JP6034861B2

JP6034861B2 - ジュウテリウム富化４−ヒドロキシ−５−メトキシ−ｎ，１−ジメチル−２−オキソ−ｎ−［（４−トリフルオロ−メチル）フェニル］−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボキサミド

Info

Publication number: JP6034861B2
Application number: JP2014516322A
Authority: JP
Inventors: スヴェンソン，レイフ
Original assignee: アクティブバイオテックエイビー
Priority date: 2011-06-22
Filing date: 2012-06-20
Publication date: 2016-11-30
Anticipated expiration: 2032-06-20
Also published as: EP2723340A1; BR112013031712B1; AU2012274160A1; CA2838947A1; EP2537517A1; RU2608306C2; AU2012274160B2; JP2014517051A; ZA201309733B; WO2012175541A1; BR112013031712A2; AU2012274160A2; CN103796654A; KR20140035493A; RU2014101775A; CN103796654B; US9216956B2; US20140112946A1; EP2723340B1

Description

本発明は、ジュウテリウム（重水素）富化４−ヒドロキシ−５−メトキシ−Ｎ，１−ジメチル−２−オキソ−Ｎ−［（４−トリフルオロ−メチル）フェニル］−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボキサミド、その製薬学的に許容可能な塩、及び療法におけるその使用に関する。

化合物４−ヒドロキシ−５−メトキシ−Ｎ，１−ジメチル−２−オキソ−Ｎ−［（４−トリフルオロメチル）フェニル］−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボキサミド（ＣＡＳ番号２５４９６４−６０−８、本明細書においては以後ＡＢＲ−２１５０５０とも呼ぶ）は、がん関連の動物実験において効果を示している（１）。また、ＡＢＲ−２１５０５０は、抗血管新生応答を含む機序を通じて前立腺腫瘍の増殖を阻害できることも示されている（２）。ヒト前立腺がん細胞株を用いたいくつかのインビボ腫瘍モデルで明確な抗腫瘍応答が達成されている（３）。このことにより、化合物に対する更なる研究が促され、ヒトがんの治療における効果が第２相臨床試験で示されている（４）。

無症候性転移性去勢抵抗性前立腺がん患者におけるＡＢＲ−２１５０５０の最近の無作為プラセボ対照二重盲検第II相臨床試験において、６ヶ月時点で疾患の進行があった患者の数に違いが示された。実際、６ヶ月の間に疾患が進行した患者の割合は、ＡＢＲ−２１５０５０で処置された患者の場合３１％であったのに対し、プラセボ処置患者では６６％であったという結果が示された（ｐ＜０．０００１）。無増悪期間中央値は、ＡＢＲ−２１５０５０処置群の場合、７．６ヶ月であったのに対し、プラセボ群では３．２ヶ月であった（ｐ＝０．０００９）。ＡＢＲ−２１５０５０処置は、前立腺がんの進行に関するバイオマーカーにも効果を有し、おおむね耐容性良好であった。

インビボ動物実験はさらに、ＡＢＲ−２１５０５０は自己免疫疾患の治療にも効果を有することを示している。すなわち、インビボ動物実験研究は関節リウマチの治療における化合物の効果を示し（５）、別の研究は多発性硬化症の治療におけるその効果を示している（６）。

ジュウテリウム（^２Ｈ又はＤ）は、プロチウム（^１Ｈ又はＨ）のおよそ２倍の質量を有する水素の安定な非放射性同位体で、水素の最も一般的な同位体である。薬物動態（ＰＫ）、薬力学（ＰＤ）、及び毒性プロフィールを改良するための医薬のジュウテリウム化は、いくつかのクラスの薬物に関してこれまでに開示されている。例えば、（ａ）不要な代謝産物を削減又は排除するため、（ｂ）親薬物の半減期を増大するため、（ｃ）所望効果を達成するのに必要な用量数を低減するため、（ｄ）所望効果を達成するのに必要な１用量の量を低減するため、（ｅ）活性代謝産物の形成を増大するため（何らかの活性代謝産物が形成される場合）、（ｆ）特定組織における有害代謝産物の産生を低減するため、及び／又は（ｇ）より効果的な薬物及び／又は多剤投与のためのより安全な薬物（多剤投与が意図されているか否かに関わらず）を創製するために、様々なジュウテリウム化パターンが使用できることが開示されている（７）。ゆえに、（７）において、ラキニモド(laquinimod)のジュウテリウム化が開示され、ジュウテリウム化法は、ラキニモドの代謝を緩徐化する強力な可能性を有すると述べられている。

第一の側面に従って、アミド−Ｎメチル基における少なくとも７０％のジュウテリウム富化率を有するジュウテリウム富化４−ヒドロキシ−５−メトキシ−Ｎ，１−ジメチル−２−オキソ−Ｎ−［（４−トリフルオロメチル）フェニル］−１，２−ジヒドロ−キノリン−３−カルボキサミド、又はその製薬学的に許容可能な塩である化合物を提供する。

また、アミド−Ｎメチル基における少なくとも７０％のジュウテリウム富化率を有するジュウテリウム富化４−ヒドロキシ−５−メトキシ−Ｎ，１−ジメチル−２−オキソ−Ｎ−［（４−トリフルオロメチル）フェニル］−１，２−ジヒドロ−キノリン−３−カルボキサミド、又はその製薬学的に許容可能な塩の製造法も提供する。該方法は、４−ヒドロキシ−５−メトキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−キノリン−３−カルボン酸Ｃ１−Ｃ４アルキルエステルと、Ｎ−メチル基における少なくとも７０％のジュウテリウム富化率を有するジュウテリウム化Ｎ−メチル−ｐ−トリフルオロメチルアニリンとを、適切な溶媒中で反応させ、任意に、得られた化合物と、適切な製薬学的に許容可能な塩基とを反応させることによる。

一態様において、本発明の化合物は、式（Ｉ）：

［式中、Ｒ^１は、Ｈ及び製薬学的に許容可能な有機又は無機カチオンから選ばれ；
Ｒ^２、Ｒ^３及びＲ^４は、Ｈ及びＤから独立に選ばれ；そして
ＣＲ^２Ｒ^３Ｒ^４は、少なくとも７０％の総ジュウテリウム富化率を有する］に従う。

また、式（Ｉ）：

［式中、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３及びＲ^４は上記定義の通りである］による化合物の製造法も提供し、該方法は、Ｒ^１がＨである式（Ｉ）の化合物を得るために、式（II）：

［式中、Ｒ^５は、Ｃ１−Ｃ４アルキル基である］の化合物と、式（III）：

の化合物とを適切な溶媒中で反応させ、任意に、Ｒ^１がＨである式（Ｉ）の化合物と、適切な製薬学的に許容可能な塩基とを反応させることを含む。

本発明の化合物は、医薬、例えば悪性過剰増殖性疾患又は自己免疫疾患の治療において使用するための医薬として有用である。

本発明の化合物はまた、医薬、例えば免疫機能の調節によって改善される障害の治療において使用するための医薬としても有用である。

結果として、治療上有効量の本発明による化合物を含む医薬組成物も提供する。

また、発明的化合物は、悪性過剰増殖性疾患及び自己免疫疾患から選ばれる障害の予防又は治療において使用するのにも適切である。

悪性過剰増殖性疾患を患う哺乳動物の治療法も提供する。さらに、自己免疫疾患を患う哺乳動物の治療法のほか、免疫機能の調節によって改善される障害の治療法も提供する。

図１は、Ａｈ媒介性ＣＹＰ１Ａ１誘導を測定するためのインビトロルシフェラーゼ遺伝子レポーターアッセイで使用されたヒトヘパトーマ細胞株でのルシフェラーゼ発現の誘導倍率(fold induction)を、ＡＢＲ−２１５０５０及びそのアミド脱メチル化代謝産物ＡＢＲ−２１５６９１のそれぞれの添加量の関数として表したグラフを示す。図２は、Ａｈ媒介性ＣＹＰ１Ａ１誘導を測定するためのインビトロルシフェラーゼ遺伝子レポーターアッセイで使用されたヒトヘパトーマ細胞株でのルシフェラーゼ発現の誘導倍率を、ベンゾ（ａ）ピレンの添加量の関数として表したグラフを示す。図３は、ＡＢＲ−２１５０５０の構造式を示す。該化合物中に存在し、本明細書中でアミド−Ｎ−メチル、キノリン−Ｎ−メチル及びキノリン−Ｏ−メチルとそれぞれ呼ばれる３個のメチル基が太字で示されている。図４は、ジュウテリウム化アミド−Ｎメチル基を有するＡＢＲ−２１５０５０のエレクトロスプレーイオン化、ポジティブモード、（ＥＳＩ^＋）質量スペクトルを示す。ジュウテリウム富化率約９７％。ジュウテリウム富化化合物の画分はｍ／ｚ＝４１０の質量ピーク（プロトン化分子、［Ｍ＋Ｈ］^＋）で表され、非ジュウテリウム富化化合物の画分はｍ／ｚ＝４０７の質量ピークで表されている（ｍ／ｚ＝４１０に対して３％）。ｍ／ｚ＝４３２の質量ピークはナトリウムイオン化により形成された分子イオン付加物である［Ｍ＋Ｎａ］^＋。ｍ／ｚ＝４１１、４１２、４１３及び４３３の質量ピークは、天然に存在する同位体^１３Ｃ、^１５Ｎ、^１７Ｏ及び^１８Ｏを反映している。図５は、ＡＢＲ−２１５０５０及びジュウテリウム富化ＡＢＲ−２１５０５０（アミドＮ−メチルがジュウテリウム化されており、以後ＡＢＲ−２１５０５０−ｄｘとも呼ぶ）の、ＡＢＲ−２１５０５０とＡＢＲ−２１５０５０−ｄｘを（１：１）混合物にしてラットに投与した後のアミド−Ｎ脱メチル化代謝産物の平均血漿中濃度（ｎＭ）をそれぞれ示す棒グラフである。図６は、ラットにおけるＡＢＲ−２１５０５０及びＡＢＲ−２１５０５０−ｄｘの経口投与後のＣＹＰ１Ａ１及びＣＹＰ１Ａ２の平均誘導倍率を示す棒グラフである（ブランクとして通常の飲料水を経口投与）。図７は、ヌードＢａｌｂ／ｃマウスのＬＮＣａＰ腫瘍に対する経口投与ＡＢＲ−２１５０５０−ｄｘ（１０ｍｇ／ｋｇ／日）の効果を示す図である。

上記の通り、ＡＢＲ−２１５０５０は、様々な重大疾患の治療において有用となりうる治療活性化合物として有望な結果を示している。

ＡＢＲ−２１５０５０をそのインビトロにおけるＣＹＰ１Ａ誘導能力について、ＴＶ−細胞アッセイで試験した。このアッセイは、ＡｈＲ（アリール炭化水素受容体）媒介性ＣＹＰ１Ａ誘導を測定するために開発されたルシフェラーゼ遺伝子レポーターアッセイである。ヒトＣＹＰ１Ａプロモーター及び５’−フランキング配列をホタルルシフェラーゼ発現ベクターにクローニングし、ヒトヘパトーマ細胞株、ＨｅｐＧ２に安定的に組み込んだ（９）。単離された細胞株はＴＶ１０１Ｌと改名された。この試験によれば、ＡＢＲ−２１５０５０はＣＹＰ１Ａを誘導しなかった。後述の“ＡＢＲ−２１５０５０のＣＹＰ１Ａ誘導能力のインビトロアッセイ”参照。

ＡＢＲ−２１５０５０の３種類の脱メチル化代謝産物がラットに見出された。すなわち、キノリン−Ｎ脱メチル化代謝産物（以後ＡＢＲ−２１９６９４と呼ぶ）、キノリン−Ｏ脱メチル化代謝産物ＡＢＲ−２２２０９７（以後ＡＢＲ−２２２０９７と呼ぶ）、及びアミド−Ｎ脱メチル化代謝産物（以後ＡＢＲ−２１５６９１と呼ぶ）である。表１参照。

これらの代謝産物もＴＶ−細胞アッセイで試験した。ＡＢＲ−２１５０５０と全く同様に、ＡＢＲ−２１９６９４及びＡＢＲ−２２２０９７もＣＹＰ１Ａを誘導しないことが見出された（データ示さず）。驚いたことに、親化合物及び二つの他の脱メチル化代謝産物とは対照的に、ＡＢＲ−２１５６９１は相当のＣＹＰ１Ａ誘導能力、二つの他の脱メチル化代謝産物及び親化合物ＡＢＲ−２１５０５０自体よりも数倍高い誘導能力を有していることが見出された。後述の“ＡＢＲ−２１５６９１のＣＹＰ１Ａ誘導能力のインビトロアッセイ”参照。たとえ非常に低濃度でもＡＢＲ−２１５６９１は、その高い誘導能力のためにＣＹＰ１Ａ誘導にかなり寄与しうると考えられる。

ＡＢＲ−２１５０５０及びその代謝産物の水溶性についても調べた。代謝とは、一般的に、化合物をより水溶性の実体に変換することを目的としたものであるというのは周知の事実である（１０）。これは、毒性を大部分低下させるだけでなく、腎排出も促進する。ＡＢＲ−２１９６９４及びＡＢＲ−２２２０９７はどちらも高水溶性であるが、驚いたことに、ＡＢＲ−２１５６９１は、他の代謝産物並びに親化合物と比べて極めて低い水溶性を有することが分かった。表２参照。

このＡＢＲ−２１５６９１の低水溶性を考えると、ＡＢＲ−２１５６９１の腎排泄は他の二つの脱メチル化代謝産物と比べて低いと予想できる。上記知見を合わせると、ＡＢＲ−２１５６９１によるＣＹＰ１Ａ誘導はヒトのインビボで結局のところ薬物薬物相互作用問題を引き起こしかねないことが示唆される。これは、たとえ克服できなくても、なお医療において真剣に検討されねばならない問題である。

そこで、アミド−Ｎメチル部分をトリジュウテリウム化したアミド−Ｎメチルジュウテリウム化ＡＢＲ−２１５０５０（以後ＡＢＲ−２１５０５０−ｄｘと呼ぶ）の薬物動態特徴を、ラットで、非ジュウテリウム化親化合物と比較して研究した。アミド−Ｎメチルをジュウテリウム標識した場合の代謝的アミド−Ｎ脱メチル化の削減は顕著であった。脱メチル化代謝産物の形成は、非ジュウテリウム標識ＡＢＲ−２１５０５０と比べて４倍も減少した。言い換えれば、ＡＢＲ−２１５０５０と比べて、ＡＢＲ−２１５６９１のインビボ形成は、ＡＢＲ−２１５０５０−ｄｘを使用した場合、わずか２５％に低下した。また、アミド−Ｎ脱メチル化の減少はインビボ血漿中の親薬物の１：１モル比に影響を及ぼさないことも分かった。つまり、プラスの疾患治療効果は維持されるが、ＣＹＰ１Ａ誘導からなる望まざる副作用は抑制されることを意味している。後述の“ラットにおけるＡＢＲ−２１５０５０及びＡＢＲ−２１５０５０−ｄｘの薬物動態特徴のインビボ研究”参照。

さらに、ラットにおけるインビボ研究から、ＣＹＰ１Ａ誘導は、ＡＢＲ−２１５０５０の代わりにＡＢＲ−２１５０５０−ｄｘを投与することによって実質的に削減されることも示されている（後述の“ＡＢＲ−２１５０５０及びＡＢＲ−２１５０５０−ｄｘ投与後のラットにおけるＣＹＰ１Ａ１／２活性のインビボ研究”参照）。

マウスにおけるインビボ研究も、ＡＢＲ−２１５０５０−ｄｘが高い治療活性を保持していることを示している（後述の“マウスにおけるＡＢＲ−２１５０５０−ｄｘの抗腫瘍効果のインビボ研究”参照）。

そこで、本発明に従って、投与により実質的に低減されたＣＹＰ１Ａ誘導をもたらしながらも高い治療活性を提供するジュウテリウム化ＡＢＲ−２１５０５０を提供する。

本発明の目的上、化合物の特定位置における“ジュウテリウム富化率”という用語は、水素の代わりにジュウテリウムがその位置に組み込まれている割合のことを言う。例えば、“所与の位置において９０％のジュウテリウム富化率を有する化合物”とは、サンプル中の分子の９０％がその特定位置にジュウテリウムを含有していることを意味する。ジュウテリウムの天然存在量は約０．０１５６％である。このことは、化合物の任意の特定位置における天然ジュウテリウム富化率が０．０１５６％であることを意味する。ジュウテリウム富化率は、例えば質量分析及び核磁気共鳴分光法を用いて測定することができる。

メチル基のようなジュウテリウム化可能な位置をいくつか含む部分に言及する場合、“ジュウテリウム富化率”という用語は、その部分のその位置についての個別の値を基にした平均値を言う。例示的な例として、９０％のジュウテリウム富化率を有し、三つの特定ジュウテリウム化位置を含む部分の場合、各個別位置におけるジュウテリウム富化率は、例えば８５％、９２％及び９３％（又はその他の任意のパーセント値）であってよく、その平均が９０％である。

本発明の目的上、免疫機能の調節によって改善される障害は、例えば、悪性過剰増殖性疾患、例えばがん、自己免疫疾患、炎症及び炎症性疾患、並びに免疫系の過敏性障害を含む。

“免疫機能の調節”とは、例えば、望ましくない効果を生じる免疫応答の緩和又は防止を意味する。

本明細書において“悪性過剰増殖性疾患”、“がん”及び“がん性”という用語は、典型的には無秩序な細胞増殖を特徴とする、哺乳動物における生理学的状態のことを言う又は説明する。本発明の目的上、そのような状態の例は、黒色腫、がん、リンパ腫、芽腫、肉腫、及び白血病又はリンパ性悪性疾患などであるが、これらに限定されない。そのような状態のさらに詳しい例は、扁平細胞がん（例えば上皮扁平細胞がん）、肺がん（小細胞肺がん、非小細胞肺がん、肺腺がん及び肺扁平上皮がんを含む）、腹膜がん、肝細胞がん、胃がん(gastric又はstomach cancer)（消化管がんを含む）、膵がん、グリア芽腫、子宮頸がん、卵巣がん、肝がん(liver cancer)、膀胱がん、ヘパトーマ(hepatoma)、乳がん、結腸がん、直腸がん、結腸直腸がん、子宮内膜がん又は子宮がん(endometrial cancer又はuterine carcinoma)、唾液腺がん、腎がん(kidney又はrenal cancer)、前立腺がん、外陰がん、甲状腺がん、肝がん(hepatic carcinoma)、及び肛門がん、陰茎がん、並びに頭頚部のがんなどである。

本明細書中で使用されている“自己免疫疾患”という用語は、生体の組織がその体自身の免疫系によって攻撃される場合に発生する何らかの障害のことを言う。本発明の目的上、自己免疫疾患の例は、急性播種性脳脊髄炎（ＡＤＥＭ）、急性壊死性出血性白質脳炎、アジソン病、無ガンマグロブリン血症、アレルギー性喘息、アレルギー性鼻炎、円形脱毛症、アミロイド症、強直性脊椎炎、抗−ＧＢＭ／抗−ＴＢＭ腎炎、抗リン脂質症候群（ＡＰＳ）、自己免疫性再生不良性貧血、自己免疫性自律神経障害、自己免疫性肝炎、自己免疫性脂質異常症、自己免疫性免疫不全、自己免疫性内耳疾患（ＡＩＥＤ）、自己免疫性心筋炎、自己免疫性膵炎、自己免疫性網膜症、自己免疫性血小板減少性紫斑病（ＡＴＰ）、自己免疫性甲状腺疾患、軸索＆ニューロン神経障害、バロー病、ベーチェット病、水疱性類天疱瘡、心筋症、キャッスル病、セリアック病、シャーガス病、慢性疲労症候群、慢性炎症性脱髄性多発神経炎（ＣＩＤＰ）、慢性再発性多巣性骨髄炎（ＣＲＭＯ）、チャーグ・ストラウス症候群、瘢痕性類天疱瘡／良性粘膜類天疱瘡、クローン病、コーガン症候群、寒冷凝集素症、先天性心ブロック、コクサッキー心筋炎、ＣＲＥＳＴ病、本態性混合型クリオグロブリン血症、脱髄性ニューロパシー、疱疹状皮膚炎、皮膚筋炎、デビック病（視神経脊髄炎）、円板状ループス、ドレスラー症候群、子宮内膜症、好酸球性筋膜炎、結節性紅斑、実験的アレルギー性脳脊髄炎、エバンス症候群、線維筋痛、線維化性肺胞炎、巨細胞性動脈炎（側頭動脈炎）、糸球体腎炎、グッドパスチャー症候群、グレーブス病、ギラン・バレー症候群、橋本脳炎、橋本甲状腺炎、溶血性貧血、ヘノッホ・シェーンライン紫斑病、妊娠性疱疹、低ガンマグロブリン血症、特発性血小板減少性紫斑病（ＩＴＰ）、ＩｇＡ腎症、ＩｇＧ４関連硬化性疾患、免疫調節リポタンパク質、封入体筋炎、インスリン依存性糖尿病（１型）、間質性膀胱炎、若年性関節炎、若年性糖尿病、川崎症候群、ランバート・イートン症候群、白血球破砕性血管炎、扁平苔癬、硬化性苔癬、木質性結膜炎、線状ＩｇＡ疾患（ＬＡＤ）、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、慢性ライム病、メニエール病、顕微鏡的多発性血管炎、混合性結合組織疾患（ＭＣＴＤ）、モーレン潰瘍、ムッハ・ハーベルマン病、多発性硬化症、重症筋無力症、筋炎、ナルコレプシー、視神経脊髄炎（デビック）、好中球減少症、眼部瘢痕性類天疱瘡、視神経炎、回帰性リウマチ、ＰＡＮＤＡＳ（連鎖球菌関連性の小児自己免疫性神経精神疾患）、傍腫瘍性小脳変性症、発作性夜間血色素尿症（ＰＮＨ）、パリー・ロンベルグ症候群、パーソネージ・ターナー症候群、扁平部炎（周辺性ブドウ膜炎）、天疱瘡、末梢神経障害、静脈周囲脳脊髄炎、悪性貧血、ＰＯＥＭＳ症候群、結節性多発動脈炎、Ｉ、II、＆III型多腺性自己免疫症候群、リウマチ性多発筋痛、多発性筋炎、心筋梗塞後症候群、心膜切開後症候群、プロゲステロン皮膚炎、原発性胆汁性肝硬変、原発性硬化性胆管炎、乾癬、乾癬性関節炎、特発性肺線維症、壊疽性膿皮症、赤芽球癆、レイノー現象、反射性交感神経ジストロフィー、ライター症候群、再発性多発性軟骨炎、むずむず脚症候群、後腹膜線維化症、リウマチ熱、関節リウマチ、サルコイドーシス、シュミット症候群、強膜炎、強皮症、シェーグレン症候群、精子＆精巣自己免疫、全身硬直症候群、亜急性細菌性心内膜炎（ＳＢＥ）、スザック症候群、交感性眼炎、高安動脈炎、側頭動脈炎／巨細胞性動脈炎、血小板減少性紫斑病（ＴＴＰ）、トローザ・ハント症候群、横断性脊髄炎、潰瘍性大腸炎、未分化結合組織疾患（ＵＣＴＤ）、ブドウ膜炎、血管炎、小水疱水疱性皮膚病、白斑、及びウェーグナー肉芽腫である（１１）。

本明細書中で使用されている“過敏性障害”という用語は、アレルギーのような障害のことである。アレルギーの例は、アトピー性皮膚炎、アレルギー性蕁麻疹、花粉症、アレルギー性喘息、アナフィラキシー、食物アレルギー（牛乳、卵、落花生、木の実、魚介類、大豆、小麦）、ペニシリンアレルギーなどである。

本明細書中で使用されている“哺乳動物”という用語は、ヒトのほか、ヒト以外の哺乳動物、例えばウマ、ペット動物、例えばネコ又はイヌ、家畜、例えばウシ又はヒツジ、又は実験動物、例えばラット又はサルなども含む。好ましくは、哺乳動物はヒトである。

本明細書中で使用されている“治療”という用語は、予防のほか、疾患の症状の軽減を含む。従って、該用語は、疾患又は状態の徴候及び症状を患者から取り除くため、あるいは疾患又は障害を患っている患者の状態を改善するために患者を治療するだけでなく、疾患又は状態の発症又は進行を予防するために無症状の患者を予防的に治療することも包含する。

“有効量”という用語は、治療された患者に治療効果をもたらす化合物の量のことを言う。効果は、客観的（すなわち、何らかの試験又はマーカーによって測定可能）又は主観的（すなわち、対象が効果を示唆する又は感じる）でありうる。

前述の通り、第一の側面に従って、アミド−Ｎメチル基における少なくとも７０％のジュウテリウム富化率を有するジュウテリウム富化４−ヒドロキシ−５−メトキシ−Ｎ，１−ジメチル−２−オキソ−Ｎ−［（４−トリフルオロメチル）フェニル］−１，２−ジヒドロ−キノリン−３−カルボキサミド、又はその製薬学的に許容可能な塩である化合物を提供する。

一部の態様において、アミド−Ｎメチル基におけるジュウテリウム富化率は、少なくとも７５％、又は少なくとも８０％、又は少なくとも８５％、例えば少なくとも９０％、又は少なくとも９５％、又は少なくとも９７％である。

一部の態様において、発明的化合物は、一つ又は複数の他の位置でもジュウテリウム化されている。すなわち、アミド−Ｎメチル部分でない特定の位置において、Ｈの代わりにＤを０．０１５６％を超えるジュウテリウム富化率で含む。

また、上記定義の化合物の製造法も提供する。該方法は、４−ヒドロキシ−５−メトキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−キノリン−３−カルボン酸Ｃ１−Ｃ４アルキルエステルと、アミドＮ−メチル基における少なくとも７０％のジュウテリウム富化率を有するジュウテリウム化Ｎ−メチル−ｐ−トリフルオロメチルアニリンとを、適切な溶媒中で反応させ、任意に、該化合物と、適切な製薬学的に許容可能な塩基とを反応させることによる。

一部の態様において、Ｎ−メチル−ｐ−トリフルオロメチルアニリンのＮメチル基におけるジュウテリウム富化率は、少なくとも７５％、又は少なくとも８０％、又は少なくとも８５％、例えば少なくとも９０％、又は少なくとも９５％、又は少なくとも９７％である。

一部の態様において、４−ヒドロキシ−５−メトキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−キノリン−３−カルボン酸Ｃ１−Ｃ４アルキルエステル又はＮ−メチル−ｐ−トリフルオロメチルアニリンのいずれか、又は両方は、一つ又は複数の更なる位置でジュウテリウム化されている。

４−ヒドロキシ−５−メトキシ−Ｎ，１−ジメチル−２−オキソ−Ｎ−［（４−トリフルオロメチル）フェニル］−１，２−ジヒドロ−キノリン−３−カルボキサミドの“アミドＮ”は、“カルボキサミドＮ”と言うこともできる。すなわち、これは、化合物のフェニル環部分をキノリン環部分に連結している３−カルボキサミドの窒素である。“アミドＮ−メチル”は、“カルボキサミドＮ−メチル”と言うこともできる。これは、（カルボキシ）アミドの窒素に結合しているメチル基である。

本発明の化合物の製薬学的に許容可能な塩は、例えば、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化カルシウム、モノエタノールアミン、ジエタノールアミン、ジメチルアミノエタノール又はモルホリンから誘導される塩基付加塩でありうる。

一態様において、発明的化合物は、式（Ｉ）：

［式中、Ｒ^１は、Ｈ及び製薬学的に許容可能な有機又は無機カチオンから選ばれ；
Ｒ^２、Ｒ^３及びＲ^４は、Ｈ及びＤから独立に選ばれ；そして
ＣＲ^２Ｒ^３Ｒ^４は、少なくとも７０％の総ジュウテリウム富化率を有する］を有する。

一部の態様において、Ｒ^１はＨである。他の態様において、Ｒ^１は製薬学的に許容可能な有機又は無機カチオン、例えばナトリウム、カリウム、カルシウム、モノエタノールアミン、ジエタノールアミン、ジメチルアミノエタノール、及びモルホリンから誘導されるカチオンから選ばれる。

式（Ｉ）において、Ｒ^２、Ｒ^３及びＲ^４は、Ｈ及びＤから独立に選ばれ、Ｒ^２、Ｒ^３及びＲ^４のそれぞれは、ＣＲ^２Ｒ^３Ｒ^４が少なくとも約７０％の総ジュウテリウム富化率を有するようなジュウテリウム富化を有している。一部の態様において、ＣＲ^２Ｒ^３Ｒ^４のジュウテリウム富化率は、少なくとも約７５％、又は少なくとも約８０％、又は少なくとも約８５％、例えば少なくとも約９０％、又は少なくとも約９５％、又は少なくとも約９７％である。

例えば、総ジュウテリウム富化率が少なくとも約７０％の場合、Ｒ^２、Ｒ^３及びＲ^４のそれぞれのジュウテリウム富化率は少なくとも約８９％でなければならない；そしてジュウテリウム富化率が少なくとも９７％の場合、Ｒ^２、Ｒ^３及びＲ^４のそれぞれのジュウテリウム富化率は少なくとも約９９％でなければならない。

好ましくは、Ｒ^２、Ｒ^３及びＲ^４は、すべて同一である（Ｒ^２＝Ｒ^３＝Ｒ^４）。すなわち、本発明の化合物は、式（Ｉ’）：

［式中、Ｒ^２は、Ｈ及びＤから選ばれ、ＣＲ^２ _３は、少なくとも７０％、又は少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、又は少なくとも９７％のジュウテリウム富化率を有する］によって表すことができる。これを考慮すると、当然のことながら、別段の指示がない限り又は文脈から明らかでない限り、本明細書において式（Ｉ）の化合物に対してなされる何らかの言及は、式（Ｉ’）の化合物にも適用されることは理解されるはずである。

当然のことながら、式（Ｉ）による化合物の他の水素原子のいずれもジュウテリウムと交換されていてもよい。すなわち、Ｒ^２、Ｒ^３及びＲ^４のほかに、式（Ｉ）の化合物は、式（Ｉ）の化合物中の水素を置換する１３個まで（Ｒ^１がＨでない場合）又は１４個まで（Ｒ^１がＨの場合）の更なるジュウテリウム原子を含んでいてもよい。実際、天然のジュウテリウム分布のために、式（Ｉ）の化合物の任意の所与のサンプル中の分子のごく一部は一つ又は複数のジュウテリウム原子を含んでいる。しかしながら、そのような更なるジュウテリウム原子の存在は、天然であろうとなかろうと、本発明にとって重要ではない。にもかかわらず、一部の態様において、式（Ｉ）の化合物は、アミド−Ｎメチル基以外の任意の特定位置に少なくとも１個の更なるジュウテリウム原子を、天然存在量を超えるジュウテリウム富化率で、すなわち０．０１５６％を超える富化率で、例えば少なくとも１％、又は少なくとも５％、例えば少なくとも１０％のジュウテリウム富化率で含む。この更なるジュウテリウム原子は、式（Ｉ）の化合物の任意の位置の水素原子を置換することができる。例えば、式（Ｉ）の化合物のキノリン−Ｎメチル基又はキノリン−Ｏメチル基のいずれかに結合している一つ又は複数の水素原子はジュウテリウムで置換されてもよい、及び／又は式（Ｉ）の化合物の芳香族水素のいずれもジュウテリウムで置換されてもよい。

また、上記定義の式（Ｉ）による化合物の製造法も提供し、該方法は、式（II）：

［式中、Ｒ^２、Ｒ^３及びＲ^４は上記定義の通りである］の化合物とを、適切な溶媒中で反応させ、任意に、Ｒ^１がＨである式（Ｉ）の化合物と、適切な製薬学的に許容可能な塩基、例えばＮａＯＨ、ＫＯＨ、Ｃａ（ＯＨ）_２、モノエタノールアミン、ジエタノールアミン、ジメチルアミノエタノール、又はモルホリンとを反応させることによる。

式（II）の化合物において、Ｒ^５は、Ｃ１−Ｃ４アルキル基、例えばＣ１−Ｃ３アルキル基、例えばメチル又はエチル、特にメチルでありうる。

式（II）の化合物は、一つ又は複数の位置にジュウテリウムを天然存在量を超えるジュウテリウム富化率で含んでいてもよい。同様に、式（III）の化合物においても、芳香族水素のいずれも、天然存在量を超えるジュウテリウム富化率でジュウテリウム原子によって置換されていてもよい。

式（II）及び（III）の化合物間の反応は適切な溶媒中で実施される。適切な反応溶媒は、例えば、直鎖又は分枝鎖Ｃ７−Ｃ１０アルカン又はシクロアルカン又はそれらの混合物、例えばヘプタン、オクタン又はデカヒドロナフタレンのような炭化水素でありうる。

本発明の化合物は療法に有用である。従って、一部の態様において、本発明は、例えば、黒色腫、がん、リンパ腫、芽腫、肉腫、及び白血病又はリンパ性悪性疾患から選ばれる悪性過剰増殖性状態の治療において使用するための化合物を提供する。一部の特定の態様において、本発明は、扁平細胞がん（例えば上皮扁平細胞がん）、肺がん（小細胞肺がん、非小細胞肺がん、肺腺がん及び肺扁平上皮がんを含む）、腹膜がん、肝細胞がん、胃がん(gastric又はstomach cancer)（消化管がんを含む）、膵がん、グリア芽腫、子宮頸がん、卵巣がん、肝がん(liver cancer)、膀胱がん、ヘパトーマ(hepatoma)、乳がん、結腸がん、直腸がん、結腸直腸がん、子宮内膜がん又は子宮がん(endometrial cancer又はuterine carcinoma)、唾液腺がん、腎がん(kidney又はrenal cancer)、前立腺がん、外陰がん、甲状腺がん、肝がん(hepatic carcinoma)、肛門がん、陰茎がん、及び頭頚部のがんから選ばれる悪性過剰増殖性状態の治療において使用するための化合物を提供する。

一部の態様において、悪性過剰増殖性疾患は、固形腫瘍、悪性黒色腫又は血液腫瘍から選ばれる。

一部の態様において、固形腫瘍は、腺がん、例えば前立腺がん、乳がん、肺がん及び結腸直腸がんから選ばれる。

一部の態様において、本発明は、自己免疫疾患、例えば上記定義の自己免疫疾患の治療において使用するための化合物を提供する。

一部の特定の態様において、自己免疫疾患は、クローン病、多発性硬化症、関節リウマチ、潰瘍性大腸炎及び全身性エリテマトーデスから選ばれる。

実験
ＡＢＲ−２１５０５０のＣＹＰ１Ａ誘導能力のインビトロアッセイ
ＣＹＰ１Ａ１の転写機序は、インデューサーのＡｈ受容体への結合と、それに続くリガンド−Ａｈ−受容体複合体の核への転位を含む。そこでＣＹＰ１Ａ１遺伝子の５’−フランキング領域の特定エンハンサー配列に結合する。これらの配列は、異物応答配列（ＸＲＥ）と呼ばれる。

ルシフェラーゼ遺伝子レポーターアッセイを用いて、ＡｈＲが媒介するＣＹＰ１Ａ１誘導を測定した。ヒトＣＹＰ１Ａ１プロモーター及び５’−フランキング配列をホタルルシフェラーゼ発現ベクターにクローニングし、ヒトヘパトーマ細胞株、ＨｅｐＧ２に安定的に組み込んだ（８）。単離された細胞株はＴＶ１０１Ｌと改名された。

細胞を９６ウェル組織培養プレートに、試験化合物による処理の２４〜４８時間前に播種した。ＡＢＲ−２１５０５０を、１、１０及び１００μＭの濃度で添加後、細胞をさらに１２〜２４時間インキュベートした。溶解緩衝液(lysis buffer)の添加と、それに続く凍結／解凍サイクルにより細胞を収穫した。酵素アッセイを用いてルシフェラーゼ活性を測定した。ルシフェラーゼ発現の誘導倍率として表された結果を表３及び図１に示す。

比較として、同じアッセイを、周知の、中程度に強力なＣＹＰ１Ａ１インデューサーであるベンズ（ａ）ピレンを用いて実施した。結果を図２に示す。インビトロアッセイの結果は、ＣＹＰ１Ａ１及びＣＹＰ１Ａ２の両方の誘導を媒介するＡｈ受容体と試験化合物との相互作用の程度を示している。

ＡＢＲ−２１５６９１のＣＹＰ１Ａ誘導能力のインビトロアッセイ
ＡＢＲ−２１５０５０で使用したのと同じアッセイを使用した。使用されたＡＢＲ−２１５６９１の濃度と、得られた結果（ルシフェラーゼ発現の誘導倍率として表されている）を表４及び図１に示す。

ラットにおけるＡＢＲ−２１５０５０及びＡＢＲ−２１５０５０−ｄｘの薬物動態特徴のインビボ研究
ジュウテリウム化（ジュウテリウム富化とも呼ぶ）ＡＢＲ−２１５０５０を合成した。ここではアミド−Ｎメチル部分をトリジュウテリウム化した（ＡＢＲ−２１５０５０−ｄｘ）。このジュウテリウム化化合物を非ジュウテリウム化ＡＢＲ−２１５０５０で１：１のモル比に希釈した。１：１等モル混合物をインビボ実験でラットに投与した。キノリン骨格を追加的に１３−炭素標識したため、形成されたアミド−Ｎ脱メチル代謝産物は、ＨＰＬＣ−ＭＳ（質量分析付き高速液体クロマトグラフィー検出）によって選択的に測定することができる。表５に、４匹の異なるラットで測定されたＡＢＲ−２１５０５０−ｄｘ及びＡＢＲ−２１５０５０の血漿中濃度（ｎＭ）と、これら二つの化合物の比率を示す。

表５から、ジュウテリウム化：非ジュウテリウム化親化合物の１：１の比率は、２．５ｍｇ／ｋｇの経口用量で少なくとも４時間まで動物体内で本質的に未変化のままのようである。

ＡＢＲ−２１５０５０−ｄｘ及びＡＢＲ−２１５０５０由来のＡＢＲ−２１５６９１の血漿中濃度もＬＣ−ＭＳ／ＭＳを用いて測定したので、結果を表６に示す。表には、ＡＢＲ−２１５０５０−ｄｘ及びＡＢＲ−２１５０５０からそれぞれ誘導されたＡＢＲ−２１５６９１の血漿中濃度の計算比、並びにアミド−Ｎ脱メチル代謝産物形成の計算削減率も示されている。

表６から、ＡＢＲ−２１５６９１の形成は、アミド−Ｎメチル基のジュウテリウム化によってかなり削減されているようである。前記ジュウテリウム化によって得られたアミド−Ｎ脱メチル化の削減率は、経口投与後４時間にわたって７０．５％〜７５．８％の範囲である。結果を図５に示す。

ＡＢＲ−２１５０５０及びＡＢＲ−２１５０５０−ｄｘ投与後のラットにおけるＣＹＰ１Ａ１／２活性のインビボ研究
ＡＢＲ−２１５０５０及びＡＢＲ−２１５０５０−ｄｘの反復投与後のＣＹＰ１Ａ１及びＣＹＰ１Ａ２のインビボ誘導をラットで研究した。

試験製剤
試験製剤Ｂ及びＣ、及びブランク製剤Ａを以下のように製造した。製剤Ｂの場合、ＡＢＲ−２１５０５０をＮａＯＨと無菌水中に０．５ｍｇ／ｍＬの濃度で溶解した。溶液のｐＨをｐＨ７．４〜８．５に調整した。製剤Ｃは、ＡＢＲ−２１５０５０−ｄｘを用いて同様に製造された。製剤Ａは水しか含有していないブランクであった。製剤は冷蔵庫に最大１週間保管後、使用した。表７に製剤データをまとめた。

試験動物
研究所に到着時、試験動物は９週齢のＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙ雄ラットで、体重は２５０ｇであった。これらを３群に分け、試験前に少なくとも７日間馴化させた。全馴化及び試験期間中、動物には水と餌（ＬａｂｆｏｒＲ７０、ｆｏｒｍＫｉｍｓｔａｄ、スウェーデン）を自由に与え、１２時間ずつの明暗サイクル下、２０±２℃の温度及び５０±１５％の相対湿度で飼育した。

試験の実施
いずれの試験製剤も投与前に、各動物の体重を測定し、動物に投与される個別用量を動物の体重を基に決定した。投与は４日間、経口により実施された。表８参照。

動物を１日に２回観察し、１日に１回体重測定した。全身状態減退の何らかの徴候、又は１５％を超える体重減が見られたらラットを安楽死させた。

サンプリング
最終用量の投与の少し前に、血液サンプルをラット番号５の伏在静脈から採取した。投与期間終了時（第４日）、投与化合物及びアミド−Ｎ脱メチル化代謝産物の血漿中濃度を分析するために、血液サンプルをヘパリン化管に採取した。サンプルは、表９に示されたスケジュールに従って、伏在静脈から（約２５０μＬの血液）及び大静脈から（可能な最大容量）抜き取った。

サンプルは、抜き取り後なるべく早く（３０分以内）、氷水中で冷却し、１３００×ｇ、＋４℃で１０分間遠心分離した。血漿を回収、凍結し、分析まで−７０℃に維持した。

安楽死
最終用量の投与２４時間後、動物を体重測定し、各動物から最終血液サンプルを薬物動態分析のために抜き取った。次に動物を安楽死させ、それぞれから肝臓を取り出し、秤量し、直ちに破砕ドライアイス中で凍結した。次に肝臓をミクロソーム調製まで−７０℃で保管した。

ミクロソームの調製
ミクロソームは、方法Ｍ−０２８７“動物組織からの細胞内画分の調製”に従って調製した後、分析まで−７０℃に維持した。

タンパク質濃度の決定
ミクロソーム画分の総タンパク質濃度を方法Ｍ−０２８９“Ｈａｒｔｒｅｅによるタンパク質の決定”に従って決定した。

ＣＹＰ１Ａ１／２酵素活性の測定
ＣＹＰ１Ａ１／２酵素活性は、方法Ｍ−０２７２Ａに従って、ミクロソーム画分をＣＹＰ基質としてメトキシレゾルフィン（ＭＲＯＤ）及びエトキシレゾルフィン（ＥＲＯＤ）とインキュベーションすることによって測定した。ＥＲＯＤはＣＹＰ１Ａ１に対して高い特異性を示すが、ＭＲＯＤはＣＹＰ１Ａ２に対して高い特異性を示す。

結果を表１０に示す。

表１０に示されたデータによれば、ＡＢＲ−２１５０５０によるＣＹＰ１Ａ１の観察された平均誘導倍率は４２であったが、ＡＢＲ−２１５０５０−ｄｘは１１．５という平均誘導倍率を示した。これは、ＣＹＰ１Ａ１の誘導倍率の７３％減に相当する（（４２−１１．５）／４２×１００％）。表１１によれば、ＡＢＲ−２１５０５０は１７というＣＹＰ１Ａ２の平均誘導倍率を示したが、ＡＢＲ−２１５０５０−ｄｘの投与によって得られたそれは５．５であったことも示されている。すなわち、ＣＹＰ１Ａ２の誘導倍率の減少は６８％である（（１７−５．５）／１７×１００％）。結果を図６に示す。

マウスにおけるＡＢＲ−２１５０５０−ｄｘの抗腫瘍効果のインビボ研究
ジュウテリウム化ＡＢＲ−２１５０５０の抗腫瘍効果をマウスで研究した。

細胞株及び培養条件
去勢抵抗性サブラインＬＮＣａＰ−１９を予めＬＮＣａＰ細胞から確立した（１２）。細胞は前述の通りに維持された（１３）。ＬＮＣａＰ−１９細胞は、実験に使用されたとき、１０〜２３継代の間であった。継代１は、我々の研究室における第一継代と定義される。細胞は試験の結果、マイコプラズマを含まないことが分かった。

細胞の皮下移植
雄の無胸腺ヌードＢＡＬＢ／ｃマウス（８週齢）をＴａｃｏｎｉｃ社（ＬｉｌｌｅＳｋｅｎｓｖｅｄ、デンマーク）から購入した。皮下移植のために、２００μｌのマトリゲル（ＢＤＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅ社、マサチューセッツ州ベッドフォード）中に懸濁させた１００万個の腫瘍細胞をマウスの脇腹に植え込んだ。腫瘍サイズは、実験期間を通して週１回カリパスで測定した。腫瘍獲得は非処置対照群（ｎ＝１２）で７５％であった。腫瘍増殖実験中、ＡＢＲ−２１５０５０−ｄｘ（１０ｍｇ／ｋｇ／日）を７日目から飲料水を通じて投与した。適切な用量が著しい変動なしに投与されていることを確かめるために、全実験期間を通じて各動物ケージの水消費量をモニターした。タスキニモド(tasquinimod)の血漿中半減期は３．４時間であること、飲料水による１〜１０ｍｇ／ｋｇ／日の投与は、定常状態血漿中濃度（０．４〜１μＭ）をもたらすことがこれまでに示されている（１４）。動物は、対照群の平均腫瘍サイズが９００±１００ｍｍ^３の容積に達したら、又は個々の動物の腫瘍容積が１２００ｍｍ^３に達したら犠死させた。結果を図７に示す。

本発明を以下の非制限的実施例においてさらに説明する。

４−ヒドロキシ−５−メトキシ−Ｎ−ジュウテリオメチル−１−メチル−２−オキソ−Ｎ−［（４−トリフルオロメチル）フェニル］−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボキサミド
４−ヒドロキシ−５−メトキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−キノリン−３−カルボン酸メチルエステル（１．０ｇ、３．７９ｍｍｏｌ）、Ｎ−ジュウテリオメチル−ｐ−トリフルオロメチルアニリン（１．０ｇ）、トリブチルアミン（１００マイクロリットル）及びｎ−オクタン（７０ｍＬ）を加熱還流し、揮発性物質を６時間にわたってゆっくり蒸留除去した。反応終了時に約６０ｍＬの溶媒が蒸留除去され、混合物は室温に冷却された。ｎ−ヘプタン（２５ｍＬ）とトルエン（６ｍＬ）の混合物を加え、結晶性懸濁液を２０分間撹拌し、結晶をろ過により回収し、ｎ−ヘプタンで洗浄し、乾燥させて粗標記化合物を得た（１．５２ｇ）。これを、メタノール（１１．２ｍＬ）、水（６．８ｍＬ）及び水酸化ナトリウム（５Ｍ、０．８３ｍＬ、４．１５ｍｍｏｌ）の混合物中に溶解した。塩酸（５Ｍ）を加えてｐＨをおよそ８〜９に調整し、混合物をろ過して不溶性物質があれば除去した。ろ液に５ＭのＨＣｌをｐＨがおよそ２になるまで加えた。懸濁液を１時間撹拌し、結晶をろ過により回収し、３３％ＭｅＯＨ水溶液、次いで水で洗浄し、最後に真空下で乾燥させて標記化合物を得た（１．２５ｇ、８０％）。H-nmr (CDCl_３); 9.95 (s, 1H), 7.50 (m, 5H), 6.93 (d, 1H), 6.70 (d, 1H), 4.04 (s, 3H), 3.55 (s, 3H)。Ｃ_２０Ｈ_１４Ｎ_２Ｄ_３Ｏ_４Ｆ_３の分析計算値：Ｃ５８．６８、Ｈ４．２２、Ｎ６．８４。実測値：Ｃ５８．８、Ｈ４．２５、Ｎ６．９４。大気圧エレクトロスプレーイオン化（ＥＳＩ）質量分析：（Ｍ＋Ｈ）計算値４１０、実測値４１０。図３参照。

４−ヒドロキシ−５−メトキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−キノリン−３−カルボン酸メチルエステルは（１５）に記載の方法によって製造した。

Ｎ−ジュウテリオメチル−ｐ−トリフルオロメチルアニリンは以下のように製造した。４−アミノベンゾトリフルオリド（１２．６ｍＬ、１００ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（１００ｍＬ）中に溶解し、氷浴上で冷却しながら無水トリフルオロ酢酸（２１．２ｍＬ、１５０ｍｍｏｌ）を少しずつ加えた。完全添加後、混合物を蒸発させてトリフルオロアセトアミド誘導体を白色固体として得た（２６．１ｇ）。この固体をＴＨＦ（１００ｍＬ）中に溶解し、氷浴上で冷却した。カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（１８０ｍｍｏｌ、２０．２ｇ）、次いでヨウ化ジュウテリオメチル（２５ｇ、１７３ｍｍｏｌ）を少しずつ加えた後、室温で１８時間撹拌した。混合物を蒸発させ、ジエチルエーテルと水の間で分配させた。有機抽出物を水で、次にブラインで洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させた。揮発性物質の蒸発により２，２，２−トリフルオロ−Ｎ−ジュウテリオメチル−Ｎ−（４−トリフルオロメチル−フェニル）−アセトアミドを帯黄色油として得た（２７．３ｇ）。この油をメタノール（１２５ｍＬ）と水酸化アンモニウム（２８％水溶液、５０ｍＬ）の混合物中に溶解した。室温で６時間撹拌後、混合物を濃縮し、ジエチルエーテルと水の間で分配させた。有機抽出物を水で２回、次いでブラインで洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させた。濃縮により黄色油を得、これをシリカ上で精製し（ヘプタン／酢酸エチル、１０：１〜５：１）、標記化合物を黄色油として得た（１６．２ｇ、９１％）。H-nmr (CDCl3); 7.40 (d, 2H), 6.60 (d, 2H), 4.10 (s, 1H)。

このように、ジュウテリウム化アミド−Ｎメチル基を有するジュウテリウム富化ＡＢＲ−２１５０５０を提供することにより、本発明者らは、非ジュウテリウム化化合物と比べて、（ａ）明確に定義された望まざる性質を有する特定の望まざる代謝産物を削減し、（ｂ）親薬物の半減期に影響しない、そして（ｃ）未知の性質を有する代謝産物を形成しない方法を提供する。

本発明によるジュウテリウム化ＡＢＲ−２１５０５０は、かなり低減されたＣＹＰ１Ａ誘導効果を有するので、本発明は、特に、ＣＹＰ１Ａによる代謝を受けやすい薬物との併用療法を可能にする。

本発明の化合物を別の薬物と組み合わせて使用する場合、二つの成分は同じ製剤中に含まれていても、あるいは同時又は逐次投与のために別の製剤中に含まれていてもよい。本発明の化合物は、がんの治療のための放射線照射などの他の治療と組み合わせて使用又は投与することもできる。

シトクロムＰ４５０ＣＹＰ１Ａ誘導の低減は、ＡＢＲ−２１５０５０（アミド−Ｎメチルジュウテリウム化形）の用量を増大できる可能性（ＣＹＰ１Ａによって代謝される薬物が存在している場合でもこれが所望されるべき場合）も可能にすることも想定される。

本発明の一側面に従って、免疫機能の調節によって改善される障害を患っている哺乳動物の治療法も提供し、該方法は、該哺乳動物に、有効量の本発明による化合物、又はその製薬学的に許容可能な塩を投与することを含む。

一部の態様において、治療は、予防並びに疾患又は障害の症状の緩和を含む。

一部の態様において、治療は、疾患の症状を緩和する、すなわち疾患又は障害を患っている患者の状態を改善するためのものである。

さらに、哺乳動物における悪性過剰増殖性障害（例えば上記の悪性過剰増殖性障害）又は自己免疫疾患（例えば上記の自己免疫疾患）を、該哺乳動物に、有効量の本発明による化合物、又はその製薬学的に許容可能な塩を投与することによって治療する方法も提供する。

有効量の式（Ｉ）の化合物は、好ましくはそのような治療を必要としている患者に通常の投与形路に従って投与され、有効量の活性成分と適切な製薬学的に許容可能な担体とを含む通常の医薬組成物に製剤化される。そのような組成物は様々な形態を取りうる。例えば、経口投与用に製造された溶液、懸濁液、エマルジョン、錠剤、カプセル、及び散剤、吸入用のエアゾール、非経口投与用の無菌溶液、及び直腸投与用の坐剤、又は適切な局所用製剤などである。適切な医薬製剤を選択及び製造するための従来手順は、例えば、“Ａｕｌｔｏｎ’ｓＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓ：ＴｈｅＤｅｓｉｇｎａｎｄＭａｎｕｆａｃｔｕｒｅｏｆＭｅｄｉｃｉｎｅｓ”，Ｍ．Ｅ．Ａｕｌｔｏｎ，ＣｈｕｒｃｈｉｌｌＬｉｖｉｎｇｓｔｏｎｅ，２００７に記載されている。

がん又は自己免疫疾患の治療において使用するための適切な日用量は、治療される特定の状態、特定の患者の年齢及び体重、及び薬物治療に対する特定の患者の応答に応じて、０．０００１ｍｇ／ｋｇ〜約０．５ｍｇ／ｋｇ体重、特に０．００１ｍｇ／ｋｇ〜約０．０５ｍｇ／ｋｇ体重の範囲で変動すると考えられる。正確な個別用量ならびに日用量は、医師の指示下、標準的な医療原則に従って決定される。

薬物の安定性又は投与し易さを増強するための様々な添加剤が考えられる。医薬組成物は、式（Ｉ）の化合物以外に追加の治療上有用な物質を含有していてもよい。

参考文献
(1) PCT application WO 01/30758 A1.
(2) Isaacs J, Pili R, Qian D, Dalrymple S, Garrison J, Kyprianou N, Bjork A, Olsson A, Leandersson T. Identification of ABR-215050 as lead second generation quinoline-3-carboxamide anti-angiogenic agent for the treatment of prostate cancer. Prostate. 2006 Dec 1;66(16):1768-78.
(3) Dalrymple S, Becker E, Isaacs J. The quinoline-3-carboxamide anti-angiogenic agent, tasquinimod, enhanced the anti-prostate cancer efficacy of androgen ablation and Taxotere without affecting serum PSA directly in human xenograft models. Prostate. 2007 67:790-797
(4) Clinical Phase-II study “EudraCT No: 2007-003470-26”.
(5) Trentham D. E. 1982. Collagen arthritis as a relevant model for rheumatoid arthritis. Evidence pro and con. Arthr. Rheum. 25, 911-916
(6) International patent application No.WO00/03991
(7) US patent application No. 2010/0055072 A1
(8) London, 13 December 2007 Doc.Ref.EMEA/CHMP/EWP/490784/2007
http://www.ema.europa.eu/docs/en_GB/document_library/Other/2009/11/WC500015483.pdf
(9) Postlind, H., Vu, T.P., Tukey, R.H., and Quattrochi, L.C. (1993). Response of Human CYP1-Luciferase Plasmids to 2,3,7,8-Tetrachlorodibenzo-p-dioxin and Polycyclic Aromatic Hydrocarbons. Toxicol. Appl. Pharmco. 118, 255-262
(10) Edward Kerns and Li Di. Drug-like Properties: Concepts, Structure Design and Methods: from ADME to Toxicity Optimization. Academic Press, 2008, ISBN 978-0-12-369520-8, p.139
(11) The American Autoimmune Related Diseases Association, Inc. (AARDA) 22100 Gratiot Ave. East Detroit, MI 48021, USA
http://www.aarda.org/research_display.php?ID=47
(12) Gustavsson H, Welen K, Damber JE. Transition of an androgen-dependent human prostate cancer cell line into an androgen-independent subline is associated with increased angiogenesis. Prostate. 2005;62:364-73.
(13) Jennbacken K, Gustavsson H, Welen K, Vallbo C, Damber JE. Prostate cancer progression into androgen independency is associated with alterations in cell adhesion and invasivity. Prostate. 2006; 66:1631-40.
(14) Isaacs JT, Pili R, Qian DZ, Dalrymple SL, Garrison JB, Kyprianou N, Bjork A, Olsson A, Leanderson T. Identification of ABR-215050 as lead second generation quinoline-3-carboxamide anti-angiogenic agent for the treatment of prostate cancer. Prostate. 2006; 66:1768-78.
(15) Jonsson et al, J. Med. Chem., 2004, 47, 2075-2088

Claims

アミド−Ｎメチル基における少なくとも７０％のジュウテリウム富化率を有するジュウテリウム富化４−ヒドロキシ−５−メトキシ−Ｎ，１−ジメチル−２−オキソ−Ｎ−［（４−トリフルオロメチル）フェニル］−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボキサミド、又はその製薬学的に許容可能な有機又は無機カチオンとの塩である、化合物。
前記ジュウテリウム富化率が少なくとも９０％である、請求項１に記載の化合物。
式（Ｉ）：

［式中、Ｒ^１は、Ｈ又は製薬学的に許容可能な有機又は無機カチオンであり；そしてＲ^２、Ｒ^３及びＲ^４は、Ｈ及びＤから独立に選ばれ；そして
ＣＲ^２Ｒ^３Ｒ^４は、少なくとも７０％の総ジュウテリウム富化率を有する］を有する、請求項１に記載の化合物。
Ｒ^２、Ｒ^３及びＲ^４のそれぞれが少なくとも９０％のジュウテリウム富化率を有する、請求項３に記載の化合物。
製薬学的に許容可能なカチオンが、ナトリウム、カリウム、カルシウム、モノエタノールアミン、ジエタノールアミン、ジメチルアミノエタノール、又はモルホリンから誘導される、請求項１〜４のいずれか１項に記載の化合物。
医薬として使用するための請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物。
請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物を治療上有効量含む医薬組成物。
免疫機能の調節によって改善される障害の予防又は治療において使用するための請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物。
悪性過剰増殖性障害及び自己免疫疾患から選ばれる障害の治療において使用するための請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物。
悪性過剰増殖性障害が、固形腫瘍、悪性黒色腫又は血液腫瘍である、請求項９に記載の化合物。
自己免疫疾患が、クローン病、多発性硬化症、関節リウマチ、潰瘍性大腸炎及び全身性エリテマトーデスから選ばれる、請求項９に記載の化合物。
ジュウテリウム富化４−ヒドロキシ−５−メトキシ−Ｎ，１−ジメチル−２−オキソ−Ｎ−［（４−トリフルオロメチル）フェニル］−１，２−ジヒドロキノリン−３−カルボキサミド、又はその製薬学的に許容可能な塩である化合物の製造法であって、４−ヒドロキシ−５−メトキシ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−キノリン−３−カルボン酸のＣ１−Ｃ４アルキルエステルと、Ｎ−メチル基が少なくとも７０％のジュウテリウム富化率を有するジュウテリウム富化Ｎ−メチル−ｐ−トリフルオロメチルアニリンとを反応させ、場合によりジュウテリウム富化４−ヒドロキシ−５−メトキシ−Ｎ，１−ジメチル−２−オキソ−Ｎ−［（４−トリフルオロメチル）フェニル］−１，２−ジヒドロ−キノリン−３−カルボキサミドと、製薬学的に許容可能な有機又は無機塩基とを反応させることによる方法。
式（II）：

［式中、Ｒ^５は、Ｃ１−Ｃ４アルキル基である］の化合物と、式（III）：

［式中、
Ｒ^２、Ｒ^３及びＲ^４は、Ｈ及びＤから独立に選ばれ；そして
ＣＲ^２Ｒ^３Ｒ^４は、少なくとも７０％の総ジュウテリウム富化率を有する］の化合物とを、式（Ｉ）：

の化合物を得るために反応させ、そして場合により、式（Ｉ）の化合物と、適切な製薬学的に許容可能な有機又は無機塩基とを反応させる、請求項１２に記載の方法。
ジュウテリウム富化率が少なくとも９０％である、請求項１２又は請求項１３に記載の方法。
哺乳動物における悪性過剰増殖性障害又は自己免疫疾患の治療のための医薬組成物であって、有効量の請求項１に記載の化合物、又はその製薬学的に許容可能な塩を含む、前記組成物。