JP6368609B2 - マンノース及び/又はマンノオリゴ糖含有組成物の製造方法 - Google Patents
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(1)マンナン、グルコマンナン、ガラクトマンナン、又はそれらを構成糖として一種類以上含有する天然物に、ヘミセルラーゼを作用させてマンノース及び/又はマンノオリゴ糖含有組成物を製造する方法であって、前記ヘミセルラーゼを作用させる前または作用させると同時に前記ヘミセルラーゼを加熱処理することを特徴とするマンノース及び/又はマンノオリゴ糖含有組成物の製造方法。
(2)前記天然物にヘミセルラーゼを作用させる温度が、前記ヘミセルラーゼの至適温度以下の温度であることを特徴とする(1)記載のマンノース及び/又はマンノオリゴ糖含有組成物の製造方法。
(3)前記へミセルラーゼが、マンナナーゼ又はマンノシダーゼであることを特徴とする(1)又は(2)に記載のマンノース及び/又はマンノオリゴ糖含有組成物の製造方法。
(4)前記へミセルラーゼが、アスペルギルス属由来又はトリコデルマ属由来であることを特徴とする(1)〜(3)いずれかに記載のマンノース及び/又はマンノオリゴ糖含有組成物の製造方法。
(5)前記マンナン、グルコマンナン、ガラクトマンナン、又はそれらを構成糖として一種類以上含有する天然物が、パーム核又はココヤシであることを特徴とする(1)〜(4)いずれかに記載のマンノース及び/又はマンノオリゴ糖含有組成物の製造方法。
本発明のマンナン、グルコマンナン、ガラクトマンナン、又はそれらを構成糖として一種類以上含有する天然物は、マンナン、グルコマンナン、ガラクトマンナンを構成糖として含有するものであれば特に限定されるものではなく、例えば、パーム核、ココヤシ(コプラ)またはそれらの搾油残渣(ミール)、ツクネイモ、ヤマイモ、コンニャクイモ、ローカストビーン、グァー豆、コーヒー豆などが挙げられる。当該天然物は、天然物そのものを用いても良いし、精製したものを用いても良い。それらの混合物を用いても良い。
(1)標準物質:
マンノース(純正化学株式会社製 商品名「D−(+)マンノース 特級」)
グルコース(純正化学株式会社製 商品名「D−(+)グルコース 特級」)
ガラクトース(石津製薬株式会社製 商品名「D−(+)ガラクトース 特級」)
β1−4マンノビオース(フナコシ株式会社製商品名「β1−4mannobios e」)
β1−4マンノトリオース(フナコシ株式会社製商品名「β1−4mannotriose」)
(2)分析方法
A.高速液体カラムクロマトグラフィー法1(マンノース、グルコース、β1−4マン ノビオース、β1−4マンノトリオースの分析)
分析用カラム;アミネックスHPX−87H(バイオラッド社製)
カラム温度:60℃、移動相:0.005M硫酸、流速:0.6mL/min、検 出:示差屈折計
B.高速液体カラムクロマトグラフィー法2(ガラクトースの分析)
分析用カラム;アミネックスHPX−87P(バイオラッド社製)
カラム温度:60℃、移動相:水、流速:0.6mL/min、検出:示差屈折計
全自動アミノ酸分析装置(JLC500/V、日本電子株式会社製)
標準物質: アミノ酸(島津製作所製 商品名「アミノ酸混合標準液AN−II型」)
アミノ酸(島津製作所製 商品名「アミノ酸混合標準液B型」)
分光光度計法。
光路長1cmセルにおけるAbs420nm値からAbs720nmを減じた値を着色 度とした。
パーム核ミール(インドネシア産)450gに水と硫酸を加えてpH1.0とし、パーム核ミールの4倍容量にあわせた。90℃で5時間加熱処理を実施した後、水酸化ナトリウム溶液を加えてpH4.0±0.1に調整した。吸引ろ過により固形分を回収、追加加水して吸引し、塩を除去した。回収した固形分(洗浄後原料)の質量は756g、水分率は5%であった。
参考例1で得た洗浄後原料16.8gに、セルロシンGM5エイチビィアイ株式会社製、力価10000ユニット/g、至適温度範囲60〜78℃)0.05gと水16.8gを添加し、攪拌下各反応温度(58、62、65、68℃)にて、20時間反応させた。この反応物上清に含まれるマンノース量、β1−4マンノビオース量、グルコース量、ガラクトース量を上記方法にて測定した。
参考例1で得た洗浄後原料16.8gに、セルロシンGM5(エイチビィアイ株式会社製、力価10000ユニット/g、至適温度範囲60〜78℃)0.05gと水16.8gを添加し、攪拌下において58℃で20時間反応させた。この反応物上清に含まれるマンノース量、β1−4マンノビオース及びβ1−4マンノトリオース量、グルコース量、ガラクトース量、総アミノ酸量、着色を上記方法にて測定した。
参考例1で得た洗浄後原料16.8gに、水16.8gとスミチームAC(新日本化学株式会社製、力価2000ニット/g、至適温度範囲52〜65℃)0.05gと水16.8gを添加し、攪拌下において58℃で20時間反応させた。この反応物上清に含まれるマンノース量、β1−4マンノビオース及びβ1−4マンノトリオース量、グルコース量、ガラクトース量、着色を測定した。
参考例1で得た洗浄後原料16.8gに水16.8gとセルロシンTP25(エイチビィアイ株式会社製、力価25000ユニット/g、至適温度範囲58〜62℃)を0.05gと水16.8gを添加し、攪拌下において58℃で20時間反応させた。この反応物上清に含まれるマンノース量、β1−4マンノビオース及びβ1−4マンノトリオース量、グルコース量、ガラクトース量、着色を測定した。
コプラミール5.0gにセルロシンGM5(エイチビィアイ株式会社製、力価10000ユニット/g、至適温度範囲60〜78℃)を0.05gと水16.8gを添加し、攪拌下において58℃で20時間反応させた。この反応物上清に含まれるマンノース量、β1−4マンノビオース及びβ1−4マンノトリオース量、グルコース量、ガラクトース量、総アミノ酸量を測定した。
ローカストビーンガム5gにセルロシンセルロシンGM5(エイチビィアイ株式会社製、力価10000ユニット/g、至適温度範囲60〜78℃)0.025g添加し、水で総重量を100gに調整した。58℃で20時間攪拌下において反応させた。この反応物上清に含まれるマンノース量、β1−4マンノビオース及びβ1−4マンノトリオース量、グルコース量、ガラクトース量を測定した。
参考例1で得た洗浄後原料16.8gにスミチームACH(新日本化学工業株式会社製ヘミセルラーゼ、力価50000ユニット/g、至適温度範囲50〜80℃)0.05gと水16.8gを添加し、攪拌下において58℃で20時間反応させた。この反応物上清に含まれるマンノース量、β1−4マンノビオース及びβ1−4マンノトリオース量、グルコース量、ガラクトース量を測定した。
セルロシンGM5(HBI株式会社製マンナナーゼ、力価10000ユニット/g、至適温度範囲60〜78℃)を1質量%濃度で水に溶解し、62℃の温浴に16時間入れて加熱した。参考例1で得た洗浄後原料16.8gに水11.8gと前述の加熱処理酵素液を5g添加し、攪拌下において58℃で20時間反応させた。この反応物上清のマンノース量、β1−4マンノビオース及びβ1−4マンノトリオース量、グルコース量、ガラクトース量を測定した。
セルロシンGM5(HBI株式会社製マンナナーゼ、力価10000ユニット/g、至適温度範囲60〜78℃)を1質量%濃度で水に溶解し、70℃の温浴に30分間入れて加熱した。参考例1で得た洗浄後原料16.8gに水11.8gと前述の加熱処理酵素を5g添加し、攪拌下において58℃で20時間反応させた。この反応物上清のマンノース量、β1−4マンノビオース及びβ1−4マンノトリオース量、グルコース量、ガラクトース量、総アミノ酸量、着色を測定した。
セルロシンGM5(HBI株式会社製マンナナーゼ、力価10000ユニット/g、至適温度範囲60〜78℃)を紛体のまま90℃のインキュベーターで3時間加熱した。参考例1で得た洗浄後原料16.8gに水16.8gと前述の加熱処理酵素を0.05g添加し、攪拌下において58℃で20時間反応させた。この反応物上清のマンノース量、β1−4マンノビオース及びβ1−4マンノトリオース量、グルコース量、ガラクトース量を測定した。
セルロシンGM5(HBI株式会社製マンナナーゼ、力価10000ユニット/g、至適温度範囲60〜78℃)1質量%濃度で水に溶解し、80℃の温浴で1分間加熱した。参考例1で得た洗浄後原料16.8gに水11.8gと前述の加熱処理酵素液を5g添加し、攪拌下において58℃で20時間反応させた。この反応物上清のマンノース量、β1−4マンノビオース及びβ1−4マンノトリオース量、グルコース量、ガラクトース量を測定した。
参考例1で得た洗浄後原料16.8gにセルロシンGM5(HBI株式会社製マンナナーゼ、力価10000ユニット/g、至適温度範囲60〜78℃)を0.05gと水16.8gを添加して混合し、70℃の温浴に30分間入れて加熱処理を施した。攪拌下において58℃で20時間反応させた。この反応物上清のマンノース量、β1−4マンノビオース及びβ1−4マンノトリオース量、グルコース量、ガラクトース量を測定した。
参考例1で得た洗浄後原料16.8gに水11.8gとセルロシンGM5(HBI株式会社製マンナナーゼ、力価10000ユニット/g、至適温度範囲60〜78℃)50mgを添加し、攪拌下において65℃で20時間反応させた。この反応物上清のマンノース量、β1−4マンノビオース及びβ1−4マンノトリオース量、グルコース量、ガラクトース量を測定した。
スミチームAC(新日本化学株式会社製、力価2000ニット/g、至適温度範囲52〜65℃)を1質量%濃度で水に溶解し、65℃の温浴に30分間入れて加熱した。参考例1で得た洗浄後原料16.8gに水11.8gと前述の加熱処理酵素液を5g加え、攪拌下において58℃で20時間反応させた。この反応物上清のマンノース量、β1−4マンノビオース及びβ1−4マンノトリオース量、グルコース量、ガラクトース量、着色を測定した。
セルロシンTP25(HBI製キシラナーゼ、力価25000ユニット/g、至適温度範囲58〜62℃)を1質量%濃度で水に溶解し、65℃の温浴に30分間入れて加熱した。参考例で得た洗浄後原料16.8gに前述の加熱処理酵素液5gと水11.8gを添加し、攪拌下において58℃で20時間反応させた。この反応物上清のマンノース量、β1−4マンノビオース及びβ1−4マンノトリオース量、グルコース量、ガラクトース量、着色を測定した。
セルロシンGM5(HBI株式会社製、力価10000ユニット/g、至適温度範囲60〜78℃)を1質量%濃度で水に溶解し、65℃の温浴に30分間入れて加熱した。コプラミール5gに前述の加熱処理酵素を2.5gと水を22.5g添加し、攪拌下において58℃で20時間反応させた。この反応物上清のマンノース量、β1−4マンノビオース及びβ1−4マンノトリオース量、グルコース量、ガラクトース量、着色を測定した。
セルロシンGM5(HBI株式会社製、力価10000ユニット/g、至適温度範囲60〜78℃)を1質量%濃度で水に溶解し、65℃の温浴に30分間入れて加熱した。ローカストビーンガム5gに前述の加熱処理酵素を2.5gと水92.5gを添加し、攪拌下において58℃で20時間反応させた。この反応物上清のマンノース量、β1−4マンノビオース及びβ1−4マンノトリオース量、グルコース量、ガラクトース量を測定した。
スミチームACH(新日本化学工業株式会社製ヘミセルラーゼ、力価50000ユニット/g、至適温度範囲50〜80℃)を1質量%濃度で水に溶解し、65℃の温浴に10分間入れて加熱した。参考例で得た洗浄後原料16.8gに前述の加熱処理酵素液を5gと水11.8gを添加し、攪拌下において60℃で20時間反応させた。この反応物上清のマンノース量、β1−4マンノビオース及びβ1−4マンノトリオース量、グルコース量、ガラクトース量を測定した。
Claims (5)
- マンナン、グルコマンナン、ガラクトマンナン、又はそれらを構成糖として一種類以上含有する天然物に、ヘミセルラーゼを作用させてマンノース及び/又はマンノオリゴ糖を製造する方法であって、前記天然物に前記ヘミセルラーゼを作用させる前に、前記天然物に前記ヘミセルラーゼを作用させる時の温度よりも高い温度で前記ヘミセルラーゼを加熱処理することを特徴とするマンノース及び/又はマンノオリゴ糖含有組成物の製造方法。
- 前記天然物にヘミセルラーゼを作用させる温度が、前記ヘミセルラーゼの至適温度範囲の下限値以下の温度であることを特徴とする請求項1記載のマンノース及び/又はマンノオリゴ糖含有組成物の製造方法。
- 前記へミセルラーゼが、マンナナーゼ又はマンノシダーゼであることを特徴とする請求項1又は2に記載のマンノース及び/又はマンノオリゴ糖含有組成物の製造方法。
- 前記へミセルラーゼが、アスペルギルス属由来又はトリコデルマ属由来であることを特徴とする請求項1〜3いずれか1項に記載のマンノース及び/又はマンノオリゴ糖含有組成物の製造方法。
- 前記マンナン、グルコマンナン、ガラクトマンナン、又はそれらを構成糖として一種類以上含有する天然物が、パーム核又はココヤシであることを特徴とする請求項1〜4いずれか1項に記載のマンノース及び/又はマンノオリゴ糖含有組成物の製造方法。
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