JP6929285B2

JP6929285B2 - 放射性標識ｍＧｌｕＲ２／３ＰＥＴリガンド

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Publication number: JP6929285B2
Application number: JP2018531465A
Authority: JP
Inventors: アンドレス−ギル，ホセ，イグナシオ; グール，マイケル，ルック，マリアバン; ボルマンス，ガイ，マウリッツ，アール; ベルビーク，ジュースト
Original assignee: ヤンセンファーマシューティカエヌ．ベー．
Priority date: 2015-12-18
Filing date: 2016-12-16
Publication date: 2021-09-01
Anticipated expiration: 2036-12-16
Also published as: EP3389728B1; WO2017103179A1; AU2016374568A1; US11045562B2; IL259966B; IL259966A; EA037941B1; ES2820823T3; EA201891444A1; JP2019504015A; CA3003962A1; US20180369429A1; EP3389728A1; AU2016374568B2

Description

本発明は、ポジトロン断層撮影（ＰＥＴ）を用いて組織における代謝調節型グルタミン酸受容体ｍＧｌｕ２および３をイメージングおよび定量するのに有用である、他のｍＧｌｕ受容体よりも選択的な新規の放射性標識ｍＧｌｕＲ２／３リガンドに関する。本発明は、このような化合物を含む組成物、このような化合物および組成物を調製するためのプロセス、インビトロまたはインビボで組織、細胞または哺乳動物をイメージングするためのこのような化合物および組成物の使用、ならびに前記化合物の前駆体も対象とする。

ＣＮＳにおけるグルタミン酸作動系は、一部の脳機能において重要な役割を果たす神経伝達物質系の１つである。代謝調節型グルタミン酸受容体（ｍＧｌｕＲ）はＧ−タンパク質共役ファミリーに属し、現在、８つの異なるサブタイプが同定されており、これらは様々な脳領域に分布する（Ｆｅｒｒａｇｕｔｉ＆Ｓｈｉｇｅｍｏｔｏ，Ｃｅｌｌ＆ＴｉｓｓｕｅＲｅｓｅａｒｃｈ，３２６：４８３−５０４，２００６）。ｍＧｌｕＲは、グルタミン酸の結合により、ＣＮＳにおいてシナプス伝達および神経細胞の興奮性の調整に関与する。これは、受容体の細胞内シグナル伝達パートナーへの結合を活性化し、細胞事象につながる（Ｎｉｓｗｅｎｄｅｒ＆Ｃｏｎｎ，ＡｎｎｕａｌＲｅｖｉｅｗｏｆＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ＆Ｔｏｘｉｃｏｌｏｇｙ５０：２９５−３２２，２０１０）。

ｍＧｌｕＲは、それらの薬理学的および構造特性に基づいて３つのサブグループ：Ｉ群（ｍＧｌｕＲ１およびｍＧｌｕＲ５）、ＩＩ群（ｍＧｌｕＲ２およびｍＧｌｕＲ３）、およびＩＩＩ群（ｍＧｌｕＲ４、ｍＧｌｕＲ６、ｍＧｌｕＲ７およびｍＧｌｕＲ８）にさらに分類される。オルソステリックおよびアロステリックの両方で調整するＩＩ群リガンドは、精神障害、気分障害、アルツハイマー病および認知または記憶障害を含め、様々な神経障害の処置において有用である可能性があると考えられる。これは、皮質、海馬および線条体などの脳領域でのそれらの主要な局在と一致する（Ｆｅｒｒａｇｕｔｉ＆Ｓｈｉｇｅｍｏｔｏ，Ｃｅｌｌ＆ＴｉｓｓｕｅＲｅｓｅａｒｃｈ３２６：４８３−５０４，２００６）。特に、アンタゴニストおよび負のアロステリック修飾因子が気分障害および認知または記憶機能不全の処置に対する可能性を保持することが報告されている。これは、これらの臨床症候群に関連するとみなされる一連の実験条件に供される実験動物において試験したＩＩ群受容体アンタゴニストおよび負のアロステリック修飾因子での知見に基づく（Ｇｏｅｌｄｎｅｒｅｔａｌ，Ｎｅｕｒｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ６４：３３７−３４６，２０１３）。臨床試験は、例えば、行われている抗うつ薬処置（２０１４年２月１９日に回収した、ＣｌｉｎｉｃａｌＴｒｉａｌｓ．ｇｏｖＩｄｅｎｔｉｆｉｅｒＮＣＴ０１４５７６７７）に対して不適切な反応を有する大うつ病性障害の患者における補助療法においてｍＧｌｕＲ２／３アンタゴニストＲＯ４９９５８１９（Ｆ．Ｈｏｆｆｍａｎｎ−ＬａＲｏｃｈｅＬｔｄ．）で進行中である。国際公開第２０１３０６６７３６号パンフレット（ＭｅｒｃｋＳｈａｒｐ＆ＤｏｈｍｅＣｏｒｐ．）は、ｍＧｌｕＲ２ＮＡＭとしてキノリンカルボキサミドおよびキノリンカルボニトリル化合物を記載する。国際公開第２０１３１７４８２２号パンフレット（ドメイン治療薬）は、４Ｈ−ピラゾロ［１，５−ａ］キナゾリン−５−オンおよび４Ｈ−ピロロ［１，２−ａ］キナゾリン−５−オンおよびそのインビトロｍＧｌｕＲ２ＮＡＭ活性を記載する。国際公開第２０１４０６４０２８号パンフレット（Ｆ．Ｈｏｆｆｍａｎ−ＬａＲｏｃｈｅＡＧ）は、ｍＧｌｕ２／３の負のアロステリック修飾因子の選択および自閉症スペクトラム障害（ＡＳＤ）の処置におけるそれらの使用の可能性を開示する。国際公開第２０１４１９５３１１号パンフレット（ＪａｎｓｓｅｎＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａＮＶ）は、６，７−ジヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピラジン−４（５Ｈ）−オン化合物およびｍＧｌｕＲ２ＮＡＭとしてのそれらの使用を開示する。

ＩＩ群受容体は、シナプスへのグルタミン酸の放出に対する負のフィードバックループを発揮するシナプス前神経終末に主に局在する（Ｋｅｌｍｅｎｄｉｅｔａｌ，ＰｒｉｍａｒｙＰｓｙｃｈｉａｔｒｙ１３：８０−８６，２００６）。したがって、アンタゴニストまたは負のアロステリック修飾因子によるこれらの受容体の機能的阻害は、グルタミン酸放出に対するブレーキを解除し、その結果、グルタミン酸作動性シグナル伝達が促進される。この効果は、ＩＩ群受容体の阻害剤での前臨床種で観察される抗うつ薬様および認知促進効果の根底をなすと考えられる。さらに、ＩＩ群オルソステリックアンタゴニストでのマウスの処置は、脳由来神経栄養因子（ＢＤＮＦ）などの増殖因子によるシグナル伝達を促進することが示されている（Ｋｏｉｋｅｅｔａｌ，ＢｅｈａｖｉｏｕｒａｌＢｒａｉｎＲｅｓｅａｒｃｈ２３８：４８−５２，２０１３）。ＢＤＮＦおよび他の増殖因子は、介在するシナプス可塑性に決定的に関与することが示されているため、この機序は、これらの化合物の抗うつおよび認知促進特性の両方に寄与すると思われる。したがって、ＩＩ群受容体ファミリーのｍＧｌｕＲの阻害は、うつおよび認知または記憶機能不全を含む神経障害に対する可能性のある治療機序に相当すると考えられる。

ポジトロン断層撮影（ＰＥＴ）は、全ての核イメージング技術の最大の空間的および時間的解像度をもたらす非浸潤性イメージング技術であり、組織におけるトレーサー濃度の真の定量を可能にし得るというさらなる長所を有する。これは、検出のために、例えば^１５Ｏ、^１３Ｎ、^１１Ｃおよび^１８Ｆなどのポジトロン放出核種を使用する。現在、ｍＧｌｕＲのインビボイメージングに対して数種のポジトロン断層撮影放射性トレーサーが報告されている。ＩＩ群ｍＧｌｕ受容体をイメージングするためのポジトロン断層撮影放射性トレーサーの改善をもたらすことが依然として必要とされている。

本発明は、式（Ｉ）

（式中、少なくとも１つの原子は、放射活性である）を有する化合物またはその薬学的に許容可能な塩もしくは溶媒和物に関する。

特定の実施形態において、式（Ｉ）の化合物は、化合物１

またはその薬学的に許容可能な塩もしくは溶媒和物である。

本発明は、化合物１の合成のための前駆体化合物にも関する。したがって、本発明は、式Ｐ−１、Ｐ−２およびＰ−３

の化合物またはその薬学的に許容可能な塩もしくは溶媒和物にも関する。

Ｐ−２の特定の薬学的に許容可能な塩は、メチルスルホン酸塩である。

本発明は、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩と、薬学的に許容可能な担体または希釈剤とを含む医薬組成物にも関する。特定の実施形態において、前記医薬組成物は、診断に特に適切であり、したがって診断用医薬組成物と呼ばれ得る。特に、前記医薬組成物は滅菌溶液である。したがって、本発明の例となるものは、本明細書中に記載の式（Ｉ）の化合物を含む滅菌溶液である。

本発明は、造影剤としての式（Ｉ）の化合物の使用にさらに関する。したがって、本発明を例証することは、インビトロまたはインビボで組織、細胞または哺乳動物をイメージングするための本明細書中に記載のような式（Ｉ）の化合物を使用またはイメージングする方法である。特に、本発明は、インビトロ、エクスビボまたはインビボで組織、細胞または哺乳動物をイメージングするための、造影剤としての使用のための本明細書中に記載のような式（Ｉ）の化合物に関する。本発明は、インビトロ、エクスビボまたはインビボで組織、細胞または哺乳動物をイメージングするための、造影剤としての使用のための式（Ｉ）の化合物を含む組成物にさらに関する。

本発明は、本明細書中に記載のような式（Ｉ）の標識化合物の検出可能な量を組織、細胞または哺乳動物と接触させるかまたはそれに提供もしくは投与することと、式（Ｉ）の化合物を検出することとを含む、組織、細胞または哺乳動物をイメージングする方法にも関する。

さらに本発明の例となるのは、本明細書中に記載のような式（Ｉ）の化合物を組織、細胞または哺乳動物と接触させるかまたはそれに提供もしくは投与することと、ポジトロン断層撮影イメージング系で組織、細胞または哺乳動物をイメージングすることとを含む、組織、細胞または哺乳動物をイメージングする方法である。さらに、本発明は、本明細書中で記載のような式（Ｉ）に従う化合物の調製のためのプロセスであって、
（ａ）（ａ−１）塩基および不活性溶媒、例えばトリメチルアミンまたはトリエチルアミンおよびジクロロメタンの存在下で式（Ｐ−１）の化合物をメタンスルホン酸無水物と反応させ、かつ（ａ−２）不活性溶媒中、塩基の存在下において、ステップ（ａ−１）で得られた化合物を求核性放射活性フッ素化試薬［^１８Ｆ］Ｆ⁻と反応させるステップ、

（ｂ）不活性溶媒中において塩基の存在下で式（Ｐ−２）の化合物を求核性放射活性フッ素化剤［^１８Ｆ］Ｆ⁻と反応させるステップ、

（ｃ）不活性溶媒中において塩基の存在下で式（Ｐ−３）の化合物を求核性放射活性フッ素化剤［^１８Ｆ］Ｆ⁻と反応させるステップ

を含むプロセスを指す。

ステップ（ａ−２）、（ｂ）および（ｃ）における適切な求核性放射活性フッ素化試薬は、例えば、Ｋ［^１８Ｆ］／Ｋｒｙｐｔｏｆｉｘ２２２または放射活性フッ素［^１８Ｆ］Ｆ⁻を組み込むテトラアルキルアンモニウム塩である。ステップ（ａ−２）、（ｂ）および（ｃ）における適切な塩基は、例えば、Ｋ_２ＣＯ_３またはＣｓ_２ＣＯ_３である。ステップ（ａ−２）、（ｂ）および（ｃ）における適切な溶媒は、例えば、ＤＭＳＯ、ＣＨ_３ＣＮまたはＤＭＦであり、任意選択により少量の水の添加を伴う。

ＳＤラットの脳における［^１８Ｆ］−１の体内分布を示す。ＳＤラットの末梢における［^１８Ｆ］−１の体内分布を示す。ＳＤラットにおける、この図面でｍＧｌｕ２／３ＮＡＭとして示される１０ｍｇ／ｋｇの化合物Ａ（ＮＡＭ化合物、他のｍＧｌｕＲと比較してｍＧｌｕ２／３に対して選択的（３よりも２に対して約２０倍選択的））の前処置ありまたはなしでの［^１８Ｆ］−１の取り込みに対する時間活性曲線を示す。

アカゲザルにおける２．５ｍｇ／ｋｇｉ．ｖ．化合物Ａの前処理ありおよびなしでの［^１８Ｆ］−１の取り込みに対するμＰＥＴ時間活性曲線を示し、脳橋を除く全ての脳領域で顕著な遮断効果が観察された。

ベースラインで割った脳領域におけるＳＵＶを示し、アカゲザルにおいて脳橋を除く全脳領域で遮断効果が確認される。

アカゲザルにおける最初の６０分間にわたるＳＲＴＭモデルにおいて参照として脳橋を用いた結合能の計算を示し、参照として脳橋を用いて全脳領域での遮断効果を観察した。

既に言及されるように、式（Ｉ）の化合物および式（Ｉ）の化合物を含む組成物は、インビトロまたはインビボで組織、細胞または哺乳動物をイメージングするために使用され得る。特に、本発明は、インビトロまたはインビボで組織、細胞または哺乳動物においてｍＧｌｕＲ２および３受容体をイメージングまたは定量する方法に関する。

細胞および組織は、好ましくはｍＧｌｕＲ２および３受容体が豊富である中枢神経系細胞および組織である。既に言及されるように、ｍＧｌｕＲ２および３受容体は、中枢神経系組織、とりわけ脳を形成し、とりわけ大脳皮質、視床領域、副嗅球、海馬、扁桃体、尾状核被殻および側坐核を形成する中枢神経系組織において豊富である。

本方法がインビボで行われる場合、式（Ｉ）の化合物は、静脈内、例えばシリンジでの注射により、または短いカテーテルなどの末梢静脈内ラインにより投与し得る。

哺乳動物がヒトである場合、式（Ｉ）の化合物または式（Ｉ）の化合物を含む滅菌溶液は、特に、腕において何れかの同定可能な静脈に、特に手の甲においてまたは肘の肘正中皮静脈において静脈内投与により投与し得る。

したがって、特定の実施形態において、本発明は、哺乳動物への本明細書中で定義されるような式（Ｉ）の化合物または式（Ｉ）の化合物を含む組成物の静脈内投与を含む、哺乳動物において組織または細胞をイメージングし、かつポジトロン断層撮影イメージング系で組織または細胞をイメージングする方法に関する。

したがって、さらなる特定の実施形態において、本発明は、本明細書中で定義されるような式（Ｉ）の化合物または式（Ｉ）の化合物を含む滅菌処方物のヒトへの静脈内投与を含む、ヒトにおいて組織または細胞をイメージングするか、またはポジトロン断層撮影イメージング系で組織または細胞をイメージングする方法に関する。

さらなる実施形態において、本発明は、式（Ｉ）の化合物または式（Ｉ）の化合物を含む組成物の哺乳動物への静脈内投与を含む、哺乳動物においてｍＧｌｕＲ２および３受容体をイメージングまたは定量し、かつポジトロン断層撮影イメージング系でイメージングする方法に関する。

別の実施形態において、本発明は、インビトロまたはインビボで組織、細胞または哺乳動物をイメージングするための式（Ｉ）の化合物の使用に関するか、または本発明は、ポジトロン断層撮影を使用してインビトロまたはインビボで組織、細胞または哺乳動物をイメージングすることにおける使用のための式（Ｉ）の化合物に関する。

本発明は、哺乳動物においてｍＧｌｕ２および３受容体をイメージングまたは定量する方法であって、式（Ｉ）の化合物の検出可能な量を哺乳動物に提供することと、ｍＧｌｕ２および３受容体と結合する式（Ｉ）の化合物を検出することとを含む方法にも関する。本方法は、他の非放射性標識化合物によるｍＧｌｕ２および３受容体占有を決定することも可能にし、したがって、本発明は、他の非放射性標識化合物によるｍＧｌｕ２および３受容体部位占有を決定することにおける使用のための、本明細書中で定義されるような式（Ｉ）の化合物または本発明による医薬組成物に関する。

さらに、本発明は、対象においてｍＧｌｕ２および３受容体に関連する障害またはそれに対する素因を評価する方法であって、式（Ｉ）の化合物または本発明による医薬組成物の検出可能な量を提供することを含む方法に関し、ここで、この式（Ｉ）の化合物は、脳血管関門を通過し、脳組織においてｍＧｌｕ２および３受容体に選択的に結合し、それにより脳組織への化合物の分布が可能になり、脳組織のイメージングが行われる。

本化合物は、化合物がｍＧｌｕ２および３受容体と結合するようになるのに十分な時間が経過した後、検出可能な量で対象に提供され、標識化合物が非侵襲的に検出される。

定義
本明細書中で使用される場合、「組成物」という用語は、指定量で指定成分を含む生成物および指定量での指定成分の組み合わせの結果として直接的または間接的に得られる何らかの生成物を包含するものとする。

「検出可能な量」という用語は、イメージング機器、特にＰＥＴスキャン機器の検出下限を上回る化合物の濃度を指す。

絶対配置は、Ｃａｈｎ−Ｉｎｇｏｌｄ−Ｐｒｅｌｏｇ系に従って特定される。

本発明による化合物の付加塩も本発明の範囲内に包含されるものとする。

本発明の化合物の許容可能な塩は、対イオンが薬学的に許容可能であるものである。しかし、薬学的に許容可能ではない酸および塩基の塩も、例えば、薬学的に許容可能な化合物の調製または精製において有用であり得る。全ての塩は、薬学的に許容可能であるか否かにかかわらず、本発明の範囲内に含まれる。薬学的に許容可能な塩は、本発明による化合物が形成可能である治療的に活性のある無毒性酸付加塩形態を含むと定義される。前記塩は、本発明による化合物の塩基形態を適切な酸、例えば無機酸、例えばハロゲン化水素酸、特に塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸およびリン酸；有機酸、例えば酢酸、ヒドロキシ酢酸、プロパン酸、乳酸、ピルビン酸、シュウ酸、マロン酸、コハク酸、マレイン酸、フマル酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、シクラミン酸、サリチル酸、ｐ−アミノサリチル酸およびパモ酸で処理することによって得られ得る。

逆に、前記塩形態は、適切な塩基での処理により遊離塩基形態に変換され得る。

さらに、本発明の化合物の一部は、水（すなわち水和物）または一般的な有機溶媒との溶媒和物を形成し得、このような溶媒和物も本発明の範囲内に含まれるものとする。

「対象」という用語は、本明細書中で使用される場合、処置、観察または実験の目的であるかまたは目的である状態である動物、好ましくは哺乳動物、最も好ましくはヒトを指す。特に明記しない限り、「対象」は、健康な動物および様々な疾患または障害に罹患している動物の両方を含む。

「哺乳動物」という用語は、特にヒト、マウス、イヌおよびラットを指す。

「細胞」という用語は、ｍＧｌｕ２および／または３受容体を発現するかまたは組み込む細胞を指す。

本発明の化合物の名称は、ＡｄｖａｎｃｅｄＣｈｅｍｉｃａｌＤｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ，Ｉｎｃ．ソフトウェア（ＡＣＤ／Ｎａｍｅ製品バージョン１０．０１；ビルド１５４９４、２００６年１２月１日）を使用してＣｈｅｍｉｃａｌＡｂｓｔｒａｃｔｓＳｅｒｖｉｃｅ（ＣＡＳ）により合意された命名規則に従って作成した。

適用
本発明による化合物は、インビトロおよびインビボの両方で組織、細胞または哺乳動物をイメージングするための様々な適用がある。したがって、例えば、これらは、様々な年齢および性別の対象においてｍＧｌｕＲ２／３の様々な分布をマッピングするために使用され得る。さらに、これらにより、様々な疾患または障害に罹患した対象においてｍＧｌｕＲ２／３の判別の目安となる分布を探索することができるようになる。したがって、異常な分布は、対象集団の診断、症例発見、層別化において、および個々の対象において疾患進行を監視することにおいて役立ち得る。放射性リガンドは、他のリガンドによるｍＧｌｕＲ２／３部位占有を決定することにおいてさらに有用性が見出され得る。放射性リガンドは、痕跡量、すなわち例えばＰＥＴイメージングに対して検出可能な量で投与されるため、治療効果は、本発明による放射性リガンドの投与に起因するものではない。

実験パート
中間体、［^１９Ｆ］−化合物１および前駆体の調製
全般
本明細書中で使用される場合、「ａｑ．」という用語は水性を意味し、「ＤＣＭ」はジクロロメタンを意味し、「ＤＩＰＥ」はジイソプロピルエーテルを意味し、「ＤＭＦ」はＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドを意味し、「ＤＭＳＯ」はジメチルスルホキシドを意味し、「ＤＳＣ」は示差走査熱量測定を意味し、「Ｅｔ_３Ｎ／ＴＥＡ」はトリエチルアミンを意味し、「ＥｔＯＨ」はエタノールを意味し、「ＥｔＯＡｃ」は酢酸エチルを意味し、「ｅｑ．」は当量を意味し、「ｈ」は時間を意味し、「ＨＰＬＣ」は高速液体クロマトグラフィーを意味し、「ＬＣＭＳ」は液体クロマトグラフィー／質量分析を意味し、「［Ｍ＋Ｈ］^＋」は化合物の遊離塩基のプロトン化質量を意味し、「［Ｍ−Ｈ］⁻」は化合物の遊離塩基の脱プロトン化質量を意味し、「ｍｉｎ」は分を意味し、「ｍ．ｐ．」は融点を意味し、「ｍｗ／ＭＷ」はマイクロ波を意味し、「ｑｕａｎｔ．」は定量的を意味し、「ｒ．ｍ．」は反応混合物を意味し、「ｒ．ｔ．／ＲＴ」は室温を意味し、「Ｒ_ｔ」は保持時間（分）を意味し、「ｓａｔ．」は飽和を意味し、「ｓｏｌ．」は溶液を意味し、「ＴＨＦ」はテトラヒドロフランを意味し、「ＵＶ」は紫外線を意味する。

単一モード反応器：ＢｉｏｔａｇｅＩｎｉｔｉａｔｏｒ（商標）Ｓｉｘｔｙマイクロ波反応器（Ｂｉｏｔａｇｅ）でマイクロ波補助反応を行った。

試薬グレード溶媒を使用してシリカゲル６０Ｆ２５４プレート（Ｍｅｒｃｋ）上で薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）を行った。標準的な技術のもと、シリカゲル、メッシュ２３０〜４００粒径および６０Åポアサイズ（Ｍｅｒｃｋ）上でオープンカラムクロマトグラフィーを行った。破砕状シリカゲル、粒径１５〜４０μｍ（順送使い捨てフラッシュカラム）上において、ＡｒｍｅｎＩｎｓｔｒｕｍｅｎｔからのＳＰＯＴまたはＬＡＦＬＡＳＨシステム上でＭｅｒｃｋからの連結式のカートリッジを用いて自動化フラッシュカラムクロマトグラフィーを行った。

本発明の化合物を調製するためのいくつかの方法を次の実施例で例示するが、これは、本発明を説明するものであり、本発明の範囲を限定するものではないものとする。別段の断りがない限り、全ての出発物質は市販の供給業者から得て、さらなる精製を行わずに使用した。

中間体化合物の調製
中間体１（Ｉ−１）

窒素下でトルエン（４３９ｍＬ）中の（７Ｓ）−６，７−ジヒドロ−７−メチル−ピラゾロ［１，５−ａ］ピラジン−４（５Ｈ）−オン（［１６３９９０１−７９−３］、国際公開第２０１４１９５３１１号パンフレット、５０．００ｇ、３３０．７６ｍｍｏｌ）、５−ブロモ−２−（トリフルオロメチル）ベンジルアルコール（８４．３５ｇ、３３０．７６ｍｍｏｌ）、Ｋ_２ＣＯ_３（９１．４３ｇ、６６１．５２ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ’−ジメチルエチレン−ジアミン（１６．７３ｍＬ、１３２．３０ｍｍｏｌ）の撹拌懸濁液にヨウ化銅（Ｉ）（２５．２０ｇ、１３２．３０ｍｍｏｌ）を添加した。１０５℃で１８時間、混合物を撹拌した。次いで、混合物を水およびＮＨ_３（３２％）で希釈し、ＤＣＭで抽出した。有機層を分離し、乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、ろ過し、真空下で溶媒を蒸発させた。粗製生成物をオープンカラムクロマトグラフィー（シリカ；ＥｔＯＡｃ／ヘプタン３０／７０〜７５／２５）によって精製した。所望の分画を回収し、真空中で濃縮した。生成物をＥｔＯＡｃ／ヘプタン混合物中で沈殿させた。ろ過および乾燥により、白色固形物としてＩ−１（７２．７ｇ、６８％）を得た。

中間体２（Ｉ−２）

ＣＨ_３ＣＮ（７５０ｍＬ）中のＩ−１（７２．６０ｇ、２２３．１９ｍｍｏｌ）および硝酸アンモニウムセリウム（ＩＶ）（８５．６５ｇ、１５６．２３ｍｍｏｌ）の溶液にヨウ素（３９．６５ｇ、１５６．２３ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を７５℃で４５分間撹拌した。次いで、混合物をｒ．ｔ．に冷却し、ＥｔＯＡｃで希釈し、希釈Ｎａ_２Ｓ_２Ｏ_３で洗浄した。有機層を分離し、乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、ろ過し、溶媒を真空下で蒸発させた。粗製生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ；ＥｔＯＡｃ／ヘプタン、２０／８０〜４０／６０）により精製した。所望の分画を回収し、真空下で蒸発させて、白色泡状物質としてＩ−２（８５．５０ｇ、８５％）を得た。

中間体３（Ｉ−３）

０℃および窒素下でビス（２−メトキシエチル）アミノ−硫黄トリフルオリド（５５．５７ｍＬ、１５０．７１ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（４００ｍＬ）中の中間体Ｉ−２（４０．００ｇ、８８．６６ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に添加した。混合物をｒｔまで温め、ｒｔで１時間撹拌した。次いで、これを０℃、次いでｒｔにおいてＮａＨＣＯ_３飽和水溶液で処理し、ＤＣＭで抽出した。有機層を分離し、乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、ろ過し、真空下で濃縮した。粗製生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ；溶出液ＤＣＭ）によって精製した。所望の分画を回収し、真空中で濃縮して、白色固形物として中間体化合物Ｉ−３（２５．００ｇ、６２％）を得た。

化合物［^１９Ｆ］−１の調製

窒素下で１，４−ジオキサン（６００ｍＬ）中のＩ−３（２４．５０ｇ、５４．０６ｍｍｏｌ）、２−アミノピリジン−３−カルボキサミド（１１．１２ｇ、８１．０９ｍｍｏｌ）およびＫ_３ＰＯ_４（３４．４３ｇ、１６２．１９ｍｍｏｌ）の脱酸素化撹拌懸濁液にヨウ化銅（Ｉ）（４．１２ｇ、２１．６３ｍｍｏｌ）を添加した。次いで、（＋／−）−トランス−１，２−シクロヘキサンジアミン（２．６０ｍＬ）を添加し、１００℃で１６時間、混合物を撹拌した。ＲＴに冷却した後、ｒ．ｍ．をろ過し、ＥｔＯＡｃで洗浄した。ろ液を希釈ＮＨ_３水溶液で洗浄し、分離し、乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、ろ過し、真空下で溶媒を蒸発させた。粗製生成物をオープンカラムクロマトグラフィー（シリカ；ヘプタン中ＥｔＯＡｃ、５０／５０〜１００／０）によって精製した。所望の分画を回収し、真空下で濃縮した。不純な分画をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ；ＭｅＯＨ／ＤＣＭ０／１００〜２／９８）によってさらに精製した。両方のカラムからの全ての所望の分画を合わせ、真空下で蒸発させた。この生成物をイソプロパノール（２０体積）中で結晶化させた。真空中、５０℃でのろ過および乾燥により、オフホワイト色の固形物として［^１９Ｆ］−１（１４．４８ｇ、５８％）を得た。

前駆体１（Ｐ−１）の調製

窒素下で１，４−ジオキサン（６００ｍＬ）中のＩ−２（３０ｇ、６６．４９ｍｍｏｌ）、２−アミノピリジン−３−カルボキサミド（１３．６８ｇ、９９．７４ｍｍｏｌ）およびＫ_３ＰＯ_４（４２．３４ｇ、１９９．４７ｍｍｏｌ）の脱酸素化撹拌懸濁液にヨウ化銅（Ｉ）（５．０７ｇ、２６．６０ｍｍｏｌ）を添加した。次いで、（＋／−）−トランス−１，２−シクロヘキサンジアミン（３．２０ｍＬ、２６．６０ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を１００℃で１８時間撹拌した。混合物をろ過し、ＤＣＭですすいだ。溶液をＤＣＭでさらに希釈し、希釈ＮＨ_３溶液で洗浄した。有機相を乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、ろ過し、真空下で蒸発させた。粗製生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ；ＥｔＯＡｃ／ヘプタン５０／５０〜８０／２０）によって精製した。所望の分画を回収し、真空下で蒸発させて生成物を得て、これをフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ；ＭｅＯＨ／ＤＣＭ中７ＮＮＨ_３、０／１００〜１．５／９８．５）によってさらに精製した。所望の分画を回収し、真空下で蒸発させ、その結果、生成物を得て、これをＤＩＰＥ中で沈殿させた。沈殿物をろ過し、真空下で５０℃において乾燥させて、白色固形物としてＰ−１（２０．５１ｇ、６７％）を得た。

前駆体２（Ｐ−２）の調製

Ｐ−１（１５．００ｇ、３２．５８ｍｍｏｌ）およびＤＣＭ（４００ｍＬ）の混合物にＴＥＡ（７．２５ｍＬ、５２．１３ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を０℃に冷却し、次いでＤＣＭ（５０ｍＬ）中のメタンスルホン酸無水物（８．５１ｇ、４８．８７ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を０℃で３時間撹拌した。次いで、水（３００ｍＬ）中のメタンスルホン酸（２．５４ｍＬ）を添加し、３０分間撹拌した。次いで、ＤＣＭを真空下で部分的に蒸発させた。次に、ＮａＨＣＯ_３（７．５ｇ）を添加し、混合物をＥｔＯＡｃで抽出した。水層を除去し、有機層をＮａＨＣＯ_３飽和溶液で洗浄し、次に乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、ろ過した。次いで、メタンスルホン酸（２．５４ｍＬ、３９．１０ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を蒸発乾固させた。残渣をジエチルエーテルで処理し、沈殿生成物をろ過した。得られた固形物をＣＨ_３ＣＮ（１５体積）中で結晶化させた。化合物をろ過し、真空中で一晩、５０℃で乾燥させ、その結果、淡黄色の固形物としてＰ−２（１２．９ｇ、６２％）を得た。

前駆体３（Ｐ−３）の調製

窒素下でＤＣＭ（２．４ｍＬ）中のＰ−１（６１．８ｍｇ、０．１３ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に三臭化リン（ＤＣＭ中１Ｍ、０．４０ｍＬ、０．４０ｍｍｏｌ）を添加した。混合物をｒ．ｔ．で１時間撹拌した。次いで、マイクロ波放射下で混合物を８０℃で５分間撹拌した。続いて、さらなる三臭化リン（ＤＣＭ中１Ｍ、０．０８ｍＬ、０．０８ｍｍｏｌ）を添加し、マイクロ波放射下で混合物を８０℃で５分間撹拌した。次に、混合物をＤＣＭで希釈し、０℃に冷却し、飽和ＮａＨＣＯ_３で処理した。有機層を分離し、乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、ろ過し、ヘプタンで希釈し、真空下で蒸発させて、白色固形物としてＰ−３（３９ｍｇ、５６％）を得た。

化合物［^１８Ｆ］−１の調製
全般
Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ（ＳａｉｎｔＬｏｕｉｓ，ＵＳＡ）から化学物質を入手し、さらなる精製を行わずに使用した。ＩＢＡＣｙｃｌｏｎｅ１８／９サイクロトロン（Ｌｏｕｖａｉｎ−ｌａ−Ｎｅｕｖｅ，Ｂｅｌｇｉｕｍ）によって［^１８Ｆ］Ｆ⁻を作製した。１ｍＬ・ｍｉｎ^−１の流速および２５４ｎｍの波長において、水中のＥｔＯＨ／０．０１Ｍリン酸緩衝液ｐＨ７．４（３９／６１ｖ／ｖ）を使用して、ＸｂｒｉｄｇｅＣ１８カラム（４．６×２５０ｍｍ、５μｍ；Ｗａｔｅｒｓ，ＭｉｌｆｏｒｄＵＳＡ）上で分取ＨＰＬＣを行った（方法Ａ）。

それらの非放射活性類似体と同時注入した後、上記と同じ分析ＨＰＬＣ法を使用して放射性トレーサーの識別を確認した。Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ（Ａｍｓｔｅｒｄａｍ，ＴｈｅＮｅｔｈｅｒｌａｎｄｓ）からＭｉｌｌｅｘＧＶフィルターを入手した。Ｗｉｚａｒｄ１４８０自動化ガンマカウンター（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ，Ｗａｌｔｈａｍ，ＵＳＡ）を使用して放射活性をカウントした。

化合物１（［^１８Ｆ］−１）の放射合成
アルコール前駆体（Ｐ−１）を介した［^１８Ｆ］−１の合成
この手順に従う［^１８Ｆ］−１の合成に対して、次のプロトコールに従う放射合成の直前に対応するアルコール前駆体をメシル化した：約７．５ｍｇＰ−１（１ｅｑ）をＤＣＭ（２ｍＬ）中で溶解させ、次いでトリメチルアミン（２．５μＬ、１．１ｅｑ）を添加し、続いてメタンスルホン酸無水物（３．５ｍｇ、１．１ｅｑ）の添加を行い、混合物をｒ．ｔ．で６０分間温置した。次いで、ｒ．ｍ．を水（２×）で洗浄し、ＭｇＳＯ_４上で乾燥させ、ろ過し、真空中で３０℃において蒸発乾固させた。その後、ＣＨ_３ＣＮ（３×２ｍＬ）を使用して、また真空中３０℃で生成物を共沸により乾燥させた。ＣＨ_３ＣＮの最終部分の蒸発後、メシル化前駆体は即時使用状態であった。ＴＬＣ（シリカプレートを９５％ＤＣＭおよび５％ＭｅＯＨで溶出）を使用して、対応する前駆体の純度を調べた。

ＱＭＡ（Ｗａｔｅｒｓ，ＭｉｌｆｏｒｄＵＳＡ）カートリッジ上でプロトン照射した標的含量（９８％^１８Ｏ−Ｈ_２Ｏ）をパージすることにより、［^１８Ｆ］Ｆ⁻を回収した。次に、Ｋｒｙｐｔｏｆｉｘ２２２（２６ｍｇ）およびＫ_２ＣＯ_３（２．５ｍｇ）を含有するＣＨ_３ＣＮ／水（７００μＬの９５／５ｖ／ｖ）を使用して反応バイアルにＱＭＡカートリッジを溶出した。溶液を穏やかなヘリウム気流下で１１０℃において６分間乾燥させ、続いてＣＨ_３ＣＮ（１ｍＬ）の添加によって２回行い、それぞれ１１０℃で５分間、ヘリウム下で乾燥させた。標準的な条件の場合、ドライＤＭＳＯ（０．５ｍＬ）中のメシル前駆体（２ｍｇ、３．７μｍｏｌ）を添加し、１２０℃で１０分間反応させた。ｒ．ｍ．を希釈し、次にＨＰＬＣ法を使用して［^１８Ｆ］−１を精製した。次いで、回収した分画を滅菌ｍｉｌｌｅｘＧＶフィルターに通過させ、１０％ＥｔＯＨの濃度まで生理食塩水でさらに希釈した。

メシル化塩（Ｐ−２．ＣＨ_３ＳＯ_２ＯＨ）またはブロモ前駆体（Ｐ−３）を介した［^１８Ｆ］−１の合成
ＱＭＡ（Ｗａｔｅｒｓ，ＭｉｌｆｏｒｄＵＳＡ）カートリッジ上で照射標識内容物をパージすることによって［^１８Ｆ］Ｆ⁻を回収した。次に、Ｋｒｙｐｔｏｆｉｘ２２２（２６ｍｇ）およびＫ_２ＣＯ_３（２．５ｍｇ）を含有するＣＨ_３ＣＮ／水（７００μＬの９５／５ｖ／ｖ）を使用して、反応バイアルにＱＭＡカートリッジを溶出した。１１０℃で６分間、穏やかなヘリウム気流下で溶液を乾燥させ、続いてＣＨ_３ＣＮ（１ｍＬ）の添加を２回行い、１１０℃においてそれぞれ５分間にわたりヘリウム下で乾燥させた。標準的な条件の場合、乾燥ＤＭＳＯ（０．５ｍＬ）中のメシルまたはブロモ前駆体（２ｍｇ）を添加し、１２０℃で１０分間反応させた。ｒ．ｍ．を希釈し、続いて、流速１ｍＬ・ｍｉｎ−１および波長２５４ｎｍで水中のＥｔＯＨ／０．０１Ｍリン酸緩衝液ｐＨ７．４（３９／６１ｖ／ｖ）を使用して、ＸｂｒｉｄｇｅＣ１８カラム（４．６×２５０ｍｍ、５μｍ；Ｗａｔｅｒｓ，ＭｉｌｆｏｒｄＵＳＡ）上で［^１８Ｆ］−１を精製した。次いで、［^１８Ｆ］−１を回収し（約２６分の保持時間）、次に回収した分画を滅菌ｍｉｌｌｅｘＧＶフィルターに通し、生理食塩水でさらに希釈して、生成物が１０％ＥｔＯＨを含有するようにした。放射化学物質の収率は、メシル前駆体から３５〜６０％の［^１８Ｆ］−１（Ｎ＝４）（減衰補正）およびブロモ前駆体から約３５％（Ｎ＝２）（減衰補正）であった。

分析パート
融点
値はピーク値であり、この分析方法に一般的に付随する実験的な不確実性を伴い得られる。

ＤＳＣ８２３ｅ（Ａ）：化合物の多くに対して、ＤＳＣ８２３ｅ（Ｍｅｔｔｌｅｒ−Ｔｏｌｅｄｏ）装置を用いて融点を決定した。１０℃／分の温度勾配を用いて融点を測定した。最高温度は３００℃であった。値はピーク値である。

ＭｅｔｔｌｅｒＴｏｌｅｄｏＭｅｔｔｌｅｒＦＰ８１ＨＴ／ＦＰ９０装置（Ｂ）：化合物の多くに対して、ＭｅｔｔｌｅｒＦＰ８１ＨＴ／ＦＰ９０装置上でオープンキャピラリーチューブ（ｏｐｅｎｃａｐｉｌｌａｒｙｔｕｂｅ）において融点を決定した。１、３、５または１０℃／分の温度勾配で融点を測定した。最高温度は３００℃であった。デジタルディスプレイから融点を読み取った。

ＬＣＭＳ
全般的手順
個々の方法で指定されるように、ＬＣポンプ、ダイオード−アレイ（ＤＡＤ）またはＵＶ検出装置およびカラムを使用して高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）測定を行った。必要に応じて、さらなる検出装置を含めた（以下の方法の表を参照されたい）。

大気圧イオン源とともに構成された質量分析計（ＭＳ）にカラムからの流れを運んだ。これは、化合物の名目のモノアイソトピック分子量（ＭＷ）および／または正確な質量モノアイソトピック分子量の同定を可能にするイオンを得るために調整パラメータ（例えば、スキャン範囲、滞在時間など）を設定するための熟練者の知識の範囲内である。適切なソフトウェアを用いてデータ捕捉を行った。

化合物は、その実験的な保持時間（Ｒ_ｔ）およびイオンにより説明される。データの表で別に指定されない場合、報告される分子イオンは、［Ｍ＋Ｈ］^＋（プロトン化分子）および／または［Ｍ−Ｈ］⁻（脱プロトン化分子）に対応する。化合物が直接イオン化可能でなかった場合、付加物のタイプが指定される（すなわち［Ｍ＋ＮＨ_４］^＋、［Ｍ＋ＨＣＯＯ］⁻、［Ｍ＋ＣＨ_３ＣＯＯ］⁻など）。複数の同位体パターンがある分子（Ｂｒ、Ｃｌなど）の場合、報告される値は、最低の同位体質量に対して得られるものである。全ての結果は、使用される方法に一般的に付随する実験的な不確定度とともに得られた。

本明細書中では以後、「ＳＱＤ」はシングル四重極検出器、「ＭＳＤ」は質量選択検出器、「ＱＴＯＦ」は四重極−飛行時間、「ｒｔ」は室温、「ＢＥＨ」は架橋エチルシロキサン／シリカハイブリッド、「ＣＳＨ」は荷電表面ハイブリッド、「ＵＰＬＣ」は超高速液体クロマトグラフィー、「ＤＡＤ」はダイオードアレイ検出器である。

旋光度
ナトリウムランプを用いてＰｅｒｋｉｎ−Ｅｌｍｅｒ３４１旋光計上で旋光度を測定し、次のとおり報告した：［α］°（λ，ｃｇ／１００ｍＬ、溶媒、Ｔ℃）。
［α］_λ ^Ｔ＝（１００α）／（ｌ×ｃ）：式中、ｌはｄｍの経路長であり、ｃは、温度Ｔ（℃）および波長λ（ｎｍ）での試料に対するｇ／１００ｍＬの濃度である。使用した光の波長が５８９ｎｍ（ナトリウムＤライン）である場合、シンボルＤを代わりに使用し得る。旋光度のサイン（＋または−）が常に与えられるはずである。この等式を使用する場合、濃度および溶媒は、通常、旋光後に括弧で提供される。旋光は、度を使用して報告され、濃度の単位は与えられない（これはｇ／１００ｍＬであると想定される）。

ＮＭＲ
多くの化合物に対して、溶媒としてクロロホルム−ｄ（重水素化クロロホルム、ＣＤＣｌ_３）またはＤＭＳＯ−ｄ_６（重水素化ＤＭＳＯ、ジメチル−ｄ６スルホキシド）を使用して、４００ＭＨｚで作動するＢｒｕｋｅｒＤＰＸ−４００分光計または５００ＭＨｚで作動するＢｒｕｋｅｒＡｖａｎｃｅＩ分光計上で^１ＨＮＭＲスペクトルを記録した。テトラメチルシラン（ＴＭＳ）に対するパーツパーミリオン（ｐｐｍ）で化学シフト（δ）を報告し、これを内部標準として使用した。

結合アッセイ
［^３Ｈ］−化合物Ａ（ＮＡＭ化合物、他のｍＧｌｕＲと比較してｍＧｌｕ２／３に対して選択的（３よりも２に対して約２０倍選択的））結合の場合、ヒトｍＧｌｕ２およびｍＧｌｕ３ＨＥＫ２９３細胞からの膜およびまたラット皮質膜も使用した。解凍後、ＵｌｔｒａＴｕｒｒａｘホモジナイザーを使用して膜をホモジナイズ処理し、５０ｍＭＴｒｉｓ−ＨＣｌ（ｐＨ７．４）、１０ｍＭＭｇＣｌ_２、２ｍＭＣａＣｌ_２を含有する氷冷結合緩衝液中で懸濁した。２５ｎＭを使用したヒトｍＧｌｕ３膜を除き、６ｎＭの放射性リガンドを使用して置換研究を行った。ヒトｍＧｌｕ２、ヒトｍＧｌｕ３またはラット皮質のそれぞれ７．５ｍｇ、７５〜１００ｍｇまたは７５μｇ膜タンパク質を含有する０．５ｍＬの体積でアッセイ混合物をＲＴにおいて６０分間温置した。１０ｍＭ化合物Ｂ（ｈｍＧｌｕ２に対してＩＣ_５０〜１０ｎＭおよびｈｍＧｌｕ３に対してＩＣ_５０〜２００ｎＭであるＮＡＭ）の存在下で非特異的な結合を推定した。０．１％ＰＥＩおよびＢｒａｎｄｅｌｌｈａｒｖｅｓｔｅｒ９６に予め浸漬したＷｈａｔｍａｎＧＦ／Ｃフィルターシートを使用して、ろ過を行った。フィルターシートからのフィルターをバイアルに押し込んだ。シンチレーション液の添加後、ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒからの液体シンチレーション分析器においてフィルター上の放射活性をカウントした。

試験化合物の非存在下で測定した全結合のパーセンテージとして放射性リガンド競合結合データを計算した。Ｌｅｘｉｓソフトウェアを使用して、試験化合物のログ濃度に対する全結合のパーセンテージをプロットする阻害曲線を作成した。非線形回帰分析を使用してシグモイド阻害曲線を分析した。

体内分布試験 − Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラット
１．３５ｍｍ（半値全幅）の体軸横断解像度のルテチウムオキシオルトシリケート検出器に基づく断層撮影（ｍｉｃｒｏＰＥＴＦＯＣＵＳ−２２０；ＳｉｅｍｅｎｓＭｅｄｉｃａｌＳｏｌｕｔｉｏｎｓＵＳＡ，Ｋｎｏｘｖｉｌｌｅ，ＴＮ）において動物ＰＥＴイメージングを行った。画素幅が０．４７５ｍｍであり、スライス厚が０．７９６ｍｍである１２８×１２８×９５マトリクスでデータを捕捉した。ＰＥＴイメージング中、ガス麻酔下（１ｌ／分の流速で酸素中２．５％イソフルラン）でラットを維持し、温熱パッドを使用して、それらの体温を３６．５〜３７℃で維持した。Ｐｍｏｄソフトウェア、バージョン３．２（Ｐｍｏｄ，ＺｕｒｉｃｈＳｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）を使用してＰＥＴデータを分析した。

処置まで、１ケージあたり４〜６匹の群で、Ｈａｒｌａｎ（Ｎｅｔｈｅｒｌａｎｄｓ）から得たＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラットを収容した。２１℃の一定温度および１２時間の明／暗サイクルでこれらを維持し、照明は午前８時に切り替えた。動物には餌（ＴｅｋｌａｄＧｌｏｂａｌ１６％タンパク質げっ歯類試料、Ｈａｒｌａｎ，Ｍａｄｉｓｏｎ，ＷＩ，ＵＳＡ）および水を自由に摂取させた。動物実験は、全て動物実験におけるベルギーの法律に則って地方の動物倫理委員会による承認後に行った。

全般的方法
エクスビボ体内分布
［^１８Ｆ］−１の体内分布は、ＳｐｒａｇｕｅＤａｗｌｅｙラットでの注射から２、１０、３０および６０分後に決定した（ｎ＝３／時点。尾静脈を介して０．７〜１．１ＭＢｑでラットに静脈内注射し、上記の時点でイソフルラン麻酔下において安楽死させた。全組織を解体し、重量測定し、ガンマカウンターで放射活性をカウントした。

［^１８Ｆ］−１の体内分布から、肝臓、腎臓、膵臓および心臓において初期取り込みが高く、続くウォッシュアウトが速いことが示された。血液での取り込みは低く、ウォッシュアウトが遅かった。骨での取り込みは経時的に僅かに増加し、一方で筋肉での取り込みは少なく、１０分後にピークとなり、続いてゆっくりとウォッシュアウトされた。

［^１８Ｆ］−１の脳での取り込みは高く、大脳皮質での取り込みが最大であり、取り込みが最小であったのは脳橋であった。脳橋を除く全脳領域は、１０分前後で最大取り込みを示し、続いて速いウォッシュアウトが起こったが、一方で脳橋は２分でピークとなり、続いて速いウォッシュアウトが起こった。

ＰＥＴスキャン
［^１８Ｆ］−１μＰＥＴ試験から、全脳領域に対して、特に前頭皮質および海馬で高い取り込みが示され、一方で脳橋での取り込みはより低かった。ベースラインスキャン中の前頭皮質でのピーク取り込みはトレーサー注射後１５分前後で観察された。前処理後、様々な脳領域での取り込みが低下し、脳橋と同レベルとなったが、脳橋での取り込みも低下した。図２は、ＳＤラットにおいて、１０ｍｇ／ｋｇの化合物Ａ（ＮＡＭ化合物、他のｍＧｌｕＲと比較してｍＧｌｕ２／３に対して選択的（３よりも２に対して約２０倍選択的））前処理ありおよびなしでの［^１８Ｆ］−１の取り込みに対する時間活性曲線を示す。

考察
エクスビボ体内分布の末梢における取り込みは、肝臓において最大の取り込みを示し、腎臓でも高い取り込みがあり、尿中排泄が続いた。骨での取り込みは開始時に低かったが、経時的に僅かな上昇があり、これは幾分かの脱フッ素化を暗示した。

エクスビボ体内分布から、［^１８Ｆ］に対する脳での高い取り込みと、様々な脳領域からの速いウォッシュアウトとが示された。脳橋は、ｍＧｌｕＲ２またはｍＧｌｕＲ３発現が欠如している参照領域であると考えられるが、一方で全ての他の領域においてｍＧｌｕＲ２およびｍＧｌｕＲ３の両方が存在し、大脳皮質において発現レベルが最大であった（ＦａｒｉｎｈａＡ，ｅｔａｌ．ＢＪＰｈａｒｍａｃｏｌ，２０１５，１７２，２３８３−２３９６）。［^１８Ｆ］−１から、皮質での取り込みが最大であり、他の領域と比較して、脳橋からのより速いウォッシュアウトと組み合わせて脳橋での取り込みが低いことが示され、脳での取り込みがｍＧｌｕＲ２／３に対する報告された分布パターンを反映するため、良好なｍＧｌｕＲ２／３特異性が示唆された。

ＰＥＴスキャンにおいて、［^１８Ｆ］−１の取り込みは前頭皮質および線条体で最大であり、それに直接続いて海馬で高く、ピーク取り込みは注射後１５分前後であった。脳橋は、化合物Ａでの前処理後、他の脳領域と同じ範囲で非常に低い取り込みを示し、これは、良好なｍＧｌｕＲ２／３特異性を示唆する。前頭皮質および線条体の時間活性曲線で完全な遮断が観察され、これは脳橋の場合と一致する。

μＰＥＴイメージング試験 − アカゲザル
筋肉内（ｉ．ｍ．）注射を介してケタミン（Ｋｅｔａｌａｒ（登録商標））およびキシラジン（Ｒｏｍｐｕｎ（登録商標））で鎮静させたアカゲザル（８歳雌マカカ・ムラッタ（Ｍａｃａｃａｍｕｌａｔｔａ）、５．８ｋｇ）においてＦｏｃｕｓ２２０ μＰＥＴスキャナーを用いて、［^１８Ｆ］−１によるダイナミック１２０分μＰＥＴスキャンを得た。スキャン中、ｉ．ｖ．注射を介してケタミン／キシラジンのさらなる用量をこのサルに繰り返し与えた。実験中にわたり、血中のＯ_２飽和度、呼吸頻度および心拍頻度を監視した。動物の頭部をμＰＥＴスキャナーの視野の中央に置いた。リストモードでスキャンを捕捉し、２７個の時間枠でフーリエリビニングを行った（４×１５ｓ、４×６０ｓ、５×１８０ｓ、８×３００ｓ、６×６００ｓ）。３Ｄ最大事後確率（３Ｄ−ＭＡＰ）反復再構成を使用してデータを再構成した。ＰＭＯＤソフトウェアとともにＶＯＩを使用して脳全体のＴＡＣを作成した。脳における放射活性濃度は、トレーサー注射後の時間の関数として、ＳＵＶとして表す。さらに、参照領域として脳橋を用いて、簡易参照組織モデル（ＳＲＴＭ）に基づいて動力学モデリングを使用して、非置換性結合能（ＢＰｎｄ）を決定した（０〜６０分）。右後肢の小伏在静脈を介した１８５ＭＢｑの［^１８Ｆ］−１のｉ．ｖ．注射直後にスキャンを開始した。前処理試験の場合、非放射性標準参照化合物Ａを、２０％（２−ヒドロキシプロピル）−β−シクロデキストリンおよび２当量のＨＣｌを含有するビヒクル中で溶解させ、注射前に０．２２−μｍ膜フィルター（Ｍｉｌｌｅｘ−ＧＶ，Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）に通してろ過した。１８５ＭＢｑの［^１８Ｆ］−１の注射の３０分前に２．５ｍｇ／ｋｇの非放射性標準参照化合物Ａのｉ．ｖ．注射によって前処理を行った。μＰＥＴイメージを非処理サルで捕捉したベースラインスキャンと比較した。左後肢の小伏在静脈でのカテーテルを介した１０、３０および６０分ｐ．ｉ．でベースラインおよび前処理のスキャンの両方中に血液試料を回収し、ラットの場合と同じ手順に従って放射性代謝産物について血漿を分析した。

結果 − アカゲザルでのμＰＥＴイメージング試験
［^１８Ｆ］−１の１２０分ベースラインおよび前処理スキャンの結果を図３で示す。［^１８Ｆ］−１によるベースラインスキャンのＴＡＣから、前頭皮質および小脳での高いＳＵＶとともに、急速な脳での取り込み（脳全体における約３のＳＵＶ、ピーク取り込みまでの時間：３．５分）が示される。低いおよび同等のＳＵＶが、ベースラインおよび前処理スキャンの両方で脳橋に対して記録され、一方で他の脳領域については化合物Ａでの前処理後に取り込みが減少する。脳全体、前頭葉、小脳および海馬の前処理とベースラインスキャンとの比率からこの遮断効果が確認された（図４）。さらに、前頭および前頭前野皮質の両方で高いＢＰｎｄが見出され、一方で視床ではＢＰｎｄが低かった（図５）。２．５ｍｇ／ｋｇ化合物Ａでの前処理後、全ての脳領域においてＢＰｎｄがゼロまたはゼロ付近まで低下した。何れのμＰＥＴスキャンでも［^１８Ｆ］フッ素または潜在的な放射性代謝産物の存在に関連する骨での取り込みは見られなかった。

本発明は次の実施態様を含む。
［１］
ｍＧｌｕ２および３受容体をイメージングまたは定量することにおける使用のための、式（Ｉ）

（式中、少なくとも１つの原子は、放射活性である）に従う化合物またはその薬学的に許容可能な塩もしくは溶媒和物。
［２］
式

を有する、上記［１］に記載の使用のための化合物またはその薬学的に許容可能な塩もしくは溶媒和物。
［３］
式

の放射性標識化合物またはその薬学的に許容可能な塩もしくは溶媒和物。
［４］
上記［１］〜［３］のいずれかに記載の式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩もしくは溶媒和物と、薬学的に許容可能な担体または希釈剤とを含む医薬組成物。
［５］
滅菌溶液である、上記［４］に記載の医薬組成物。
［６］
前記ｍＧｌｕ２および３受容体をイメージングまたは定量することにおける使用のための、上記［４］または［５］に記載の医薬組成物。
［７］
前記イメージングは、他の非放射性標識化合物によるｍＧｌｕ２および３受容体部位占有を決定することを含む、上記［６］に記載の使用のための医薬組成物。
［８］
組織、細胞または哺乳動物をイメージングするための造影剤としての使用のための、上記［１］〜［３］のいずれかに記載の化合物または上記［４］もしくは［５］に記載の医薬組成物。
［９］
組織、細胞または哺乳動物をイメージングする方法であって、上記［１］〜［３］のいずれかに記載の式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩もしくは溶媒和物の検出可能な量を組織、細胞または哺乳動物と接触させるかまたはそれに提供することと、前記ｍＧｌｕ２および３受容体と結合する前記標識化合物を検出することとを含む、方法。
［１０］
イメージング技術は、ポジトロン断層撮影である、上記［９］に記載の方法。
［１１］
式

を有する化合物またはその薬学的に許容可能な塩もしくは溶媒和物。
［１２］
式

を有する化合物またはその薬学的に許容可能な塩もしくは溶媒和物。
［１３］
式

を有する、上記［１２］に記載の化合物。
［１４］
式

を有する化合物またはその薬学的に許容可能な塩もしくは溶媒和物。
［１５］
上記［３］に記載の化合物の合成のためのプロセスであって、
（ａ）（ａ−１）塩基および不活性溶媒の存在下で式（Ｐ−１）の化合物をメタンスルホン酸無水物と反応させ、かつ（ａ−２）不活性溶媒中、塩基の存在下において、ステップ（ａ−１）で得られた前記化合物を［ ^１８Ｆ］Ｆ ⁻ と反応させるステップ

または
（ｂ）不活性溶媒中において塩基の存在下で式（Ｐ−２）の化合物を［ ^１８Ｆ］Ｆ ⁻ と反応させるステップ

または
（ｃ）不活性溶媒中において塩基の存在下で式（Ｐ−３）の化合物を［ ^１８Ｆ］Ｆ ⁻ と反応させるステップ

を含む、プロセス。

Claims

ｍＧｌｕ２および３受容体をイメージングまたは定量することにおける使用のための、式

を有する化合物またはその薬学的に許容可能な塩もしくは溶媒和物。
式

の放射性標識化合物またはその薬学的に許容可能な塩もしくは溶媒和物。
請求項１または２に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩もしくは溶媒和物と、薬学的に許容可能な担体または希釈剤とを含む医薬組成物。
滅菌溶液である、請求項３に記載の医薬組成物。
前記ｍＧｌｕ２および３受容体をイメージングまたは定量することにおける使用のための、請求項３または４に記載の医薬組成物。
前記イメージングは、他の非放射性標識化合物によるｍＧｌｕ２および３受容体部位占有を決定することを含む、請求項５に記載の使用のための医薬組成物。
組織、細胞または哺乳動物をイメージングするための造影剤としての使用のための、請求項１または２に記載の化合物。
組織、細胞または哺乳動物をイメージングするための造影剤としての使用のための、請求項３もしくは４に記載の医薬組成物。
組織、細胞または哺乳動物をイメージングする方法であって、請求項１または２に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩もしくは溶媒和物の検出可能な量を組織、細胞または哺乳動物と接触させるかまたはそれに提供することと、前記ｍＧｌｕ２および３受容体と結合する前記標識化合物を検出することとを含む、方法。
イメージング技術は、ポジトロン断層撮影である、請求項９に記載の方法。
式

を有する化合物またはその薬学的に許容可能な塩もしくは溶媒和物。
式

を有する化合物またはその薬学的に許容可能な塩もしくは溶媒和物。
式

を有する、請求項１２に記載の化合物。
式

を有する化合物またはその薬学的に許容可能な塩もしくは溶媒和物。
請求項２に記載の化合物の合成のためのプロセスであって、
（ａ）（ａ−１）塩基および不活性溶媒の存在下で式（Ｐ−１）の化合物をメタンスルホン酸無水物と反応させ、かつ（ａ−２）不活性溶媒中、塩基の存在下において、ステップ（ａ−１）で得られた前記化合物を［^１８Ｆ］Ｆ⁻と反応させるステップ

または
（ｂ）不活性溶媒中において塩基の存在下で式（Ｐ−２）の化合物を［^１８Ｆ］Ｆ⁻と反応させるステップ

または
（ｃ）不活性溶媒中において塩基の存在下で式（Ｐ−３）の化合物を［^１８Ｆ］Ｆ⁻と反応させるステップ

を含む、プロセス。