JP5284928B2 - 液体混合方法及び分注装置 - Google Patents
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本発明に係る液体混合方法(以下、「本方法」という)は、二種類の異なる液体を撹拌し、混合液を得る工程において、第一液を含有する容器に第二液を供給した後、液体を全量吸引せず、吸引時にピペットチップの先端部に空気を導入し、吐出時に気泡を発生させ、吸引及び吐出の繰り返しにより撹拌を行う方法である。本方法では、吸引時にピペットチップの先端部に空気を導入し、吐出時に気泡を発生させ、吐出液により気泡を揺動させることにより、液体の流動を撹乱させ、乱流が発生する。具体的には、吸引・吐出時のピペットチップの高さを制御し、吸引終了前のピペットチップ先端部が液中に浸漬していない状態となるようにすることで、吸引時にピペットチップ先端部に空気を導入する。当該吸引後においては、ピペットチップ内の上部に液体が存在し、底部に空気が存在することとなる。次の吐出を、ピペットチップ先端部を液中に浸漬させた状態で行うことにより、液中に気泡が導入され、吸引及び吐出による撹拌の効率を上げることができる。ここで、吸引時のピペットチップ内の上部の液体に対する底部の空気の容量の割合としては、例えば上部の液体に対して5%〜30%、好ましくは5%〜20%が挙げられる。また、吸引時に容器内に残す液体量としては、例えば第一液と第二液との総容量に対して5%〜50%、好ましくは10%〜20%が挙げられる。
図1及び図2は、本装置の一実施形態に相当する分注装置100を示す。図1は分注装置100の上面図、図2はその側面図である。本実施形態では、分注装置100は、遺伝子増幅検査を行うためのものであり、酵素試薬と増幅用バッファー及び被験対象である遺伝子を含有する検体液とを分注し、撹拌するものである。
〔実施例1〕
本実施例は、本方法の過程を示す図3を参照しながら、本方法によって2種の液体が均一に混合することを示す。なお、使用する分注装置は、図1及び2に示す分注装置100である。
条件1: Zb=1mm(吸引・吐出時に気泡が生成しない条件:陰性対照)
条件2: Zb=3mm(吸引・吐出時に気泡が生成する条件)
条件1の撹拌では、粘性の高いグリセロール液がチューブ底部に留まったまま動かなかったり、純水に馴染まないままピペットチップ内を上下したりする現象が観察され、5回の吸引・吐出動作後でも色素の濃淡差が目視にて確認された。
本実施例は、本方法により混合した液体試薬を使用した遺伝子増幅を示す。なお、本実施例では、全血より得られたゲノムDNAからALDH-2遺伝子を増幅させた。
第1核酸プライマー: 5'-CATACACTAAAGTGAAA-3'(配列番号1)
第2核酸プライマー: 5'-CATACACTGAAGTGAAA-3'(配列番号2)
本実施例は、本方法により混合した乾燥試薬を使用した遺伝子増幅を示す。なお、本実施例では、Nuclisens HIV-1 QT Amplification Reagents(bioMerieux社)の試薬を用い、HIVパネル血漿からHIV-RNA増幅反応を行った。
101:ノズル部
103:シリンジ
104:フィッティング部
105:ピペットチップ
110:XYZロボット
111:X駆動部
112:Y駆動部
113:Z駆動部
114:リミットスイッチ
120:分注台
121:チューブラック
122:チューブ
123:試薬ラック
124:試薬チューブ
125:分注ラック
126:分注チューブ
127:ピペットチップ立て
128:ピペットチップ廃棄ラック
129:空洞
301〜306:撹拌状態
310:試薬チューブ3
311:ピペットチップ
312:フィッティング部
Claims (12)
- 複数の液体を撹拌し、混合液を得る工程を含む液体混合方法であって、
第一液を含有する容器に第二液を供給し、
ピペットチップの先端部を前記液体内の一定の高さに保持し、
前記一定の高さで、前記ピペットチップの先端部までもしくは前記ピペットチップの先端部の上部までの液体を、ピペットチップの先端部に空気が導入される吸引速度で吸引し、
前記一定の高さで、前記容器内の液体に気泡を発生させるように吐出し、
吸引及び吐出の繰り返しにより撹拌を行うことを特徴とする、液体混合方法。 - 前記第一液の粘性が、前記第二液より大きく、且つ前記第一液の容量が前記第二液より少量であることを特徴とする、請求項1記載の方法。
- 前記吸引速度が150〜400μL/秒であることを特徴とする、請求項1記載の方法。
- 前記第二液の供給後、ピペットチップを交換することなく吸引及び吐出を行うことを特徴とする、請求項1記載の方法。
- 可溶性固体と液体との混合液を撹拌する工程を含む液体混合方法であって、
可溶性固体を含有する容器に液体を供給し、
ピペットチップの先端部を前記可溶性固体と前記液体の混合液の一定の高さに保持し、
前記一定の高さで、前記ピペットチップの先端部までもしくは前記ピペットチップの先端部の上部までの前記混合液を、ピペットチップの先端部に空気が導入される吸引速度で吸引し、
前記一定の高さで、前記容器内の前記混合液に気泡を発生させるように吐出し、
吸引及び吐出の繰り返しにより撹拌を行うことを特徴とする、液体混合方法。 - 前記可溶性固体が乾燥粉末であることを特徴とする、請求項5記載の方法。
- 前記吸引速度が150〜400μL/秒であることを特徴とする、請求項5記載の方法。
- 前記液体の供給後、ピペットチップを交換することなく吸引及び吐出を行うことを特徴とする、請求項5記載の方法。
- シリンジとフィッティング部とピペットチップとから構成されるノズル部と、
前記ノズル部を制御する制御手段と、を備え、
前記制御手段は、第一液を含有する容器に第二液を供給した後、
ピペットチップの先端部を前記液体内の一定の高さに保持し、
前記一定の高さで、前記ピペットチップの先端部までもしくは前記ピペットチップの先端部の上部までの液体を、ピペットチップの先端部に空気が導入される吸引速度で吸引し、
前記一定の高さで、前記容器内の液体に気泡を発生させるように吐出し、
吸引及び吐出の繰り返しにより撹拌を行うように制御することを特徴とする、分注装置。 - 前記制御手段は、前記吸引速度を150〜400μL/秒に制御することを特徴とする、請求項9記載の分注装置。
- シリンジとフィッティング部とピペットチップとから構成されるノズル部と、
前記ノズル部を制御する制御手段と、を備え、
前記制御手段は、可溶性固体を含有する容器に液体を供給した後、
ピペットチップの先端部を前記可溶性固体と前記液体の混合液の一定の高さに保持し、
前記一定の高さで、前記ピペットチップの先端部までもしくは前記ピペットチップの先端部の上部までの前記混合液を、ピペットチップの先端部に空気が導入される吸引速度で吸引し、
前記一定の高さで、前記容器内の前記混合液に気泡を発生させるように吐出し、
吸引及び吐出の繰り返しにより撹拌を行うように制御することを特徴とする、分注装置。 - 前記制御手段は、前記吸引速度を150〜400μL/秒に制御することを特徴とする、請求項11記載の分注装置。
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