCDR-H3を含んでなる重鎖と、配列番号25、26、および27のアミノ酸配列のそれぞれCDR-L1、CDR-L2、およびCDR-L3を含んでなる軽鎖とを含んでなる、抗体
の中から選択される、N末端抗hPG抗体である。
各実験について、T0における対照ウェル中の細胞数を計数する。
PGに対するヒト化抗体を、前立腺がんの研究に一般的に使用されプロガストリンを産生および分泌するいくつかの細胞株の増殖を阻害する能力について試験する。異なる抗hPGモノクローナル抗体を用いて、これらの細胞株の各々からの細胞の生存率を試験する。
PGに対するモノクローナル抗体におけるがん幹細胞(CSC)頻度を低減する能力を、極限限界希釈アッセイ(Extreme Limiting Dilution Assay)(ELDA)を用いて、前立腺がんの研究に一般的に使用されプロガストリンを産生および分泌するいくつかの細胞株において試験する。異なる抗hPGモノクローナル抗体を用いて、これらの細胞株の各々からのCSC頻度を試験する。
・球形成アッセイ
PGに対するヒト化抗体におけるがん幹細胞(CSC)頻度を低減する能力を、球形成アッセイを用いて、前立腺がんの研究に一般的に使用されプロガストリンを産生および分泌するいくつかの細胞株において試験する。
PGに対するヒト化抗体におけるがん幹細胞(CSC)頻度を低減する能力を、極限限界希釈アッセイ(ELDA)を用いて、前立腺がんの研究に一般的に使用されプロガストリンを産生および分泌するいくつかの細胞株において試験する。異なる抗hPGヒト化抗体を用いて、これらの細胞株の各々からのCSC頻度を試験する。
PGに対するモノクローナル抗体におけるWNT/βカテニン経路を阻害する能力を、前立腺がんの研究に一般的に使用されプロガストリンを産生および分泌するいくつかの細胞株において、読出しとして、周知のWNT/βカテニン経路標的化遺伝子であるタンパク質サバイビンの発現を用いて試験する。異なる抗hPGモノクローナル抗体を用いて、これらの細胞株の各々からのサバイビン発現を試験する。
PGに対するヒト化抗体におけるWNT/βカテニン経路を阻害する能力を、前立腺がんの研究に一般的に使用されプロガストリンを産生および分泌するいくつかの細胞株において、読出しとして、周知のWNT/βカテニン経路標的化遺伝子であるタンパク質サバイビンの発現を用いて試験する。異なる抗hPGヒト化抗体を用いて、これらの細胞株の各々からのサバイビン発現を試験する。
2.1.抗hPGヒト化抗体の細胞生存率に対する中和活性
ヒト化抗PG抗体を、前立腺がんの研究に一般的に使用されプロガストリンを産生および分泌するいくつかの細胞株(すなわち、PC3、LNCAP、またはDU145など)の増殖を阻害する能力について試験した。異なる抗hPG抗体を用いて、これらの株の各々からの細胞の生存率について試験した。
24ウェルの超低接着プレート(ULA)に150個のLNCaP細胞を播種した。細胞を11日間、M11培地(Macari et al,Oncogene,2015)を有するULAプレートで培養し、3日または4日ごとに10μg/mlのヒト化対照抗体(BioXCell製の抗ヒトFcG1)(CT Hz)、または10μg/mlの抗hPG Hz 8CV2(PG Hz)で処置した(当該Hzは、C末端抗hPGヒト化抗体またはN末端抗hPGヒト化抗体である)。
Claims (14)
- プロガストリン結合抗体またはその抗原結合断片を含んでなる、前立腺がんの予防または治療用組成物であって、前記抗体が、
・配列番号4、5、および6のアミノ酸配列のそれぞれCDR-H1、CDR-H2、およびCDR-H3を含んでなる重鎖と、配列番号7、8、および9のアミノ酸配列のそれぞれCDR-L1、CDR-L2、およびCDR-L3を含んでなる軽鎖とを含んでなる、抗体、
・配列番号10、11、および12のアミノ酸配列のそれぞれCDR-H1、CDR-H2、およびCDR-H3を含んでなる重鎖と、配列番号13、14、および15のアミノ酸配列のそれぞれCDR-L1、CDR-L2、およびCDR-L3を含んでなる軽鎖とを含んでなる、抗体、
・配列番号16、17、および18のアミノ酸配列のそれぞれCDR-H1、CDR-H2、およびCDR-H3を含んでなる重鎖と、配列番号19、20、および21のアミノ酸配列のそれぞれCDR-L1、CDR-L2、およびCDR-L3を含んでなる軽鎖とを含んでなる、抗体、
・配列番号22、23、および24のアミノ酸配列のそれぞれCDR-H1、CDR-H2、およびCDR-H3を含んでなる重鎖と、配列番号25、26、および27のアミノ酸配列のそれぞれCDR-L1、CDR-L2、およびCDR-L3を含んでなる軽鎖とを含んでなる、抗体、
・配列番号28、29、および30のアミノ酸配列のそれぞれCDR-H1、CDR-H2、およびCDR-H3を含んでなる重鎖と、配列番号31、32、および33のアミノ酸配列のそれぞれCDR-L1、CDR-L2、およびCDR-L3を含んでなる軽鎖とを含んでなる、抗体、並びに
・配列番号34、35、および36のアミノ酸配列のそれぞれCDR-H1、CDR-H2、およびCDR-H3を含んでなる重鎖と、配列番号37、38、および39のアミノ酸配列のそれぞれCDR-L1、CDR-L2、およびCDR-L3を含んでなる軽鎖とを含んでなる、抗体
からなる群から選択される、組成物。 - 前記プロガストリン結合抗体またはその抗原結合断片が、1本鎖抗体、ラクダ化抗体、IgA1抗体、IgA2抗体、IgD抗体、IgE抗体、IgG1抗体、IgG2抗体、IgG3抗体、IgG4抗体、およびIgM抗体から選択される、請求項1に記載の組成物。
- 前記プロガストリン結合抗体またはその抗原結合断片が、N末端抗プロガストリン抗体およびC末端抗プロガストリン抗体から選択される、請求項1または2に記載の組成物。
- 前記プロガストリン結合抗体またはその抗原結合断片が、中和抗体である、請求項1~3のいずれか一項に記載の組成物。
- 前記抗体が、
・配列番号41のアミノ酸配列の重鎖と、配列番号42のアミノ酸配列の軽鎖とを含んでなる、モノクローナル抗体、
・配列番号43のアミノ酸配列の重鎖と、配列番号44のアミノ酸配列の軽鎖とを含んでなる、モノクローナル抗体、
・配列番号45のアミノ酸配列の重鎖と、配列番号46のアミノ酸配列の軽鎖とを含んでなる、モノクローナル抗体、
・配列番号47のアミノ酸配列の重鎖と、配列番号48のアミノ酸配列の軽鎖とを含んでなる、モノクローナル抗体、
・配列番号49のアミノ酸配列の重鎖と、配列番号50のアミノ酸配列の軽鎖とを含んでなる、モノクローナル抗体、および
・配列番号51のアミノ酸配列の重鎖と、配列番号52のアミノ酸配列の軽鎖とを含んでなる、モノクローナル抗体
からなる群から選択される、請求項1~4のいずれか一項に記載の組成物。 - 前記抗体がヒト化抗体である、請求項1~4のいずれか一項に記載の組成物。
- 前記抗体が、
・配列番号53のアミノ酸配列の重鎖可変領域と、配列番号54のアミノ酸配列の軽鎖可変領域とを含んでなる、ヒト化抗体、
・配列番号55のアミノ酸配列の重鎖可変領域と、配列番号56のアミノ酸配列の軽鎖可変領域とを含んでなる、ヒト化抗体、
・配列番号57、58、および59の間で選択されるアミノ酸配列の重鎖可変領域と、配列番号60、61、および62の間で選択されるアミノ酸配列の軽鎖可変領域とを含んでなる、ヒト化抗体、
・配列番号63、64、および65の間で選択されるアミノ酸配列の重鎖可変領域と、配列番号66、67、および68の間で選択されるアミノ酸配列の軽鎖可変領域とを含んでなる、ヒト化抗体、
・配列番号69および71の間で選択されるアミノ酸配列の重鎖可変領域と、配列番号70および72の間で選択されるアミノ酸配列の軽鎖可変領域とを含んでなる、ヒト化抗体、並びに
・配列番号75および76の間で選択されるアミノ酸配列の重鎖可変領域と、配列番号77および78の間で選択されるアミノ酸配列の軽鎖可変領域とを含んでなる、ヒト化抗体
からなる群において選択され、
前記抗体が、ヒト抗体に由来する軽鎖および重鎖の定常領域も含む、請求項6に記載の組成物。 - 前記抗体が、配列番号71のアミノ酸配列の重鎖可変領域と、配列番号72のアミノ酸配列の軽鎖可変領域とを含み、前記抗体が、ヒト抗体に由来する軽鎖および重鎖の定常領域も含んでなる、請求項6または7に記載の組成物。
- 前記抗体が、配列番号73のアミノ酸配列の重鎖と、配列番号74のアミノ酸配列の軽鎖とを含む、請求項6~8のいずれか一項に記載の組成物。
- 請求項1~9のいずれか一項に定義されるプロガストリン結合抗体またはその抗原結合断片並びに薬学的に許容される担体および/または賦形剤を含んでなる、前立腺がんの予防または治療のための、医薬組成物。
- 第2の治療剤をさらに含んでなる、請求項10に記載の医薬組成物。
- 前記剤が、生物学的剤または化学療法剤である、請求項11に記載の医薬組成物。
- 前記生物学的剤が、抗EGFRモノクローナル抗体または抗VEGFモノクローナル抗体である、請求項12に記載の医薬組成物。
- 前記化学療法剤が、アルキル化剤、代謝拮抗物質、抗腫瘍抗生物質、有糸分裂阻害物質、クロマチン機能阻害物質、抗血管新生剤、抗エストロゲン物質、抗アンドロゲン物質、および免疫調節物質の群において選択される、請求項13に記載の医薬組成物。
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