JP6190276B2 - 自己免疫疾患の治療及び/又は診断におけるアプタマーの使用 - Google Patents
自己免疫疾患の治療及び/又は診断におけるアプタマーの使用 Download PDFInfo
- Publication number
- JP6190276B2 JP6190276B2 JP2013557052A JP2013557052A JP6190276B2 JP 6190276 B2 JP6190276 B2 JP 6190276B2 JP 2013557052 A JP2013557052 A JP 2013557052A JP 2013557052 A JP2013557052 A JP 2013557052A JP 6190276 B2 JP6190276 B2 JP 6190276B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- aptamer
- cardiomyopathy
- chagas
- seq
- receptor
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
- C12N15/115—Aptamers, i.e. nucleic acids binding a target molecule specifically and with high affinity without hybridising therewith ; Nucleic acids binding to non-nucleic acids, e.g. aptamers
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61M—DEVICES FOR INTRODUCING MEDIA INTO, OR ONTO, THE BODY; DEVICES FOR TRANSDUCING BODY MEDIA OR FOR TAKING MEDIA FROM THE BODY; DEVICES FOR PRODUCING OR ENDING SLEEP OR STUPOR
- A61M1/00—Suction or pumping devices for medical purposes; Devices for carrying-off, for treatment of, or for carrying-over, body-liquids; Drainage systems
- A61M1/36—Other treatment of blood in a by-pass of the natural circulatory system, e.g. temperature adaptation, irradiation ; Extra-corporeal blood circuits
- A61M1/3679—Other treatment of blood in a by-pass of the natural circulatory system, e.g. temperature adaptation, irradiation ; Extra-corporeal blood circuits by absorption
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
- A61P13/02—Drugs for disorders of the urinary system of urine or of the urinary tract, e.g. urine acidifiers
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
- A61P13/08—Drugs for disorders of the urinary system of the prostate
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
- A61P13/12—Drugs for disorders of the urinary system of the kidneys
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
- A61P17/06—Antipsoriatics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/08—Antiepileptics; Anticonvulsants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
- A61P27/02—Ophthalmic agents
- A61P27/06—Antiglaucoma agents or miotics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P33/00—Antiparasitic agents
- A61P33/02—Antiprotozoals, e.g. for leishmaniasis, trichomoniasis, toxoplasmosis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
- A61P7/08—Plasma substitutes; Perfusion solutions; Dialytics or haemodialytics; Drugs for electrolytic or acid-base disorders, e.g. hypovolemic shock
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
- A61P9/08—Vasodilators for multiple indications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
- A61P9/12—Antihypertensives
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/564—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for pre-existing immune complex or autoimmune disease, i.e. systemic lupus erythematosus, rheumatoid arthritis, multiple sclerosis, rheumatoid factors or complement components C1-C9
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
- G01N33/6854—Immunoglobulins
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
- C12N2310/10—Type of nucleic acid
- C12N2310/16—Aptamers
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
- C12N2310/30—Chemical structure
- C12N2310/31—Chemical structure of the backbone
- C12N2310/317—Chemical structure of the backbone with an inverted bond, e.g. a cap structure
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
- C12N2310/30—Chemical structure
- C12N2310/35—Nature of the modification
- C12N2310/351—Conjugate
- C12N2310/3517—Marker; Tag
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2320/00—Applications; Uses
- C12N2320/10—Applications; Uses in screening processes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2320/00—Applications; Uses
- C12N2320/30—Special therapeutic applications
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
- Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Cardiology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Vascular Medicine (AREA)
- Neurosurgery (AREA)
- Neurology (AREA)
- Pathology (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Biophysics (AREA)
Description
それぞれ配列番号1及び2を有する核酸配列からなるアプタマーは、Gタンパク質共役受容体を標的とする自己抗体に対して親和性があり、且つ、特異的な結合剤である。前記アプタマーは、AAB(自己抗体)機能を可溶状態で中和することができる。表面に固定化されたアプタマーはAABを捕捉することができる。その後溶出を行えば、捕捉されたAABを除去することができる。
心筋細胞の調製及び培養
1〜3日齢のラットの心臓を無菌条件下で摘出し、ペニシリン/ストレプトマイシンを含有するリン酸緩衝生理食塩水(PBS)に移した。心室組織を分離し、細片に切断し、ペニシリン/ストレプトマイシンを含有する10mlのPBSで2回洗浄し、最後にPBSのみで1回洗浄した。これらの心室細片を、0.2%トリプシンを含有する30mlのPBSに懸濁させた。37℃で20分間インキュベートした後、このトリプシン処理を10mlの氷冷した熱不活化仔ウシ血清で停止させた。得られた懸濁液を130xgで6分間遠心分離し、ペレットを20mlのSM20−I培地に移した。細胞数の評価のため、100μlのこの懸濁液を100μlのトリパンブルー溶液に加えた。細胞培養のため、2.4×106細胞を、加湿空気で平衡化し10%熱不活化仔ウシ血清、0.1mUインスリン、及び2μMフルオロデオキシウリジン(非筋細胞による筋細胞の肥大を防ぐ)を添加したグルコース含有SM20−I培地2.5mlに懸濁させ、12.5cm2のファルコンフラスコに移し、単層として37℃で4日間培養した。培地を2日後に更新した。
AABの同定及び定量のため、最初にWallukat and Wollenberger (Wallukat G, Wollenberger A. Effects of the serum gamma globulin fraction of patients with allergic asthma and dilated cardiomyopathy on chromotropic beta adrenoceptor function in cultured neonatal rat heart myocytes. Biomed Biochim Acta 1987;46:S634-9)によってGタンパク質共役受容体に対するAABの測定のために確立され、最近、本発明者らが慢性シャーガス病においてアドレナリン作動性β1及びβ2受容体並びにムスカリン作動性M2受容体に対するAABの測定に関して詳細に記載した(Wallukat G, Munoz Saravia SG, Haberland A, Bartel S, Araujo R, Valda G, Duchen D, Diaz Ramirez I, Borges AC, Schimke I. Distinct patterns of autoantibodies against G-protein-coupled receptors in Chagas' cardiomyopathy and megacolon. Their potential impact for early risk assessment in asymptomatic Chagas' patients. J Am Coll Cardiol. 2010;55:463-8)バイオアッセイを用いた。
1mlの対照及び患者血清と660μlの飽和硫酸アンモニウム溶液を混合し(終濃度40%硫酸アンモニウム)、4℃で18時間インキュベートした。6,000xgで15分間遠心分離した後、ペレットを750μlのPBSに再懸濁させ、750μlの飽和硫酸アンモニウム溶液と混合し(終濃度50%硫酸アンモニウム)、再び遠心分離した。この後、ペレットを700μlのPBSに懸濁させ、100倍容量のPBSに対して透析した。得られたIgG画分は測定まで−20℃で保存することができる。
特異的アプタマーによる、Gタンパク質共役受容体に対する種々のAABのAAB機能の阻害
以下では、抗体(患者血清由来の自己抗体)の活性の、アプタマー配列番号1(トロンビンアプタマー配列番号1又はARC183としても知られる、米国特許第5,543,293号明細書に記載)による、及びアプタマー配列番号2(トロンビンアプタマー配列番号2、又はARC2172若しくはNU172としても知られる、国際出願公開第2007/025049号に記載)による中和を検討した(表1)。
以下では、単一トロンビンアプタマー−インキュベーションの用量反応曲線を評価した(図1)。これを実施したところ、Gタンパク質共役受容体に対するヒトAABが中和されただけでなく、SHRラットの血液に由来するβ1受容体AABも中和された。実際に、β1受容体の第1又は第2ループに対するヒトAAB、AT1受容体及びアドレナリン作動性α1受容体に対するAABが中和された。ラットのβ1受容体AABは、自発的に形成されたAABである。
ヒトIgGサブタイプに対するトロンビンアプタマー配列番号1の親和性を試験する前者の実験は、トロンビンアプタマー配列番号1がIgG−3、次いでIgG−4、IgG−2、及びIgG1に対して高い親和性を有することを示した。最後の3つのサブタイプ間の違いはわずかなものに過ぎず、サブタイプIgG−3に対する親和性が著しかった(データは示されていない)。
1.バイオアッセイにおけるETA−AB機能試験及びトロンビンアプタマー配列番号1による中和
ヒトエンドセリン受容体の第2の細胞外ループに対してウサギエンドセリン受容体抗体(ETA−AB)を作製した。この抗体はバイオアッセイにおいて機能活性を示した。このETA−ABは、自発的に拍動する新生(neonatale)ラット心筋細胞の拍動数の減少を引き起こした(図3)。100nMのトロンビンアプタマーを添加すると、このETA−ABの完全な中和が起こり、拍動数に変化が生じた(図3)。トロンビンアプタマー(配列番号1)を単独で新生(neonatale)ラット心筋細胞に添加しても、細胞に対して視覚的影響は無く、基本拍動数にも影響を及ぼさなかった(データは示されていない)。
2つの異なる試験設定のELISA試験において、トロンビンアプタマーとETA−ABの間の直接的結合を試験した。第1に、ETA−ABをELISAプレートに固定化し、そのトロンビンアプタマー配列番号1との結合能を試験した(図4)。第2の試験セットでは、トロンビンアプタマー配列番号1を固定化し、ETA−ABを結合に用いた(図5)。
1.ウサギETA−ABを添加したヒト血清
以下では、トロンビンアプタマーカラムを作製し、血清からAABを除去するために用いた。対照として、スクランブルトロンビンアプタマーを保持するカラムを用いた。
第2の一連の試験では、トロンビンアプタマーカラムを血清AABの除去に用いた。対照として、スクランブルトロンビンアプタマーカラムを用いた。
トロンビンアプタマー−磁性ビーズにより血清をAABから精製するため、又はAABを濃縮するためのキット。
以下では、アプタマー配列番号1の機能活性に及ぼす3’−dTキャップの導入の影響を調べた。3’−dTキャップは、ヌクレオチド配列をエキソヌクレアーゼ活性から保護し、生物学的流体中でのその安定性を高めると考えられる。アプタマー機能に及ぼす3’−dTキャップの影響を調べるにあたって、DCM患者由来のβ1受容体AAB(2.ループ)及びアルツハイマー患者由来のβ2受容体AABを使用した(表4)。両AABの機能活性は、100nMの3’−dTキャップ修飾アプタマーとともにインキュベートした際に中和された。3’−キャップ修飾は、アプタマー配列番号1の機能活性に影響を及ぼさなかった。
血清AABの検出のための直接蛍光マーカー標識トロンビンアプタマーの使用
これらの試験の目的は、Gタンパク質共役受容体に対する自己抗体を標的とする直接標識アプタマーの生成であり、最終的にこのようなAABの検出に活用される。
次の試験において、Gタンパク質共役受容体に対する自己抗体を中和するトロンビンアプタマー活性に影響を及ぼすことなくエキソヌクレアーゼ(exonulease)活性から保護するためにdTキャップなどの保護基を導入することが可能であるかどうかを調べた。dTキャップの導入は、Gタンパク質共役受容体に対するAABを中和するトロンビンアプタマー機能に影響を及ぼすことなく可能であった(図11).
次の試験セットにおいて、トロンビンアプタマーを末端切断してもGタンパク質共役受容体に対する自己抗体をなお中和することができる産物を生じるかどうかを調べた。
Claims (11)
- Gタンパク質共役受容体に対する特異的な自己抗体の存在に関連する自己免疫疾患の治療及び/又は診断において使用するための、配列番号1、配列番号2、配列番号3の核酸配列を含むアプタマーであって、前記自己抗体が、前記自己免疫疾患に罹患している患者の血清中に存在し、前記自己免疫疾患が、心筋症、拡張型心筋症(DCM)、周産期心筋症(PPCM)、特発性心筋症、シャーガス心筋症、シャーガス巨大結腸、シャーガス巨大食道、シャーガス神経障害、良性前立腺肥大、硬皮症、乾癬、レイノー症候群、子癇前症、腎臓同種移植片拒絶、心筋炎、緑内障、糖尿病、高血圧症、肺高血圧症、悪性高血圧症、及び/又はアルツハイマー病であり、前記アプタマーが、前記自己抗体と特異的にかつ高親和性で結合することを特徴とする、アプタマー。
- Gタンパク質共役受容体に対する特異的な自己抗体の存在に関連する自己免疫疾患に罹患している患者の血液又はその構成要素の治療的アフェレシスの際の選択性成分として使用するための、配列番号1、配列番号2、配列番号3の核酸配列を含む、又はからなるアプタマーであって、前記自己抗体が、前記自己免疫疾患に罹患している患者の血清中に存在し、前記自己免疫疾患が、心筋症、拡張型心筋症(DCM)、周産期心筋症(PPCM)、特発性心筋症、シャーガス心筋症、シャーガス巨大結腸、シャーガス巨大食道、シャーガス神経障害、良性前立腺肥大、硬皮症、乾癬、レイノー症候群、子癇前症、腎臓同種移植片拒絶、心筋炎、緑内障、糖尿病、高血圧症、肺高血圧症、悪性高血圧症、及び/又はアルツハイマー病であり、前記アプタマーが、前記自己抗体と特異的にかつ高親和性で結合することを特徴とする、アプタマー。
- 前記アプタマーが、ヒトにおける治療において使用される、請求項1又は2のいずれか一項に記載のアプタマー。
- 前記アプタマーが、DNAアプタマーである、請求項1〜3のいずれか一項に記載のアプタマー。
- 前記アプタマーが、前記の配列番号1、配列番号2、配列番号3の核酸配列からなる、請求項1〜4のいずれか一項に記載のアプタマー。
- Gタンパク質共役受容体に対する特異的な自己抗体の存在に関連する自己免疫疾患の治療において使用するための、請求項1〜5のいずれか一項に記載のアプタマーと、少なくとも1種の薬学上許容される賦形剤とを含む医薬組成物であって、前記自己抗体が、前記自己免疫疾患に罹患している患者の血清中に存在し、前記自己免疫疾患が、心筋症、拡張型心筋症(DCM)、周産期心筋症(PPCM)、特発性心筋症、シャーガス心筋症、シャーガス巨大結腸、シャーガス巨大食道、シャーガス神経障害、良性前立腺肥大、硬皮症、乾癬、レイノー症候群、子癇前症、腎臓同種移植片拒絶、心筋炎、緑内障、糖尿病、高血圧症、肺高血圧症、悪性高血圧症、及び/又はアルツハイマー病であり、前記アプタマーが、前記自己抗体と特異的にかつ高親和性で結合することを特徴とする医薬組成物。
- Gタンパク質共役受容体に対する特異的な自己抗体の存在に関連する自己免疫疾患の治療において使用するための、請求項1〜5のいずれか一項に記載の少なくとも1種のアプタマーと、容器とを含むキットであって、前記自己抗体が、前記自己免疫疾患に罹患している患者の血清中に存在し、前記自己免疫疾患が、心筋症、拡張型心筋症(DCM)、周産期心筋症(PPCM)、特発性心筋症、シャーガス心筋症、シャーガス巨大結腸、シャーガス巨大食道、シャーガス神経障害、良性前立腺肥大、硬皮症、乾癬、レイノー症候群、子癇前症、腎臓同種移植片拒絶、心筋炎、緑内障、糖尿病、高血圧症、肺高血圧症、悪性高血圧症、及び/又はアルツハイマー病であり、前記アプタマーが、前記自己抗体と特異的にかつ高親和性で結合することを特徴とするキット。
- Gタンパク質共役受容体に特異的である抗体の生体外検出のための、請求項1〜5のいずれか一項に記載のアプタマーの使用。
- 前記被検抗体が、自己抗体である、請求項8に記載の使用。
- 前記抗体が、体液に存在するか、又はそれらに由来する、請求項8又は9に記載の使用。
- 前記体液が、自己免疫疾患に罹患している、又は罹患している疑いのある個体から採取される、請求項10に記載の使用。
Applications Claiming Priority (5)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US201161449772P | 2011-03-07 | 2011-03-07 | |
EP11157229.3 | 2011-03-07 | ||
EP11157229A EP2497828A1 (en) | 2011-03-07 | 2011-03-07 | Use of aptamers in therapy and/or diagnosis of autoimmune diseases |
US61/449,772 | 2011-03-07 | ||
PCT/EP2012/053616 WO2012119938A2 (en) | 2011-03-07 | 2012-03-02 | Use of aptamers in therapy and/or diagnosis of autoimmune diseases |
Related Child Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2017054518A Division JP6550092B2 (ja) | 2011-03-07 | 2017-03-21 | 自己免疫疾患の治療及び/又は診断におけるアプタマーの使用 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2014509849A JP2014509849A (ja) | 2014-04-24 |
JP6190276B2 true JP6190276B2 (ja) | 2017-08-30 |
Family
ID=44223589
Family Applications (5)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2013557052A Active JP6190276B2 (ja) | 2011-03-07 | 2012-03-02 | 自己免疫疾患の治療及び/又は診断におけるアプタマーの使用 |
JP2017054518A Active JP6550092B2 (ja) | 2011-03-07 | 2017-03-21 | 自己免疫疾患の治療及び/又は診断におけるアプタマーの使用 |
JP2019069178A Active JP7125370B2 (ja) | 2011-03-07 | 2019-03-29 | 自己免疫疾患の治療及び/又は診断におけるアプタマーの使用 |
JP2021029168A Pending JP2021100408A (ja) | 2011-03-07 | 2021-02-25 | 自己免疫疾患の治療及び/又は診断におけるアプタマーの使用 |
JP2023006274A Pending JP2023038284A (ja) | 2011-03-07 | 2023-01-19 | 自己免疫疾患の治療及び/又は診断におけるアプタマーの使用 |
Family Applications After (4)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2017054518A Active JP6550092B2 (ja) | 2011-03-07 | 2017-03-21 | 自己免疫疾患の治療及び/又は診断におけるアプタマーの使用 |
JP2019069178A Active JP7125370B2 (ja) | 2011-03-07 | 2019-03-29 | 自己免疫疾患の治療及び/又は診断におけるアプタマーの使用 |
JP2021029168A Pending JP2021100408A (ja) | 2011-03-07 | 2021-02-25 | 自己免疫疾患の治療及び/又は診断におけるアプタマーの使用 |
JP2023006274A Pending JP2023038284A (ja) | 2011-03-07 | 2023-01-19 | 自己免疫疾患の治療及び/又は診断におけるアプタマーの使用 |
Country Status (11)
Country | Link |
---|---|
US (3) | US9234201B2 (ja) |
EP (3) | EP2497828A1 (ja) |
JP (5) | JP6190276B2 (ja) |
CN (4) | CN103608456B (ja) |
AU (1) | AU2012224729B2 (ja) |
BR (1) | BR112013022883B1 (ja) |
CA (1) | CA2828896C (ja) |
DK (1) | DK2683826T3 (ja) |
ES (1) | ES2589796T3 (ja) |
PL (1) | PL2683826T3 (ja) |
WO (1) | WO2012119938A2 (ja) |
Families Citing this family (14)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP2497828A1 (en) | 2011-03-07 | 2012-09-12 | Charité - Universitätsmedizin Berlin | Use of aptamers in therapy and/or diagnosis of autoimmune diseases |
EP3011974B1 (en) | 2011-06-02 | 2018-08-08 | University Of Louisville Research Foundation, Inc. | Anti-nucleolin agent-conjugated nanoparticles |
CN103728454B (zh) * | 2012-10-10 | 2016-05-18 | 吴庄民 | 基于表位抗原肽的抗内皮素受体a抗体酶联免疫试剂盒及其应用 |
EP2982756A1 (en) * | 2014-08-04 | 2016-02-10 | Berlin Cures Holding AG | Aptamers for use against autoantibody-associated diseases |
JP6793917B2 (ja) * | 2016-08-15 | 2020-12-02 | 国立大学法人東京農工大学 | アプタマー及び抗体検出方法 |
CN117653654A (zh) * | 2016-11-23 | 2024-03-08 | 柏林制药股份有限公司 | 用于抑制和/或压制tlr9激活的适体 |
US11986536B2 (en) | 2019-03-23 | 2024-05-21 | Ablevia Biotech Gmbh | Compound for the sequestration of undesirable antibodies in a patient |
EP3715374A1 (en) | 2019-03-23 | 2020-09-30 | Ablevia biotech GmbH | Compound for the sequestration of undesirable antibodies in a patient |
CN116635081A (zh) * | 2020-09-23 | 2023-08-22 | 艾柏力维亚生技有限公司 | 用于预防或治疗自身抗体-介导的疾病的化合物 |
CN113109571B (zh) * | 2021-03-19 | 2023-05-05 | 浙江工商大学 | 一种用于评估个体过敏程度的试剂盒 |
CN113075400B (zh) * | 2021-03-29 | 2022-07-22 | 广州市妇女儿童医疗中心 | 抗双链dna抗体作为先天性巨结肠诊断标志物的应用 |
MX2023011974A (es) * | 2021-04-09 | 2023-10-23 | Berlin Cures GmbH | Aptameros para usarse en el tratamiento contra infecciones por coronaviridae. |
JP7359457B2 (ja) * | 2021-10-11 | 2023-10-11 | タグシクス・バイオ株式会社 | 自己免疫性疾患治療薬 |
WO2024038918A1 (ja) * | 2022-08-19 | 2024-02-22 | 国立大学法人東京農工大学 | 一本鎖抗体結合アプタマー |
Family Cites Families (17)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5543293A (en) | 1990-06-11 | 1996-08-06 | Nexstar Pharmaceuticals, Inc. | DNA ligands of thrombin |
IE920562A1 (en) * | 1991-02-21 | 1992-08-26 | Gilead Sciences | Aptamer specific for biomolecules and method of making |
IL101038A0 (en) * | 1991-02-21 | 1992-11-15 | Gilead Sciences Inc | Agent specific for trombin and its use |
WO1996008559A1 (en) * | 1994-09-16 | 1996-03-21 | Cardiac Crc Nominees Pty. Ltd. | Glycosaminoglycan-degrading enzyme inhibition and resultant disease therapies |
DE10041560A1 (de) * | 2000-08-24 | 2002-03-07 | Max Delbrueck Centrum | Peptide des alpha1-adrenergen Rezeptors und ihre Verwendung bei Psoriasis |
EP2322648A1 (en) * | 2000-09-26 | 2011-05-18 | Duke University | RNA aptamers and methods for identifying the same |
DE10311106B4 (de) * | 2003-01-31 | 2011-05-05 | Max-Delbrück-Centrum für Molekulare Medizin | Peptide gegen Kälteunverträglichkeit hervorrufende Autoantikörper, dafür kodierende Nukleinsäuren, ihre Verwendung und diese umfassende pharmazeutische Zusammensetzungen |
DE10355702A1 (de) | 2003-06-12 | 2005-01-13 | Kübler, Ulrich, Dr. | Methode zur Diagnose und Therapie von Gliomen und Astrozytomen in einem sehr frühen Stadium |
AT413336B (de) * | 2003-09-12 | 2006-02-15 | Mattner Frank Dr | Apherese-vorrichtung |
WO2005037323A2 (en) * | 2003-10-10 | 2005-04-28 | University Of Louisville Research Foundation, Inc. | Use of gro to treat or prevent inflammation |
JP2009508473A (ja) * | 2005-08-26 | 2009-03-05 | アーケミツクス・コーポレイシヨン | 高親和性でトロンビンに結合するアプタマー |
CN101501056A (zh) * | 2005-08-26 | 2009-08-05 | 阿切米克斯公司 | 以高亲和力结合凝血酶的适体 |
EP1832600A1 (en) * | 2006-03-09 | 2007-09-12 | Max-Delbrück-Centrum Für Molekulare Medizin | Peptides against autoantibodies associated with glaucoma and use of these peptides |
EP2080519A1 (en) * | 2008-01-15 | 2009-07-22 | Max-Delbrück-Centrum für Molekulare Medizin (MDC) | Peptides having binding affinity to an antibody which recognizes an epitope on an alpha1 loop 2 or beta 2 loop 1 of an adrenoreceptor |
US8877177B2 (en) * | 2008-09-10 | 2014-11-04 | Ith Immune Therapy Holdings Ab | Chemokine containing apheresis column and methods of use |
WO2010033167A2 (en) | 2008-09-18 | 2010-03-25 | Archemix Corp. | Anti-thrombin aptamer formulations and methods for use |
EP2497828A1 (en) * | 2011-03-07 | 2012-09-12 | Charité - Universitätsmedizin Berlin | Use of aptamers in therapy and/or diagnosis of autoimmune diseases |
-
2011
- 2011-03-07 EP EP11157229A patent/EP2497828A1/en not_active Withdrawn
-
2012
- 2012-03-02 DK DK12711799.2T patent/DK2683826T3/en active
- 2012-03-02 CN CN201280012243.6A patent/CN103608456B/zh active Active
- 2012-03-02 CN CN201810948038.XA patent/CN109106722B/zh active Active
- 2012-03-02 JP JP2013557052A patent/JP6190276B2/ja active Active
- 2012-03-02 US US14/003,675 patent/US9234201B2/en active Active
- 2012-03-02 CN CN202310081849.5A patent/CN116298268A/zh active Pending
- 2012-03-02 CN CN201810947768.8A patent/CN109172594A/zh active Pending
- 2012-03-02 WO PCT/EP2012/053616 patent/WO2012119938A2/en active Application Filing
- 2012-03-02 CA CA2828896A patent/CA2828896C/en active Active
- 2012-03-02 PL PL12711799T patent/PL2683826T3/pl unknown
- 2012-03-02 ES ES12711799.2T patent/ES2589796T3/es active Active
- 2012-03-02 EP EP16172486.9A patent/EP3085786A3/en active Pending
- 2012-03-02 BR BR112013022883-0A patent/BR112013022883B1/pt active IP Right Grant
- 2012-03-02 EP EP12711799.2A patent/EP2683826B1/en active Active
- 2012-03-02 AU AU2012224729A patent/AU2012224729B2/en active Active
-
2015
- 2015-12-22 US US14/977,780 patent/US9862953B2/en active Active
-
2017
- 2017-03-21 JP JP2017054518A patent/JP6550092B2/ja active Active
- 2017-12-14 US US15/841,755 patent/US10266830B2/en active Active
-
2019
- 2019-03-29 JP JP2019069178A patent/JP7125370B2/ja active Active
-
2021
- 2021-02-25 JP JP2021029168A patent/JP2021100408A/ja active Pending
-
2023
- 2023-01-19 JP JP2023006274A patent/JP2023038284A/ja active Pending
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP6550092B2 (ja) | 自己免疫疾患の治療及び/又は診断におけるアプタマーの使用 | |
JP7267689B2 (ja) | 自己抗体関連疾患に対する使用のためのアプタマー | |
EP2588115B1 (en) | Aptamers that inhibit interaction between antibody and 2nd extracellular loop of human beta-1-adrenergic receptor | |
AU2019293600A1 (en) | Compositions and methods for modulating monocyte and macrophage inflammatory phenotypes and immunotherapy uses thereof | |
CN112807427A (zh) | 一种抗-cxcl10抗体在制备用于治疗受试者中的炎性疾病的用途 | |
WO2014064192A1 (en) | Method and pharmaceutical composition for use in the treatment and prediction of myocardial infraction |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20150219 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20160118 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20160418 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20160617 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20160719 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A821 Effective date: 20160719 |
|
A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20161121 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20170321 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A821 Effective date: 20170428 |
|
A911 | Transfer to examiner for re-examination before appeal (zenchi) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A911 Effective date: 20170525 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20170712 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20170804 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 6190276 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |