JP5339500B2 - マンノースの精製方法 - Google Patents
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Description
H.S.Isbell,Method in Carbohydrate Chemistry, R.L.Whistler, M.L.Wolfrom Eds (Academic Press, New York, 1962) pp 145-147
なお、HPLCによる糖の分析条件を1)に、グリセリンの分析条件を2)に示す。
1)HPLC分析条件カラム:Aminex HPX87P(7.8×300mm、BIO RAD製)、移動相:水、流速:0.6mL/min、カラム温度:80℃、検出:示差屈折計(RI)
2)HPLC分析条件カラム:Aminex HPX87H(7.8×300mm、BIO RAD製)、移動相:0.005N 硫酸、流速:0.6mL/min、カラム温度:60℃、検出:示差屈折計(RI)
パーム核ミール100gに酵素セルロシンGM5(HBI製 マンナナーゼ)1.2g、水300mLおよびシュウ酸1.8gを加え、60℃で48時間反応させ、珪藻土ろ過を行った。ろ液をpH6.6、Bx(可溶性固形分量)6%に調整した遠心上清の糖成分をHPLCにより分析した結果、マンノースが28.76g/L、フルクトースが2.82g/L、グルコースが1.98g/L、ガラクトースが0.30g/L及び含まれており、これら単糖中のマンノース含量率は86%であった。またショ糖は0.60g/L、グリセリンは1.06g/L含まれていた。
参考例1で得られた糖液を121℃、20分の熱処理を行った後、糖液10mLに対して成瀬菌の粉末菌体((株)成瀬発酵化学研究所製)) 0.1mgを添加し37℃で24時間振盪処理を行った。遠心分離(13000rpm、5min)により菌体を除去した。得られた遠心上清の糖成分を分析したところ、HPLC分析において単糖中のマンノース含有率は100%となり、そのマンノース濃度は28.83g/Lであり、ショ糖は43%、グリセリンは60%ほど資化されていた。
成瀬菌を高橋菌の粉末菌体(納豆素本舗 高橋祐蔵研究所製)に変えた以外は実施例1と同様に処理した。HPLC分析における単糖中のマンノース含有率は87%、マンノース濃度31.79g/Lから菌処理によりマンノース含有率は100%、マンノース濃度は30.20g/Lとなり、ショ糖は74%、グリセリンは98%ほど資化されていた。
宮城野菌(宮城野納豆菌製造所製)をTSB培地で37℃、24時間、前培養した後、遠心分離により集菌した。参考例1と同様にマンノース含有糖液を調製し、糖液10mLに対して湿菌体量0.1mg添加し37℃で24時間振盪処理を行った。遠心分離(13000rpm、5min)により菌体を除去した。得られた遠心上清の糖成分を分析したところ、HPLC分析における単糖中のマンノース含有率は77%、マンノース濃度23.30g/Lから菌処理によりマンノース含有率は100%、マンノース濃度は21.05g/Lとなり、ショ糖は83%、グリセリンは88%ほど資化されていた。
枯草菌(Bacillus subtilis NBRC no.3009)をLB培地で37℃、24時間、前培養した後、遠心分離により集菌した。参考例1と同様にマンノース含有糖液を調製し、糖液10mLに対して湿菌体量0.1mg添加し37℃で24時間振盪処理を行った。遠心分離(13000rpm、5min)により菌体を除去した。得られた遠心上清の糖成分を分析したところ、HPLC分析における単糖中のマンノース含有率は81%、マンノース濃度22.57g/Lから菌処理によりマンノース含有率は100%、マンノース濃度は17.00g/Lとなり、ショ糖は23%、グリセリンは100%資化されていた。
乳酸菌(Lactobacillus plantarum 東亜薬品工業のLP菌末トーア)をMRS培地で30℃、24時間、前培養した後、遠心分離により集菌した。参考例1と同様にマンノース含有糖液を調製し、糖液10mLに対して乾燥菌体量10mg添加し37℃で24時間振盪処理を行った。遠心分離(13000rpm、5min)により菌体を除去した。得られた遠心上清の糖成分を分析したところ、HPLC分析において単糖中のマンノース含有率は95%、マンノース濃度は45.37g/Lから菌処理により99%となったが、マンノース自体が26%ほど資化されマンノース濃度は33.43g/Lになり、糖液中のガラクトースは34%しか資化されていなかった。
酵母(Candida versatilis NBRC no.10056)をYPD培地で37℃、24時間、前培養した後、遠心分離により集菌した。参考例1と同様にマンノース含有糖液を調製し、糖液10mLに対して湿菌体量10mg添加し37℃で24時間振盪処理を行った。遠心分離(13000rpm、5min)により菌体を除去した。得られた遠心上清の糖成分を分析したところ、HPLC分析において単糖中のマンノース含有率は95%、マンノース濃度は33.34g/Lから菌処理により97%となったが、マンノース自体が83%も資化されマンノース濃度は5.74g/Lになり、さらに糖液中のガラクトースは17%しか資化されていなかった。
Claims (4)
- マンノースとマンノース以外の単糖が1種類以上混在する混合糖液に、マンノースの資化能がないもしくは弱い納豆菌(Bacillus subtilis var. natto)を作用させてマンノース以外の単糖を1種類以上資化させることによりマンノースの含有率を高めるマンノースの精製方法であって、前記納豆菌が成瀬菌、高橋菌又は宮城野菌であることを特徴とするマンノースの精製方法。
- マンノースとマンノース以外の単糖が1種類以上混在する混合糖液が、植物由来の原料を酸及び/又は酵素で分解して得られるものである請求項1記載のマンノースの精製方法。
- 植物由来の原料が、コプラミール又はパーム核ミールである請求項2記載のマンノースの精製方法。
- マンノース以外の単糖が、グルコース、ガラクトース、フルクトース、アラビノース及びキシロースからなる群より選択される1種類以上の単糖である請求項1〜3のいずれかに記載のマンノースの精製方法。
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