JP5040191B2 - マイクロインジェクション装置及び自動焦点調整方法 - Google Patents
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Description
光源から光が照射される前記細胞の画像を、レンズを通して該レンズの異なる焦点位置毎に撮像する細胞画像撮像手段と、
前記レンズの基準となる焦点位置において前記細胞画像撮像手段により撮像された前記細胞の画像である参照画像と、前記レンズの基準となる焦点位置とは異なる各焦点位置において前記細胞画像撮像手段により撮像された前記細胞の画像との差分画像に基づいて該細胞の状態を計測する細胞状態計測手段と
を備えたことを特徴とするマイクロインジェクション装置。
前記参照画像と、前記観測位置において前記第1の焦点位置検出手段により検出された前記第1の焦点位置を含む所定範囲内で前記第1の焦点間隔よりも狭い第2の焦点間隔の各焦点位置で前記細胞画像撮像手段により撮像された前記細胞の画像との差分画像に基づいて算出された、該第2の焦点間隔の各焦点位置に応じた微分総和分布が最小値を取る前記レンズの第2の焦点位置を検出する第2の焦点位置検出手段と
をさらに備えたことを特徴とする付記1、2又は3に記載のマイクロインジェクション装置。
光源から光が照射される前記細胞の画像を、前記レンズの異なる焦点位置毎に撮像する細胞画像撮像工程と、
前記レンズの基準となる焦点位置において前記細胞画像撮像工程により撮像された前記細胞の画像である参照画像と、前記レンズの基準となる焦点位置とは異なる各焦点位置において前記細胞画像撮像工程により撮像された前記細胞の画像との差分画像に基づいて該細胞の状態を計測する細胞状態計測工程と
を含んだことを特徴とする自動焦点調整方法。
前記参照画像と、前記観測位置において前記第1の焦点位置検出工程により検出された前記第1の焦点位置を含む所定範囲内で前記第1の焦点間隔よりも狭い第2の焦点間隔の各焦点位置で前記細胞画像撮像工程により撮像された前記細胞の画像との差分画像に基づいて算出された、該第2の焦点間隔の各焦点位置に応じた微分総和分布が最小値を取る前記レンズの第2の焦点位置を検出する第2の焦点位置検出工程と
をさらに含んだことを特徴とする付記7に記載の自動焦点調整方法。
110 シャーレステージ
121 インジェクタ
122 針
123 針制御ステージ
131 照明光源
132 対物レンズ
133 反射鏡
134 結像レンズ
135 CCDカメラ
136 操作部
137 表示部
138 対物レンズ駆動部
150 制御部
151 針駆動制御部
152 対物レンズ駆動制御部
153 シャーレステージ駆動制御部
154 インジェクション制御部
155 微分総和分布最大焦点位置算出部
156 微分総和分布最小焦点位置算出部
157 微分総和分布算出部
158 画像取得部
159 差分画像計算部
160 細胞有無判定部
161 シャーレ底面傾斜算出制御部
162 シャーレ底面傾斜算出部
200 シャーレ
Claims (5)
- 基底面上の細胞に突き刺した微細な針を通して該細胞に目的物を注入するマイクロインジェクション装置であって、
光源から光が照射される前記細胞の画像を、レンズを通して該レンズの異なる焦点位置毎に撮像する細胞画像撮像手段と、
前記レンズの基準となる焦点位置において前記細胞画像撮像手段により撮像された前記細胞の画像である参照画像と、前記レンズの基準となる焦点位置とは異なる各焦点位置において前記細胞画像撮像手段により撮像された前記細胞の画像との差分画像における前記参照画像の輝度に対する輝度の低さの度合い及び輝度が所定閾値以下となる領域の面積に基づいて該細胞の状態を計測する細胞状態計測手段と
を備えたことを特徴とするマイクロインジェクション装置。 - 前記細胞状態計測手段により前記細胞の状態が計測された前記基底面における観測位置において、前記参照画像と前記レンズの第1の焦点間隔の各焦点位置で前記細胞画像撮像手段により撮像された前記細胞の画像との差分画像に基づいて算出された、該第1の焦点間隔の焦点位置に応じた微分総和分布が最大値を取る前記レンズの第1の焦点位置を検出する第1の焦点位置検出手段と、
前記参照画像と、前記観測位置において前記第1の焦点位置検出手段により検出された前記第1の焦点位置を含む所定範囲内で前記第1の焦点間隔よりも狭い第2の焦点間隔の各焦点位置で前記細胞画像撮像手段により撮像された前記細胞の画像との差分画像に基づいて算出された、該第2の焦点間隔の各焦点位置に応じた微分総和分布が最小値を取る前記レンズの第2の焦点位置を検出する第2の焦点位置検出手段と
をさらに備えたことを特徴とする請求項1に記載のマイクロインジェクション装置。 - 前記基底面における少なくとも3箇所の前記観測位置において、前記第1の焦点位置検出手段により検出された前記第1の焦点位置に基づき前記第2の焦点位置検出手段により検出された前記第2の焦点位置に基づいて該基底面の傾斜を算出する基底面傾斜算出手段をさらに備えたことを特徴とする請求項2に記載のマイクロインジェクション装置。
- 前記基底面傾斜算出手段により算出された前記基底面の傾斜に応じて、前記観測位置に関わらず該基底面と前記針の先端との距離を一定に保持する距離保持手段をさらに備えたことを特徴とする請求項3に記載のマイクロインジェクション装置。
- レンズを通して視認可能な基底面上の細胞に突き刺した微細な針を通して該細胞に目的物を注入するマイクロインジェクション装置において該細胞に対する該レンズの焦点を自動で調整する自動焦点調整方法であって、
光源から光が照射される前記細胞の画像を、前記レンズの異なる焦点位置毎に撮像する細胞画像撮像工程と、
前記レンズの基準となる焦点位置において前記細胞画像撮像工程により撮像された前記細胞の画像である参照画像と、前記レンズの基準となる焦点位置とは異なる各焦点位置において前記細胞画像撮像工程により撮像された前記細胞の画像との差分画像における前記参照画像の輝度に対する輝度の低さの度合い及び輝度が所定閾値以下となる領域の面積に基づいて該細胞の状態を計測する細胞状態計測工程と
を含んだことを特徴とする自動焦点調整方法。
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