JP5577558B2 - ドック・ロック(dnl)技術によるpeg化 - Google Patents
ドック・ロック(dnl)技術によるpeg化 Download PDFInfo
- Publication number
- JP5577558B2 JP5577558B2 JP2010531272A JP2010531272A JP5577558B2 JP 5577558 B2 JP5577558 B2 JP 5577558B2 JP 2010531272 A JP2010531272 A JP 2010531272A JP 2010531272 A JP2010531272 A JP 2010531272A JP 5577558 B2 JP5577558 B2 JP 5577558B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- moiety
- ddd
- pegylated
- therapeutic agent
- complex
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
- A61K47/6835—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/18—Growth factors; Growth regulators
- A61K38/1816—Erythropoietin [EPO]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/19—Cytokines; Lymphokines; Interferons
- A61K38/193—Colony stimulating factors [CSF]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/19—Cytokines; Lymphokines; Interferons
- A61K38/21—Interferons [IFN]
- A61K38/212—IFN-alpha
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/56—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule
- A61K47/59—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes
- A61K47/60—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes the organic macromolecular compound being a polyoxyalkylene oligomer, polymer or dendrimer, e.g. PEG, PPG, PEO or polyglycerol
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/62—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being a protein, peptide or polyamino acid
- A61K47/65—Peptidic linkers, binders or spacers, e.g. peptidic enzyme-labile linkers
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
- A61K47/6835—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site
- A61K47/6851—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site the antibody targeting a determinant of a tumour cell
- A61K47/6853—Carcino-embryonic antigens
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K51/00—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo
- A61K51/02—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo characterised by the carrier, i.e. characterised by the agent or material covalently linked or complexing the radioactive nucleus
- A61K51/04—Organic compounds
- A61K51/08—Peptides, e.g. proteins, carriers being peptides, polyamino acids, proteins
- A61K51/10—Antibodies or immunoglobulins; Fragments thereof, the carrier being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. a camelised human single domain antibody or the Fc fragment of an antibody
- A61K51/1045—Antibodies or immunoglobulins; Fragments thereof, the carrier being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. a camelised human single domain antibody or the Fc fragment of an antibody against animal or human tumor cells or tumor cell determinants
- A61K51/1048—Antibodies or immunoglobulins; Fragments thereof, the carrier being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. a camelised human single domain antibody or the Fc fragment of an antibody against animal or human tumor cells or tumor cell determinants the tumor cell determinant being a carcino embryonic antigen
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
- A61P11/06—Antiasthmatics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
- A61P13/12—Drugs for disorders of the urinary system of the kidneys
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
- A61P17/02—Drugs for dermatological disorders for treating wounds, ulcers, burns, scars, keloids, or the like
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
- A61P17/06—Antipsoriatics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
- A61P21/02—Muscle relaxants, e.g. for tetanus or cramps
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
- A61P21/04—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system for myasthenia gravis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
- A61P27/02—Ophthalmic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
- A61P27/02—Ophthalmic agents
- A61P27/06—Antiglaucoma agents or miotics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
- A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
- A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
- A61P7/02—Antithrombotic agents; Anticoagulants; Platelet aggregation inhibitors
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
- A61P7/04—Antihaemorrhagics; Procoagulants; Haemostatic agents; Antifibrinolytic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
- A61P7/06—Antianaemics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
- A61P7/10—Antioedematous agents; Diuretics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
- A61P9/06—Antiarrhythmics
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B82—NANOTECHNOLOGY
- B82Y—SPECIFIC USES OR APPLICATIONS OF NANOSTRUCTURES; MEASUREMENT OR ANALYSIS OF NANOSTRUCTURES; MANUFACTURE OR TREATMENT OF NANOSTRUCTURES
- B82Y10/00—Nanotechnology for information processing, storage or transmission, e.g. quantum computing or single electron logic
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B82—NANOTECHNOLOGY
- B82Y—SPECIFIC USES OR APPLICATIONS OF NANOSTRUCTURES; MEASUREMENT OR ANALYSIS OF NANOSTRUCTURES; MANUFACTURE OR TREATMENT OF NANOSTRUCTURES
- B82Y5/00—Nanobiotechnology or nanomedicine, e.g. protein engineering or drug delivery
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2319/00—Fusion polypeptide
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2319/00—Fusion polypeptide
- C07K2319/70—Fusion polypeptide containing domain for protein-protein interaction
Description
Bioconjugate Chem. 2005;16:504)などの位置異性体の混合物からなるモノPEG化コンジュゲートだけでなく、2個以上のPEG鎖を含むアダクトも生じた。N末端残基のαアミノ基に単一PEGが部位特異的に付着したものが、PEG-アルデヒド(PEG-ALD)をIFN-β1b(Basu et al., Bioconjugate Chem. 2006;17:618)またはIFN-β1a(Pepinsky et al., J.
Pharmacol. Exp. Ther. 2001;297:1059)と低いpHで反応させたときの主産物であることが報告された。同様の戦略は、G-CSF(Kinstler et al., Pharm. Res. 1996;13:996)またはI型可溶性腫瘍壊死因子受容体(Kerwin et al., Protein Sci. 2002;11:1825)のN末端に連結したPEGを調製するために適用された。つい最近、組換えインターフェロンα2aのN末端のPEG化のための固相法が報告された(Lee et al., Bioconjug. Chem. Oct. 18, 2007, epub)。
Chem. 2005;16:200)、GM-CSF (Doherty et al., Bioconjugate Chem. 2005;16: 1291)、scFv (Yang et al.,
Protein Eng. 2003;16:761)、およびミニ抗体(Kubetzko et al., J. Biol. Chem; 2006;201:35186)を含むいくつかの組換えコンストラクトについて達成されている。酵素の治療効力を向上させるための一般的なアプローチは、メチオニナーゼ(Yang et al., Cancer Res. 2004;64:6673)、L-メチオニンγ-リアーゼ(Takakura et al.,
Cancer Res. 2006:66:2807)、アルギニンデアミナーゼ(Wang et al., Bioconjugate Chem. 2006;17: 1447)、アデノシンデアミナーゼ(Davis et al., Clin. Exp. Immunol. 1981;46:649)、L-アスパラギナーゼ(Bendich et al., Clin.
Exp. Immunol. 1982;48:273)、および肝カタラーゼ(Abuchowski et al., J. Biol. Chem. 1977;252:3582)について知られているように、複数の小さいサイズのPEGを含むコンジュゲートを調製することである。
Bioconjugate Chem. 2003;14:464)、ビソマント(Mosharraf et al., Int. J. Pharm. 2007;336:215)、インテグリンα4βlの阻害剤などの小分子(Pepinsky et al., J. Pharmacol. Exp. Ther. 2005;312:742)、リンパ腫標的化ペプチド(DeNardo et al., Clin. Cancer. Res. 2003;9(Suppl.):3854s)、抗VEGFアプタマー(Bunka and Stockley,
Nat. Rev. Microbiol. 2006;4:588)、およびオリゴデオキシヌクレオチド(Fisher et al., Drug Metab. Dispos. 2004;32:983)のPEG化も記載されている。しかしながら、候補薬剤の所定の位置に部位特異的に連結した単一PEGから構成されかつ未修飾対応物の生物活性を保持するモノPEG化コンジュゲートだけを産生する一般的なPEG化法に対する必要性が存在する。
DNL法は、cAMP依存性タンパク質キナーゼ(PKA)の調節(R)サブユニットとAキナーゼアンカリングタンパク質(AKAP)のアンカリングドメイン(AD)との間で生じる特異的なタンパク質/タンパク質相互作用を利用している(Baillie et al., FEBS Letters. 2005; 579: 3264. Wong and
Scott, Nat. Rev. MoI. Cell Biol. 2004; 5: 959)。PKAは、セカンドメッセンジャーcAMPのRサブユニットへの結合によって引き起こされる最もよく研究されたシグナル伝達経路の1つで中心的な役割を果たしているが、これは 1968年にウサギの骨格筋から最初に単離された(Walsh et al., J. Biol. Chem. 1968;243:3763)。ホロ酵素の構造は、Rサブユニットによって不活性形に保たれた2つの触媒サブユニットからなる(Taylor, J. Biol. Chem. 1989;264:8443)。PKAのアイソザイムは2種類のRサブユニット(RIおよびRII)を有することが分かっており、各々の種類はαアイソフォームおよびβアイソフォームを有する(Scott, Pharmacol. Ther. 1991 ;50:123)。Rサブユニットは、安定な二量体としてのみ単離されており、二量体化ドメインは、最初の44個のアミノ末端残基からなることが示されている(Newlon et al., Nat. Struct. Biol. 1999;6:222)。cAMPのRサブユニットへの結合は、広範囲のセリン/トレオニンキナーゼ活性のために活性触媒サブユニットの放出を引き起こし、この活性は、AKAPとのドッキングを介したPKAのコンパートメント化を通じて選択された基質へと向かう(Scott et al., J. Biol. Chem. 1990;265;21561)。
:6723)、形質膜、アクチン細胞骨格、核、ミトコンドリア、および小胞体を含む、様々な細胞内部位に局在する50個を超えるAKAPが、酵母からヒトに及ぶ種で多様な構造を有することが同定されている(Wong and Scott, Nat. Rev. Mol. Cell Biol. 2004;5:959)。PKAに対するAKAPのADは、14〜18残基の両親媒性ヘリックスである(Carr et al., J. Biol. Chem. 1991;266:14188)。ADのアミノ酸配列は、個々のAKAP間で全く異なっており、RII二量体について報告された結合親和性の範囲は2〜90nMである(Alto et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2003;100:4445)。興味深いことに、AKAPは、二量体のRサブユニットにしか結合しない。ヒトRIIαの場合、ADは、23個のアミノ末端残基により形成される疎水性表面に結合する(Colledge and Scott, Trends Cell Biol. 1999; 6:216)。したがって、ヒトRIIαの二量体化ドメインとAKAP結合ドメインは両方とも、同じN末端の44個のアミノ酸配列中にあり(Newlon et al., Nat. Struct. Biol. 1999;6:222; Newlon et
al., EMBO J. 2001 ;20: 1651)、この配列を本明細書ではDDDと呼ぶ。
本発明者らは、ヒトRIIαのDDDおよびある種のアミノ酸配列のADを、任意の2つの実体(以後、AおよびBと表す)をドッキングさせて非共有結合複合体にするためのリンカーモジュールの優れたペアとして利用するためのプラットフォーム技術を開発した。この複合体は、図1に示すように、DDDとADの両方の戦略的位置にシステイン残基を導入することによって、安定に連結された構造へとさらにロックして、ジスルフィド結合を形成しやすくすることができる。「ドック・ロック」アプローチの一般的方法論は以下の通りである。DDD配列をAの前駆体に連結することによって実体Aを構築し、第一構成要素(以後、aと表す)を生じさせる。DDD配列は二量体を自発的に形成するので、Aはa2から構成される。AD配列をBの前駆体に連結することによって実体Bを構築し、第二構成要素(以後、bと表す)を生じさせる。a2に含まれるDDDの二量体モチーフは、bに含まれるAD配列に結合するためのドッキング部位を作り出し、それによってa2とbの素早い会合を促進して、a2bから構成される2成分の三量体複合体を形成させる。この結合事象は、ジスルフィド架橋を介して2つの実体を共有結合的に固定するための次の反応で不可逆的になる。この反応は、有効局所濃度の原理に基づいて非常に効率的に生じる。なぜなら、最初の結合相互作用がDDDとADの両方の上に配置された反応性チオール基を近接させて(Chimura et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2001 ;98:8480)、部位特異的にライゲートするはずであるからである。
好ましい方法において、PEG化される標的をDDD配列に連結し、DDDモジュールを作製する。望ましい分子サイズのPEG試薬を、関連するAD配列で誘導体化し、得られたPEG-ADモジュールをDDDモジュールと組み合わせて、PEG化コンジュゲートを産生する。このPEG化コンジュゲートは、DDDとADの間に形成されたジスルフィド結合を介して2コピーのエフェクター部分と部位特異的につながれた単一PEGからなる。PEG試薬は、一方の端でメトキシ基によりキャッピングされてもよく(m-PEG)、線状または分岐状であることができ、以下の官能基、すなわち、プロピオンアルデヒド、ブチルアルデヒド、オルト-ピリジルチオエステル(OPTE)、N-ヒドロキシスクシンイミド(NHS)、チアゾリジン-2-チオン、炭酸スクシンイミジル(SC)、マレイミド、またはオルト-ピリジルジスルフィド(OPPS)のうちの1つを含んでもよい。PEG化用の関心となり得るエフェクター部分の中には、酵素、サイトカイン、ケモカイン、成長因子、ペプチド、アプタマー、ヘモグロビン、抗体、および抗体断片が含まれる。本方法は限定的ではなく、開示された方法および組成物を用いて種々様々な薬剤がPEG化されてもよい。様々なサイズの、様々な反応性部分で誘導体化されたPEGを、下記の実施例でより詳細に議論されるような市販源から入手してもよい。
ある好ましい実施形態において、PEG化されるエフェクター部分は、免疫モジュレーターである。免疫モジュレーターは、存在するときに、体の免疫系を変化させるか、抑制するか、または刺激する薬剤である。有用な免疫モジュレーターとしては、サイトカイン、幹細胞成長因子、リンホトキシン、造血因子、コロニー刺激因子(CSF)、インターフェロン(IFN)、エリスロポエチン、トロンボポエチン、およびそれらの組み合わせが挙げられ得る。特に有用なのは、リンホトキシン(例えば、腫瘍壊死因子(TNF))、造血因子(例えば、インターロイキン(IL))、コロニー刺激因子(例えば、顆粒球コロニー刺激因子(G-CSF)または顆粒球マクロファージコロニー刺激因子(GM-CSF))、インターフェロン(例えば、インターフェロン-α、インターフェロン-β、またはインターフェロン-γ)、および幹細胞成長因子(例えば、「S1因子」と表されるもの)である。
その他の実施形態において、抗体または抗体の抗原結合断片をPEG化してもよい。抗原結合抗体断片(例えば、F(ab')2、F(ab)2、Fab'、Fab、Fv、scFvなど)は、当技術分野において周知であり、任意のそのような公知の断片を使用してもよい。本明細書で使用するとき、抗原結合抗体断片とは、インタクト抗体または親抗体によって認識されるのと同じ抗原と結合する抗体の任意の断片を指す。関心となるほとんど全ての抗体または断片のADコンジュゲートおよび/またはDDDコンジュゲートを調製する技術が公知である(例えば、米国特許出願第11/633,729号)。
IMMUNOLOGY, 第1巻, 2.5.1-2.6.7頁 (John Wiley & Sons 1991)を参照されたい。簡潔に述べると、モノクローナル抗体は、マウスに抗原を含む組成物を注射し、脾臓を摘出してBリンパ球を採取し、そのBリンパ球をミエローマ細胞と融合させてハイブリドーマを産生し、そのハイブリドーマをクローンニングし、抗原に対する抗体を産生する陽性クローンを選択し、抗原に対する抗体を産生するクローンを培養し、このハイブリドーマ培養液から抗体を単離することによって得ることができる。
BIOLOGY, 第10巻, 79-104頁 (The Humana Press, Inc. 1992))を参照されたい。
キメラ抗体は、ヒト抗体の可変領域が、例えば、マウス抗体の相補性決定領域(CDR)を含む、マウス抗体の可変領域に置換されている組換えタンパク質である。キメラ抗体は、対象に投与されたときに減少した免疫原性および増大した安定性を示す。マウス免疫グロブリン可変ドメインをクローニングするための一般的な技術は、例えば、Orlandi et al., Proc. Nat'l Acad. ScL USA 86: 3833 (1989)に開示されている。キメラ抗体を構築するための技術は当業者に周知である。一例として、Leungら(Hybridoma 13:469 (1994))は、マウスLL2、抗CD22モノクローナル抗体のVκドメインおよびVHドメインをコードするDNA配列をそれぞれのヒトκ定常領域ドメインおよびIgG1定常領域ドメインと組み合わせることによって、LL2キメラを産生した。
ヒト化MAbを産生するための技術は当技術分野において周知である(例えば、Jones et al., Nature 321: 522 (1986)、Riechmann et al.,
Nature 332: 323 (1988)、Verhoeyen et al., Science 239: 1534 (1988)、Carter et al., Proc.
Nat'l Acad. Sci. USA 89: 4285 (1992)、Sandhu, Crit. Rev. Biotech. 12: 437 (1992)、およびSinger et al., J.
Immun. 150: 2844 (1993)参照)。キメラ抗体またはマウスモノクローナル抗体は、マウス免疫グロブリンの重可変鎖および軽可変鎖由来のマウスCDRをヒト抗体の対応する可変ドメインに移すことによってヒト化し得る。キメラモノクローナル抗体中のマウスフレームワーク領域(FR)もヒトFR配列と置換される。マウスCDRをヒトFRに単に移すだけでは、しばしば抗体親和性の低下または損失さえ起こるため、マウス抗体のもとの親和性を回復するためにさらなる修飾が必要になる場合がある。これは、そのエピトープに対して良好な結合親和性を保有する抗体を得るために、FR領域の1つまたは複数のあるヒト残基をマウスの相当部分と置換することにより達成することができる。例えば、Tempest et al., Biotechnology 9:266 (1991)およびVerhoeyen et al.,
Science 239: 1534 (1988)を参照されたい。一般に、マウスの相当部分と異なりかつ1つもしくは複数のCDRアミノ酸残基の近くに位置するかまたは該アミノ酸残基と接しているヒトFRアミノ酸残基が置換の候補となるであろう。
コンビナトリアルアプローチまたはヒト免疫グロブリン座を形質転換したトランスジェニック動物のいずれかを用いて完全ヒト化抗体を産生するための方法は、当技術分野において公知である(例えば、Mancini et al., 2004, New Microbiol. 27:315-28; Conrad
and Scheller, 2005, Comb. Chem. High Throughput Screen. 8: 1 17-26; Brekke and
Loset, 2003, Curr. Opin. Phamacol 3:544-50)。完全ヒト抗体は、遺伝子または染色体トランスフェクション法、およびファージディスプレイ技術によって構築することもでき、これらの方法は全て当技術分野において公知である。例えば、McCafferty et al., Nature 348:552-553 (1990)を参照されたい。そのような完全ヒト抗体は、キメラ抗体またはヒト化抗体よりもずっと少ない副作用を示すことおよび本質的に内在性のヒト抗体としてインビボで機能することが期待される。ある実施形態において、請求された方法および手順は、そのような技術によって産生されたヒト抗体を利用してもよい。
Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY 9.1〜9.22頁)に従って行なわれた。最終的なFab断片が制限エンドヌクレアーゼで消化され、バクテリオファージゲノムに挿入されて、ファージディスプレイライブラリーが作製された。そのようなライブラリーは、当技術分野において公知であるような、標準的なファージディスプレイ法によってスクリーニングし得る。
Biology 3:5564-571 (1993)を参照されたい。また、ヒト抗体は、インビトロで活性化されたB細胞によって生成されてもよい。例えば、それらの全体が参照により本明細書に組み入れられる米国特許第5,567,610号および第5,229,275号を参照されたい。当業者は、これらの技術が例示的なものであり、ヒトの抗体または抗体断片を作製およびスクリーニングするための任意の公知の方法を利用し得るということを理解するであろう。
5(55:856 (1994)、およびTaylor et al., Int. Immun. 6:579 (1994)によって開示されている。そのような系の非限定的な例は、Abgenix (Fremont, CA)からのXenoMouse(登録商標)(例えば、Green et al., 1999, J Immunol. Methods 231 : 11-23)である。XenoMouse(登録商標)および同様の動物において、マウス抗体遺伝子は不活化され、機能的ヒト抗体遺伝子に置換されているが、残りのマウス免疫系はインタクトのままである。
特異的エピトープを認識する抗体断片を公知の技術によって作製することができる。抗体断片とは、抗体の抗原結合部分(例えば、F(ab')2、Fab'、F(ab)2、Fab、Fv、sFvなど)である。F(ab')2断片は、抗体分子のペプシン消化によって産生することができ、Fab'断片は、F(ab')2断片のジスルフィド架橋を還元することによって作製することができる。あるいは、Fab'発現ライブラリーを構築して(Huse et al., 1989, Science, 246: 1274-1281)、所望の特異性を有するモノクローナルFab'断片の迅速かつ簡単な同定を可能にすることができる。F(ab)2断片は、抗体のパパイン消化によって作製し得、Fab断片は、ジスルフィドの還元によって取得し得る。
73:119 (1959)、Edelman et al., METHODS IN ENZYMOLOGY, 第1巻, 422頁(Academic Press 1967)、およびColigan(2.8.1-2.8.10および2.10-2.10.4頁)も参照されたい。
有用な抗体は、種々様々な公知の源から市販で入手し得る。例えば、様々な抗体分泌ハイブリドーマ株が、American Type Culture Collection(ATCC, Manassas, VA)から入手可能である。腫瘍関連抗原を含むが、これらに限定されない、様々な疾患標的に対する多くの抗体がATCCに寄託されており、かつ/または該抗体は可変領域配列を公表しており、請求された方法および組成物で使用することができる。例えば、米国特許第7,312,318号;第7,282,567号;第7,151,164号;第7,074,403号;第7,060,802号;第7,056,509号;第7,049,060号;第7,045,132号;第7,041,803号;第7,041,802号;第7,041,293号;第7,038,018号;第7,037,498号;第7,012,133号;第7,001,598号;第6,998,468号;第6,994,976号;第6,994,852号;第6,989,241号;第6,974,863号;第6,965,018号;第6,964,854号;第6,962,981号;第6,962,813号;第6,956,107号;第6,951,924号;第6,949,244号;第6,946,129号;第6,943,020号;第6,939,547号;第6,921,645号;第6,921,645号;第6,921,533号;第6,919,433号;第6,919,078号;第6,916,475号;第6,905,681号;第6,899,879号;第6,893,625号;第6,887,468号;第6,887,466号;第6,884,594号;第6,881,405号;第6,878,812号;第6,875,580号;第6,872,568号;第6,867,006号;第6,864,062号;第6,861,511号;第6,861,227号;第6,861,226号;第6,838,282号;第6,835,549号;第6,835,370号;第6,824,780号;第6,824,778号;第6,812,206号;第6,793,924号;第6,783,758号;第6,770,450号;第6,767,711号;第6,764,688号;第6,764,681号;第6,764,679号;第6,743,898号;第6,733,981号;第6,730,307号;第6,720,15号;第6,716,966号;第6,709,653号;第6,693,176号;第6,692,908号;第6,689,607号;第6,689,362号;第6,689,355号;第6,682,737号;第6,682,736号;第6,682,734号;第6,673,344号;第6,653,104号;第6,652,852号;第6,635,482号;第6,630,144号;第6,610,833号;第6,610,294号;第6,605,441号;第6,605,279号;第6,596,852号;第6,592,868号;第6,576,745号;第6,572;856号;第6,566,076号;第6,562,618号;第6,545,130号;第6,544,749号;第6,534,058号;第6,528,625号;第6,528,269号;第6,521,227号;第6,518,404号;第6,511,665号;第6,491,915号;第6,488,930号;第6,482,598号;第6,482,408号;第6,479,247号;第6,468,531号;第6,468,529号;第6,465,173号;第6,461,823号;第6,458,356号;第6,455,044号;第6,455,040号;第6,451,310号;第6,444,206号;第6,441,143号;第6,432,404号;第6,432,402号;第6,419,928号;第6,413,726号;第6,406,694号;第6,403,770号;第6,403,091号;第6,395,276号;第6,395,274号;第6,387,350号;第6,383,759号;第6,383,484号;第6,376,654号;第6,372,215号;第6,359,126号;第6,355,481号;第6,355,444号;第6,355,245号;第6,355,244号;第6,346,246号;第6,344,198号;第6,340,571号;第6,340,459号;第6,331,175号;第6,306,393号;第6,254,868号;第6,187,287号;第6,183,744号;第6,129,914号;第6,120,767号;第6,096,289号;第6,077,499号;第5,922,302号;第5,874,540号;第5,814,440号;第5,798,229号;第5,789,554号;第5,776,456号;第5,736,119号;第5,716,595号;第5,677,136号;第5,587,459号;第5,443,953号;第5,525,338を参照されたい。これらは、例示的であるに過ぎず、種々様々なその他の抗体およびそれらのハイブリドーマが当技術分野において公知である。当業者は、関心となる選択された疾患関連標的に対する抗体についてATCC、NCBI、および/またはUSPTOのデータベースを簡単に探索することにより、ほとんど全ての疾患関連抗原に対する抗体配列または抗体分泌ハイブリドーマを入手し得るということを理解するであろう。当技術分野において周知の標準的な技術を用いて、クローニングした抗体の抗原結合ドメインを増幅し、切り出し、発現ベクターにライゲートし、適合宿主細胞にトランスフェクトし、タンパク質産生に使用してもよい。
代わりの実施形態において、細胞毒性剤、抗血管形成剤、アポトーシス促進剤、抗生物質、ホルモン、ホルモンアンタゴニスト、ケモカイン、薬物、プロドラッグ、毒素、酵素、またはその他の薬剤などの治療剤を本明細書に記載されるようにPEG化してもよい。例えば、SN38(Zhao et al., Bioconjug Chem 2008, 10:849-59)、ウリカーゼ(Biggers &
Scheinfeld, Curr Opin Investig Drugs 2008, 9:422-29)、ドセタキセル(Liu et al., 2008, J
Pharm Sci 97:3274-90)、およびカンプトテシン(Haverstick et al., 2007, Bioconjug Chem 18:21 15-21)について、PEG化型の治療剤が開示されている。有用な薬物は、抗有糸分裂剤、抗キナーゼ剤、アルキル化剤、代謝拮抗剤、抗生剤、アルカロイド剤、抗血管形成剤、アポトーシス促進剤、およびそれらの組み合わせからなる群より選択される薬学的特性を保有していてもよい。
小分子をタンパク質またはペプチド(例えば、ADペプチドもしくはDDDペプチド)にコンジュゲートするための様々な技術および組成物が公知であり、使用され得る。治療剤を、例えば、還元されたSH基および/または炭水化物側鎖に付着させることができる。治療剤を、ジスルフィド結合の形成を通じてシステイン残基を含む還元されたタンパク質またはペプチドに付着させることができる。あるいは、そのような薬剤を、ヘテロ二官能性クロスリンカー(例えば、N-スクシニル3-(2-ピリジルジチオ)プロピオネート(SPDP))を用いて付着させることができる。Yu et al., Int. J. Cancer 56: 244 (1994)。そのようなコンジュゲーションのための一般的な技術は当技術分野において周知である。例えば、Wong, CHEMISTRY OF PROTEIN CONJUGATION AND CROSS-LINKING
(CRC Press 1991);Upeslacis et al., 「Modification of Antibodies by Chemical Methods」(MONOCLONAL ANTIBODIES:
PRINCIPLES AND APPLICATIONS, Birch et al., (編), 187-230頁 (Wiley-Liss, Inc. 1995));Price, 「Production and Characterization of Synthetic
Peptide-Derived Antibodies」(MONOCLONAL ANTIBODIES: PRODUCTION, ENGINEERING AND
CLINICAL APPLICATION, Ritter et al., (編), 60-84頁 (Cambridge University Press 1995))を参照されたい。
本明細書に記載された組成物は、様々な疾患状態の治療に特に有用である。好ましい実施形態において、疾患は、自己免疫疾患または癌(例えば、造血系癌もしくは固形腫瘍)であってもよい。開示された組成物および方法を用いて治療し得る例示的で非限定的な疾患としては、遅発性型のB細胞リンパ腫、侵攻型のB細胞リンパ腫、非ホジキンリンパ腫、多発性骨髄腫、慢性リンパ性白血病、急性リンパ性白血病、急性骨髄性白血病、慢性リンパ球性白血病、慢性骨髄性白血病、ホジキンリンパ腫、ヴァルデンストレームマクログロブリン血症、ならびにGVHD、クリオグロブリン血症、溶血性貧血、同種感作、および臓器移植拒絶反応が挙げられる。免疫介在性血小板減少症(例えば、急性特発性血小板減少性紫斑病および慢性特発性血小板減少性紫斑病)、皮膚筋炎、シェーグレン症候群、多発性硬化症、シドナム舞踏病、重症筋無力症、全身性エリテマトーデス、ループス腎炎、リウマチ熱、関節リウマチ、多腺症候群、水疱性類天疱瘡、若年型糖尿病、ヘノッホ・シェーンライン紫斑病、連鎖球菌後腎炎、結節性紅斑、高安動脈炎、アジソン病、サルコイドーシス、潰瘍性大腸炎、多形性紅斑、IgA腎症、結節性多発性動脈炎、強直性脊椎炎、グッドパスチャー症候群、閉塞性血栓血管炎、原発性胆汁性肝硬変、橋本甲状腺炎、甲状腺中毒症、強皮症、慢性活動性肝炎、多発性筋炎/皮膚筋炎、多発性軟骨炎、尋常性天疱瘡、ウェゲナー肉芽腫症、膜性腎症、筋萎縮性側索硬化症、脊髄癆、巨細胞動脈炎/多発性筋痛、悪性貧血、急速進行性糸球体腎炎、ならびに線維化性肺胞炎などのクラスIII自己免疫疾患も挙げられる。
様々な実施形態は、患者の罹患組織を治療または診断するのに好適な構成要素を含むキットに関係し得る。例示的なキットは、本明細書に記載されたような少なくともPEG化された治療剤を含んでもよい。投与用の構成要素を含む組成物が、経口送達のような、消化管経由の送達用に処方されていない場合、何らかのその他の経路を通してキット構成要素を送達することができる装置が含まれてもよい。非経口送達などの用途のための装置の1つの種類は、対象の体内に組成物を注射するのに使用される注射器である。吸入装置も使用してよい。ある実施形態において、PEG化された治療剤は、滅菌された液体製剤または凍結乾燥調製物を含む前充填注射器または前充填自動注射ペンの形態で提供されてもよい。
以下の実施例は、限定されるわけではないが、本発明の特許請求の範囲を例証するために提供される。
IMP350の合成
CGQIEYLAKQIVDNAIQQAGC(SS-tbu)-NH2(配列番号:1)MH+2354
AD2の配列を組み入れたIMP350を、Protein TechnologiesのPS3ペプチド合成機でFmoc法を用いて、Sieber Amide樹脂を用いて0.1mmolスケールで作製した。C末端から順に、使用された保護アミノ酸は、Fmoc-Cys(t-Buthio)-OH、Fmoc-Gly-OH、Fmoc-Ala-OH、Fmoc-Gln(Trt)-OH、Fmoc-Gln(Trt)-OH、Fmoc-Ile-OH、Fmoc-Ala-OH、Fmoc-Asn(Trt)-OH、Fmoc-Asp(OBut)-OH、Fmoc-Val-OH、Fmoc-Ile-OH、Fmoc-Gln(Trt)-OH、Fmoc-Lys(Boc)-OH、Fmoc-Ala-OH、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-Tyr(But)-OH、Fmoc-Glu(OBut)-OH、Fmoc-Ile-OH、Fmoc-Gln(Trt)-OH、Fmoc-Gly-OH、およびFmoc-Cys(Trt)-OHであった。ペプチドを樹脂から切断し、逆相(RP)-HPLCで精製した。
IMP350(0.0104g)を、7mLの1M Tris緩衝液(pH7.81)中で、0.1022 gのmPEG-OPTE(20kDa, Nektar Therapeutics)と混合した。その後、アセトニトリル(1mL)を添加して、懸濁された材料をいくぶん溶解した。この反応物を室温で3時間撹拌し、その後、0.0549gのシステインと共に0.0527gのTCEPを添加した。この反応混合物を1.5時間撹拌し、その後、水中の20%エタノールで平衡化したPD-10脱塩カラムで精製した。この試料を溶出し、凍結し、凍結乾燥して、0.0924gの粗PEG20-IMP350(MALDIでMH+ 23508)を得た。
CGQIEYLAKQIVDNAIQQAGC(SS-tbu)G-EDANS(配列番号:1)MH+ 2660
AD2の配列を組み入れたIMP36Oを、Protein TechnologiesのPS3ペプチド合成機でFmoc法を用いて、Fmoc-Gly-EDANS樹脂を用いて0.1mmolスケールで作製した。0.23gのFmoc-Gly-OH、0.29gのHATU、26μLのDIEA、7.5mLのDMF、および0.57gのEDANS樹脂(Nova Biochem)を用いて、Fmoc-Gly-OHを樹脂に手作業で添加した。試薬を混合し、樹脂に添加した。この反応物を室温で2.5時間混合し、樹脂をDMFおよびIPAで洗浄して、余分な試薬を除去した。C末端から順に、使用された保護アミノ酸は、Fmoc-Cys(t-Buthio)-OH、Fmoc-Gly-OH、Fmoc-Ala-OH、Fmoc-Gln(Trt)-OH、Fmoc-Gln(Trt)-OH、Fmoc-Ile-OH、Fmoc-Ala-OH、Fmoc-Asn(Trt)-OH、Fmoc-Asp(OBut)-OH、Fmoc-Val-OH、Fmoc-Ile-OH、Fmoc-Gln(Trt)-OH、Fmoc-Lys(Boc)-OH、Fmoc-Ala-OH、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-Tyr(But)-OH、Fmoc-Glu(OBut)-OH、Fmoc-Ile-OH、Fmoc-Gln(Trt)-OH、Fmoc-Gly-OH、およびFmoc-Cys(Trt)-OHであった。ペプチドを樹脂から切断し、RP-HPLCで精製した。
IMP362の模式図を図2に示す。IMP362の合成のために、IMP360(0.0115g)を、7mLの1M tris緩衝液(pH7.81)中で0.1272gのmPEG-OPTE(20kDa, Nektar Therapeutics)と混合した。その後、アセトニトリル(1mL)を添加して、懸濁された材料をいくぶん溶解した。この反応物を室温で4時間撹拌し、その後、0.0431gのシステインと共に0.0410gのTCEPを添加した。この反応混合物を1時間撹拌し、水中の20%エタノールで平衡化したPD-10脱塩カラムで精製した。この試料を溶出し、凍結し、凍結乾燥して、0.1471gの粗IMP362(MH+ 23713)を得た。
IMP413の模式図を図3に示す。IMP413の合成のために、IMP360(0.0103g)を、7mLの1M tris緩衝液(pH7.81)中で0.1601gのmPEG-OPTE(30kDa, Nektar Therapeutics)と混合した。その後、アセトニトリル(1mL)を添加して、懸濁された材料をいくぶん溶解した。この反応物を室温で4.5時間撹拌し、その後、0.0473gのシステインと共に0.0423gのTCEPを添加した。この反応混合物を2時間撹拌した後、2日間透析した。透析した材料を凍結し、凍結乾燥して、0.1552gの粗IMP413(MH+ 34499)を得た。
IMP421 Ac-C-PEG3-C(S-tBu)GQIEYLAKQIVDNAIQQAGC(S-tBU)G-NH2(配列番号:9)
以下のアミノ酸を以下に示す順序で樹脂に添加することによって、ペプチドIMP421(MH+ 2891)をNovaSyn(登録商標)TGR樹脂(487.6 mg, 0.112mmol)上に作製した:Fmoc-Gly- OH、Fmoc-Cys(t-Buthio)-OH、Fmoc-Gly-OH、Fmoc-Ala-OH、Fmoc-Gln(Trt)-OH、Fmoc- Gln(Trt)-OH、Fmoc-Ile-OH、Fmoc-Ala-OH、Fmoc-Asn(Trt)-OH、Fmoc-Asp(OBut)-OH、Fmoc-Val-OH、Fmoc-Ile-OH、Fmoc-Gln(Trt)-OH、Fmoc-Lys(Boc)-OH、Fmoc-Ala-OH、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-Tyr(But)-OH、Fmoc-Glu(OBut)-OH、Fmoc-Ile-OH、Fmoc-Gln(Trt)-OH、Fmoc-Gly-OH、Fmoc-Cys(t-Buthio)-OH、Fmoc-NH-PEG3-COOH、Fmoc-Cys(Trt)-OH。N末端アミノ酸はアセチル誘導体として保護された。その後、ペプチドを樹脂から切断し、RP-HPLCで精製して、32.7mgの白色固体を生じた。
AD2の配列を組み入れたIMP421(配列番号:9、図15)を、標準的な化学的手段で合成した。15.2mg(5.26μmol)のIMP421(F.W. 2890.50)と274.5mg(6.86μmol)のmPEG2-MAL-40Kのアセトニトリル溶液(1mL)に、7mLの1M Tris(pH7.8)を添加し、室温で3時間反応させた。余分なmPEG2-MAL-40K(図16)を49.4mg L-システインでクエンチした後、59.1mg TCEPを用いて1時間かけてS-S-tBu脱保護を行なった。この反応混合物を、2つの3〜12mLの限度容量の10K Slide-A-Lyzer透析カセット(各カセットに4ml)を用いて、5Lの5mM酢酸アンモニウム(pH5.0)中に2〜8℃で終夜透析した。次の日、5Lの5mM酢酸アンモニウム(pH5.0)緩衝液の交換をさらに3回行ない、各透析を少なくとも2.5時間続けた。精製産物(19.4mL)を2つの20mLシンチレーションバイアルに移し、凍結し、凍結乾燥して、246.7mgの白色固体が得られた。MALDI-TOFにより、mPEG2-MAL-40K 42,982およびIMP-457 45,500という結果が得られた。
哺乳動物細胞での発現用のIFN-α2b-DDD2-pdHL2の構築
IFN-α2bのcDNA配列をPCRで増幅し、以下の特徴、すなわち、XbaI---シグナルペプチド---IFNα2b---6 His---BamHIを含む配列(配列中、XbaIおよびBamHIは制限部位であり、シグナルペプチドはIFN-α2b由来のものであり、6 Hisはヘキサヒスチジンタグである)が結果として得られた。得られる分泌タンパク質は、そのC末端で配列番号:2からなるポリペプチドに融合したIFN-α2bからなる。
KSHHHHHHGSGGGGSGGGCGHIQIPPGLTELLQGYTVEVLRQQPPDLVEFAVEYFTRLREARA(配列番号:2)
IFNA2 XbaI 左
5'-TCTAGACACAGGACCTCATCATGGCCTTGACCTTTGCTTTACTGG-3'(配列番号:3)
IFNA2 BamHI 右
5'-GGATCCATGATGGTGATGATGGTGTGACTTTTCCTTACTTCTTAAACTTTCTTGC-3'(配列番号:4)
SalI酵素で消化することによって、IFN-α2b-DDD2-pdHL2を線状化し、エレクトロポレーションでSp/EEEミエローマ細胞内に安定的にトランスフェクトした(例えば、参照により本明細書に組み入れられる、2006年7月14日に出願された米国特許出願第11/487,215号参照)。2つのクローンが検出可能なレベルのIFN-α2bを有することがELISAで分かった。2つのクローンのうちの1つ(95と表す)を、生産性を実質的に減少させることなく、無血清培地中での増殖に適合させた。次に、このクローンを、0.1〜0.8μMの増加するメトトレキサート(MTX)濃度で5週間にわたって増幅させた。この段階で、クローンを限界希釈によりサブクローニングし、最も生産性の高いサブクローン(95-5)を拡大した。市販のrIFN-α2b(Chemicon IF007, ロット06008039084)を標準品として用いて、振盪フラスコで増殖させた95-5の生産性が、2.5mg/Lであると推定した。
クローン95-5を、合計20Lの無血清Hybridoma SFM(0.8μM MTXを含む)を含む34個のローラーボトルに拡大し、最終培養物に到達させた。この上清液を遠心分離で清澄化し、濾過(0.2μM)した。この濾過物を1×結合緩衝液(10mMイミダゾル、0.5M NaCl、50mM NaH2PO4、pH7.5)中に透析濾過し、固定化金属親和性クロマトグラフィー(IMAC)による精製に備えて310mLに濃縮した。この濃縮物を30-mL Ni-NTAカラムに充填し、これを500mLの1×結合緩衝液中の0.02%Tween 20で洗浄し、その後、290mLの30mMイミダゾル、0.02%Tween 20、0.5M NaCl、50mM NaH2PO4(pH7.5)で洗浄した。この産物を110 mLの250mMイミダゾル、0.02%Tween 20、150mM NaCl、50mM NaH2PO4(pH7.5)で溶出した。約6mgのIFNα2b-DDD2が精製された。図4は、IFNα2b-DDD2を定量するために用いた抗IFNαイムノブロットおよびELISAの結果を示す。
IFN-α2b-DDD2の純度を還元条件下のSDS-PAGEで評価した(図示せず)。クマシーブルー染色ゲルにより、ローラーボトルから産生されたバッチは、それより前のバッチよりも純度が高いということが示された(図示せず)。IFN-α2b-DDD2は最も強く染色されたバンドであり、総タンパク質の約50%を占めた(図示せず)。この産物は、分子量約26kDaのダブレットとして分離したが、これは、IFN-α2b-DDD2-SPの計算分子量(26kDa)と一致している。分子量34kDaの1つの主要な汚染物質と多くの微かな汚染バンドがあった(図示せず)。
α2b-362(IFN-α2b-DDD2-IMP362)の調製および精製
20kDa PEGに連結した2コピーのIFNα2bを有するα2b-362の構造を表した模式図を図5に示す。11mgの還元された凍結乾燥IMP362を、250mMイミダゾル、0.02%Tween 20、150mM NaCl、1mM EDTA、50mM NaH2PO4(pH7.5)中の2.25mg(3.5ml)のIFN-α2b-DDD2に10倍モル過剰で添加することにより、DNL反応を行なった。室温、暗所で6時間後、この反応混合物を、4℃、暗所で、CMローディング緩衝液(150mM NaCl、20mM NaAc、pH4.5)に対して透析した。この溶液を、CMローディング緩衝液で事前に平衡化した1-mL Hi-Trap CM-FFカラム(Amersham)に充填した。試料を充填した後、カラムをCMローディング緩衝液でベースラインまで洗浄し、その後、15mLの0.25M NaCl、20mM NaAc(pH4.5)で洗浄した。PEG化産物を12.5mLの0.5M NaCl、20mM NaAc(pH4.5)で溶出した。
2.5mgの還元された凍結乾燥IMP457を、250mMイミダゾル、0.02%Tween 20、150mM NaCl、1mM EDTA、50mM NaH2PO4(pH7.5)中の1mg(1.7ml)のIFN-α2b-DDD2に10倍モル過剰で添加することにより、DNL反応を行なった。室温で60時間後、1mMの酸化グルタチオンをこの反応混合物に添加し、その後、これをさらに2時間保持した。この混合物を、CMローディング緩衝液(150mM NaCl、20mM NaAc、pH4.5)で1:20に希釈し、酢酸でpH4.5に滴定した。この溶液を、CMローディング緩衝液で事前に平衡化した1-mL Hi-Trap CM-FFカラム(Amersham)に充填した。試料を充填した後、カラムをCMローディング緩衝液でベースラインまで洗浄し、その後、15mLの0.25M NaCl、20mM NaAc(pH4.5)で洗浄した。PEG化産物を20mLの0.5M NaCl、20mM NaAc(pH4.5)で溶出した。a2b-457を2mLに濃縮し、0.4M PBS(pH7.4)中に透析濾過した。SDS-PAGEおよびIFNα ELISAで決定した場合、最終的な収量は、a2b-457 約1mgで、純度は>90%であった。
30kDa PEGに連結した2コピーのIFNα2bを有するα2b-413の構造を表した模式図を図6に示す。IMP362の代わりにIMP413を用いてすぐ上で記載したようにα2b-413を調製した。
インビトロ抗増殖アッセイ
IFN-α2b-DDD2およびα2b-362を、バーキットリンパ腫(Daudi)細胞の増殖の阻害についてアッセイした。簡潔に述べると、IFN-α2b標準品(Chemicon IF007, ロット06008039084)、IFN-α2b-DDD2(品番010207)、およびα2b-362 (品番010807)を、各々、10%FBSを補充したRPMI1640培地で500pMに希釈し、そこから3通りの3倍連続希釈を96ウェル組織培養プレート中に作製した(50μL試料/ウェル)。Daudi細胞を4×105細胞/mLに希釈し、50μLを各ウェルに添加した(20K/ウェル)。各試験試薬の濃度範囲は、500pM〜0.008pMであった。37℃で4日後、MTS色素をプレートに添加し(ウェル当たり20μL)、3時間後、このプレートをEnvisionプレートリーダー(Perkin Elmer, Boston MA)を用いて490nmで読み取った。用量応答曲線を作成し(図7)、50%有効濃度(EC50)値を、Graph Pad Prismソフトウェア(Advanced Graphics
Software, Encinitas, CA)を用いてシグモイドフィットの非線形回帰によって得た。IFNα2b-DDD2およびα2b-362についての計算EC50はよく似ており(約16pM)、IFN-α2b標準品(EC50 約4pM)よりも約5倍効力が小さかった。同様の実験で、α2b- 413は、α2b-362と同様の効力を有していた。
脳心筋炎(EMC)ウイルスをA549細胞に対して用いるウイルスチャレンジアッセイで、独立の分析実験室(PBL Interferon Source, Piscataway, NJ)が2通りの試料を解析した。プレートをクリスタルバイオレットで染色し、色素を溶解した後、96ウェルプレートリーダーで分光光度法によりODを測定した。データは、Graph Pad Prismソフトウェア(Advanced Graphics Software, Encinitas, CA)でシグモイドフィット(可変の傾き)の非線形回帰を用いて解析した。EC50値をIFNα標準品のEC50値と比較することによって、抗ウイルス力価を決定した。特異的な抗ウイルス活性は、α2b-362およびα2b-413について、それぞれ1.2×108U/mgおよび8.8×106U/mgと計算された。
薬物動態
成体メスのSwiss-Websterマウス(約35g)で研究を行った。マウス2匹ずつの4つの異なる処置群があった。各試薬(試験および対照)を、単回ボーラス静注として、等モルタンパク質用量(3μgのrhuIFN-α2a、5μgのPEGINTRON(商標)、11μgのα2b-362、および13μgのα2b-413)で投与した。マウスに、経後眼窩(retro-orbital)法により様々な時点で(投薬前、注射5分後、2時間後、8時間後、24時間後、48時間後、72時間後、96時間後、および168時間後に)餌を与えた。血液を凝固させ、遠心分離し、血清を単離し、IFN-α濃度のアッセイと、それに続く薬物動態(PK)解析まで-70℃で保存した。
初期のインビボでの腫瘍治療研究により、DNL-PEG化インターフェロンは、PEGINTRON(商標)と比較してより強力でかつより長く持続することが示された。8週齢メスのC.B.-17 SCIDマウスに、動物当たり1.5×107細胞のヒトバーキットリンパ腫細胞株(Daudi)を静注した。マウス5匹ずつの10の異なる処置群があった。同等の活性ユニットのPEGINTRON(商標)、α2b-362、およびα2b-413を、3つの異なる用量(3500ユニット、7000ユニット、および14000ユニット)で、左右いずれかの脇腹に皮下注射で、7日に1回投与した。Daudi細胞を移植した1日後に治療を開始した。
哺乳動物細胞での発現用のG-CSF-DDD2-pdHL2の構築
G-CSFのcDNA配列をPCRで増幅し、以下の特徴、すなわち、Xbal---シグナルペプチド---G-CSF---6 His---BamHIを含む配列(配列中、XbaIおよびBamHIは制限部位であり、シグナルペプチドはヒトG-CSF由来のものであり、6 Hisはヘキサヒスチジンタグである)が結果として得られた。得られる分泌タンパク質は、そのC末端で配列番号:5からなるポリペプチドに融合したG-CSFからなっていた。
KSHHHHHHGSGGGGSGGGCGHIQIPPGLTELLQGYTVEVLRQQPPDLVEFAVEYFTRLREARA(配列番号:2)
G-CSF XbaI 左
5'-TCTAGACACAGGACCTCATCATGGCTGGACCTGCCACCCAG-3'(配列番号:5)
G-CSF BamHI-右
5'-GGATCCATGATGGTGATGATGGTGTGACTTGGGCTGGGCAAGGTGGCGTAG-3'(配列番号:6)
SalI酵素で消化することによって、G-CSF-pdHL2を線状化し、エレクトロポレーションでSp/EEEミエローマ細胞内に安定的にトランスフェクトした。0.15μM MTXを含む培地でクローンを選択した。サンドイッチELISAにより、クローン#4が、0.15mg/LのG-CSF-DDD2を産生することが示された。
約3mgのG-CSF-DDD2を実施例2に記載されたように精製する。クローン4を、合計20Lの無血清Hybridoma SFM(0.4μM MTXを含む)を含む34個のローラーボトルに拡大し、最終培養物に到達させる。この上清液を遠心分離で清澄化し、濾過(0.2μM)し、1×結合緩衝液(10mMイミダゾル、0.5M NaCl、50mM NaH2PO4、pH7.5)中に透析濾過し、濃縮する。この濃縮物をNi-NTAカラムに充填し、これを1×結合緩衝液中の0.02%Tween 20で洗浄し、その後、30mMイミダゾル、0.02%Tween 20、0.5M NaCl、50mM NaH2PO4(pH7.5)で洗浄する。この産物を250mMイミダゾル、0.02%Tween 20、150mM NaCl、50mM NaH2PO4(pH7.5)で溶出する。
30kDa PEGに連結した2コピーのG-CSFを有するG-CSF-413の構造を表した模式図を図11に示す。還元された凍結乾燥IMP413を、PBS中のG-CSF-DDD2に10倍モル過剰で添加することにより、DNL反応を行なう。室温、暗所で6時間後、この反応混合物を、Ni-NTAを用いた固定化金属親和性クロマトグラフィーによって精製する。
哺乳動物細胞での発現用のG-CSF-DDD2-pdHL2の構築
EPOのcDNA配列をPCRで増幅し、以下の特徴、すなわち、Xbal---シグナルペプチド---EPO---6 His---BamHIを含む配列(配列中、XbaIおよびBamHIは制限部位であり、シグナルペプチドはヒトEPO由来のものであり、6 Hisはヘキサヒスチジンタグである)を含む配列が結果として得られた。得られる分泌タンパク質は、そのC末端で配列番号:2からなるポリペプチドに融合したEPOからなる。
EPO XbaI 左
5'-TCTAGACACAGGACCTCATCATGGGGGTGCACGAATGTCC-3'(配列番号:7)
EPO BamHI 右
5'-GGATCCATGATGGTGATGATGGTGTGACTTTCTGTCCCCTGTCCTGCAG-3'(配列番号:8)
SalI酵素で消化することによって、EPO-DDD2-pdHL2を線状化し、エレクトロポレーションでSp/EEEミエローマ細胞内に安定的にトランスフェクトした。0.15μM MTXを含む培地でクローンを選択した。Hisタグ付き融合タンパク質を捕捉するためのNunc Immobilizer Nickel-Chelateプレートおよび抗EPO抗体による検出を用いたELISAにより、クローン#41、#49、および#37が各々約0.5mg/LのEPOを産生することが示された。
約2.5mgのEPO-DDD2を実施例2に記載されたように9.6リットルの無血清ローラーボトル培養液からIMACで精製した。SDS-PAGEおよびイムノブロット解析により、精製産物が、IMAC後の総タンパク質の約10%を構成することが示された(図示せず)。還元条件下では、EPO-DDD2ポリペプチドは、広範囲でかつ不均質なグリコシル化のためにその計算質量(28kDa)よりも大きい分子量(40〜45kDa)を有する幅広いバンドとして分離された。非還元条件下では、EPO-DDD2は、主として分子量80〜90kDaのジスルフィド結合した共有結合二量体として分離する。
h679は、ハプテンHSG(ヒスタミン-スクシニル-グリシン)に極めて特異的であるヒト化モノクローナル抗体である。図12の模式図に表す、h679-Fab-AD2モジュールの産生は、以前に記載されている(Rossi et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2006; 103:6841)。 EPO-DDD2の二量体構造を表した模式図を図12Bに示す。EPO-679(EPO-DDD2 x h679- Fab-AD2)の小規模な調製物をDNLで作製した。EPO-DDD2(1mg)を、1mMの還元グルタチオンおよび2mMの酸化グルタチオンを含むPBS中でh679-Fab-AD2(1mg)と終夜反応させた。DNLコンジュゲートを、以前に記載されたように(Rossi et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2006; 103:6841)HSGベースの親和性クロマトグラフィーで精製した。2つのEPO部分およびh679-Fabを有するEPO-679の構造を表した模式図を図12Cに示した。SDS-PAGEゲルのクマシーブルー染色により、EPO-679の生成が示された(図示せず)。非還元条件下で分子量150〜170kDaの幅広いバンドとして分離するDNL産物は、還元条件下のSDS-PAGEで示されるように、高度に精製され、3つの成分ポリペプチド(EPO、h679-Fd-AD2、およびh679κ)のみからなっていた(図示せず)。
組換えヒトEPO(Calbiochem)を陽性対照として用いて、EPO-DDD2およびEPO-679が、EPO応答性のTF1細胞(ATCC)の増殖を刺激する能力についてアッセイした。TF1細胞を、1×104細胞/ウェルを含む96ウェルプレート中のRPMI培地(20%FBSを補充、GM-CSFは補充せず)で増殖させた。EPOコンストラクトの濃度(ユニット/ml)を、市販のキット(ヒトエリスロポエチンELISAキット、Stem Cell Research、カタログ番号01630)を用いて決定した。細胞を、900U/ml〜0.001U/mlの範囲の濃度のrhEPO、EPO-DDD2、またはEPO-679の存在下で72時間培養した。96ウェルプレートリーダーでOD490を測定する前に6時間インキュベートした20μlのMTS試薬/ウェルを用いてMTSアッセイで生存細胞密度を比較した。用量応答曲線およびEC50値を、Graph Pad Prismソフトウェアを用いて作成した(図13)。EPO-DDD2とEPO-679の両方が、rhEPOの効力の約10%のインビトロ生物活性を示した。
30kDa PEGに連結した2コピーのEPOを有するEPO-413の構造を表した模式図を図14に示す。還元された凍結乾燥IMP413を、PBS中のEPO-DDD2に10倍モル過剰で添加することにより、DNL反応を行なう。室温、暗所で6時間後、この反応混合物を、Ni-NTAを用いた固定化金属親和性クロマトグラフィーによって精製する。
代わりの実施形態において、PEG部分とエフェクター部分の分子量比が2:1のPEG化複合体を作製することが望ましい。そのようなPEG化複合体は、PEG部分をDDD配列に付着させ、活性剤をAD配列に付着させることにより、上記の実施例1〜3の方法で容易に作製される。実施例1〜3の方法を修正することにより、PEGとIFN-α2bの化学量比が2:1のPEG化複合体が調製される。この複合体は、血清中での安定性を示し、PEGとIFN-α2bの化学量比が1:2のPEG化複合体よりも低いインターフェロン活性を示す。しかしながら、バイPEG化複合体のクリアランス速度は、モノPEG化複合体のクリアランス速度よりも遅い。
Fab抗体断片を、DDD配列またはAD配列のいずれかを含む融合タンパク質として産生してもよい。独立のトランスジェニック細胞株を各々のFab融合タンパク質用に開発する。ひとたび産生されれば、所望の場合にそのモジュールを精製するかまたは細胞培養上清液中に維持することができる。産生した後、PEG化Fabコンストラクトを作製するために、任意の(Fab-DDD2)モジュールを任意のPEG-ADモジュールと組み合わせることができ、または任意のFab-ADモジュールを任意の(PEG-DDD)2モジュールと組み合わせることができる。
DDD1:SHIQIPPGLTELLQGYTVEVLRQQPPDLVEFAVEYFTRLREARA(配列番号:10)
DDD2:CGHIQIPPGLTELLQGYTVEVLRQQPPDLVEFAVEYFTRLREARA(配列番号:11)
AD1:QIEYLAKQIVDNAIQQA(配列番号:12)
AD2:CGQIEYLAKQIVDNAIQQAGC(配列番号:1)
Losman et al., Cancer (Phila) (1997), 80:2660-6を参照されたい。ジシストロン性の哺乳動物発現ベクターは、IgGの重鎖および軽鎖の合成を導く。このベクター配列は、多くの異なるIgG-pdHL2コンストラクトとほとんど同一であり、可変ドメイン(VHおよびVL)配列にのみ違いが存在する。当業者に公知の分子生物学のツールを用いて、これらのIgG発現ベクターをFab-DDDまたはFab-AD発現ベクターに変換することができる。Fab-DDD発現ベクターを作製するために、重鎖のヒンジドメイン、CH2ドメイン、およびCH3ドメインのコード配列を、ヒンジの最初の4残基、14残基のGly-Serリンカー、およびヒトRIIαの最初の44残基(DDD1と表す)をコードする配列と置換する。Fab-AD発現ベクターを作製するために、IgGのヒンジドメイン、CH2ドメイン、およびCH3ドメインの配列を、ヒンジの最初の4残基、15残基のGly-Serリンカー、ならびにバイオインフォマティックスおよびペプチドアレイ技術を用いて作製され、RIIα二量体と非常に高い親和性(0.4nM)で結合することが示されたAKAP-ISと呼ばれる17残基の合成AD(AD1と表す)をコードする配列と置換する。Alto, et al., Proc. Natl. Acad. ScL, U.S.A (2003),
100:4445-50を参照されたい。
CH1ドメインを、pdHL2プラスミドベクターを鋳型として用いてPCRで増幅した。左側のPCRプライマーは、CH1ドメインの上流(5')およびCH1コード配列の5'にあるSacII制限エンドヌクレアーゼ部位からなる。右側のプライマーは、ヒンジの最初の4残基(PKSC)と、それに続くGGGGS(その最後の2つのコドン(GS)がBamHI制限部位を含む)をコードする配列からなる。
CH1の5' 左側のプライマー
5'GAACCTCGCGGACAGTTAAG-3'(配列番号:13)
CH1+G4S-Bam 右
5'GGATCCTCCGCCGCCGCAGCTCTTAGGTTTCTTGTCCACCTTGGTGTTGCTGG-3'(配列番号:14)
二重鎖オリゴヌクレオチド((G4S)2DDD1と表す)は、DDD1のアミノ酸配列と、それに続く11残基のリンカーペプチド(その最初の2つのコドンがBamHI制限部位を含む)をコードするように、Sigma Genosys(Haverhill, UK)によって合成された。停止コドンおよびEagI制限部位が3'末端に付加されている。コードされたポリペプチド配列を以下に示す。
GSGGGGSGGGGSHIQIPPGLTELLQGYTVEVLRQQPPDLVEFAVEYFTRLREARA(配列番号:15)
RIIA1-44 上
5'GTGGCGGGTCTGGCGGAGGTGGCAGCCACATCCAGATCCCGCCGGGGCTCACGGAGCTGCTGCAGGGCTACACGGTGGAGGTGCTGCGACAG-3'(配列番号:16)
RIIA1-44 下
5'GCGCGAGCTTCTCTCAGGCGGGTGAAGTACTCCACTGCGAATTCGACGAGGTCAGGCGGCTGCTGTCGCAGCACCTCCACCGTGTAGCCCTG-3'(配列番号:17)
GS4 Bam 左
5'-GGATCCGGAGGTGGCGGGTCTGGCGGAGGT-3'(配列番号:18)
1-44 停止 Eag 右
5'-CGGCCGTCAAGCGCGAGCTTCTCTCAGGCG-3'(配列番号:19)
二重鎖オリゴヌクレオチド((G4S)2-AD1と表す)を、AD1のアミノ酸配列と、それに続く11残基のリンカーペプチド(その最初の2つのコドンがBamHI制限部位を含む)をコードするように合成した(Sigma Genosys)。停止コドンおよびEagI制限部位が3'末端に付加されている。コードされたポリペプチド配列を以下に示す。
GSGGGGSGGGGSQIEYLAKQIVDNAIQQA(配列番号:20)
AKAP-IS 上
5'GGATCCGGAGGTGGCGGGTCTGGCGGAGGTGGCAGCCAGATCGAGTACCTGGCCAAGCAGATCGTGGACAACGCCATCCAGCAGGCCTGACGGCCG-3'(配列番号:21)
AKAP-IS 下
5'CGGCCGTCAGGCCTGCTGGATGGCGTTGTCCACGATCTGCTTGGCCAGGTACTCGATCTGGCTGCCACCTCCGCCAGACCCGCCACCTCCGGATCC-3'(配列番号:22)
GS4 Bam 左
5'-GGATCCGGAGGTGGCGGGTCTGGCGGAGGT-3'(配列番号:23)
AKAP-IS 停止 Eag 右
5'-CGGCCGTCAGGCCTGCTGGATG-3'(配列番号:24)
DDD1配列をコードする190bp断片を、BamHIおよびNotI制限酵素を用いてpGemTから切り出し、その後、CH1-pGemTの同位置にライゲートして、シャトルベクターCH1-DDD1-pGemTを作製した。
AD1配列を含む110bp断片を、BamHIおよびNotIを用いてpGemTから切り出し、その後、CH1-pGemTの同位置にライゲートして、シャトルベクターCH1-AD1-pGemTを作製した。
このモジュラー設計を用いて、CH1-DDD1またはCH1-AD1のいずれかを、pdHL2ベクター中の任意のIgGコンストラクトに組み入れることができる。SacII/EagI制限断片(CH1-CH3)をpdHL2から取り除き、それをそれぞれのpGemTシャトルベクターから切り出されたCH1-DDD1またはCH1-AD1のSacII/EagI断片と置換することによって、重鎖定常ドメイン全体を上記コンストラクトのうちの1つと置換する。
hMN-14抗体は、マウスMN-14 CDR配列を含むヒト化CEA結合抗体である(例えば、米国特許第6,676,924号参照)。C-DDD1-Fd-hMN-14-pdHL2は、2コピーの融合タンパク質C-DDD 1-Fab-hMN-14を含む安定二量体を産生するための発現ベクターである。この融合タンパク質C-DDD 1-Fab-hMN-14において、DDD1は、柔軟なペプチドスペーサーを介してCH1のカルボキシル末端でhMN-14 Fabに連結している。SacIIおよびEagI制限エンドヌクレアーゼで消化してCH1-CH3ドメインを取り除き、SacIIおよびEagIでCH1-DDD1-SV3シャトルベクターから切り出したCH1-DDD1断片を挿入することにより、プラスミドベクターhMN14(I)-pdHL2(これは、hMN-14 IgGを産生するのに使用されている)をC-DDD1-Fd-hMN-14-pdHL2に変換した。
C-DDD2-Fd-hMN-14-pdHL2は、C-DDD2-Fab- hMN-14を産生するための発現ベクターである。C-DDD2-Fab-hMN-14は、14アミノ酸残基のGly/Serペプチドリンカーを介してFdのカルボキシル末端に付加されたDDD2の二量体化/ドッキング配列を有する。分泌される融合タンパク質は、DDD2ドメインの非共有結合相互作用によって結び付いている2つの同一コピーのhMN-14 Fabから構成される。
G4S-DDD2 上
5'GATCCGGAGGTGGCGGGTCTGGCGGAGGTTGCGGCCACATCCAGATCCCGCCGGGGCTCACGGAGCTGCTGCA-3'(配列番号:26)
G4S-DDD2 下
5'GCAGCTCCGTGAGCCCCGGCGGGATCTGGATGTGGCCGCAACCTCCGCCAGACCCGCCACCTCCG-3'(配列番号:27)
C-DDD2-Fd-hMN14-pdHL2ベクターをSp/EEE細胞(米国特許出願第11/487,215号)にトランスフェクトし、C-DDD2-Fab-hMN-14を産生するのに用いる。このジジストロン性発現ベクターは、hMN-14κ軽鎖とC-DDD2-Fd-hMN-14の両方の合成および分泌を導き、これらが組み合わさって、C-DDD2-Fab-hMN14を形成する。このC-DDD2-Fab-hMN-14は、自発的に二量体を形成する。この二量体を等モル量のIMP362、IMP413、またはIMP457と混合し、PEG化C-DDD2-Fab-hMN-14二量体を産生させる。hMN-14 Fab部分は、CEA抗原に対する結合特異性を保持する。CEA発現腫瘍を持つヌードマウスへの注射により、PEG化C-DDD2-Fab-hMN-14が、非PEG化hMN-14 F(ab)2と比べて顕著に長い循環半減期を示し、より頻度の少ない投薬スケジュールで効力が向上するということが示されている。
pdHL2哺乳動物発現ベクターは、多くの組換えIgGの発現を仲介するのに用いられている。任意のIgG-pdHL2ベクターをC-H-AD2-IgG-pdHL2ベクターに変換しやすくするために、プラスミドシャトルベクターを産生した。Fc(CH2ドメインおよびCH3ドメイン)の遺伝子を、pdHL2ベクターを鋳型とし、オリゴヌクレオチドFc BglII左およびFc Bam-EcoRI右をプライマーとして用いて増幅した。
Fc BglII 左
5'-AGATCTGGCGCACCTGAACTCCTG-3'(配列番号:28)
Fc Bam-EcoRI 右
5'-GAATTCGGATCCTTTACCCGGAGACAGGGAGAG-3'(配列番号:29)
エプラツズマブ、すなわちhLL2 IgGは、ヒト化抗ヒトCD22 Mabである(例えば、米国特許第5,443,953号;第5,789,554号;第6,187,287号;第7,074,403号参照)。C-H-AD2-hLL2 IgG用の発現ベクターを、実施例15に記載されたように、hLL2 IgG-pdHL2から作製し、エレクトロポレーションでSp2/0ミエローマ細胞にトランスフェクトするのに用いた。トランスフェクション後、細胞を96ウェルプレートにプレーティングし、トランスジェニッククローンを、メトトレキサートを含む培地で選択した。hLL2特異的な抗イディオタイプMAbでコーティングした96ウェルマイクロタイタープレートおよびペルオキシダーゼをコンジュゲートした抗ヒトIgGによる検出を用いたサンドイッチELISAによって、クローンのC-H-AD2-hLL2 IgG生産性をスクリーニングした。クローンをタンパク質産生用のローラーボトルに拡大し、C-H-AD2-hLL2 IgGを、プロテイン-A親和性クロマトグラフィーを用いて一段階で使用済み培養培地から精製した。SE-HPLC分析により、2つのタンパク質ピークが分離された(図示せず)。より遅く溶出されるピークの保持時間(8.63分)は、hLL2 IgGと類似している。より速く溶出されるピークの保持時間(7.75分)は、約300kDaのタンパク質と一致する。後に、このピークが、C-H-AD2-hLL2-IgGのジスルフィド結合二量体に相当することが明らかにされた。この二量体は、DNL反応中に単量体型に還元される。SDS-PAGE解析により、精製されたC-H-AD2-hLL2-IgGが、単量体型とジスルフィド結合二量体型の両方のモジュールからなることが示された(図示せず)。これら2つの型に相当するタンパク質バンドは、非還元条件下のSDS-PAGEにより明らかであるが、還元条件下では、全ての型が、これらの成分ポリペプチド(重鎖AD2およびκ鎖)に相当する2つのバンドに還元される。その他の汚染バンドは検出されなかった。
hA20 IgGは、ヒト化抗ヒトCD20 MAbである(例えば、米国特許第7,154,164号参照)。C-H-AD2-hA20 IgG用の発現ベクターを、実施例15に記載されたように、hA20 IgG-pDHL2から作製し、エレクトロポレーションでSp2/0ミエローマ細胞にトランスフェクトするのに用いた。トランスフェクション後、細胞を96ウェルプレートにプレーティングし、トランスジェニッククローンを、メトトレキサートを含む培地で選択した。hA20特異的な抗イディオタイプMAbでコーティングした96ウェルマイクロタイタープレートおよびペルオキシダーゼをコンジュゲートした抗ヒトIgGによる検出を用いたサンドイッチELISAによって、クローンのC-H-AD2-hA20 IgG生産性をスクリーニングした。クローンをタンパク質産生用のローラーボトルに拡大し、C-H-AD2-hA20 IgGを、プロテイン-A親和性クロマトグラフィーを用いて一段階で使用済み培養培地から精製した。SE-HPLC分析およびSDS-PAGE解析により、実施例16のC-H-AD2-hLL2 IgG について得られた結果と非常によく似た結果が得られた。
C-H-AD2-hLL2 IgG抗体またはC-H-AD2-hA20 IgG抗体をPEG-DDD2と混合して、PEG化されたhLL2またはhA20を形成させる。hLL2およびhA20は、それぞれCD22抗原およびCD20抗原に対する結合特異性を保持する。CD20またはCD22を発現するリンパ腫を持つヌードマウスへの注射により、これらのPEG化抗体が、非PEG化抗体と比べて顕著に長い循環半減期を示し、より頻度の少ない投薬スケジュールで効力が向上するということが示されている。
Claims (13)
- PEG化複合体であって、
a)cAMP依存性タンパク質キナーゼの調節サブユニット由来のDDD(二量体化/ドッキングドメイン)部分に結合した治療薬;および
b)Aキナーゼアンカリングタンパク質(AKAP)由来のAD(アンカードメイン)部分に結合したPEG部分を含み、
2つのDDD部分が1つのAD部分に結合してPEG化複合体を形成し、前記DDD部分とAD部分の間のジスルフィド結合をさらに含み、
前記DDD部分が、配列番号11を含む配列を有し、
前記AD部分が、配列番号1を含む配列を有し、
前記治療薬がインターフェロンである、PEG化複合体。 - 前記DDD部分が配列番号2を含む配列を有する、請求項1に記載の複合体。
- 前記PEG部分が、一方の端でメトキシ基によりキャッピングされている、請求項1に記載の複合体。
- 前記治療薬が、インターフェロン−α、インターフェロン−β、およびインターフェロン−γからなる群より選択される、請求項1に記載の複合体。
- AD配列に結合した前記PEG部分が、
CGQIEYLAKQIVDNAIQQAGC(SS−tbu)G−EDANSからなるIMP360とmPEG−OPTE(20kDa)とを反応して得られるPEG化IMP360であるIMP362、または前記IMP360とmPEG−OPTE(30kDa)とを反応して得られるPEG化IMP360であるIMP413を含む、請求項1に記載の複合体。 - 前記治療薬が、インターフェロン(IFN)−α2bである、請求項1に記載の複合体。
- DDD部分に結合した前記治療薬が、DDDとの融合タンパク質である、請求項1に記載の複合体。
- 前記PEG化複合体の血清からのクリアランス速度が、PEG化されていない治療薬のクリアランス速度よりも少なくとも1桁遅い、請求項1に記載の複合体。
- PEG化複合体であって、
a)Aキナーゼアンカリングタンパク質(AKAP)由来のAD部分に結合した治療薬;および
b)cAMP依存性タンパク質キナーゼの調節サブユニット由来のDDD部分に結合したPEG部分を含み、
2つのDDD部分が1つのAD部分に結合してPEG化複合体を形成し、
前記DDD部分が、配列番号11を含む配列を有し、
前記AD部分が、配列番号1を含む配列を有し、
前記治療薬がインターフェロンである、PEG化複合体。 - 前記PEG化複合体の血清からのクリアランス速度が、PEG化されていない治療薬のクリアランス速度よりも少なくとも1桁遅い、請求項9に記載のPEG化複合体。
- 治療薬をPEG化する方法であって、
a)治療薬をcAMP依存性タンパク質キナーゼの調節サブユニット由来のDDD部分に結合させる工程;
b)PEG部分をAキナーゼアンカリングタンパク質(AKAP)由来のAD部分に結合させる工程;ならびに、
c)前記DDD部分を前記AD部分に結合させて、2つの治療薬−DDD部分および1つのPEG−AD部分を含むPEG化複合体を形成させる工程を含み、
前記DDD部分が、配列番号11を含む配列を有し、
前記AD部分が、配列番号1を含む配列を有し、
前記治療薬がインターフェロンである、方法。 - 前記PEG化複合体の血清からのクリアランス速度が、PEG化されていない治療薬のクリアランス速度よりも少なくとも1桁遅い、請求項11に記載の方法。
- 治療薬をPEG化する方法であって、
a)治療薬をAキナーゼアンカリングタンパク質(AKAP)由来のAD部分に結合させる工程;
b)PEG部分をcAMP依存性タンパク質キナーゼの調節サブユニット由来のDDD部分に結合させる工程;ならびに
c)前記DDD部分を前記AD部分に結合させて、2つの治療薬−DDD部分および1つのPEG−AD部分を含むPEG化複合体を形成させる工程を含み、
前記DDD部分が、配列番号11を含む配列を有し、
前記AD部分が、配列番号1を含む配列を有し、
前記治療薬がインターフェロンである、方法。
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US11/925,408 US7666400B2 (en) | 2005-04-06 | 2007-10-26 | PEGylation by the dock and lock (DNL) technique |
US11/925,408 | 2007-10-26 | ||
PCT/US2008/081085 WO2009055653A1 (en) | 2007-10-26 | 2008-10-24 | Pegylation by the dock and lock (dnl) technique |
Related Child Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2014040570A Division JP5779789B2 (ja) | 2007-10-26 | 2014-03-03 | ドック・ロック(dnl)技術によるpeg化 |
Publications (3)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2011500842A JP2011500842A (ja) | 2011-01-06 |
JP2011500842A5 JP2011500842A5 (ja) | 2011-12-08 |
JP5577558B2 true JP5577558B2 (ja) | 2014-08-27 |
Family
ID=40580038
Family Applications (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2010531272A Active JP5577558B2 (ja) | 2007-10-26 | 2008-10-24 | ドック・ロック(dnl)技術によるpeg化 |
JP2014040570A Active JP5779789B2 (ja) | 2007-10-26 | 2014-03-03 | ドック・ロック(dnl)技術によるpeg化 |
Family Applications After (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2014040570A Active JP5779789B2 (ja) | 2007-10-26 | 2014-03-03 | ドック・ロック(dnl)技術によるpeg化 |
Country Status (11)
Country | Link |
---|---|
US (5) | US7666400B2 (ja) |
EP (1) | EP2197468B1 (ja) |
JP (2) | JP5577558B2 (ja) |
KR (1) | KR101583388B1 (ja) |
CN (1) | CN101951939B (ja) |
AU (1) | AU2008316741B9 (ja) |
CA (1) | CA2696160C (ja) |
HK (1) | HK1148471A1 (ja) |
IL (1) | IL204066A (ja) |
MX (1) | MX2010004547A (ja) |
WO (1) | WO2009055653A1 (ja) |
Families Citing this family (110)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US7666400B2 (en) * | 2005-04-06 | 2010-02-23 | Ibc Pharmaceuticals, Inc. | PEGylation by the dock and lock (DNL) technique |
US7534866B2 (en) * | 2005-10-19 | 2009-05-19 | Ibc Pharmaceuticals, Inc. | Methods and compositions for generating bioactive assemblies of increased complexity and uses |
US7550143B2 (en) * | 2005-04-06 | 2009-06-23 | Ibc Pharmaceuticals, Inc. | Methods for generating stably linked complexes composed of homodimers, homotetramers or dimers of dimers and uses |
WO2002026265A2 (en) | 2000-09-29 | 2002-04-04 | Schering Corporation | Pegylated interleukin-10 |
US20160279239A1 (en) | 2011-05-02 | 2016-09-29 | Immunomedics, Inc. | Subcutaneous administration of anti-cd74 antibody for systemic lupus erythematosus and autoimmune disease |
US7906118B2 (en) | 2005-04-06 | 2011-03-15 | Ibc Pharmaceuticals, Inc. | Modular method to prepare tetrameric cytokines with improved pharmacokinetics by the dock-and-lock (DNL) technology |
US8034352B2 (en) | 2005-04-06 | 2011-10-11 | Ibc Pharmaceuticals, Inc. | Tetrameric cytokines with improved biological activity |
US20110020273A1 (en) * | 2005-04-06 | 2011-01-27 | Ibc Pharmaceuticals, Inc. | Bispecific Immunocytokine Dock-and-Lock (DNL) Complexes and Therapeutic Use Thereof |
US8883160B2 (en) * | 2004-02-13 | 2014-11-11 | Ibc Pharmaceuticals, Inc. | Dock-and-lock (DNL) complexes for therapeutic and diagnostic use |
US8551480B2 (en) | 2004-02-13 | 2013-10-08 | Immunomedics, Inc. | Compositions and methods of use of immunotoxins comprising ranpirnase (Rap) show potent cytotoxic activity |
US8652484B2 (en) | 2004-02-13 | 2014-02-18 | Immunomedics, Inc. | Delivery system for cytotoxic drugs by bispecific antibody pretargeting |
US8562988B2 (en) * | 2005-10-19 | 2013-10-22 | Ibc Pharmaceuticals, Inc. | Strategies for improved cancer vaccines |
US8003111B2 (en) * | 2005-04-06 | 2011-08-23 | Ibc Pharmaceuticals, Inc. | Dimeric alpha interferon pegylated site-specifically shows enhanced and prolonged efficacy in vivo |
US20110064754A1 (en) * | 2005-03-03 | 2011-03-17 | Center For Molecular Medicine And Immunology | Immunoconjugates Comprising Poxvirus-Derived Peptides and Antibodies Against Antigen-Presenting Cells for Subunit-Based Poxvirus Vaccines |
US8435539B2 (en) * | 2004-02-13 | 2013-05-07 | Immunomedics, Inc. | Delivery system for cytotoxic drugs by bispecific antibody pretargeting |
US9481878B2 (en) | 2004-02-13 | 2016-11-01 | Immunomedics, Inc. | Compositions and methods of use of immunotoxins comprising ranpirnase (Rap) show potent cytotoxic activity |
US8491914B2 (en) * | 2004-02-13 | 2013-07-23 | Ibc Pharmaceuticals, Inc. | Dock-and-lock (DNL) complexes for delivery of interference RNA |
US9550838B2 (en) | 2004-02-13 | 2017-01-24 | Ibc Pharmaceuticals, Inc. | Dock-and-lock (DNL) complexes for therapeutic and diagnostic use |
US10058621B2 (en) | 2015-06-25 | 2018-08-28 | Immunomedics, Inc. | Combination therapy with anti-HLA-DR antibodies and kinase inhibitors in hematopoietic cancers |
DK3332808T3 (da) | 2005-03-03 | 2020-12-14 | Immunomedics Inc | Humaniserede L243-antistoffer |
US20160355591A1 (en) | 2011-05-02 | 2016-12-08 | Immunomedics, Inc. | Subcutaneous anti-hla-dr monoclonal antibody for treatment of hematologic malignancies |
US9623115B2 (en) | 2005-04-06 | 2017-04-18 | Ibc Pharmaceuticals, Inc. | Dock-and-Lock (DNL) Complexes for Disease Therapy |
US9931413B2 (en) | 2005-04-06 | 2018-04-03 | Ibc Pharmaceuticals, Inc. | Tetrameric cytokines with improved biological activity |
US8475794B2 (en) | 2005-04-06 | 2013-07-02 | Ibc Pharmaceuticals, Inc. | Combination therapy with anti-CD74 antibodies provides enhanced toxicity to malignancies, Autoimmune disease and other diseases |
US8067006B2 (en) * | 2005-04-06 | 2011-11-29 | Immunomedics, Inc. | Polymeric carriers of therapeutic agents and recognition moieties for antibody-based targeting of disease sites |
US8349332B2 (en) | 2005-04-06 | 2013-01-08 | Ibc Pharmaceuticals, Inc. | Multiple signaling pathways induced by hexavalent, monospecific and bispecific antibodies for enhanced toxicity to B-cell lymphomas and other diseases |
US8158129B2 (en) | 2005-04-06 | 2012-04-17 | Ibc Pharmaceuticals, Inc. | Dimeric alpha interferon PEGylated site-specifically shows enhanced and prolonged efficacy in vivo |
US8481041B2 (en) | 2005-04-06 | 2013-07-09 | Ibc Pharmaceuticals, Inc. | Dock-and-lock (DNL) constructs for human immunodeficiency virus (HIV) therapy |
CN101484182B (zh) | 2005-04-06 | 2014-06-11 | Ibc药品公司 | 由同二聚体、同四聚体或二聚体的二聚体组成的稳定连接复合体的生产方法及用途 |
US7855279B2 (en) * | 2005-09-27 | 2010-12-21 | Amunix Operating, Inc. | Unstructured recombinant polymers and uses thereof |
US7846445B2 (en) * | 2005-09-27 | 2010-12-07 | Amunix Operating, Inc. | Methods for production of unstructured recombinant polymers and uses thereof |
US20100226884A1 (en) | 2009-01-20 | 2010-09-09 | Immunomedics, Inc. | Novel Class of Monospecific and Bispecific Humanized Antibodies that Target the Insulin-like Growth Factor Type I Receptor (IGF-1R) |
US9862770B2 (en) | 2005-10-19 | 2018-01-09 | Ibc Pharmaceuticals, Inc. | Multivalent antibody complexes targeting IGF-1R show potent toxicity against solid tumors |
WO2012024223A2 (en) * | 2010-08-17 | 2012-02-23 | Immunomedics, Inc. | Combination therapy with anti-cd74 antibodies provides enhanced toxicity to malignancies, autoimmune disease and other diseases |
JP2010516675A (ja) * | 2007-01-17 | 2010-05-20 | イミューノメディクス、インコーポレイテッド | 治療薬剤のポリマー担体および疾病部位の抗体に基づく標的化のための認識部分 |
AU2008275911A1 (en) * | 2007-07-19 | 2009-01-22 | Arizona Board of Regents, a body corporate acting for and on behalf of Arizona State University | Self- anchoring MEMS intrafascicular neural electrode |
JP2010536341A (ja) * | 2007-08-15 | 2010-12-02 | アムニクス, インコーポレイテッド | 生物学的に活性なポリペプチドの特性を改変するための組成物および方法 |
US9272029B2 (en) | 2009-03-26 | 2016-03-01 | Ibc Pharmaceuticals, Inc. | Interferon lambada-antibody complexes |
EP2326346A4 (en) * | 2008-08-20 | 2012-06-13 | Ibc Pharmaceuticals Inc | DOCK-AND-LOCK (DNL) ACCOSTAGE AND LOCK VACCINES FOR CANCER THERAPY |
EP2379115B1 (en) | 2008-12-17 | 2017-10-25 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Mono- and di-peg il-10 production; and uses |
US8703717B2 (en) * | 2009-02-03 | 2014-04-22 | Amunix Operating Inc. | Growth hormone polypeptides and methods of making and using same |
US20110046060A1 (en) | 2009-08-24 | 2011-02-24 | Amunix Operating, Inc., | Coagulation factor IX compositions and methods of making and using same |
MX2011008094A (es) | 2009-02-03 | 2012-02-13 | Amunix Operating Inc | Polipeptidos recombinantes extendidos y composiciones que comprenden los mismos. |
US8680050B2 (en) * | 2009-02-03 | 2014-03-25 | Amunix Operating Inc. | Growth hormone polypeptides fused to extended recombinant polypeptides and methods of making and using same |
US9849188B2 (en) | 2009-06-08 | 2017-12-26 | Amunix Operating Inc. | Growth hormone polypeptides and methods of making and using same |
EP2440228B8 (en) * | 2009-06-08 | 2023-02-22 | Amunix Operating Inc. | Glucose-regulating polypeptides and methods of making and using same |
WO2011026026A1 (en) * | 2009-08-31 | 2011-03-03 | Immunomedics, Inc. | Compositions and methods of use of immunotoxins comprising ranpirnase (rap) show potent cytotoxic activity |
AU2010286642B2 (en) * | 2009-08-31 | 2016-03-10 | Ibc Pharmaceuticals, Inc. | Bispecific immunocytokine dock-and-lock (DNL) complexes and therapeutic use thereof |
EP2478110B1 (en) | 2009-09-16 | 2016-01-06 | Immunomedics, Inc. | Class i anti-cea antibodies and uses thereof |
IN2012DN02692A (ja) * | 2009-11-05 | 2015-09-04 | Ct Molecular Med & Immunology | |
CA2782194C (en) | 2009-12-02 | 2018-01-16 | Immunomedics, Inc. | Combination of radiolabelled antibodies (rait) and antibody-drug conjugates (adc) for treatment of pancreatic cancer |
CN102665758A (zh) * | 2009-12-09 | 2012-09-12 | Ibc药品公司 | 用于递送干扰rna的对接锁定(dnl)复合物 |
CN102665757A (zh) * | 2009-12-09 | 2012-09-12 | 免疫医疗公司 | 通过双特异性抗体预靶向的用于细胞毒性药物的递送系统 |
US10822396B2 (en) | 2009-12-15 | 2020-11-03 | MuHyeon CHOE | Repeat-chain for the production of dimer, multimer, multimer complex and super-complex |
EP2518078B1 (en) * | 2009-12-15 | 2020-05-20 | Choe, Muhyeon | Method for manufacturing dimers and multimers by increasing the production of bond bridges in a complex of multiple monomers and repeating chains of an affinity domain of a type specifically binding to protein monomers |
US8557961B2 (en) | 2010-04-02 | 2013-10-15 | Amunix Operating Inc. | Alpha 1-antitrypsin compositions and methods of making and using same |
CA2812442A1 (en) * | 2010-11-03 | 2012-05-10 | Ibc Pharmaceuticals, Inc. | Dock-and-lock (dnl) constructs for human immunodeficiency virus (hiv) therapy |
US9140698B2 (en) | 2011-04-06 | 2015-09-22 | The Board Of Regents Of The University Of Texas System | Modulating bacterial MAM polypeptides in pathogenic disease |
CN107115526A (zh) | 2011-05-02 | 2017-09-01 | 免疫医疗公司 | 用于小体积施用的同种异型选择的抗体的超滤浓缩 |
US20130101664A1 (en) | 2011-08-18 | 2013-04-25 | Donald W. Kufe | Muc1 ligand traps for use in treating cancers |
US20150158934A1 (en) | 2011-09-09 | 2015-06-11 | Ucl Business Plc | Broadly neutralizing vhh against hiv-1 |
CA2855566A1 (en) * | 2011-12-02 | 2013-06-06 | Ibc Pharmaceuticals, Inc. | Multivalent antibody complexes targeting igf-1r show potent toxicity against solid tumors |
HUE046848T2 (hu) | 2012-02-15 | 2020-03-30 | Bioverativ Therapeutics Inc | VIII. faktor készítmények és eljárások elõállításukra és alkalmazásukra |
EP2822577B1 (en) | 2012-02-15 | 2019-02-06 | Bioverativ Therapeutics Inc. | Recombinant factor viii proteins |
EP2819788B1 (en) | 2012-02-27 | 2018-08-22 | Amunix Operating Inc. | Xten conjugate compositions and methods of making same |
EP2854845B1 (en) | 2012-06-01 | 2018-03-28 | IBC Pharmaceuticals, Inc. | Multimeric complexes with improved in vivo stability, pharmacokinetics and efficacy |
AU2013302696B9 (en) | 2012-08-14 | 2018-08-09 | Ibc Pharmaceuticals, Inc. | T-cell redirecting bispecific antibodies for treatment of disease |
US9682143B2 (en) | 2012-08-14 | 2017-06-20 | Ibc Pharmaceuticals, Inc. | Combination therapy for inducing immune response to disease |
US20150231241A1 (en) | 2012-08-14 | 2015-08-20 | Ibc Pharmaceuticals, Inc. | Combination therapy for inducing immune response to disease |
US9382329B2 (en) | 2012-08-14 | 2016-07-05 | Ibc Pharmaceuticals, Inc. | Disease therapy by inducing immune response to Trop-2 expressing cells |
US10131712B2 (en) | 2012-08-14 | 2018-11-20 | Ibc Pharmaceuticals, Inc. | Combination therapy with T-cell redirecting bispecific antibodies and checkpoint inhibitors |
KR101358330B1 (ko) | 2012-09-26 | 2014-02-12 | 현대모비스 주식회사 | 차속 제어 장치, 이를 포함하는 차속 제어 시스템 및 그 제어 방법 |
BR112015013444B1 (pt) | 2012-12-13 | 2022-11-01 | Immunomedics, Inc | Uso de um imunoconjugado |
US9789156B2 (en) | 2013-03-11 | 2017-10-17 | Dana-Farber Cancer Institute, Inc. | Combination anti-human epidermal growth factor receptor 2 (anti-HER2) cancer therapy using mucin 1 (MUC1) peptides and hemotherapeutics |
AU2014254019B2 (en) * | 2013-04-18 | 2018-09-27 | Armo Biosciences, Inc. | Methods of using interleukin-10 for treating diseases and disorders |
US9823255B2 (en) | 2013-06-17 | 2017-11-21 | Armo Biosciences, Inc. | Method for assessing protein identity and stability |
US10548953B2 (en) | 2013-08-14 | 2020-02-04 | Bioverativ Therapeutics Inc. | Factor VIII-XTEN fusions and uses thereof |
JP6509867B2 (ja) | 2013-08-30 | 2019-05-08 | アルモ・バイオサイエンシーズ・インコーポレイテッド | 疾患及び障害を治療するためにインターロイキン−10を使用する方法 |
EP3062818B1 (en) | 2013-11-01 | 2019-09-11 | IBC Pharmaceuticals, Inc. | Bispecific antibodies that neutralize both tnf-alpha and il-6: novel therapeutic agent for autoimmune disease |
ES2862139T3 (es) | 2013-11-11 | 2021-10-07 | Armo Biosciences Inc | Procedimientos de uso de Interleucina 10 para el tratamiento de enfermedades y trastornos |
KR20160102210A (ko) | 2013-12-27 | 2016-08-29 | 노버스 인터내쇼날 인코포레이티드 | 에톡시화 계면활성제 |
KR20150080417A (ko) * | 2013-12-30 | 2015-07-09 | 경희대학교 산학협력단 | 링커를 통해 연결된 동일한 표적 물질에 결합하는 항체 및 앱타머를 포함하는 집게 분자 및 이의 용도 |
CA2937236C (en) | 2014-02-21 | 2023-03-07 | Ibc Pharmaceuticals, Inc. | Disease therapy by inducing immune response to trop-2 expressing cells |
CA2935748A1 (en) | 2014-02-25 | 2015-09-03 | Immunomedics, Inc. | Humanized rfb4 anti-cd22 antibody |
WO2015187295A2 (en) | 2014-06-02 | 2015-12-10 | Armo Biosciences, Inc. | Methods of lowering serum cholesterol |
EP3160504B1 (en) | 2014-06-24 | 2020-09-16 | Immunomedics, Inc. | Anti-histone therapy for vascular necrosis in severe glomerulonephritis |
PL3204018T3 (pl) | 2014-10-07 | 2022-01-03 | Immunomedics, Inc. | Neoadiuwantowe zastosowanie koniugatów przeciwciało-lek |
KR20170068553A (ko) | 2014-10-14 | 2017-06-19 | 아르모 바이오사이언시스 인코포레이티드 | 인터류킨-15 조성물 및 이의 용도 |
EP3209320B1 (en) | 2014-10-22 | 2023-03-08 | Armo Biosciences, Inc. | Methods of using interleukin-10 for treating diseases and disorders |
WO2016126615A1 (en) | 2015-02-03 | 2016-08-11 | Armo Biosciences, Inc. | Methods of using interleukin-10 for treating diseases and disorders |
MA41957A (fr) * | 2015-03-11 | 2018-02-28 | Nektar Therapeutics | Conjugués d'une fraction d'il-7 et d'un polymère |
CA2981543A1 (en) | 2015-04-22 | 2016-10-27 | Immunomedics, Inc. | Isolation, detection, diagnosis and/or characterization of circulating trop-2-positive cancer cells |
JP7121496B2 (ja) | 2015-05-28 | 2022-08-18 | アルモ・バイオサイエンシーズ・インコーポレイテッド | 癌治療で使用するためのペグ化インターロイキン-10 |
CA2982376A1 (en) | 2015-05-28 | 2016-12-01 | Immunomedics, Inc. | T20 constructs for anti-hiv (human immunodeficiency virus) therapy and/or vaccines |
ES2953441T3 (es) | 2015-06-25 | 2023-11-13 | Immunomedics Inc | Combinación de anticuerpos anti-hla-dr o anti-Trop-2 con inhibidores de microtúbulos, inhibidores de parp, inhibidores de la cinasa de bruton o inhibidores de la fosfoinositida 3-cinasa mejora significativamente el resultado terapéutico en el cáncer |
SI3316885T1 (sl) | 2015-07-01 | 2021-09-30 | Immunomedics, Inc. | Imunokonjugati protitelo-SN-38 z linkerjem CL2A |
IL257231B (en) | 2015-08-03 | 2022-09-01 | Bioverativ Therapeutics Inc | Factor ix fusion proteins and methods for their preparation and use |
EP3341012A4 (en) | 2015-08-25 | 2019-03-20 | Armo Biosciences, Inc. | METHOD FOR USE OF INTERLEUKIN-10 FOR THE TREATMENT OF ILLNESSES AND SUFFERING |
WO2017040344A2 (en) | 2015-08-28 | 2017-03-09 | Amunix Operating Inc. | Chimeric polypeptide assembly and methods of making and using the same |
US10669338B2 (en) | 2016-06-17 | 2020-06-02 | Immunomedics, Inc. | Anti-PD-1 checkpoint inhibitor antibodies that block binding of PD-L1 to PD-1 |
EP3606964A4 (en) | 2017-04-03 | 2020-12-09 | Immunomedics, Inc. | SUBCUTANE ADMINISTRATION OF ANTIBODY DRUG CONJUGATES FOR CANCER THERAPY |
CN107118269B (zh) * | 2017-06-05 | 2020-12-01 | 北京交通大学 | 一种重组人il-24蛋白的peg修饰方法 |
US10584306B2 (en) | 2017-08-11 | 2020-03-10 | Board Of Regents Of The University Of Oklahoma | Surfactant microemulsions |
US20210032316A1 (en) | 2018-02-05 | 2021-02-04 | Stichting Vu | Inverse Agonistic Anti-US28 Antibodies |
WO2020080941A1 (en) | 2018-10-16 | 2020-04-23 | Umc Utrecht Holding B.V. | Anti- low-density lipoprotein receptor-related protein 5/6 antibodies |
KR20220038415A (ko) | 2019-07-26 | 2022-03-28 | 벤더르빌트 유니버시티 | 엔테로바이러스 d68에 대한 인간 모노클로날 항체 |
IL295310A (en) | 2020-02-11 | 2022-10-01 | Univ Vanderbilt | Human monoclonal antibodies to severe acute respiratory syndrome coronavirus 2 (sars-cov-2) |
DK4045533T3 (da) | 2020-03-26 | 2024-02-12 | Univ Vanderbilt | Humane monoklonale antistoffer mod svær akut respiratorisk syndrom-coronavirus 2 (sars-cov-2) |
WO2021195385A1 (en) | 2020-03-26 | 2021-09-30 | Vanderbilt University | HUMAN MONOCLONAL ANTIBODIES TO SEVERE ACUTE RESPIRATORY SYNDROME CORONAVIRUS 2 (SARS-GoV-2) |
GB202204813D0 (en) | 2022-04-01 | 2022-05-18 | Bradcode Ltd | Human monoclonal antibodies and methods of use thereof |
Family Cites Families (50)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
GB1541435A (en) * | 1975-02-04 | 1979-02-28 | Searle & Co | Immunological materials |
NL8501219A (nl) * | 1985-04-29 | 1986-11-17 | Stichting Vrienden Van De Stic | Immunologisch complex, de bereiding en toepassing daarvan. |
US4699784A (en) * | 1986-02-25 | 1987-10-13 | Center For Molecular Medicine & Immunology | Tumoricidal methotrexate-antibody conjugate |
US5770198A (en) * | 1988-05-18 | 1998-06-23 | The Research Foundation Of The State Of New York | Platelet-specific chimeric 7E3 immunoglobulin |
US20030198956A1 (en) * | 2002-02-21 | 2003-10-23 | Lee Makowski | Staged assembly of nanostructures |
US20040018587A1 (en) * | 1994-10-13 | 2004-01-29 | Lee Makowski | Nanostructures containing antibody assembly units |
US5871945A (en) | 1994-11-23 | 1999-02-16 | Icos Corporation | Modulators of anchoring protein function |
KR20000029673A (ko) * | 1996-08-02 | 2000-05-25 | 오르토-맥네일 파마슈티칼, 인코퍼레이티드 | 단일의공유결합된n-말단수용성폴리머를갖는폴리펩티드 |
US6261537B1 (en) * | 1996-10-28 | 2001-07-17 | Nycomed Imaging As | Diagnostic/therapeutic agents having microbubbles coupled to one or more vectors |
US6306393B1 (en) * | 1997-03-24 | 2001-10-23 | Immunomedics, Inc. | Immunotherapy of B-cell malignancies using anti-CD22 antibodies |
US6756039B1 (en) | 1999-05-10 | 2004-06-29 | The Regents Of The University Of California | Self assembling proteins |
US7527787B2 (en) | 2005-10-19 | 2009-05-05 | Ibc Pharmaceuticals, Inc. | Multivalent immunoglobulin-based bioactive assemblies |
US7666400B2 (en) * | 2005-04-06 | 2010-02-23 | Ibc Pharmaceuticals, Inc. | PEGylation by the dock and lock (DNL) technique |
US7550143B2 (en) * | 2005-04-06 | 2009-06-23 | Ibc Pharmaceuticals, Inc. | Methods for generating stably linked complexes composed of homodimers, homotetramers or dimers of dimers and uses |
US7534866B2 (en) | 2005-10-19 | 2009-05-19 | Ibc Pharmaceuticals, Inc. | Methods and compositions for generating bioactive assemblies of increased complexity and uses |
EP1200479B1 (en) | 1999-08-09 | 2006-02-01 | Lexigen Pharmaceuticals Corp. | Multiple cytokine-antibody complexes |
US6831158B2 (en) * | 2000-01-10 | 2004-12-14 | Maxygen Holdings Ltd. | G-CSF conjugates |
US7060506B2 (en) * | 2000-01-31 | 2006-06-13 | Cyclacel, Ltd. | Compositions and methods for monitoring the modification of modification dependent binding partner polypeptides |
US6524854B1 (en) * | 2001-09-11 | 2003-02-25 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Antisense inhibition of PKA regulatory subunit RII alpha expression |
EP2295468B1 (en) | 2002-02-14 | 2015-07-08 | Immunomedics, Inc. | Anti-CD20 antibodies and fusion proteins thereof and methods of use |
US8491896B2 (en) * | 2002-06-14 | 2013-07-23 | Immunomedics, Inc. | Anti-pancreatic cancer antibodies |
CA2484676A1 (en) * | 2002-05-03 | 2003-11-13 | Sequenom, Inc. | Kinase anchor protein muteins, peptides thereof, and related methods |
US7906118B2 (en) | 2005-04-06 | 2011-03-15 | Ibc Pharmaceuticals, Inc. | Modular method to prepare tetrameric cytokines with improved pharmacokinetics by the dock-and-lock (DNL) technology |
US7541440B2 (en) | 2002-09-30 | 2009-06-02 | Immunomedics, Inc. | Chimeric, human and humanized anti-granulocyte antibodies and methods of use |
MXPA05006944A (es) * | 2002-12-26 | 2005-12-14 | Mountain View Pharmaceuticals | Conjugados polimericos de interferon-beta cion potencia biologica aumentada. |
AU2004232928A1 (en) * | 2003-04-22 | 2004-11-04 | Ibc Pharmaceuticals | Polyvalent protein complex |
US8491914B2 (en) | 2004-02-13 | 2013-07-23 | Ibc Pharmaceuticals, Inc. | Dock-and-lock (DNL) complexes for delivery of interference RNA |
US8883160B2 (en) | 2004-02-13 | 2014-11-11 | Ibc Pharmaceuticals, Inc. | Dock-and-lock (DNL) complexes for therapeutic and diagnostic use |
US20110064754A1 (en) | 2005-03-03 | 2011-03-17 | Center For Molecular Medicine And Immunology | Immunoconjugates Comprising Poxvirus-Derived Peptides and Antibodies Against Antigen-Presenting Cells for Subunit-Based Poxvirus Vaccines |
US8034352B2 (en) * | 2005-04-06 | 2011-10-11 | Ibc Pharmaceuticals, Inc. | Tetrameric cytokines with improved biological activity |
US8003111B2 (en) * | 2005-04-06 | 2011-08-23 | Ibc Pharmaceuticals, Inc. | Dimeric alpha interferon pegylated site-specifically shows enhanced and prolonged efficacy in vivo |
US20110020273A1 (en) * | 2005-04-06 | 2011-01-27 | Ibc Pharmaceuticals, Inc. | Bispecific Immunocytokine Dock-and-Lock (DNL) Complexes and Therapeutic Use Thereof |
US8562988B2 (en) * | 2005-10-19 | 2013-10-22 | Ibc Pharmaceuticals, Inc. | Strategies for improved cancer vaccines |
US8551480B2 (en) | 2004-02-13 | 2013-10-08 | Immunomedics, Inc. | Compositions and methods of use of immunotoxins comprising ranpirnase (Rap) show potent cytotoxic activity |
US7608425B2 (en) * | 2004-07-23 | 2009-10-27 | Immunomedics, Inc. | Methods for protein expression in mammalian cells in serum-free medium |
DK3332808T3 (da) * | 2005-03-03 | 2020-12-14 | Immunomedics Inc | Humaniserede L243-antistoffer |
US8481041B2 (en) | 2005-04-06 | 2013-07-09 | Ibc Pharmaceuticals, Inc. | Dock-and-lock (DNL) constructs for human immunodeficiency virus (HIV) therapy |
US8349332B2 (en) | 2005-04-06 | 2013-01-08 | Ibc Pharmaceuticals, Inc. | Multiple signaling pathways induced by hexavalent, monospecific and bispecific antibodies for enhanced toxicity to B-cell lymphomas and other diseases |
CN101484182B (zh) * | 2005-04-06 | 2014-06-11 | Ibc药品公司 | 由同二聚体、同四聚体或二聚体的二聚体组成的稳定连接复合体的生产方法及用途 |
US20120276100A1 (en) | 2005-04-06 | 2012-11-01 | Ibc Pharmaceuticals, Inc. | Compositions and Methods of Use of Immunotoxins Comprising Ranpirnase (Rap) Show Potent Cytotoxic Activity |
US8158129B2 (en) * | 2005-04-06 | 2012-04-17 | Ibc Pharmaceuticals, Inc. | Dimeric alpha interferon PEGylated site-specifically shows enhanced and prolonged efficacy in vivo |
US8067006B2 (en) * | 2005-04-06 | 2011-11-29 | Immunomedics, Inc. | Polymeric carriers of therapeutic agents and recognition moieties for antibody-based targeting of disease sites |
US8475794B2 (en) | 2005-04-06 | 2013-07-02 | Ibc Pharmaceuticals, Inc. | Combination therapy with anti-CD74 antibodies provides enhanced toxicity to malignancies, Autoimmune disease and other diseases |
US8333971B2 (en) * | 2006-05-15 | 2012-12-18 | Immunomedics, Inc. | Methods and compositions for treatment of human immunodeficiency virus infection with conjugated antibodies or antibody fragments |
US9623115B2 (en) | 2005-04-06 | 2017-04-18 | Ibc Pharmaceuticals, Inc. | Dock-and-Lock (DNL) Complexes for Disease Therapy |
AU2006232310B9 (en) | 2005-04-06 | 2011-07-21 | Ibc Pharmaceuticals, Inc. | Improved stably tethered structures of defined compositions with multiple functions or binding specificities |
AU2006302848C1 (en) | 2005-10-19 | 2012-08-02 | Ibc Pharmaceuticals, Inc. | Methods and compositions for generating bioactive assemblies of increased complexity and uses |
CA2633486C (en) | 2005-12-16 | 2015-02-03 | Ibc Pharmaceuticals, Inc. | Multivalent immunoglobulin-based bioactive assemblies |
AU2007294805A1 (en) | 2006-09-14 | 2008-03-20 | Human Genome Sciences, Inc. | Albumin fusion proteins |
EP2326346A4 (en) | 2008-08-20 | 2012-06-13 | Ibc Pharmaceuticals Inc | DOCK-AND-LOCK (DNL) ACCOSTAGE AND LOCK VACCINES FOR CANCER THERAPY |
-
2007
- 2007-10-26 US US11/925,408 patent/US7666400B2/en active Active
-
2008
- 2008-10-24 CA CA2696160A patent/CA2696160C/en active Active
- 2008-10-24 WO PCT/US2008/081085 patent/WO2009055653A1/en active Application Filing
- 2008-10-24 JP JP2010531272A patent/JP5577558B2/ja active Active
- 2008-10-24 KR KR1020107009090A patent/KR101583388B1/ko not_active Application Discontinuation
- 2008-10-24 AU AU2008316741A patent/AU2008316741B9/en active Active
- 2008-10-24 EP EP08842661.4A patent/EP2197468B1/en active Active
- 2008-10-24 MX MX2010004547A patent/MX2010004547A/es active IP Right Grant
- 2008-10-24 CN CN2008801133361A patent/CN101951939B/zh active Active
-
2009
- 2009-12-22 US US12/644,146 patent/US7981398B2/en active Active
-
2010
- 2010-02-21 IL IL204066A patent/IL204066A/en active IP Right Grant
-
2011
- 2011-03-16 HK HK11102652.2A patent/HK1148471A1/xx unknown
- 2011-06-01 US US13/150,613 patent/US8277817B2/en active Active
-
2012
- 2012-08-20 US US13/589,575 patent/US9457100B2/en active Active
-
2014
- 2014-03-03 JP JP2014040570A patent/JP5779789B2/ja active Active
-
2016
- 2016-08-25 US US15/247,386 patent/US9872920B2/en active Active
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
HK1148471A1 (en) | 2011-09-09 |
US20090060862A1 (en) | 2009-03-05 |
US7981398B2 (en) | 2011-07-19 |
EP2197468A1 (en) | 2010-06-23 |
EP2197468B1 (en) | 2015-07-29 |
US9457100B2 (en) | 2016-10-04 |
CA2696160C (en) | 2017-12-19 |
CA2696160A1 (en) | 2009-04-30 |
US20160361435A1 (en) | 2016-12-15 |
JP2011500842A (ja) | 2011-01-06 |
WO2009055653A1 (en) | 2009-04-30 |
CN101951939A (zh) | 2011-01-19 |
CN101951939B (zh) | 2013-11-20 |
IL204066A (en) | 2015-06-30 |
MX2010004547A (es) | 2010-07-05 |
AU2008316741A1 (en) | 2009-04-30 |
US20110236352A1 (en) | 2011-09-29 |
AU2008316741B2 (en) | 2013-12-19 |
KR20100085932A (ko) | 2010-07-29 |
US20100261885A1 (en) | 2010-10-14 |
KR101583388B1 (ko) | 2016-01-07 |
JP2014129395A (ja) | 2014-07-10 |
US20130177532A1 (en) | 2013-07-11 |
EP2197468A4 (en) | 2012-04-25 |
AU2008316741B9 (en) | 2014-02-06 |
US7666400B2 (en) | 2010-02-23 |
JP5779789B2 (ja) | 2015-09-16 |
US8277817B2 (en) | 2012-10-02 |
US9872920B2 (en) | 2018-01-23 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP5577558B2 (ja) | ドック・ロック(dnl)技術によるpeg化 | |
US8435540B2 (en) | Dimeric alpha interferon PEGylated site-specifically shows enhanced and prolonged efficacy in VIVO | |
US8003111B2 (en) | Dimeric alpha interferon pegylated site-specifically shows enhanced and prolonged efficacy in vivo | |
JP5999217B2 (ja) | 二重特異性免疫サイトカインドック−アンド−ロック(dnl)複合体及びその治療的使用 | |
JP5090366B2 (ja) | 多価イムノグロブリン系生物活性アセンブリー | |
JP5699362B2 (ja) | 薬物動態が改善された四量体サイトカインをドック・アンド・ロック(dnl)技術により調製するためのモジュール法 | |
ES2672974T3 (es) | Complejos multiméricos con estabilidad in vivo, farmacocinética y eficacia mejoradas | |
JP6205621B2 (ja) | 抗体を有するインターフェロンλでの標的化は抗腫瘍および抗ウイルス活性を大きく増強する | |
US20070140966A1 (en) | Multivalent immunoglobulin-based bioactive assemblies | |
WO2006107786A2 (en) | Improved stably tethered structures of defined compositions with multiple functions or binding specificities | |
US20150024458A1 (en) | Dock-and-Lock (DNL) Complexes for Therapeutic and Diagnostic Use |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20111017 |
|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20111017 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20111028 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20130514 |
|
RD03 | Notification of appointment of power of attorney |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A7423 Effective date: 20130611 |
|
RD04 | Notification of resignation of power of attorney |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A7424 Effective date: 20130621 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20130729 |
|
A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20131105 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20140303 |
|
A911 | Transfer to examiner for re-examination before appeal (zenchi) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A911 Effective date: 20140319 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20140520 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20140521 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20140610 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20140620 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 5577558 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |