JP5978676B2 - 油脂中における糖脂質分解酵素の分散方法、油脂組成物および小麦粉製品の製造方法 - Google Patents
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Description
以下に記載する構成要件の説明は、本発明の実施態様の一例(代表例)であり、本発明はその要旨を超えない限り、これらの内容に特定はされない。
油脂分解酵素とは、トリグリセライド、リン脂質、糖脂質のいずれか一種以上を分解する活性を有する酵素のことである。本発明では、油脂分解酵素の中でも、糖脂質分解活性を有する酵素を用いることを特徴とし、本発明ではこれを糖脂質分解酵素という。
この方法に使用する装置等が存在しない場合は、同様の測定が可能なものを使用してもよい。また、測定条件は、使用する酵素に応じて適宜変更することができる。
測定方法II:オリーブ油(ナカライテスク株式会社)100mgとアラビアガム(和光純薬株式会社)50mg、水10mlを加え、ブレンダー(日本精機株式会社)で10,000r.p.m.で1分間乳化する。この溶液(500μl)、400mM MOPS(ナカライテスク株式会社製)pH6緩衝液(250μl)および100mM
カルシウムクロライド溶液(50μl)の混合液を37℃で5分間保温した後、酵素溶液(100μl)を加えて均一に分散させた後、37℃で10分間保温する。この反応液に1N塩酸(100μl)を加え酵素反応を停止させた後、4重量%Triton X−100(Sigma−Aldrich Japan株式会社製)水溶液(1ml)を加えて遊離脂肪酸を溶解させ、20μlを別の試験管に移す。この溶液をデタミナーNEFA755(協和メディックス株式会社製)で比色定量する。1分間に1μmolの遊離脂肪酸を生じさせる酵素量を1ユニットと定義する。
この方法に使用する装置等が存在しない場合は、同様の測定が可能なものを使用してもよい。また、測定条件は、使用する酵素に応じて適宜変更することができる。
本発明における水分散性被膜形成材とは、フィルム形成能があり、油脂類および低水分下では溶解せず、内容物を外的環境から物理的に遮断できる材料であり、また水が加えられることにより、容易に溶解し、内容物を放出する材料を意味する。
後掲の実施例に示されるように、水分散性被膜形成材の種類により、被覆酵素剤に加水したときの油脂分解活性に差があるため、目的に応じて水分散性被膜形成材を選択使用することが好ましい。
本発明の被覆酵素剤は、糖脂質分解酵素に水分散性被膜形成材をコーティングすることにより得られる。酵素への水分散性被膜形成材のコーティングに用いる装置としては、コーティングパン、流動層型造粒機等が挙げられるが、特に限定されない。コーティングパンとしては例えばハイコーター(フロイント産業社製)、ドリアコーター(富士産業社製)等が挙げられ、流動型造粒機としては例えば、フローコーター((株)大川原製作所社製)、CFグラニュレーター(フロイント産業社製)、マルチプレックスMP(Powrex社製)等が挙げられる。
本発明の被覆酵素剤は、小麦粉製品、米粉製品、豆製品等、油脂分解酵素により改良が期待できる製品の改良剤としての用途に用いることができるが、小麦粉中の油脂すなわちトリグリセライド、糖脂質、リン脂質を油脂分解酵素によって分解することで、特に小麦粉製品の改良が期待できるため、中でも本発明の被覆酵素剤を用いて小麦粉製品を製造することが好ましい。本発明において小麦粉製品とは、小麦粉を含有する製品(通常は食品)であり、特に小麦粉を主成分として含有する食品であって、具体的には、パン、洋菓子、和菓子、麺類等の小麦粉を主成分として含有する食品である。
本発明の被覆酵素剤はこれらの原料と共に直接添加することもできるが、原料中に予め混合させたものを用いて添加することもできる。原料中に予め混合する際は、油脂に混合しておくことが計量、分散性の面から好ましい。
PANAMORE Golden(登録商標、DSM社製)、リパーゼAY「アマノ」30G(天野エンザイム社製)について、トリグリセライド分解活性、グリセロ糖脂質分解活性を前述の測定方法I,IIによりそれぞれ測定し、トリグリセライド分解活性を100%としたときのグリセロ糖脂質分解活性の相対活性を算出した。結果を表1に示す。
尚、表1において、TGはトリグリセライド分解活性、DGはグリセロ糖脂質分解活性を示す。
転動流動型造粒機(マルチプレックスMP−01mini、Powrex社製)に、グリセロ糖脂質分解酵素(PANAMORE Golden(登録商標)、DSM社製)(粒子径50〜200μm程度の粉末状)250gを仕込み、80℃の温風を吹き込み流動させた。次に、水分散性被膜形成材として、5重量%のヒドロキシプロピルメチルセルロース(SE−06、信越化学社製、以下「HPMC」という場合がある)水溶液500gを、底部に取り付けたノズルより、8g/分の速度で上方に噴霧し、被覆酵素剤を得た。水分散性被膜形成材の使用量は、固形分として酵素の10重量%となるようにした。
具体的には、油脂としてショートニング(花王社製、ニューエコナVE(L))を50℃に加熱し、液状とした。これに、被覆酵素剤を油脂に対してトリグリセライド分解活性として9ユニット/gとなるように加えて油脂組成物とし、攪拌しながら氷冷し、20℃で保存した。保存前(氷冷後)と20℃での保存4日後の油脂組成物の油脂分解度をそれぞれ以下の通り測定した。
油脂組成物0.5〜10gを三角フラスコに秤量し、50℃温浴中で溶解させた。速やかにヘキサン/イソプロパノール(1:1)溶液100mlを加えて振り、完全に油脂組成物を溶解させた。ここに1重量%フェノールフタレイン溶液を1滴滴下し、0.1mol/lの水酸化カリウム標準液で滴定し、溶液の変色が30秒間続いたときの中和点を終点とし、酸価を求めた。
酸価は、酵素による、油脂の加水分解反応により生じる遊離脂肪酸の指標となる。従って、酸価(基準油脂分析法2.3.1−1996)を測定することで、酵素による油脂の分解度を評価することができる。すなわち、酸価が高い方が、油脂分解度が高いといえる。
尚、酸価の計算には下記の式を用いた。
酸価(mg−KOH/g)=5.611×A×F/B
A:0.1mol/l水酸化カリウム標準液使用量(ml)
F:0.1mol/l水酸化カリウム標準液のファクター
B:油脂組成物採取量(g)
結果を表2に示す。
活性回収率(%)=被覆酵素剤のトリグリセライド分解活性(U/g)÷(被覆前の酵素のトリグリセライド分解活性(U/g)÷1.1)×100
尚、被覆酵素剤のトリグリセライド分解活性は、前述の酵素の分解活性と同様にして測定した。
水分散性被膜形成材として、5重量%のゼラチン(♯150、新田ゼラチン社製)水溶液を用い、60℃のヒーター付スターラーで攪拌しながら実施例1と同様の条件にて、被覆酵素剤を得た。
この被覆酵素剤を用いて、実施例1と同様にして油脂組成物を製造し、同様に油脂分解度(酸価)を測定した。結果を表2に示す。また、活性回収率を算出した結果を表3に示す。
水分散性被膜形成材として、5重量%の大豆多糖類(ヘミロース、フロイント産業社製)水溶液を用いた以外は実施例1と同様の方法で被覆酵素剤を得た。
この被覆酵素剤を用いて、実施例1と同様にして油脂組成物を製造し、同様に油脂分解度(酸価)を測定した。結果を表2に示す。また、活性回収率を算出した結果を表3に示す。
被覆酵素剤を用いず、グリセロ糖脂質分解酵素(PANAMORE Golden(登録商標)、DSM社製)をそのまま用いた以外は、実施例1と同様にして油脂組成物を製造し、同様に油脂分解度(酸価)を測定した。結果を表2に示す。
油脂としてショートニング(花王社製、ニューエコナVE(M))を50℃に加熱し、液状とした。これに、実施例1と同様にして製造した被覆酵素剤を油脂に対してトリグリセライド分解活性として9ユニット/gとなるように加えて油脂組成物とした。この油脂組成物に対し、0.5重量%の水を加え、攪拌しながら氷冷し、20℃で保存した。
保存前(氷冷後)と20℃での保存4日後の油脂組成物の油脂分解度(酸価)を実施例1と同様にして測定した。結果を表4に示す。
実施例1と同様にして製造した被覆酵素剤に代えて、実施例2と同様にして製造した被覆酵素剤を用いた以外は、実施例4と同様にして油脂組成物を製造し、同様に油脂分解度(酸価)を測定した。結果を表4に示す。
実施例1と同様にして製造した被覆酵素剤に代えて、実施例3と同様にして製造した被覆酵素剤を用いた以外は、実施例4と同様にして油脂組成物を製造し、同様に油脂分解度(酸価)を測定した。結果を表4に示す。
被覆酵素剤を用いず、グリセロ糖脂質分解酵素(PANAMORE Golden(登録商標)、DSM社製)をそのまま用いた以外は、実施例4と同様にして油脂組成物を製造し、同様に油脂分解度(酸価)を測定した。結果を表4に示す。
実施例1〜3と同様にして油脂組成物を製造し、それぞれの油脂組成物に、油脂に対して10重量%の水を添加し、40℃に加温しながら攪拌して被覆酵素剤の被膜を溶解させた。被覆酵素剤の被膜が完全に溶解したことを確認するため、この被膜溶解後の油脂組成物を新たなショートニングに0.5重量%となるように混合し、20℃で1日保存した後、実施例1と同様にして油脂分解度(酸価)を測定した。
また、比較例1と同様にして油脂組成物を製造し、これをショートニングに上記と同様の割合で混合し、20℃に1日保存した後、実施例1と同様にして油脂分解度(酸価)を測定した。
被覆酵素剤の被膜が完全に溶解していれば、水分散性被膜形成材をコーティングしていない酵素を添加した比較例1の油脂組成物の場合と同等の酸価の上昇が認められることとなり、相対値は100%に近づく。
表5に、水分散性被膜形成材をコーティングしていない酵素を添加した比較例1の油脂組成物をショートニングに混合した際の酸価の上昇速度に対する、被膜溶解酵素を含む油脂組成物を混合したショートニングの酸価の上昇速度の割合を百分率で示す。
Claims (4)
- 油脂中に糖脂質分解酵素を分散させる方法であって、
該糖脂質分解酵素を水分散性被膜形成材としてヒドロキシプロピルメチルセルロースまたはゼラチンでコーティングした被覆酵素剤として
油脂中に分散させることを特徴とする、油脂中における糖脂質分解酵素の分散方法。 - 糖脂質分解酵素が、グリセロ糖脂質分解活性を有する酵素である、請求項1に記載の油脂中における糖脂質分解酵素の分散方法。
- 油脂中に糖脂質分解酵素を分散させた油脂組成物であって、
該糖脂質分解酵素が、水分散性被膜形成材としてヒドロキシプロピルメチルセルロースまたはゼラチンでコーティングした被覆酵素剤である、油脂組成物。 - 糖脂質分解酵素を水分散性被膜形成材としてヒドロキシプロピルメチルセルロースまたはゼラチンでコーティングした被覆酵素剤を分散させた油脂を用いることを特徴とする、小麦粉製品の製造方法。
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