JP6177240B2 - マンガン高含有酵母抽出物の製造方法、並びに、マンガン高含有酵母抽出物の利用 - Google Patents
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Description
しかしながら、従来のマンガン含有酵母においては、酵母臭等の独特の臭い及び酵母味等の独特の味が十分に低減されていないため、食品素材としての用途には十分でなかった。また、従来のマンガン含有酵母は、水に可溶でないため、食品に添加した際ににごりや沈殿が生じ、特に清涼飲料水等としての用途には利用できないという問題があった。
しかしながら、前記(1)〜(3)の方法では、ミネラルの回収率(抽出率)が低いという問題があった。更に、前記(2)及び(3)の方法には、酵母抽出物に特有の酵母臭及びエキス味が残り、前記(3)の方法には、高コストであり、使用した酵素が抽出物中に残存するという問題があった。
<1> マンガンを含有する酵母を、カルボン酸及びカルボン酸塩の少なくともいずれかを含む溶液に懸濁させ、得られた懸濁液の固体成分と液体成分とを分離する抽出工程を含むことを特徴とするマンガン高含有酵母抽出物の製造方法である。
<2> カルボン酸が1価から3価のカルボン酸であり、カルボン酸塩が1価から3価のカルボン酸塩である前記<1>に記載のマンガン高含有酵母抽出物の製造方法である。
<3> 抽出工程における懸濁液のpHが、8.0以下である前記<1>から<2>のいずれかに記載のマンガン高含有酵母抽出物の製造方法である。
<4> カルボン酸及びカルボン酸塩の総量が、酵母中のマンガン1モルに対して0.5モル以上である前記<1>から<3>のいずれかに記載のマンガン高含有酵母抽出物の製造方法である。
<5> 抽出工程の前に、酵母を60℃〜120℃の熱水に懸濁させ、得られた懸濁液の固体成分と液体成分とを分離する熱水処理工程を含む前記<1>から<4>のいずれかに記載のマンガン高含有酵母抽出物の製造方法である。
<6> 熱水処理工程において、熱水にリン酸塩を添加する前記<5>に記載のマンガン高含有酵母抽出物の製造方法である。
<7> 酵母菌体由来のマンガンを0.2質量%以上含有するマンガン高含有酵母抽出物であって、マンガン高含有酵母抽出物1gを水100mLに溶解乃至分散させたときの濁度が、波長660nmの吸光度(O.D.660)として、0.1以下であることを特徴とするマンガン高含有酵母抽出物である。
<8> 前記<1>から<6>のいずれかに記載の製造方法により製造された前記<7>に記載のマンガン高含有酵母抽出物である。
<9> 酵母が、食品用酵母である前記<7>から<8>のいずれかに記載のマンガン高含有酵母抽出物である。
<10> 食品用酵母が、パン酵母、ビール酵母、ワイン酵母、清酒酵母及び味噌醤油酵母から選択される少なくとも1種である前記<9>に記載のマンガン高含有酵母抽出物である。
<11> 食品用酵母が、Saccharomyces cerevisiaeである前記<9>に記載のマンガン高含有酵母抽出物である。
<12> 食品に添加されて用いられる前記<7>から<11>のいずれかに記載のマンガン高含有酵母抽出物である。
<13> 食品が、流動食及び清涼飲料水のいずれかである前記<12>に記載のマンガン高含有酵母抽出物である。
<14> 前記<7>から<13>のいずれかに記載のマンガン高含有酵母抽出物を含むことを特徴とする食品である。
<15> 前記<7>から<11>のいずれかに記載のマンガン高含有酵母抽出物を含むことを特徴とする食品用乳酸菌培養培地用組成物である。
<16> 前記<15>に記載の食品用乳酸菌培養培地用組成物を含むことを特徴とする食品用乳酸菌培養培地である。
<17> 前記<16>に記載の食品用乳酸菌培養培地を用いて食品用乳酸菌を培養することを特徴とする食品用乳酸菌の培養方法である。
本発明のマンガン高含有酵母抽出物の製造方法は、抽出工程を含み、更に必要に応じて、熱水処理工程、乾燥工程などのその他の工程を含む。
前記抽出工程は、マンガンを含有する酵母を、カルボン酸及びカルボン酸塩の少なくともいずれかを含む溶液に懸濁させ、得られた懸濁液の固体成分と液体成分とを分離する工程である。前記抽出工程により、マンガンを高含有する液体成分(抽出物)を得ることができる。
前記酵母は、菌体内にマンガンを含んでいる限り特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。前記酵母におけるマンガン含有量としては、マンガン高含有酵母抽出物をマンガン強化食品素材等として用いる場合には多いほど好ましいが、酵母におけるマンガンの取込みの限界、及びマンガン高含有酵母抽出物を効率的に製造する観点からは、乾燥菌体質量当たり0.01質量%〜5質量%が好ましく、1質量%〜5質量%がより好ましい。
なお、前記酵母におけるマンガン含有量は、公知の方法で測定することができ、例えば、原子吸光法、ICP発光分光分析法により測定することができる。
なお、添加するマンガンの種類、培地の種類、培養条件などは、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。
前記食品用酵母としては、特に制限はなく、公知のものの中から選択することができ、例えば、パン酵母、ビール酵母、ワイン酵母、清酒酵母、味噌醤油酵母などが挙げられる。これらの中でも、パン酵母が特に好ましい。
これらの中でも、Saccharomyces cerevisiae、Saccharomyces carlsbergensisが好ましく、Saccharomyces cerevisiaeが特に好ましい。
前記カルボン酸としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、マンガンの抽出率(マンガン溶出率)の観点から、1価から3価のカルボン酸が好ましい。
前記2価のカルボン酸としては、例えば、シュウ酸、マロン酸、コハク酸、グルタル酸、アジピン酸、フマル酸、マレイン酸、酒石酸、オキサロ酢酸、α−ケトグルタル酸などが挙げられる。
前記3価のカルボン酸としては、例えば、クエン酸、イソクエン酸、アコニット酸、オキサロコハク酸などが挙げられる。
これらの中でも、食品添加及びマンガン抽出率の観点から、コハク酸、クエン酸、酢酸、グルコン酸、酒石酸が好ましい。
前記カルボン酸は、1種単独で使用してもよいし、2種以上を併用してもよい。
これらのカルボン酸塩としては、例えば、上記カルボン酸の具体例の塩などが挙げられる。
これらの中でも、食品添加及びマンガン抽出率の観点から、コハク酸塩、クエン酸塩、酢酸塩、グルコン酸塩、酒石酸塩が好ましい。
前記カルボン酸塩は、1種単独で使用してもよいし、2種以上を併用してもよい。
前記塩の種類としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、ナトリウム、カリウム等のアルカリ金属塩、マグネシウム、カルシウム等のアルカリ土類金属塩などが挙げられる。これらは、1種単独で使用してもよいし、2種以上を併用してもよい。
前記カルボン酸緩衝液の濃度としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、マンガンの抽出率の観点から、25ミリモル/L以上が好ましく、50ミリモル/L以上がより好ましく、100ミリモル/L以上が特に好ましい。
前記抽出工程における懸濁液のpHとしては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、マンガンの抽出効率の観点から、8.0以下が好ましく、7.0以下がより好ましく、6.5以下が特に好ましい。
前記マンガンの抽出率は、下記式により求めることができる。
マンガンの抽出率(%)={抽出物中のマンガン全量(質量)/抽出に用いた酵母に含まれるマンガン全量(質量)}×100
前記酵母を前記カルボン酸及びカルボン酸塩の少なくともいずれかを含む溶液に懸濁させる方法としては、特に制限はなく、公知の攪拌方法や振とう方法を用いることができる。
また、前記抽出工程において、前記懸濁液を更に振とうしてもよい。前記振とうの条件としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。
前記懸濁液の固体成分と液体成分とを分離する方法としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、濾過による分離、遠心による分離などが挙げられる。
前記濾過の方法としては、特に制限はなく、公知の濾過装置を適宜選択して行うことができ、例えば、フィルタープレス、ラインフィルターなどを用いることができる。なお、これらは併用してもよい。
前記遠心分離の方法としては、特に制限はなく、公知の遠心装置を適宜選択して行うことができる。また、前記遠心の条件としても、特に制限はなく、前記懸濁液の量に応じて適宜選択することができ、例えば、前記懸濁液の量が5mLの場合は、3,000rpmで5分間という条件とすることが挙げられる。
前記その他の工程としては、本発明の効果を損なわない限り特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、熱水処理工程、乾燥工程、濃縮工程、希釈工程などが挙げられる。これらの中でも、熱水処理工程を含むことが好ましい。
前記熱水処理工程は、前記抽出工程の前に、マンガンを含有する前記酵母を60℃〜120℃の熱水に懸濁させ、得られた懸濁液の固体成分と液体成分とを分離する工程である。前記抽出工程の前に、前記熱水処理工程を行うことが、酵母特有の臭い及び味(酵母臭、酵母味)を低減することができ、得られたマンガン高含有酵母抽出物を食品等に添加した際に食品等の風味をより損なわない点で好ましい。
前記熱水の温度としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、酵母臭及び酵母味の低減効果が高い点で、80℃〜120℃が好ましく、95℃〜120℃がより好ましい。
なお、酵母を懸濁させる方法及び得られた懸濁液の固体成分と液体成分とを分離する方法としては、特に制限はなく、前述した抽出工程と同様の方法が挙げられる。
前記抽出促進剤の添加量としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、乾燥酵母菌体質量当たり、5質量%〜50質量%が好ましく、20質量%〜50質量%がより好ましい。
前記乾燥工程は、前記マンガン高含有酵母抽出物を乾燥させる工程である。
前記乾燥の方法としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、スプレードライヤーL−8(大川原化工機株式会社製)を用いて行うことができる。これにより、マンガンを高含有した酵母抽出固形物(粉体)を得ることができ、後述する種々の用途に用いることができる。なお、前記固形物とする際には、デキストリン等の賦形剤を適宜含有させてもよい。
前記濃縮工程は、前記マンガン高含有酵母抽出物を濃縮する工程であり、前記希釈工程は、前記マンガン高含有酵母抽出物を希釈する工程である。
前記濃縮及び希釈の方法としては、特に制限はなく、従来公知の方法を用いることができる。
本発明のマンガン高含有酵母抽出物は、酵母菌体由来のマンガンを0.2質量%以上含有するマンガン高含有酵母抽出物であって、マンガン高含有酵母抽出物1gを水100mLに溶解乃至分散させたときの濁度が、波長660nmにおける吸光度(O.D.660)として、0.1以下である。
前記マンガン高含有酵母抽出物の製造方法としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、前記本発明のマンガン高含有酵母抽出物の製造方法によって好適に製造することができる。即ち、マンガンを含有する酵母を、カルボン酸及びカルボン酸塩の少なくともいずれかを含む溶液で抽出して製造することが好ましい。
前記マンガン高含有酵母抽出物におけるマンガン含有量としては、マンガン高含有酵母抽出物をマンガン強化食品素材等として用いる観点から、多いほど好ましいが、本発明において「マンガン高含有」とは、酵母菌体由来のマンガンを0.2質量%以上含有することをいい、0.5質量%以上が好ましく、1.0質量%以上がより好ましい。
このようにマンガンを高濃度に含有することにより、流動食、飲料等の経口経管栄養組成物、食品素材、乳酸菌培養培地用組成物等として好適に用いることができる。
なお、前記マンガン含有量は、公知の方法で測定することができ、例えば、原子吸光法、ICP発光分光分析法などにより測定することができる。
本発明のマンガン高含有酵母抽出物は、水に対する溶解性が高いため、水溶液とした場合の透明度が高く、マンガン高含有酵母抽出物1gを水100mLに溶解乃至分散させたときの濁度が、波長660nmにおける吸光度(O.D.660)として、0.1以下であり、0.05以下が好ましく、0.01以下がより好ましい。前記濁度が0.1を超えると、食品等に添加した際ににごりが生じ、変色することがあり、食品等の外観を損ねることがある。また、水に対する溶解性が十分でなく、沈殿することがあるため、特に清涼飲料水等、透明性が必要とされる食品としての用途に用いる際に問題が生じることがある。
なお、前記濁度は、分光光度計を使用して、波長660nmにおける吸光度(O.D.660)を測定することができ、前記分光光度計としては、例えば、U−2000型(株式会社日立製作所製)などが挙げられる。
本発明のマンガン高含有酵母抽出物の用途としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、食品に添加されて用いられる食品素材、飼料、餌料、後述する食品用乳酸菌培養培地用組成物としての用途が好ましく、前記食品素材、前記食品用乳酸菌培養培地用組成物としての用途がより好ましい。前記食品素材の中でも、本発明のマンガン高含有酵母抽出物が溶解性に優れる点で、前記食品としては、流動食、清涼飲料水の用途が好ましい。本発明のマンガン高含有酵母抽出物を用いることにより、マンガン高含有食品、マンガン高含有飼料、マンガン高含有餌料、マンガン高含有食品用乳酸菌培養培地用組成物等が得られる。
本発明の食品は、本発明のマンガン高含有酵母抽出物を含み、更に必要に応じてその他の成分を含む。
ここで、前記食品とは、人の健康に危害を加えるおそれが少なく、通常の社会生活において、経口又は消化管投与により摂取されるものをいい、行政区分上の食品、医薬品、医薬部外品などの区分に制限されるものではなく、例えば、経口的に摂取される一般食品、健康食品、保健機能食品、医薬部外品、医薬品などを幅広く含むものを意味する。
前記食品の種類としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、例えば、流動食、パン、ビスケット、クラッカー等の製菓、水産加工品、食肉加工品、麺類、味噌等の調味料、加工野菜製品、ジュース等の飲料、アイスクリーム等の氷菓、健康食品等が好ましく、流動食、飲料が特に好ましい。
前記補助的原料又は添加物としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、ブドウ糖、果糖、ショ糖、マルトース、ソルビトール、ステビオサイド、ルブソサイド、コーンシロップ、乳糖、クエン酸、酒石酸、リンゴ酸、コハク酸、乳酸、L−アスコルビン酸、dl−α−トコフェロール、エリソルビン酸ナトリウム、グリセリン、プロピレングリコール、グリセリン脂肪酸エステル、ポリグリセリン脂肪酸エステル、ショ糖脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル、アラビアガム、カラギーナン、カゼイン、ゼラチン、ペクチン、寒天、ビタミンB類、ニコチン酸アミド、パントテン酸カルシウム、アミノ酸類、カルシウム塩類、色素、香料、保存剤などが挙げられる。
前記その他の成分の含有量としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。
本発明の食品用乳酸菌培養培地用組成物は、本発明のマンガン高含有酵母抽出物を含み、更に必要に応じてその他の成分を含む。
前記食品用乳酸菌培養培地用組成物は、前記マンガン高含有酵母抽出物のみからなるものであってもよいし、その他の成分を含むものであってもよい。
前記その他の成分としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、後述する食品用乳酸菌培養培地に含まれる成分が挙げられる。
本発明の食品用乳酸菌培養培地は、本発明の食品用乳酸菌培養培地用組成物を含み、更に必要に応じてその他の成分を含む。
前記食品用乳酸菌培養培地としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、GYP培地、前記GYP培地に含まれるMnSO4・4H2Oを除いた培地等が挙げられる。
前記GYP培地は、乳酸菌の培養の基本培地として慣用されており、その組成は、以下のとおりである。
−GYP培地(pH6.8)の組成(100mLあたり)−
・ Glucose ・・・ 1.0g
・ Yeast extract ・・・ 1.0g
・ Peptone ・・・ 0.5g
・ Na−acetate・3H2O ・・・ 0.2g
・ Salts solution(※1) ・・・ 0.5mL
・ Tween 80 solution(2.5mg/mL水溶液) ・・・ 1.0mL
※1:Salts solutionの組成(1mLあたり)
・ MgSO4・7H2O ・・・ 40mg
・ MnSO4・4H2O ・・・ 2mg
・ FeSO4・7H2O ・・・ 2mg
・ NaCl ・・・ 2mg
前記食品用乳酸菌培養培地では、前記マンガン高含有酵母抽出物を前記GYP培地に含まれるMnSO4・4H2Oの代わりに使用することができる。また、前記食品用乳酸菌培養培地は、前記マンガン高含有酵母抽出物を含むので、培地中に酵母菌体の沈殿が生じることがなく、乳酸菌を回収した際に酵母と混在しない点でも、好適に用いることができる。このような食品用乳酸菌培養培地は、天然物由来のマンガンを使用しているため、食品用乳酸菌の培養にも安全に用いることができる。
本発明の食品用乳酸菌の培養方法は、本発明の食品用乳酸菌培養培地を用いて食品用乳酸菌を培養することを含む。
前記食品用乳酸菌としては、食品用途で使用されているものであれば、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、各種乳酸菌が挙げられる。その具体例としては、Lactobacillus属、Leuconostoc属、Pediococcus属、などが挙げられ、これらの属に含まれる任意の種・株が好適に挙げられる。これらの中でも、Lactobacillus casei subsp. casei、Lactobacillus brevis、Lactobacillus plantarum、Leuconostoc mesenteroides subsp. mesenteroides、Pediococcus pentosaceusが好ましい。
前記食品用乳酸菌を本発明の食品用乳酸菌培養培地を用いて培養する場合、培養の前に前記食品用乳酸菌培養培地を調製し、オートクレーブ滅菌処理することが好ましい。
前記食品用乳酸菌培養培地の調製は、常法に従って行うことができ、例えば、前記GYP培地に含まれるMnSO4・4H2Oを除いた培地を用いる場合、前記GYP培地の組成において、MnSO4・4H2Oを除いた組成の溶液を調製し、前記食品用乳酸菌培養培地用組成物を添加すればよい。
このとき、前記食品用乳酸菌培養培地用組成物の前記食品用乳酸菌培養培地における含有量としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、マンガン(Mn)の含有量(Mn換算含有量)が、一般の前記GYP培地と略同じ含有量となる量であるのが好ましく、該GYP培地よりも高濃度となる量であってもよい。
前記オートクレーブ滅菌条件としては、常法に従って行うことができ、特に制限はなく、目的に応じて適宜条件を選択することができる。
前記食品用乳酸菌の培養は、少量であれば坂口フラスコ等を用いて振とう培養により行うことができ、このときの振とう条件としては、特に制限はないが振幅12cm程度では100rpm〜200rpm程度が好ましい。大量であればジャーファーメンターを用いて好適に行うことができる。このときのジャーファーメンターにおける培養条件としては、特に制限はなく適宜決定することができる。
前記培養の条件としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、温度としては、例えば、28℃〜33℃程度であり、時間としては、例えば、1時間〜40時間程度であり、通気量としては、例えば、0vvm〜5vvm程度であり、攪拌速度としては、例えば、100rpm〜700rpm程度が好ましい。前記培養液のpHとしては、無調製であってもよく、調製する場合は4.0〜8.0程度であるが、培養初期を7.0以上とするのが好ましく、7.0〜8.0に調整するのがより好ましい。
前記培養は、静置培養により行なってもよい。
また、前記培養を行なう前に前培養を行なってもよい。
前記食品としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、ヨーグルト等の乳製品、パン類、菓子類、麺類、惣菜類、飲料などが挙げられる。
乾物質量5gのマンガン高含有酵母粉末(ミネラル酵母Mn2、マンガン含有量:18,980質量ppm、オリエンタル酵母工業株式会社製)に、表1に示す200ミリモル/Lの各カルボン酸ナトリウム水溶液を50mL加えて攪拌し、100mLにメスアップした。なお、前記各カルボン酸ナトリウムの量は、抽出される酵母中のマンガン1モルに対して、4.1モルであった。対照としては、水又は200ミリモル/Lの塩化ナトリウム(食塩)水溶液を用い、以下同様の試験を行った。ここで得られた各懸濁液のpHをpHメーターMP230(METTLER TOREDO社製)で測定した。
前記懸濁液をスターラーによって攪拌しながら、5mLを試験管に取り、沸騰水中で10分間加熱した。この懸濁液を3,000rpmで5分間遠心分離し、上清のみを試験管に採取し、酵母抽出物を得て、その質量を測定した。
前記マンガンの抽出率は、酵母抽出物中のマンガン含有量を、ICP発光分光分析装置(Optima2100DV、パーキンエルマー社製)を用いてICP発光分光分析法により測定し、抽出液へ抽出されたマンガンの割合を計算した。結果を表1及び図1に示す。
乾物質量5gのマンガン高含有酵母粉末(ミネラル酵母Mn2、マンガン含有量:18,980質量ppm、オリエンタル酵母工業株式会社製)に、表2に示す200ミリモル/Lの各カルボン酸ナトリウム水溶液を10mL加えて攪拌し、各pHに調整後、20mLにメスアップした。なお、酵母中のマンガン1モルに対する前記各カルボン酸ナトリウムの量は、表2のとおりであった。また、前記pHの調整は、pHメーターMP230(METTLER TOREDO社製)で測定しながら行った。
前記懸濁液をスターラーによって攪拌しながら、5mLを試験管に取り、沸騰水中で10分間加熱した。この懸濁液を3,000rpmで5分間遠心分離し、上清のみを試験管に採取し、酵母抽出物を得て、その質量を測定した。
前記マンガンの抽出率は、酵母抽出物中のマンガン含有量を、ICP発光分光分析装置(Optima2100DV、パーキンエルマー社製)を用いてICP発光分光分析法により測定し、抽出液へ抽出されたマンガンの割合を計算した。結果を表2及び図2に示す。
40質量%のクリームになるようミネラル酵母Mn2(オリエンタル酵母工業株式会社製)の粉末を300mLの水に懸濁した。得られたクリームを沸騰水中で10分間加熱した後、洗浄し、沈殿を300mLにメスアップした。得られたクリーム10mLにクエン酸及びクエン酸三ナトリウムの少なくともいずれかを含む下記表3に記載の各水溶液(クエン酸緩衝液)10mLを添加して懸濁させた。なお、前記クエン酸緩衝液の濃度は、全ての液で200ミリモル/Lであり、前記クエン酸緩衝液のpHは、クエン酸とクエン酸三ナトリウムとの量比を適宜変更することにより、調整した。
各クエン酸緩衝液に懸濁させてから2時間後、遠心分離を行い、得られた上清(酵母抽出物)について、試験例1と同様にして、マンガン抽出率を測定した。また、試験例1と同様にして、抽出物の乾燥粉末を得て抽出物におけるマンガン含有量を測定した。結果を下記表3及び図3に示す。
原料としてミネラル酵母Mn2(オリエンタル酵母工業株式会社製)を用いてカルボン酸及びカルボン酸塩の総量とマンガンの抽出効率との関係を試験した。抽出溶媒に含まれるカルボン酸としてクエン酸を用い、下記表4に示した濃度のクエン酸緩衝液を用意した。クエン酸緩衝液のpHは、クエン酸とクエン酸三ナトリウムとの量比を適宜変更することにより調整し、5.0とした。
下記表4に示した濃度の各クエン酸緩衝液を用いた以外は、試験例3と同様にして、酵母抽出物を得てマンガン抽出率を測定し、試験例1と同様にして、抽出物の乾燥粉末を得て乾燥粉末質量当たりのマンガン含有量を測定した。結果を下記表4及び図4に示す。なお、図4中、「◆」はマンガン抽出率を示し、「■」は懸濁液のpHを示す。
試験例4−9で得られたマンガン高含有酵母抽出物の粉末1gを水又はリンゴ果汁(10体積%リンゴ果汁入り飲料、アサヒ飲料株式会社製)で100mLにメスアップして、マンガン高含有酵母抽出物の1%(質量/体積)溶液を作製した。
そして、前記各溶液の濁度について、分光光度計(U−2000型、株式会社日立製作所製)を使用して、波長660nmにおける吸光度(O.D.660)を測定することにより求めた。
また、前記各溶液を3,000rpmで5分間遠心した後の沈殿の有無を観察した。
なお、対照として、ミネラル酵母Mn2(オリエンタル酵母工業株式会社製;抽出を行っていない)について、マンガン含量が同じになるように添加して、同様に溶液の濁度の測定、遠心後の沈殿の有無の評価を行った。結果を表5、図5A(遠心前の水溶液)、図5B(遠心後の水溶液)、図5C(遠心前のリンゴ果汁入り飲料)、及び図5D(遠心後のリンゴ果汁入り飲料)に示す。
これらの結果は、水の代わりにリンゴ果汁入り飲料を用いた試験例5−3、及び試験例5−4でも同様であった。
したがって、本発明のマンガン高含有酵母抽出物は、溶解性が高いため、流動食や飲料等にも添加して使用することができ、また、濁りや変色が生じないため、添加する食品等の外観を損なうことがなく、特に透明度の高い清涼飲料水等に添加して使用することもできることがわかった。
試験例4−9で得られたマンガン高含有酵母抽出物の粉末(以下、「粉末」と称する)、前記粉末の1%(質量/体積)水溶液、リンゴ果汁(10体積%リンゴ果汁入り飲料、アサヒ飲料株式会社製)に前記粉末を1%(質量/体積)となるように溶解させたもの(以下、「リンゴ果汁」と称する)、調整粉乳(チルミル、森永乳業株式会社製)14gを水100mLに溶解又は懸濁させた水溶液に前記粉末を1%(質量/質量)となるように溶解させたもの(以下、「ミルク」と称する)、栄養調整食品(メイバランス(ヨーグルト味)、株式会社明治製)に前記粉末を1%(質量/質量)となるように添加したもの(以下、「流動食」と称する)を用意した。
前記粉末、前記粉末の1%水溶液、前記リンゴ果汁、前記ミルク、及び前記流動食について、酵母或いは酵母抽出物に特有の臭い(「エキス臭」、「金属臭・不快臭」)、及び味(「エキス味」、「金属的味・異味・えぐ味」)を6人の評価者により評価した。なお、前記マンガン高含有酵母抽出物の粉末については、臭いのみ評価した。
また、対照として、ミネラル酵母Mn2(オリエンタル酵母工業株式会社製、抽出を行っていない)をマンガン含有量が同じになるようにしたものも同様に評価した。
前記粉末、前記粉末の1%水溶液、及び前記リンゴ果汁では、マンガン高含有酵母抽出物における各評価項目の評価を3(基準)として、試料(ミネラル酵母Mn2)について、下記基準に従って6人が評価した数値の平均をとった。結果を表6−1から表6−3に示す。
−臭い(「エキス臭」、「金属臭・不快臭」)の評価基準−
5:非常に強い
4:強い
3:同等
2:弱い
1:非常に弱い
−味(「エキス味」、「金属的味・異味・えぐ味」)の評価基準−
5:非常に強い
4:強い
3:同等
2:弱い
1:非常に弱い
前記ミルク、及び前記流動食では、試料無添加における各評価項目の評価を3(基準)として、各試料(マンガン高含有酵母抽出物、及びミネラル酵母Mn2)について、下記基準に従って6人が評価した数値の平均をとった。結果を表6−4から表6−5に示す。
−臭い(「エキス臭」、「金属臭・不快臭」)の評価基準−
5:非常に強い
4:強い
3:同等
2:弱い
1:非常に弱い
−味(「エキス味」、「金属的味・異味・えぐ味」)の評価基準−
5:非常に強い
4:強い
3:同等
2:弱い
1:非常に弱い
後述の5種類の食品用乳酸菌を、以下の4種類の培地を用いて培養を行った。即ち、使用した培地としては、(1)GYP培地(組成は、下記参照;以下、「GYP」と称することがある)、(2)Mn非含有GYP培地(前記GYP培地においてMnSO4・4H2Oを含まない以外は該GYP培地と同一組成のもの;以下、「GYP Mnなし」と称することがある)、(3)Mn含有食品用酵母を含有するGYP培地(前記GYP培地においてMnSO4・4H2Oに代えてマンガン含有食品用酵母(オリエンタル酵母工業株式会社製、ミネラル酵母Mn−F)を含む以外は該GYP培地と同一組成のもの;以下、「マンガン含有酵母」と称することがある)、(4)Mn高含有酵母抽出物を含有するGYP培地(前記GYP培地においてMnSO4・4H2Oに代えて試験例4−9で得られたマンガン高含有酵母抽出物の粉末を含む以外は該GYP培地と同一組成のもの;以下、「マンガン高含有酵母抽出物」と称することがある)の4種類である。なお、前記GYP培地中のMnSO4由来のMn濃度が2.5mg/Lであるので、前記(3)の培地においては、マンガン含有食品用酵母を、前記(4)の培地においては、試験例4−9で得られたマンガン高含有酵母抽出物の粉末を、Mn含有量が、前記(1)GYP培地におけるMn含有量と、実質的に同一となるよう添加した。
これら4種の培地に対し、食品用乳酸菌を接種する前に、それぞれpHを6.8に調整した後、オートクレーブ処理(121℃、15分)を行った。
<食品用乳酸菌>
培養に使用した菌株は、下記の5種類とした。いずれも東京農業大学応用生物科学部菌株保存室(NRIC)より入手したタイプストレインである。
A)Lactobacillus casei subsp. casei(NRIC1042)
B)Lactobacillus brevis(NRIC1684)
C)Lactobacillus plantarum(NRIC1067)
D)Leuconostoc mesenteroides subsp. mesenteroides(NRIC1541)
E)Pediococcus pentosaceus(NRIC0099)
<GYP培地(pH6.8)の組成(100mLあたり)>
・ Glucose ・・・ 1.0g
・ Yeast extract ・・・ 1.0g
・ Peptone ・・・ 0.5g
・ Na−acetate・3H2O ・・・ 0.2g
・ Salts solution(※1) ・・・ 0.5mL
・ Tween 80 solution(2.5mg/mL水溶液) ・・・ 1.0mL
※1:Salts solutionの組成(1mLあたり)
・ MgSO4・7H2O ・・・ 40mg
・ MnSO4・4H2O ・・・ 2mg
・ FeSO4・7H2O ・・・ 2mg
・ NaCl ・・・ 2mg
また、前記(4)マンガン高含有酵母抽出物の粉末を含むGYP培地では、前記マンガン高含有酵母抽出物を用いたため、培地中に酵母菌体の沈殿が生じることがなく、乳酸菌を回収した際に酵母と混在することがなかった。
前記(4)マンガン高含有酵母抽出物の粉末を含むGYP培地では、食品添加物として認可されていないマンガンを使用していないので、培養の結果として得られた食品用乳酸菌の安全性が高く、好適に各種食品等に使用することができる。
本発明のマンガン高含有酵母抽出物の製造方法によれば、マンガンを含有する酵母からのマンガン抽出率が高く、マンガン高含有酵母抽出物を効率的に製造することができる。
また、本発明の食品用乳酸菌培養培地用組成物は、食品用乳酸菌培養培地の成分として好適に用いることができ、前記食品用乳酸菌培養培地は、食品として利用可能な食品用乳酸菌の培養方法に好適に用いることができる。
Claims (10)
- マンガンを含有する酵母を、60℃〜120℃の熱水に懸濁させ、第1の懸濁液を得て、前記第1の懸濁液の固体成分と液体成分とを分離し、固体成分を得る熱水処理工程、及び、前記熱水処理工程で得られた固体成分を、カルボン酸及びカルボン酸塩の少なくともいずれかを含む溶液に懸濁させ、第2の懸濁液を得て、前記第2の懸濁液の固体成分と液体成分とを分離し、マンガンを含有する液体成分を得る抽出工程を含み、
前記酵母が、酵母の菌体破砕物の粉末であることを特徴とするマンガン高含有酵母抽出物の製造方法。 - カルボン酸が1価から3価のカルボン酸であり、カルボン酸塩が1価から3価のカルボン酸塩である請求項1に記載のマンガン高含有酵母抽出物の製造方法。
- 抽出工程における懸濁液のpHが、8.0以下である請求項1から2のいずれかに記載のマンガン高含有酵母抽出物の製造方法。
- カルボン酸及びカルボン酸塩の総量が、酵母中のマンガン1モルに対して0.5モル以上である請求項1から3のいずれかに記載のマンガン高含有酵母抽出物の製造方法。
- カルボン酸及びカルボン酸塩の総量が、酵母中のマンガン1モルに対して1.0モル以上である請求項1から3のいずれかに記載のマンガン高含有酵母抽出物の製造方法。
- マンガン高含有酵母抽出物が、酵母菌体由来のマンガンを0.2質量%以上含有し、マンガン高含有酵母抽出物1gを水100mLに溶解乃至分散させたときの濁度が、波長660nmの吸光度(O.D.660)として、0.1以下である請求項1から5のいずれかに記載のマンガン高含有酵母抽出物の製造方法。
- 請求項1から6のいずれかに記載の製造方法により得られるマンガン高含有酵母抽出物を用いることを特徴とする食品の製造方法。
- 請求項1から6のいずれかに記載の製造方法により得られるマンガン高含有酵母抽出物を用いることを特徴とする食品用乳酸菌培養培地用組成物の製造方法。
- 請求項8に記載の製造方法により得られる食品用乳酸菌培養培地用組成物を用いることを特徴とする食品用乳酸菌培養培地の製造方法。
- 請求項9に記載の製造方法により得られる食品用乳酸菌培養培地を用いて食品用乳酸菌を培養することを特徴とする食品用乳酸菌の培養方法。
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