CN103249413B

CN103249413B - 作为脂氧素(alx)受体激动剂的羟基化氨基三唑衍生物

Info

Publication number: CN103249413B
Application number: CN201180058422.9A
Authority: CN
Inventors: 丹尼尔·贝尔; 奥利维尔·康明比欧夫; 塞尔文·克伦; 科琳娜·格里索斯托米; 泽维尔·勒罗伊; 西尔维娅·理查德-比尔德斯滕
Original assignee: Actelion Pharmaceuticals Ltd
Current assignee: Aidu West Pharmaceutical Co. Ltd.
Priority date: 2010-12-07
Filing date: 2011-12-06
Publication date: 2015-11-25
Anticipated expiration: 2031-12-06
Also published as: CA2816406C; JP2013544879A; CN103249413A; AU2011340103A1; EP2648724B1; BR112013014035A2; CA2816406A1; US20130267569A1; WO2012077051A1; RU2013130878A; EP2648724A1; TW201305150A; KR101847672B1; MX2013006420A; ES2604135T3; JP5923108B2; KR20130133239A; US9346793B2; AR084172A1

Abstract

本发明涉及式(I)的羟基化氨基三唑衍生物，其中Q、R¹、R²、R³及R⁴如说明中所定义；其制备及其作为医药学上活性化合物的用途。

Description

作为脂氧素(ALX)受体激动剂的羟基化氨基三唑衍生物

技术领域

本发明涉及式(I)的羟基化氨基三唑衍生物及其作为药物的用途。本发明亦涉及相关方面，该等方面包括制备化合物的方法、含有一或多种式(I)化合物的医药组合物及尤其其作为脂氧素(ALX)受体激动剂的用途。

背景技术

ALXR(别名脂氧素A4受体、FPRL1、FPR2；已在WO2003/082314中揭示为核苷酸序列SEQIDNO:1及氨基酸序列SEQIDNO:2)为G蛋白偶合受体家族的成员。发现ALXR可对高浓度的甲酰基-甲硫胺酸-白胺酰基-苯丙胺酸肽作出反应介导钙移动(calciummobilisation)。此外，发现脂质代谢物即脂氧素A4(LXA4)及其类似物以高亲和力结合ALXR且增加ALXR转染细胞中花生四烯酸产生及G蛋白活化(Chiang等人，Pharmacol.Rev.,2006,58,463-487)。已在各种动物疾病模型中评估LXA4的作用；且证明LXA4具有有效的消炎及促消退活性。LXA4或衍生物或稳定类似物显示活体内活性的疾病模型为例如皮肤发炎、背侧气囊(dorsalairpouch)、局部缺血/再灌注损伤、腹膜炎、结肠炎、系膜增殖性肾炎、胸膜炎、哮喘、囊肿性纤维化、败血症、角膜损伤、血管生成、牙周炎、角叉菜胶诱导的痛觉过敏及移植物抗宿主疾病(GvHD)(Schwab及Serhan,CurrentOpinioninPharmacology,2006,414-420)。ALXR亦被鉴定为包括以下的各种肽的功能性受体：朊病毒蛋白片段、源自人类免疫缺乏病毒(HIV)-1_LAI病毒株的gp120的肽及类淀粉蛋白-β1-42(Ab42)(关于综述，参见Le等人，ProteinPeptLett.,2007,14,846-853)，且已提出其以数种关键方式参与阿兹海默氏症(Alzheimer'sDisease，AD)的发病机制(Yazawa等人，FASEBJ.,2001,15,2454-2462)。活化巨噬细胞及微神经胶质细胞上的ALXR引发G蛋白介导的信号传导级联，其增加定向细胞迁移、吞噬及介体释放。此等事件可解释以下现象：单核细胞募集于过度产生及积累Ab42的AD脑患病区中的老年斑附近。尽管可认为白血球积累于组织损伤部位处为一种旨在清除有害因子(noxiousagent)的先天性宿主反应，但经活化的单核吞噬细胞亦释放各种可能对神经元有毒的物质(诸如超氧阴离子)。因此，ALXR可介导AD脑中由Ab42引发的促炎反应且加剧疾病恶化。亦已报导Humanin(HN)(一种具有神经保护能力的肽)与单核吞噬细胞及神经元细胞株上的Ab42共有人类ALXR，且已提出HN的神经保护活性可能归因于其竞争性占据ALXR(Ying等人，J.Immunol.,2004,172,7078-7085)。

ALXR激动剂的生物特性包括(但不限于)单核细胞/巨噬细胞/微神经胶质细胞/树突状细胞迁移/活化、嗜中性白血球迁移/活化、调节淋巴细胞活化、增殖及分化、调节发炎、调节细胞因子产生及/或释放、调节促炎性介体产生及/或释放、调节免疫反应。

本发明提供羟基化氨基三唑衍生物，其为人类ALX受体的非肽激动剂。化合物适用于预防或治疗对ALX受体调节作出反应的疾病，该等疾病诸如发炎性疾病、阻塞性气管疾病、过敏病状、HIV介导的逆转录病毒感染、心血管病症、神经发炎、神经性病症、疼痛、朊病毒介导的疾病及类淀粉蛋白介导的病症(尤其为阿兹海默氏症)；此外，其适用于预防或治疗自体免疫疾病及调节免疫反应(尤其由疫苗接种所引起者)。

与WO2009/077990中所揭示的亦为ALX受体激动剂的氨基三唑衍生物相比，当在人类或大鼠血浆中测试稳定性时，本申请案的化合物显示明显改良概况。此外，令人惊讶地发现叔醇仅在其(如式(I))连接至噁唑-2-基的4位置时显示作为ALX受体激动剂的较高活性。其它所测试的杂芳基叔醇衍生物活性明显较小。此与WO2009/077990中所揭示的对于各种不同杂芳基均显示较高活性的乙酰基衍生物相反。

其它氨基三唑衍生物揭示于WO2010/143158及WO2010/143116中；氨基吡唑衍生物作为ALX受体激动剂已描述于WO2009/077954中。

发明内容

下文呈现本发明的各种实施例：

1)本发明涉及式(I)的羟基化氨基三唑衍生物，

其中：

R¹表示未经取代或经卤素、(C₁-C₄)烷基、(C₁-C₄)烷氧基、(C₁-C₂)氟烷基或(C₁-C₂)氟烷氧基单取代的苯基；

R²表示氢、甲基或环丙基(尤其氢或甲基)；

R³及R⁴均表示甲基；或R³及R⁴连同其所连接的碳原子一起形成环丙基环；且

Q表示O或S；

且涉及该等化合物的盐(特定言之医药学上可接受的盐)。

实施例1)的式(I)化合物可含有一或多个立体对称或不对称中心，诸如一或多个不对称碳原子。除非另外指出，否则双键处的取代基可以(Z)或(E)构型存在。因此，式(I)的化合物可以立体异构体的混合物或较佳地以纯立体异构体形式存在。可以本领域技术人员已知的方式分离立体异构体混合物。

以下段落提供对本发明化合物的各种化学部分的定义，且除非另外特别阐述的定义提供更宽或更窄的定义，否则前述定义意欲一致地应用于整个说明书及申请专利范围。

单独使用或组合使用的术语“烷基”系指含有1至4个碳原子的直链或支链烷基。术语“(C_x-C_y)烷基”(x及y各为整数)系指含有x至y个碳原子的如先前所定义的烷基。举例而言，(C₁-C₄)烷基含有1至4个碳原子。烷基的代表性实例包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基及叔丁基。较佳为(C₁-C₃)烷基，诸如甲基、乙基、正丙基及异丙基。最佳为甲基。

单独使用或组合使用的术语“烷氧基”系指烷基-O-基团，其中烷基如先前所定义。术语“(C_x-C_y)烷氧基”(x及y各为整数)系指含有x至y个碳原子的如先前所定义的烷氧基。举例而言，(C₁-C₄)烷氧基含有1至4个碳原子。烷氧基的代表性实例包括甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基、仲丁氧基及叔丁氧基。较佳为乙氧基及甲氧基。最佳为甲氧基。

术语“氟烷基”系指如先前所定义的含有一或两个碳原子的烷基，其中一或多个(及可能所有)氢原子已置换为氟。术语“(C_x-C_y)氟烷基”(x及y各为整数)系指含有x至y个碳原子的如先前所定义的氟烷基。举例而言，(C₁-C₂)氟烷基含有一或两个碳原子，其中一至五个氢原子已置换为氟。氟烷基的代表性实例包括二氟甲基、三氟甲基及2,2,2-三氟乙基。较佳为(C₁)氟烷基，诸如三氟甲基及二氟甲基。最佳为三氟甲基。

术语“氟烷氧基”系指如先前所定义的含有一或两个碳原子的烷氧基，其中一或多个(及可能所有)氢原子已置换为氟。术语“(C_x-C_y)氟烷氧基”(x及y各为整数)系指含有x至y个碳原子的如先前所定义的氟烷氧基。举例而言，(C₁-C₂)氟烷氧基含有一或两个碳原子，其中一至五个氢原子已置换为氟。氟烷氧基的代表性实例包括三氟甲氧基、二氟甲氧基及2,2,2-三氟乙氧基。较佳为(C₁)氟烷氧基，诸如三氟甲氧基及二氟甲氧基。最佳为三氟甲氧基。

术语卤素意谓氟、氯、溴或碘，较佳为氟、氯或溴且最佳为氟或氯。

2)本发明的另一实施例涉及如实施例1)的羟基化氨基三唑衍生物，其中：

R²表示氢或甲基；

Q表示O；

且涉及该等化合物的盐(特定言之医药学上可接受的盐)。

3)本发明的另一实施例涉及如实施例1)或2)中任一者的羟基化氨基三唑衍生物，其中：

R¹表示未经取代或经氟、氯、甲基或甲氧基单取代的苯基；

R²表示氢或甲基；

R³及R⁴均表示甲基；且

Q表示O；

且涉及该等化合物的盐(特定言之医药学上可接受的盐)。

4)本发明的另一实施例涉及如实施例1)或2)中任一者的羟基化氨基三唑衍生物，其中：

R¹表示未经取代或经氟、氯、甲基、甲氧基、三氟甲基或三氟甲氧基单取代的苯基；

且涉及该等化合物的盐(特定言之医药学上可接受的盐)。

5)本发明的另一实施例涉及如实施例1)至3)中任一者的羟基化氨基三唑衍生物，其中：

R¹表示未经取代或经卤素、(C₁-C₄)烷基或(C₁-C₄)烷氧基(且尤其经氟、氯、甲基或甲氧基)单取代的苯基；

且涉及该等化合物的盐(特定言之医药学上可接受的盐)。

6)本发明的另一实施例涉及如实施例1)至3)中任一者的羟基化氨基三唑衍生物，其中：

R¹表示未经取代或经(C₁-C₄)烷基或(C₁-C₄)烷氧基(且尤其经甲基或甲氧基)单取代的苯基；

且涉及该等化合物的盐(特定言之医药学上可接受的盐)。

7)本发明的另一实施例涉及如实施例1)至6)中任一者的羟基化氨基三唑衍生物，其中：

在R¹表示经单取代的苯基时，该苯基在间位上经取代；

且涉及该等化合物的盐(特定言之医药学上可接受的盐)。

8)本发明的另一实施例涉及如实施例1)至7)中任一者的羟基化氨基三唑衍生物，其中：

R²表示氢或甲基；

且涉及该等化合物的盐(特定言之医药学上可接受的盐)。

9)本发明的另一实施例涉及如实施例1)至7)中任一者的羟基化氨基三唑衍生物，其中：

R²表示氢；

且涉及该等化合物的盐(特定言之医药学上可接受的盐)。

10)本发明的另一实施例涉及如实施例1)至7)中任一者的羟基化氨基三唑衍生物，其中：

R²表示甲基；

且涉及该等化合物的盐(特定言之医药学上可接受的盐)。

11)本发明的另一实施例涉及如实施例1)至10)中任一者的羟基化氨基三唑衍生物，其中：

R³及R⁴均表示甲基；

且涉及该等化合物的盐(特定言之医药学上可接受的盐)。

12)本发明的另一实施例涉及如实施例1)、2)或4)至10)中任一者的羟基化氨基三唑衍生物，其中：

R³及R⁴连同其所连接的碳原子一起形成环丙基环；

且涉及该等化合物的盐(特定言之医药学上可接受的盐)。

13)本发明的另一实施例涉及如实施例1)至12)中任一者的羟基化氨基三唑衍生物，其中：

Q表示O；

且涉及该等化合物的盐(特定言之医药学上可接受的盐)。

14)本发明的另一实施例涉及如实施例1)或4)至10)中任一者的羟基化氨基三唑衍生物，其中：

Q表示S；

且涉及该等化合物的盐(特定言之医药学上可接受的盐)。

15)如实施例1)中所定义的较佳式(I)化合物系选自由以下组成的群：

2-甲基-5-间甲苯基-噁唑-4-甲酸{2-[4-(1-羟基-1-甲基-乙基)-噁唑-2-基甲基]-2H-[1,2,3]三唑-4-基}-酰胺；

2-甲基-5-间甲苯基-噁唑-4-甲酸{2-[4-(1-羟基-环丙基)-噁唑-2-基甲基]-2H-[1,2,3]三唑-4-基}-酰胺；

5-苯基-噁唑-4-甲酸{2-[4-(1-羟基-1-甲基-乙基)-噁唑-2-基甲基]-2H-[1,2,3]三唑-4-基}-酰胺；

5-(4-氟-苯基)-噁唑-4-甲酸{2-[4-(1-羟基-1-甲基-乙基)-噁唑-2-基甲基]-2H-[1,2,3]三唑-4-基}-酰胺；

2-甲基-5-(3-三氟甲基-苯基)-噁唑-4-甲酸{2-[4-(1-羟基-1-甲基-乙基)-噁唑-2-基甲基]-2H-[1,2,3]三唑-4-基}-酰胺；

5-(3-甲氧基-苯基)-2-甲基-噁唑-4-甲酸{2-[4-(1-羟基-1-甲基-乙基)-噁唑-2-基甲基]-2H-[1,2,3]三唑-4-基}-酰胺；

5-(3-氯-苯基)-2-甲基-噁唑-4-甲酸{2-[4-(1-羟基-1-甲基-乙基)-噁唑-2-基甲基]-2H-[1,2,3]三唑-4-基}-酰胺；

5-(3-氯-苯基)-噁唑-4-甲酸{2-[4-(1-羟基-1-甲基-乙基)-噁唑-2-基甲基]-2H-[1,2,3]三唑-4-基}-酰胺；

5-(3-甲氧基-苯基)-噁唑-4-甲酸{2-[4-(1-羟基-1-甲基-乙基)-噁唑-2-基甲基]-2H-[1,2,3]三唑-4-基}-酰胺；

2-甲基-5-苯基-噁唑-4-甲酸{2-[4-(1-羟基-1-甲基-乙基)-噁唑-2-基甲基]-2H-[1,2,3]三唑-4-基}-酰胺；

5-(3-氟-苯基)-噻唑-4-甲酸{2-[4-(1-羟基-1-甲基-乙基)-噁唑-2-基甲基]-2H-[1,2,3]三唑-4-基}-酰胺；

2-甲基-5-(3-三氟甲氧基-苯基)-噁唑-4-甲酸{2-[4-(1-羟基-1-甲基-乙基)-噁唑-2-基甲基]-2H-[1,2,3]三唑-4-基}-酰胺；

5-(3-氟-苯基)-2-甲基-噁唑-4-甲酸{2-[4-(1-羟基-1-甲基-乙基)-噁唑-2-基甲基]-2H-[1,2,3]三唑-4-基}-酰胺；

5-间甲苯基-噁唑-4-甲酸{2-[4-(1-羟基-1-甲基-乙基)-噁唑-2-基甲基]-2H-[1,2,3]三唑-4-基}-酰胺；及

2-环丙基-5-间甲苯基-噁唑-4-甲酸{2-[4-(1-羟基-1-甲基-乙基)-噁唑-2-基甲基]-2H-[1,2,3]三唑-4-基}-酰胺；

或该等化合物的盐(特定言之医药学上可接受的盐)。

本发明亦包括经同位素标记、尤其经²H(氘)标记的式(I)化合物，该等化合物与式(I)化合物相同，只是其一或多个原子各自已置换为具有相同原子序数但原子质量不同于自然界中通常发现的原子质量的原子。经同位素标记、尤其经²H(氘)标记的式(I)化合物及其盐属于本发明的范畴内。用较重同位素²H(氘)取代氢可增加代谢稳定性，引起例如活体内半衰期延长或剂量需求降低，或可减少对细胞色素P450酶的抑制，引起例如安全概况改良。在本发明的一个实施例中，式(I)化合物未经同位素标记，或其仅用一或多个氘原子标记。在一子实施例中，式(I)化合物完全未经同位素标记。经同位素标记的式(I)化合物可类似于下文所述的方法，但使用适合试剂或起始物质的适当同位素变体来制备。

术语“医药学上可接受的盐”系指无毒性的无机或有机酸及/或无机或有机碱加成盐，参考文献例如“Saltselectionforbasicdrugs”,Int.J.Pharm.(1986),33,201-217。

在化合物、盐、医药组合物、疾病及其类似物使用复数形式的情况下，此复数形式亦意谓单一化合物、盐或类似物。

如实施例1)至15)中任一者的式(I)化合物或其医药学上可接受的盐适合用作药物。特定言之，式(I)化合物调节ALX受体，亦即其充当ALX受体激动剂且适用于预防或治疗对ALX受体活化作出反应的疾病，该等疾病诸如发炎性疾病、阻塞性气管疾病、过敏病状、HIV介导的逆转录病毒感染、心血管病症、神经发炎、神经性病症、疼痛、朊病毒介导的疾病及类淀粉蛋白介导的病症(尤其为阿兹海默氏症)；此外，其适用于调节免疫反应(尤其由疫苗接种所引起者)。式(I)化合物尤其适用于预防或治疗诸如以下的疾病：发炎性疾病、阻塞性气管疾病、过敏病状、心血管病症、神经发炎、神经性病症、疼痛、朊病毒介导的疾病及类淀粉蛋白介导的病症(尤其为阿兹海默氏症)。

特定言之，如实施例1)至15)中任一者的式(I)化合物或其医药学上可接受的盐适用于预防或治疗选自发炎性疾病、阻塞性气管疾病及过敏病状的疾病。

发炎性疾病、阻塞性气管疾病及过敏病状包括(但不限于)以下疾病及病症群中的一者、数者或全部：

1)急性肺损伤(ALI)；成人/急性呼吸窘迫症候群(ARDS)；慢性阻塞性肺部疾病、气管病或肺病(COPD、COAD或COLD)，包括慢性支气管炎或与其相关的呼吸困难；气肿；以及因其它药物疗法(尤其其它吸入药物疗法)所致的气管过度反应加剧。发炎性疾病、阻塞性气管疾病及过敏病状尤其包括COPD、COAD及COLD。

2)其它发炎性疾病、阻塞性气管病及过敏病状包括任何类型或成因的支气管炎。

3)其它发炎性疾病、阻塞性气管疾病及过敏病状包括任何类型或成因的支气管扩张症及肺尘埃沉着病。

4)其它发炎性疾病、阻塞性气管疾病及过敏病状包括任何类型或成因的哮喘，包括内源性(非过敏性)哮喘及外源性(过敏性)哮喘、控制哮喘、非控制哮喘、轻度哮喘、中度哮喘、重度哮喘、支气管哮喘、运动诱发哮喘、职业性哮喘及细菌感染后诱导的哮喘。

5)在另一实施例中，如实施例1)至15)中任一者的式(I)化合物或其医药学上可接受的盐尤其适用于预防或治疗发炎性疾病。发炎性疾病包括以下疾病及病症群中的一者、数者或全部：

5a)特定言之，发炎性疾病系指嗜中性白血球相关病症，尤其气管的嗜中性白血球相关病症，包括影响气管及/或肺的嗜中性白血球过多症。其它嗜中性白血球相关病症亦包括牙周炎、丝球体肾炎及囊肿性纤维化。

5b)其它发炎性疾病包括皮肤病，诸如牛皮癣、接触性皮炎、异位性皮炎、疱疹样皮炎、硬皮病、过敏性血管炎、荨麻疹、红斑狼疮及表皮松懈。

5c)其它发炎性疾病亦有关于具有发炎组分的疾病或病状。具有发炎组分的疾病或病状包括(但不限于)影响眼睛的疾病及病状，诸如葡萄膜炎(前葡萄膜炎、中间葡萄膜炎及后葡萄膜炎)、白塞氏症候群葡萄膜炎syndromeuveitis)、结膜炎、干燥性角膜结膜炎、休格连氏症候群干燥性角膜结膜炎syndromekeratoconjunctivitissicca)及春季结膜炎(且尤其为结膜炎、干燥性角膜结膜炎及春季结膜炎)；影响鼻的疾病，包括鼻炎及过敏性鼻炎(且尤其为过敏性鼻炎)；及发炎性疾病，其中涉及自体免疫反应或其具有自体免疫组分或病因，诸如全身性红斑狼疮、僵直性脊椎炎、白塞氏症候群syndrome)、休格连氏症候群syndrome)、多软骨炎、硬皮病、韦格纳肉牙肿病(Wegenergranulamatosis)、皮肌炎、慢性活动性肝炎、重症肌无力、史蒂芬-琼森症候群(Stevens-Johnsonsyndrome)、特发性口炎性腹泻、自体免疫性发炎性肠道疾病(例如溃疡性结肠炎及克隆氏病(Crohn'sdisease))、内分泌眼病变、慢性过敏性肺炎、原发性胆汁性肝硬化症、干燥性角膜结膜炎及春季角膜结膜炎、肺间质性纤维化、牛皮癣性关节炎及丝球体肾炎(且尤其为全身性红斑狼疮、多软骨炎、硬皮病、韦格纳肉牙肿病、皮肌炎、慢性活动性肝炎、重症肌无力、史蒂芬-琼森症候群、特发性口炎性腹泻、自体免疫性发炎性肠道疾病(例如溃疡性结肠炎及克隆氏病)、内分泌眼病变、慢性过敏性肺炎、原发性胆汁性肝硬化、干燥性角膜结膜炎及春季角膜结膜炎、肺间质性纤维化、牛皮癣性关节炎及丝球体肾炎)。

5d)其它发炎性疾病，其中涉及自体免疫反应或其具有自体免疫组分或病因，包括类风湿性关节炎、桥本氏甲状腺(Hashimoto'sthyroid)及I型或II型糖尿病。

此外，如实施例1)至15)中任一者的式(I)化合物或其医药学上可接受的盐适用于预防或治疗器官或组织移植排斥反应，例如治疗心脏、肺、组合的心肺、肝脏、肾脏、胰脏、皮肤或角膜移植物的接受者，及预防移植物抗宿主疾病(诸如有时在骨髓移植之后发生的移植物抗宿主疾病)，尤其适用于治疗急性或慢性同种异体移植及异种移植排斥反应或移植产生胰岛素的细胞(例如胰岛细胞)。

此外，如实施例1)至15)中任一者的式(I)化合物或其医药学上可接受的盐适用于预防或治疗HIV介导的逆转录病毒感染。

HIV介导的逆转录病毒感染包括(但不限于)由HIV-1及HIV-2病毒株(诸如GUN-4v、GUN-7wt、AG204、AG206、AG208、HCM305、HCM308、HCM342、mSTD104及HCM309)所致的疾病及病症群中的一者、数者或全部。

此外，如实施例1)至15)中任一者的式(I)化合物或其医药学上可接受的盐适用于预防或治疗心血管病症。

心血管病症系指心血管树(包括心脏)的一或多种疾病病况及依赖性器官的疾病。心血管树的疾病病况及依赖性器官的疾病包括(但不限于)心肌病症(心肌病或心肌炎)，诸如特发性心肌病、代谢心肌病，其包括糖尿病性心肌病、酒精性心肌病、药物诱发的心肌病、缺血性心肌病及高血压性心肌病；主要血管(诸如主动脉、冠状动脉、颈动脉、脑血管动脉、肾动脉、肠骨动脉、股动脉及腘动脉)的动脉粥样化病症(大血管疾病)；小血管(诸如视网膜小动脉、肾小球小动脉、神经滋养血管(vasanervorum)、心脏小动脉以及眼睛、肾脏、心脏及中枢与周边神经系统的相关毛细血管床)的中毒性、药物诱发性及代谢性(包括高血压性及/或糖尿病性)病症(微血管疾病)；及主要血管(诸如主动脉、冠状动脉、颈动脉、脑血管动脉、肾动脉、肠骨动脉、股动脉及腘动脉)的动脉粥样化病变的斑块破裂。

此外，如实施例1)至15)中任一者的式(I)化合物或其医药学上可接受的盐适用于预防或治疗神经发炎。神经发炎系指细胞信号传导分子产生；活化神经胶质或神经胶质活化路径及反应、促炎性细胞激素或趋化因子；活化星形胶质细胞或星形胶质细胞活化路径及反应；活化微神经胶质或微神经胶质活化路径及反应、氧化应激相关反应(诸如氧化氮合成酶产生及氧化氮积累)、急性期蛋白；丧失突触素(synaptophysin)及突触后致密蛋白95(PSD-95)、补体级联组分；丧失或减少突触功能、蛋白激酶活性(例如死亡相关的蛋白激酶活性)；行为缺损；细胞受损(例如神经元细胞受损)；细胞死亡(例如神经元细胞死亡)；及/或类淀粉蛋白斑块的类淀粉蛋白β沉积。

此外，如实施例1)至15)中任一者的式(I)化合物或其医药学上可接受的盐适用于预防或治疗神经性病症。

特定言之，神经性病症包括(但不限于)癫痫、中风、大脑缺血、大脑性麻痹、复发缓解型多发性硬化、进行性多发性硬化、视神经脊髓炎、临床上分离症候群、亚尔培氏症(Alpers'disease)、肌萎缩性侧索硬化(ALS)、老年痴呆症、路易体痴呆(dementiawithLewybodies)、雷特症候群(Rettsyndrome)、脊髓损伤、创伤性脑损伤、三叉神经痛、慢性发炎性脱髓鞘性多发性神经病、格－巴二氏症候群(Guillain-Barrésyndrome)、舌咽神经痛、贝尔氏麻痹(Bell'spalsy)、重症肌无力、肌肉萎缩症、进行性肌肉萎缩、进行性延髓遗传肌肉萎缩、椎盘突出、破裂或脱垂症候群、颈椎关节黏连、丛病症(plexusdisorder)、胸廓出口破坏症候群、周边神经病、轻度认知减退、认知减退、阿兹海默氏症、帕金森氏症(Parkinson'sdisease)、亨廷顿氏舞蹈病(Huntington'schorea)、脊髓性肌萎缩、多聚谷氨酰胺病(诸如脊髓延髓肌肉萎缩(肯尼迪病(Kennedydisease))、1型、2型、3型(马查多-约瑟夫病(Machado-Josephdisease))、6型、7型、17型脊髓小脑共济失调)及大脑疟疾(且尤其为癫痫、中风、大脑缺血、大脑性麻痹、复发缓解型多发性硬化、进行性多发性硬化、亚尔培氏症、肌萎缩性侧索硬化(ALS)、老年痴呆症、路易体痴呆、雷特症候群、脊髓损伤、创伤性脑损伤、三叉神经痛、舌咽神经痛、贝尔氏麻痹、重症肌无力、肌肉失养症、进行性肌肉萎缩、进行性延髓遗传肌肉萎缩、椎盘突出、破裂或脱垂症候群、颈椎关节黏连、丛病症、胸廓出口破坏症候群、周边神经病、轻度认知减退、认知减退、阿兹海默氏症、帕金森氏症及亨廷顿氏舞蹈病)。

此外，如实施例1)至15)中任一者的式(I)化合物或其医药学上可接受的盐适用于预防或治疗疼痛。疼痛包括(但不限于)神经痛，例如有如下病状：诸如糖尿病性神经病、疱疹后神经痛、三叉神经痛、疼痛性糖尿病多神经病、中风后疼痛、切除术后疼痛、骨髓病性或神经根病性疼痛、非典型颜面疼痛及灼性神经痛样症候群。

此外，如实施例1)至15)中任一者的式(I)化合物或其医药学上可接受的盐适用于预防或治疗朊病毒介导的疾病。朊病毒介导的疾病(亦称作可传播性海绵状脑病(TSE))包括(但不限于)库鲁症(kuru)、格-斯-斯症候群(Gerstmann-Scheinkersyndrome，GSS)、致命性家族性失眠症(FFI)及库贾氏症(Creutzfeldt-JakobDisease，CJD)。

此外，如实施例1)至15)中任一者的式(I)化合物或其医药学上可接受的盐适用于治疗类淀粉蛋白介导的病症。类淀粉蛋白介导的病症系定义为由类淀粉蛋白或类淀粉样蛋白质所致或与其相关的疾病及病症。由类淀粉蛋白或类淀粉样蛋白质所致或与其相关的疾病及病症包括(但不限于)阿兹海默氏症(AD)，包括特征为丧失认知记忆能力的疾病或病状，诸如轻度认知障碍(MCI)；路易体痴呆；唐氏症候群(Down'ssyndrome)；大脑出血伴淀粉样变性病。在另一实施例中，由类淀粉蛋白或类淀粉样蛋白质所致或与其相关的疾病及病症包括进行性核上麻痹、类淀粉蛋白轻链淀粉样变性病、家族性类淀粉神经病、多发性硬化症、库贾氏症、帕金森氏症、血管型失智症、HIV相关的痴呆、肌萎缩性侧索硬化症(ALS)、包涵体肌炎(IBM)、成年发作型糖尿病及老年心脏淀粉样变性病(且尤其为进行性核上麻痹、多发性硬化症、库贾氏症、帕金森氏症、HIV相关的痴呆、肌萎缩性侧索硬化症(ALS)、包涵体肌炎(IBM)、成年发作型糖尿病及老年心脏淀粉样变性病)。

此外，如实施例1)至15)中任一者的式(I)化合物或其医药学上可接受的盐适用于调节免疫反应。

调节免疫反应包括(但不限于)基于投与个体含有至少一种抗原及至少一种如实施例1)至15)中任一者的式(I)化合物或其医药学上可接受的盐的组合物的方法。在一些情况下，首先投与含抗原组合物，继而投与含至少一种如实施例1)至15)中任一者的式(I)化合物或其医药学上可接受的盐的组合物。在其它情况下，最后投与含抗原组合物。不同组合物可同时投与，依序接连投与或按时间分别投与。提供彼等方法及组合物用于治疗性及预防性免疫(亦即，有意激发、增强、强化或调节适应性及/或先天性免疫反应)。特定优势可包括以下中的一或多者：

1)相较于仅投与抗原，在投与至少一种如实施例1)至15)中任一者的式(I)化合物或其医药学上可接受的盐及抗原之后可加速免疫反应；

2)对少量抗原(例如毒素或病原体)或惯常不能诱发强免疫反应的抗原的敏感性提高；及

3)更有效的抗肿瘤疗法。

此外，如实施例1)至15)中任一者的式(I)化合物或其医药学上可接受的盐适用于预防或治疗囊肿性纤维化、肺纤维化、肺高血压、创口愈合、糖尿病性肾病，减少移植组织的发炎或由病原生物所致的发炎性疾病。

如实施例1)至15)中任一者的式(I)化合物或其医药学上可接受的盐尤其适用于预防或治疗选自以下疾病及病症群中的一者、数者或全部的疾病：

1)发炎性疾病、阻塞性气管病及过敏病状，诸如急性肺损伤(ALI)；成人/急性呼吸窘迫症候群(ARDS)；慢性阻塞性肺部疾病、气管病或肺病(COPD、COAD或COLD)，包括慢性支气管炎或与其相关的呼吸困难；及任何类型或成因的哮喘，包括内源性(非过敏性)哮喘及外源性(过敏性)哮喘、控制哮喘、非控制哮喘、轻度哮喘、中度哮喘、重度哮喘、支气管哮喘、运动诱发哮喘、职业性哮喘及细菌感染后诱导的哮喘(且尤其为急性肺损伤(ALI)；成人/急性呼吸窘迫症候群(ARDS)；及任何类型或成因的哮喘，包括内源性(非过敏性)哮喘及外源性(过敏性)哮喘、控制哮喘、非控制哮喘、轻度哮喘、中度哮喘、重度哮喘、支气管哮喘、运动诱发哮喘、职业性哮喘及细菌感染后诱导的哮喘)；

2)发炎性疾病，诸如嗜中性白血球相关病症，尤其气管的嗜中性白血球相关病症，包括影响气管及/或肺的嗜中性白血球过多症；牙周炎；丝球体肾炎；囊肿性纤维化；及皮肤病，诸如牛皮癣、接触性皮炎、异位性皮炎、疱疹样皮炎、硬皮病、过敏性血管炎、荨麻疹、红斑狼疮及表皮松懈；

3)具有发炎组分的疾病，诸如影响眼睛的疾病及病状，诸如结膜炎、干燥性角膜结膜炎及春季结膜炎；发炎性疾病，其中涉及自体免疫反应或其具有自体免疫组分或病因；及自体免疫性发炎性肠道疾病(例如溃疡性结肠炎及克隆氏病)；

4)HIV介导的逆转录病毒感染，诸如由HIV-1及HIV-2病毒株(诸如GUN-4v、GUN-7wt、AG204、AG206、AG208、HCM305、HCM308、HCM342、mSTD104及HCM309)所致的疾病及病症；

5)神经发炎，其系指细胞信号传导分子产生；活化神经胶质或神经胶质活化路径及反应、促炎性细胞激素或趋化因子；活化星形胶质细胞或星形胶质细胞活化路径及反应；活化微神经胶质或微神经胶质活化路径及反应、氧化应激相关反应，诸如类淀粉蛋白斑块的类淀粉蛋白β沉积；

6)神经性病症，诸如中风、大脑缺血、阿兹海默氏症及帕金森氏症；

7)朊病毒介导的疾病(亦称作可传播性海绵状脑病(TSE))，诸如库鲁症、格-斯-斯症候群(GSS)、致命性家族性失眠症(FFI)及库贾氏症(CJD)；

8)类淀粉蛋白介导的病症；

9)囊肿性纤维化、创口愈合及由病原生物所致的发炎性疾病。

本发明亦涉及如实施例1)至15)中任一者的式(I)化合物的用途，其用于制备供治疗及/或预防上述疾病的医药组合物。

本发明亦涉及如实施例1)至15)中任一者的式(I)化合物的医药学上可接受的盐及医药组合物及调配物。

本发明的医药组合物含有至少一种如实施例1)至15)中任一者的式(I)化合物(或其医药学上可接受的盐)作为活性剂及视情况选用的载剂及/或稀释剂及/或佐剂。

如实施例1)至15)中任一者的式(I)化合物及其医药学上可接受的盐可例如以用于经肠(该等尤其为经口)或非经肠投药(包括局部施用或吸入)的医药组合物的形式用作药物。

可以任何本领域技术人员所熟知的方式(参见例如Remington,TheScienceandPracticeofPharmacy，第21版(2005)，第5部分，“PharmaceuticalManufacturing”[由LippincottWilliams&Wilkins出版])藉由将所述的式(I)化合物或其医药学上可接受的盐、视情况以及其它有治疗价值的物质连同适合的无毒性惰性治疗上兼容的固体或液体载剂物质及必要时常用医药佐剂制成盖伦投药剂型(galenicaladministrationform)来制造医药组合物。

本发明亦涉及一种预防或治疗本文所述的疾病或病症的方法，其包含投与个体医药学上活性量的如实施例1)至15)中任一者的式(I)化合物或其医药学上可接受的盐。

适当及便利时，本文中对式(I)化合物的任何提及应理解为亦指代该等化合物的盐(且尤其为医药学上可接受的盐)。针对式(I)化合物所指示的优选当然就实际的情形应用于式(I)化合物的盐及医药学上可接受的盐。上述情况亦同样适用于作为药物的此等化合物、含有此等化合物作为活性成分的医药组合物或此等化合物用于制造供治疗本发明疾病的药物的用途。

除非关于温度使用，否则置于数值“X”之前的术语“约(about)”(或者“约(around)”)在当前应用中系指自X减去10%X延伸至X加上10%X的区间，且较佳为自X减去5%X延伸至X加上5%X的区间。在温度的特定情况中，置于温度“Y”之前的术语“约(about)”(或者“约(around)”)在当前应用中系指自Y减去10℃延伸至Y加上10℃的区间，且较佳为自Y减去5℃延伸至Y加上5℃的区间。此外，如本文所用的术语“室温”(rt)系指约25℃的温度。

无论何时使用措词“之间”描述数值范围，应了解所指示范围的终点明确地包括在范围中。举例而言：若温度范围描述为在40℃与80℃之间，则此意谓终点40℃及80℃包括于范围中；或若变量定义为1与4之间的整数，则此意谓变量为整数1、2、3或4。

具体实施方式

式(I)化合物可藉由以下提供的方法、藉由实例中提供的方法或藉由类似方法来制造。虽然最佳反应条件可随用所用特定反应物或溶剂而改变，但此等条件可由本领域技术人员藉由常规最佳化程序来确定。

若非另外指示，否则一般基团R¹、R²、R³、R⁴及Q如针对式(I)所定义。所使用的其它缩写系于实验部分中定义。

视所用反应条件而定，醇与甲烷磺酰氯反应可形成各别氯化物或各别甲磺酸酯衍生物；在本领域中众所周知，该等反应条件的很小变化已经可能对该等反应的结果有影响；应了解，通常两种试剂(氯化物与甲磺酸酯)均可能适用作下述反应的亲电子剂。

A.合成最终产物

A.a)式(I)化合物可由结构1的胺藉由在约室温的温度下在适合的溶剂(诸如CH₂Cl₂)中在碱(诸如Et₃N或DIPEA)存在下与适当酰氯反应制备。适当酰氯可由结构6的相应羧酸在约室温的温度下藉由与试剂(诸如乙二酰氯)在DMF存在下在适合的溶剂(诸如甲苯)中反应制备。或者，可使用标准酰胺偶合条件(诸如EDC/HOBt/DMAP或TBTU或HBTU或PyBOP)在碱(诸如DIPEA或Et₃N)存在下在约室温的温度下在适合的溶剂(诸如CH₂Cl₂(或CH₂Cl₂与DMF的混合物))中使结构1的胺与结构6的适当羧酸偶合，得到式(I)化合物。

结构1

A.b)或者，R³及R⁴连同其所连接的碳原子一起形成环丙基环的式(I)化合物可藉由在标准还原条件下使用试剂(诸如DiBAL-H)在溶剂(诸如THF)中在约-78℃至室温范围内的温度下将结构2的酯类还原为相应醇来制备。

结构2

A.c)或者，R³及R⁴均表示甲基的式(I)化合物可藉由在低于室温的温度(较佳约-78℃)下在溶剂(诸如THF)中向结构3的酮添加甲基格林纳试剂(Grignardreagent)或者在约0℃的温度下在溶剂(诸如CH₂Cl₂)中添加三烷基铝试剂提供相应叔醇进行制备。

结构3

B.合成中间体

结构1的化合物可由结构4的化合物藉由在金属催化剂(诸如Pd/C、Pt/C或PtO₂)存在下在约室温的温度下在适当溶剂(诸如MeOH或EtOH)中氢化或藉由在溶剂混合物(诸如H₂O/EtOH)中在氯化铵存在下在室温至约95℃范围的温度下以金属(诸如铁)还原来还原硝基获得。

结构4

结构4的化合物可藉由使结构5的化合物与4-硝基-2H-[1,2,3]三唑(T.E.Eagles等人，Organicpreparationsandprocedures2(2),117-119,1970；P.N.NeumanJ.Heterocycl.Chem.8,51-56,1971)在碱(诸如K₂CO₃或Cs₂CO₃)存在下在溶剂(诸如丙酮或AcCN)中在约室温或80℃的温度下(在添加或不添加四丁基溴化铵的情况下)反应来制备。或者，反应可在碱(诸如DIPEA)存在下在溶剂(诸如DMF、丙酮或两者的混合物)中在约室温或50℃的温度下进行。

X=Cl或MsO

结构5

R³及R⁴表示甲基的结构5的化合物可藉由在低于室温的温度(较佳约-78℃)下在溶剂(诸如THF)中向2-(氯甲基)噁唑-4-甲酸甲酯(OrganicProcessResearch&Development2001,5,37-44)中添加甲基格林纳试剂或者在约0℃的温度下在溶剂(诸如CH₂Cl₂)中添加三烷基铝试剂提供相应叔醇来制备。

或者，R³及R⁴表示甲基的结构4的化合物可藉由在低于室温的温度(较佳约-78℃)下在溶剂(诸如THF)中在1-(2-((4-硝基-2H-1,2,3-三唑-2-基)甲基)噁唑-4-基)乙酮(WO2009/077990，第105页)上添加甲基格林纳试剂或者在约0℃的温度下在溶剂(诸如CH₂Cl₂)中添加三烷基铝试剂提供相应叔醇来制备。

结构2的化合物可根据以下次序以2-(氯甲基)噁唑-4-甲酸甲酯(OrganicProcessResearch&Development2001,5,37-44)为起始物进行制备：a)藉由在乙酸中在约120℃下以乙酸酐与乙酸钠的混合物处理来形成乙酸酯；b)使用甲醇钠裂解乙酸酯；c)利用保护基(诸如TBDMS)保护所得醇；d)藉由以四异丙氧基钛(IV)及溴化乙基镁处理进行环丙化；e)藉由在吡啶中以特戊酰氯处理来保护叔醇；f)使用TBAF在THF中脱除保护基TBDMS；g)藉由在三乙胺存在下以MsCl处理来形成甲磺酸酯；h)在碱(诸如K₂CO₃或Cs₂CO₃)存在下在溶剂(诸如丙酮或AcCN)中在约室温或80℃的温度下(在添加或不添加四丁基溴化铵的情况下)与4-硝基-2H-[1,2,3]三唑(T.E.Eagles等人，Organicpreparationsandprocedures2(2),117-119,1970；P.N.NeumanJ.Heterocycl.Chem.8，51-56,1971)偶合。或者，反应可在碱(诸如DIPEA)存在下在溶剂(诸如DMF、丙酮或两者的混合物)中在约室温或50℃的温度下进行，i)藉由在金属催化剂(诸如Pd/C、Pt/C或PtO₂)存在下在约室温的温度下在适当溶剂(诸如MeOH或EtOH)中氢化或藉由在溶剂混合物(诸如H₂O/EtOH)中在氯化铵存在下在室温至约95℃范围的温度下以金属(诸如铁)还原来还原硝基；j)在约室温的温度下在适当溶剂(诸如CH₂Cl₂)中在碱(诸如Et₃N或DIPEA)存在下与适当酰氯偶合。适当酰氯可由结构6的相应羧酸在约室温的温度下藉由在DMF存在下在适合的溶剂(诸如甲苯)中与试剂(诸如乙二酰氯)反应制备。或者，使用标准酰胺偶合条件(诸如EDC/HOBt/DMAP或TBTU或HBTU或PyBOP)在碱(诸如DIPEA或Et₃N)存在下在约室温的温度下在适合的溶剂(诸如CH₂Cl₂(或CH₂Cl₂与DMF的混合物))中与结构6的适当羧酸偶合。

结构3的化合物可藉由在约室温的温度下在适当溶剂(诸如CH₂Cl₂)中在碱(诸如Et₃N或DIPEA)存在下使1-(2-((4-氨基-2H-1,2,3-三唑-2-基)甲基)噁唑-4-基)乙酮(WO2009/077990，第105页)与适当酰氯反应来制备。适当酰氯可由结构6的相应羧酸在约室温的温度下藉由与试剂(诸如乙二酰氯)在DMF存在下在适合的溶剂(诸如甲苯)中反应制备。或者，使用标准酰胺偶合条件(诸如EDC/HOBt/DMAP或TBTU或HBTU或PyBOP)在碱(诸如DIPEA或Et₃N)存在下在约室温的温度下在适合的溶剂(诸如CH₂Cl₂)中使1-(2-((4-氨基-2H-1,2,3-三唑-2-基)甲基)噁唑-4-基)乙酮可与结构6的适当羧酸偶合。

结构6的酸可市面上购得、为本领域中所熟知或根据WO2009/077990(第112页至第116页)中所述的方法或类似方法进行制备。

结构6

1-(2-((4-硝基-2H-1,2,3-三唑-2-基)甲基)噁唑-4-基)乙酮(WO2009/077990中所述)亦可藉由使甲烷磺酸4-乙酰基-噁唑-2-基甲酯(WO2009/077990，第105页中所述)与4-硝基-2H-[1,2,3]三唑(T.E.Eagles等人，Organicpreparationsandprocedures2(2),117-119,1970；P.N.NeumanJ.Heterocycl.Chem.8,51-56,1971)在碱(诸如K₂CO₃或Cs₂CO₃)存在下在溶剂(诸如丙酮或AcCN)中在约室温或80℃的温度下(在添加或不添加四丁基溴化铵的情况下)反应进行制备。或者，反应可在碱(诸如DIPEA)存在下在溶剂(诸如DMF、丙酮或两者的混合物)中在约室温或50℃的温度下进行。

实验部分

缩写(如本文所用且在以上描述中)

Ac乙酰基

AcCN乙腈

AlMe₃三甲基铝

aq.水性

COAD慢性阻塞性气管病

COLD慢性阻塞性肺病

COPD慢性阻塞性肺部疾病

DAD二极管数组检测器

DCCN,N'-二环己基碳化二亚胺

DIPEA二异丙基乙胺

DiBAL-H二异丁基氢化铝

DMAP4-N,N-二甲基氨基吡啶

DMEM达尔伯克改良伊格尔培养基(dulbecco'smodified

eagle'smedium)

DMF二甲基甲酰胺

DMSO二甲亚砜

EA乙酸乙酯

EC₅₀半数有效浓度

EDCN-(3-二甲基氨基丙基)-N'-乙基-碳化二亚胺盐酸盐

ELSD蒸发光散射检测

eq.当量

Et乙基

乙醚(Ether)或Et₂O乙醚(diethylether)

Et₃N三乙胺

EtOH乙醇

FC硅胶快速管柱层析

FLIPR荧光成像板读取器

FPRL1甲酰基肽样受体1（formyl-peptidereceptorlike-1）

GSH谷胱甘肽

h小时

HBTUO-(苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐

(汉克氏(Hank's))BSS(汉克氏)平衡盐溶液

hept庚烷

HIV人类免疫缺乏病毒

HLM人类肝微粒体

HOBt羟基苯并三唑

HPLC高效液相色谱法

IU国际单位

LC-MS液相色谱-质谱分析

lem发射波长

lex激发波长

Me甲基

MeOH甲醇

min分钟

mM毫摩尔

μM微摩尔

MS质谱分析

Ms甲烷磺酰基

NADPH烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸

nm纳米

nM纳摩尔

NMR核磁共振

org.有机

p对位

PG保护基

PTFE聚四氟乙烯

PyBOP六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基-三-吡咯烷基-鏻

罗谢尔盐(Rochelle's酒石酸钾钠

salt)

RCP放射化学纯度

rf比移值

rpm每分钟转数

rt室温

sat.饱和

SDS十二烷基硫酸钠

sol.溶液

TBAF四正丁基氟化铵

TBDMS叔丁基-二甲基-硅烷基

TBTUO-(苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲四氟硼酸盐

TFA三氟乙酸

THF四氢呋喃

TLC薄层层析

t_R滞留时间

UV紫外线

Vis可见光

I化学

通则。所有温度均以摄氏温度(℃)形式陈述。除非另外指出，否则反应在室温下进行。

用0.2mm板进行分析型薄层层析(TLC)：Merck，硅胶60F₂₅₄。用0.2mm或0.5mm板进行制备型薄层层析(TLC)：Merck，硅胶60F₂₅₄。用UV或用KMnO₄(3g)、K₂CO₃(20g)、NaOH5%(3mL)及H₂O(300mL)的溶液，随后加热来进行检测。

快速管柱层析(FC)及过滤使用硅胶60Merck(0.063mm-0.200mm)或Macherey-Nagel硅胶(0.063mm-0.200mm)进行；以EA、hept、CH₂Cl₂、CHCl₃、MeOH、NH₄OH或其混合物洗脱。

LC-MS条件10(若非另外指定)：分析：DionexHPG-3000二元泵，MS：ThermoMSQMS，DAD：DionexPDA3000，ELSD:PolymerLabELS2100。管柱：AscentisExpressC182.7μm，2.1×30mmID来自Sigma-Aldrich，在DionexTCC-3000隔室中恒温。洗脱剂：A：H₂O+0.05%NH₄OH+2%AcCN；B：AcCN。方法：梯度：在2.00分钟内5%B→95%B。流速：1.8mL/min。检测：UV/可见光及/或ELSD及MS，t_R以分钟给出。

LC-MS条件02(若非另外指定)：分析：ThermoFinniganMSQPlusMS伴以Agilent1100二元泵及DAD。管柱：ZorbaxSB-AQ5μm，4.6×50mmID来自AgilentTechnologies。洗脱剂：A：H₂O+0.04%TFA；B：AcCN；梯度：在1分钟内5%B→95%B。流速：4.50mL/min。检测：UV/可见光及/或ELSD及MS，t_R以分钟给出。

LC-MS条件04(若非另外指定)：分析：DionexP680，MS：ThermoMSQPlus，DAD：AgilentG1315A，ELSD：SedereSedex85。管柱：WatersXBridgeC185μm,4.6×50mm。洗脱剂：A：水/NH₃([NH₃]=13mmol)；B：AcCN。方法：梯度：在0.75分钟内5%B→95%B。流速：4.5mL/min。检测：UV/可见光及/或ELSD及MS，t_R以分钟给出。

LC-MS条件06(若非另外指定)：分析：泵：DionexHPG-3200RS，MS：ThermoMSQPlus，DAD：DionexDAD-3000RS，ELSD：SedereSedex85。管柱：AtlantisT35μM，4.6×30mmID来自Waters，在DionexTCC-3200隔室中恒温(40℃)。洗脱剂：A：H₂O+0.04%TFA；B：AcCN。方法：梯度：在1.00分钟内5%B→95%B。流速：4.5mL/min。检测：UV/可见光及/或ELSD及MS，t_R以分钟给出。

HPLC制备型：X-BridgeC185μm，50×19mmID来自Waters。洗脱剂：A：H₂O+0.5%NH₄OH；B：AcCN；梯度：在5分钟内10%B→90%B。流速：40.0mL/min。检测：UV/可见光及/或ELSD及MS，t_R以分钟给出。

NMR：BrukerAvance400(400MHz)；VarianMercury300(300MHz)；化学位移系以相对于所用溶剂的ppm给出；多重性：s=单峰，d=双重峰，t=三重峰，q=四重峰，p=五重峰，hex=六重峰，hept=七重峰，m=多重峰，br=宽峰，偶合常数系以Hz给出。

虽然以下实例说明本发明，但完全不限制其范畴。

一般程序

一般程序1(GP1)：酰胺偶合：

在配备有磁性搅拌棒的小瓶中且在惰性氛围(N₂)下，以a)含0.4M2-(2-((4-氨基-2H-1,2,3-三唑-2-基)甲基)噁唑-4-基)丙-2-醇(0.1mmol，1.0当量)的CH₂Cl₂/DMF为4比1的混合物(0.25mL)、b)HOBT(2.0当量)、DMAP(0.25当量)及DIPEA(2.0当量)于CH₂Cl₂(0.25mL)中的混合物及c)含EDC·HCl(1.5当量)的CH₂Cl₂(0.5mL)相继处理所需酸(1.5当量)。随后，将反应混合物在室温下搅拌12小时。将所得溶液装入含有以水(0.6mL)处理的isoluteHM-N(来自InternationalSorbentTechnology的硅藻土)(800mg)的针筒中，且以CH₂Cl₂(5×1mL)洗涤针筒。在减压下移除溶剂。利用制备型HPLC纯化，提供所需材料。

合成参考化合物

参考化合物1：

N-(2-((4-(2-羟基丙-2-基)噻唑-2-基)甲基)-2H-1,2,3-三唑-4-基)-2-甲基-5-(间甲苯基)噁唑-4-甲酰胺：

在配备有磁性搅拌棒的火焰干燥圆底烧瓶中且在惰性氛围(N₂)下，在0℃下以AlMe₃(0.3mL的含1.0M溶液的庚烷，0.3mmol)处理N-(2-((4-乙酰基噻唑-2-基)甲基)-2H-1,2,3-三唑-4-基)-2-甲基-5-(间甲苯基)噁唑-4-甲酰胺(来自WO2009/077990的实例75；50mg，0.12mmol)于CH₂Cl₂(1.1mL)中的溶液，且将所得混合物在0℃下搅拌2小时。将反应混合物小心倾入氯化铵的饱和水溶液(5mL)中且以CH₂Cl₂(10mL)稀释。随后添加1NHCl(5mL)。分离各层且经Na₂SO₄干燥有机相，过滤且在减压下移除溶剂。利用FC(1:1hept-EA)纯化残余物，得到呈无色油状的标题化合物：TLC：rf(1:1hept-EA)=0.20。LC-MS条件02：t_R=0.88分钟，[M+H]⁺=438.94。

合成中间体

N-(2-((4-乙酰基噁唑-2-基)甲基)-2H-1,2,3-三唑-4-基)-2-甲基-5-(间甲苯基)噁唑-4-甲酰胺：

在配备有磁性搅拌棒的火焰干燥圆底烧瓶中且在惰性氛围(N₂)下，相继以DMF(0.02mL，0.3mmol)及乙二酰氯(0.84mL，9.50mmol)处理2-甲基-5-(间甲苯基)噁唑-4-甲酸(WO2009/077990)(1.38g，6.33mmol)于无水甲苯(63mL)中的溶液，且将反应混合物在室温下搅拌50分钟。随后，将溶剂在减压下移除。将所得酰氯化物溶解于CH₂Cl₂(23mL)中且逐滴添加至1-(2-((4-氨基-2H-1,2,3-三唑-2-基)甲基)噁唑-4-基)乙酮(WO2009/077990)(1.31g，6.33mmol)及DIPEA(3.3mL，18.99mmol)于CH₂Cl₂(40mL)中的溶液，且将所得混合物在室温下搅拌隔夜。添加水，分离各层，且以CH₂Cl₂萃取水层三次。将合并的有机层以盐水洗涤，经MgSO₄干燥，过滤且在减压下移除溶剂。利用FC(4:6hept-EA)纯化残余物，得到标题化合物，其自热EtOH再结晶得到白色固体：TLC：rf(4:6hept-EA)=0.35。LC-MS条件02：t_R=0.99分钟，[M+H]⁺=407.22。

2-(乙酰氧基甲基)噁唑-4-甲酸甲酯：

在配备有磁性搅拌棒的火焰干燥圆底烧瓶中且在惰性氛围(N2)下，相继以乙酸酐(8.0mL)及乙酸钠(39.72g，484.14mmol)处理2-(氯甲基)噁唑-4-甲酸甲酯(OrganicProcessResearch&Development2001,5,37-44)(20.00g，113.91mmol)于乙酸(80mL)中的溶液。在120℃下搅拌反应混合物3小时。在室温下添加EA(400mL)且以碳酸钠饱和水溶液中和悬浮液。分离各层且以EA(2×400mL)萃取水层。将合并的有机层经Na₂SO₄干燥，过滤且在减压下移除溶剂，得到呈白色固体状的标题化合物。LC-MS条件06：tR=0.48分钟，[M+H]+=200.41。

2-(羟甲基)噁唑-4-甲酸甲酯：

在配备有磁性搅拌棒的火焰干燥圆底烧瓶中且在惰性氛围(N₂)下，将钠(1.32g，57.42mmol)逐份添加至MeOH(145mL)中。随后添加2-(乙酰氧基甲基)噁唑-4-甲酸甲酯(23.30g，116.99mmol)，且将反应混合物在室温下搅拌1小时。随后添加NH₄Cl饱和水溶液(760mL)且以EA(2×760mL)萃取混合物。合并的有机层经MgSO₄干燥，过滤且在减压下移除溶剂，得到呈白色固体状的标题化合物：TLC：rf(9:1hept-EA)=0.33。LC-MS条件06：t_R=0.31分钟，[M+H]⁺=158.15。

2-(((叔丁基二甲基硅烷基)氧基)甲基)噁唑-4-甲酸甲酯：

在配备有磁性搅拌棒的火焰干燥圆底烧瓶中且在惰性氛围(N₂)下，相继以咪唑(10.40g，152.75mmol)及叔丁基二甲基氯硅烷(23.02g，152.75mmol)处理2-(羟甲基)噁唑-4-甲酸甲酯(12.00g，76.37mmol)于THF(360mL)中的溶液，且将所得混合物在室温下搅拌2.5小时。添加EA(360mL)及NH₄Cl饱和水溶液(360mL)。分离各层且以EA(360mL)萃取水层。将合并的有机层经MgSO₄干燥，过滤且在减压下移除溶剂。利用FC(7:3hept-EA)纯化残余物，得到呈白色固体状的标题化合物：TLC：rf(7:3hept-EA)=0.44。LC-MS条件06：t_R=0.98分钟，[M+H]⁺=272.38。

1-(2-(((叔丁基二甲基硅烷基)氧基)甲基)噁唑-4-基)环丙醇：

在配备有磁性搅拌棒的火焰干燥圆底烧瓶中且在惰性氛围(N₂)下，以四异丙氧基钛(IV)(3.27mL，11.05mmol)处理2-(((叔丁基二甲基硅烷基)氧基)甲基)噁唑-4-甲酸甲酯(3.00g，11.05mmol)于THF(110mL)中的溶液。在室温下在30分钟内经由注射泵向所得溶液中添加溴化乙基镁(18.4mL的3M乙醚溶液，55.27mmol)，且将所得溶液在室温下搅拌3小时。添加EA(100mL)及1NHCl(50mL)。分离各层，且以EA(2×100mL)萃取水层，且以碳酸氢钠饱和水溶液(200mL)、盐水(200mL)洗涤合并的有机层。将有机层经Na₂SO₄干燥，过滤且在减压下移除溶剂。利用FC(4:1hept-EA)纯化残余物，得到呈黄色油状的标题化合物：TLC：rf(4:1hept-EA)=0.28。LC-MS条件06：t_R=0.92分钟，[M+H]⁺=270.41。

特戊酸1-(2-(((叔丁基二甲基硅烷基)氧基)甲基)噁唑-4-基)环丙酯：

在配备有磁性搅拌棒的火焰干燥圆底烧瓶中且在惰性氛围(N₂)下，以特戊酰氯(0.28mL，2.27mmol)处理1-(2-(((叔丁基二甲基硅烷基)氧基)甲基)噁唑-4-基)环丙醇(509mg，1.89mmol)于吡啶(2.0mL)中的溶液，且将反应混合物在室温下搅拌隔夜。相继添加NH₄Cl饱和水溶液(10mL)及EA(10mL)。相继以CuSO₄溶液(2×15mL)及盐水(10mL)洗涤有机层。分离各层且将有机层经MgSO₄干燥，过滤且在减压下移除溶剂。利用FC(9:1hept-EA)纯化残余物，得到呈无色油状的标题化合物：TLC：rf(9:1hept-EA)=0.35。LC-MS条件06：t_R=1.19分钟，[M+H]⁺=354.18。

特戊酸1-(2-(羟甲基)噁唑-4-基)环丙酯：

在配备有磁性搅拌棒的火焰干燥圆底烧瓶中且在惰性氛围(N₂)下，在0℃下以TBAF(2.55ml的1MTHF溶液，2.55mmol)处理特戊酸1-(2-(((叔丁基二甲基硅烷基)氧基)甲基)噁唑-4-基)环丙酯(450mg，1.27mmol)于THF(13.0mL)中的溶液，且将反应混合物在0℃下搅拌30分钟。以EA(30mL)稀释反应混合物，分离各层且以NH₄Cl饱和水溶液及盐水相继洗涤有机层。将有机层经MgSO₄干燥，过滤且在减压下移除溶剂。利用FC(1:1hept-EA)纯化残余物，得到呈无色油状的标题化合物：TLC：rf(1:1hept-EA)=0.29。LC-MS条件06：t_R=0.69分钟，[M+H]⁺=240.11。

特戊酸1-(2-(((甲磺酰基)氧基)甲基)噁唑-4-基)环丙酯：

在配备有磁性搅拌棒的火焰干燥圆底烧瓶中且在惰性氛围(N₂)下，在0℃下相继以Et₃N(0.22mL，1.57mmol)及DMAP(15mg，0.12mmol)处理特戊酸1-(2-(羟甲基)噁唑-4-基)环丙酯(288mg，1.20mmol)于CH₂Cl₂(12.0mL)中的溶液。随后，逐滴添加甲烷磺酰氯(0.11mL，1.44mmol)且将反应混合物在室温下搅拌1小时。添加水(5mL)，分离各层，且将有机相经Na₂SO₄干燥，过滤且在减压下移除溶剂，得到呈黄色油状的标题化合物。LC-MS条件06：t_R=0.84分钟，[M+H]⁺=318.19。

特戊酸1-(2-((4-硝基-2H-1,2,3-三唑-2-基)甲基)噁唑-4-基)环丙酯：

在配备有磁性搅拌棒的火焰干燥圆底烧瓶中且在惰性氛围(N₂)下，将特戊酸1-(2-(((甲磺酰基)氧基)甲基)噁唑-4-基)环丙酯(400mg，1.26mmol)于DMF(3.0mL)中的溶液添加至经DIPEA(0.43mL，2.53mmol)预处理30分钟的4-硝基-2H-[1,2,3]三唑(T.E.Eagles等人，Organicpreparationsandprocedures2(2),117-119,1970；P.N.NeumanJ.Heterocycl.Chem.8,51-56,1971)(1.80g的8%DMF溶液，1.26mmol)于DMF(3.0mL)中的溶液中，且将反应混合物在50℃下搅拌隔夜。相继添加水(20mL)及EA(20mL)。分离各层且以水(3×10mL)洗涤有机层，经Na₂SO₄干燥，过滤且在减压下移除溶剂。利用FC(7:3hept-EA)纯化残余物，得到呈黄色油状的标题化合物：TLC：rf(7:3hept-EA)=0.34。LC-MS条件06：t_R=0.91分钟，[M+H]⁺=336.22。

特戊酸1-(2-((4-氨基-2H-1,2,3-三唑-2-基)甲基)噁唑-4-基)环丙酯：

在配备有磁性搅拌棒的火焰干燥圆底烧瓶中且在惰性氛围(N₂)下，在85℃下将含特戊酸1-(2-((4-硝基-2H-1,2,3-三唑-2-基)甲基)噁唑-4-基)环丙酯(150mg，0.45mmol)、铁粉(76mg，1.34mmol)与NH₄Cl(121mg，2.24mmol)的混合物的EtOH(2.0mL)与水(1.0mL)的混合物搅拌15分钟。趁热过滤反应混合物且在减压下浓缩。相继添加CH₂Cl₂(5.0mL)及1NNaOH(5.0mL)。分离各层且以CH₂Cl₂(2×5mL)萃取水层。将合并的有机萃取物经MgSO₄干燥，过滤且在减压下移除溶剂，得到呈黄色油状的标题化合物。LC-MS条件06：t_R=0.73分钟；[M+H]⁺=306.04。

特戊酸1-(2-((4-(2-甲基-5-(间甲苯基)噁唑-4-甲酰氨基)-2H-1,2,3-三唑-2-基)甲基)噁唑-4-基)环丙酯：

在配备有磁性搅拌棒的火焰干燥圆底烧瓶中且在惰性氛围(N₂)下，以DMAP(13mg，0.11mmol)、HOBt(69mg，0.51mmol)、EDC·HCl(203mg，1.06mmol)及DIPEA(0.29mL，1.69mmol)依次处理2-甲基-5-(间甲苯基)噁唑-4-甲酸(WO2009/077990)(92mg，0.42mmol)于CH₂Cl₂(2.0mL)中的混合物，且将混合物在室温下搅拌30分钟。随后，添加特戊酸1-(2-((4-氨基-2H-1,2,3-三唑-2-基)甲基)噁唑-4-基)环丙酯(129mg，0.42mmol)于CH₂Cl₂(2.0mL)中的溶液，且在室温下将反应混合物搅拌隔夜。随后，以CH₂Cl₂(10mL)稀释反应混合物，分离各层且以水(10mL)洗涤有机层，经MgSO₄干燥，过滤且在减压下移除溶剂。利用FC(2:1hept-EA)纯化残余物，得到呈白色发泡体状的标题化合物：TLC：rf(2:1hept-EA)=0.25。LC-MS条件06：t_R=1.10分钟，[M+H]⁺=505.37。

2-(2-(氯甲基)噁唑-4-基)丙-2-醇：

在配备有磁性搅拌棒的火焰干燥圆底烧瓶中且在惰性氛围(N₂)下，在0℃下以甲基氯化镁(51.8mL的3.0MTHF溶液，155.49mmol)逐滴处理2-(氯甲基)噁唑-4-甲酸甲酯(OrganicProcessResearch&Development2001,5,37-44)(13.00g，74.04mmol)于THF(433mL)中的溶液，且将所得橙色溶液在0℃下搅拌1.5小时。将反应混合物小心倾倒于经冰冷却的NH₄Cl饱和水溶液(300mL)上。将其以EA(3×200mL)萃取，且以盐水(300mL)洗涤合并的有机层，经MgSO₄干燥，过滤且在减压下移除溶剂。利用FC(6:4hept-EA)纯化残余物，得到呈黄色油状的标题化合物：TLC：rf(6:4hept-EA)=0.24。LC-MS条件06：t_R=0.49。

2-(2-((4-硝基-2H-1,2,3-三唑-2-基)甲基)噁唑-4-基)丙-2-醇：

在配备有磁性搅拌棒的火焰干燥圆底烧瓶中且在惰性氛围(N₂)下，将2-(2-(氯甲基)噁唑-4-基)丙-2-醇(1.32g，7.51mmol)于DMF(22.0mL)中的溶液添加至经DIPEA(2.57mL，15.01mmol)预处理30分钟的4-硝基-2H-[1,2,3]三唑(T.E.Eagles等人，Organicpreparationsandprocedures2(2),117-119,1970；P.N.NeumanJ.Heterocycl.Chem.8,51-56,1971)(12.84g的8%DMF溶液，9.01mmol)于DMF(22.0mL)中的溶液中，且将反应混合物在50℃下搅拌隔夜。相继添加水(60mL)及EA(60mL)。分离各层且以水(3×60mL)洗涤有机层，经MgSO₄干燥，过滤且在减压下移除溶剂。利用FC(4:6hept-EA)纯化残余物，得到呈橙色油状的标题化合物：TLC：rf(4:6hept-EA)=0.30。LC-MS条件06：t_R=0.55min。

2-(2-((4-氨基-2H-1,2,3-三唑-2-基)甲基)噁唑-4-基)丙-2-醇：

在配备有磁性搅拌棒的火焰干燥圆底烧瓶中且在惰性氛围(N₂)下，在85℃下将含2-(2-((4-硝基-2H-1,2,3-三唑-2-基)甲基)噁唑-4-基)丙-2-醇(2.40g，10.75mmol)、铁粉(1.82g，32.25mmol)与NH₄Cl(2.90g，53.76mmol)的混合物的EtOH(70mL)与水(35mL)的混合物搅拌15分钟。趁热过滤反应混合物且在减压下浓缩。相继添加CH₂Cl₂(110mL)及1NNaOH(65mL)。分离各层且以CH₂Cl₂(5×50mL)萃取水层。将合并的有机萃取物经M_gSO₄干燥，过滤且在减压下移除溶剂，得到呈橙色油状的标题化合物。LC-MS条件06：t_R=0.35分钟；[M+H]⁺=224.00。

制备实例

实例1：

2-甲基-5-间甲苯基-噁唑-4-甲酸{2-[4-(1-羟基-1-甲基-乙基)-噁唑-2-基甲基]-2H-[1,2,3]三唑-4-基}-酰胺：

在配备有磁性搅拌棒的火焰干燥圆底烧瓶中且在惰性氛围(N₂)下，在0℃下以AlMe₃(2.3mL的2.0M庚烷溶液，4.6mmol)处理N-(2-((4-乙酰基噁唑-2-基)甲基)-2H-1,2,3-三唑-4-基)-2-甲基-5-(间甲苯基)噁唑-4-甲酰胺(622mg，1.53mmol)于CH₂Cl₂(15mL)中的溶液，且将所得混合物在0℃下搅拌2小时。将反应混合物小心倾入氯化铵的饱和水溶液(10mL)中且以CH₂Cl₂(20mL)稀释。随后添加1NHCl(10mL)。分离各层且将有机相经Na₂SO₄干燥、过滤且在减压下移除溶剂。利用FC(3:7hept-EA)纯化残余物，得到呈白色固体状的标题化合物：TLC：rf(3:7hept-EA)=0.28。LC-MS条件06：t_R=0.85分钟，[M+H]⁺=423.17。

实例2：

2-甲基-5-间甲苯基-噁唑-4-甲酸{2-[4-(1-羟基-环丙基)-噁唑-2-基甲基]-2H-[1,2,3]三唑-4-基}-酰胺：

在配备有磁性搅拌棒的火焰干燥圆底烧瓶中且在惰性氛围(N₂)下，在0℃下以DiBAL-H(0.7mL的1MTHF溶液，0.70mmol)处理特戊酸1-(2-((4-(2-甲基-5-(间甲苯基)噁唑-4-甲酰氨基)-2H-1,2,3-三唑-2-基)甲基)噁唑-4-基)环丙酯(70mg，0.14mmol)于THF(1.4mL)中的溶液，且将所得溶液在0℃下搅拌3.5小时。将反应混合物倾倒于罗谢尔盐水溶液(14mL)上，且将混合物在室温下剧烈搅拌2小时。分离两层且以EA(14mL)萃取水相。将合并的有机层经MgSO₄干燥，过滤且在减压下移除溶剂。利用FC(4:6hept-EA)纯化残余物，得到呈黄色油状的标题化合物：TLC：rf(4:6hept-EA)=0.30。LC-MS条件06：t_R=0.86分钟，[M+H]⁺=421.22。

实例3：

5-苯基-噁唑-4-甲酸{2-[4-(1-羟基-1-甲基-乙基)-噁唑-2-基甲基]-2H-[1,2,3]三唑-4-基}-酰胺：

根据GP1使用5-苯基噁唑-4-甲酸(市售)合成。LC-MS条件10：t_R=0.95分钟，[M+H]⁺=395.12。

实例4：

5-(4-氟-苯基)-噁唑-4-甲酸{2-[4-(1-羟基-1-甲基-乙基)-噁唑-2-基甲基]-2H-[1,2,3]三唑-4-基}-酰胺：

根据GP1使用5-(4-氟苯基)噁唑-4-甲酸(WO2009/077990，第114页)合成。LC-MS条件10：t_R=0.99分钟，[M+H]⁺=413.08。

实例5：

2-甲基-5-(3-三氟甲基-苯基)-噁唑-4-甲酸{2-[4-(1-羟基-1-甲基-乙基)-噁唑-2-基甲基]-2H-[1,2,3]三唑-4-基}-酰胺：

根据GP1使用2-甲基-5-(3-(三氟甲基)苯基)噁唑-4-甲酸(WO2009/077990，第113页)合成。LC-MS条件10：t_R=1.22分钟，[M+H]⁺=477.02。

实例6：

5-(3-甲氧基-苯基)-2-甲基-噁唑-4-甲酸{2-[4-(1-羟基-1-甲基-乙基)-噁唑-2-基甲基]-2H-[1,2,3]三唑-4-基}-酰胺：

根据GP1使用5-(3-甲氧苯基)-2-甲基-噁唑-4-甲酸(WO2009/077990，第112页)合成。LC-MS条件10：t_R=1.06分钟，[M+H]⁺=439.08。

实例7：

5-(3-氯-苯基)-2-甲基-噁唑-4-甲酸{2-[4-(1-羟基-1-甲基-乙基)-噁唑-2-基甲基]-2H-[1,2,3]三唑-4-基}-酰胺：

根据GP1使用5-(3-氯苯基)-2-甲基-噁唑-4-甲酸(WO2009/077990，第113页)合成。LC-MS条件10：t_R=1.18分钟，[M+H]⁺=443.02。

实例8：

5-(3-氯-苯基)-噁唑-4-甲酸{2-[4-(1-羟基-1-甲基-乙基)-噁唑-2-基甲基]-2H-[1,2,3]三唑-4-基}-酰胺：

根据GP1使用5-(3-氯苯基)噁唑-4-甲酸(WO2009/077990，第114页)合成。LC-MS条件10：t_R=1.08分钟，[M+H]⁺=429.02。

实例9：

5-(3-甲氧基-苯基)-噁唑-4-甲酸{2-[4-(1-羟基-1-甲基-乙基)-噁唑-2-基甲基]-2H-[1,2,3]三唑-4-基}-酰胺：

根据GP1使用5-(3-甲氧苯基)噁唑-4-甲酸(WO2009/077990，第114页)合成。LC-MS条件10：t_R=0.98分钟，[M+H]⁺=425.09。

实例10：

2-甲基-5-苯基-噁唑-4-甲酸{2-[4-(1-羟基-1-甲基-乙基)-噁唑-2-基甲基]-2H-[1,2,3]三唑-4-基}-酰胺：

根据GP1使用2-甲基-5-苯基噁唑-4-甲酸(WO2009/077990，第113页)合成。LC-MS条件10：t_R=1.04分钟，[M+H]⁺=409.13。

实例11：

5-(3-氟-苯基)-噻唑-4-甲酸{2-[4-(1-羟基-1-甲基-乙基)-噁唑-2-基甲基]-2H-[1,2,3]三唑-4-基}-酰胺：

根据GP1使用5-(3-氟苯基)噻唑-4-甲酸(WO2009/077990，第115页)合成。LC-MS条件10：t_R=0.97分钟，[M+H]⁺=429.03。

实例12：

2-甲基-5-(3-三氟甲氧基-苯基)-噁唑-4-甲酸{2-[4-(1-羟基-1-甲基-乙基)-噁唑-2-基甲基]-2H-[1,2,3]三唑-4-基}-酰胺：

根据GP1使用2-甲基-5-(3-(三氟甲氧基)苯基)噁唑-4-甲酸(WO2009/077990，第113页)合成。LC-MS条件10：t_R=1.26分钟，[M+H]⁺=493.04。

实例13：

5-(3-氟-苯基)-2-甲基-噁唑-4-甲酸{2-[4-(1-羟基-1-甲基-乙基)-噁唑-2-基甲基]-2H-[1,2,3]三唑-4-基}-酰胺：

根据GP1使用5-(3-氟苯基)2-甲基噁唑-4-甲酸(WO2009/077990，第112页)合成。LC-MS条件10：t_R=1.09分钟，[M+H]⁺=427.08。

实例14：

5-间甲苯基-噁唑-4-甲酸{2-[4-(1-羟基-1-甲基-乙基)-噁唑-2-基甲基]-2H-[1,2,3]三唑-4-基}-酰胺：

根据GP1使用5-(间甲苯基)噁唑-4-甲酸(WO2009/077990，第114页)合成。LC-MS条件10：t_R=1.05分钟，[M+H]⁺=409.09。

实例15：

2-环丙基-5-间甲苯基-噁唑-4-甲酸{2-[4-(1-羟基-1-甲基-乙基)-噁唑-2-基甲基]-2H-[1,2,3]三唑-4-基}-酰胺：

根据GP1使用2-环丙基-5-(间甲苯基)噁唑-4-甲酸(如WO2009/077990第114页中2-环丙基-5-苯基-噁唑-4-甲酸来制备，但以3-氧代-3-(间甲苯基)丙酸乙酯为起始物)合成。LC-MS条件10：t_R=1.29分钟，[M+H]⁺=449.1。

II.生物测定

活体外测定

根据以下实验方法测定式(I)化合物的ALX受体激动活性。

实验方法：

细胞内钙量测：

使表现重组人类ALX受体与G蛋白Gα16的细胞(HEK293-hALXR-Gα16)在生长培养基(GM)中生长至长满80%。用细胞解离缓冲液(Invitrogen，13151-014)使细胞自培养皿剥离，且在1'000rpm下离心5分钟，收集于分析缓冲液(AB)(等份的汉克氏BSS(Hank'sBSS，Gibco，14065-049)及无酚红的DMEM(Gibco，11880-028))中。在37℃、5%CO₂下于补充有1μMFluo-4(AM)(Invitrogen，F14202)及20mMHEPES(Gibco，15630-056)的AB中培养60分钟之后，洗涤细胞且再悬浮于AB中。随后依每孔70μl50'000个细胞接种于384孔FLIPR分析盘(Greiner，781091)上，且在1'000rpm下离心1分钟而沉降。于DMSO中配制10mM浓度的测试化合物的储备溶液，且在AB中连续稀释至活化剂量效应曲线所需的浓度。采用WKYMVm(PhoenixPeptides)作为参考激动剂。根据制造商标准说明书操作FLIPRTetra仪器(MolecularDevices)，添加4μl的10mM测试化合物的DMSO溶液，且在实验前先在分析缓冲液中稀释，以得到所需最终浓度。在添加测试化合物之前及之后监测lex=488nm及lem=540nm下的荧光变化。添加化合物之后高于基线值的发射峰值系在减去基线值之后才送出。在减去基线值(添加AB时)之后，相对于高浓度对照组(WKYMVm化合物，10nM最终浓度)校正数值。

例示化合物针对ALX受体的激动活性(EC₅₀值)示于表1中。

表1

比较测试结果

令人惊讶地发现叔醇仅在其如式(I)连接至噁唑-2-基的4位置时显示出作为ALX受体激动剂的较高活性。其它所测试的杂芳基叔醇衍生物活性明显较小。此与WO2009/077990中所揭示的对各种不同杂芳基均显示较高活性的乙酰基衍生物相反(表2，EC₅₀值来自胞内钙量测)。

表2(如上述测试中所测得的激动活性)

使用人类肝微粒体分析反应代谢物与蛋白质之间的共价结合

所述共价结合分析的目的为在人类肝微粒体(HLM)于NADPH再生系统存在下培养之后，测定每小时反应代谢物与蛋白质之间的共价结合量。所测得的共价结合速率以pmol结合药物等效物/mg蛋白质/h表示。若化合物与蛋白质共价结合的趋势较弱时，则此点将成为众所周知的优点。

培养法

将经放射性标记的化合物(³H或¹⁴C)以10μM浓度在具有含1.0mg/mL人类肝微粒体的0.1M磷酸盐缓冲液(pH7.4)的单一96孔盘中培养。为此，添加在各别溶剂(乙醇)中所制备的2.5μL体积的1mM储备溶液至最终体积250μL。在不存在或存在具有葡萄糖-6-磷酸脱氢酶的NADPH再生系统(20IU/ml去氢酶，25μl，包含含于0.1MTris缓冲液的11mMNADP钠盐、100mM葡萄糖-6-磷酸二钠盐、100mMMgCl₂，pH7.4)的情况下培养且另外在不存在或存在5mMGSH的情况下进行培养，以捕获反应中间体。亦测定在无NADPH、未经培养情况下的初始空白值以测定非特异性快速结合。藉由添加25μLNADPH再生系统来引发反应，且在1小时之后将200μL培养混合物添加于含有260μL冰冷乙腈的Multiscreen深孔solvinert96疏水性PTFE滤板(Millipore,Zug，瑞士)上来终止反应。将滤板在15℃的温度下，于600rpm下振荡15分钟，使微粒体蛋白质完全沉淀。最后，将沉淀的培养物在4℃下在冰箱中储存15分钟。

在10℃下，以1800g离心20分钟，分离蛋白质与滤液。蛋白质集结粒使用800μL甲醇/0.1%硫酸(v/v)，于1500g及10℃下离心2分钟，洗涤移除非特异性结合物。重复洗涤步骤六次。添加500μL0.1%(w/v)NaOH/1%(w/v)SDS水溶液再度溶解经洗涤的蛋白质集结粒。滤板以400rpm在60℃下振荡45分钟且以2000g在35℃下离心20分钟。重复此步骤一次且合并蛋白质溶液。

为了测定总放射性，将等分400μL蛋白质溶液与4mL液体闪烁混合液(IrgaSafeplus,PerkinElmer,Zürich，瑞士)混合且使用Tricarb2300TR液体闪烁分析仪(PerkinElmer)，藉助于外标准物(¹³³Ba)进行荧光校正，并在在线进行消光校正下分析。为了测定总蛋白质含量，使用BCA蛋白质分析套组(PerbioScience瑞士SA,Lausanne，瑞士)分析20μL蛋白质溶液等分试样。与微粒体蛋白质共价结合量的计算法如下：在有NADPH的情况下所测定的药物当量结合量(由背景值减去在无NADPH的情况下的药物当量结合量)除以各孔中经再溶解洗涤的蛋白质集结粒计算得到的蛋白质量，得到以pmol/mg蛋白质/小时表示的药物当量结合量。

血浆稳定性分析

使经过乳酸或氢氧化铵调整为pH7.4的大鼠或人类血浆在含有5%CO₂的培养箱中在37℃下在环绕式振荡下平衡。藉由添加1μM化合物(1μl含于DMSO的1mM储备溶液加至999μl血浆中)来引发反应。在开始时及在30分钟、1小时、2小时、4小时、6小时及24小时之后，将等分试样(30μl)转移至置于冰上的含有90μlMeOH的96孔盘中来终止反应。分析盘在Eppendorf恒温混匀器上以1400rpm涡转混合20分钟之后，在4℃下以3220g离心20分钟，且用LC-MSMS分析上清液。在含有0.1%二氯松(dichlorvos)的血浆中制备校准样本，且与培养样本同时分析，以进行定量。随后以小时为单位计算半衰期。

使用如上所述血浆稳定性分析已得到以下结果：

Claims

1.一种式(I)化合物，

其中：

R²表示氢、甲基或环丙基；

Q表示O或S；

或该化合物的盐。

2.如权利要求1的式(I)化合物，其中：

R²表示氢或甲基；

Q表示O；

或该化合物的盐。

3.如权利要求2的式(I)化合物，其中：

R¹表示未经取代或经卤素、(C₁-C₄)烷基或(C₁-C₄)烷氧基单取代的苯基；

或该化合物的盐。

4.如权利要求1至3中任一项的式(I)化合物，其中：

在R¹表示经单取代的苯基时，该苯基在间位上经取代；

或该化合物的盐。

5.如权利要求4的式(I)化合物，其中：

R²表示氢或甲基；

或该化合物的盐。

6.如权利要求4的式(I)化合物，其中：

R³及R⁴均表示甲基；

或该化合物的盐。

7.如权利要求5的式(I)化合物，其中：

R³及R⁴均表示甲基；

或该化合物的盐。

8.如权利要求4的式(I)化合物，其中：

R³及R⁴连同其所连接的碳原子一起形成环丙基环；

或该化合物的盐。

9.如权利要求5的式(I)化合物，其中：

R³及R⁴连同其所连接的碳原子一起形成环丙基环；

或该化合物的盐。

10.如权利要求4的式(I)化合物，其中：

Q表示O；

或该化合物的盐。

11.如权利要求1的式(I)化合物，其选自由以下组成的群：

或该化合物的盐。

12.一种医药组合物，其含有如权利要求1至9中任一项的式(I)化合物或其医药学上可接受的盐作为活性成分及至少一种治疗惰性赋形剂。

13.如权利要求1至9中任一项的式(I)化合物或其医药学上可接受的盐在制备用于预防或治疗对ALX受体活化作出反应的疾病或调节免疫反应的药物中的用途，其中所述疾病选自：发炎性疾病、阻塞性气管疾病、过敏病状、HIV介导的逆转录病毒感染、心血管病症、神经性病症、疼痛、朊病毒介导的疾病及类淀粉蛋白介导的病症。

14.如权利要求1至9中任一项的式(I)化合物或其医药学上可接受的盐在制备用于预防或治疗对ALX受体活化作出反应的疾病的药物中的用途，其中所述疾病是神经发炎。