JP5205354B2 - クロマトグラフ測定装置 - Google Patents
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Description
呈色状態として光学濃度および色度を測定する測定手段と、
測定手段により測定された光学濃度および色度に基づいて、被験物質の検査結果の有効性判定および増幅要否判定を行う判定手段と、
増幅要否判定による増幅が必要であるとの判定に応じて、呈色状態を増幅させる増幅溶液を展開する増幅手段とを備えることを特徴とするものである。
式1:光学濃度=−log10(Ir/I)
増幅手段により増幅された呈色状態を測定して、被験物質を検査することが好ましい。
検体溶液を不溶性担体に点着してから予め設定された所定時間の経過時に、テストラインおよびコントロールラインの光学濃度および色度を測定手段に測定させ、
すべてのラインについての光学濃度および色度が所定値に達した場合には、判定手段に増幅要否判定を増幅不要と判定させて、増幅を行わず被験物質の検査結果について有効性判定を行わせ、
それ以外の場合には、判定手段に増幅要否判定を増幅必要と判定させて、増幅手段に呈色状態を増幅させ、増幅後、判定手段に被験物質の検査結果について有効性判定を行わせる動作モードを有することが好ましい。
動作モード選択手段は、選択可能な動作モードとして、
検体溶液を不溶性担体に点着してから予め設定された所定時間の経過時に、テストラインおよびコントロールラインの光学濃度および色度を測定手段に測定させ、
指定手段に指定されたテストラインおよびコントロールラインについての光学濃度および色度が所定値に達した場合には、判定手段に増幅要否判定を増幅不要と判定させて、増幅を行わず被験物質の検査結果について判定を行わせ、
それ以外の場合には、判定手段に増幅要否判定を増幅必要と判定させて、増幅手段に呈色状態を増幅させ、増幅後、判定手段に被験物質の検査結果について有効性判定を行わせる動作モードを有することが好ましい。
被験物質に対する特異的結合物質が固定されたテストラインと、測定の終了時を判断するためのコントロールラインと、固定化された標識物質とを有する不溶性担体であって、被験物質を含有しうる検体溶液と被験物質を標識する標識物質とが展開された不溶性担体の、テストラインおよびコントロールラインに捕捉された標識物質の呈色状態を測定して、被験物質について検査するクロマトグラフ測定方法において、
不溶性担体に検体溶液を点着してから所定時間が経過した時に測定された、呈色状態の光学濃度および色度に基づいて、呈色状態の増幅が必要であるか否かについて第1の判定を行い、
第1の判定の結果、テストラインおよびコントロールラインの少なくとも1つの光学濃度および色度が所定値に達しなかったために、呈色状態の増幅が必要である旨の判定が出された場合に、
不溶性担体に洗浄液および増幅溶液を展開することにより、テストラインおよびコントロールラインを洗浄すると共に、呈色状態を増幅し、
増幅された呈色状態の光学濃度および色度を測定して、この光学濃度および色度に基づき、検査の結果が有効であるか否かについて第2の判定を行うことを特徴とするものである。
(クロマトグラフ測定装置)
まず、本実施形態に係るクロマトグラフ測定装置1の構成について説明する。図1は本実施形態に係るクロマトグラフ測定装置1の外観を示す概略斜視図であり、図2はイムノクロマト用デバイス20が装填され、図1におけるI−I線で切断した場合の内部を示す概略図である。また、図3Aおよび図3Bはそれぞれデバイス20の外観を示す概略上面図および概略底面図、図3Cは図3AのII−II線における概略断面図である。
クロマトグラフ測定装置1の判定部32は、本発明に係る判定手段として、第1の測定部により測定された検査部位の呈色状態に基づいて、被験物質の検査結果の有効性判定および増幅要否判定を行うものである。有効性判定により、検査の進行状態(溶液の展開状態、テストラインにおける被験物質および標識物質の捕捉状態、およびコントロールラインにおける標識物質の捕捉状態等)が正常であり、その後得られる結果が信頼に足るか否か、または検査が正常に終了しその結果が信頼に足るか否かが判定される。これらの場合において、信頼に足る場合には有効判定が出され、信頼に足らない場合にはエラー判定が出される。一方、増幅要否判定により、検査部位の呈色状態を増幅させる必要があるか否かが判定され、必要がある場合には増幅必要判定が、必要がない場合には増幅不要判定が出される。
検査の進行段階において、判定部32よりエラー判定が出される場合としては、例えば、上記進行状態が正常でない恐れがあるため、何らかの検査結果が得られたとしてもその結果の信頼性が低いと判断された場合等が挙げられる。検査の進行状態が正常でない場合としては、例えばデバイス20を再使用しているために検査の初期段階にもかかわらずコントロールラインが呈色していた場合等が挙げられる。検査の終了段階において、判定部32より有効判定が出された場合には、判定部32は当該検査結果が陽性か陰性かの判定も行う。検査の終了段階において、判定部32よりエラー判定が出される場合としては、例えば、上記進行状態が正常でなかったため正常な検査結果を得ることができなかった場合が挙げられる。なお、それぞれの段階でのエラー判定の他の具体例については後述する。
判定部32より増幅必要判定が出される場合としては、例えば、もともと検体溶液中の被験物質の濃度が低いために、或いは検査ライン(テストラインおよびコントロールライン)についての試薬等の性質上当該検査自体の反応完了時間が長いために、検査の進行状態が、そのまま検査を進行させたとしても相当の時間を要しなければ検査結果を得ることができない状態にあると予測された場合が挙げられる。ここで、上記進行状態のどのポイントで増幅要否判定を行うかについては、任意に設定することができる。相当の時間を要するか否かの予測は、経時的に計測した呈色状態の変化に基づいて予測することができ、例えば光学濃度の変化率に基づいて予測することができる。判定部32より増幅不要判定が出される場合としては、例えば、検体溶液中の被験物質の濃度が高いために或いは当該検査自体の反応完了時間が短いために、上記進行状態が、すでに検査結果を得ることができる状態にあると判断された場合、或いは相当の時間を要せずに検査結果を得ることができる状態にあると予測された場合が挙げられる。
動作モード選択部34は、予め設定された所定の動作処理を装置に行わせるための動作モードを格納している。そして、格納されている動作モードは制御部30を介して画面表示部11にメニューとして表示され、測定装置1の使用者はメニュー操作部12を操作してこのメニューの中から動作モードを選択することができる。これにより使用者は検査目的に適合した測定を実施することができる。
第1の測定部40は、デバイス20の観察窓24を通して検査部位21aの呈色状態を測定する本発明に係る測定手段として機能し、検査部位21aにおける光学的情報を取得するものである。第1の測定部40は、図2に示すようにイメージセンサ42と光源44とを備え、デバイス20が測定装置1に装填された際に、これらがデバイス20の下方に配して観察窓24に対向するように構成されている。そして、第1の測定部40によって取得された検査部位21aにおける光学的情報に基づいて、検査部位21aの呈色状態として光学濃度および色度が算出される。
光学濃度は、アッセイ用デバイスの検査部位に入射された入射光の強度をI、検査部位からの反射光の強度をIrとしたとき、下記式1により定める。
式1:光学濃度=−log10(Ir/I)
また、色度は、色相と彩度を数量的に表示したものであり、イメージセンサで読み取ったRGB輝度信号から算出する。色度の表色系としては、一般的なCIE表色系を用いることができる。
増幅溶液供給部60は、銀イオン含有化合物を含む増幅溶液を貯蔵する増幅溶液貯蔵ポット62と、増幅溶液貯蔵ポット62から増幅溶液を注入する増幅溶液注入ノズル62aと、上記増幅溶液に含まれる銀イオンを還元する還元剤を貯蔵する還元剤貯蔵ポット64と、還元剤貯蔵ポット64から還元剤を注入する還元剤注入ノズル64aとを備え、増幅溶液貯蔵ポット62および還元剤貯蔵ポット64のそれぞれに貯蔵された液体を、それぞれの注入ノズル62a・64aを通して装填されたデバイス20の溶液注入口23に注入することができるように構成されている。液体の注入は、例えば増幅溶液供給部60を駆動装置により駆動させて順に或いは交互にそれぞれの注入ノズルから別個に注入するようにしてもよく、また2つのノズルを先端部で結合させてそれぞれの貯蔵ポットから供給された液体を同時に注入するようにしてもよい。
次に本発明のクロマトグラフ測定方法について説明する。
本実施形態に係る測定方法は、被験物質に対する特異的結合物質が固定されたテストラインと、測定の終了時を判断するためのコントロールラインと、固定化された標識物質とを有する不溶性担体21を備えるデバイス20を用意し、このデバイス20の溶液注入口23に検査対象である被験物質を含有しうる検体溶液を注入し、不溶性担体21に検体溶液を点着してから所定時間経過後、検査部位21aにおける呈色状態として光学濃度および色度を測定し、この光学濃度および色度に基づいて増幅要否判定(第1の判定)を行い、
テストライン(AおよびB)およびコントロールラインCの少なくとも1つの光学濃度および色度が所定値に達しなかったため、増幅要否判定の結果、増幅必要判定が出された場合には、不溶性担体21に還元剤(ここで、還元剤は洗浄液としても機能する。)を展開することによりテストライン(AおよびB)およびコントロールラインCを洗浄し(洗浄処理)、不溶性担体21に増幅溶液を展開することにより、銀イオンの還元により形成された銀微粒子を標識物質に沈着させて呈色状態を増幅させ(増幅処理)、増幅された呈色状態の光学濃度および色度を測定して、この光学濃度および色度に基づいて有効性判定(第2の判定)を行い、
それ以外の場合には、上記増幅工程(洗浄処理、増幅処理を含む)を行わず、増幅要否判定(第1の判定)時の光学濃度および色度に基づいて有効性判定(第2の判定)を行うものである。
本発明のアッセイ用デバイスを用いて分析することのできる検体溶液としては、被験物質(天然物、毒素、ホルモンまたは農薬等の生理活性物質あるいは環境汚染物質等)を含む可能性のあるものである限り、特に限定されるものではなく、例えば、生物学的試料、特には動物(特にヒト)の体液(例えば、血液、血清、血漿、髄液、涙液、汗、尿、膿、鼻水、又は喀痰)若しくは排泄物(例えば、糞便)、臓器、組織、粘膜や皮膚、それらを含むと考えられる搾過検体(スワブ)、うがい液、又は動植物それ自体若しくはそれらの乾燥体を後述の希釈液で希釈したもの等を挙げることができる。
本発明で使用することができる標識物質としては、一般的なイムノクロマトグラフ法で用いられるような金属微粒子(又は金属コロイド)、着色ラテックス粒子、酵素など、有色で視認できる、または、反応により検査できるようになる標識物であれば特に限定されることなく用いることができるが、標識物質を触媒とした金属イオンの還元反応によって、標識物質への金属の沈着でシグナルを増幅する場合には、その触媒活性の観点から金属微粒子が好ましい。
特異的結合物質としては、被検物質に対して親和性を持つものならば特に限定されることはなく例えば、被験物質が抗原である場合には当該抗原に対する抗体、被験物質がたんぱく質、金属イオンまたは低分子量有機化合物である場合にはこれらに対するアプタマー、被験物質がDNAやRNAなど核酸である場合にはこれらに対して相補的な配列を持つDNAやRNA等の核酸分子、被験物質がアビジンである場合にはビオチン、被験物質が特定のペプチドの場合にはこれに特異的に結合する錯体、等を挙げることができる。また、上記した例では特異的結合物質と被験物質との関係を入れ替えることもでき、例えば被験物質が抗体である場合には当該抗体に対する抗原を、特異的結合物質として用いることもできる。さらに、上記のような被検物質に対して親和性を持つ物質を一部に含有する化合物等を特異的結合物質として用いることもできる。
上記抗体としては具体的に、その被験物質によって免疫された動物の血清から調製する抗血清、抗血清から精製された免疫グロブリン画分、その被験物質によって免疫された動物の脾臓細胞を用いる細胞融合によって得られるモノクローナル抗体、あるいは、それらの断片[例えば、F(ab’)2、Fab、Fab’、又はFv]を用いることができる。これらの抗体の調製は、常法により行なうことができる。
標識物質として金属コロイド標識、金属硫化物標識、その他金属合金標識、または金属を含むポリマ−粒子標識を用いるアッセイの場合には、金属系標識の信号を増幅させることができる。具体的には、被験物質と標識物質の複合体の形成後に、無機銀塩、有機銀塩などの銀を含む化合物から供給される銀イオンおよび還元剤を接触させ、還元剤によって銀イオンを還元して銀粒子を生成させると、その銀粒子が金属系標識を核として金属系標識上に沈着するので、金属系標識が増幅され、被験物質の分析を高感度に実施することができる。
不溶性担体21は、検体溶液を滴下する部分である試料添加パッド、被験物質と結合可能な標識物質が固定された標識物質保持パッド、被験物質に対する特異的結合物質が固定された検査部位を有するクロマトグラフ担体、及び送液された検体溶液等を吸収する吸収パッドを有している。検査部位には、それぞれ異なる特異的結合物質が固定された2つのテストラインを設けているが、テストラインの数はこれに限定されず、1つでもよいし3つ以上でもよい。テストラインを複数にすることによって検体溶液に複数の被験物質が含まれる場合に、効率よく一度に複数の被験物質を検査することが可能となる。不溶性担体21の材料は、多孔性であることが好ましく、例えば、ニトロセルロース膜、セルロース膜、アセチルセルロース膜、ポリスルホン膜、ポリエーテルスルホン膜、ナイロン膜、ガラス繊維、不織布、布、または糸等が好ましく挙げられる。
増幅溶液は、含まれる薬剤が標識物質や被験物質の触媒作用によって反応することにより、呈色或いは発光する化合物などを生じ、シグナルの増幅を起こすことができる溶液である。例えば、金属標識上で、物理現像により金属銀の析出を起こす銀イオン溶液である。詳細には、写真化学の分野での一般書物(例えば、「改訂写真工学の基礎-銀塩写真編-」(日本写真学会編、コロナ社)、「写真の化学」(笹井明、写真工業出版社)、「最新処方ハンドブック」(菊池真一他、アミコ出版社))に記載されているような、いわゆる現像液を用いることができる。例えば、増幅溶液として銀イオン含有化合物を含む物理現像液を用いれば、銀イオンの還元剤により液中の銀イオンを、現像の核となるような金属コロイド等を中心に還元させることができる。
別の酵素を用いた例としては、アルカリホスファターゼを標識とし、5−ブロモ−4クロロ−3−インドリル−リン酸二ナトリウム塩(BCIP)を基質として発色させるような系もある。以上、呈色する反応を代表に挙げたが、一般的にエンザイムイムノアッセイで用いられるような、酵素と基質の組み合わせであればなんでも良く、化学発光する基質であっても、蛍光を発する基質であってもよい。
銀イオン含有化合物としては、有機銀塩、無機銀塩、もしくは銀錯体を用いることができる。好ましくは、水などの溶媒に対して溶解度の高い銀イオン含有化合物であり、硝酸銀、酢酸銀、乳酸銀、酪酸銀、チオ硫酸銀などが挙げられる。特に好ましくは硝酸銀である。銀錯体としては、水酸基やスルホン基など水溶性基を有する配位子に配位された銀錯体が好ましく、ヒドロキシチオエーテル銀等が挙げられる。無機銀塩、もしくは銀錯体は、銀として一般に0.001モル/m2〜0.2モル/m2、好ましくは0.01モル/m2〜0.05モル/m2含有されることが好ましい。
銀イオンの還元剤は、銀イオンを銀に還元することができれば、無機・有機のいかなる材料、またはその混合物でも用いることができる。
以下検査部位の呈色状態に基づいて、増幅要否判定および有効性判定がどのように行われるかを図5A〜図5Eに示す具体例を用いながら説明する。
さらに、本発明の有効性判定は、増幅前後の検査部位の光学濃度および色度に基づいて、増幅工程が正常に行われたか否かを細かく判定することができる。これにより、検査結果の信頼性をより高めることができる。
本発明の測定装置1は、被験物質の検査結果の有効性判定および増幅要否判定を行う判定手段と、この判定手段の増幅要否判定に応じて、呈色状態を増幅させる増幅溶液を展開する増幅手段とを備えている。したがって、本装置によれば、検査部位の呈色状態を測定し、この呈色状態に基づいて判定手段により増幅要否判定(第1の判定)を行い、増幅要否判定として増幅は不要である旨の判定が出された場合にはその呈色状態に基づいて有効性判定(第2の判定)を行い、増幅要否判定として増幅必要判定が出された場合にはその呈色状態を増幅し、増幅された呈色状態に基づいて有効性判定(第2の判定)を行うことができる。上記のように必要な場合にのみ増幅工程を実施することにより、不要な増幅工程の実施による検査時間の遅延や無駄な増幅溶液の消費、および使用者に過度の手間を取らせることを防止することができる。さらに、呈色状態の増幅によって検査ラインからの信号量を稼ぐことにより、検体溶液中の被験物質の濃度が低い等の場合においても検査結果が偽陰性とみなされることを防止することができる。この結果、アッセイ用デバイスを用いた検査においてより簡便かつ迅速に信頼性の高い検査結果を取得することが可能となる。
上記実施形態においては、呈色状態の増幅方法として銀イオン含有化合物を還元剤で還元することにより標識物質を増感させる方法を用いたが、本発明の増幅方法はこれに限定されない。増幅溶液は、含まれる薬剤が標識物質や被験物質の触媒作用によって反応することにより、呈色或いは発光する化合物などを生じ、シグナルの増幅を起こすことができる溶液であればよく、例えば上記したような酵素を用いた用液などが挙げられる。
図7は、本実施形態の測定装置2を示す概略断面図である。測定装置2は、第1の測定部40および/または第2の測定部50のイメージセンサによって取得した情報を、リアルタイムに画面表示部11に表示し、さらに当該情報を画像として記憶することができるように構成されている点で、第1の実施形態と異なる。したがって、その他の構成については、第1の実施形態と同様であるため、同様の構成についての詳細な説明は、特に必要のない限り省略する。
上記のように、本実施形態の測定装置2は、第1の測定部40および/または第2の測定部50のイメージセンサによって取得した情報を、リアルタイムに画面表示部11に表示し、さらに当該情報を画像として記憶することができるように構成されている。従来クロマト測定装置について、デバイスが装填されブラックボックスとなることにより、呈色反応の途中の進行状況がわからず次の準備ができない等の問題がある。しかし本発明により、使用者は、測定装置2内部をリアルタイムに見ることができるため、反応の進行状況を把握し易くなり、検査終了の判断をし易くなる。例えば、試薬によって定められた反応完了時間よりも短い時間で呈色を確認できた場合には、使用者はその時点で検査終了の判断をすることができるため、検査の効率を高めることができる。
10 筐体
11 画面表示部
12 メニュー操作部
13 電源スイッチ
14 デバイス装填部
20 イムノクロマト用デバイス
21 不溶性担体
21a 検査部位
22 デバイス用筐体
23 溶液注入口
24 観察窓
25 情報表示部
30 制御部
32 判定部
34 動作モード選択部
36 記憶部
37 画像形成部
38 画像処理部
40、50 測定部
60 増幅溶液供給部
70 イムノクロマトグラフキット
90 検査画面
A、B テストライン
C コントロールライン
Claims (22)
- 被験物質に対する特異的結合物質が固定されたテストラインと、測定の終了時を判断するためのコントロールラインと、固定化された標識物質とを有する不溶性担体であって、前記被験物質を含有しうる検体溶液と該被験物質を標識する前記標識物質とが展開された不溶性担体の、前記テストラインおよび前記コントロールラインを含む検査部位の呈色状態を測定して、前記被験物質について検査するクロマトグラフ測定装置において、
前記呈色状態として光学濃度および色度を測定する測定手段と、
該測定手段により測定された前記光学濃度および前記色度に基づいて、前記被験物質の検査結果の有効性判定および増幅要否判定を行う判定手段と、
前記増幅要否判定による増幅が必要であるとの判定に応じて、前記呈色状態を増幅させる増幅溶液を展開する増幅手段とを備えたことを特徴とするクロマトグラフ測定装置。 - 前記判定手段が、前記テストラインおよび前記コントロールラインの少なくとも1つの前記光学濃度および前記色度が所定値に達しなかった場合に、増幅要否判定を増幅必要と判定するものであり、
前記増幅手段により増幅された前記呈色状態を測定して、前記被験物質について検査することを特徴とする請求項1に記載のクロマトグラフ測定装置。 - 所定の動作処理を装置に行わせるための動作モードを選択可能とする動作モード選択手段を備えたことを特徴とする請求項1または2に記載のクロマトグラフ測定装置。
- 前記動作モード選択手段が、選択可能な動作モードとして、
前記検体溶液を前記不溶性担体に点着してから予め設定された所定時間の経過時に、前記テストラインおよび前記コントロールラインの前記光学濃度および前記色度を前記測定手段に測定させ、
すべての前記ラインについての前記光学濃度および前記色度が所定値に達した場合には、前記判定手段に増幅要否判定を増幅不要と判定させて、増幅を行わず前記被験物質の検査結果について有効性判定を行わせ、
それ以外の場合には、前記判定手段に増幅要否判定を増幅必要と判定させて、前記増幅手段に前記呈色状態を増幅させ、増幅後、前記判定手段に前記被験物質の検査結果について有効性判定を行わせる動作モードを有することを特徴とする請求項3に記載のクロマトグラフ測定装置。 - 前記テストラインが2つ以上ある場合に、該2つ以上のテストラインの一部を検査対象として指定可能とする指定手段をさらに備え、
前記動作モード選択手段が、選択可能な動作モードとして、
前記検体溶液を前記不溶性担体に点着してから予め設定された所定時間の経過時に、前記テストラインおよび前記コントロールラインの前記光学濃度および前記色度を前記測定手段に測定させ、
前記指定手段に指定されたテストラインおよび前記コントロールラインについての前記光学濃度および前記色度が所定値に達した場合には、前記判定手段に増幅要否判定を増幅不要と判定させて、増幅を行わず前記被験物質の検査結果について有効性判定を行わせ、
それ以外の場合には、前記判定手段に増幅要否判定を増幅必要と判定させて、前記増幅手段に前記呈色状態を増幅させ、増幅後、前記判定手段に前記被験物質の検査結果について有効性判定を行わせる動作モードを有することを特徴とする請求項3に記載のクロマトグラフ測定装置。 - 前記被験物質についての検査結果を記憶する記憶手段をさらに備えたことを特徴とする請求項4または5に記載のクロマトグラフ測定装置。
- 前記記憶手段が、前記検査結果と、増幅前と増幅後のいずれの時点で該検査結果が得られたかを表示する識別記号とを関連付けて記憶するものであることを特徴とする請求項6に記載のクロマトグラフ測定装置。
- 前記記憶手段が、前記判定手段の有効性判定によって、前記所定時間が経過する前に前記被験物質の検査結果について有効である旨の判定が出された場合に、前記所定時間が経過する前に得られた前記検査結果を記憶するものであることを特徴とする請求項6に記載のクロマトグラフ測定装置。
- 前記記憶手段が、前記検査結果と、前記所定時間が経過する前に該検査結果が得られた旨を表示する識別記号とを関連付けて記憶するものであることを特徴とする請求項8に記載のクロマトグラフ測定装置。
- 前記検査結果と前記識別記号を表示する画面表示手段を備えたことを特徴とする請求項7または9いずれかに記載のクロマトグラフ測定装置。
- 前記判定手段が、前記テストラインおよび前記コントロールラインの少なくとも1つの増幅前の前記色度が増幅前の正常な色度と異なった場合に、有効性判定をエラーと判定するものであることを特徴とする請求項1から10いずれかに記載のクロマトグラフ測定装置。
- 前記判定手段が、前記テストラインおよび前記コントロールラインの少なくとも1つの増幅後の前記色度が増幅後の正常な色度と異なった場合に、有効性判定をエラーと判定するものであることを特徴とする請求項1から11いずれかに記載のクロマトグラフ測定装置。
- 前記判定手段が、前記不溶性担体の装置への装填直後に、前記コントロールラインの前記光学濃度および前記色度が所定値に達している場合に、有効性判定をエラーと判定するものであることを特徴とする請求項1から12いずれかに記載のクロマトグラフ測定装置。
- 前記判定手段が、前記テストラインおよび前記コントロールラインの少なくとも1つの増幅前の前記光学濃度の値に対する増幅後の前記光学濃度の値が、所定の値よりも小さい場合に、有効性判定をエラーと判定するものであることを特徴とする請求項1から13いずれかに記載のクロマトグラフ測定装置。
- 前記増幅手段が、銀イオン含有化合物を含む増幅溶液および銀イオンのための還元剤を用いて、銀イオンの還元により形成された銀微粒子を前記標識物質に沈着させることによって前記呈色状態を増幅するものであることを特徴とする請求項1から14いずれかに記載のクロマトグラフ測定装置。
- 被験物質に対する特異的結合物質が固定されたテストラインと、測定の終了時を判断するためのコントロールラインと、固定化された標識物質とを有する不溶性担体であって、前記被験物質を含有しうる検体溶液と該被験物質を標識する前記標識物質とが展開された不溶性担体の、前記テストラインおよび前記コントロールラインに捕捉された前記標識物質の呈色状態を測定して、前記被験物質について検査するクロマトグラフ測定方法において、
前記不溶性担体に前記検体溶液を点着してから所定時間が経過した時に測定された、前記呈色状態の光学濃度および色度に基づいて、前記呈色状態の増幅が必要であるか否かについて第1の判定を行い、
該第1の判定の結果、前記テストラインおよび前記コントロールラインの少なくとも1つの前記光学濃度および前記色度が所定値に達しなかったために、前記呈色状態の増幅が必要である旨の判定が出された場合に、
前記不溶性担体に洗浄液および増幅溶液を展開することにより、前記テストラインおよび前記コントロールラインを洗浄すると共に、前記呈色状態を増幅し、
増幅された前記呈色状態の光学濃度および色度を測定して、該光学濃度および該色度に基づき、検査の結果が有効であるか否かについて第2の判定を行うことを特徴とするクロマトグラフ測定方法。 - 前記所定時間が5分〜20分であることを特徴とする請求項16に記載のクロマトグラフ測定方法。
- 前記第2の判定を前記第1の判定後1分〜20分以内に行うことを特徴とする請求項16または17に記載のクロマトグラフ測定方法。
- 前記検体溶液の展開方向と洗浄液の展開方向との成す角が45度から170度であることを特徴とする請求項16から18いずれかに記載のクロマトグラフ測定方法。
- 前記不溶性担体が多孔性担体であることを特徴とする請求項16から19いずれかに記載のクロマトグラフ測定方法。
- 前記標識物質が金属コロイドであることを特徴とする請求項16から20いずれかに記載のクロマトグラフ測定方法。
- 前記金属コロイドが金コロイドであることを特徴とする請求項21に記載のクロマトグラフ測定方法。
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