JP4980222B2 - 組換えタンパク質製造を改良するための方法および組成物 - Google Patents
組換えタンパク質製造を改良するための方法および組成物 Download PDFInfo
- Publication number
- JP4980222B2 JP4980222B2 JP2007535779A JP2007535779A JP4980222B2 JP 4980222 B2 JP4980222 B2 JP 4980222B2 JP 2007535779 A JP2007535779 A JP 2007535779A JP 2007535779 A JP2007535779 A JP 2007535779A JP 4980222 B2 JP4980222 B2 JP 4980222B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- antibody
- nucleotide sequence
- nucleic acid
- acid molecule
- heavy chain
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/44—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material not provided for elsewhere, e.g. haptens, metals, DNA, RNA, amino acids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/67—General methods for enhancing the expression
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
- C07K2317/24—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin containing regions, domains or residues from different species, e.g. chimeric, humanized or veneered
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/52—Constant or Fc region; Isotype
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/52—Constant or Fc region; Isotype
- C07K2317/53—Hinge
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
- C07K2317/565—Complementarity determining region [CDR]
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2810/00—Vectors comprising a targeting moiety
- C12N2810/50—Vectors comprising as targeting moiety peptide derived from defined protein
- C12N2810/80—Vectors comprising as targeting moiety peptide derived from defined protein from vertebrates
- C12N2810/85—Vectors comprising as targeting moiety peptide derived from defined protein from vertebrates mammalian
- C12N2810/859—Vectors comprising as targeting moiety peptide derived from defined protein from vertebrates mammalian from immunoglobulins
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Immunology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Neurology (AREA)
- Neurosurgery (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Psychiatry (AREA)
- Hospice & Palliative Care (AREA)
- Mycology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Description
本出願は、2004年10月5日出願の米国特許出願第60/616,474号(その内容全体はここに引用することにより組み込まれる)に対する優先権を主張する。
本発明は、組換えタンパク質若しくはペプチドの発現および/若しくは製造を改良するための方法および組成物を提供する。一態様において、誤ってスプライスされたおよび/若しくはイントロンリードスルー副生成物を減少若しくは排除し、かつ/または組換えタンパク質の発現を高めるよう改変されている核酸分子が提供される。ある態様において、該核酸は組換え抗体(本明細書で免疫グロブリンともまた称される)若しくはそれらのフラグメントをコードする。
るための組成物および方法を提供する。例えば単位用量あたりの該分子の治療活性が維持されかつ精製が向上されるような、こうした抗体の完全性はとりわけ重要である。特化された機能、すなわち、ある種の生物学的適応症、例えば、治療的ポリペプチドが血液脳関門(BBB)を横断しかつ脳中の標的抗原を結合する神経変性状態の処置における使用に意図されるこうしたタンパク質の純度を向上させるための緊急の所望が存在する。本発明により製造される例示的一抗体は、神経変性疾患の標的、例えばアルツハイマー病のアミロイドタンパク質、すなわちアミロイドβペプチド(Aβ)を結合するための高純度で製造される抗体である。
イントロンを欠失させるよう改変される。例えば、免疫グロブリンH鎖定常領域のCH2とCH3の間のイントロンを欠失させ得る。個別に若しくは組合せで欠失させ得る他のH鎖免疫グロブリンイントロンの例は、H鎖可変領域と免疫グロブリンH鎖定常領域のCH1の間のイントロン、CH1とヒンジ領域の間のイントロン、およびヒンジ領域とCH2の間のイントロンを包含する。前述のイントロンの2、3個のイントロン、若しくは1個を除き全部までのイントロンの組合せを包含する、先行するイントロンのいずれの組合せも欠失させ得る。いくつかの態様において、H鎖定常領域の3個のイントロン、例えば、CH1とヒンジ領域の間のイントロン、ヒンジ領域とCH2の間のイントロン、およびCH2とCH3の間のイントロンを欠失させる。H鎖免疫グロブリンのイントロン欠失の以下の例示的組合せ、すなわち、免疫グロブリンH鎖定常領域のCH1とヒンジ領域の間のイントロン、およびCH2とCH3の間のイントロン;CH1とヒンジ領域の間のイントロン、およびヒンジ領域とCH2の間のイントロン;ヒンジ領域とCH2の間のイントロン、およびCH2とCH3の間のイントロンもまた本発明の範囲内にある。
VH−Int1−CH1−Int2−Hinge−Int3−CH2−Int4−CH3、
式中、VHはH鎖可変領域をコードするヌクレオチド配列であり;
CH1、CH2およびCH3は、対応するH鎖定常領域をコードするヌクレオチド配列、例えば天然に存在するか若しくは変異された形態のヒトIgG1若しくはIgG4 H鎖遺伝子であり;
Hingeは、H鎖定常領域のヒンジ領域をコードするヌクレオチド配列、例えば天然に存在するか若しくは変異された形態のヒトIgG1若しくはIgG4 H鎖遺伝子であり;ならびに
Int1、Int2、Int3およびInt4はH鎖ゲノム配列からのイントロンである、
により表されるヌクレオチド配列を包含する。一態様において、本明細書でInt4として表されるCH2とCH3の間のイントロンが欠失される。他の態様において、本明細書でInt2、Int3およびInt4として表される、CH1とヒンジ領域の間、ヒンジ領域とCH2の間、および/若しくはCH2とCH3の間のイントロンの1、2若しくは典型的には3個が欠失される。H鎖ゲノム配列のイントロン/エキソンの配置の付加的な図解を、図1、5および7に示す。
VH−Int1−CH1−Int2−Hinge−Int3−CH2−CH3、
式中、VHはH鎖可変領域をコードするヌクレオチド配列であり;
CH1、CH2およびCH3は、対応するH鎖定常領域をコードするヌクレオチド配列、例えば天然に存在するか若しくは変異された形態のヒトIgG1若しくはIgG4 H鎖遺伝子であり;
Hingeは、H鎖定常領域のヒンジ領域をコードするヌクレオチド配列、例えば天然に存在するか若しくは変異された形態のヒトIgG1若しくはIgG4 H鎖遺伝子であり
;ならびに
Int1、Int2およびInt3はH鎖ゲノム配列からのイントロンである、
により表されるヌクレオチド配列を包含する。一態様において、ヌクレオチド配列は、例えば構造若しくは機能を変える介在配列を伴わない、上で描かれた構成要素より本質的になる。
VH−Int1−CH1−Hinge−CH2−CH3、
式中、VHはH鎖可変領域をコードするヌクレオチド配列であり;
CH1、CH2およびCH3は、対応するH鎖定常領域をコードするヌクレオチド配列、例えば天然に存在するか若しくは変異された形態のヒトIgG1若しくはIgG4 H鎖遺伝子であり;
Hingeは、H鎖定常領域のヒンジ領域をコードするヌクレオチド配列、例えば天然に存在するか若しくは変異された形態のヒトIgG1若しくはIgG4 H鎖遺伝子であり;ならびに
Int1はH鎖ゲノム配列からのイントロンである、
により表されるヌクレオチド配列を包含する。一態様において、ヌクレオチド配列は、例えば構造若しくは機能を変える介在配列を伴わない、上に描かれた構成要素より本質的になる。
トIgG4のヒンジ領域とCH2の間のイントロンを包含する。前述のイントロンの2、3、4個のイントロン若しくは1個を除き全部までのイントロンの組合せを包含する、先行するイントロンのいかなる組合せも欠失し得る。いくつかの態様において、H鎖定常領域の3個のイントロン、例えば、CH1とヒンジ領域の間、ヒンジ領域とCH2の間、およびCH2とCH3の間のイントロンが欠失される。いくつかの態様において、核酸分子は、本明細書に開示されるヒトIgG1若しくはIgG4のエキソンのヌクレオチド配列の1種若しくはそれ以上およびイントロンのヌクレオチド配列の1種若しくはそれ以上(しかし全部ではない)、またはそれらに実質的に同一の配列を包含する。関連する一態様において、核酸分子は、本明細書に開示されるヒトIgG1若しくはIgG4のイントロンのヌクレオチド配列の1種若しくはそれ以上(しかし全部ではない)またはそれらに実質的に同一の配列に1個の欠失を有する。
若しくは実質的にヒトのフレームワーク領域を包含する。一態様において、核酸分子は、ヒト化抗Aβペプチド抗体のHおよびL鎖可変領域を包含する。
酸プローブと、該核酸サンプルおよびプローブのハイブリダイゼーションを可能にする条件下で接触させる段階;生じる複合体を、例えば該プローブ配列のPCR増幅により検出する段階をさらに包含し得る。イントロン配列に相補的な核酸プローブを含有するサンプル中の複合体、例えばPCR増幅産物の検出は、IRT若しくはIRT生成物の存在を暗示する。IRT生成物のレベルは例えば実施例1に記述されるとおり定量し得る。
多数のアプローチを発現ベクターの設計および構築に採用することができ、そして、該過程は、典型的に、合理的なレベルのタンパク質が産生される前に実質的な試行錯誤実験を必要とする。設計過程での重大な考慮は、ベクターの構築におけるイントロン配列の使用に関する。一アプローチにおいては、遺伝子配列全体を、それが天然に存在する(イントロンおよびエキソン双方の配列の完全な相補物を含有する)ように利用しうる。こうした場合、細胞内の翻訳後スプライシング機構がイントロン配列を摘出して該遺伝子のエキソン配列のみを含有する成熟mRNAを生じることができることが期待される。第二のアプローチは、遺伝子のcDNAのみに対応する配列を利用することである。この場合、スプライシング事象が起こらず、かつ、プレmRNA配列はタンパク質をコードする内容物(content)中のmRNA配列と実質的に同一であることが予測される。なお第三
の場合には、ベクター構築は、元の遺伝子配列を通常は伴わないイントロンの選択および配置を必要とする。
若しくは宿主細胞のゲノム中に組込まれうる。
ン若しくは抗体は抗原を特異的に結合する能力を有する。
89:10915(1989)を参照されたい)。
本発明の方法論は、不必要な若しくは望ましくない副生成物が検出される多様な抗体製造方法で応用可能である。とりわけ、該方法論は、製造されている抗体の配列が既知であるキメラおよびヒト化モノクローナル抗体のような組換え抗体の製造に応用可能である。
ヒト以外の免疫グロブリン若しくは抗体からの相補性決定領域(CDR)を包含する可変領域を指す。
ムワーク残基を含んでなる可変領域)を包含する。
314:446−449;およびShawら(1988)J.Natl.Cancer
Inst.80:1553−1559);Morrison,S.L.(1985)Science 299:1202−1207;Oiら(1986)BioTechniques 4:214;Winter 米国特許第5,225,539号明細書;Jonesら(1986)Nature 321:552−525;Verhoeyanら(1988)Science 239:1534;およびBeidlerら(1988)J.Immunol.141:4053−4060に記述されている方法を使用して製造し得る。
あるいは、免疫化に際して、内因性免疫グロブリン産生の非存在下でヒト抗体の完全なレパートリーを産生することが可能であるトランスジェニック動物(例えばマウス)を製
造することが今や可能である。例えば、キメラおよび生殖系列変異体マウスにおける抗体H鎖結合領域(JH)遺伝子のホモ接合性の欠失は、内因性抗体産生の完全な阻害をもたらすことが記述されている。こうした生殖系列変異体マウスへのヒト生殖系列免疫グロブリン遺伝子アレイの移入は、抗原攻撃に際してヒト抗体の産生をもたらす。例えば米国特許第6,150,584号;同第6,114,598号;および同第5,770,429号明細書を参照されたい。
二特異性抗体(BsAb)は、最低2種の異なるエピトープに対する結合特異性を有する抗体である。こうした抗体は、完全長抗体若しくは抗体フラグメント(例えばF(ab)’2二特異性抗体)に由来し得る。二特異性抗体の作成方法は当該技術分野で既知である。完全長二特異性抗体の伝統的製造は、2種の鎖が異なる特性を有する2種の免疫グロブリンH鎖−L鎖対の共発現に基づく(Millsteinら、Nature、305:537−539(1983))。免疫グロブリンHおよびL鎖の無作為な取り合わせ(assortment)のため、これらのハイブリドーマ(クアドローマ)は多様な抗体分子の潜在的混合物を生じる(第WO 93/08829号明細書およびTrauneckerら、EMBO J.、10:3655−3659(1991)中を参照されたい)。
一般に、本発明の抗体は、Aβペプチドを標的とすることによりアミロイド形成性疾患、とりわけアルツハイマー病を処置するための抗体を包含する。
質により定義若しくは特徴付けられている。例えば、アルツハイマー病を有する被験体若しくは患者において、βアミロイドタンパク質(例えば野性型、バリアント若しくは切断型βアミロイドタンパク質)がアミロイド沈着物の特徴付けるポリペプチド成分である。従って、アルツハイマー病は、例えば被験体若しくは患者の脳中の「Aβの沈着物を特徴とする疾患」若しくは「Aβの沈着物を伴う疾患」の一例である。「βアミロイドタンパク質」、「βアミロイドペプチド」、「βアミロイド」、「Aβ」および「Aβペプチド」という用語は本明細書で互換可能に使用される。「免疫原性剤」若しくは「免疫原」は、場合によってはアジュバントとともにの哺乳動物への投与に際してそれ自身に対する免疫学的応答を誘導することが可能である。
WO02/46237A3号明細書に記述されている。3D6および10D5の記述は、例えば、国際特許公開第WO02/088306A2号および国際特許公開第WO02/088307A2号明細書にもまた見出し得る。3D6はヒトβアミロイドペプチド中に位置するN末端エピトープ、具体的には残基1−5に特異的に結合するモノクローナル抗体(mAb)である。比較すれば、10D5は、ヒトβアミロイドペプチド中に位置するN末端エピトープ、具体的には残基3−6に特異的に結合するmAbである。別の態様において、該抗体は、米国特許公開第20040082762A1号および国際特許公開第WO03/077858A2号明細書に記述されるところの12B4抗体若しくはそのバリアントでありうる。12B4は、ヒトβアミロイドペプチド中に位置するN末端エピトープ、具体的には残基3−7に特異的に結合するmAbである。なお別の態様において、抗体は、米国特許出願第10/858,855号および国際特許出願第PCT/US04/17514号明細書に記述されるところの12A11抗体若しくはそのバリアントでありうる。12A11は、ヒトβアミロイドペプチド中に位置するN末端エピトープ、具体的には残基3−7に特異的に結合するmAbである。なお別の態様において、抗体は、米国特許出願第10/789,273号および国際特許出願第WO01/62801A2号明細書に記述されるところの266抗体でありうる。本発明での使用のためのヒトβアミロイドペプチド中に位置するC末端エピトープに特異的に結合するよう設計された抗体は、限定されるものでないが、米国特許第5,786,160号明細書に記述されるところの369.2Bを挙げることができる。
いくつかの態様において、本発明の核酸分子は融合若しくはキメラタンパク質をコードする。融合タンパク質はターゲッティング部分、例えば可溶性の受容体フラグメント若しくはリガンド、および免疫グロブリン鎖、Fcフラグメント、IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgM、IgA1、IgA2、IgDおよびIgEを包含する多様なアイソタイプのH鎖定常領域を包含し得る。例えば、融合タンパク質は、受容体の細胞外ドメインを包含し得、かつ、例えばヒト免疫グロブリンFc鎖(例えばヒトIgG、例えばヒトIgG1若しくはヒトIgG4、またはそれらの変異された形態)に融合され得る。一態様において、ヒトFc配列は、Fc受容体結合を減少させるために、野性型配列から1個若しくはそれ以上のアミノ酸で変異されて(例えば残基254および257で変異されて)いる。融合タンパク質は、第一の部分を第二の部分、例えば免疫グロブリンフラグメントに結合するリンカー配列を付加的に包含しうる。例えば、融合タンパク質は、ペプチドリンカー、例えば長さ約4ないし20、より好ましくは5ないし10アミノ酸のペプチドリンカーを包含し得;該ペプチドリンカーは長さ8アミノ酸である。例えば、融合タンパク質は、式(Ser−Gly−Gly−Gly−Gly)y(式中yは1、2、3、4、5、6、7若しくは8である)を有するペプチドリンカーを包含し得る。他の態様において、付加的なアミノ酸配列を、発現、立体的可撓性、検出および/または単離若しくは精製を助長するために、融合タンパク質のN若しくはC末端に付加し得る。
提供するための制限酵素消化、適切なようにの付着端の補填(filling−in)、望ましくない結合を回避するためのアルカリホスファターゼ処理、および酵素的ライゲーションにより、インフレームで一緒に連結する。別の態様において、融合遺伝子は自動DNA合成機を包含する慣習的技術により合成し得る。あるいは、遺伝子フラグメントのPCR増幅を、その後アニーリングしかつ再増幅してキメラ遺伝子配列を生成させ得る2個の連続する遺伝子フラグメント間に相補的オーバーハングを生じさせるアンカープライマーを使用して実施し得る(例えば、Ausubelら(編)Current Protcols in Molecular Biology、John Wiley & Sons、1992を参照されたい)。さらに、融合部分(例えば免疫グロブリンH鎖のFc領域)をコードする多くの発現ベクターが商業的に入手可能である。免疫グロブリン融合ポリペプチドは当該技術分野で既知であり、かつ、例えば米国特許第5,516,964号;同第5,225,538号;同第5,428,130号;同第5,514,582号;同第5,714,147号;および同第5,455,165号明細書に記述されている。
本発明の例示的態様は、不必要な若しくは望ましくない副生成物、とりわけ不必要な若しくは望ましくない抗体(若しくは免疫グロブリン)副生成物を排除するよう設計された、工作された構築物を特徴とする。ある局面において、構築物は天然に存在する抗体遺伝子配列の成分を包含し、該成分は、生じる構築物が不必要な若しくは望ましくない副生成物の非存在下で目的の所望のタンパク質(例えば抗体)を発現するような、遺伝子的に変えられ、改変され若しくは工作され(例えば遺伝子的に工作され)ている。構築物は、下に詳細に記述されるところの(例えば免疫グロブリン鎖遺伝子の成分を含んでなる)組換え核酸分子を製造するための技術に認識される技術を使用して生成させ得る。
変鎖リーダー配列)に効果的に連結し得る。
本発明の抗体は典型的に組換え発現により製造される。LおよびH鎖をコードする核酸を発現ベクターに挿入し得る。LおよびH鎖は同一若しくは異なる発現ベクターにクローン化し得る。免疫グロブリン鎖をコードするDNAセグメントを、免疫グロブリンポリペプチドの発現を確実にする発現ベクター(1種若しくは複数)中の制御配列に作動可能に
連結する。発現制御配列は、限定されるものでないが、プロモーター(例えば天然に関連する若しくは異種のプロモーター)、シグナル配列、エンハンサー要素および転写終止配列を挙げることができる。好ましくは、発現制御配列は、真核生物宿主細胞(例えばCOS若しくはCHO細胞)を形質転換若しくはトランスフェクトすることが可能なベクター中の真核生物プロモーター系である。
書を参照されたい)。免疫グロブリンDNAカセット配列、挿入物配列および制御配列に加え、本発明の組換え発現ベクターは、宿主細胞中での該ベクターの複製を調節する配列(例えば複製起点)および選択可能なマーカー遺伝子のような付加的な配列を運搬しうる。選択可能なマーカー遺伝子はベクターが導入された宿主細胞の選択を容易にする(例えば、米国特許第4,399,216号、同第4,634,665号および同第5,179,017号明細書(全部Axelらによる)を参照されたい)。例えば、典型的には、選択可能なマーカー遺伝子は、ベクターが導入された宿主細胞に、G418、ハイグロマイシン若しくはメトトレキセートのような薬物に対する耐性を賦与する。好ましい選択可能なマーカー遺伝子は、ジヒドロ葉酸還元酵素(DHFR)遺伝子(メトトレキセート選択/増幅とともにのdhfr−宿主細胞での使用のため)およびneo遺伝子(G418選択のため)を包含する。
)を包含する。適合性のIRES配列は米国特許第6,193,980号明細書(また本明細書に組み込まれる)に開示されている。
すなわちHAMAの証拠は、植物由来の分泌型二量体IgA抗体の局所経口適用を受領する患者で観察されていない(例えばLarrickら(1998)Res.Immunol.149:603−608を参照されたい)。
治療的タンパク質のためのタンパク質発現系の開発の間に、精製された標的生成物のHPLC分析がペプチドの期待されない低分子量(LMW)種を同定した。より具体的には、望ましくないポリペプチド副生成物が、3D6抗体を発現させるために開発したCHO(チャイニーズハムスター卵巣)細胞株で観察された。この抗体は別の場所に記述されており、そして、アルツハイマー病の処置に有用な免疫治療薬を開発するための努力の結果である。それはAβペプチドに対する特異性を有し、また、Aβ斑の消失において有効であることが示された。該CHO細胞株は、技術に認識された方法を使用して開発され、そして、発現カセット含有細胞の選択的培養のための遺伝子に加えて3D6抗体のHおよびL鎖のコピーを含有した。
本実施例を通じ、以下の本文に例示されるところの材料および方法を、別の方法で述べられない限り使用した:
一般に、本発明の実務は、分子生物学、組換えDNA技術、および免疫学、とりわけ例
えば抗体技術における技術に認識された技術を使用する。例えば、Sambrook、FritschとManiatis、Molecular Cloning:Cold Spring Harbor laboratory Press(1989);Antibody Engineering Protocols(Methods in Molecular Biology)、510、Paul,S.、Human Press(1996);Antibody Engineering:A Practical Approach(Practical Approach Series、169)、McCafferty編 IRL Press(1996);Antibodies:A
Laboratory Manual、Harlowら Cold Spring Harbor Press、(1999);およびCurrent Protocols in Molecular Biology Ausubelら編 John Wiley & Sons(1992)を参照されたい。
イントロンリードスルーにより形成される異常な転写物の相対量を定量するため、定量的PCRアッセイを設計した。IRT転写を評価するためのアプローチを図3に図で概説する。具体的には、定量的PCRアッセイを、PCR増幅を使用して目的の核酸種を定量したTaqMan3系を使用して考案した。3種のプローブ−プライマーの組を、産生されているイントロンリードスルーmRNAの画分を測定するよう設計した。第一のプローブ−プライマーの組は、目的のイントロンと天然の効果的関連にあるエキソンの配列の転写のレベルを定量するように設計した。3D6 H鎖発現カセットの場合には、3D6の第二の定常H鎖(CH2)エキソンを含有するmRNA種を標的とした。これは全3D6
mRNA産生の尺度を提供した。第二のプローブ−プライマーの組は、効果的関連にあるイントロンおよびエキソン(ここでは3D6発現カセットのCH2エキソン−第四のイントロンの界面)を架橋した。このプローブ−プライマーの組に由来する増幅は、5’スプライスドナー配列を含有するイントロンリードスルー転写物、ならびにCH2エキソンおよびイントロン4を架橋する配列の存在を示した。第三のプローブ−プライマーの組は第四のイントロンの配列を標的とした。このプローブ組は、内的イントロン4配列を含んでなる不正確にスプライスされたRNAの画分の定量を提供した。
なるタンパク質発現系にも応用可能であることが、当業者に容易に明らかであろう。例えば、該系は、いずれの真核生物細胞系、例えばサッカロミセス属(Saccharomyces)、ドロソフィラ属(Drosophila)、マウス、サル、ウサギ、ラット若しくはヒト細胞に基づく系とともにも使用しうる。
イントロンおよびエキソンの天然の効果的関連が改変された発現ベクターを考案した。2種の例示的ベクター配列を図5に示す。この図は、イントロンリードスルー副生成物の問題を解消するため開発された発現構築物を具体的に説明する。上図は、可変領域(VH)、3種の定常領域(CH1、CH2、CH3)およびヒンジ領域のエキソンを含有する包括的な抗体H鎖のゲノムすなわちイントロン−エキソンの構成を図で描く。中および下図は、イントロンリードスルーH鎖副生成物を排除した発現ベクターに組み込まれたゲノム配列に対する改変を記述する。
抗体発現に対するイントロン除去の影響を決定するため、抗体の発現構築物を、異なる数のイントロンを用いて創製した。12A11v3.1の可変領域をCHO細胞中で安定に発現させ、3種の定常領域発現構築物は、ゲノム配列、cDNA配列、ならびに3個のイントロンが欠失されたゲノム配列(すなわち、CH1とヒンジ領域の間のイントロン、ヒンジ領域とCH2の間のイントロン、およびCH2とCH3の間のイントロン)を含有した。12A11v3.1について、イントロンの除去は抗体発現の有意の増大を与えた。より具体的には、発現の約5倍の増大が、ゲノム配列に比較して12A11v3.1の3イントロン欠失構築物で検出された。cDNA配列を有する12A11v3.1構築物は、ゲノム配列に関して、発現の6倍を上回る増大を示した。一方、良好に発現された抗体は、典型的に、イントロン欠失配列とゲノム配列の間のCHO細胞の発現の有意の変化
を示さなかった。
Claims (29)
- 抗Aβ抗体H鎖をコードする組換え核酸分子であって、以下:
H鎖をコードするヌクレオチド配列中にある1個以上のイントロン、ならびに
可変領域をコードするエキソン、ヒンジ領域をコードするエキソン、第一の定常領域(CH1)をコードするエキソン、第二の定常領域(CH2)をコードするエキソン及び第三の定常領域(CH3)をコードするエキソン
を含んでなり、CH1とヒンジ領域との間のイントロン、ヒンジ領域とCH2との間のイントロン、およびCH2とCH3との間のイントロンが欠失されている、核酸分子。 - 可変領域がヒト化可変領域である、請求項1に記載の核酸分子。
- ヒト化可変領域が、マウス3D6抗体のH鎖可変領域、マウス12A11抗体のH鎖可変領域、マウス10D5抗体のH鎖可変領域またはマウス12B4抗体のH鎖可変領域に由来する相補性決定領域(CDR)を含んでなる、請求項2に記載の核酸分子。
- CDRがマウス3D6抗体のH鎖可変領域に由来する、請求項3に記載の核酸分子。
- 配列番号52のヌクレオチド配列を含んでなる、請求項4に記載の核酸分子。
- 配列番号37の残基20〜138のアミノ酸配列を含むヒト化可変領域をコードする、請求項2に記載の核酸分子。
- 抗体H鎖が、ヒト免疫グロブリンGサブタイプである、請求項1に記載の核酸分子。
- ヒト免疫グロブリンGサブタイプがヒトIgG1若しくはヒトIgG4である、請求項7に記載の核酸分子。
- ヒト免疫グロブリンGサブタイプがヒトIgG1である、請求項8に記載の核酸分子。
- ヒトIgG1若しくはヒトIgG4が変異されている、請求項8に記載の核酸分子。
- CH1をコードするエキソンが配列番号1のヌクレオチド配列のヌクレオチド230〜523と最低95%同一であるヌクレオチド配列を含み、ヒンジ領域をコードするエキソンが配列番号1のヌクレオチド配列のヌクレオチド915〜959と最低95%同一であるヌクレオチド配列を含み、CH2をコードするエキソンが配列番号1のヌクレオチド配列のヌクレオチド1078〜1407と最低95%同一であるヌクレオチド配列を含み、CH3をコードするエキソンが配列番号1のヌクレオチド配列のヌクレオチド1505〜1828と最低95%同一であるヌクレオチド配列を含んでなる、請求項1に記載の核酸分子。
- CH1をコードするエキソンが配列番号1のヌクレオチド配列のヌクレオチド230〜523のヌクレオチド配列を含み、ヒンジ領域をコードするエキソンが配列番号1のヌクレオチド配列のヌクレオチド915〜959のヌクレオチド配列を含み、CH2をコードするエキソンが配列番号1のヌクレオチド配列のヌクレオチド1078〜1407のヌクレオチド配列を含み、CH3をコードするエキソンが配列番号1のヌクレオチド配列のヌクレオチド1505〜1828のヌクレオチド配列を含んでなる、請求項11に記載の核酸分子。
- CH1をコードするエキソンが配列番号3のヌクレオチド配列のヌクレオチド230〜523と最低95%同一であるヌクレオチド配列を含み、ヒンジ領域をコードするエキソンが配列番号3のヌクレオチド配列のヌクレオチド916〜951と最低95%同一であるヌクレオチド配列を含み、CH2をコードするエキソンが配列番号3のヌクレオチド配列のヌクレオチド1070〜1399と最低95%同一であるヌクレオチド配列を含み、CH3をコードするエキソンが配列番号3のヌクレオチド配列のヌクレオチド1497〜1820と最低95%同一であるヌクレオチド配列を含んでなる、請求項1に記載の核酸分子。
- 式:
VH−Int1−CH1−Hinge−CH2−CH3
式中、VHはH鎖可変領域をコードするヌクレオチド配列であり;
CH1、CH2およびCH3は対応するH鎖定常領域をコードするヌクレオチド配列であり;
HingeはH鎖定常領域のヒンジ領域をコードするヌクレオチド配列であり;ならびに
Int1はH鎖ゲノム配列からのイントロンである、
により表されるヌクレオチド配列を含んでなる、請求項1に記載の核酸分子。 - H鎖可変領域がヒト化されている、請求項14に記載の核酸分子。
- ヒトIgG1 H鎖をコードする、請求項15に記載の核酸分子。
- 請求項1に記載の核酸分子を含んでなる発現カセット。
- 請求項1に記載の核酸分子を含んでなる発現ベクター。
- 宿主細胞中での複製、選択、mRNA転写、mRNAの安定性、タンパク質発現若しくはタンパク質分泌を高める1種若しくはそれ以上のヌクレオチド配列をさらに含んでなる、請求項18に記載の発現ベクター。
- 請求項1に記載の核酸分子を含んでなる宿主細胞。
- 抗Aβ抗体L鎖をコードする核酸分子をさらに含んでなる、請求項20に記載の宿主細胞。
- L鎖がヒト化可変領域を含んでなる、請求項21記載の宿主細胞。
- ヒト化可変領域が、マウス3D6抗体のL鎖可変領域、マウス12A11抗体のL鎖可変領域、マウス10D5抗体のL鎖可変領域またはマウス12B4抗体のL鎖可変領域に由来する相補性決定領域(CDR)を含んでなる、請求項22に記載の宿主細胞。
- CDRがマウス3D6抗体のL鎖可変領域に由来する、請求項23に記載の宿主細胞。
- 核酸が配列番号:42のアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードする、請求項24に記載の宿主細胞。
- 請求項17に記載の発現カセットを含んでなる、請求項20に記載の宿主細胞。
- 請求項18に記載の発現ベクターを含んでなる、請求項20に記載の宿主細胞。
- 哺乳動物細胞である、請求項20に記載の宿主細胞。
- チャイニーズハムスター卵巣(CHO)細胞である、請求項28に記載の宿主細胞。
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US61647404P | 2004-10-05 | 2004-10-05 | |
PCT/US2005/035854 WO2006041934A2 (en) | 2004-10-05 | 2005-10-05 | Methods and compositions for improving recombinant protein production |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2008515430A JP2008515430A (ja) | 2008-05-15 |
JP4980222B2 true JP4980222B2 (ja) | 2012-07-18 |
Family
ID=35710394
Family Applications (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2007535779A Expired - Fee Related JP4980222B2 (ja) | 2004-10-05 | 2005-10-05 | 組換えタンパク質製造を改良するための方法および組成物 |
JP2007535857A Ceased JP2008515438A (ja) | 2004-10-05 | 2005-10-05 | 組換えタンパク質産生の改善方法および組成物 |
Family Applications After (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2007535857A Ceased JP2008515438A (ja) | 2004-10-05 | 2005-10-05 | 組換えタンパク質産生の改善方法および組成物 |
Country Status (13)
Country | Link |
---|---|
US (3) | US7807804B2 (ja) |
EP (2) | EP1797182A2 (ja) |
JP (2) | JP4980222B2 (ja) |
KR (1) | KR20070073885A (ja) |
CN (2) | CN101287471B (ja) |
AU (2) | AU2005294131A1 (ja) |
BR (2) | BRPI0516264A (ja) |
CA (2) | CA2582157A1 (ja) |
EA (1) | EA200700751A1 (ja) |
IL (1) | IL182182A0 (ja) |
MX (2) | MX2007003906A (ja) |
WO (2) | WO2006042158A2 (ja) |
ZA (1) | ZA200703561B (ja) |
Families Citing this family (42)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20080050367A1 (en) * | 1998-04-07 | 2008-02-28 | Guriq Basi | Humanized antibodies that recognize beta amyloid peptide |
TWI239847B (en) | 1997-12-02 | 2005-09-21 | Elan Pharm Inc | N-terminal fragment of Abeta peptide and an adjuvant for preventing and treating amyloidogenic disease |
US7790856B2 (en) * | 1998-04-07 | 2010-09-07 | Janssen Alzheimer Immunotherapy | Humanized antibodies that recognize beta amyloid peptide |
US7964192B1 (en) | 1997-12-02 | 2011-06-21 | Janssen Alzheimer Immunotherapy | Prevention and treatment of amyloidgenic disease |
US7700751B2 (en) | 2000-12-06 | 2010-04-20 | Janssen Alzheimer Immunotherapy | Humanized antibodies that recognize β-amyloid peptide |
MY139983A (en) * | 2002-03-12 | 2009-11-30 | Janssen Alzheimer Immunotherap | Humanized antibodies that recognize beta amyloid peptide |
GB0300571D0 (en) * | 2003-01-10 | 2003-02-12 | Imp College Innovations Ltd | Modification of feeding behaviour |
DE10303974A1 (de) | 2003-01-31 | 2004-08-05 | Abbott Gmbh & Co. Kg | Amyloid-β(1-42)-Oligomere, Verfahren zu deren Herstellung und deren Verwendung |
WO2004069182A2 (en) * | 2003-02-01 | 2004-08-19 | Neuralab Limited | Active immunization to generate antibodies to soluble a-beta |
PE20050627A1 (es) * | 2003-05-30 | 2005-08-10 | Wyeth Corp | Anticuerpos humanizados que reconocen el peptido beta amiloideo |
JP4805848B2 (ja) | 2004-02-12 | 2011-11-02 | モルフォテック、インク. | 腫瘍抗原の生物活性を特異的に阻止するモノクローナル抗体 |
CA2582157A1 (en) | 2004-10-05 | 2006-04-20 | Wyeth | Methods and compositions for improving recombinant protein production |
EP1831365B1 (en) * | 2004-10-08 | 2013-08-07 | VIRxSYS Corporation | Use of rna trans-splicing for antibody gene transfer and antibody polypeptide production |
WO2006066089A1 (en) | 2004-12-15 | 2006-06-22 | Neuralab Limited | Humanized amyloid beta antibodies for use in improving cognition |
GT200600031A (es) * | 2005-01-28 | 2006-08-29 | Formulacion anticuerpo anti a beta | |
EP1879922A2 (en) | 2005-04-22 | 2008-01-23 | Morphotek, Inc. | Antibodies with immune effector activity and that internalize in folate receptor alpha-positive cells |
EP2388274A1 (en) * | 2005-06-17 | 2011-11-23 | Janssen Alzheimer Immunotherapy | Methods of purifying anti A Beta antibodies |
CN101506236B (zh) | 2005-11-30 | 2012-12-12 | 雅培制药有限公司 | 抗淀粉样β蛋白的单克隆抗体及其用途 |
BRPI0619249A2 (pt) | 2005-11-30 | 2011-09-20 | Abbott Lab | anticorpos anti-globulÈmeros-aß, frações que se ligam a antìgeno destes, hibridomas correspondentes, ácidos nucléicos, vetores, células hospedeiras, métodos de produzir os ditos anticorpos, composições compreendendo os ditos anticorpos, usos dos ditos anticorpos e métodos de usar os ditos anticorpos |
NZ571208A (en) * | 2006-03-10 | 2011-12-22 | Wyeth Corp | Anti-5T4 antibodies and uses thereof |
US8784810B2 (en) | 2006-04-18 | 2014-07-22 | Janssen Alzheimer Immunotherapy | Treatment of amyloidogenic diseases |
US8455626B2 (en) | 2006-11-30 | 2013-06-04 | Abbott Laboratories | Aβ conformer selective anti-aβ globulomer monoclonal antibodies |
EP2486928A1 (en) | 2007-02-27 | 2012-08-15 | Abbott GmbH & Co. KG | Method for the treatment of amyloidoses |
US8003097B2 (en) | 2007-04-18 | 2011-08-23 | Janssen Alzheimer Immunotherapy | Treatment of cerebral amyloid angiopathy |
US20130195881A1 (en) * | 2007-04-27 | 2013-08-01 | Sanjaya Singh | Potent, stable and non-immunosuppressive anti-cd4 antibodies |
EP3351557A1 (en) * | 2007-06-29 | 2018-07-25 | F. Hoffmann-La Roche AG | Heavy chain mutant leading to improved immunoglobulin production |
PL2182983T3 (pl) | 2007-07-27 | 2014-10-31 | Janssen Alzheimer Immunotherap | Leczenie chorób amyloidowych z wykorzystaniem humanizowanych przeciwciał specyficznych względem Abeta |
JO3076B1 (ar) * | 2007-10-17 | 2017-03-15 | Janssen Alzheimer Immunotherap | نظم العلاج المناعي المعتمد على حالة apoe |
US9067981B1 (en) | 2008-10-30 | 2015-06-30 | Janssen Sciences Ireland Uc | Hybrid amyloid-beta antibodies |
EP2496601B1 (en) * | 2009-11-05 | 2017-06-07 | F. Hoffmann-La Roche AG | Methods and composition for secretion of heterologous polypeptides |
MX360403B (es) | 2010-04-15 | 2018-10-31 | Abbvie Inc | Proteinas de union a amiloide beta. |
JP6147665B2 (ja) | 2010-08-14 | 2017-06-14 | アッヴィ・インコーポレイテッド | アミロイドベータ結合タンパク質 |
SG11201404354UA (en) * | 2012-02-17 | 2014-10-30 | Seattle Genetics Inc | ANTIBODIES TO INTEGRIN αVβ6 AND USE OF SAME TO TREAT CANCER |
CA2941687A1 (en) | 2014-03-14 | 2015-09-17 | Genentech, Inc. | Methods and compositions for secretion of heterologous polypeptides |
US20180148778A1 (en) * | 2014-12-16 | 2018-05-31 | Garvan Institute Of Medical Research | Sequencing controls |
US11623950B2 (en) * | 2015-07-09 | 2023-04-11 | Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale (Inserm) | Lentiviral vector expressing membrane-anchored or secreted antibody |
AU2020304841A1 (en) | 2019-06-28 | 2021-12-23 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Method for the production of an antibody |
MX2022006132A (es) | 2019-12-05 | 2022-06-17 | Seagen Inc | Anticuerpos anti alfa-v beta-6 (avb6) y conjugados de anticuerpo-farmaco. |
EP4179094A1 (en) * | 2020-07-08 | 2023-05-17 | Astrazeneca AB | Methods of improving protein expression |
JP2023535024A (ja) | 2020-07-23 | 2023-08-15 | オター プロシーナ リミテッド | 抗aベータ抗体 |
WO2023135519A1 (en) * | 2022-01-13 | 2023-07-20 | Astrazeneca Ab | Methods of improving protein expression |
CN116844637B (zh) * | 2023-07-07 | 2024-02-09 | 北京分子之心科技有限公司 | 一种获取第一源抗体序列对应的第二源蛋白质序列的方法与设备 |
Family Cites Families (57)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4704362A (en) | 1977-11-08 | 1987-11-03 | Genentech, Inc. | Recombinant cloning vehicle microbial polypeptide expression |
US4399216A (en) | 1980-02-25 | 1983-08-16 | The Trustees Of Columbia University | Processes for inserting DNA into eucaryotic cells and for producing proteinaceous materials |
US4634665A (en) | 1980-02-25 | 1987-01-06 | The Trustees Of Columbia University In The City Of New York | Processes for inserting DNA into eucaryotic cells and for producing proteinaceous materials |
US5179017A (en) | 1980-02-25 | 1993-01-12 | The Trustees Of Columbia University In The City Of New York | Processes for inserting DNA into eucaryotic cells and for producing proteinaceous materials |
EP0247091B1 (en) * | 1985-11-01 | 1993-09-29 | Xoma Corporation | Modular assembly of antibody genes, antibodies prepared thereby and use |
US5225539A (en) | 1986-03-27 | 1993-07-06 | Medical Research Council | Recombinant altered antibodies and methods of making altered antibodies |
EP0832981A1 (en) | 1987-02-17 | 1998-04-01 | Pharming B.V. | DNA sequences to target proteins to the mammary gland for efficient secretion |
WO1988007089A1 (en) | 1987-03-18 | 1988-09-22 | Medical Research Council | Altered antibodies |
US5530101A (en) * | 1988-12-28 | 1996-06-25 | Protein Design Labs, Inc. | Humanized immunoglobulins |
GB8905669D0 (en) | 1989-03-13 | 1989-04-26 | Celltech Ltd | Modified antibodies |
US5633076A (en) | 1989-12-01 | 1997-05-27 | Pharming Bv | Method of producing a transgenic bovine or transgenic bovine embryo |
US6075181A (en) * | 1990-01-12 | 2000-06-13 | Abgenix, Inc. | Human antibodies derived from immunized xenomice |
US6150141A (en) * | 1993-09-10 | 2000-11-21 | Trustees Of Boston University | Intron-mediated recombinant techniques and reagents |
US5827690A (en) | 1993-12-20 | 1998-10-27 | Genzyme Transgenics Corporatiion | Transgenic production of antibodies in milk |
GB9524973D0 (en) | 1995-12-06 | 1996-02-07 | Lynxvale Ltd | Viral vectors |
EP2305709A1 (en) * | 1997-04-09 | 2011-04-06 | Intellect Neurosciences, Inc. | Recombinant antibodies specific for beta-amyloid ends, DNA encoding and methods for use thereof |
US6710226B1 (en) * | 1997-12-02 | 2004-03-23 | Neuralab Limited | Transgenic mouse assay to determine the effect of Aβ antibodies and Aβ Fragments on alzheimer's disease characteristics |
US6905686B1 (en) * | 1997-12-02 | 2005-06-14 | Neuralab Limited | Active immunization for treatment of alzheimer's disease |
US7179892B2 (en) * | 2000-12-06 | 2007-02-20 | Neuralab Limited | Humanized antibodies that recognize beta amyloid peptide |
US6761888B1 (en) * | 2000-05-26 | 2004-07-13 | Neuralab Limited | Passive immunization treatment of Alzheimer's disease |
US7588766B1 (en) * | 2000-05-26 | 2009-09-15 | Elan Pharma International Limited | Treatment of amyloidogenic disease |
TWI239847B (en) * | 1997-12-02 | 2005-09-21 | Elan Pharm Inc | N-terminal fragment of Abeta peptide and an adjuvant for preventing and treating amyloidogenic disease |
US6750324B1 (en) * | 1997-12-02 | 2004-06-15 | Neuralab Limited | Humanized and chimeric N-terminal amyloid beta-antibodies |
US6913745B1 (en) * | 1997-12-02 | 2005-07-05 | Neuralab Limited | Passive immunization of Alzheimer's disease |
US6787523B1 (en) * | 1997-12-02 | 2004-09-07 | Neuralab Limited | Prevention and treatment of amyloidogenic disease |
US20080050367A1 (en) * | 1998-04-07 | 2008-02-28 | Guriq Basi | Humanized antibodies that recognize beta amyloid peptide |
US7964192B1 (en) * | 1997-12-02 | 2011-06-21 | Janssen Alzheimer Immunotherapy | Prevention and treatment of amyloidgenic disease |
US20050059802A1 (en) * | 1998-04-07 | 2005-03-17 | Neuralab Ltd | Prevention and treatment of amyloidogenic disease |
US20050059591A1 (en) * | 1998-04-07 | 2005-03-17 | Neuralab Limited | Prevention and treatment of amyloidogenic disease |
US6737056B1 (en) * | 1999-01-15 | 2004-05-18 | Genentech, Inc. | Polypeptide variants with altered effector function |
US6787637B1 (en) * | 1999-05-28 | 2004-09-07 | Neuralab Limited | N-Terminal amyloid-β antibodies |
CN101670105B (zh) * | 2000-02-24 | 2014-08-06 | 华盛顿大学 | 螯合淀粉样蛋白β肽的人源化抗体 |
PE20020574A1 (es) * | 2000-12-06 | 2002-07-02 | Wyeth Corp | Anticuerpos humanizados que reconocen el peptido amiloideo beta |
AU2002257162A1 (en) * | 2001-04-30 | 2002-11-11 | Eli Lilly And Company | Humanized antibodies |
MY139983A (en) * | 2002-03-12 | 2009-11-30 | Janssen Alzheimer Immunotherap | Humanized antibodies that recognize beta amyloid peptide |
CN100450551C (zh) * | 2002-11-29 | 2009-01-14 | 中国医学科学院基础医学研究所 | 用于治疗和预防阿尔茨海默病的重组腺相关病毒基因疫苗及其用途 |
WO2004069182A2 (en) * | 2003-02-01 | 2004-08-19 | Neuralab Limited | Active immunization to generate antibodies to soluble a-beta |
GB0304576D0 (en) * | 2003-02-28 | 2003-04-02 | Lonza Biologics Plc | Protein a chromatography |
PE20050627A1 (es) * | 2003-05-30 | 2005-08-10 | Wyeth Corp | Anticuerpos humanizados que reconocen el peptido beta amiloideo |
EP1648675A2 (en) * | 2003-05-30 | 2006-04-26 | Koppers Industries of Delaware, Inc. | Chopped carbon fiber preform processing method using coal tar pitch binder |
WO2005035753A1 (ja) * | 2003-10-10 | 2005-04-21 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | 機能蛋白質を代替する二重特異性抗体 |
HUE026000T2 (en) * | 2003-12-17 | 2016-04-28 | Wyeth Llc | Immunogenic peptide-bearing conjugates and methods for their preparation |
PL2336147T3 (pl) * | 2003-12-17 | 2015-01-30 | Janssen Alzheimer Immunotherap | Immunogenne koniugaty A beta z nośnikiem peptydowym i sposoby ich otrzymywania |
US7790956B2 (en) * | 2004-04-02 | 2010-09-07 | Cropdesign N.V. | Plants having improved growth characteristics and methods for making the same by modulating expression of a nucleic acid sequence encoding a NAP1-like protein |
CA2582157A1 (en) * | 2004-10-05 | 2006-04-20 | Wyeth | Methods and compositions for improving recombinant protein production |
US20060160161A1 (en) * | 2004-10-26 | 2006-07-20 | Elan Pharmaceuticals, Inc. | Methods for assessing antibodies to neurodegenerative disease-associated antigens |
WO2006066089A1 (en) * | 2004-12-15 | 2006-06-22 | Neuralab Limited | Humanized amyloid beta antibodies for use in improving cognition |
US20060240486A1 (en) * | 2004-12-15 | 2006-10-26 | Johnson-Wood Kelly L | Immunoprecipitation-based assay for predicting in vivo efficacy of beta-amyloid antibodies |
PE20061401A1 (es) * | 2004-12-15 | 2006-12-23 | Neuralab Ltd | ANTICUERPOS Aß PARA MEJORAR LA COGNICION |
US20060153772A1 (en) * | 2004-12-15 | 2006-07-13 | Wyeth | Contextual fear conditioning for predicting immunotherapeutic efficacy |
TW200636066A (en) * | 2004-12-15 | 2006-10-16 | Elan Pharm Inc | Humanized antibodies that recognize beta amyloid peptide |
AR052469A1 (es) * | 2005-01-28 | 2007-03-21 | Wyeth Corp | Formulaciones liquidas estabilizadas de polipeptido |
GT200600031A (es) * | 2005-01-28 | 2006-08-29 | Formulacion anticuerpo anti a beta | |
EP2388274A1 (en) * | 2005-06-17 | 2011-11-23 | Janssen Alzheimer Immunotherapy | Methods of purifying anti A Beta antibodies |
US8003097B2 (en) * | 2007-04-18 | 2011-08-23 | Janssen Alzheimer Immunotherapy | Treatment of cerebral amyloid angiopathy |
BRPI0810118A8 (pt) * | 2007-04-18 | 2015-09-29 | Janssen Alzheimer Immunotherap | Método para tratar doença, método para efetuar profilaxia contra caa, uso de um agente, método para reduzir amilóide vascular em um paciente, e, kit para tratamento |
JO3076B1 (ar) * | 2007-10-17 | 2017-03-15 | Janssen Alzheimer Immunotherap | نظم العلاج المناعي المعتمد على حالة apoe |
-
2005
- 2005-10-05 CA CA002582157A patent/CA2582157A1/en not_active Abandoned
- 2005-10-05 WO PCT/US2005/036247 patent/WO2006042158A2/en active Application Filing
- 2005-10-05 EP EP05803366A patent/EP1797182A2/en not_active Withdrawn
- 2005-10-05 AU AU2005294131A patent/AU2005294131A1/en not_active Abandoned
- 2005-10-05 BR BRPI0516264-5A patent/BRPI0516264A/pt not_active Application Discontinuation
- 2005-10-05 AU AU2005294373A patent/AU2005294373B2/en not_active Ceased
- 2005-10-05 EP EP05812436A patent/EP1828251B1/en active Active
- 2005-10-05 CN CN200580034045XA patent/CN101287471B/zh not_active Expired - Fee Related
- 2005-10-05 CA CA002582194A patent/CA2582194A1/en not_active Abandoned
- 2005-10-05 WO PCT/US2005/035854 patent/WO2006041934A2/en active Application Filing
- 2005-10-05 CN CNA2005800319406A patent/CN101027391A/zh active Pending
- 2005-10-05 US US11/244,678 patent/US7807804B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2005-10-05 ZA ZA200703561A patent/ZA200703561B/xx unknown
- 2005-10-05 MX MX2007003906A patent/MX2007003906A/es active IP Right Grant
- 2005-10-05 MX MX2007003856A patent/MX2007003856A/es not_active Application Discontinuation
- 2005-10-05 JP JP2007535779A patent/JP4980222B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2005-10-05 US US11/664,865 patent/US20090285806A1/en not_active Abandoned
- 2005-10-05 BR BRPI0516572-5A patent/BRPI0516572A/pt not_active IP Right Cessation
- 2005-10-05 JP JP2007535857A patent/JP2008515438A/ja not_active Ceased
- 2005-10-05 EA EA200700751A patent/EA200700751A1/ru unknown
- 2005-10-05 KR KR1020077010237A patent/KR20070073885A/ko not_active Application Discontinuation
-
2007
- 2007-03-26 IL IL182182A patent/IL182182A0/en unknown
-
2010
- 2010-09-24 US US12/889,623 patent/US20110038863A1/en not_active Abandoned
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN101287471B (zh) | 2012-10-03 |
WO2006041934A3 (en) | 2008-04-24 |
MX2007003906A (es) | 2007-05-21 |
EP1828251B1 (en) | 2012-09-26 |
EP1828251A4 (en) | 2009-01-21 |
WO2006041934A2 (en) | 2006-04-20 |
CA2582194A1 (en) | 2006-04-20 |
KR20070073885A (ko) | 2007-07-10 |
US7807804B2 (en) | 2010-10-05 |
CA2582157A1 (en) | 2006-04-20 |
WO2006042158A3 (en) | 2006-06-22 |
IL182182A0 (en) | 2007-07-24 |
ZA200703561B (en) | 2009-09-30 |
AU2005294373A1 (en) | 2006-04-20 |
EP1828251A2 (en) | 2007-09-05 |
US20060099206A1 (en) | 2006-05-11 |
US20110038863A1 (en) | 2011-02-17 |
BRPI0516264A (pt) | 2008-08-26 |
AU2005294131A1 (en) | 2006-04-20 |
EA200700751A1 (ru) | 2008-06-30 |
EP1797182A2 (en) | 2007-06-20 |
JP2008515438A (ja) | 2008-05-15 |
BRPI0516572A (pt) | 2008-09-16 |
AU2005294373B2 (en) | 2011-12-08 |
CN101027391A (zh) | 2007-08-29 |
MX2007003856A (es) | 2007-09-19 |
JP2008515430A (ja) | 2008-05-15 |
US20090285806A1 (en) | 2009-11-19 |
WO2006042158A2 (en) | 2006-04-20 |
CN101287471A (zh) | 2008-10-15 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP4980222B2 (ja) | 組換えタンパク質製造を改良するための方法および組成物 | |
WO2019149269A1 (zh) | 全人源的抗b细胞成熟抗原(bcma)单链抗体及其应用 | |
US7803618B2 (en) | Recombinant tumor specific antibody and use thereof | |
JP6952827B2 (ja) | 血液脳関門輸送分子およびそれらの使用 | |
EP4000632A1 (en) | Antibodies to alpha-synuclein and uses thereof | |
AU2002308562A1 (en) | Recombinant tumor specific antibody and use thereof | |
KR20120095343A (ko) | 대리 경쇄의 발현 | |
CN101189264A (zh) | M-csf特异性单克隆抗体及其应用 | |
KR102585324B1 (ko) | 항-fam19a5 항체의 아데노-연관 바이러스(aav) 전달 | |
WO2014052693A2 (en) | Veterinary composition and methods for non-surgical neutering and castration | |
JP7072077B2 (ja) | 自己免疫阻害剤及びその適用 | |
CN114555639A (zh) | 特异性识别白细胞介素-4受体α的抗体及其用途 | |
CN110494452A (zh) | 结合steap-1的抗体 | |
TW202241943A (zh) | Tau特異性抗體基因療法組合物、方法及其用途 | |
CN114364695A (zh) | 特异性识别c5a的抗体及其应用 | |
JP2022545925A (ja) | 抗tfpiモノクローナル抗体 | |
US20220227875A1 (en) | Vector-based therapy for thyroid disease | |
CN117003872A (zh) | 含有突变轻链可变区骨架的单链抗体片段 | |
KR20230118864A (ko) | 항원 결합 분자 및 이의 용도 | |
WO2023118241A1 (en) | Anti-canine interleukine-31-receptor a (il-31ra) antibodies and the uses thereof |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A821 Effective date: 20080118 |
|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20080924 |
|
A711 | Notification of change in applicant |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A711 Effective date: 20100309 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20110510 |
|
A256 | Written notification of co-pending application filed on the same date by different applicants |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A2516 Effective date: 20110510 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20110809 |
|
A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20110816 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20110901 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20111206 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20120302 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20120327 |
|
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20120418 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20150427 Year of fee payment: 3 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |