JP6527132B2 - 肝臓がんの診断及び治療のための組成物及び方法 - Google Patents
肝臓がんの診断及び治療のための組成物及び方法 Download PDFInfo
- Publication number
- JP6527132B2 JP6527132B2 JP2016502189A JP2016502189A JP6527132B2 JP 6527132 B2 JP6527132 B2 JP 6527132B2 JP 2016502189 A JP2016502189 A JP 2016502189A JP 2016502189 A JP2016502189 A JP 2016502189A JP 6527132 B2 JP6527132 B2 JP 6527132B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- antibody
- amino acid
- seq
- acid sequence
- notch2
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
- C07K16/2896—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against molecules with a "CD"-designation, not provided for elsewhere
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
- A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
- A61K39/3955—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against proteinaceous materials, e.g. enzymes, hormones, lymphokines
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
- A61K47/6835—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site
- A61K47/6849—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site the antibody targeting a receptor, a cell surface antigen or a cell surface determinant
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
- A61K47/6835—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site
- A61K47/6851—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site the antibody targeting a determinant of a tumour cell
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
- C07K16/30—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants from tumour cells
- C07K16/303—Liver or Pancreas
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
- A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
- A61K39/39558—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against tumor tissues, cells, antigens
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/22—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against growth factors ; against growth regulators
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
- C07K16/30—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants from tumour cells
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
- C07K2317/21—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin from primates, e.g. man
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
- C07K2317/24—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin containing regions, domains or residues from different species, e.g. chimeric, humanized or veneered
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
- C07K2317/33—Crossreactivity, e.g. for species or epitope, or lack of said crossreactivity
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/55—Fab or Fab'
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
- C07K2317/565—Complementarity determining region [CDR]
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
- C07K2317/567—Framework region [FR]
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
- C07K2317/73—Inducing cell death, e.g. apoptosis, necrosis or inhibition of cell proliferation
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
- C07K2317/75—Agonist effect on antigen
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
- C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding
Description
本出願は、2013年3月15日に出願された米国仮出願第61/789,475号の利益を主張し、その開示内容は、参照によりその全体が記載されるかのように本明細書に組み込まれる。
本出願は、ASCIIフォーマットで電子的に提出された配列表を含み、その全体が本明細書中で参照することにより援用される。2014年3月13日に作成された前記ASCIIコピーはP5570R1−WO_SL.txtと命名され、大きさは115,666バイトである。
本発明は、分子生物学の分野に関する。より具体的には、本発明は、がんなどの病的な状態の治療の方法に関する。
肝臓の増殖性障害を有するか又は危険性のある患者を治療するためのNotch2シグナル伝達阻害剤の使用が提供される。
(a)配列番号1のアミノ酸配列を含むHVR−H1;
(b)配列番号3のアミノ酸配列を含むHVR−H2;
(c)配列番号4のアミノ酸配列を含むHVR−H3;
(d)配列番号9のコンセンサス配列に一致するアミノ酸配列を含むHVR−L1;
(e)配列番号14のコンセンサス配列に一致するアミノ酸配列を含むHVR−L2;及び
(f)配列番号19のコンセンサス配列に一致するアミノ酸配列を含むHVR−L3を含む。
I.定義
本明細書における目的のための「アクセプターヒトフレームワーク」とは、下記に定義されるように、ヒト免疫グロブリンフレームワーク又はヒトコンセンサスフレームワークから得られる軽鎖可変ドメイン(VL)フレームワーク又は重鎖可変ドメイン(VH)フレームワークのアミノ酸配列を含有するフレームワークである。ヒト免疫グロブリンのフレームワーク又はヒトコンセンサスフレームワーク「に由来する」アクセプターヒトフレームワークは、その同一のアミノ酸配列を含んでもよく、又はそれはアミノ酸配列の変化を含み得る。幾つかの実施態様において、アミノ酸変化の数は、10以下、9以下、8以下、7以下、6以下、5以下、4以下、3以下、又は2以下である。幾つかの実施態様において、VLアクセプターヒトフレームワークは、Vはヒト免疫グロブリンのフレームワーク配列又はヒトコンセンサスフレームワーク配列に、配列が同一である。
(a)アミノ酸残基26−32(L1)、50−52(L2)、91−96(L3)、26−32(H1)、53−55(H2)、及び96−101(H3)で生じる超可変ループ(Chothia and Lesk, J. Mol. Biol. 196:901-917 (1987));
(b)アミノ酸残基24−34(L1)、50−56(L2)、89−97(L3)、31−35b(H1)、50−65(H2)、及び95−102(H3)で生じるCDR(Kabat et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5th Ed. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD (1991));
(c)アミノ酸残基27c−36(L1)、46−55(L2)、89−96(L3)、30−35b(H1)、47−58(H2)、及び93−101(H3)で生じる抗原接触(MacCallum et al.J. Mol.Biol.262:732-745 (1996));及び
(d)HVRアミノ酸残基46−56(L2)、47−56(L2)、48−56(L2)、49−56(L2)、26−35(H1)、26−35b(H1)、49−65(H2)、93−102(H3)、及び94−102(H3)を含む、(a)、(b)、及び/又は(c)の組合せを含む。
分率X/Yの100倍。
ここで、Xは配列アラインメントプログラムALIGN−2により、AとBのそのプログラムのアラインメントにおいて同一と一致したスコアのアミノ酸残基の数であり、YはBの全アミノ酸残基数である。アミノ酸配列Aの長さがアミノ酸配列Bの長さと異なる場合、AのBに対する%アミノ酸配列同一性は、BのAに対する%アミノ酸配列同一性とは異なることは理解されるであろう。特に断らない限り、本明細書で使用される全ての%アミノ酸配列同一性値が、ALIGN−2コンピュータプログラムを使用し、直前の段落で説明したように得られる。
一態様において、本発明は、肝臓がんの治療のための、Notch経路の成分の阻害に一部は基づく。
(a)配列番号1のアミノ酸配列を含むHVR−H1;
(b)配列番号3のアミノ酸配列を含むHVR−H2;
(c)配列番号4のアミノ酸配列を含むHVR−H3;
(d)配列番号9のコンセンサス配列に一致するアミノ酸配列を含むHVR−L1;
(e)配列番号14のコンセンサス配列に一致するアミノ酸配列を含むHVR−L2;及び
(f)配列番号19のコンセンサス配列に一致するアミノ酸配列を含むHVR−L3から選択される少なくとも1、2、3、4、5、又は6つHVRを含む。
(a)配列番号1のアミノ酸配列を含むHVR−H1;
(b)配列番号3のアミノ酸配列を含むHVR−H2;
(c)配列番号4のアミノ酸配列を含むHVR−H3;
(d)配列番号5のアミノ酸配列を含むHVR−L1;
(e)配列番号10のアミノ酸配列を含むHVR−L2;及び
(f)配列番号15のアミノ酸配列を含むHVR−L3
を含む。
(a)配列番号1のアミノ酸配列を含むHVR−H1;
(b)配列番号3のアミノ酸配列を含むHVR−H2;
(c)配列番号4のアミノ酸配列を含むHVR−H3;
(d)配列番号6のアミノ酸配列を含むHVR−L1;
(e)配列番号11のアミノ酸配列を含むHVR−L2;及び
(f)配列番号16のアミノ酸配列を含むHVR−L3
を含む。
(a)配列番号1のアミノ酸配列を含むHVR−H1;
(b)配列番号3のアミノ酸配列を含むHVR−H2;
(c)配列番号4のアミノ酸配列を含むHVR−H3;
(d)配列番号7のアミノ酸配列を含むHVR−L1;
(e)配列番号12のアミノ酸配列を含むHVR−L2;及び
(f)配列番号17のアミノ酸配列を含むHVR−L3
を含む。
(a)配列番号1のアミノ酸配列を含むHVR−H1;
(b)配列番号3のアミノ酸配列を含むHVR−H2;
(c)配列番号4のアミノ酸配列を含むHVR−H3;
(d)配列番号8のアミノ酸配列を含むHVR−L1;
(e)配列番号13のアミノ酸配列を含むHVR−L2;及び
(f)配列番号18のアミノ酸配列を含むHVR−L3
を含む。
− HVR−L1(配列番号5)において:S28N;I29N又はV;S30R又はK;S31R;Y32F
− HVR−L2(配列番号10)において:G50R;S53I又はT;A55E
− HVR−L3(配列番号15)において:S93I又はR;L96S又はH。
所定の実施態様において、本明細書において与えられる抗体は、解離定数(Kd)が、≦1μM、≦100nM、≦10nM、≦1nM、≦0.1nM、≦0.01nM、又は≦0.001nM(例えば、10−8M以下、例えば、10−8Mから10−13M、例えば、10−9Mから10−13M)である。
所定の実施態様において、本明細書で提供される抗体は、抗体断片である。抗体断片は、限定されないが、Fab、Fab’、Fab’−SH、F(ab’)2、Fv,及びscFv断片、及び下記の他の断片を含む。所定の抗体断片の総説については、Hudson et al. Nat. Med. 9:129-134 (2003)を参照。scFv断片の総説については、例えば、Pluckthun, in The Pharmacology of Monoclonal Antibodies, vol. 113, Rosenburg and Moore eds., (Springer-Verlag, New York), pp. 269-315 (1994)を参照;また、国際公開第93/16185号;及び米国特許第5571894号及び第5587458号も参照。サルベージ受容体結合エピトープ残基を含み、かつインビボ半減期を増加させたFab及びF(ab’)2断片の議論については、米国特許第5869046号を参照のこと。
所定の実施態様において、本明細書で提供される抗体は、キメラ抗体である。所定のキメラ抗体は、例えば、米国特許第4816567号;及びMorrison et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 81:6851-6855 (1984))に記載されている。一例において、キメラ抗体は、非ヒト可変領域(例えば、マウス、ラット、ハムスター、ウサギ、又はサル等の非ヒト霊長類由来の可変領域)及びヒト定常領域を含む。更なる例において、キメラ抗体は、クラス又はサブクラスが親抗体のものから変更された「クラススイッチ」抗体である。キメラ抗体は、その抗原結合断片を含む。
所定の実施態様において、本明細書で提供される抗体はヒト抗体である。ヒト抗体は、当技術分野で周知の様々な技術を用いて生産することができる。ヒト抗体は一般的にvan Dijk and van de Winkel, Curr. Opin. Pharmacol. 5: 368-74 (2001) 及びLonberg, Curr. Opin. Immunol. 20:450-459 (2008)に記載されている。
本発明の抗体は、所望の活性又は活性(複数)を有する抗体についてコンビナトリアルライブラリーをスクリーニングすることによって単離することができる。例えば、様々な方法が、ファージディスプレイライブラリーを生成し、所望の結合特性を有する抗体についてのライブラリーをスクリーニングするために、当該技術分野で知られている。そのような方法は、例えば、Hoogenboom et al. in Methods in Molecular Biology 178:1-37 (O'Brien et al., ed., Human Press, Totowa, NJ, 2001)に総説され、更に、例えば、McCafferty et al., Nature 348:552-554; Clackson et al., Nature 352: 624-628 (1991); Marks et al., J. Mol. Biol. 222: 581-597 (1992); Marks and Bradbury, in Methods in Molecular Biology 248:161-175 (Lo, ed., Human Press, Totowa, NJ, 2003); Sidhu et al., J. Mol. Biol. 338(2): 299-310 (2004); Lee et al., J. Mol. Biol. 340(5): 1073-1093 (2004); Fellouse, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 101(34): 12467-12472 (2004); 及びLee et al., J. Immunol. Methods 284(1-2): 119-132(2004)に記載されている。
所定の実施態様において、本明細書で提供される抗体は、多重特異性抗体、例えば二重特異性抗体である。多重特異性抗体は、少なくとも二つの異なる部位に対して結合特異性を有するモノクローナル抗体である。所定の実施態様において、結合特異性の一つはJag1に対してであり、他は、任意の他の抗原に対してである。所定の実施態様において、結合特異性の一つはNotch2に対してであり、他は、任意の他の抗原に対してである。所定の実施態様において、二重特異性抗体は、Jag1の2つの異なるエピトープに結合することができる。所定の実施態様において、二重特異性抗体は、Notch2の2つの異なるエピトープに結合することができる。二重特異性抗体はまた、Jag1及び/又はNotch2を発現する細胞に対して細胞傷害性薬剤を局在化させるために用いることができる。二重特異性抗体は、全長抗体又は抗体断片として調製することができる。
所定の実施態様において、本明細書で提供される抗体のアミノ酸配列変異体が企図される。例えば、抗体の結合親和性及び/又は他の生物学的特性を改善することが望まれ得る。抗体のアミノ酸配列変異体は、抗体をコードするヌクレオチド配列に適切な改変を導入することにより、又はペプチド合成によって調製することができる。このような改変は、例えば、抗体のアミノ酸配列内における、残基の欠失、及び/又は挿入及び/又は置換を含む。最終コンストラクトが所望の特性、例えば、抗原結合を有していることを条件として、欠失、挿入、及び置換の任意の組み合わせが、最終コンストラクトに到達させるために作成され得る。
所定の実施態様において、一つ以上のアミノ酸置換を有する抗体変異体が提供される。置換型変異誘発の対象となる部位は、HVRとFRを含む。保存的置換は、表1の「望ましい置換」の見出しの下に示されている。より実質的な変更が、表1の「典型的な置換」の見出しの下に与えられ、アミノ酸側鎖のクラスを参照して以下に更に説明される。アミノ酸置換は、目的の抗体に導入することができ、その産物は、所望の活性、例えば、抗原結合の保持/改善、免疫原性の減少、又はADCC又はCDCの改善についてスクリーニングされる。
(1)疎水性:ノルロイシン、Met、Ala、Val、Leu、Ile;
(2)中性の親水性:Cys、Ser、Thr、Asn、Gln;
(3)酸性:Asp、Glu;
(4)塩基性:His、Lys、Arg;
(5)鎖配向に影響する残基:Gly、Pro;
(6)芳香族:Trp、Tyr、Phe.
所定の実施態様において、本明細書で提供される抗体は、抗体がグリコシル化される程度が増加又は減少するように改変される。抗体へのグリコシル化部位の付加又は欠失は、一以上のグリコシル化部位が作成又は削除されるようにアミノ酸配列を変えることによって簡便に達成することができる。
所定の実施態様において、1つ又は複数のアミノ酸改変を、本明細書で提供される抗体のFc領域に導入することができ、それによってFc領域変異体を生成する。Fc領域の変異体は、1つ又は複数のアミノ酸位置においてアミノ酸修飾(例えば置換)を含むヒトFc領域の配列(例えば、ヒトIgG1、IgG2、IgG3又はIgG4のFc領域)を含んでもよい。
所定の実施態様において、抗体の1つ以上の残基がシステイン残基で置換されている、システイン操作抗体、例えば、「thioMAb(複数)」を作成することが望まれ得る。特定の実施態様において、置換された残基は、抗体のアクセス可能な部位で存在する。それらの残基をシステインで置換することにより、反応性チオール基は、それによって抗体のアクセス可能な部位に配置され、本明細書中で更に記載されるように、イムノコンジュゲーを作成するために、例えば薬物部分又はリンカー−薬剤部分などの他の部分に抗体をコンジュゲートするために使用することができる。所定の実施態様において、以下の残基の何れか又は複数がシステインに置換され得る:軽鎖のV205(Kabat番号付け);重鎖のA118(EU番号付け);及び重鎖Fc領域のS400(EU番号付け)。システイン改変抗体は、例えば、米国特許第7521541号に記載のように生成され得る。
所定の実施態様において、本明細書で提供される抗体は、当技術分野で知られ、容易に入手される追加の非タンパク質部分を含むように更に改変することができる。抗体の誘導体化に適した部分としては、限定されないが、水溶性ポリマーを含む。水溶性ポリマーの非限定的な例は、限定されないが、ポリエチレングリコール(PEG)、エチレングリコール/プロピレングリコールの共重合体、カルボキシメチルセルロース、デキストラン、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、ポリ−1,3−ジオキソラン、ポリ−1,3,6−トリオキサン、エチレン/無水マレイン酸共重合体、ポリアミノ酸(単独重合体又はランダム共重合体の何れか)及びデキストラン又はポリ(n−ビニルピロリドン)ポリエチレングリコール、プロピレングリコール単独重合体、プロピレンオキシド/エチレンオキシド共重合体、ポリオキシエチル化ポリオール(例えばグリセロール)、ポリビニルアルコール及びこれらの混合物を包含する。ポリエチレングリコールプロピオンアルデヒドはその水中での安定性に起因して製造における利点を有し得る。ポリマーは何れかの分子量のものであってよく、そして分枝鎖又は未分枝鎖であってよい。抗体に結合するポリマーの数は変動してよく、そして、一以上の重合体が結合する場合は、それらは同じか又は異なる分子であってよい。一般的に、誘導体化に使用するポリマーの数及び/又は種類は、限定されないが、向上させるべき抗体の特定の特性又は機能、抗体誘導体が限定された条件下で治療に使用されるのか等を含む検討事項に基づいて決定することができる。
抗体は、例えば米国特許第4816567号で説明したように、組換えの方法及び組成物を用いて製造することができる。一実施態様において、本明細書に記載される抗Jag1抗体をコードする単離された核酸が提供される。一実施態様において、本明細書に記載される抗Notch2抗体をコードする単離された核酸が提供される。このような核酸は、抗体のVLを含むアミノ酸配列、及び/又は抗体のVHを含むアミノ酸配列(例えば、抗体の軽鎖及び/又は重鎖)をコードし得る。更なる実施態様において、そのような核酸を含む一以上のベクター(例えば、発現ベクター)が提供される。更なる実施態様において、そのような核酸を含む宿主細胞が提供される。一つのそのような実施態様において、宿主細胞は、(1)抗体のVLを含むアミノ酸配列、及び抗体のVHを含むアミノ酸配列をコードする核酸を含むベクター、又は(2)抗体のVLを含むアミノ酸配列をコードする核酸を含む第一ベクター、及び抗体のVHを含むアミノ酸配列をコードする核酸を含む第二ベクターを含む。一実施態様において、宿主細胞は、真核生物、例えばチャイニーズハムスター卵巣(CHO)細胞、又はリンパ系細胞(例えば、Y0、NS0、Sp20細胞)である。一実施態様において、抗Jag1抗体を作成する方法が提供され、その方法は、上記のように、抗体の発現に適した条件下で、抗体をコードする核酸を含む宿主細胞を培養することを含み、及び必要に応じて、宿主細胞(又は宿主細胞培養培地)から抗体を回収することを含む。一実施態様において、抗Notch2抗体を作成する方法が提供され、その方法は、上記のように、抗体の発現に適した条件下で、抗体をコードする核酸を含む宿主細胞を培養することを含み、及び必要に応じて、宿主細胞(又は宿主細胞培養培地)から抗体を回収することを含む。
本明細書で提供される抗体は、当技術分野で公知の様々なアッセイによってその物理的/化学的性質及び/又は生物学的活性について同定され、スクリーニングされ、又は特徴づけることができる。
一態様において、本発明の抗体は、例えばELISA、ウエスタンブロット法など公知の方法により、その抗原結合活性について試験される。
一態様において、生物学的活性を有する、抗Jag1抗体及び抗Notch2抗体などのNotch2シグナル伝達阻害剤抗体を同定するためのアッセイが提供される。生物学的活性は、例えば、Notch2活性、例えばNotch2シグナル伝達の阻害又は減少、Jag1媒介性Notchシグナル伝達、例えば、Jag1媒介性Notch2シグナル伝達の阻害又は減少を含み得る。インビボ及び/又はインビトロでこのような生物学的活性を有する抗体もまた提供される。
本発明はまた、化学療法剤又は薬物、成長抑制剤、毒素(例えば、タンパク質毒素、細菌、真菌、植物、又は動物起源の酵素活性毒素、又はそれらの断片)、又は放射性同位元素など、一以上の細胞傷害性薬物にコンジュゲートした本明細書中の抗Notch2抗体又は抗Jag1抗体を含むイムノコンジュゲートを提供する。
所定の実施態様において、本明細書で提供される抗体の何れかは、生物学的試料中のNotch2又はその断片、又はJag1又はその断片の存在を検出するのに有用である。本明細書で使用する「検出」という用語は、定量的又は定性的検出を包含する。所定の実施態様において、生物学的試料は、肝細胞、肝臓がん細胞及び肝腫瘍組織などの細胞又は組織を含む。
本明細書に記載の抗Notch2又は抗Jag1抗体の薬学的製剤は、所望の程度の純度を有するその抗体と任意の薬学的に許容可能な担体(Remington's Pharmaceutical Sciences 16th edition, Osol, A. Ed.: Williams and Wilkins PA, USA (1980))とを、凍結乾燥製剤又は水性溶液の形態で混合することによって調製される。薬学的に許容可能な担体は、使用される投薬量及び濃度でレシピエントに毒性でなく、そしてこれには、限定しないが、リン酸塩、クエン酸塩及び他の有機酸のような緩衝液;アスコルビン酸及びメチオニンを含む抗酸化剤;防腐剤(例えば、オクタデシルジメチオルベンジルアンモニウムクロライド;ヘキサメトニウムクロライド;塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、フェノール、ブチル又はベンジルアルコール;アルキルパラベン、例えば、メチル又はプロピルパラベン;カテコール;レゾルシノール;シクロヘキサノール;3−ペンタノール;及びm−クレゾール);低分子量(約10残基未満)ポリペプチド;タンパク質、例えば、血清アルブミン、ゼラチン、又は免疫グロブリン;親水性ポリマー、例えば、ポリビニルピロリドン;アミノ酸、例えば、グリシン、グルタミン、アスパラギン、ヒスチジン、アルギニン又はリジン;マンノサッカライド、ジサッカライド、及びグルコース、マンノース又はデキストリンを含む他の炭水化物;キレート剤、例えば、EDTA;糖、例えば、スクロース、マンニトール、トレハロース又はソルビトール;塩形成対イオン、例えば、ナトリウム;金属錯体(例えば、Zn−タンパク質錯体);及び/又はポリエチレングリコール(PEG)等の非イオン性界面活性剤が挙げられる。本明細書における典型的な薬学的に許容可能な担体は、水溶性の中性アクティブヒアルロニダーゼ糖タンパク質(sHASEGP)などの介在性薬物分散剤、例えば、rHuPH20(HYLENEX(登録商標)、Baxter International,Inc.)などのヒト可溶性PH−20ヒアルロニダーゼ糖タンパク質を更に含む。所定の典型的なsHASEGP及び使用法は、rHuPH20を含み、米国特許出願公開第2005/0260186号及び第2006/0104968に開示されている。一態様において、sHASEGPは、コンドロイチナーゼなどの1つ又は複数の追加のグルコサミノグリカンと組み合わされる。
また、本明細書において提供されるのは、(a)容器;(b)肝臓がんの治療のための抗Notch2抗体又は抗Jagged1抗体及び担体を含む容器内に含まれる組成物;及び(c)肝臓がんの治療的処置又は診断的検出のための組成物の使用に言及する、容器に貼付されたラベル又は容器と共に含まれる添付文書を含む製造品である。
本発明の他の実施態様において、上述した障害の治療、予防、及び/又は診断に有用な物質を含む製造品が提供される。製造品は、容器と容器上ないしは容器に付随するラベル又は添付文書を含んでなる。例えば、(a)容器;(b)肝臓がんの治療のための抗Notch2抗体又は抗Jagged1抗体及び担体を含む容器内に含まれる組成物;及び(c)肝臓がんの治療的処置又は診断的検出のための組成物の使用に言及する、容器に貼付されたラベル又は容器と共に含まれる添付文書を含む製造品が提供される。
以下は本発明の方法及び組成物の例である。上記提供される一般的な説明を前提として、他の様々な実施態様が実施され得ることが理解される。
肝臓がんのマウスモデル
FVB−Nマウス(Charles River,Hollister)は、以前に記載されるように、Ras、AKT及びのSleeping Beautyトランスポザーゼをコードするプラスミドの尾静脈水圧注射が施された(Ho et al., C., Hepatology 55:833-845 (2012))。簡潔には、10ugのpT3−CAGGS−NRasV12、10ugのpT3−EF1A−AKT、及び0.8ugのCMV−SB(Ho et al., Hepatology 55:833-845 (2012); Yant et al., Mol. Cell. Biol. 24:9239-9247 (2004))が、生理食塩溶液(0.9%NaCl)で約2mlに希釈され、5から8秒でFVB−Nマウスの外側尾静脈に注射された。
Notch2シグナル伝達の活性化
肝臓がんがNotch2活性化に関連付けられているかどうかを決定するために、免疫蛍光分析は、AKT/Ras HTVマウスの肝臓に生じる腫瘍で実施された。肝臓組織を包埋し、O.C.T.TM凍結培地(TISSUE−TEK(登録商標))中で凍結され、8μmで凍結切片化された。切片は、4%パラホルムアルデヒド(PFA)で固定し、Notch2(Cell Signaling Technology)、EpCAM(BioLegend)、及びAFP(R&D Systemsに対する一次抗体を使用して染色された。画像解析のために、免疫蛍光染色スライドはAriolスライド走査システム(Leica)を使用してスキャンされた。
抗体の産生
Notch2シグナル伝達は肝臓がんの発生や増殖を、特に二重陽性腫瘍において、駆動するために重要であったかどうかを決定するために、実施例1に記載されるように、AKT/Rasコンストラクトによる尾静脈水圧注射が施され、抗Notch2抗体、抗Jag1抗体、又はアイソタイプ対照(抗ブタクサ)抗体で処置された。
ヒトIgGレパートリーの天然の多様性を模倣する、選択された相補性決定領域における合成多様性を有するヒトファージ抗体ライブラリーが、M13バクテリオファージ粒子の表面上に示されたFab断片をパニングするために使用された。ヒトJag1−DSL−EGF1−4(図10)がライブラリー選別のための抗原として使用された。Nunc96ウェルMaxisorpイムノプレートは、標的抗原(10μgの/ml)により4℃で一晩コーティングされ、ファージブロッキング緩衝液PBST(リン酸緩衝生理食塩水(PBS)及び1%(w/v)ウシ血清アルブミン(BSA)及び0.05%(v/v)のTween−20)を用いて室温にて1時間ブロックした抗体ファージライブラリーVH(Lee et al., J. Immunol. Meth. 284:119-132, 2004を参照)及びVH/VL(Liang et al., JMB. 366: 815-829, 2007を参照)が別々に抗原プレートに加えられ、室温で一晩インキュベートされた。翌日、抗原でコーティングされたプレートは、PBT(0.05%のTween−20を含むPBS)で10回洗浄され、結合したファージを30分間、50mMのHCl及び500mMのNaClで溶出し、1MのTris塩基(pH7.5)の等量で中和した。回収したファージを大腸菌XL−1 Blue細胞中で増幅させた。つづく選択ラウンドの間に、抗原被覆プレートとの抗体ファージのインキュベーションは、2〜3時間に減らし、プレート洗浄のストリンジェンシーは徐々に増加された。
全てのCDR−L3の位置に停止コドン(TAA)を含み、かつM13バクテリオファージの表面に一価のFabを提示する、ファージミドpV0350−2b由来のファージミドpW0703(Lee et al., J. Mol. Biol 340, 1073-1093 (2004)は、親和性成熟のためのVHライブラリーから目的のクローンの重鎖可変ドメイン(VH)をグラフトするためのライブラリテンプレートとしての機能を果たした。ハード及びソフトランダム化の戦略が、親和性成熟のために使用された。ハードランダム化のために、天然のヒト抗体を模倣するように設計されたアミノ酸を使用して、3つの軽鎖CDRの選択された位置を含む一つの軽鎖ライブラリーがランダム化され、その設計されたDNAの縮退は、 Lee et al. (J. Mol. Biol 340, 1073-1093 (2004))に記載される通りであった。選択された位置で約50%の突然変異率を導入されたソフトランダム化条件を達成するために、変異原性DNAは、野生型ヌクレオチドを好む塩基の70−10−10−10混合物を用いて合成された(Gallop et al., J.Med. Chem. 37:1233-1251 (1994))。ソフトランダム化のために、CDR−L3の91−96、CDR−H1の30−33、35、CDR−H2の50、52、53−54,及び56、CDR−H3の95−98が標的とされ;CDRループの3つの異なる組み合わせ、H1/L3、H2/L3,及びH3/L3がソフトランダム化のために選択された。
親和性向上の選択のために、Jag1抗原は、限定試薬条件下で最初にビオチン化された。ファージライブラリーは、ストリンジェンシーを増加させた、一ラウンドのプレート選別及び5ラウンドの溶液選別を受けた。プレート選別の最初のラウンドでは、10ug/mlの抗原がMaxisorpプレート上に最初に塗布され、ブロッキング緩衝液(PBS中に1%BSA、0.05%のTween20)で予めブロックされた。ファージインプットのブロッキング緩衝液中の3OD/mlが、3時間抗原プレートに対してインキュベートされた。ウェルをPBS−0.05%Tween20により10回洗浄した。結合ファージを50mMのHCl、500mMのKClの150ul/ウェルで溶出し、続いて1MのTris(pH8)の50ul/ウェルにより中和し、滴定し、次のラウンドのために増殖された。続くラウンドにおいて、ファージライブラリーのパニングが溶液ファージ中で行われ、ここではファージライブラリーは、室温で2時間、1%のSuperblock(Pierce Biotechnology)及び0.05%のTween20を含有する100μlの緩衝液中で100nMのビオチン化標的タンパク質(濃度は親クローンファージのIC50値に基づく)とインキュベートされた。混合物は1%のスーパーブロックで10Xに更に希釈され、100μl/ウェルをニュートラアビジンでコーティングされたウェル(10μg/ml)に室温で30分間穏やかに振盪しながら適用した。バックグラウンド結合を決定するために、ファージを含むコントロールウェルをニュートラアビジンでコーティングされたプレート上に捕獲した。その後、結合したファージは、洗浄し、溶出し、最初のラウンドのために説明したように増殖させた。溶液選別の更なる4回のラウンドが、選別ストリンジェンシーの増加とともに実行された。その最初の2ラウンドは、ビオチン化標的タンパク質濃度を100nMから0.1nMに減少させることによる会合速度(on−rate)選択のためであり、その最後の2回のラウンドは、室温で弱い結合剤を競合するため、過剰量の非ビオチン化標的タンパク質(300から1000倍以上)を加えることによる解離速度(off−rate)選択のためのものであった。
コロニーが第6ラウンドのスクリーニングから採取された。コロニーを96ウェルプレート(Falcon)中で50μg/mlのカルベニシリンと1×1010/mlのM13KO7を含む2YT培地の150μl/ウェル中で、37℃で一晩増殖させた。同じプレートから、XL−1に感染した親のファージのコロニーをコントロールとして取り上げた。96ウェルNuncマキシソープ(登録商標)プレートを一晩4℃で、PBS中のJAg1又はJag2(0.5μg/ml)のどちらかを100μl/ウェルでコーティングした。プレートは1時間、PBS20中に1%のBSA及び0.05%のTween20を含む150μlでブロックした。
Notch2とシグナル伝達阻害剤による治療は、腫瘍量を減少させる
実施例1に記載したように、AKT/Ras HTVマウスは、尾静脈水圧注射の日に開始する、抗Notch2抗体(15mg/kg、1回/週)、抗Jag1抗体(10mg/kg、1回/週)又はアイソタイプ対照抗体により処置された。肝臓は画像化され、剖検時に標準的な実験室のバランス上で体重測定された。対照抗体で処置したマウスは、尾静脈水圧注射後5週間で重度の腫瘍量を生じ(図2A)、その肝臓は、正常な非担腫瘍マウスでは1.2gから体重の5.8%から(図2B)、最大で約8.9g又は体重のおよそ31%にまで大きさが増加した。抗Notch2又は抗Jag1抗体のどちらかによる処置は、腫瘍発生を有意に阻害した(図2A及びB;p<0.0001、n>8)。抗Notch2抗体で処置されたマウスは、その肝臓は平均して5.1g又は体重の19.3%まで増殖し、有意に小さな腫瘍量を生じた(図2B)。抗Jag1処置はさらに大きな効果があった。これらのマウスでは、最終的な肝臓重量は、平均すると4.3g又は体重の15.8%であった(図2B)。
Notch1及びNotch3の阻害
Jag1の阻害はNotch2の阻害と同様の効果があり、Jag1とNotch2は同じ経路で作用していること、具体的には、Jag1は腫瘍形成を支える上でのNotch2に対するリガンドとして作用することを示唆している。他のNotch受容体の阻害もまた、肝臓がんの形成や増殖を減少させることができるかどうかを決定するために、実施例1に記載されるように、マウスは、Ras/AKTコンストラクトによる尾静脈水圧注射が施され、抗Notch1アンタゴニスト抗体(10mg/kg、1回/週)又は抗Notch3アンタゴニスト抗体(30mg/kg、3回/週)により処置された。抗Notch1抗体による処置は、アイソタイプ対照と比較して、Ras/AKT HTVマウスの肝臓重量を減少させたが、抗Notch3抗体による処置は、肝臓重量には有意な影響を与えなかった(図2D;p<0.02、n≧7)。抗Notch2又は抗Jag1処置は、EpCAMの転写物のレベルを減少させたが、(図3E、p<0.005、n≧7)、Notch1の阻害は、肝臓でのEpCAM陽性腫瘍の断面積を増加させ(図3D、図3E、p<0.02、n≧7)、胆管がんマーカーのサイトケラチン19の発現を増加させた(CK19;図3F)。抗Notch1又は抗Notch3に対するアンタゴニスト抗体を用いた処置は、肝前駆細胞及び前駆細胞様腫瘍マーカー並びに胆管がん様腫瘍マーカーである、Sox9の発現に影響を及ぼさなかったが、抗Notch2又は抗Jag1抗体による処置は、Sox9を、mRNA(図3G)及びタンパク質(図3H)のレベルの両方で、劇的に減少させた。
抗Notch2又は抗Jag1抗体処置は、Notch2活性化を減少させる
免疫組織化学的分析のために、組織を、中性緩衝ホルマリン10%で固定し、パラフィンに包埋し、切片化した。4μmの厚さのホルマリン固定パラフィン包埋ヒト組織が染色に供された。Jag1 IHC染色については、全工程は、Ventana検出試薬(Ventana Medical Systems,Tucson,AZ)を用いてVentana Discovery XT自動染色機で行った。組織切片をEZPrep溶液中で脱パラフィン化し、前処理は、標準的なインキュベーション時間を用いるCell Conditioner 1を用いて行った。組織切片は、その後、0.2μg/mlのヤギポリクローナル抗Jag1一次抗体(Santa Cruz Biotechnology Inc,Santa Cruz,CA;Cat#sc−6011)と共に室温で32分間インキュベートされ、その後、7.5μg/mlのビオチン化ウサギ抗ヤギIgG抗体(Vector Labs,Burlingame,CA)と室温で32分間インキュベートされた。一次及び二次抗体の両方とも、3%のBSA中の10%正常ヒト血清(Jackson ImmunoResearch)で希釈された。切片は、その後、室温で16分間、抗ウサギOmniMAP−HRP試薬とともにインキュベートされた。
Notchシグナル伝達経路成分の発現に対するNotch阻害抗体の効果
AKT/Ras HTVを施されたマウスは、Notch1(10mg/kg、1回/週)、Notch2(10mg/kg、2回/週)、Notch3(30mg/kg、3回/週)、又はJag1(10mg/kg、1回/週)に対するアンタゴニスト抗体で処置された。抗ブタクサ抗体が、陰性対照として30mg/kgで3回/週で投与された。5週間後、肝臓が採取され、定量的リアルタイムPCRが、Notchシグナル伝達経路の成分の転写物に対する処置の効果を決定するために、単離されたRNAについて行われた。個々のNotchファミリー受容体の阻害は、他のNotch受容体ファミリーメンバーの発現の代償性増加をもたらさなかった。
抗Notch2又は抗Jag1抗体処置は、前駆細胞様及び胆管がん様の肝腫瘍増殖を遮断する。
Notch2阻害が腫瘍量の減少へと導くメカニズムに取り組むために、ハイスループットRNA配列分析を行った。AKT/Ras HTVを施されたマウスは、Notch2(10mg/kg、2回/週)、Jag1(10mg/kg、1回/週)、又は抗ブタクサ対照(30mg/kg、1回/週)に対するアンタゴニスト抗体で処置された。5週間後、肝臓を採取し、RNAは、ハイスループット配列決定に供された。
ヒト肝細胞がんにおけるNotch2の発現と活性化
ヒトHCC細胞株及び原発性ヒトHCC腫瘍は、Notchシグナル伝達成分の発現について、定量的逆転写ポリメラーゼ連鎖反応(qRT−PCR)を使用して分析された。HCC細胞株のHepG2、Hep3B、PCL/PRF/5、Snu387、Snu398、Snu423、Snu449、Snu475は、ATCC(Manassas、Virginia)から入手した。HCC細胞株のHuh−7、HLE、HLF、JHH1、JHH4、JHH5、JHH7はJapanese Collection of Bioresources Cell Bank(Osaka、Japan)から入手した。全染色した組織切片は、Definiensソフトウェアを用いて分析された。
Claims (41)
- 抗Jagged1(抗Jag1)抗体を含む、肝臓がん治療を必要とする個体における肝臓がんを治療するための医薬であって、
肝臓がんは、EpCAM及び/又はAFPを発現する細胞を含む、医薬。 - 抗Jag1抗体を含む、図11に示されるポリペプチドに対して少なくとも90%の同一性を有するアミノ酸配列を含むペプチドをコードするSpp1遺伝子を発現する細胞を含む肝臓がんを有する哺乳動物を治療的に処置するための医薬であって、
肝臓がんは、EpCAM及び/又はAFPを発現する細胞を含む、医薬。 - 肝臓がんにおいて、抗Jag1抗体が、SPP1発現の減少をもたらす、請求項2に記載の医薬。
- 哺乳動物はヒトである、請求項2又は3に記載の医薬。
- Notch2シグナル伝達阻害剤を含む、肝臓がんを有する個体を治療するための方法に使用するための医薬であって、前記方法は
(a)個体にNotch2シグナル伝達阻害剤を投与する工程、及び
(b)Notch2シグナル伝達を決定する工程を含み、
治療前のNotch2シグナル伝達と比較した、治療後のNotch2シグナル伝達の減少が、個体における肝臓がんの減少を示し、
Notch2シグナル伝達阻害剤は抗Jag1抗体であり、肝臓がんはEpCAM及び/又はAFPを発現する細胞を含む、医薬。 - Notch2シグナル伝達が、Notch2 ICDの核局在化を測定することによって、又はNotch2、Jag1、Hes又はHey1の発現を測定することによって決定される、請求項5に記載の医薬。
- 抗Jag1抗体を含む、肝臓がんを有する個体における血清SPP1タンパク質レベルを減少させるための医薬であって、抗Jag1抗体の有効量が個体に投与され、これにより個体における血清SPP1濃度を減少させ、肝臓がんはEpCAM及び/又はAFPを発現する細胞を含む、医薬。
- 個体に抗Jag1抗体を投与する前の血清SPP1タンパク質レベルが、少なくとも約80ng/mlであるか、又は約80ng/mlと約500ng/mlの間である、請求項7に記載の医薬。
- 個体に抗Jag1抗体を投与する前の血清SPP1タンパク質レベルが、約86ng/mlと約250ng/mlの間であるか、又は約120ng/mlと約170ng/mlの間である、請求項7に記載の医薬。
- 個体に抗Jag1抗体を投与することは、80ng/ml未満の血清SPP1タンパク質レベルをもたらす、請求項7から9の何れか一項に記載の医薬。
- 抗Jag1抗体を投与する前の血清SPP1タンパク質レベルが、抗Jag1抗体を投与する前24時間に決定される、請求項7から9の何れか一項に記載の医薬。
- 抗Jag1抗体を投与する前の血清SPP1タンパク質レベルが、酵素結合免疫吸着法により決定される、請求項7から11の何れか一項に記載の医薬。
- 血清SPP1タンパク質レベルが、抗Jag1抗体を投与した後、約1ヶ月、2ヶ月、又は3ヶ月減少する、請求項7から12の何れか一項に記載の医薬。
- Jag1に結合する抗体であるNotch2シグナル伝達阻害剤を含む、哺乳動物の肝臓がんを治療的に処置するための医薬であって、Notch2シグナル伝達の増殖増強効果に少なくとも一部依存している腫瘍を、Jag1に結合する抗体であるNotch2シグナル伝達阻害剤と接触させ、それによって腫瘍を効果的に治療し、肝臓がんはEpCAM及び/又はAFPを発現する細胞を含む、医薬。
- 抗体の、がんに対する結合が、Notch2の増殖増強活性に拮抗する、請求項14に記載の医薬。
- 抗Jag1抗体を含む、肝臓がんを有する危険性のある個体における肝臓がんを予防するための医薬であって、肝臓がんはEpCAM及び/又はAFPを発現する細胞を含む、医薬。
- 抗Jag1アンタゴニスト抗体であるNotch2シグナル伝達阻害剤を含む、図8Cに示されるポリペプチドに対して少なくとも90%のアミノ酸配列の同一性を有するタンパク質の増加した発現又は活性と関連した肝細胞増殖性疾患を治療するための医薬であって、肝細胞増殖性疾患はがんであってEpCAM及び/又はAFPを発現する細胞を含む、医薬。
- 抗Jag1抗体を含む、分泌型ホスホプロテイン1(SPP1)を発現する肝臓がん細胞の増殖を阻害するための医薬であって、抗Jag1抗体と細胞を接触させ、それによって細胞の増殖を阻害し、肝臓がんはEpCAM及び/又はAFPを発現する細胞を含む、医薬。
- 細胞と当該抗体を接触させることが肝臓がん細胞においてSPP1発現を減少させる、請求項18に記載の医薬。
- SPP1発現を、少なくとも約50%、60%、70%、80%、90%、95%又は100%減少させる、請求項19に記載の医薬。
- 発現が、RNAseq、マイクロアレイ分析、免疫組織化学、酵素結合免疫吸着法、遺伝子発現プロファイリング、ポリメラーゼ連鎖反応、SAGE、MassARRAY技術、蛍光インサイツハイブリダイゼーション及びウェスタンブロッティングからなる群から選択される方法により決定される、請求項19又は20に記載の医薬。
- 細胞を抗体と接触させることは、(i)細胞によるEpCAM、AFP、Prom1、Spp1、FoxM1、Plk1、ccnb1及びAurkbの少なくとも一の発現の減少をもたらすか、又は(ii)細胞によるWnt2、Axin2及びGlulの少なくとも一の発現の増加をもたらす、請求項18から21の何れか一項に記載の医薬。
- 細胞は個体中にある、請求項18から22の何れか一項に記載の医薬。
- SPP1タンパク質が、図11に示されるアミノ酸配列を含む、請求項7から13及び18から23の何れか一項に記載の医薬。
- 肝臓がんが、肝細胞がん、ヘパトーマ、胆管がん、肝芽腫、肝がん、肝血管肉腫、又は転移性肝臓がんである、請求項1から14及び17の何れか一項に記載の医薬。
- 肝臓がんが、Notch2、Jag1、Sox9、CK19、Ras、Prom1、Spp1、FoxM1、Plk1、ccnb1、Aurkb、Wnt2、Axin2、又はGlulの少なくとも一を発現する細胞を含む、請求項1から14、17、及び25の何れか一項に記載の医薬。
- 肝臓がんが、核Notch2を有する細胞を含むか、又は活性化Rasを有する細胞を含む;
抗Jag1抗体の投与が、細胞におけるEpCAM発現の減少をもたらす;
肝臓がんが、AFPを発現する細胞を含み、抗Jag1抗体の投与が、細胞におけるAFP発現の減少をもたらす;
肝臓がんにおいて、抗Jag1抗体の投与が、抗Jag1抗体を投与する前の発現と比較して、Prom1、Spp1、FoxM1、Plk1、ccnb1及びAurkbの少なくとも一の発現の減少をもたらす;又は
肝臓がんにおいて、抗Jag1抗体の投与が、Wnt2、Axin2及びGlulの少なくとも一の発現の増加をもたらす、請求項26に記載の医薬。 - 抗Jag1抗体が、モノクローナル抗体及び/又はアンタゴニスト抗体である、請求項1から27の何れか一項に記載の医薬。
- 抗Jag1抗体が、
(i)
(a)配列番号81のアミノ酸配列を含むHVR−H1;
(b)配列番号84のアミノ酸配列を含むHVR−H2;
(c)配列番号87のアミノ酸配列を含むHVR−H3;
(d)配列番号88のアミノ酸配列を含むHVR−L1;
(e)配列番号89のアミノ酸配列を含むHVR−L2;及び
(f)配列番号92のアミノ酸配列を含むHVR−L3
を含む抗体;
(ii)
(a)配列番号81のアミノ酸配列を含むHVR−H1;
(b)配列番号82のアミノ酸配列を含むHVR−H2;
(c)配列番号85のアミノ酸配列を含むHVR−H3;
(d)配列番号88のアミノ酸配列を含むHVR−L1;
(e)配列番号89のアミノ酸配列を含むHVR−L2;及び
(f)配列番号90のアミノ酸配列を含むHVR−L3
を含む抗体;
(iii)
(a)配列番号81のアミノ酸配列を含むHVR−H1;
(b)配列番号82のアミノ酸配列を含むHVR−H2;
(c)配列番号86のアミノ酸配列を含むHVR−H3;
(d)配列番号88のアミノ酸配列を含むHVR−L1;
(e)配列番号89のアミノ酸配列を含むHVR−L2;及び
(f)配列番号91のアミノ酸配列を含むHVR−L3
を含む抗体;又は
(iv)
(a)配列番号81のアミノ酸配列を含むHVR−H1;
(b)配列番号83のアミノ酸配列を含むHVR−H2;
(c)配列番号85のアミノ酸配列を含むHVR−H3;
(d)配列番号88のアミノ酸配列を含むHVR−L1;
(e)配列番号89のアミノ酸配列を含むHVR−L2;及び
(f)配列番号90のアミノ酸配列を含むHVR−L3
を含む抗体
である、請求項1から28の何れか一項に記載の医薬。 - 抗体が、
(i)図18の、huMAb4D5−8の軽鎖可変ドメインフレームワークLC−FR1、LC−FR2、LC−FR3、及びLC−FR4のアミノ酸配列を順番に含む、軽鎖可変ドメインフレームワークLC−FR1、LC−FR2、LC−FR3、及びLC−FR4;
(ii)図18の、huMAb4D5−8の重鎖可変ドメインフレームワークHC−FR1、HC−FR2、HC−FR3、及びHC−FR4のアミノ酸配列を順番に含む、重鎖可変ドメインフレームワークHC−FR1、HC−FR2、HC−FR3、及びHC−FR4;
(iii)図19の、huMAb4D5−8の軽鎖可変ドメインフレームワークLC−FR1、LC−FR2、LC−FR3、及びLC−FR4のアミノ酸配列を順番に含む、軽鎖可変ドメインフレームワークLC−FR1、LC−FR2、LC−FR3、及びLC−FR4;又は
(iv)図19の、huMAb4D5−8の重鎖可変ドメインフレームワークHC−FR1、HC−FR2、HC−FR3、及びHC−FR4のアミノ酸配列を順番に含む、重鎖可変ドメインフレームワークHC−FR1、HC−FR2、HC−FR3、及びHC−FR4を更に含む、請求項29に記載の医薬。 - 抗体が、
(a)配列番号93のアミノ酸配列に対して、少なくとも95%の配列同一性を有するVH配列;
(b)配列番号96のアミノ酸配列に対して、少なくとも95%の配列同一性を有するVL配列;
(c)(a)に記載のVH配列及び(b)に記載のVL配列;
(d)配列番号94のアミノ酸配列に対して、少なくとも95%の配列同一性を有するVH配列;
(e)配列番号97のアミノ酸配列に対して、少なくとも95%の配列同一性を有するVL配列;
(f)(d)に記載のVH配列及び(e)に記載のVL配列;
(g)配列番号95のアミノ酸配列に対して、少なくとも95%の配列同一性を有するVH配列;
(h)配列番号98のアミノ酸配列に対して、少なくとも95%の配列同一性を有するVL配列;又は
(i)(g)に記載のVH配列及び(h)に記載のVL配列
を含む、請求項29又は30に記載の医薬。 - 抗体が、
(i)配列番号93のVH配列及び/又は配列番号96のVL配列;
(ii)配列番号94のVH配列及び/又は配列番号97のVL配列;又は
(iii)配列番号95のVH配列及び/又は配列番号98のVL配列
を含む、請求項31に記載の医薬。 - 抗Jag1抗体が、
完全長IgG1又はIgG2a抗体であるか、
抗体断片であるか、
ヒト、ヒト化、又はキメラ抗体であるか、
増殖阻害剤にコンジュゲートされているか、又は
任意に毒素、抗生物質、放射性同位体及び核酸分解酵素から選択される、細胞傷害性薬剤にコンジュゲートされている、
請求項1から32の何れか一項に記載の医薬。 - 抗Jag1抗体が細菌で産生されるか、又はCHO細胞で産生される、請求項1から33の何れか一項に記載の医薬。
- 抗Jag1抗体が、がん細胞死を引き起こす抗体である、請求項1から34の何れか一項に記載の医薬。
- 少なくとも一の付加的な治療剤を更に含み、場合により付加的な治療剤が化学療法剤又は抗体である、請求項1から35の何れか一項に記載の医薬。
- 付加的な治療剤が抗Notch2アンタゴニスト抗体である、請求項36に記載の医薬。
- Jag1に対する抗体を含む、哺乳動物の肝臓がん細胞の増殖を阻害するための医薬であって、
哺乳動物の肝臓がん細胞がJag1に対する抗体を用いて治療され、肝臓がんは、EpCAM及び/又はAFPを発現する肝臓がん細胞を含む、医薬。 - 細胞が、ヒトにあるか、又は培地中にある、請求項38に記載の医薬。
- (a)容器;(b)肝臓がんの治療のための抗Jag1抗体及び担体を含む、容器内に含まれる組成物;及び(c)肝臓がんの治療的処置の組成物の使用に言及する、容器に貼付されたラベル又は容器と共に含まれる添付文書を含む、肝臓がんの治療的処置のための製造品であって、
肝臓がんはEpCAM及び/又はAFPを発現する細胞を含む、製造品。 - 肝臓がんの治療のための医薬の調製における、請求項40に記載される製造品の使用であって、
肝臓がんはEpCAM及び/又はAFPを発現する肝臓がん細胞を含む、使用。
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US201361789475P | 2013-03-15 | 2013-03-15 | |
US61/789,475 | 2013-03-15 | ||
PCT/US2014/026588 WO2014151866A1 (en) | 2013-03-15 | 2014-03-13 | Compositions and methods for diagnosis and treatment of hepatic cancers |
Publications (3)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2016520520A JP2016520520A (ja) | 2016-07-14 |
JP2016520520A5 JP2016520520A5 (ja) | 2017-03-23 |
JP6527132B2 true JP6527132B2 (ja) | 2019-06-05 |
Family
ID=50483571
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2016502189A Expired - Fee Related JP6527132B2 (ja) | 2013-03-15 | 2014-03-13 | 肝臓がんの診断及び治療のための組成物及び方法 |
Country Status (20)
Country | Link |
---|---|
US (3) | US9550829B2 (ja) |
EP (1) | EP2970476A1 (ja) |
JP (1) | JP6527132B2 (ja) |
KR (1) | KR20150128707A (ja) |
CN (1) | CN105143264A (ja) |
AU (1) | AU2014236815B2 (ja) |
BR (1) | BR112015020290A2 (ja) |
CA (1) | CA2902765A1 (ja) |
CL (1) | CL2015002571A1 (ja) |
CR (1) | CR20150483A (ja) |
EA (1) | EA201591705A1 (ja) |
HK (1) | HK1211963A1 (ja) |
IL (1) | IL240116A0 (ja) |
MA (1) | MA38495A1 (ja) |
MX (1) | MX2015011444A (ja) |
PE (1) | PE20151750A1 (ja) |
PH (1) | PH12015501997A1 (ja) |
SG (2) | SG11201507427QA (ja) |
TW (1) | TW201511770A (ja) |
WO (1) | WO2014151866A1 (ja) |
Families Citing this family (14)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
SG11201401287SA (en) | 2011-10-05 | 2014-05-29 | Genentech Inc | Methods of treating liver conditions using notch2 antagonists |
KR102193080B1 (ko) | 2012-08-13 | 2020-12-18 | 제넨테크, 인크. | 항-jagged 항체 및 사용 방법 |
EP2970468B1 (en) | 2013-03-13 | 2021-07-07 | Novartis AG | Notch2 binding molecules for treating respiratory diseases |
CN105143264A (zh) | 2013-03-15 | 2015-12-09 | 豪夫迈·罗氏有限公司 | 用于肝癌诊断和治疗的组合物和方法 |
AU2015217271B2 (en) | 2014-02-12 | 2018-10-25 | Genentech, Inc. | Anti-Jagged1 antibodies and methods of use |
MX2017011443A (es) * | 2015-03-06 | 2018-06-27 | Sorrento Therapeutics Inc | Terapeuticos de anticuerpo que se unen a jag1. |
CN104990905B (zh) * | 2015-06-30 | 2017-12-29 | 曲凯 | 一种基于固相酶联免疫荧光斑点的肝癌转移诊断试剂盒 |
WO2017205651A1 (en) * | 2016-05-25 | 2017-11-30 | The Trustees Of Columbia University In The City Of New York | Human notch1 based fusion proteins as decoy inhibitors of jagged-notch signaling and dll-notch signaling |
CN106053812B (zh) * | 2016-06-29 | 2017-12-08 | 厦门生迪生物技术有限公司 | 一种用于肝癌早期筛查和诊断的多种自身抗体联合检测elisa试剂盒 |
JOP20190259A1 (ar) * | 2017-05-31 | 2019-10-31 | Amgen Inc | بروتينات ربط مولد ضد مضادة لـ jagged1 |
CN108187050A (zh) * | 2018-01-18 | 2018-06-22 | 石河子大学 | 抑制食管癌细胞增殖的药物 |
WO2019195959A1 (en) | 2018-04-08 | 2019-10-17 | Cothera Biosciences, Inc. | Combination therapy for cancers with braf mutation |
KR102325972B1 (ko) * | 2020-05-06 | 2021-11-16 | 아주대학교산학협력단 | 간암 치료 반응 예측용 spp1 바이오마커 및 이의 용도 |
WO2022061595A1 (en) * | 2020-09-23 | 2022-03-31 | Xiang Li | Notch1 biomarkers for cancer therapy |
Family Cites Families (112)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4737456A (en) | 1985-05-09 | 1988-04-12 | Syntex (U.S.A.) Inc. | Reducing interference in ligand-receptor binding assays |
US4676980A (en) | 1985-09-23 | 1987-06-30 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services | Target specific cross-linked heteroantibodies |
US6548640B1 (en) | 1986-03-27 | 2003-04-15 | Btg International Limited | Altered antibodies |
IL85035A0 (en) | 1987-01-08 | 1988-06-30 | Int Genetic Eng | Polynucleotide molecule,a chimeric antibody with specificity for human b cell surface antigen,a process for the preparation and methods utilizing the same |
JP3101690B2 (ja) | 1987-03-18 | 2000-10-23 | エス・ビィ・2・インコーポレイテッド | 変性抗体の、または変性抗体に関する改良 |
US5770701A (en) | 1987-10-30 | 1998-06-23 | American Cyanamid Company | Process for preparing targeted forms of methyltrithio antitumor agents |
US5606040A (en) | 1987-10-30 | 1997-02-25 | American Cyanamid Company | Antitumor and antibacterial substituted disulfide derivatives prepared from compounds possessing a methyl-trithio group |
EP0368684B2 (en) | 1988-11-11 | 2004-09-29 | Medical Research Council | Cloning immunoglobulin variable domain sequences. |
DE3920358A1 (de) | 1989-06-22 | 1991-01-17 | Behringwerke Ag | Bispezifische und oligospezifische, mono- und oligovalente antikoerperkonstrukte, ihre herstellung und verwendung |
CA2026147C (en) | 1989-10-25 | 2006-02-07 | Ravi J. Chari | Cytotoxic agents comprising maytansinoids and their therapeutic use |
US5208020A (en) | 1989-10-25 | 1993-05-04 | Immunogen Inc. | Cytotoxic agents comprising maytansinoids and their therapeutic use |
US5959177A (en) | 1989-10-27 | 1999-09-28 | The Scripps Research Institute | Transgenic plants expressing assembled secretory antibodies |
US6150584A (en) | 1990-01-12 | 2000-11-21 | Abgenix, Inc. | Human antibodies derived from immunized xenomice |
US6075181A (en) | 1990-01-12 | 2000-06-13 | Abgenix, Inc. | Human antibodies derived from immunized xenomice |
US5770429A (en) | 1990-08-29 | 1998-06-23 | Genpharm International, Inc. | Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies |
DK0564531T3 (da) | 1990-12-03 | 1998-09-28 | Genentech Inc | Berigelsesfremgangsmåde for variantproteiner med ændrede bindingsegenskaber |
US5571894A (en) | 1991-02-05 | 1996-11-05 | Ciba-Geigy Corporation | Recombinant antibodies specific for a growth factor receptor |
LU91067I2 (fr) | 1991-06-14 | 2004-04-02 | Genentech Inc | Trastuzumab et ses variantes et dérivés immuno chimiques y compris les immotoxines |
GB9114948D0 (en) | 1991-07-11 | 1991-08-28 | Pfizer Ltd | Process for preparing sertraline intermediates |
CA2116774C (en) | 1991-09-19 | 2003-11-11 | Paul J. Carter | Expression in e. coli antibody fragments having at least a cysteine present as a free thiol. use for the production of bifunctional f(ab') 2 antibodies |
US5587458A (en) | 1991-10-07 | 1996-12-24 | Aronex Pharmaceuticals, Inc. | Anti-erbB-2 antibodies, combinations thereof, and therapeutic and diagnostic uses thereof |
WO1993008829A1 (en) | 1991-11-04 | 1993-05-13 | The Regents Of The University Of California | Compositions that mediate killing of hiv-infected cells |
US6004924A (en) | 1991-12-11 | 1999-12-21 | Imperial Cancer Research Technology, Ltd. | Protein sequences of serrate gene products |
CA2372813A1 (en) | 1992-02-06 | 1993-08-19 | L.L. Houston | Biosynthetic binding protein for cancer marker |
JP3095175B2 (ja) | 1992-11-13 | 2000-10-03 | アイデック ファーマシューティカルズ コーポレイション | B細胞リンパ腫の治療のためのヒトbリンパ球限定分化抗原に対するキメラ抗体と放射能標識抗体の療法利用 |
US5635483A (en) | 1992-12-03 | 1997-06-03 | Arizona Board Of Regents Acting On Behalf Of Arizona State University | Tumor inhibiting tetrapeptide bearing modified phenethyl amides |
US5780588A (en) | 1993-01-26 | 1998-07-14 | Arizona Board Of Regents | Elucidation and synthesis of selected pentapeptides |
WO1994029351A2 (en) | 1993-06-16 | 1994-12-22 | Celltech Limited | Antibodies |
US5773001A (en) | 1994-06-03 | 1998-06-30 | American Cyanamid Company | Conjugates of methyltrithio antitumor agents and intermediates for their synthesis |
US5910486A (en) | 1994-09-06 | 1999-06-08 | Uab Research Foundation | Methods for modulating protein function in cells using, intracellular antibody homologues |
US5789199A (en) | 1994-11-03 | 1998-08-04 | Genentech, Inc. | Process for bacterial production of polypeptides |
US5731168A (en) | 1995-03-01 | 1998-03-24 | Genentech, Inc. | Method for making heteromultimeric polypeptides |
US5840523A (en) | 1995-03-01 | 1998-11-24 | Genetech, Inc. | Methods and compositions for secretion of heterologous polypeptides |
US5869046A (en) | 1995-04-14 | 1999-02-09 | Genentech, Inc. | Altered polypeptides with increased half-life |
US5714586A (en) | 1995-06-07 | 1998-02-03 | American Cyanamid Company | Methods for the preparation of monomeric calicheamicin derivative/carrier conjugates |
US5712374A (en) | 1995-06-07 | 1998-01-27 | American Cyanamid Company | Method for the preparation of substantiallly monomeric calicheamicin derivative/carrier conjugates |
US6267958B1 (en) | 1995-07-27 | 2001-07-31 | Genentech, Inc. | Protein formulation |
GB9603256D0 (en) | 1996-02-16 | 1996-04-17 | Wellcome Found | Antibodies |
US6171586B1 (en) | 1997-06-13 | 2001-01-09 | Genentech, Inc. | Antibody formulation |
WO1998058964A1 (en) | 1997-06-24 | 1998-12-30 | Genentech, Inc. | Methods and compositions for galactosylated glycoproteins |
US6040498A (en) | 1998-08-11 | 2000-03-21 | North Caroline State University | Genetically engineered duckweed |
US6602677B1 (en) | 1997-09-19 | 2003-08-05 | Promega Corporation | Thermostable luciferases and methods of production |
WO1999022764A1 (en) | 1997-10-31 | 1999-05-14 | Genentech, Inc. | Methods and compositions comprising glycoprotein glycoforms |
US6610833B1 (en) | 1997-11-24 | 2003-08-26 | The Institute For Human Genetics And Biochemistry | Monoclonal human natural antibodies |
IL136544A0 (en) | 1997-12-05 | 2001-06-14 | Scripps Research Inst | Humanization of murine antibody |
CA2323757C (en) | 1998-04-02 | 2011-08-02 | Genentech, Inc. | Antibody variants and fragments thereof |
US6194551B1 (en) | 1998-04-02 | 2001-02-27 | Genentech, Inc. | Polypeptide variants |
DK1071700T3 (da) | 1998-04-20 | 2010-06-07 | Glycart Biotechnology Ag | Glykosylerings-modifikation af antistoffer til forbedring af antistofafhængig cellulær cytotoksicitet |
US6737056B1 (en) | 1999-01-15 | 2004-05-18 | Genentech, Inc. | Polypeptide variants with altered effector function |
EP1141024B1 (en) | 1999-01-15 | 2018-08-08 | Genentech, Inc. | POLYPEPTIDE COMPRISING A VARIANT HUMAN IgG1 Fc REGION |
DK2270150T4 (da) | 1999-04-09 | 2019-08-26 | Kyowa Hakko Kirin Co Ltd | Fremgangsmåde til at kontrollere aktiviteten af immunologisk funktionelt molekyle. |
US7125978B1 (en) | 1999-10-04 | 2006-10-24 | Medicago Inc. | Promoter for regulating expression of foreign genes |
MXPA02003456A (es) | 1999-10-04 | 2002-10-23 | Medicago Inc | Metodo para regular la transcripcion de genes foraneos. |
CA2388245C (en) | 1999-10-19 | 2012-01-10 | Tatsuya Ogawa | The use of serum-free adapted rat cells for producing heterologous polypeptides |
EP1240319A1 (en) | 1999-12-15 | 2002-09-18 | Genentech, Inc. | Shotgun scanning, a combinatorial method for mapping functional protein epitopes |
CA2395660A1 (en) | 1999-12-29 | 2001-07-12 | Immunogen, Inc. | Cytotoxic agents comprising modified doxorubicins and daunorubicins and their therapeutic use |
CN101289511A (zh) | 2000-04-11 | 2008-10-22 | 杰南技术公司 | 多价抗体及其应用 |
US6984522B2 (en) | 2000-08-03 | 2006-01-10 | Regents Of The University Of Michigan | Isolation and use of solid tumor stem cells |
PL218428B1 (pl) | 2000-10-06 | 2014-12-31 | Kyowa Hakko Kogyo Kk | Komórka, sposoby wytwarzania przeciwciał, leki zawierające przeciwciała, komórka CHO i przeciwciało klasy IgG |
US7064191B2 (en) | 2000-10-06 | 2006-06-20 | Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. | Process for purifying antibody |
US6946292B2 (en) | 2000-10-06 | 2005-09-20 | Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. | Cells producing antibody compositions with increased antibody dependent cytotoxic activity |
US6596541B2 (en) | 2000-10-31 | 2003-07-22 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Methods of modifying eukaryotic cells |
DE60131456T2 (de) | 2000-11-30 | 2008-07-10 | Medarex, Inc., Milpitas | Transchromosomale transgen-nagetiere zur herstellung von humanen antikörpern |
KR20100018071A (ko) | 2001-08-03 | 2010-02-16 | 글리카트 바이오테크놀로지 아게 | 항체 의존적 세포 독성이 증가된 항체 글리코실화 변이체 |
KR100988949B1 (ko) | 2001-10-25 | 2010-10-20 | 제넨테크, 인크. | 당단백질 조성물 |
US20040093621A1 (en) | 2001-12-25 | 2004-05-13 | Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd | Antibody composition which specifically binds to CD20 |
JPWO2003084569A1 (ja) | 2002-04-09 | 2005-08-11 | 協和醗酵工業株式会社 | 抗体組成物含有医薬 |
JPWO2003085118A1 (ja) | 2002-04-09 | 2005-08-11 | 協和醗酵工業株式会社 | 抗体組成物の製造方法 |
US20050031613A1 (en) | 2002-04-09 | 2005-02-10 | Kazuyasu Nakamura | Therapeutic agent for patients having human FcgammaRIIIa |
CA2481657A1 (en) | 2002-04-09 | 2003-10-16 | Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. | Cells of which genome is modified |
US7749753B2 (en) | 2002-04-09 | 2010-07-06 | Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd | Cells in which activity of the protein involved in transportation of GDP-fucose is reduced or lost |
AU2003236018A1 (en) | 2002-04-09 | 2003-10-20 | Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. | METHOD OF ENHANCING ACTIVITY OF ANTIBODY COMPOSITION OF BINDING TO FcGamma RECEPTOR IIIa |
NZ556507A (en) | 2002-06-03 | 2010-03-26 | Genentech Inc | Synthetic antibody phage libraries |
US20040101847A1 (en) | 2002-11-22 | 2004-05-27 | Isis Pharmaceuticals Inc. | Modulation of Notch2 expression |
CA2496547A1 (en) | 2002-08-29 | 2004-03-11 | University Of Southampton | Use of apoptosis inducing agents in the preparation of a medicament for the treatment of liver diseases |
US7361740B2 (en) | 2002-10-15 | 2008-04-22 | Pdl Biopharma, Inc. | Alteration of FcRn binding affinities or serum half-lives of antibodies by mutagenesis |
ES2347241T3 (es) | 2002-12-16 | 2010-10-27 | Genentech, Inc. | Variantes de inmunoglobulina y sus utilizaciones. |
AU2004205631A1 (en) | 2003-01-16 | 2004-08-05 | Genentech, Inc. | Synthetic antibody phage libraries |
US20060104968A1 (en) | 2003-03-05 | 2006-05-18 | Halozyme, Inc. | Soluble glycosaminoglycanases and methods of preparing and using soluble glycosaminogly ycanases |
US7871607B2 (en) | 2003-03-05 | 2011-01-18 | Halozyme, Inc. | Soluble glycosaminoglycanases and methods of preparing and using soluble glycosaminoglycanases |
EP1688439A4 (en) | 2003-10-08 | 2007-12-19 | Kyowa Hakko Kogyo Kk | HYBRID PROTEIN COMPOSITION |
AU2004280065A1 (en) | 2003-10-09 | 2005-04-21 | Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. | Process for producing antibody composition by using RNA inhibiting the function of alpha1,6-fucosyltransferase |
US9296820B2 (en) | 2003-11-05 | 2016-03-29 | Roche Glycart Ag | Polynucleotides encoding anti-CD20 antigen binding molecules with increased Fc receptor binding affinity and effector function |
ES2697327T3 (es) | 2003-11-06 | 2019-01-23 | Seattle Genetics Inc | Compuesto intermedio para la preparación de conjugados que comprenden derivados de auristatina y un enlazador |
WO2005053742A1 (ja) | 2003-12-04 | 2005-06-16 | Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. | 抗体組成物を含有する医薬 |
CN1961003B (zh) | 2004-03-31 | 2013-03-27 | 健泰科生物技术公司 | 人源化抗TGF-β抗体 |
US7785903B2 (en) | 2004-04-09 | 2010-08-31 | Genentech, Inc. | Variable domain library and uses |
SG172616A1 (en) | 2004-04-13 | 2011-07-28 | Hoffmann La Roche | Anti-p-selectin antibodies |
TWI380996B (zh) | 2004-09-17 | 2013-01-01 | Hoffmann La Roche | 抗ox40l抗體 |
JP4948413B2 (ja) | 2004-09-23 | 2012-06-06 | ジェネンテック, インコーポレイテッド | システイン操作抗体および結合体 |
JO3000B1 (ar) | 2004-10-20 | 2016-09-05 | Genentech Inc | مركبات أجسام مضادة . |
AT502055B1 (de) | 2005-06-21 | 2007-11-15 | Univ Wien Med | Anti tumor medikament |
EP2465870A1 (en) | 2005-11-07 | 2012-06-20 | Genentech, Inc. | Binding polypeptides with diversified and consensus VH/VL hypervariable sequences |
EP1973951A2 (en) | 2005-12-02 | 2008-10-01 | Genentech, Inc. | Binding polypeptides with restricted diversity sequences |
EP2016101A2 (en) | 2006-05-09 | 2009-01-21 | Genentech, Inc. | Binding polypeptides with optimized scaffolds |
US20080241150A1 (en) | 2006-05-15 | 2008-10-02 | The Brigham And Women's Hospital, Inc. | Functional negative regulatory domain sequences from human NOTCH1 and 2 and isolated LNR domains from human NOTCH1 |
DK2059533T3 (da) | 2006-08-30 | 2013-02-25 | Genentech Inc | Multispecifikke antistoffer |
US20080226635A1 (en) | 2006-12-22 | 2008-09-18 | Hans Koll | Antibodies against insulin-like growth factor I receptor and uses thereof |
WO2008140826A1 (en) | 2007-05-15 | 2008-11-20 | Oncomed Pharmaceuticals, Inc. | Compositions and methods for diagnosing and treating cancer |
CN100592373C (zh) | 2007-05-25 | 2010-02-24 | 群康科技(深圳)有限公司 | 液晶显示面板驱动装置及其驱动方法 |
PE20090321A1 (es) | 2007-06-04 | 2009-04-20 | Genentech Inc | Anticuerpos anti-notch1 nrr, metodo de preparacion y composicion farmaceutica |
DK2235064T3 (en) | 2008-01-07 | 2016-01-11 | Amgen Inc | A process for the preparation of heterodimeric Fc molecules using electrostatic control effects |
AU2009235467A1 (en) | 2008-04-07 | 2009-10-15 | Ablynx Nv | Single variable domains against the Notch pathways |
MX2011000236A (es) * | 2008-07-08 | 2011-02-24 | Oncomed Pharm Inc | Agentes de union a notch y antagonistas y metodos de uso de los mismos. |
EP2927244A1 (en) | 2008-09-19 | 2015-10-07 | MedImmune, LLC | Antibodies directed to DLL4 and uses thereof |
KR101712214B1 (ko) * | 2008-10-01 | 2017-03-03 | 제넨테크, 인크. | 항-노치2 항체 및 사용 방법 |
US8945569B2 (en) * | 2009-11-19 | 2015-02-03 | Oncomed Pharmaceuticals, Inc. | Jagged-binding agents and uses thereof |
SG11201401287SA (en) * | 2011-10-05 | 2014-05-29 | Genentech Inc | Methods of treating liver conditions using notch2 antagonists |
SG11201408554QA (en) | 2012-06-22 | 2015-02-27 | Cytomx Therapeutics Inc | Anti-jagged 1/jagged 2 cross-reactive antibodies, activatable anti-jagged antibodies and methods of use thereof |
KR102193080B1 (ko) * | 2012-08-13 | 2020-12-18 | 제넨테크, 인크. | 항-jagged 항체 및 사용 방법 |
CN105143264A (zh) | 2013-03-15 | 2015-12-09 | 豪夫迈·罗氏有限公司 | 用于肝癌诊断和治疗的组合物和方法 |
AU2015217271B2 (en) | 2014-02-12 | 2018-10-25 | Genentech, Inc. | Anti-Jagged1 antibodies and methods of use |
-
2014
- 2014-03-13 CN CN201480012380.9A patent/CN105143264A/zh active Pending
- 2014-03-13 CA CA2902765A patent/CA2902765A1/en not_active Abandoned
- 2014-03-13 TW TW103109210A patent/TW201511770A/zh unknown
- 2014-03-13 EP EP14717341.3A patent/EP2970476A1/en not_active Withdrawn
- 2014-03-13 US US14/208,523 patent/US9550829B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2014-03-13 SG SG11201507427QA patent/SG11201507427QA/en unknown
- 2014-03-13 AU AU2014236815A patent/AU2014236815B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2014-03-13 KR KR1020157024799A patent/KR20150128707A/ko not_active Application Discontinuation
- 2014-03-13 MX MX2015011444A patent/MX2015011444A/es unknown
- 2014-03-13 MA MA38495A patent/MA38495A1/fr unknown
- 2014-03-13 JP JP2016502189A patent/JP6527132B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2014-03-13 PE PE2015001965A patent/PE20151750A1/es unknown
- 2014-03-13 WO PCT/US2014/026588 patent/WO2014151866A1/en active Application Filing
- 2014-03-13 EA EA201591705A patent/EA201591705A1/ru unknown
- 2014-03-13 BR BR112015020290A patent/BR112015020290A2/pt not_active Application Discontinuation
- 2014-03-13 SG SG10201706210WA patent/SG10201706210WA/en unknown
-
2015
- 2015-07-23 IL IL240116A patent/IL240116A0/en unknown
- 2015-09-08 PH PH12015501997A patent/PH12015501997A1/en unknown
- 2015-09-10 CL CL2015002571A patent/CL2015002571A1/es unknown
- 2015-09-11 CR CR20150483A patent/CR20150483A/es unknown
- 2015-12-31 HK HK15112885.6A patent/HK1211963A1/xx unknown
-
2016
- 2016-12-08 US US15/373,275 patent/US9982058B2/en not_active Expired - Fee Related
-
2018
- 2018-04-27 US US15/964,248 patent/US10266602B2/en not_active Expired - Fee Related
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
SG10201706210WA (en) | 2017-09-28 |
US10266602B2 (en) | 2019-04-23 |
CR20150483A (es) | 2015-11-02 |
EA201591705A1 (ru) | 2016-01-29 |
HK1211963A1 (en) | 2016-06-03 |
AU2014236815A1 (en) | 2015-08-06 |
TW201511770A (zh) | 2015-04-01 |
CN105143264A (zh) | 2015-12-09 |
CL2015002571A1 (es) | 2016-03-28 |
AU2014236815B2 (en) | 2019-04-04 |
US9550829B2 (en) | 2017-01-24 |
PH12015501997A1 (en) | 2016-01-11 |
MA38495A1 (fr) | 2017-08-31 |
CA2902765A1 (en) | 2014-09-25 |
BR112015020290A2 (pt) | 2017-10-10 |
PE20151750A1 (es) | 2015-12-07 |
MX2015011444A (es) | 2015-12-16 |
IL240116A0 (en) | 2015-09-24 |
KR20150128707A (ko) | 2015-11-18 |
US20180355054A1 (en) | 2018-12-13 |
US9982058B2 (en) | 2018-05-29 |
US20170210815A1 (en) | 2017-07-27 |
WO2014151866A1 (en) | 2014-09-25 |
EP2970476A1 (en) | 2016-01-20 |
JP2016520520A (ja) | 2016-07-14 |
SG11201507427QA (en) | 2015-10-29 |
US20140314749A1 (en) | 2014-10-23 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP6527132B2 (ja) | 肝臓がんの診断及び治療のための組成物及び方法 | |
USRE47761E1 (en) | Anti-axl antibodies and methods of use | |
JP6877350B2 (ja) | 抗fgfr2/3抗体及びその使用方法 | |
US9266955B2 (en) | Anti-FGFR4 antibodies and methods of use | |
JP7032929B2 (ja) | 抗pd-l1抗体及びその診断上の使用 | |
JP5955828B2 (ja) | 抗vegf抗体 | |
ES2932874T3 (es) | Anticuerpos anti-FGFR3 y métodos que utilizan los mismos | |
ES2432798T3 (es) | Anticuerpos anti-NRR de Notch 1 y procedimientos de uso de los mismos | |
JP2017538442A5 (ja) | ||
JP2014516511A5 (ja) | ||
TW201106972A (en) | Combination treatments | |
JP2015145379A (ja) | 抗notch2抗体および使用方法 | |
JP2014526891A (ja) | ニューレグリン抗体とその使用 | |
CN115916348A (zh) | 使用抗tigit抗体和pd-1轴结合拮抗剂的治疗 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20170216 |
|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20170216 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20171212 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20180312 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20180821 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20181121 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20190416 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20190509 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 6527132 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |