CN109212183B - 一步法粪便血红蛋白快速检测试剂盒 - Google Patents

一步法粪便血红蛋白快速检测试剂盒 Download PDF

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Abstract

本发明提供了一步法粪便血红蛋白快速检测试剂盒，包含检测试剂盒壳体(2)、取样管(4)、过滤管(5)和检测试纸(6)，取样管(4)可插入检测试剂盒壳体(2)，取样管(4)与检测试剂盒壳体(2)活动连接，取样管(4)插入检测试剂盒壳体(2)时所述检测试剂盒壳体(2)内自上至下依次为取样管(4)、过滤管(5)和检测试纸(6)。本发明的样本可以一步处理完成，检测过程方便快捷，无需专门操作平台或者专业检测人员即可完成样本的处理。

Description

一步法粪便血红蛋白快速检测试剂盒
技术领域
本发明属于生物医药技术领域，特别涉及粪便血红蛋白检测。
背景技术
便隐血(FOB)是指人血红蛋白出现在大便里，消化道出血量很少，肉眼无法观察，并且红细胞被消化分解，显微镜也无法观察的一种临床表现，对消化道出血诊断具有重要的临床意义。便隐血试验是胃肠道出血性疾病早期诊断的常用方法，特别在消化道癌肿的筛查诊断方面有重要意义。目前便隐血试验主要有化学法和免疫法两种，化学法主要是利用血红蛋白中的亚铁血红素有类似过氧化物酶的活性，使氧化物分解释放出氧原子，氧化四甲基联苯胺指示剂，出现颜色变化的原理来检测血红蛋白，所以易受食物、药物干扰，特异性较低。常用的胶体金免疫层析法与化学法相比在灵敏度、特异性方面得到较大的提高，但该法只是一种定性(至多为半定量)的检测方法，还不能满足精确定量的需要。
现有检测方法中使用的试剂盒，在检测前样本需要专业人员与设备进行处理，使用不便。
发明内容
为了解决上述问题，本发明提供了一种粪便血红蛋白快速检测试剂盒，该试剂盒可以方便样本的检查前处理，取样后直接，样本直接插入本发明的粪便血红蛋白快速检测试剂盒中即可完成样本的处理。处理粪便血红蛋白快速检测试剂盒可以整体插入检测仪器中或者取下检测试纸插入现有检测仪器中完成检测例如微测生物科技的
Figure BDA0001793519930000011
系列荧光免疫分析仪，检测过程方便快捷，无需专门操作平台或者专业检测人员即可完成样本的处理。
根据本发明的一个方面，在一些实施方式中，提供一种一步法粪便血红蛋白快速检测试剂盒，包含检测试剂盒壳体、取样管、过滤管和检测试纸，取样管可插入检测试剂盒壳体，取样管与检测试剂盒壳体活动连接，取样管插入检测试剂盒壳体时所述检测试剂盒壳体内自上至下依次为取样管、过滤管和检测试纸。检测试纸为粪便血红蛋白检测试纸条，所述检测试纸包含荧光标记物结合垫、T线和C线，荧光标记物结合垫含量子点标记鼠抗血红蛋白单克隆抗体A，T线含有包被鼠抗血红蛋白单克隆抗体B，C线含有包被羊抗鼠多克隆抗体，上述抗体来源为珠海博美生物科技有限公司。本发明的取样管取样后直接插入检测试剂盒壳体内完成样本处理，处理完的样本直接滴到检测试纸上，可以使之用于光学检测。
根据本发明的一个方面，在一些实施方式中，提供一种一步法粪便血红蛋白快速检测试剂盒，检测试剂盒壳体顶面设有与取样管配合的进样孔，检测试剂盒壳体内设有用于稳固所述取样管的第一固定装置，检测试剂盒壳体内设有用于固定所述过滤管的第二固定装置，第一固定装置位于所述第二固定装置上方。
根据本发明的一个方面，在一些实施方式中，提供一种一步法粪便血红蛋白快速检测试剂盒，取样管包含腔管和螺纹杆，螺纹杆位于腔管底部，螺纹杆上设有螺纹。螺纹杆上设有螺纹，取样管上设有出液孔。
根据本发明的一个方面，在一些实施方式中，提供一种一步法粪便血红蛋白快速检测试剂盒，腔管内中部设有储液池，腔管内部设有穿刺杆，穿刺杆顶端突出腔管，所述穿刺杆可在腔管内上下滑动，腔管上部向内收边，腔管外边设有导向柱，所述进样孔旁设有与导向柱配合的导向通孔。由此，按压穿穿刺杆，使向下运动，刺破储液池后，储液池内液体向下流动，通过出液孔对粘在螺纹杆上的内样本进行冲洗。
根据本发明的一个方面，在一些实施方式中，提供一种一步法粪便血红蛋白快速检测试剂盒，储液池为夹层结构由两层薄片夹粪便稀释液组成，粪便稀释液为100μL的10mMPBS(PH 7.4)、0.02％NaN3，粪便稀释液稀释样品使待测物质浓度在试剂盒检测范围内。
根据本发明的一个方面，在一些实施方式中，提供一种一步法粪便血红蛋白快速检测试剂盒，过滤管为上下开口结构，过滤管中部设有玻璃纤维膜。经由储液池内液体冲洗后的样本液体可以通过玻璃纤维膜，可以实现间接混匀样本液体的目的。
根据本发明的一个方面，在一些实施方式中，提供一种一步法粪便血红蛋白快速检测试剂盒，检测试剂盒壳体一侧外壁设有检测孔，所述检测试剂盒壳体外壁还设有条形码或二维码，用以识别检测的试剂盒类别。
在一些实施例中，本发明的检测试剂盒可以整体放入检测仪器中检测，仅需稍加改造现有检测仪器即可建造方案可以是在原有检测仪器上开出一个适配检测试剂盒的腔体，检测头在位于适配检测孔处伸出即可。
根据本发明的一个方面，在一些实施方式中，提供一种一步法粪便血红蛋白快速检测试剂盒，检测试纸还设有托板，检测试纸和托板构成检测板。
根据本发明的一个方面，在一些实施方式中，提供一种一步法粪便血红蛋白快速检测试剂盒，检测试纸(检测板)使用卡扣与检测试剂盒壳体连接、检测试纸可从检测试剂盒壳体上拆下。拆下后可以直接插入现有检测仪器中完成检测。
根据本发明的一个方面，在一些实施方式中，提供一种一步法粪便血红蛋白快速检测试剂盒，出液孔孔位分布于腔管和螺纹杆连接处；或者螺纹为中空结构与腔管相通，出液孔分布螺纹上。
本发明的整体思路是将检测前的样本处理在一个试剂盒盒中一步完成处理，并且处理试剂盒可以整体放入改造后的检测仪器中或者取下检测试纸直接用现有检测仪器检测。
本发明提供的试剂盒还是一体式检测试剂盒具有能同时满足快速、灵敏、经济、定量、操作简单的粪便血红蛋白检测要求。一体式检测试剂盒(检测装置)：定量取样管获取样品直接插入检测装置加样孔，检测装置置入配套检测仪或是现有仪器即可，5～10分钟后检测仪自动检测，获得检测项目结果。
附图说明
图1是本发明一实施例中检测试剂盒的结构示意图；
图2是本发明一实施例中检测试剂盒的顶部结构示意图；
图3是本发明一实施例中试纸的结构示意图；
图4是本发明一实施例中取样管的局部放大的结构示意图；
图5是本发明另一实施例中取样管的局部放大的结构示意图；
图6是本发明一实施例中检测试剂盒的外部结构示意图；
图7是本发明一实施例中适配本发明的检测试剂盒的检测仪器中适配装置腔体结构示意图；
图8是本发明一实施例中带有适配本发明检测试剂盒腔体的检测仪器外部示意图。
具体实施方式
为了便于理解，以下将通过具体的附图、实施例对本发明进行详细地描述。需要特别指出的是，这些描述仅仅是示例性的描述，并不构成对本发明范围的限制。依据本说明书的论述，本发明的许多变化、改变对所属领域技术人员来说都是显而易见的。另外，本发明引用了公开文献，这些文献是为了更清楚地描述本发明，它们的全文内容均纳入本文进行参考，就好像它们的全文已经在本文中重复叙述过一样。
实施例1
如图1～4，6所示，本发明的一步法粪便血红蛋白快速检测试剂盒，包含检测试剂盒壳体2、取样管4、过滤管5和检测试纸6，取样管4可插入检测试剂盒壳体2，取样管4与检测试剂盒壳体2活动连接，取样管4插入检测试剂盒壳体2时所述检测试剂盒壳体2内自上至下依次为取样管4、过滤管5和检测试纸6。检测试纸6为粪便血红蛋白检测试纸条，检测试纸6包含荧光标记物结合垫、T线和C线，荧光标记物结合垫含量子点标记鼠抗血红蛋白单克隆抗体A，T线含有包被鼠抗血红蛋白单克隆抗体B，C线含有包被羊抗鼠多克隆抗体，抗体由珠海博美生物科技有限公司提供。本发明的取样管取样后直接插入检测试剂盒壳体内完成样本处理，处理完的样本直接滴到检测试纸上，可以之际用于光学检测。检测试剂盒壳体2顶面设有与所述取样管4配合的进样孔10，检测试剂盒壳体2内设有用于稳固所述取样管4的第一固定装置11，检测试剂盒壳体2内设有用于固定所述过滤管5的第二固定装置12，第一固定装置11位于所述第二固定装置12上方。取样管4包含腔管401和螺纹杆402，螺纹杆402位于腔管401底部。螺纹杆上设有螺纹，取样管上设有出液孔。螺纹杆是沾取固定量粪便样本，本取样管的螺纹杆沾取粪便样品10μL。腔管401内中部设有储液池405，腔管401内部设有穿刺杆406，穿刺杆406顶端突出腔管401，穿刺杆406可在腔管401内上下滑动，腔管401上部向内收边，腔管401外边设有导向柱407，进样孔10旁设有与导向柱407配合的导向通孔408。储液池为两头锡纸塑封。由此，按压穿穿刺杆，使向下运动，刺破储液池后，储液池内液体向下流动，通过出液孔404对样本进行冲洗。
储液池405为夹层结构由两层薄片夹粪便稀释液组成，粪便稀释液为100μL的10mMPBS(PH 7.4)、0.02％NaN3。过滤管5为上下开口结构，过滤管(5)中部设有玻璃纤维膜13。在取样装置是取样管取样粪便时。经由储液池内液体冲洗后的样本液体可以通过玻璃纤维膜，可以实现间接混匀样本液体的目的。检测试纸6还设有托板601。
检测试纸6使用卡扣与检测试剂盒壳体2连接、检测试纸6可从检测试剂盒壳体2上拆下。拆下后可以直接插入现有检测仪器中完成检测。
出液孔404孔位分布于腔管401和螺纹杆402连接处。
进样孔10和检测孔7在试剂检测装置未启用有锡纸塑封。主要保持内部干燥和不被污染。
检测试纸6和有托板601构成检测板
实施例2
如图5所示在实施例1的基础上螺纹403为中空结构与腔管401相通，出液孔(404)分布螺纹(403)上。
实施例3
如图7和8所示在实施例1的基础上本发明的检测试剂盒壳体2一侧外壁设有检测孔7，所述检测试剂盒壳体2外壁还设有条形码或二维码14。本发明的检测试剂盒可以整体放入适配的检测仪器1(如图8所示)中检测，本发明适配的检测仪器仅需稍加改造现有检测仪器(例如
Figure BDA0001793519930000051
系列荧光免疫分析仪)，改造方案可以式是在原有检测仪器上开出一个适配检测试剂盒的腔体3，腔体上设有条形码或二维码检测装置15，检测头701在位于适配检测孔7出伸出即可(如图7所示)，检测时检测头701插入检测试剂盒内进行光学检测。
实施例4使用方法
使用实施例1的试剂盒
1.使用取样管4上螺纹杆402在粪便样本上几个不同位置随机取样(注：约50mg)。
2.从检测试剂盒2的进样孔10处插入。按下取样管4中穿刺杆406圆柄刺破储液池405的塑封锡纸，粪便稀释液从出液孔流出，不断冲刷螺纹中的样品，随之样品进入过滤管。
3.样品经过滤管中玻璃纤维膜的过滤和间接混匀滴入检测板的样品孔中。
4.当粪便中含有血红蛋白，其余荧光标记物结合垫中量子点标记鼠抗血红蛋白单克隆抗体A进行抗原抗体特异性识别作用，形成血红蛋白-量子点标记鼠抗血红蛋白单克隆抗体A结合物，该结合物随着膜的毛细管作用迁移到检测区，与膜上的鼠抗血红蛋白单克隆抗体B起反应，形成鼠抗血红蛋白单克隆抗体B-血红蛋白-量子点标记鼠抗血红蛋白单克隆抗体A结合物，该结合物在紫外激发光的作用下发光，形成发光条带。无论样品中是否存在血红蛋白，当液面继续迁移至固定羊抗鼠多克隆抗体区带时，控制线(C线)区必定会在紫外激发光下出现一条发光条带。控制线(C线)区发光条带同时作为试剂的内控标准，有助于判定样本量是否足够或层析过程是否正常。
5.取下检测试纸(检测板)放入检测仪器中
Figure BDA0001793519930000052
系列荧光免疫分析仪。
6.到达预置检测时间(约5～10分钟)，检测仪依据内置判断标准对读取的检测线(T线)区有无发光转换成样品中是否含血红蛋白。含血红蛋白代表检测样本阳性，不含血红蛋白代表检测样本阴性。
粪便血红蛋白检测
用本发明的粪便血红蛋白快速检测试剂盒与商用检测试剂盒(商用检测卡)对60份粪便样品进行检测血红蛋白快速定量检测。
商用检测试剂盒(商用检测卡)：按照检测卡说明书进行取制样、加样并进行读取检测样本操作。
所得数据如下：
Figure BDA0001793519930000061
Figure BDA0001793519930000071
注：表中“+”代表检测阳性、“-”代表检测阴性。
对所得数据进行基础统计数据如下表：
Figure BDA0001793519930000072
其阳性符合率＝34/34*100％＝100.00％；阴性符合率＝25/26*100％＝96.15％；阳性预期值＝34/35*100％＝97.14％；阴性预期值＝25/25*100％＝100.00％；总符合率＝59/60*100％＝98.33％；Kappa一致性检验：Kappa值为0.9659,表示两检测试剂盒一致性较好。综上实验，可认为两种试剂盒测量粪便血红蛋白结果是等价的，可以相互替换。
可以看出本发明可以用于生物样本检测而不需要复杂的样本处理过程，更方便非专业人员的使用，如家庭用户或是非检验科医生的使用，同时专业人员使用也可以减少工作量可以快速大量的处理样本。
以上所述的仅是本发明的一些实施方式。对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明创造构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。

Claims (7)

1.一步法粪便血红蛋白快速检测试剂盒，其特征在于，包含检测试剂盒壳体(2)、取样管(4)、过滤管(5)和检测试纸(6)，所述取样管(4)可插入检测试剂盒壳体(2)，所述取样管(4)与检测试剂盒壳体(2)活动连接；
所述取样管(4)插入检测试剂盒壳体(2)时所述检测试剂盒壳体(2)内自上至下依次为
取样管(4)、过滤管(5)和检测试纸(6)；
所述检测试纸(6)，所述检测试纸(6)包含荧光标记物结合垫、T线和C线，所述荧光标记物结合垫含量子点标记鼠抗血红蛋白单克隆抗体A，T线含有包被鼠抗血红蛋白单克隆抗体B，C线含有包被羊抗鼠多克隆抗体；所述检测试剂盒壳体(2)顶面设有与所述取样管(4)配合的进样孔(10)，所述检测试剂盒壳体(2)内设有用于稳固所述取样管(4)的第一固定装置(11)，所述检测试剂盒壳体(2)内设有用于固定所述过滤管(5)的第二固定装置(12) ，所述第一固定装置(11)位于所述第二固定装置(12)上方；所述取样管(4)包含腔管(401)和螺纹杆(402)，所述螺纹杆(402)位于腔管(401)底部，所述螺纹杆上设有螺纹(403)，所述取样管(4)上设有出液孔(404) ；
所述腔管(401)内中部设有储液池(405)，所述腔管(401)内部设有穿刺杆(406)，穿刺杆(406)顶端突出腔管(401)，所述穿刺杆(406)可在腔管(401)内上下滑动，所述腔管(401)上部向内收边，所述腔管(401)外边设有导向柱(407)，所述进样孔(10)旁设有与导向柱(407)配合的导向通孔(408)。
2.根据权利要求1所述的一步法粪便血红蛋白快速检测试剂盒，其特征在于，所述储液池(405)为夹层结构由两层薄片夹粪便稀释液组成，所述粪便稀释液为100μL的20mM PBS(PH7.4)、0.5％BSA、0.2％Tween20、0.02％NaN3。
3.根据权利要求2所述的一步法粪便血红蛋白快速检测试剂盒，其特征在于，所述过滤管(5)为上下开口结构，所述过滤管(5)中部设有玻璃纤维膜(13)。
4.根据权利要求3所述的一步法粪便血红蛋白快速检测试剂盒，所述检测试剂盒壳体(2)一侧外壁设有检测孔(7)，所述检测试剂盒壳体(2)外壁还设有条形码或二维码(14)。
5.根据权利要求4所述的一步法粪便血红蛋白快速检测试剂盒，所述检测试纸(6)还设有托板(601)。
6.根据权利要求5所述的一步法粪便血红蛋白快速检测试剂盒，所述检测试纸(6)使用卡扣与检测试剂盒壳体(2)连接、所述检测试纸(6)可从检测试剂盒壳体(2)上拆下。
7.根据权利要求6所述的一步法粪便血红蛋白快速检测试剂盒，出液孔(404)孔位分布于腔管(401)和螺纹杆(402)连接处；或者所述螺纹(403)为中空结构与腔管(401)相通，所述出液孔(404)分布螺纹(403)上。
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