JP6407268B2

JP6407268B2 - Ａｌｘ受容体アゴニストとしてのジフルオロエチル−オキサゾール置換架橋スピロ［２．４］ヘプタン誘導体

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Publication number: JP6407268B2
Application number: JP2016522439A
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Inventors: コルミンボウフオリヴィエ; クレンシルヴェーヌ; ポッツィダビデ
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Priority date: 2013-06-25
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Publication date: 2018-10-17
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Description

本発明は、式（Ｉ）のジフルオロエチル−オキサゾール置換架橋スピロ［２．４］ヘプタン誘導体及び医薬としてのこれらの使用に関する。本発明はまた上記化合物の製造方法、式（Ｉ）の化合物を１又は２以上含有する医薬組成物、及び特にＡＬＸ受容体（ＡＬＸＲ）アゴニストとしてのそれらの使用を含む関連した側面に関する。

ＡＬＸＲ（別名ＬｉｐｏｘｉｎＡ４受容体、ＦＰＲＬ１、ＦＰＲ２；国際公開公報第２００３／０８２３１４号にヌクレオチド配列ＳＥＱＩＤＮＯ：１及びアミノ酸配列ＳＥＱＩＤＮＯ：２として開示）は、Ｇ−タンパク質結合受容体ファミリーの一員である。ＡＬＸＡは、高濃度のホルミル−メチオニン−ロイシル−フェニルアラニンペプチドに反応するカルシウム動員を介在することが見出された。さらに、ＡＬＸＲ導入細胞において、脂質代謝物であるｌｉｐｏｘｉｎＡ４（ＬＸＡ４）及びそのアナログが、ＡＬＸＲと高い親和性で結合し、アラキドン酸産生及びＧ−タンパク質の活性化を増大させることが見出された（Ｃｈｉａｎｇら、Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｒｅｖ．、２００６、５８、４６３−４８７）。ＬＸＡ４の効果は、種々の病態動物モデルで評価され、そしてＬＸＡ４が、高い抗炎症及び消散促進活性を有することが示された。ＬＸＡ４、又は誘導体、又は安定なアナログがｉｎｖｉｖｏ活性を示した病態モデルは、例えば、皮膚炎、背部空気嚢、虚血／再灌流損傷、腹膜炎、大腸炎、メサンギウム増殖性腎炎、胸膜炎、喘息、嚢胞性線維症、敗血症、角膜損傷、血管新生、歯周炎、カラゲナン誘発痛覚過敏及び移植片対宿主病（ＧｖＨＤ）である（Ｓｃｈｗａｂ及びＳｅｒｈａｎ、ＣｕｒｒｅｎｔＯｐｉｎｉｏｎｉｎＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ、２００６、４１４−４２０）。ＬｉｐｏｘｉｎＡ４は、ヒト線維芽細胞様滑膜細胞においてＩＬ−６の発現を阻害し（Ｓｏｄｉｎ−Ｓｅｍｒｌら、ＩｎｔＪＩｍｍｕｎｏｐａｔｈｏｌＰｈａｒｍａｃｏｌ（２００４）１７：１５−２５）、安定なＦＰＲ２アゴニストであるＢＭＬ−１１１は、コラーゲン誘発関節炎の重篤度を軽減したが（Ｚｈａｎｇら、（２００８）ＩｎｆｌａｍｍＲｅｓ５７：１５７−１６２）、これは、関節リウマチの治療におけるＦＰＲ２アゴニストの有用性を示すものである。急性肺障害（ＡＬＩ）マウスは、安定なｌｉｐｏｘｉｎＡ４で処置した場合、肺炎症の軽減を示した（Ｊｉｎら、（２００７）ＡｎｅｓｔｈＡｎａｌｇ１０４：３６９−３７７）。重篤な喘息においてｌｉｐｏｘｉｎＡ４レベルが下がっていること（Ｃｅｌｉｋら、（２００７）ＣｌｉｎＥｘｐＡｌｌｅｒｇｙ３７：１４９４−１５０１；Ｐｌａｎａｇｕｍａら、（２００８）ＡｍＪＲｅｓｐｉｒＣｒｉｔＣａｒｅＭｅｄ１７８：５７４−５８２）及び安定なｌｉｐｏｘｉｎ
Ａ４アナログにより、動物モデルの喘息症状が改善されたこと（Ｌｅｖｙら、（２００２）ＮａｔＭｅｄ８：１０１８−１０２３；Ｌｅｖｙら、（２００７）ＦＡＳＥＢＪ２１：３８７７−３８８４）が記述されている。嚢胞性線維症については、嚢胞性線維症患者及びこの疾患の動物モデルの双方で肺のｌｉｐｏｘｉｎＡ４レベルが低下すること（Ｋａｒｐら、（２００４）ＮａｔＩｍｍｕｎｏｌ５：３８８−３９２）；安定なｌｉｐｏｘｉｎアナログによる処置により、同じ動物モデルにおいて、疾患を有する肺における炎症細胞の蓄積及び体重の減少が軽減されたことが示されている（Ｋａｒｐら、（２００４）ＮａｔＩｍｍｕｎｏｌ５：３８８−３９２）。ｌｉｐｏｘｉｎＡ４で局所的に処理することにより、乾燥角膜表面の再上皮化が増大し、炎症が軽減されるが（Ｇｒｏｎｅｒｔ、（２００５）ＰｒｏｓｔａｇｌａｎｄｉｎｓＬｅｕｋｏｔＥｓｓｅｎｔＦａｔｔｙＡｃｉｄｓ７３：２２１−２２９；Ｇｒｏｎｅｒｔら、（２００５）ＪＢｉｏｌＣｈｅｍ２８０：１５２６７−１５２７８）、これは、角膜乾燥症の治療におけるＦＰＲ２アゴニストの有用性を示すものである。ｌｉｐｏｘｉｎＡ４アナ
ログの経口投与により、炎症性腸疾患のマウスモデルにおいて大腸炎の重篤度が軽減された（Ｇｅｗｉｒｔｚら、（２００２）ＥｉｃｏｓａｎｏｉｄｓａｎｄｏｔｈｅｒＢｉｏａｃｔｉｖｅＬｉｐｉｄｓｉｎＣａｎｃｅｒ、Ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ、ａｎｄＲａｄｉａｔｉｏｎＩｎｊｕｒｙ、ＫｌｕｗｅｒＡｃａｄｅｍｉｃ／ＰｌｅｎｕｍＰｕｂｌｉｓｈｅｒｓ、２２９−２３６）。

ＡＬＸＲはまた、プリオンタンパク質のフラグメント、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）−１_ＬＡＩ株のｇｐ１２０由来ペプチド及びアミロイド−ベータ１−４２（Ａｂ４２）を含む種々のペプチドの機能性受容体としても同定され（概説については、Ｌｅら、ＰｒｏｔｅｉｎＰｅｐｔＬｅｔｔ．、２００７、１４、８４６−８５３）、アルツハイマー病の病因における重要な関与が示唆されている（Ｙａｚａｗａら、ＦＡＳＥＢＪ．、２００１、１５、２４５４−２４６２）。マクロファージ及び小膠細胞上でのＡＬＸＲの活性化は、細胞の指向性移動、食作用及び伝達物質の遊離を増大させるＧ−タンパク質介在シグナル伝達カスケードを開始させる。これらは、Ａｂ４２が過剰生産され、蓄積するＡＤ脳の病変領域における老人班周辺に、単核細胞が濃縮される現象を説明するかもしれない。組織損傷部位における白血球の蓄積は、有害な物質の除去を目的とする本来の宿主応答と考えられるが、活性化した単核食細胞もまた、ニューロンに対して有毒な過酸化物アニオン等の種々の物質を放出する。従って、ＡＬＸＲは、ＡＤ脳中のＡｂ４２によって誘起された炎症促進反応を仲介し、病態の進行を促進するのかもしれない。さらに、ヒューマニン（ｈｕｍａｎｉｎ）はＡＬＸＲの高親和性リガンドであり、アルツハイマー病モデルにおいて神経を保護する（Ｍａｍｉｙａら、（２００１）ＢｒＪＰｈａｒｍａｃｏｌ１３４：１５９７−１５９９；Ｙｉｎｇら、（２００４）ＪＩｍｍｕｎｏｌ１７２：７０７８−７０８５；Ｍｉａｏら、（２００８）Ｎｅｕｒｏｐｅｐｔｉｄｅｓ４２：５５７−５６７）。

ＡＬＸＲアゴニストの生物学的特性は、単核球／マクロファージ／小膠細胞／樹状細胞の移動／活性化、好中球の移動／活性化、リンパ球の活性化、増殖及び分化の調節、炎症の調節、サイトカイン産生及び／又は放出の調節、炎症誘発性メディエーターの産生及び／又は放出の調節、免疫応答の調節を含むが、これらに限定されるものではない。

本発明は、ヒトＡＬＸ受容体の非ペプチド性アゴニストであるジフルオロエチル−オキサゾール置換架橋スピロ［２．４］ヘプタン誘導体を提供する。ヒトＡＬＸ受容体に対してアゴニスト活性を有する他の架橋スピロ［２．４］ヘプタン誘導体が、ＷＯ２０１０／１３４０１４、ＷＯ２０１１／１６３５０２、ＷＯ２０１２／０６６４８８、ＷＯ２０１３／００９５４３、ＷＯ２０１３／１７１６９４及びＷＯ２０１３／１７１６８７に開示されている。異なる架橋スピロ［２．４］ヘプタン誘導体がＷＯ９５／０２５８７に開示されている。本発明の化合物は、炎症性疾患、閉塞性気道疾患、アレルギー、ＨＩＶによるレトロウイルス感染、心血管障害、神経炎症、神経障害、疼痛、プリオンによる疾患及びアミロイドによる障害（特に、アルツハイマー病）等のＡＬＸ受容体の調節に反応する疾患の予防又は治療に有用である；加えて、本発明の化合物は、自己免疫疾患の予防又は治療並びに免疫応答（特に、免疫化によって誘起される免疫応答。）の調節に有用である。

本発明の種々の態様を以下に記述する：
１）本発明は、式（Ｉ）の化合物及びそのような化合物の塩（特に薬学的に許容される塩）に関する：

式中、ピペリジン環における置換基はトランス配置にある。

いかなる疑義をも避けるために、態様１）に従う式（Ｉ）の化合物の立体配置において、架橋スピロ［２．４］ヘプタン部分における２つのアミド置換基はトランス配置にあり、シクロプロピル部分は、ピペリジン−置換アミドに対して相対的に近接している（ｅｘｏ−位）。

いかなる疑義をも避けるために、式（Ｉ）の化合物は下記の例と同様に命名される：
構造

の純粋な立体異性体は、（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−Ｎ^２−（（４−（１，１−ジフルオロエチル）オキサゾール−２−イル）メチル）−Ｎ^３−（（３Ｓ，４Ｓ）−３−フルオロピペリジン−４−イル）スピロ［ビシクロ［２．２．１］ヘプタン−７，１’−シクロプロパン］−２，３−ジカルボキサミドと命名される。

態様１）に従う式（Ｉ）の化合物は、１又は２以上の不斉炭素原子などの、１又は２以上のキラル又は不斉中心を含んでいてもよい。二重結合の置換基は、特に明記しない限り、（Ｚ）−又は（Ｅ）−配置で存在してもよい。従って、式（Ｉ）の化合物は、立体異性体の混合物として、又は好ましくは純粋な立体異性体として存在してもよい。立体異性体の混合物は当業者に知られた方法で分離してもよい。

２）本発明の好ましい態様は、式（Ｉ_ＳＴ１）の化合物でもある、態様１）に従う式（Ｉ）の化合物及びそのような化合物の塩（特に薬学的に許容される塩）に関する：

３）態様１）に定義した式（Ｉ）の好ましい化合物は、
（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−Ｎ^２−（（４−（１，１−ジフルオロエチル）オキサゾール−２−イル）メチル）−Ｎ^３−（（３Ｓ，４Ｓ）−３−フルオロピペリジン−４−イル）スピロ［ビシクロ［２．２．１］ヘプタン−７，１’−シクロプロパン］−２，３−ジカルボキサミド；
又はそのような化合物の塩（特に薬学的に許容される塩）である。

４）態様１）に定義した式（Ｉ）の別の好ましい化合物は、
（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−Ｎ^２−（（４−（１，１−ジフルオロエチル）オキサゾール−２−イル）メチル）−Ｎ^３−（（３Ｒ，４Ｒ）−３−フルオロピペリジン−４−イル）スピロ［ビシクロ［２．２．１］ヘプタン−７，１’−シクロプロパン］−２，３−ジカルボキサミド；
又はそのような化合物の塩（特に薬学的に許容される塩）である。

本発明はまた、同位体標識された、特に^２Ｈ（デューテリウム）標識された式（Ｉ）の化合物をも含み、当該同位体標識された化合物は、１又は２以上の原子が、同じ原子番号を有するが、自然において通常見出される原子量と異なる原子量を有する原子によってそれぞれ置き換えられていることを除いては、式（Ｉ）の化合物と同一である。同位体標識された、特に^２Ｈ（デューテリウム）標識された式（Ｉ）の化合物、及びその塩は、本発明の範囲に含まれる。水素をより重い同位体^２Ｈ（デューテリウム）に置換することにより代謝安定性が増大するため、例えば、ｉｎ−ｖｉｖｏでの半減期が長くなり、あるいは、必要用量を減らすことができ、又は、チトクロームＰ４５０酵素の阻害が軽減され得るため、例えば、安全性プロファイルが改善される。本発明の１つの態様においては、式（Ｉ）の化合物は同位体標識されていないか、又は、それらは１若しくは２以上のデューテリウム原子によってのみ標識されている。副態様においては、式Ｉの化合物は全く同位体標識されていない。同位体標識された式Ｉの化合物は、適切な試薬又は出発物質の適宜な同位体種を用いることを除いては、下記の方法と同様に製造してもよい。

「薬学的に許容される塩」という用語は、対象化合物の所望の生物活性を保持し、かつ最小の望ましくない毒性作用を示す塩を意味する。そのよう塩としては、対象化合物中の塩基性基及び／又は酸性基の存在に応じた、無機又は有機の酸及び／又は塩基付加塩が挙げられる。参考としては、例えば、「ＨａｎｄｂｏｏｋｏｆＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＳａｌｔｓ．Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ、ＳｅｌｅｃｔｉｏｎａｎｄＵｓｅ．」、Ｐ．ＨｅｉｎｒｉｃｈＳｔａｈｌ、ＣａｍｉｌｌｅＧ．Ｗｅｒｍｕｔｈ（Ｅｄｓ．）、Ｗｉｌｅｙ−ＶＣＨ、２００８；及び「ＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＳａｌｔｓ
ａｎｄＣｏ−ｃｒｙｓｔａｌｓ」、ＪｏｈａｎＷｏｕｔｅｒｓａｎｄＬｕｃＱｕｅｒｅ（Ｅｄｓ．）、ＲＳＣＰｕｂｌｉｓｈｉｎｇ、２０１２を参照されたい。

化合物、塩、医薬組成物、疾病等について複数形が使用される場合は、単数の化合物、塩、医薬組成物、疾病等をも意味することが意図されている。

態様１）〜４）のいずれか１つに従う式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容される塩は、医薬としての使用に好適である。特に、式（Ｉ）の化合物はＡＬＸ受容体を調節し、すなわち、ＡＬＸ受容体アゴニストとして作用し、炎症性疾患、閉塞性気道疾患、アレルギー、ＨＩＶによるレトロウイルス感染、心血管障害、神経炎症、神経障害、疼痛、プリオンによる疾患、白血病及びアミロイドによる障害（特に、アルツハイマー病）等のＡＬＸ受容体の活性化に反応する疾患の予防又は治療に有用である；加えて、これらは、免疫応答（特に、免疫化によって惹起される免疫応答）の調節に有用である。

特に、態様１）〜４）のいずれか１つに従う式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容される塩は、炎症性疾患、閉塞性気道疾患及びアレルギーから選択される疾患の予防又は治療に好適である。

炎症性疾患、閉塞性気道疾患及びアレルギーは、下記の群の疾患及び障害の１つ、幾つか又はすべてを含むが、これらに限定されるものではない：
１）急性肺障害（ＡＬＩ）；成人／急性呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）；慢性気管支炎若しくはそれに関連する呼吸困難を含む、慢性閉塞性の肺（ｐｕｌｍｏｎａｒｙ）、気道又は肺（ｌｕｎｇ）疾患（ＣＯＰＤ，ＣＯＡＤ又はＣＯＬＤ）；肺気腫；及び他の薬物治療、特に他の吸入薬物治療に起因する気道過敏性の悪化。特に、炎症性疾患、閉塞性気道疾患及びアレルギーは、ＣＯＰＤ，ＣＯＡＤ及びＣＯＬＤを含む。

２）さらに、炎症性疾患、閉塞性気道疾患及びアレルギーは、いかなるタイプの、又はいかなる病因による気管支炎をも包含する。

３）さらに、炎症性疾患、閉塞性気道疾患及びアレルギーは、いかなるタイプの、又はいかなる病因による気管支拡張症及び塵肺症をも包含する。

４）さらに、炎症性疾患、閉塞性気道疾患及びアレルギーは、内因性（非アレルギー性）喘息及び外因性（アレルギー性）喘息、軽度の喘息、中等度の喘息、重症喘息、気管支炎性喘息、運動誘発喘息、職業性喘息並びに細菌感染に続いて誘発される喘息を含む、いかなるタイプの、又はいかなる病因による喘息をも包含する。

５）さらなる態様において、態様１）〜４）のいずれか１つに従う式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容される塩は、特に炎症性疾患の予防又は治療に好適である。炎症性疾患は、下記の群の疾患及び障害の１つ、幾つか又はすべてを含む：
５ａ）特に、炎症性疾患は、好中球関連障害、特に、過剰−好中球増多症を含む、気道及び／又は肺に影響を与えるような気道の好中球関連障害を意味する。さらに、好中球関連障害はまた、歯肉炎、歯周炎、糸球体腎炎、嚢胞性線維症をも含む。

５ｂ）さらに、炎症性疾患は、乾癬、接触皮膚炎、アトピー性皮膚炎、ヘルペス状皮膚炎、硬皮症、過敏性血管炎、じんましん、紅斑性狼瘡、円盤状狼瘡及び表皮剥離等の皮膚疾患を含む。

５ｃ）さらに、炎症性疾患はまた、炎症相を有する疾患又は状態にも関連する。炎症相を有する疾患又は状態は、ぶどう膜炎（前部、中間部及び後部）、ベーチェット症候群
に伴うぶどう膜炎、結膜炎、角膜乾燥症、シェーグレン症候群に伴う角膜乾燥症及び春季カタル等の眼に影響を与える疾患及び状態；鼻炎及びアレルギー性鼻炎を含む鼻に影響を与える疾患（特にアレルギー性鼻炎）；並びに全身性紅斑性狼瘡、強直性脊椎炎、ベーチェット症候群、シェーグレン症候群、多発性軟骨炎、硬皮症、ウェゲナー肉芽腫症、巨細胞動脈炎、好中球性皮膚病、膠原病、慢性活動性肝炎、重症筋無力症、スティーブンス・ジョンソン症候群、突発性スプルー、自己免疫性炎症性腸疾患（例えば、潰瘍性大腸炎及びクローン病）、バセドウ病眼症、慢性過敏性肺炎、原発性胆汁性肝硬変、角膜乾燥症及び春季カタル、間質性肺線維症、乾癬性関節炎及び糸球体腎炎；等の自己免疫反応が関連し、又は自己免疫相若しくは自己免疫的な病因を有する炎症性疾患を含むが、これらに限定されるものではない。

５ｄ）さらに、自己免疫反応が関連し、又は自己免疫相若しくは自己免疫的な病因を有する炎症性疾患は、関節リウマチ、橋本病及びＩ又はＩＩ型糖尿病を含む。

さらに、態様１）〜４）のいずれか１つに従う式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容される塩は、臓器又は組織移植拒絶の予防又は治療、例えば、心臓、肺、心肺、肝臓、腎臓、膵臓、皮膚又は角膜の被移植者の治療並びに、特に、急性又は慢性の自家−及び異種移植拒絶の治療において又はインスリン産生細胞、例えば膵島細胞の移植において、骨髄移植に続いて時々起るような移植片対宿主病の予防に適している。

さらに、態様１）〜４）のいずれか１つに従う式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容される塩は、ＨＩＶによるレトロウイルス感染の予防又は治療に好適である。ＨＩＶによるレトロウイルス感染は、ＧＵＮ−４ｖ、ＧＵＮ−７ｗｔ、ＡＧ２０４、ＡＧ２０６、ＡＧ２０８、ＨＣＭ３０５、ＨＣＭ３０８、ＨＣＭ３４２、ｍＳＴＤ１０４及びＨＣＭ３０９等のＨＩＶ−１及びＨＩＶ−２株によって引き起こされる疾患及び障害の群の１つ、幾つか又はすべてを含むが、これらに限定されるものではない。

さらに、態様１）〜４）のいずれか１つに従う式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容される塩は、心血管障害の予防又は治療に好適である。心血管障害は、（心臓を含む）心血管系統の１又は２以上の病的状態及びそれに係る組織の疾患を意味する。心血管系統の病的状態及び依存性組織の疾患は、突発性心筋症、糖尿病性心筋症を含む代謝性心筋症、アルコール性心筋症、薬剤誘発性心筋症、虚血性心筋症及び高血圧性心筋症等の心筋の障害（心筋症又は心筋炎）；大動脈、冠動脈、頸動脈、脳動脈、腎動脈、腸骨動脈、大腿動脈、膝窩動脈等の主要血管のアテローム性疾患（大血管性疾患）；網膜細動脈、糸球体細動脈、神経栄養血管、心細動脈、及び目、腎臓、心臓及び中枢及び末梢神経系の関連する毛細血管等の細血管の中毒性、薬剤誘発性及び（高血圧性及び／又は糖尿病性を含む）代謝性障害（微小血管障害）；並びに大動脈、冠動脈、頸動脈、脳動脈、腎動脈、腸骨動脈、大腿動脈、膝窩動脈等の主要血管のアテローム病変のプラーク破裂を含むが、これらに限定されるものではない。

さらに、態様１）〜４）のいずれか１つに従う式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容される塩は、神経炎症の予防又は治療に好適である。神経炎症は、細胞情報伝達分子の産生、グリア若しくはグリアの活性化経路及び反応の活性化、炎症促進性サイトカイン若しくはケモカイン、アストロサイト若しくはアストロサイトの活性化経路及び反応の活性化、ミクログリア若しくはミクログリアの活性化経路及び反応の活性化、一酸化窒素合成酵素の産生及び一酸化窒素の蓄積、急性期タンパク質、シナプトフィジン及びシナプス後肥厚部タンパク９５（ＰＳＤ−９５）の喪失、補体カスケードの構成要素、シナプス機能の喪失若しくは減少、プロテインキナーゼ活性（例えば、細胞死関連プロテインキナーゼ活性）、行動障害、細胞損傷（例えば、神経細胞損傷）、細胞死（例えば、神経細胞死）及び／又はアミロイド班のアミロイドβ沈着等の酸化ストレス関連反応を意味する。

さらに、態様１）〜４）のいずれか１つに従う式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容される塩は、神経障害の予防又は治療に好適である。特に、神経障害は、てんかん、脳卒中、脳虚血、脳性麻痺、再発型多発性硬化症、進行型多発性硬化症、視神経脊髄炎、臨床的に孤発した症候群（ｃｌｉｎｉｃａｌｌｙｉｓｏｌａｔｅｄｓｙｎｄｒｏｍｅ）、アルパース病、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）、老年認知症、レビー小体型認知症、レット症候群、脊髄外傷、外傷性脳損傷、三叉神経痛、慢性炎症性脱髄性多発ニューロパチー、ギラン−バレー症候群、舌咽神経痛、ベル麻痺、重症筋無力症、筋ジストロフィー、進行型筋萎縮症、進行型延髄遺伝性筋萎縮症、ヘルニア性、破裂性若しくは脱出性椎間板症候群、頸椎症、神経叢疾患、胸郭出口破壊症候群、末梢神経障害、軽度の認知機能低下、認知機能低下、アルツハイマー病、パーキンソン病及びハンチントン舞踏病を含むが、これらに限定されるものではない。

さらに、態様１）〜４）のいずれか１つに従う式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容される塩は、疼痛の予防又は治療に好適である。疼痛は、糖尿病性神経障害、帯状疱疹後神経痛、三叉神経痛、有痛性糖尿病性多発神経障害、卒中後痛、切断後痛、骨髄障害性若しくは神経根性疼痛、非定形顔面痛及びカウザルギー様症候群等の状態を例とする神経因性疼痛を含むが、これらに限定されるものではない。

さらに、態様１）〜４）のいずれか１つに従う式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容される塩は、プリオンによる疾患の予防又は治療に好適である。プリオンによる疾患は、伝達性海綿状脳症（ＴＳＥ）としても知られており、クールー、ゲルストマン・ストロイスラー・シャインカー症候群（ＧＳＳ）、致死性家族性不眠症（ＦＦＩ）及びクロイツフェルト・ヤコブ病（ＣＪＤ）を含むが、これらに限定されるものではない。

さらに、態様１）〜４）のいずれか１つに従う式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容される塩は、アミロイドによる障害の治療に好適である。アミロイドによる障害は、アミロイド又はアミロイド様タンパク質により引き起こされ、又はこれらと関連する疾患又は障害と定義される。アミロイド又はアミロイド様タンパク質により引き起こされるか又はこれらと関連する疾患又は障害は、軽度の認知障害（ＭＣＩ）等の認知記憶能力の喪失により特徴づけられる疾患又は状態を含む、アルツハイマー病（ＡＤ）；レビー小体型認知症；ダウン症；アミロイドーシスを伴う脳内出血を含むが、これらに限定されるものではない。別の態様においては、アミロイド又はアミロイド様タンパク質により引き起こされるか又はこれらと関連する疾患又は障害は、進行性核上性麻痺、アミロイド軽鎖アミロイド症、家族性アミロイドニューロパチー、多発性硬化症、クロイツフェルト・ヤコブ病、パーキンソン病、血管性認知症、ＨＩＶ−関連痴呆、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）、封入体筋炎（ＩＢＭ）、成人発症型糖尿病及び老人性心アミロイドーシス）を含む。

さらに、態様１）〜４）のいずれか１つに従う式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容される塩は、免疫応答の調節に好適である。免疫応答の調節は、少なくとも１つの抗原と少なくとも１つの態様１）〜４）のいずれか１つに従う式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容される塩の組成物を対象に投与することに基づく方法を含むが、これらに限定されるものではない。いくつかの場合においては、抗原含有組成物を最初に投与し、次いで、少なくとも１つの態様１）〜４）のいずれか１つに従う式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容される塩の組成物を投与する。他の場合においては、抗原含有組成物が最後に投与される。異なる組成物の投与は、同時に行ってもよく、連続的に行ってもよく、又は異なる時間に行ってもよい。これらの方法及び組成物は、治療的及び予防的免疫化（すなわち、獲得及び／又は自然免疫応答の意図的な誘発、増強（ｅｎｈａｎｃｅｍｅｎｔ）、強化（ｉｎｔｅｎｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ）又は調節）のために供されるものである。特記すべき利点として、以下の１又は２以上を含みうる：
１）抗原を単独で投与した場合と比較した、態様１）〜４）に従う少なくとも１つの式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容される塩及び抗原の投与に続く免疫応答の促進；
２）少量の抗原（例えば、毒素又は病原体）、又は通常強い免疫応答を惹起しない抗原に対する感受性の増強；及び
３）より効果的な抗腫瘍治療。

さらに、態様１）〜４）のいずれか１つに従う式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容される塩は、嚢胞性線維症、肺線維症、肺高血圧、創傷治癒、糖尿病性腎症、移植組織における炎症の軽減、病原微生物により引き起こされる炎症性疾患の予防又は治療に好適である。

特に、態様１）〜４）のいずれか１つに従う式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容される塩は、下記の群の疾患及び障害の１つ、幾つか又はすべてから選択される疾患の予防又は治療に好適である：
１）急性肺障害（ＡＬＩ）；成人／急性呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）；慢性閉塞性肺疾患、慢性気管支炎及びそれに伴う呼吸困難を含む気道又は肺疾患（ＣＯＰＤ、ＣＯＡＤ又はＣＯＬＤ）、並びに内因性（非アレルギー性）喘息及び外因性（アレルギー性）喘息、軽度の喘息、中等度の喘息、重症喘息、気管支炎性喘息、運動誘発喘息、職業性喘息及び細菌感染に続いて誘発される喘息を含む、いかなるタイプの、又はいかなる病因によるかを問わない喘息等の炎症性疾患、閉塞性気道疾患及びアレルギー；
２）好中球関連障害、特に、過剰−好中球増多症を含む、気道及び／又は肺に影響を与えるような気道の好中球関連障害；歯周炎；糸球体腎炎；嚢胞性線維症；等の炎症性疾患及び乾癬、接触皮膚炎、アトピー性皮膚炎、ヘルペス状皮膚炎、硬皮症、過敏性血管炎、じんましん、紅斑性狼瘡及び表皮剥離；等の皮膚病；
３）結膜炎、角膜乾燥症及び春季カタル等の眼に影響を与える疾患及び状態；自己免疫反応が関連し、又は自己免疫相若しくは自己免疫的な病因を有する炎症性疾患；並びに自己免疫性炎症性腸疾患（例えば、潰瘍性大腸炎及びクローン病）；等の炎症相を有する疾患；
４）ＧＵＮ−４ｖ、ＧＵＮ−７ｗｔ、ＡＧ２０４、ＡＧ２０６、ＡＧ２０８、ＨＣＭ３０５、ＨＣＭ３０８、ＨＣＭ３４２、ｍＳＴＤ１０４及びＨＣＭ３０９等のＨＩＶ−１及びＨＩＶ−２株によって引き起こされる疾患及び障害等のＨＩＶによるレトロウイルス感染；
５）細胞情報伝達分子の産生、グリア又はグリアの活性化経路及び反応の活性化、炎症促進性サイトカイン又はケモカイン、アストロサイト又はアストロサイトの活性化経路及び反応の活性化、ミクログリア又はミクログリアの活性化経路及び反応の活性化、アミロイド班のアミロイドβ沈着等の酸化ストレス関連反応に関連する神経炎症；
６）脳卒中、脳虚血、アルツハイマー病及びパーキンソン病等の神経障害；
７）伝達性海綿状脳症（ＴＳＥ）としても知られている、クールー、ゲルストマン・ストロイスラー・シャインカー症候群（ＧＳＳ）、致死性家族性不眠症（ＦＦＩ）及びクロイツフェルト・ヤコブ病（ＣＪＤ）等のプリオンによる疾患；
８）アミロイドによる障害；
９）嚢胞性線維症、創傷治癒及び病原微生物により引き起こされる炎症性疾患。

最も好ましくは、態様１）〜４）のいずれか１つに従う式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容される塩は、急性肺障害（ＡＬＩ）；喘息；嚢胞性線維症；角膜乾燥症；炎症性腸疾患；関節リウマチ；及びアルツハイマー病からなる群より選択される疾患の予防又は治療に好適である。

本発明はまた、上記の疾患の治療及び／又は予防のための医薬組成物の製造のための態様１）〜４）のいずれか１つに従う式（Ｉ）の化合物の使用に関する。

本発明はまた、態様１）〜４）のいずれか１つに従う式（Ｉ）の化合物の、薬学的に許容される塩並びに医薬組成物及び製剤に関する。

本発明に従う医薬組成物は、活性成分としての態様１）〜４）のいずれか１つに従う式（Ｉ）の化合物の少なくとも１つ（又は、その薬学的に許容される塩）と、任意に、担体及び／又は希釈剤及び／又はアジュバントとを含む。

態様１）〜４）のいずれか１つに従う式（Ｉ）の化合物及びそれらの薬学的に許容される塩は、医薬として、たとえば（特に経口等の）経腸又は（局所的適用又は吸入を含む）非経口投与のための医薬組成物の形態で使用することができる。

医薬組成物の製造は、いずれの当業者によく知られた様式で（例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ、ＴｈｅＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＰｒａｃｔｉｃｅｏｆＰｈａｒｍａｃｙ、２１ｓｔＥｄｉｔｉｏｎ（２００５）、Ｐａｒｔ５、「ＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＭａｎｕｆａｃｔｕｒｉｎｇ」［ＬｉｐｐｉｎｃｏｔｔＷｉｌｌｉａｍｓ＆Ｗｉｌｋｉｎｓにより出版］参照。）、記載される式（Ｉ）の化合物又はこれらの薬学的に許容される塩を、任意にその他の治療的に有益な物質と組み合わせて、適切な無毒の不活性な治療上適合性のある固体又は液体の担体材料、及び必要に応じて、通常の薬学的アジュバントと共に、製剤投与形態とすることにより遂行することができる。

本発明はまた、薬学的に活性な量の態様１）〜４）のいずれか１つに従う式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容される塩を患者に投与することを含む、本明細書に言及した疾患又は障害の予防又は治療方法に関する。

本明細書における、式Ｉ又はＩ_ＳＴ１の化合物に対するいかなる言及も、適宜かつ文脈に応じて、そのような化合物の塩（特に、薬学的に許容される塩）にも言及しているものと解される。式Ｉの化合物に対して示した好適性は、当然のことながら、式Ｉ_ＳＴ１の化合物並びに式Ｉ又は式Ｉ_ＳＴ１の化合物の塩及び薬学的に許容される塩にも適宜準用される。同様のことが、医薬としてのこれらの化合物に、これらの化合物を活性成分として含む医薬組成物に、又は疾患の治療のための医薬の製造のためのこれらの化合物の使用に適用される。

温度に関して使用されていない場合には、数値「Ｘ」の前に置かれる「約」（あるいは「およそ」）という用語は、本出願において、Ｘ−１０％ＸからＸ＋１０％Ｘの間、好ましくはＸ−５％ＸからＸ＋５％Ｘの間を表す。温度の特定の場合には、温度「Ｙ」の前に置かれる「約」（あるいは「およそ」）という用語は、この出願において、Ｙ−１０℃からＹ＋１０℃の間、好ましくはＹ−５℃からＹ＋５℃の間を表す。さらに、ここで使用される「室温」（ｒｔ）という用語は、約２５℃の温度を意味する。

数値の範囲を記述するために「間」という単語が使用される場合は常に、示された範囲の末端の点は明示的にその範囲に含まれると解される。これは、例えば、温度範囲が４０℃と８０℃の間であると記述される場合、末端の点である４０℃と８０℃はその範囲に含まれることを意味し；あるいは、可変数が１と４の間の整数であると定義される場合、可変数は整数の１、２、３又は４であることを意味する。

式（Ｉ）の化合物は、実施例に示された方法によって、又は類似の方法によって製造することができる。最適反応条件は、使用する具体的反応物又は溶媒によって変わるが、このような条件は、当業者により、ルーチンの最適化手順によって決定することができる。

実験の部（この項において、及び明細書の上記の部分において使用される）略語：
Ａｃアセチル
ＡｃＣＮアセトニトリル
ＡｃＯＨ酢酸
ａｑ．水溶液
Ｂｏｃｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル
ｂｐ沸点
ｃａ．約
ＣＯＡＤ慢性閉塞性気道疾患
ＣＯＬＤ慢性閉塞性肺疾患
ＣＯＰＤ慢性閉塞性肺疾患
ＤＡＤダイオードアレイ検出
ＤＥＡジエチルアミン
Ｄｅｏｘｏ−Ｆｌｕｏｒビス（２−メトキシエチル）アミノ硫黄トリフルオリド
ＤＩＰＥＡジイソプロピルエチルアミン
ＤＭＥＭダルベッコ変法イーグル培地
ＤＭＦジメチルホルムアミド
ＤＭＳＯジメチルスルホキシド
ＥＡ酢酸エチル
ＥＣ_５０半数効果濃度
ＥＤＣＮ−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ’−
エチル−カルボジイミド
ＥＬＳＤ蒸発光散乱検出器
ｅｑ．当量
Ｅｔエチル
Ｅｔ_２Ｏジエチルエーテル
Ｅｔ_３Ｎトリエチルアミン
ＥｔＯＨエタノール
ＦＣシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィー
ＦＬＩＰＲ蛍光イメージングプレートリーダー
ＦＰＲＬ１ホルミルペプチド受容体様受容体−１
ＦＰＲＬ２ホルミルペプチド受容体様受容体−２
ｈ時間
Ｈａｎｋ’ｓＢＳＳハンクス平衡塩類溶液
ＨＥＰＥＳ４−（２−ヒドロキシエチル）−１−
ピペラジンエタンスルホン酸
ｈｅｐｔヘプタン
ＨＩＶヒト免疫不全ウイルス
ＨＯＢｔヒドロキシベンゾトリアゾール
ＨＰＬＣ高圧液体クロマトグラフィー
ＩｐＡｃ酢酸イソプロピル
ＬＣ−ＭＳ液体クロマトグラフィー−質量分析
ｌｅｍ発光波長
ｌｅｘ励起波長
Ｍｅメチル
ＭｅＯＨメタノール
ｍｉｎ分
（ｍ）Ｍミリモル
μＭマイクロモル
ＭＰＬＣ中圧液体クロマトグラフィー
ＭＳ質量分析
ｎｍナノメーター
ｎＭナノモル
ＮＭＲ核磁気共鳴
ｏｒｇ．有機
ｐパラ
ＰＧ保護基
ｒｆ保持係数
ｒｐｍ分当たりの回転数
ｒｔ室温
ｓａｔ．飽和した
ＴＦＡトリフルオロ酢酸
ＴＨＦテトラヒドロフラン
ＴＬＣ薄層クロマトグラフィー
ＴＭＳトリメチルシリル
ｔ_Ｒ保持時間
ＵＶ紫外線
Ｖｉｓ可視

Ｉ−化学
全般。すべての温度は摂氏温度（℃）で示す。別段の記載が無い限り、反応はｒｔで行う。

分析用薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）は、０．２ｍｍプレート：Ｍｅｒｃｋ、Ｓｉｌｉｃａｇｅｌ６０Ｆ_２５４を用いて行った。分取用薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）は、０．２又は０．５ｍｍプレート：Ｍｅｒｃｋ、Ｓｉｌｉｃａｇｅｌ６０Ｆ_２５４を用いて行った。検出は、ＵＶ、又はＫＭｎＯ_４（３ｇ）、Ｋ_２ＣＯ_３（２０ｇ）、ＮａＯＨ５％（３ｍＬ）及びＨ_２Ｏ（３００ｍＬ）の溶液を用い、次いで加熱することにより行った。

フラッシュカラムクロマトグラフィー（ＦＣ）及びろ過は、Ｓｉｌｉｃａｇｅｌ６０Ｍｅｒｃｋ（０．０６３−０．２００ｍｍ）又はＭａｃｈｅｒｅｙ−Ｎａｇｅｌシリカゲル（０．０６３−０．２００ｍｍ）を用いて行った：溶出は、ＥＡ、Ｅｔ_２Ｏ、ｈｅｐｔ、ヘキサン、石油エーテル、ＣＨ_２Ｃｌ_２、ＣＨＣｌ_３、ＭｅＯＨ、ＮＨ_４ＯＨ又はこれらの混合物を用いて行った。

ＭＰＬＣは、ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌｓｏｒｂｅｎｔｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙの、ｉｓｏｌｕｔｅ（登録商標）ＳＰＥＦｌａｓｈＳＩＩＩカラムを用い、溶出は、ＥＡ、Ｅｔ_２Ｏ、ｈｅｐｔ、ヘキサン、ＣＨ_２Ｃｌ_２、ＣＨＣｌ_３、ＭｅＯＨ、ＮＨ_４ＯＨ又はこれらの混合物を用いて行った。

ＬＣ−ＭＳ−条件０１（別段の記載が無い限り）：分析用：Ａｇｉｌｅｎｔ１１００
ＢｉｎａｒｙＰｕｍｐ及びＤＡＤを備えたＴｈｅｒｍｏＦｉｎｎｉｇａｎＭＳＱ
ＰｌｕｓＭＳ。カラム：ＡｇｉｌｅｎｔＴｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓのＺｏｒｂａｘ
ＳＢ−ＡＱ５μｍ、４．６ｘ５０ｍｍＩＤ。溶出液：Ａ：Ｈ_２Ｏ＋０．０４％ＴＦＡ；Ｂ：ＣＨ_３ＣＮ；勾配：１分に渡り５％Ｂから９５％Ｂへ。流速：４．５０ｍＬ／ｍｉｎ。検出：ＵＶ／Ｖｉｓ及び／又はＥＬＳＤ及びＭＳ、ｔ_Ｒはｍｉｎ．で示す。

ＬＣ−ＭＳ−条件０２（別段の記載が無い限り）：分析用：ポンプ：ＤｉｏｎｅｘＨＰＧ−３０００ＢｉｎａｒｙＰｕｍｐ、ＭＳ：ＴｈｅｒｍｏＭＳＱＭＳ、ＤＡ
Ｄ：Ｄｉｏｎｅｘ３０００ＲＳ、ＥＬＳＤ：ＳｅｄｅｒｅＳｅｄｅｘ８５。カラム：ＤｉｏｎｅｘＴＣＣ−３２００コンパートメント内で温度制御された、ＷａｔｅｒｓのＡｔｌａｎｔｉｓＴ３、５μｍ、４．６ｘ３０ｍｍ。溶出液：Ａ：Ｈ_２Ｏ＋０．０４％ＴＦＡ；Ｂ：ＣＨ_３ＣＮ；勾配：１．００ｍｉｎに渡り５％Ｂから９５％Ｂへ。流速：４．５ｍＬ／ｍｉｎ。検出：ＵＶ／Ｖｉｓ及び／又はＥＬＳＤ及びＭＳ、ｔ_Ｒはｍｉｎ．で示す。

ＬＣ−ＭＳ−条件０３（別段の記載が無い限り）：分析用。ポンプ：ＤｉｏｎｅｘＨＰＧ−３２００ＲＳ、ＭＳ：ＴｈｅｒｍｏＭＳＱＰｌｕｓ、ＤＡＤ：ＤｉｏｎｅｘＤＡＤ−３０００ＲＳ、ＥＬＳＤ：ＳｅｄｅｒｅＳｅｄｅｘ８５。カラム：ＤｉｏｎｅｘＴＣＣ−３２００コンパートメント内で温度制御された、ＡｇｉｌｅｎｔＴｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓのＺｏｒｂａｘＳＢ−ＡＱ３．５μｍ、４．６ｘ５０ｍｍＩＤ。溶出液：Ａ：Ｈ_２Ｏ＋０．０４％ＴＦＡ；Ｂ：ＣＨ_３ＣＮ。方法：勾配：１．００分に渡り５％Ｂから９５％Ｂへ。流速：４．５ｍＬ／ｍｉｎ。検出：ＵＶ／Ｖｉｓ及び／又はＥＬＳＤ、及びＭＳ、ｔ_Ｒはｍｉｎ．で示す。

ＬＣ−ＭＳ−条件４（別段の記載が無い限り）：分析用。ポンプ：ＡｇｉｌｅｎｔＧ４２２０Ａ、ＭＳ：ＴｈｅｒｍｏＭＳＱＰｌｕｓ、ＤＡＤ：ＡｇｉｌｅｎｔＧ４２１２Ａ、ＥＬＳＤ：ＳｅｄｅｒｅＳｅｄｅｘ９０。カラム：ＤｉｏｎｅｘＴＣＣ−３２００コンパートメント内で温度制御された、ＡｇｉｌｅｎｔＴｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓのＺｏｒｂａｘＳＢ−ＡＱ３．５μｍ、４．６ｘ５０ｍｍＩＤ。溶出液：Ａ：Ｈ_２Ｏ＋０．０４％ＴＦＡ；Ｂ：ＣＨ_３ＣＮ。溶出液の調整（ＥｌｕｅｎｔＭａｋｅＵｐ）：ＣＨ_３ＣＮ／Ｈ_２Ｏ７：３を０．２５０ｍＬ／ｍｉｎで。方法：勾配：１．０７ｍｉｎに渡り５％Ｂから９５％Ｂへ。流速：４．５ｍＬ／ｍｉｎ。検出：ＵＶ／Ｖｉｓ及び／又はＥＬＳＤ及びＭＳ、ｔ_Ｒはｍｉｎ．で示す。

分取用ＨＰＬＣ：ＷａｔｅｒｓのＸ−ＢｒｉｄｇｅＣ１８５μｍ、５０ｘ１９ｍｍＩＤ。溶出液：Ａ：Ｈ_２Ｏ＋０．５％ＮＨ_４ＯＨ；Ｂ：ＣＨ_３ＣＮ；勾配：５ｍｉｎに渡って１０％Ｂから９０％Ｂへ。流速：４０．０ｍＬ／ｍｉｎ。検出：ＵＶ／Ｖｉｓ及び／又はＥＬＳＤ、及びＭＳ、ｔ_Ｒはｍｉｎ．で示す。

キラルＨＰＬＣ、分析用：（Ｒ，Ｒ）Ｗｈｅｌｋ−Ｏ１２５０ｘ４．６ｍｍＩＤ、５μｍ。溶出液Ａ（８０％）：ヘプタン＋０．０５％ＤＥＡ。溶出液Ｂ（２０％）：エタノール＋０．０５％ＤＥＡ。流速：０．８ｍＬ／ｍｉｎ。検出：ＵＶ／Ｖｉｓ、ｔ_Ｒはｍｉｎ．で示す。

ＮＭＲ：ＢｒｕｋｅｒＡｖａｎｃｅ４００（４００ＭＨｚ）；ＶａｒｉａｎＭｅｒｃｕｒｙ３００（３００ＭＨｚ）；化学シフトは、使用する溶媒と関連して、ｐｐｍで示す；多重度：ｓ＝一重項、ｄ＝二重項、ｔ＝三重項、ｑ＝四重項、ｐ＝五重項、ｈｅｘ＝六重項、ｈｅｐｔ＝七重項、ｍ＝多重項、ｂｒ＝広域、結合定数はＨｚで示す。

以下の実施例は本発明を説明するものであり、その範囲を限定するものではまったくない。

中間体の合成：
一般的手順Ａ：Ｂｏｃ脱保護
ガラスバイアル内で、不活性雰囲気下（Ｎ_２）、Ｂｏｃ−保護アミン（１．０ｅｑ．）をＣＨ_２Ｃｌ_２中に溶解したものを、ジオキサン中４ＮＨＣｌ（１０．０ｅｑ．）で処理し、反応混合物を、反応が完結するまで０℃又はｒｔで撹拌した。次いで、反応混合物を
減圧下で濃縮し、必要に応じて残渣をＦＣ又はＨＰＬＣで精製し、所望の化合物を得た。

スピロ［２．４］ヘプタ−４，６−ジエン：

磁気攪拌棒を備えた、火炎乾燥した丸底スラスコ内において、不活性雰囲気下（Ｎ_２）、ベンジルトリエチルアンモニウムクロリド（１８．０ｇ、７８ｍｍｏｌ）を５０％ＮａＯＨ水溶液（１．２Ｌ）中に混合したものを、４５℃に加熱した。シクロペンタジエン（シクロペンタジエン二量体の１８０℃におけるクラッキングにより形成、１４０ｍＬ、１．７０ｍｏｌ）を１，２−ジクロロエタン（１２２ｍＬ、１．５５ｍｏｌ）中に溶解した冷溶液を、内部温度を５５℃未満に保ちながら、攪拌したＮａＯＨ溶液に加えた。添加完了後（ｃａ．１．７５ｈ）、反応混合物を５０℃にて２ｈ攪拌し、ｒｔに冷ました。層を分離し、有機層を１ＭＮａＯＨで洗浄し、乾燥し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、ろ過した。粗製の茶色の液体を減圧下で蒸留し（８５−９５ｍｂａｒ）、表題化合物を無色の液体として得た（８０ｍｂａｒにおいてｂｐ＝４５−５０℃）。^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ６．５８（ｍ、２Ｈ）、６．１９（ｍ、２Ｈ）、１．７１（ｓ、４Ｈ）。

ＤｉｅｌｓＡｌｄｅｒ反応−（５Ｒ，６Ｒ）−５，６−ビス−［（１−（１Ｓ）−エトキシカルボニル）−エトキシ−カルボニル］−（４Ｓ，７Ｒ）−［４，７−エテニレン−スピロ［２．４］ヘプタン］の形成：

磁気攪拌棒を備えた、火炎乾燥した丸底スラスコ内において、不活性雰囲気下（Ｎ_２）、（Ｅ）−１，２−ビス−［（（１Ｓ）−１−エトキシカルボニル）−エトキシ−カルボニル］−エテン（７．４０ｇ、２２．７ｍｍｏｌ）をｎ−ヘキサン（７６ｍＬ）中に溶解したものに、スピロ［２．４］ヘプタ−４，６−ジエン（３．１４ｇ、３４．０ｍｍｏｌ）をｒｔにて加えた。反応混合物をこの温度で一晩攪拌した。混合物を減圧下で濃縮し、粗製の残渣をＦＣ（ｈｅｐｔ／ＥＡ、９：１）で精製した。表題化合物を薄黄色のオイルとして得た。ＴＬＣ：ｒｆ（ｈｅｐｔ／ＥＡ、９：１）＝０．２５。ＬＣ−ＭＳ−条件０１：ｔ_Ｒ＝１．１２ｍｉｎ；［Ｍ＋Ｈ］^＋＝４０９．００。^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ６．４４（ｄｄ、Ｊ＝５．５、３．０Ｈｚ、１Ｈ）、６．３２（ｄｄ、Ｊ＝５．５、２．８Ｈｚ、１Ｈ）、５．１２（ｑ、Ｊ＝７．１Ｈｚ、１Ｈ）、５．０６（ｑ、Ｊ＝７．１Ｈｚ、１Ｈ）、４．２８−４．１４（ｍ、４Ｈ）、３．７６（ａｐｐ．ｔ、Ｊ＝４．０Ｈｚ、１Ｈ）、２．９２（ｄ、Ｊ＝４．８Ｈｚ、１Ｈ）、２．８６（ｍ、１Ｈ）、２．８０（ｍ、１Ｈ）、１．５５−１．４７（ｍ、６Ｈ）、１．２９（ｔ、Ｊ＝７．３Ｈｚ、３Ｈ）、１．２９（ｔ、Ｊ＝７．３Ｈｚ、３Ｈ）、０．７０（ｍ、１Ｈ）、０．５６−０．４４（ｍ、３Ｈ）。

けん化−（４Ｓ，７Ｒ）−［４，７−エテニレン−スピロ［２．４］ヘプタン］−（５Ｒ，６Ｒ）−５，６−ビス−カルボン酸の形成：

（５Ｒ，６Ｒ）−５，６−ビス−［（１−（１Ｓ）−エトキシカルボニル）−エトキシ−カルボニル］−（４Ｓ，７Ｒ）−［４，７−エテニレン−スピロ［２．４］ヘプタン］（９．５１ｇ、２３．２８ｍｍｏｌ）をＴＨＦ／Ｈ_２Ｏ（１：１、２３２ｍＬ）中に溶解したものに、ＬｉＯＨ（３．９１ｇ、９３．１３ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物をｒｔにて一晩攪拌した。１ＮＨＣを加え、反応混合物のｐＨをｐＨ＝３に調整し、層を分離し、水層をＥＡ（３ｘ）で抽出した。有機性抽出物を合わせたものをＭｇＳＯ_４で乾燥し、ろ過し、減圧下で濃縮した。粗製の残渣をＦＣ（ＣＨ_２Ｃｌ_２／ＭｅＯＨ、９：１）で精製し、表題化合物を無色のオイルとして得た。ＴＬＣ：ｒｆ（ＣＨ_２Ｃｌ_２／ＭｅＯＨ、９：１）＝０．３１。ＬＣ−ＭＳ−条件０１：ｔ_Ｒ＝０．７２ｍｉｎ；［Ｍ＋ＣＨ_３ＣＮ＋Ｈ］^＋＝２５０．１８。

ヨードラクトン化−６−ヨード−２−オキソヘキサヒドロスピロ［３，５−メタノシクロペンタ［ｂ］フラン−４，１’−シクロプロパン］−７−カルボン酸の形成：

（４Ｓ，７Ｒ）−［４，７−エテニレン−スピロ［２．４］ヘプタン］−（５Ｒ，６Ｒ）−５，６−ビス−カルボン酸（５．６０ｇ、２２．３２ｍｍｏｌ）をＣＨ_２Ｃｌ_２（３３ｍＬ）中に溶解したものに、ＮａＨＣＯ_３（２．０６ｇ、２４．５６ｍｍｏｌ）、水（１００ｍＬ）、ＫＩ（１．３７ｇ、８２．６０ｍｍｏｌ）及びＩ_２（６．８０ｇ、２６．７９ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物をｒｔにて３ｈ攪拌した。反応を飽和Ｎａ_２Ｓ_２Ｏ_３水溶液の添加によりクェンチした。層を分離し、水層をＣＨ_２Ｃｌ_２（３ｘ）で抽出した。有機性抽出物を合わせたものをＭｇＳＯ_４で乾燥し、ろ過し、減圧下で濃縮した。粗製のフォームをＦＣ（ＥＡ）により精製し、表題化合物を白色の固体として得た。ＴＬＣ：ｒｆ（ＥＡ）＝０．３３。

エステル化−メチル６−ヨード−２−オキソヘキサヒドロスピロ［３，５−メタノシクロペンタ［ｂ］フラン−４，１’−シクロプロパン］−７−カルボキシレートの形成：

磁気攪拌棒を備えた、火炎乾燥した丸底スラスコ内において、不活性雰囲気下（Ｎ_２）、６−ヨード−２−オキソヘキサヒドロスピロ［３，５−メタノシクロペンタ［ｂ］フラン−４，１’−シクロプロパン］−７−カルボン酸（５．００ｇ、１４．９６ｍｍｏｌ）を乾燥ＭｅＯＨ（７５ｍＬ）中に溶解したものに、ＴＭＳＣＨ_２Ｎ_２（ヘキサン中２．０Ｍ、３７．０ｍＬ、７４．８３ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物をｒｔにて一晩攪拌し、減圧下で濃縮し、ＦＣ（ｈｅｐｔ／ＥＡ、４：１）で精製し、表題化合物を白色の固体として得た。ＴＬＣ：ｒｆ（ｈｅｐｔ／ＥＡ、４：１）＝０．１８。

レトロ−ヨードラクトン化−（６Ｒ）−６−メトキシカルボニル−（４Ｓ，７Ｒ）−［４，７−エテニレン−スピロ［２．４］ヘプタン］−（５Ｒ）−５−カルボン酸の形成：

磁気攪拌棒を備えた、火炎乾燥した丸底スラスコ内において、不活性雰囲気下（Ｎ_２）、メチル６−ヨード−２−オキソヘキサヒドロスピロ［３，５−メタノシクロペンタ［ｂ］フラン−４，１’−シクロプロパン］−７−カルボキシレート（２．８６ｇ、８．２１ｍｍｏｌ）を酢酸（２９ｍＬ）中に溶解したものに、亜鉛粉末（８．０６ｇ、１２３．２３ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を６５℃にて４ｈ攪拌し、ｒｔに冷却し、ろ過し、水とＥＡの間で分画した。層を分離し、水層をＥＡ（３ｘ）で抽出した。有機性抽出物を合わせたものを塩水（ｂｒｉｎｅ）で洗浄し、ＭｇＳＯ_４で乾燥し、ろ過し、減圧下で濃縮した。粗製の残渣をＦＣ（ｈｅｐｔ／ＥＡ、１：１）で精製し、表題化合物を無色のオイルとして得た。ＴＬＣ：ｒｆ（１：１、ｈｅｐｔ／ＥＡ）＝０．４１。

二重結合の還元−（６Ｒ）−６−メトキシカルボニル−（４Ｓ，７Ｒ）−［４，７−エチレン−スピロ［２．４］ヘプタン］−（５Ｒ）−５−カルボン酸の形成：

磁気攪拌棒を備えた、火炎乾燥した丸底スラスコ内において、不活性雰囲気下（Ｎ_２）、（６Ｒ）−６−メトキシカルボニル−（４Ｓ，７Ｒ）−［４，７−エテニレン−スピロ［２．４］ヘプタン］−（５Ｒ）−５−カルボン酸（２２０ｍｇ、０．９９ｍｍｏｌ）、Ｐｄ／Ｃ１０％（４４ｍｇ）及びシクロヘキセン（０．２０ｍＬ、１．９８ｍｍｏｌ）を
乾燥ＴＨＦ（２．５ｍＬ）中に懸濁した脱酸素懸濁液を、還流下にて２ｈ攪拌した。反応混合物をセライトを通してろ過し、フィルターケークをＴＨＦで洗浄した。ろ液を減圧下で濃縮し、表題化合物を白色の固体として得た。ＴＬＣ：ｒｆ（ｈｅｐｔ／ＥＡ、２：３）＝０．４８。

２−（クロロメチル）オキサゾール−４−カルバルデヒド：
磁気撹拌棒を備えた火炎乾燥した丸底フラスコ内において、不活性雰囲気下（Ｎ_２）、メチル２−（クロロメチル）オキサゾール−４−カルボキシレート（２５．００ｇ、１４２．００ｍｍｏｌ）をＣＨ_２Ｃｌ_２（４７５ｍＬ）中に溶解した−７８℃に冷却した溶液に、ＣＨ_２Ｃｌ_２中の１Ｍ水素化ジイソブチルアルミニウム（２８５．００ｍＬ、２８５．００ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を−７８℃にて３ｈ撹拌した。メタノール（１２５ｍＬ）を注意深く加え、反応混合物をｒｔに温めた。次いで、反応混合物をＣＨ_２Ｃｌ_２（５００ｍＬ）で希釈し、Ｒｏｃｈｅｌｌｅ塩の飽和水溶液で洗浄した。有機層をＭｇＳＯ_４上で乾燥し、ろ過し、溶媒を減圧下で除き、表題化合物をオレンジ色のオイルとして得た。ＬＣ−ＭＳ−条件０２：ｔ_Ｒ＝０．４０ｍｉｎ；［Ｍ＋ＣＨ３ＣＮ＋Ｈ］^＋＝１８７．４４。

１−（２−（クロロメチル）オキサゾール−４−イル）エタノール：
磁気撹拌棒を備えた火炎乾燥した丸底フラスコ内において、不活性雰囲気下（Ｎ_２）、２−（クロロメチル）オキサゾール−４−カルバルデヒド（１８．１０ｇ、１２４．３６ｍｍｏｌ）をＣＨ_２Ｃｌ_２（６２５ｍＬ）中に溶解したものを、０℃にて、トリメチルアルミニウム（ヘプタン中の２Ｍ溶液を３１１．００ｍＬ、６２１．８０ｍｍｏｌ）で処理した。次いで、反応混合物を０℃にて６０ｍｉｎ撹拌した。次いで、飽和ＮＨ_４Ｃｌ水溶液を添加し、水層をＣＨ_２Ｃｌ_２で２回、そしてＥＡで２回抽出した。有機抽出物を合わせたものをＭｇＳＯ_４上で乾燥し、ろ過し、溶媒を減圧下で除いた。粗製残渣をＦＣ（ｈｅｐｔ／ＥＡ、３：７）で精製し、表題化合物を黄色のオイルとして得た。ＴＬＣ：ｒｆ（ｈｅｐｔ／ＥＡ、３：７）＝０．３８。ＬＣ−ＭＳ−条件０２：ｔ_Ｒ＝０．４３ｍｉｎ，［Ｍ＋Ｈ］^＋＝１６２．１２。

１−（２−（クロロメチル）オキサゾール−４−イル）エタノン：
磁気撹拌棒を備えた火炎乾燥した丸底フラスコ内において、不活性雰囲気下（Ｎ_２）、１−（２−（クロロメチル）オキサゾール−４−イル）エタノール（１４．９０ｇ、９２．２０ｍｍｏｌ）をＡｃＣＮ（４５８ｍＬ）中に溶解したものを、ｒｔにて、ＭｎＯ_２（４４．５４ｇ、４６１．００ｍｍｏｌ）で処理した。反応混合物をｒｔにて５ｈ撹拌した後、セライトを通してろ過した。溶媒を減圧下で除いた。粗製残渣をＭＰＬＣ（ｈｅｐｔ／ＥＡ，１：１）で精製し、表題化合物を白色の固体として得た。ＴＬＣ：ｒｆ（ｈｅｐｔ／ＥＡ、１：１）＝０．５０。ＬＣ−ＭＳ−条件０２：ｔ_Ｒ＝０．４７ｍｉｎ、［Ｍ＋Ｈ］^＋＝１６０．１１。

２−（クロロメチル）−４−（１，１−ジフルオロエチル）オキサゾール：
磁気撹拌棒を備えた火炎乾燥した丸底フラスコ内において、不活性雰囲気下（Ｎ_２）、ＣＨ_２Ｃｌ_２（２．５ｍＬ）中の１−（２−（クロロメチル）オキサゾール−４−イル）エタノン（１．５５ｇ、９．７１ｍｍｏｌ）を、Ｄｅｏｘｏ−Ｆｌｕｏｒ（トルエン中の５０％溶液を１４．３０ｍＬ、３８．９０ｍｍｏｌ）で処理し、４５℃にて７２ｈ撹拌した。溶液を０℃に冷却し、１ＭＮａＯＨ水溶液（３５ｍＬ）を注意深く加え（発熱（ｅｘｏｔｅｒｍｉｃ））、得られた混合物をＣＨ_２Ｃｌ_２で希釈した。層を分離し、有機層を飽和ＮａＣｌ水溶液及び水で洗浄し、ＭｇＳＯ_４上で乾燥し、ろ過し、溶媒を減圧下で除いた。残渣をＦＣ（ｈｅｐｔ／ＩｐＡｃ５：１）で精製し、表題化合物を黄色のオイルとして得た。ＬＣ−ＭＳ−条件０３：ｔ_Ｒ＝０．７２ｍｉｎ，［Ｍ＋Ｈ］^＋＝１８２．０６。

２−（アジドメチル）−４−（１，１−ジフルオロエチル）オキサゾール：
磁気撹拌棒を備えた丸底フラスコ内において、不活性雰囲気下（Ｎ_２）、アジ化ナトリウム（３８０ｍｇ、５．７８ｍｍｏｌ）を、２−（クロロメチル）−４−（１，１−ジフルオロエチル）オキサゾール（１．００ｇ、５．５１ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（２５ｍＬ）中に溶解したものに添加し、８０℃に４ｈ加熱した。反応混合物を水で希釈し、Ｅｔ_２Ｏで抽出した。有機相をＭｇＳＯ_４上で乾燥し、ろ過し、溶媒を減圧下で除き、表題化合物を黄色のオイルとして得た。ＬＣ−ＭＳ−条件０４：ｔ_Ｒ＝０．７３ｍｉｎ、［Ｍ＋Ｈ］^＋＝１８９．３５。

（４−（１，１−ジフルオロエチル）オキサゾール−２−イル）メタンアミン：
磁気撹拌棒及び凝縮器を備えた丸底フラスコ内において、２−（アジドメチル）−４−（１，１−ジフルオロエチル）オキサゾール（１．２５３ｇ、６．６６ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（９０ｍＬ）中に溶解したものに、トリフェニルホスフィンポリスチレン（１．６０ｍｍｏｌ／ｇ、１００−２００メッシュ、２．０９６ｇ、７．９９ｍｍｏｌ）及び水（５ｍＬ）を添加した。得られた混合物を６０℃に３ｈ加熱した。混合物をろ過し、ろ液をＭｇＳＯ_４上で乾燥し、ろ過し、溶媒を減圧下で除き、表題化合物を得た。ＬＣ−ＭＳ−条件０４：ｔ_Ｒ＝０．２４ｍｉｎ、［Ｍ＋Ｈ］^＋＝１６３．２１。

（４−（１，１−ジフルオロエチル）オキサゾール−２−イル）メタンアミンとのカップリング−（１Ｒ、２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−メチル３−（（（４−（１，１−ジフルオロエチル）オキサゾール−２−イル）メチル）カルバモイル）スピロ［ビシクロ［２．２．１］ヘプタン−７，１’−シクロプロパン］−２−カルボキシレートの形成：

磁気撹拌棒を備えた火炎乾燥した丸底フラスコ内において、不活性雰囲気下（Ｎ_２）、（６Ｒ）−６−メトキシカルボニル−（４Ｓ，７Ｒ）−［４，７−エチレン−スピロ［２．４］ヘプタン］−（５Ｒ）−５−カルボン酸（１．００ｇ、４．４６ｍｍｏｌ）を乾燥ＣＨ_２Ｃｌ_２（１６ｍＬ）中に溶解したものに、３滴のＤＭＦ及び塩化オキサリル（０．４２６ｍＬ、４．９３ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物をｒｔにて６０分間撹拌し、減圧下で濃縮した。（４−（１，１−ジフルオロエチル）オキサゾール−２−イル）メタンアミン（０．７２３ｇ、４．４６ｍｍｏｌ）をピリジン（１．０８ｍＬ）中に溶解したものに、塩化アシルをアセトン（６ｍＬ）中に溶解したものを添加し、反応混合物をｒｔにて１ｈ撹拌し、ＥＡで希釈し、１ＮＨＣｌ水溶液、飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液及び塩水で連続的に洗浄した。有機層をＭｇＳＯ_４上で乾燥し、ろ過し、減圧下で濃縮した。残渣をＦＣ（ｈｅｐｔからｈｅｐｔ／ＥＡへ、７：３）で精製し、表題化合物を黄色のオイルとして得た。ＬＣ−ＭＳ−条件０４：ｔ_Ｒ＝０．８４ｍｉｎ；［Ｍ＋Ｈ］^＋＝３６９．２０。

（１Ｒ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−３−（（（４−（１，１−ジフルオロエチル）オキサゾール−２−イル）メチル）カルバモイル）スピロ［ビシクロ［２．２．１］ヘプタン−７，１’−シクロプロパン］−２−カルボン酸：

（１Ｒ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−メチル３−（（（４−（１，１−ジフルオロエチル）オキサゾール−２−イル）メチル）カルバモイル）スピロ［ビシクロ［２．２．１］ヘプタン−７，１’−シクロプロパン］−２−カルボキシレート（１．２７ｇ、３．４５ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（２０ｍＬ）中に溶解したものに、ａｑ．２ＮＮａＯＨ（１６．００ｍＬ、３２．００ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を反応が完結するまでｒｔで撹拌した。次いで、混合物をａｑ．１ＮＨＣｌ中に注ぎ、ＥＡ（３ｘ）で抽出した。有機性抽出物を合わせたものを塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ_４上で乾燥し、ろ過し、減圧下で濃縮し、表題化合物を白色のフォームとして得た。ＬＣ−ＭＳ−条件０４：ｔ_Ｒ＝０．７５ｍｉｎ；［Ｍ＋Ｈ］^＋＝３５５．２５。

ｔｅｒｔ−ブチル３−フルオロ−４−オキソピペリジン−１−カルボキシレート：
磁気攪拌棒を備えた、火炎乾燥した丸底スラスコ内において、不活性雰囲気下（Ｎ_２）、ｔｅｒｔ−ブチル４−オキソピペリジン−１−カルボキシレート（５．００ｇ、２５．０９ｍｍｏｌ）を乾燥ＤＭＦ（２５ｍＬ）中に溶解したものに、クロロトリメチルシラン（５．７７ｍＬ、４５．１７ｍｍｏｌ）、次いでＥｔ_３Ｎ（８．３８ｍＬ、６０．２３ｍｍｏｌ）をｒｔにて加えた。反応混合物を８０℃にて２４ｈ攪拌した。次いで、混合物をｒｔに冷却し、ヘキサンで希釈し、飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液で洗浄した。層を分離し、有機層をＭｇＳＯ_４で乾燥し、ろ過し、減圧下で濃縮した。残渣をＦＣ（ヘキサン／ＥＡ、９：１）で精製し、ｔｅｒｔ−ブチル４−（（トリメチルシリル）オキシ）−５，６−ジヒドロピリジン−１（２Ｈ）−カルボキシレートを無色のオイルとして得た。ＴＬＣ：ｒｆ（ヘキサン／ＥＡ、９：１）＝０．５０。

磁気攪拌棒を備えた、火炎乾燥した丸底スラスコ内において、不活性雰囲気下（Ｎ_２）、ｔｅｒｔ−ブチル４−（（トリメチルシリル）オキシ）−５，６−ジヒドロピリジン−１（２Ｈ）−カルボキシレート（５．００ｇ、１８．４０ｍｍｏｌ）を乾燥アセトニトリル（２５ｍＬ）中に溶解したものに、１−（クロロメチル）−４−フルオロ−１，４−ジアゾニアビシクロ［２．２．２］オクタンジテトラフルオロボレート（７．５５ｇ、２０．３ｍｍｏｌ）をｒｔにて加えた。反応混合物をｒｔにて２ｈ乾燥し、次いでＥＡ中に注ぎ、１％ＮａＨＣＯ_３水溶液と塩水で連続的に洗浄した。有機層をＭｇＳＯ_４で乾燥し、ろ過し、減圧下で濃縮した。残渣をＦＣ（ヘキサン／ＥＡ、４：１）で精製し、表題化合物を薄黄色の固体として得た。ＬＣ−ＭＳ−条件０３：ｔ_Ｒ＝０．５５ｍｉｎ；［Ｍ−ＣＨ_３＋Ｈ］^＋＝２０３．２３；ＴＬＣ：ｒｆ（ヘキサン／ＥＡ、４：１）＝０．１７。

トランス−ｔｅｒｔ−ブチル４−アミノ−３−フルオロピペリジン−１−カルボキシレート及びシス−ｔｅｒｔ−ブチル４−アミノ−３−フルオロピペリジン−１−カルボキシレート：
磁気撹拌棒を備えた火炎乾燥した丸底フラスコ内において、不活性雰囲気下（Ｎ_２）、ｔｅｒｔ−ブチル３−フルオロ−４−オキソピペリジン−１−カルボキシレート（０．８０ｇ、３．６８ｍｍｏｌ）をＭｅＯＨ（１０ｍＬ）中に溶解したものに、酢酸アンモニウム（１．９９ｇ、２５．８０ｍｍｏｌ）を加え、得られた溶液をｒｔで２ｈ撹拌した。
次いで、ＮａＣＮＢＨ_３（０．２９ｇ、４．４２ｍｍｏｌ）を加え、溶液をｒｔで一晩撹拌した。反応混合物を濃縮乾固し、有機物を１％Ｎａ_２ＣＯ_３水溶液からＥＡで抽出した。有機性抽出物を合わせて、塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ_４で乾燥し、ろ過し、減圧下で濃縮した。残渣をＦＣ（ＣＨ_２Ｃｌ_２／ＭｅＯＨ、９：１）で精製し、トランス−ｔｅｒｔ−ブチル４−アミノ−３−フルオロピペリジン−１−カルボキシレートを最初に溶出するジアステレオマーとして、及びシス−ｔｅｒｔ−ブチル４−アミノ−３−フルオロピペリジン−１−カルボキシレートを２番目に溶出するジアステレオマーとして、その双方を自然に固化する無色のオイルとして得た。トランス体のジアステレオマー：ＬＣ−ＭＳ−条件０３：ｔ_Ｒ＝０．４８ｍｉｎ；［Ｍ−ＣＨ_３＋Ｈ］^＋＝２０４．２５；ＴＬＣ：ｒｆ（ＣＨ_２Ｃｌ_２／ＭｅＯＨ、９：１）＝０．３０。シス体のジアステレオマー：ＬＣ−ＭＳ−条件０３：ｔ_Ｒ＝０．４６；［Ｍ＋Ｈ］^＋＝２１９．２６；ＴＬＣ：ｒｆ（ＣＨ_２Ｃｌ_２／ＭｅＯＨ、９：１）＝０．０９。

実施例の製造：
ｔｅｒｔ−ブチル４−（（１Ｒ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−３−（（（４−（１，１−ジフルオロエチル）オキサゾール−２−イル）メチル）カルバモイル）スピロ［ビシクロ［２．２．１］ヘプタン−７，１’−シクロプロパン］−２−イルカルボキサミド）−３，４−トランス−フルオロピペリジン−１−カルボキシレート：

磁気撹拌棒を備えた火炎乾燥した丸底フラスコ内において、不活性雰囲気下（Ｎ_２）、（１Ｒ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−３−（（（４−（１，１−ジフルオロエチル）オキサゾール−２−イル）メチル）カルバモイル）スピロ［ビシクロ［２．２．１］ヘプタン−７，１’−シクロプロパン］−２−カルボン酸（０．２００ｇ、０．５６４ｍｍｏｌ）をＣＨ_２Ｃｌ_２（８．５ｍＬ）中に溶解したものに、トランス−ｔｅｒｔ−ブチル４−アミノ−３−フルオロピペリジン−１−カルボキシレート（０．１４８ｇ、０．６７７ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＨＣｌ（０．２２４ｇ、１．１３０ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（０．０９２ｇ、０．６８ｍｍｏｌ）及びＤＩＰＥＡ（０．２９ｍＬ、１．６９ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を反応が完結するまでｒｔで撹拌した。次いで、水を添加し、層を分離し、有機層をＭｇＳＯ_４上で乾燥し、ろ過し、減圧下で濃縮した。ジアステレオマーをＦＣ（ＥＡ／ヘキサンｓ、７：３）で分離した。最初に溶出するジアステレオマー：ＬＣ−ＭＳ−条件０４：ｔ_Ｒ＝０．９０ｍｉｎ；［Ｍ＋Ｈ］^＋＝５５５．２９；ＴＬＣ：ｒｆ（ヘキサン／ＥＡ、３：７）＝０．５４。２番目に溶出するジアステレオマー：ＬＣ−ＭＳ−条件０４：ｔ_Ｒ＝０．９０ｍｉｎ；［Ｍ＋Ｈ］^＋＝５５５．３０；ＴＬＣ：ｒｆ（ヘキサンｓ／ＥＡ、３：７）＝０．３５。

実施例１：（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−Ｎ^２−（（４−（１，１−ジフルオロエチル）オキサゾール−２−イル）メチル）−Ｎ^３−（トランス−３−フルオロピペリジン−４−イル）スピロ［ビシクロ［２．２．１］ヘプタン−７，１’−シクロプロパン］−２，３−ジカルボキサミド（ジアステレオ異性体１）：
最初に溶出するジアステレオ異性体のｔｅｒｔ−ブチル４−（（１Ｒ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−３−（（（４−（１，１−ジフルオロエチル）オキサゾール−２−イル）メチル）カルバモイル）スピロ［ビシクロ［２．２．１］ヘプタン−７，１’−シクロプロパン
］−２−イルカルボキサミド）−３，４−トランス−フルオロピペリジン−１−カルボキシレートを出発物質として、一般的手順Ａに従う。ＬＣ−ＭＳ−条件０４：ｔ_Ｒ＝０．６２ｍｉｎ；［Ｍ＋Ｈ］^＋＝４５５．２８。キラルＨＰＬＣ、分析用：ｔ_Ｒ＝１５．９１ｍｉｎ。

実施例２：（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−Ｎ^２−（（４−（１，１−ジフルオロエチル）オキサゾール−２−イル）メチル）−Ｎ^３−（トランス−３−フルオロピペリジン−４−イル）スピロ［ビシクロ［２．２．１］ヘプタン−７，１’−シクロプロパン］−２，３−ジカルボキサミド（ジアステレオ異性体２）：
２番目に溶出するジアステレオ異性体のｔｅｒｔ−ブチル４−（（１Ｒ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−３−（（（４−（１，１−ジフルオロエチル）オキサゾール−２−イル）メチル）カルバモイル）スピロ［ビシクロ［２．２．１］ヘプタン−７，１’−シクロプロパン］−２−イルカルボキサミド）−３，４−トランス−フルオロピペリジン−１−カルボキシレートを出発物質として、一般的手順Ｂに従う。ＬＣ−ＭＳ−条件０４：ｔ_Ｒ＝０．６１ｍｉｎ；［Ｍ＋Ｈ］^＋＝４５５．２９。キラルＨＰＬＣ、分析用：ｔ_Ｒ＝１３．０４３ｍｉｎ。

ＩＩ．生物学的アッセイ
ＦＬＩＰＲアッセイ（ＡＬＸ受容体）
実験方法：
細胞内カルシウムの測定：
リコンビナントヒトＡＬＸ受容体及びＧ−タンパク質Ｇα１６（ＨＥＫ２９３−ｈＡＬＸＲ−Ｇα１６）発現細胞を、ＧｒｏｗｉｎｇＭｅｄｉｕｍ（ＧＭ）中で、８０％の培養密度になるまで培養した。細胞解離バッファー（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、１３１５１−０１４）を用いて、細胞を培養皿からはがし、ｒｔにて５ｍｉｎ、アッセイバッファー（ＡＢ）（同量のハンクス平衡塩溶液（Ｈａｎｋ’ｓＢＳＳ）（Ｇｉｂｃｏ、１４０６５−０４９）と、ＰｈｅｍｏｌＲｅｄを含まないＤＭＥＭ（Ｇｉｂｃｏ、１１８８０−０２８））中にて１’０００ｒｐｍで遠心して集めた。５％のＣＯ_２下、１μＭのＦｌｕｏ−４（ＡＭ）（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、Ｆ１４２０２）及び２０ｍＭのＨＥＰＥＳ（Ｇｉｂｃｏ、１５６３０−０５６）を添加したＡＢ中で、３７℃にて６０ｍｉｎインキュベートした後、細胞を洗浄し、ＡＢに再懸濁した。次に、それらを、３８４−ウェルのＦＬＩＰＲアッセイプレート（Ｇｒｅｉｎｅｒ、７８１０９１）上に、１ウェル当たり７０μｌ、５０’０００個を播種し、１’０００ｒｐｍで１ｍｉｎ遠心して沈殿させた。被検化合物の保存溶液はＤＭＳＯ中に１０ｍＭの濃度で調製し、ＡＢで段階希釈することにより活性用量反応曲線に必要な濃度とした。対照アゴニストとしては、ＷＫＹＭＶｍ（ＰｈｏｅｎｉｘＰｅｐｔｉｄｅｓ）を用いた。ＦＬＩＰＲＴｅｔｒａ装置（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ
Ｄｅｖｉｃｅｓ）は製造元の標準使用説明書に従って操作し、ＤＭＳＯ中に１０ｍＭの濃度で溶解し、所望の最終濃度を得るために実験に先立ってアッセイバッファーで希釈した被検化合物を４μｌ添加した。被検化合物添加の前後における蛍光の変化を、ｌｅｘ＝４８８ｎｍ、ｌｅｍ＝５４０ｎｍにてモニターした。化合物添加後の、ベースレベルを超える発光強度のピーク値を、ベースラインを差し引いた後に出力した。値は、ベースラインの値（ＡＢの添加）を差し引いた後、ハイレベルコントロール（ＷＫＹＭＶｍ化合物、１０ｎＭの最終濃度）に基づいて調整した。

例示化合物のＡＬＸ受容体に対するアゴニスト活性（ＥＣ_５０値、ｎ回反復の中央値）を表１に示す。

ＦＬＩＰＲアッセイ（ＦＰＲ１受容体）
実験方法：
細胞内カルシウムの測定：
リコンビナントヒトＦＰＲ１受容体及びＧ−タンパク質Ｇα１６（ＨＥＫ２９３−ｈＦＰＲ１−Ｇα１６）発現細胞を、ＧｒｏｗｉｎｇＭｅｄｉｕｍ（ＧＭ）中で、８０％の培養密度になるまで培養した。細胞解離バッファー（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、１３１５１−０１４）を用いて、細胞を培養皿からはがし、ｒｔにて５ｍｉｎ、アッセイバッファー（ＡＢ）（同量のハンクス平衡塩溶液（Ｈａｎｋ’ｓＢＳＳ）（Ｇｉｂｃｏ、１４０６５−０４９）と、ＰｈｅｍｏｌＲｅｄを含まないＤＭＥＭ（Ｇｉｂｃｏ、１１８８０−０２８））中にて１’０００ｒｐｍで遠心して集めた。５％のＣＯ_２下、１μＭのＦｌｕｏ−４（ＡＭ）（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、Ｆ１４２０２）及び２０ｍＭのＨＥＰＥＳ（Ｇｉｂｃｏ、１５６３０−０５６）を添加したＡＢ中で、３７℃にて６０ｍｉｎインキュベートした後、細胞を洗浄し、ＡＢに再懸濁した。次に、それらを、３８４−ウェルのＦＬＩＰＲアッセイプレート（Ｇｒｅｉｎｅｒ、７８１０９１）上に、１ウェル当たり７０μｌ、５０’０００個を播種し、１’０００ｒｐｍで１ｍｉｎ遠心して沈殿させた。被検化合物の保存溶液はＤＭＳＯ中に１０ｍＭの濃度で調製し、ＡＢで段階希釈することにより活性用量反応曲線に必要な濃度とした。対照アゴニストとしては、ＷＫＹＭＶｍ（ＰｈｏｅｎｉｘＰｅｐｔｉｄｅｓ）を用いた。ＦＬＩＰＲＴｅｔｒａ装置（ＭｏｌｅｃｕｌａｒＤｅｖｉｃｅｓ）は製造元の標準使用説明書に従って操作し、ＤＭＳＯ中に１０ｍＭの濃度で溶解し、所望の最終濃度となるように実験に先立ってアッセイバッファーで希釈した被検化合物を４μｌ添加した。被検化合物添加の前後における蛍光の変化を、ｌｅｘ＝４８８ｎｍ、ｌｅｍ＝５４０ｎｍにてモニターした。化合物添加後の、ベースレベルを超える発光強度のピーク値を、ベースラインを差し引いた後に出力した。値は、ベースラインの値（ＡＢの添加）を差し引いた後、ハイレベルコントロール（ＷＫＹＭＶｍ化合物、１０ｎＭの最終濃度）に基づいて調整した。

例示化合物のＦＰＲ１受容体に対するアゴニスト活性（ＥＣ_５０値、ｎ回反復の中央値）を表１に示す。

血漿安定性試験
乳酸又は水酸化アンモニウムでｐＨ７．４に調整したラット又はヒト血清を、５％のＣＯ_２を含むインキュベーター内で、軌道振とう（ｏｒｂｉｔａｌｓｈａｋｉｎｇ）しながら、３７℃にて平衡化した。１μＭの化合物（９９９μｌの血漿にＤＭＳＯ中の１ｍＭストック溶液を１μｌ）を添加することにより反応を開始した。０．０１ｈ、０．２５ｈ、０．５ｈ、１ｈ、２ｈ、４ｈ、及び６ｈ後に、反応を止めるために、アリコート（３０μｌ）を、アイス上に置いた９０μｌのＭｅＯＨを含む９６ウェルプレートに移した。Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆｔｈｅｒｍｏｍｉｘｅｒ上で、１４００ｒｐｍにて２０ｍｉｎヴォルテックスにかけた後、プレートを、４℃にて２０ｍｉｎ、３２２０ｇで遠心分離し、上清をＬＣ−ＭＳ／ＭＳで分析した。０．１％のジクロルボス（２，２−ジクロロビニル−ジメチル−ホスファート）を含む血清中の較正試料を調製し、定量化を可能にするために、インキュベーションした試料と並行して分析した。次いで、半減期（Ｔ_１／２）を時間で算出した。加えて、初期濃度に対するＴ_ｌａｓｔ後の各化合物の残存濃度を決定した（表３）。

血漿タンパク結合アッセイ
化合物を、乳酸又は水酸化アンモニウムでｐＨ７．４に調整したヒト血漿に添加し（最終濃度１μＭ）、５％ＣＯ_２を含むインキュベーター内にて、ＲＥＤ（ＲａｐｉｄＥｑｕｉｌｉｂｒｉｕｍＤｉａｌｙｓｉｓ）装置を用いて、０．１Ｍ、ｐＨ７．４のリン酸緩衝生理食塩水（０．１Ｍリン酸ナトリウム及び０．１５Ｍ塩化ナトリウム）に対して３７℃にて４ｈ透析した。透析の後、血漿及び緩衝液を等量の逆マトリクス（ｏｐｐｏｓｉｔｅｍａｔｒｉｘ）に分注してマトリクス効果を相殺し、また、混合マトリクス中の
較正試料を調製した。試料及び較正試料（３０μｌ）を、９０μｌのＭｅＯＨを入れた９６穴プレートに分注して移して、タンパク質を沈殿させた。Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆｔｈｅｒｍｏｍｉｘｅｒ上にて、１４００ｒｐｍで２０ｍｉｎボルテックスで撹拌した後、プレートを４℃にて３２２０ｇで２０ｍｉｎ遠心分離し、上清をＬＣ−ＭＳ／ＭＳで分析した。血漿に結合した割合の算出には、被検対象の濃度を用いた。参照化合物であるプロプラノロール［（±）−１−イソプロピルアミノ−３−（１−ナフチルオキシ）−２−プロパノール］を並行して試験した。

Claims

式（Ｉ）の化合物又はその塩：

式中、ピペリジン環における置換基はトランス配置にある。
式（Ｉ_ＳＴ１）の化合物でもある、請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物、又はその塩：

式中、ピペリジン環における置換基はトランス配置にある。
前記化合物が（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−Ｎ^２−（（４−（１，１−ジフルオロエチル）オキサゾール−２−イル）メチル）−Ｎ^３−（（３Ｓ，４Ｓ）−３−フルオロピペリジン−４−イル）スピロ［ビシクロ［２．２．１］ヘプタン−７，１’−シクロプロパン］−２，３−ジカルボキサミドである、請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物又はその塩。
前記化合物が（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−Ｎ^２−（（４−（１，１−ジフルオロエチル）オキサゾール−２−イル）メチル）−Ｎ^３−（（３Ｒ，４Ｒ）−３−フルオロピペリジン−４−イル）スピロ［ビシクロ［２．２．１］ヘプタン−７，１’−シクロプロパン］−２，３−ジカルボキサミドである、請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物又はその塩。
医薬として使用するための、請求項１〜４のいずれか１項に記載の式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容される塩。
有効成分としての請求項１〜４のいずれか１項に記載の式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容される塩と、少なくとも１種の治療上不活性な賦形剤とを含む医薬組成物。
炎症性疾患、閉塞性気道疾患、アレルギー、ＨＩＶによるレトロウイルス感染、心血管障害、神経炎症、神経障害、疼痛、プリオンによる疾患及びアミロイドによる障害から選択される疾患の予防又は治療のための医薬の製造のための、請求項１〜４のいずれか１項に記載の式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容される塩の使用。
炎症性疾患、閉塞性気道疾患、アレルギー、ＨＩＶによるレトロウイルス感染、心血管障害、神経炎症、神経障害、疼痛、プリオンによる疾患及びアミロイドによる障害から選択される疾患の予防又は治療における使用のための、請求項１〜４のいずれか１項に記載の式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容される塩。