JP4806353B2 - ポリ（ａｄｐ−リボース）ポリメラーゼインヒビターとしての６−置換２−キノリノンおよび２−キノキサリノン - Google Patents

Description

発明の分野
本発明は、ＰＡＲＰのインヒビターに関し、そして化合物および開示する化合物を含有する組成物を提供する。さらに本発明は開示するＰＡＲＰインヒビターを例えば薬剤として使用する方法を提供する。

発明の背景
核酵素であるポリ（ＡＤＰ−リボース）ポリメラーゼ−１（ＰＡＲＰ−１）は、ＰＡＲＰ−１および最近同定された幾つかの新規ポリ（ＡＤＰ−リボシル化）酵素からなるＰＡＲＰ酵素ファミリーのメンバーである。またＰＡＲＰはポリ（アデノシン５’−ジホスホ−リボース）ポリメラーゼまたはＰＡＲＳ（ポリ（ＡＤＰ−リボース）シンセターゼ）とも呼ばれている。

ＰＡＲＰ−１は３つのドメイン：２つのジンクフィンガーを含有するＮ−末端ＤＮＡ結合ドメイン、自己修飾（ａｕｔｏｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎ）ドメインおよびＣ−末端触媒ドメインからなる１１６ｋＤａの主要核タンパク質である。これはほとんどすべての真核生物に存在する。この酵素は、２００を越えるＡＤＰ−リボース単位からなることができる分枝ポリマーであるポリ（ＡＤＰ−リボース）を合成する。ポリ（ＡＤＰ−リボース）のタンパク質受容体は、直接または間接的にＤＮＡの完全性の維持に関与する。それらにはヒストン、トポイソメラーゼ、ＤＮＡおよびＲＮＡポリメラーゼ、ＤＮＡリガーゼおよびＣａ^２＋−およびＭｇ^２＋−依存的エンドヌクレアーゼがある。ＰＡＲＰタンパク質は多くの組織、最も顕著には免疫系、心臓、脳および生殖系細胞で高レベルに発現される。正常な生理学的条件下では、ＰＡＲＰ活性は最小である。しかしＤＮＡの損傷は、最高５００倍ものＰＡＲＰの即座の活性化を引き起こす。

ＰＡＲＰ、そして特にＰＡＲＰ−１に起因する多くの機能の中でも、ＡＤＰ−リボシル化、それ故に多くのＤＮＡ修復タンパク質の協調によりＤＮＡ修復を促進することがその主な役割である。ＰＡＲＰ活性化の結果として、ＮＡＤ^＋レベルは有意に下がる。徹底的なＰＡＲＰの活性化は、大きなＤＮＡ損傷を受けた細胞中のＮＡＤ^＋にかなりの消耗を生じる。ポリ（ＡＤＰ−リボース）の短い半減期は、迅速な代謝回転速度をもたらす。いったんポリ（ＡＤＰ−リボース）が形成されれば、これはホスホジエステラーゼおよび（ＡＤＰ−リボース）タンパク質リアーゼと一緒になって構成的に活性なポリ（ＡＤＰ−リボース）グリコヒドロラーゼ（ＰＡＲＧ）により素早く分解される。ＰＡＲＰおよびＰＡＲＧは、大量のＮＡＤ^＋をＡＤＰ−リボースに転換するサイクルを形成する。１時間以内に、ＰＡＲＰの過剰刺激はＮＡＤ^＋およびＡＴＰを正常レべルの２０％未満に低下させる可能性がある。そのようなシナリオは、酸素の欠乏がすでに細胞のエネルギー出力に劇的な障害をきたしている場合、虚血状態では特に有害である。続いて再潅流中のフリーラジカル生産が組織傷害の主な原因と考えられる。虚血および再潅流中に多くの臓器で典型的なＡＴＰ低下の一部は、ポリ（ＡＤＰ−リボース）の代謝回転によるＮＡＤ^＋消耗と結び付く。すなわちＰＡＲＰまたはＰＡＲＧ阻害は細胞のエネルギーレベルを保存すると予想され、これにより傷害後の虚血性組織の生存の可能性を上げる。

またポリ（ＡＤＰ−リボース）合成は、炎症応答に必須な数々の遺伝子の誘導型発現にも関与している。ＰＡＲＰインヒビターは、マクロファージでの誘導性酸化窒素シンターゼ（ｉＮＯｓ）、内皮細胞でのＰ−型セレクチンおよび細胞間接着分子−１（ＩＣＡＭ−
１）の生産を抑制する。そのような活性はＰＡＲＰインヒビターにより現される強い抗炎症効果の下にある。ＰＡＲＰ阻害は好中球の傷害組織への移動および侵襲を防止することにより壊死を減少させることができる。

ＰＡＲＰは損傷したＤＮＡフラグメントにより活性化され、そしていったん活性化されると、最高１００個のＡＤＰ−リボース単位の、ヒストンおよびＰＡＲＰ自体を含む種々の核タンパク質への結合を触媒する。主な細胞ストレス中に、ＰＡＲＰの徹底的な活性化は貯蔵エネルギーの消費を介して細胞の傷害または死を迅速に導く恐れがある。１分子のＮＡＤ^＋が再生されるたびに、４分子のＡＴＰが消費されるので、ＮＡＤ^＋はＮＡＤ^＋を再合成する反応において激しいＰＡＲＰの活性化により消費され、ＡＴＰも消費され得るようになる。

ＰＡＲＰ活性化はＮＭＤＡ−およびＮＯ−誘導型の両方の神経毒性に重要な役割を果たすことが報告された。これは毒性の防止がＰＡＲＰ阻害能力と直接的に相関する皮質カルチャーおよび海馬スライスで証明された。このようにたとえ正確な作用機作が解明されていなくても、神経変性疾患および頭部外傷の処置におけるＰＡＲＰインヒビターの潜在的役割が認識されてきた。

同様に、ＰＡＲＰインヒビターの単回注射がウサギにおける心臓または骨格筋の虚血および再潅流により生じる閉塞サイズを減少させることが証明された。これらの実験では、３−アミノ−ベンズアミド（１０ｍｇ／ｋｇ）の単回注射が閉塞の１分前または再潅流の１分前のいずれでも心臓の梗塞サイズに類似の減少を生じる（３２〜４２％）と同時に、別のＰＡＲＰインヒビターである１，５−ジヒドロキシイソキノリン（１ｍｇ／ｋｇ）も匹敵する程度まで梗塞サイズを減少した（３８〜４８％）。これらの結果は、ＰＡＲＰインヒビターが虚血の心臓を、または骨格筋組織の再潅流損傷を事前に救済できるという予想を合理的なものとする。

またＰＡＲＰ活性化は、脳卒中、アルツハイマー病およびパーキンソン病のような生理学的状態に関与するグルタメート（ＮＭＤＡ受容体刺激を介して）、反応性酸素中間体、アミロイドβ−タンパク質、Ｎ−メチル−４−フェニル−１，２，３，６−テトラヒドロピリジン（ＭＰＴＰ）またはその活性な代謝産物Ｎ−メチル−４−フェニルピリジン（ＭＰＰ^＋）のような任意のインデューサーへの暴露から生じる神経毒性的傷害後の傷害の尺度としても使用することができる。他の研究もインビトロの小脳顆粒細胞における、およびＭＰＴＰ神経毒性におけるＰＡＲＰ活性化の役割を解明するために続けられた。有力な中枢神経系の神経伝達物質として役立ち、そしてＮ−メチルＤ−アスパラギン酸（ＮＭＤＡ）受容体および他のサブタイプ受容体に作用するグルタメートへの過剰な神経の暴露は、最も多くは脳卒中または他の神経変性プロセスの結果として起こる。脳卒中または心臓発作中のような虚血性の脳傷害中に、酸素が欠乏したニューロンはグルタメートを大量に放出する。この過剰なグルタメートの放出は、次いでニューロンの過剰刺激を導くイオンチャンネルを開き、そして制御されていないイオン流（例えば細胞へのＣａ^２＋およびＮａ^＋の、および細胞からのＫ^＋）を可能とするＮ−メチル−Ｄ−アスパラギン酸（ＮＭＤＡ）、ＡＭＰＡ、カイニン酸およびＭＧＲ受容体の過剰刺激（興奮毒性）を引き起こす。過剰に刺激されたニューロンはさらにグルタメートを分泌し、最終的にプロテアーゼ、リパーゼおよびフリーラジカルの生産を介して細胞傷害または死をもたらすフィードバックループまたはドミノ効果を生成する。グルタミン酸受容体の過剰な活性化は、癲癇、脳卒中、アルツハイマー病、パーキンソン病、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）、ハンチントン病、統合失調症、慢性疼痛、虚血、および低酸素、低血糖、虚血、外傷および神経傷害後のニューロン損失を含む種々の神経学的疾患および状態と結び付けられてきた。またグルタメートの暴露および刺激は、強迫性障害（ｃｏｍｐｕｌｓｉｖｅ ｄｉｓｏｒｄｅｒ）、特に薬物依存の基礎と関係してきた。この証拠には多くの動物種での知見、ならびにグ
ルタメートまたは血管発作（ｖａｓｃｕｌａｒ ｓｔｒｏｋｅ）後に神経傷害を遮断するグルタミン酸受容体アンタゴニスト（すなわち、グルタメートがその受容体に結合するか、または活性化することを遮断する）であるＮＭＤＡで処置した大脳皮質カルチャーでの知見を含む。ＮＭＤＡ、ＡＭＰＡ、カイニン酸およびＭＧＲ受容体を遮断することにより興奮毒性を防止する試みは、各受容体がグルタメートが結合できる多くの部位を有するので難しいことが明らかとなり、したがってグルタメートがすべての受容体に結合することを防止し、そしてこの理論を試験することを可能にするアンタゴニストまたは汎用的アンタゴニストの効果的混合を見いだすことは困難であった。さらに受容体の遮断に効果的な多くの組成物は、動物にも毒性である。このように現在、グルタメート異常（ｇｌｕｔａｍａｔｅ ａｂｎｏｒｍａｌｉｔｙ）に関する効果的な処置は知られていない。

グルタメートによるＮＭＤＡ受容体の刺激は、例えば酵素であるニューロンの酸化窒素シンターゼ（ｎＮＯＳ）を活性化し、酸化窒素（ＮＯ）の形成を導き、これも神経毒性を媒介する。ＮＭＤＡの神経毒性は、酸化窒素シンターゼ（ＮＯＳ）インヒビターでの処置により、またはインビトロでのｎＮＯＳの標的化された遺伝子破壊を介して防ぐことができる。

ＰＡＲＰインヒビターの別の用途は末梢神経損傷、および総座骨神経（ｃｏｍｍｏｎ ｓｃｉａｔｉｃ ｎｅｒｖｅ）の慢性絞扼性神経損傷（ＣＣＩ）により誘導され、そしてそこに細胞質および核質の過染色性を特徴とする脊髄後角の経シナプス改変（いわゆる“ダーク（ｄａｒｋ）”ニューロン）が生じるような神経傷害疼痛として知られている生じた病理的疼痛症候群の処置である。

またＰＡＲＰインヒビターが結腸炎のような炎症性腸障害を処置するために有用である証拠も存在する。具体的にはラットにおいて結腸炎は、５０％エタノール中のハプテントリニトロベンゼンスルホン酸の管腔内投与により誘導された。処置したラットは３−アミノベンズアミド（ＰＡＲＰ活性の特異的インヒビター）を受けた。ＰＡＲＰ活性の阻害は炎症性応答を減少させ、そして遠位結腸の形態およびエネルギー状態を回復した。

さらなる証拠は、ＰＡＲＰインヒビターが関節炎の処置に有用であることを示唆する。さらにＰＡＲＰインヒビターは糖尿病の処置に有用と思われる。ＰＡＲＰインヒビターは内毒素ショックまたは敗血症ショックを処置するために有用であることが示された。

またＰＡＲＰインヒビターは、皮膚の老化、アルツハイマー病、アテローム硬化症、変形性関節炎、骨粗鬆症、筋ジストロフィー、細胞老化（ｒｅｐｌｉｃａｔｉｖｅ ｓｅｎｅｓｃｅｎｃｅ）が関与する骨格筋の変性疾患、加齢に関係する筋肉変性、免疫老化、ＡＩＤＳおよび他の免疫老化疾患のような疾患の処置を含め、細胞の寿命および増殖能力を延ばすために；ならびに老化細胞の遺伝子発現を改変するために使用されてきた。

また３−アミノベンズアミドのようなＰＡＲＰインヒビターは、例えば過酸化水素または電離放射線に対する応答において、全体的なＤＮＡ修復に影響を及ぼすことも知られている。

ＤＮＡ鎖の破壊の修復におけるＰＡＲＰの中枢的役割は、特に電離放射線により直接的に、またはメチル化剤、トポイソメラーゼＩインヒビターおよびシスプラチンおよびブレオマイシンのような他の化学治療剤により誘導されるＤＮＡ損傷の酵素的修復後に間接的に生じる場合、十分に確立されている。「ノックアウトマウス」、トランス−ドミナント阻害モデル（ＤＮＡ−結合ドメインの過剰発現）、アンチセンスおよび低分子量インヒビターを使用した様々な実験が、ＤＮＡ傷害誘導後の修復および細胞生存におけるＰＡＲＰの役割を証明した。ＰＡＲＰの酵素的活性の阻害は、ＤＮＡを損傷する処置に向けられた
腫瘍細胞の感受性の強化を導くはずである。

ＰＡＲＰインヒビターは（低酸素）腫瘍細胞の放射線増感に効果的であり、そして恐らくＤＮＡ鎖の破壊が再結合することを防止する能力により、そして幾つかのＤＮＡ傷害シグナル伝達経路に影響を及ぼすことにより、腫瘍細胞が放射線治療後にＤＮＡの潜在的に致死的な、および致死未満の傷害から回復することを防ぐために効果的であることが報告された。

ＰＡＲＰインヒビターは、ガンを処置するために使用されてきた。加えて特許文献１は、電離放射線または化学治療薬の腫瘍細胞に及ぼす致死的効果を強化するために使用された数種のイソキノリンについて検討している。Ｗｅｌｔｉｎ ｅｔ ａｌ．の「６（５−フェナントリジノン、ポリ（ＡＤＰ−リボース）ポリメラーゼのインヒビターが培養した腫瘍細胞に及ぼす効果」、非特許文献１は、ＰＡＲＰ活性の阻害、腫瘍細胞の低下した増殖、および腫瘍細胞をアルキル化剤で同時処置した時の顕著な相乗効果を検討している。

この技術の現状に関する最近の包括的見解が非特許文献２に公開された。

効果的および有効なＰＡＲＰインヒビター、そしてさらに詳細には最少の副作用を生じるＰＡＲＰ−１インヒビターの必要性が今なお存在する。本発明はガンを処置し、かつ／または細胞傷害または例えば壊死もしくはアポトーシスによる死から生じる細胞、組織および／または臓器の傷害を防止するためにＰＡＲＰ活性を阻害するための化合物、組成物および方法を提供する。本発明の化合物および組成物は、処置の主要な効果が標的細胞のＤＮＡに傷害を引き起こすことである化学療法および放射線療法の効果を強化するために特に有用である。

従来技術の背景
１９９０年６月６日に公開された特許文献２は、（１Ｈ−アゾール−１−イルメチル）置換キノリン、キナゾリンまたはキノキサリン誘導体を開示する。記載された化合物は、レチン酸の血漿排除を抑制する。より詳細には、化合物３−エチル−６−［２−メチル−１−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）プロピル］−２（１Ｈ）−キノキサリノン（本出願の化合物番号２０）、３−エチル−６−［１−（１Ｈ−イミダゾール−１−イル）−２−メチルプロピル］−２（１Ｈ）−キノキサリノン（本出願の化合物番号２１）、６−［２−メチル−１−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）プロピル］−３−（２−チエニル）−２（１Ｈ）−キノキサリノン（本出願の化合物番号２２）、６−［２−メチル−１−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）プロピル］−３−（チエニル）−２（１Ｈ）−キノキサリノン（本出願の化合物番号２３）、６−［１−（１Ｈ−イミダゾール−１−イル）−２−メチルプロピル］−３−（３−チエニル）−２（１Ｈ）−キノキサリノン（本出願の化合物番号２４）、および６−［１−（１Ｈ−イミダゾール−１−イル）ペンチル］−３−メチル−２（１Ｈ）−キノキサリノン（本出願の化合物番号２５）が開示された。
参考文献
米国特許第５，１７７，０７５号明細書 欧州特許第３７１５６４号明細書 Ｏｎｃｏｌ．Ｒｅｓ．，６：９，３９９−４０３，１９９４ Ｌｉ ａｎｄ Ｚｈａｎｇ，Ｄｒｕｇｓ，４（７）：８０４−８１２，２００１

発明の記載
本発明は、式（Ｉ）

［式中、
ｎは０、１または２であり；
ＸはＮまたはＣＲ^５であり、ここでＲ^５は水素であるか、またはＲ^１と一緒になって式−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ＝ＣＨ−の二価の基を形成することができ；
Ｒ^１はＣ_１−６アルキルまたはチエニルであり；
Ｒ^２は水素またはヒドロキシであるか、またはＲ^３またはＲ^４と一緒になって＝Ｏを形成することができ；
Ｒ^３は
−（ＣＨ_２）_ｓ−ＮＲ^６Ｒ^７ （ａ−１）
−Ｏ−Ｈ （ａ−２）
−Ｏ−Ｒ^８ （ａ−３）
−Ｓ−Ｒ^９ （ａ−４）または
−Ｃ≡Ｎ （ａ−５）
ここで
ｓは０、１、２または３であり；
Ｒ^６は−ＣＨＯ、Ｃ_１−６アルキル、ヒドロキシＣ_１−６アルキル、Ｃ_１−６アルキルカルボニル、ジ（Ｃ_１−６アルキル）アミノＣ_１−６アルキル、Ｃ_１−６アルキルオキシＣ_１−６アルキル、Ｃ_１−６アルキルカルボニルアミノＣ_１−６アルキル、ピペリジニルＣ_１−６アルキルアミノカルボニル、ピペリジニル、ピペリジニルＣ_１−６アルキル、ピペリジニルＣ_１−６アルキルアミノカルボニル、Ｃ_１−６アルキルオキシ、チエニルＣ_１−６アルキル、ピロリルＣ_１−６アルキル、アリールＣ_１−６アルキルピペリジニル、アリールカルボニルＣ_１−６アルキル、アリールカルボニルピペリジニルＣ_１−６アルキル、ハロインドゾリルピペリジニルＣ_１−６アルキルまたはアリールＣ_１−６アルキル（Ｃ_１−６アルキル）アミノＣ_１−６アルキルであり；
Ｒ^７は水素またはＣ_１−６アルキルであり；
Ｒ^８はＣ_１−６アルキル、Ｃ_１−６アルキルカルボニルまたはジ（Ｃ_１−６アルキル）アミノＣ_１−６アルキルであり；そして
Ｒ^９はジ（Ｃ_１−６アルキル）アミノＣ_１−６アルキルである、
から選択される基であるか、あるいは
Ｒ^３は式
−Ｚ− （ｂ−１）
式中
Ｚは

ここで
各Ｒ^１０は独立して水素、Ｃ_１−６アルキル、アミノカルボニル、ヒドロキシ、

Ｃ_１−６アルキルオキシＣ_１−６アルキル、Ｃ_１−６アルキルオキシＣ_１−６アルキルアミノ、アリールＣ_１−６アルキル、ジ（フェニルＣ_２−６アルケニル）、ピペリジニルＣ_１−６アルキル、Ｃ_３−１０シクロアルキル、Ｃ_３−１０シクロアルキルＣ_１−６アルキル、アリールオキシ（ヒドロキシ）Ｃ_１−６アルキル、ハロインダゾリル、アリールＣ_１−６アルキル、アリールＣ_２−６アルケニル、モルホリノ、Ｃ_１−６アルキルイミダゾリルまたはピリジニルＣ_１−６アルキルアミノである、
から選択される複素環式環系である、
の基であり；
Ｒ^４は水素、Ｃ_１−６アルキル、フラニル、ピリジニル、アリールＣ_１−６アルキル、または

であり；
アリールはフェニル、またはハロ、Ｃ_１−６アルキルまたはＣ_１−６アルキルオキシで置換されたフェニルであるが、ただしｎが０であり、ＸがＮであり、Ｒ^２が水素であり、Ｒ^３が式（ｂ−１）の基であり、Ｚが複素環式環系（ｃ−２）または（ｃ−４）であり（ここで該複素環式環系Ｚは、窒素原子で分子の残りと結合しており）、そしてＲ^１０が水素である場合、Ｒ^４はＣ_１−６アルキルまたはピリジニル以外である］
の化合物、そのＮ−オキシド形、付加塩および立体化学的異性体に関する。

複素環式環系Ｚが−ＣＨ_２−、−ＣＨ＝または−ＮＨ−部分を含む時はいつでも、置換基Ｒ^１０または分子の残りは炭素または窒素原子に結合し、この場合、１もしくは両方の水素原子が置き換えられる。

式（Ｉ）の化合物は、それらの互換異性体でも存在できる。そのような形態は上記式では例示しないが、本発明の範囲内に含まれるものとする。

前記定義およびこれから使用する多くの用語を以下に説明する。これらの用語は時折そのまま使用され、または複合した用語で使用される。

前記定義およびこれから使用するようにハロは、フルオロ、クロロ、ブロモおよびヨードの総称である；Ｃ_１−６アルキルは、例えばメチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、１−メチルエチル、２−メチルプロピル、２−メチル−ブチル、２−メチルペンチル等のような１〜６個の炭素原子を有する直鎖もしくは分枝鎖の飽和炭化水素基と定義する；Ｃ_１−６アルカンジイルとは、例えばメチレン、１，２−エタンジイル、１，３−プロパンジイル１，４−ブタンジイル、１，５−ペンタンジイル、１，６−ヘキサンジイルのような１〜６個の炭素原子を有する二価の直鎖もしくは分枝鎖の飽和の炭化水素基、および２−メチルペンタンジイル、３−メチルペンタンジイル、２，２−ジメチルブタンジイル、２，３−ジメチルブタンジイル等のようなそれらの分枝異性体と定義する；；Ｃ_２−６アルケニルは、例えばエテニル、２−プロペニル、３−ブテニル、２−ペンテニル、３−ペンテニル、３−メチル−２−ブテニル等のような１つの二重結合を含み、そして２〜６個の炭素原子を有する直鎖および分枝鎖炭化水素基と定義する；Ｃ_３−１０シクロアルキルにはシクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロペンテニル、シクロヘキシル、シクロヘキセニル、シクロヘプチル、シクロオクチル等のような３〜１０個の炭素原子を有する環式炭化水素基を含む。

用語「付加塩」は、式（Ｉ）の化合物が、アミン、アルカリ金属塩基およびアルカリ土類塩基、または４級アンモニウム塩基のような有機または無機塩基と、あるいは鉱酸、スルホン酸、カルボン酸またはリンを含有する酸のような有機または無機酸と形成することができる塩を含んで成る。

用語「付加塩」にはさらに、式（Ｉ）の化合物が形成することができる製薬学的に許容され得る塩、金属錯体および溶媒和物およびそれらの塩を含んでなる。

用語「製薬学的に許容され得る塩」とは、製薬学的に許容され得る酸または塩基付加塩を意味する。これまでに述べた製薬学的に許容され得る酸または塩基付加塩は、式（Ｉ）の化合物が形成することができる治療的に活性な非−毒性の酸および非毒性の塩基付加塩形を含んで成ることを意味する。塩基性の特性を有する式（Ｉ）の化合物は、該塩基形を適切な酸で処理することによりそれらの製薬学的に許容され得る酸付加塩に転換することができる。適切な酸は例えば無機酸、例えばハロ化水素酸、例えば塩酸または臭化水素酸等；硫酸；硝酸；リン酸の酸等；または有機酸、例えば酢酸、プロピオン酸、ヒドロキシ酢酸、乳酸、ピルビン酸、蓚酸、マロン酸、コハク酸（すなわちブタン二酸）、マレイン酸、フマル酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、シクラミン酸、サリチル酸、ｐ−アミノサリチル酸、パモ酸等の酸を含んでなる。

酸性の特性を有する式（Ｉ）の化合物は、それらの製薬学的に許容され得る塩基付加塩に、該酸形を適切な有機もしくは無機塩基で処理することにより転換することができる。適切な塩基塩の形には例えばアンモニウム塩、アルカリおよびアルカリ土類金属塩、例え
ばリチウム、ナトリウム、カリウム、マグネシウム、カルシウム塩等、有機塩基との塩、例えばベンザチン、Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン、ヒドラバミン塩、および例えばアルギニン、リシン等のようなアミノ酸との塩を含んでなる。

また用語、酸または塩基付加塩は式（Ｉ）の化合物が形成することができる水和物および溶媒付加形も含んでなる。そのような形態の例は、例えば水和物、アルコラート等である。

用語「金属錯体」は、式（Ｉ）の化合物と、１もしくは複数の有機もしくは無機金属塩との間で形成される錯体を意味する。該有機もしくは無機塩の例には、周期表の第２主族の金属、例えばマグネシウムもしくはカルシウム塩、第３または第４主族の金属、例えばアルミニウム、錫、鉛の、ならびに例えばクロム、マンガン、鉄、コバルト、ニッケル、銅、亜鉛等のような周期表の第１から第８遷移族のハロゲン化物、硝酸塩、硫酸塩、リン酸塩、酢酸塩、トリフルオロ酢酸塩、トリクロロ酢酸塩、プロピオン酸塩、酒石酸塩、スルホン酸塩、例えばメチルスルホン酸塩、４−メチルフェニルスルホン酸塩、サリチル酸塩、安息香酸塩等を含んでなる。

これまでに使用した式（Ｉ）の化合物の立体化学的異性体と言う用語は、同じ結合配列により結合された同じ原子から作られているが、互換性がない異なる３次元構造を有する、式（Ｉ）の化合物が有することができるすべての可能な化合物と定義する。特に言及または示さない限り、化合物の化学名は該化合物が有すことができるすべての可能な立体化学的異性体の混合物を包含する。該混合物は該化合物の基本的分子構造のすべてのジアステレオマーおよび／またはエナンチオマーを含むことができる。式（Ｉ）の化合物のすべての立体化学的異性体は、純粋な形態および互いの混合物の両方で、本発明の化合物の範囲内に包含されるものとする。

式（Ｉ）の化合物のＮ−オキシド形は、１もしくは幾つかの窒素原子が酸化されて所謂Ｎ−オキシド、特に１もしくは複数のピペリジン−、ピペラジンまたはピリダジニル−窒素がＮ−オキシド化されたＮ−オキシドに酸化される。

これから使用する場合はいつでも、用語「式（Ｉ）の化合物」は、Ｎ−オキシド形、製薬学的に許容され得る酸または塩基付加塩およびすべての立体異性体を含むことを意味する。

欧州特許第３７１５６４号明細書に記載された化合物は、レチン酸の血漿排除を抑制する。化合物３−エチル−６−［２−メチル−１−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）プロピル］−２（１Ｈ）−キノキサリノン（本出願の化合物番号２０）、３−エチル−６−［１−（１Ｈ−イミダゾール−１−イル）−２−メチルプロピル］−２（１Ｈ）−キノキサリノン（本出願の化合物番号２１）、６−［２−メチル−１−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）プロピル］−３−（２−チエニル）−２（１Ｈ）−キノキサリノン（本出願の化合物番号２２）、６−［２−メチル−１−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）プロピル］−３−（チエニル）−２（１Ｈ）−キノキサリノン（本出願の化合物番号２３）、６−［１−（１Ｈ−イミダゾール−１−イル）−２−メチルプロピル］−３−（３−チエニル）−２（１Ｈ）−キノキサリノン（本出願の化合物番号２４）、および６−［１−（１Ｈ−イミダゾール−１−イル）ペンチル］−３−メチル−２（１Ｈ）−キノキサリノン（本出願の化合物番号２５）が欧州特許第３７１５６４号明細書に開示された。予期せずに本発明の化合物はＰＡＲＰ阻害活性を示すことが見いだされた。

興味深い化合物の第１群は、１もしくは複数の以下の制限が適用される式（Ｉ）の化合
物からなる：
ａ）ｎが０または１であり；
ｂ）ＸがＮまたはＣＲ^５であり、ここでＲ^５が水素であり；
ｃ）Ｒ^３が（ａ−１）、（ａ−２）または（ａ−３）から選択される基であるか、または式（ｂ−１）の基、すなわち−Ｚ−であり；
ｄ）ｓが０、１または２であり；
ｅ）Ｒ^６が−ＣＨＯ、Ｃ_１−６アルキル、ピペリジニルＣ_１−６アルキル、アリールカルボニルピペリジニルＣ_１−６アルキルまたはアリールＣ_１−６アルキル（Ｃ_１−６アルキル）アミノＣ_１−６アルキルであり；
ｆ）Ｒ^８がＣ_１−６アルキルであり；
ｇ）Ｒ^３が式（ｂ−１）の基である時、Ｚは式（ｃ−２）または（ｃ−４）から選択される複素環式環系であり；そして
ｈ）各Ｒ^１０が独立して水素、Ｃ_１−６アルキルまたはＣ_１−６アルキルオキシＣ_１−６アルキルアミノである。

興味深い化合物の第２群は、１もしくは複数の以下の制限が適用される式（Ｉ）の化合物からなる：
ａ）ｎが０であり；
ｂ）ＸがＮまたはＣＲ^５であり、ここでＲ^５が水素であり；
ｃ）Ｒ^１がＣ_１−６アルキルであり；
ｄ）Ｒ^２が水素またはヒドロキシであるか、またはＲ^４と一緒になって＝Ｏを形成することができ；
ｅ）Ｒ^３が（ａ−１）または（ａ−２）から選択される基であり；
ｆ）ｓが０または１であり；
ｇ）Ｒ^６が−ＣＨＯまたはＣ_１−６アルキルであり；そして
ｈ）Ｒ^４が水素、Ｃ_１−６アルキルまたは

である。

興味深い化合物の第３群は、Ｚが式（ｃ−２）または（ｃ−４）の複素環式環系以外の複素環式環系である式（Ｉ）の化合物、興味深い化合物の第１群または興味深い化合物の第２群の化合物からなる。

好適な化合物群は、ｎが０または１であり；ＸがＮまたはＣＲ^５であり、ここでＲ^５が水素であり；Ｒ^３が（ａ−１）、（ａ−２）または（ａ−３）から選択される基であるか、または式（ｂ−１）の基、すなわち−Ｚ−であり；ｓが０、１または２であり；Ｒ^６が−ＣＨＯ、Ｃ_１−６アルキル、ピペリジニルＣ_１−６アルキル、アリールカルボニルピペリジニルＣ_１−６アルキルまたはアリールＣ_１−６アルキル（Ｃ_１−６アルキル）アミノＣ_１−６アルキルであり；Ｒ^８がＣ_１−６アルキルであり；Ｒ^３が式（ｂ−１）の基である時、Ｚは式（ｃ−２）または（ｃ−４）から選択される複素環式環系であり；そして各Ｒ^１０が独立して水素、Ｃ_１−６アルキルまたはＣ_１−６アルキルオキシＣ_１−６アルキルアミノである式（Ｉ）の化合物からなる。

さらに好適な化合物群は、ｎが０であり；ＸがＮまたはＣＲ^５であり、ここでＲ^５が水素であり；Ｒ^１がＣ_１−６アルキルであり；Ｒ^２が水素またはヒドロキシであるか、またはＲ^４と一緒になって＝Ｏを形成することができ；Ｒ^３が（ａ−１）または（ａ−２）から選択される基であり；ｓが０または１であり；Ｒ^６が−ＣＨＯまたはＣ_１−６アルキルであり；そしてＲ^４が水素、Ｃ_１−６アルキルまたは

である式（Ｉ）の化合物からなる。

さらに一層好適な化合物群は、Ｚが式（ｃ−２）または（ｃ−４）の複素環式環系以外の複素環式環系である式（Ｉ）の化合物、好適な化合物群、またはさらに好適な化合物群からなる。

最も好適な化合物は、化合物番号１、化合物番号５、化合物番号７、化合物番号３および化合物番号１７である。

式（Ｉ）の化合物は、欧州特許第３７１５６４号明細書に記載の一般法に従い調製することができる。

そのような多数の調製法をこれからさらに詳細に記載する。式（Ｉ）の最終化合物を得る他の方法を実施例に記載する。

Ｒ^２が水素であり、そしてＲ^３が−ＮＲ^７−ＣＨＯ（ここでＲ^７は水素またはメチルである）である式（Ｉ）の化合物（本明細書では式（Ｉ−ｂ）の化合物を指す）は、Ｒ^２がＲ^３と一緒になって＝Ｏを形成する式（Ｉ）の化合物（本明細書では式（Ｉ−ａ）の化合物を指す）から出発して、ここで式（ＩＩ）の中間体として示すホルムアミドまたはメチルホルムアミドおよびギ酸の存在下で調製することができる。

Ｒ^３がヒドロキシである式（Ｉ）の化合物（本明細書では式（Ｉ−ｃ）の化合物を指す）は、適切な還元剤、例えば水素化ホウ素ナトリウムを適切な溶媒、例えばメタノールおよびテトラヒドロフラン中で用いて、式（Ｉ−ａ）の化合物のケトン部分をヒドロキシ基に転換することにより調製することができる。

式（Ｉ−ａ）の化合物は、Ｒ^２が水素である式（Ｉ−ｃ）の化合物（本明細書では式（Ｉ−ｃ−１）の化合物を指す）を、三酸化クロムのような適切なオキシダント、および硫酸のような酸の存在下、２−プロパノンのような適切な溶媒中で転換することにより調製することができる。

Ｗが例えばクロロ、ブロモ、メタンスルホニルオキシまたはベンゼンスルホニルオキシのような適切な脱離基である式（ＩＶ）の中間体は、式（Ｉ−ｃ−１）の化合物から、該化合物を適切な試薬、例えばメタンスルホニルオキシクロライドもしくはベンゼンスルホニルマロライド、または例えばＰＯＣｌ_３もしくはＳＯＣｌ_２のようなハロゲン化試薬で処理することにより調製できる。

Ｒ^ｂがＲ^６で定義する通りであり、そしてＲ^ｃがＲ^７で定義する通りであるか、あるいはＲ^ｂおよびＲ^ｃがそれらに結合している窒素と一緒になってＺで定義する適切な複素環式環系を形成する式（Ｉ）の化合物と定義する式（Ｉ）の化合物（本明細書では式（Ｉ−ｈ）の化合物を指す）は、式（ＩＶ）の中間体を、式（Ｖ）の中間体と反応させることにより調製できる。反応は、ジメチルホルムアミドまたはアセトニトリルのような反応に不活性な溶媒中、そして場合により例えば炭酸ナトリウム、炭酸カリウムまたはトリエチルアミンのような適切な塩基の存在下で行うことができる。

式（Ｉ）の化合物は、技術的に知られている反応または官能基変換法を介して互いに変換することもできる。そのような多数の変換法はすでにこれまでに記載した。他の例は、カルボン酸エステルの対応するカルボン酸またはアルコールへの加水分解；アミドの対応するカルボン酸またはアミンへの加水分解；ニトリルの対応するアミドへの加水分解であり；イミダゾールまたはフェニル上のアミノ基は、技術的に知られているジアゾテーション（ｄｉａｚｏｔａｔｉｏｎ）反応、そして続いてジアゾ基の水素による置換により水素に置き換えることができ：アルコールはエステルおよびエーテルに転換することができ；１級アミンは２級または３級アミンに転換することができ；二重結合は水素化して対応する単結合にすることができ；フェニル基上のヨード基は適切なパラジウム触媒の存在下で一酸化炭素の挿入によりエステル基に転換することができる。

したがって式（Ｉ）、（Ｉ−ａ）、（Ｉ−ｂ）、（Ｉ−ｃ）、（Ｉ−ｃ−１）、（Ｉ−ｈ）、（Ｉ−ｉ）、（Ｉ−ｊ）および（Ｉ−ｋ）の化合物は、場合により任意の所望する順序で１もしくは複数の以下の転換の対象となることができる：
（ｉ）式（Ｉ）の化合物の異なる式（Ｉ）の化合物への転換；
（ｉｉ）式（Ｉ）の化合物のその対応する許容され得る塩またはＮ−オキシドへの転換；（ｉｉｉ）式（Ｉ）の化合物の製薬学的に許容され得る塩またはＮ−オキシドの、元の式（Ｉ）の化合物への転換；
（ｉｖ）式（Ｉ）の化合物またはその製薬学的に許容され得る塩またはＮ−オキシドの立体化学異性体の調製。

Ｒ^ｄおよびＲ^ｅが適切な基であるか、またはそれらが結合している炭素と一緒になって
Ｚで定義する適切な複素環式環系を形成する式（ＶＩＩ）の中間体は、Ｒ^３が式（ｂ−１）の基であるか、またはｓが０以外である式（ａ−１）の基（本明細書ではＲ^ｇを指す）である式（ＶＩ）の中間体を、例えばテトラヒドロフランのような反応に不活性な溶媒の存在下で、水性酸溶液中で中間体（ＶＩ）を撹拌するような技術的に知られている方法に従い加水分解することにより調製できる。適切な酸は例えば塩酸である。

Ｒ^２が水素であり、そしてＲ^ｇが上記定義の通りである式（Ｉ）の化合物（本明細書では式（Ｉ−ｋ）の化合物を指す）は、式（ＶＩＩ）の中間体から出発して、該中間体を例えば活性炭担持白金、活性炭担持パラジウム等のような貴金属触媒のような適切な還元剤、およびメタノールのような適切な溶媒中で水素のような適切な還元剤を用いた選択的な水素化により調製できる。

式（Ｉ）の化合物は、式（ＶＩＩＩ）の中間体をトリクロライド、酢酸および塩酸のような適切な試薬に、反応に不活性な溶媒、例えばテトラヒドロフランの存在下で供することにより、式（ＶＩＩＩ）の中間体を技術的に知られている方法に従い加水分解することにより調製することができる。

式（Ｉ）の化合物は、式（ＩＸ）のＮ−オキシドから出発して、炭酸ナトリウムまたは無水酢酸のような適切な試薬、そして適切な場合にはジクロロメタンのような溶媒の存在下で、式（ＩＸ）の中間体を転換することにより調製できる。

またＸがＣＨである式（Ｉ）の化合物（本明細書では式（Ｉ−ｊ）の化合物を指す）は、式（Ｘ）の中間体を環化することにより得ることもできる。式（Ｘ）の中間体の環化反応は、技術的に知られている環化手順に従い行うことができる。好ましくは反応は適切なルイス酸、例えば塩化アルミニウムがそのままで存在するか、または例えば芳香族炭化水素、例えばベンゼン、クロロベンゼン、メチルベンゼン等；ハロゲン化炭化水素、例えばトリクロロメタン、テトラクロロメタン等；エーテル、例えばテトラヒドロフラン、１，４−ジオキサン等；またはそのような溶媒の混合物のような適切な溶媒中に塩化アルミニウムが存在する中で行う。幾分高温、好ましくは７０℃〜１００℃の間、そして撹拌が反応速度を強化し得る。

ＸがＮである式（Ｉ）の化合物（本明細書では式（Ｉ−ｉ）の化合物を指す）は、式（ＸＩ）の適切なオルト−ベンゼンジアミンをＲ^ｈがＣ_１−６アルキルである式（ＸＩＩ）のエステルと縮合することにより得ることができる。式（ＸＩ）の置換オルトジアミンと式（ＸＩＩ）のエステルとの縮合は、カルボン酸、例えば酢酸等、例えば塩酸、硫酸のような鉱酸、または例えばメタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、４−メチルベンゼンスルホン酸等のスルホン酸の存在下で行うことができる。幾分高温が反応速度を強化するために適切であり、そして場合により反応はさらに反応混合物の還流温度で行ってもよい。縮合中に遊離する水は、共沸蒸留、蒸留等の方法により混合物から除去することができる。

式（ＸＩ）の中間体は、式（ＸＩＩＩ）の中間体から出発して、ラニーニッケルのような金属触媒および水素のような適切な還元剤の存在下で、メタノールのような適切な溶媒中でニトロからアミノへの還元反応により調製することができる。

式（ＸＩＩＩ）の中間体は、反応に不活性な溶媒、例えばテトラヒドロフランの存在下で水性酸溶液中で中間体（ＸＩＶ）を撹拌するような技術的に知られている方法に従い式（ＸＩＶ）の中間体を加水分解することにより調製できる。適切な酸は例えば塩酸である。

式（Ｘ）の中間体は、式（ＸＶ）のアニリンを式（ＸＶＩ）のハライドと、ジクロロメタンのような適切な溶媒中でピリジンのような塩基の存在下にて反応させることより都合よく調製することができる。

ｎが０であり、Ｒ^２が水素またはヒドロキシであり、そしてＲ^２が水素である時、Ｒ^３がヒドロキシである式（ＶＩＩＩ）の中間体（本明細書では式（ＶＩＩＩ−ａ）の中間体を指す）は、Ｗがハロである式（ＸＶＩＩ）の中間体を、例えばｎ−ブチルリチウムのような有機リチウム試薬を用いて、反応に不活性な溶媒、例えばテトラヒドロフラン中で処理し、続いて該中間体をＲ^ｉが水素またはＲ^３に定義した基である式（ＸＶＩＩＩ）の中間体と反応させることにより調製できる。

また本発明は薬剤として使用するための上記定義の式（Ｉ）の化合物に関する。

本発明の化合物は、これから記載する実験の部で分かるようなＰＡＲＰ阻害特性を有する。

本発明は、本明細書に記載する動物における任意の疾患および障害を処置するための薬剤の調製における化合物の使用を意図し、ここで該化合物は式（Ｉ）

［式中、
ｎは０、１または２であり；
ＸはＮまたはＣＲ^５であり、ここでＲ^５は水素であるか、またはＲ^１と一緒になって式−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ＝ＣＨ−の二価の基を形成することができ；
Ｒ^１はＣ_１−６アルキルまたはチエニルであり；
Ｒ^２は水素またはヒドロキシであるか、またはＲ^３またはＲ^４と一緒になって＝Ｏを形
成することができ；
Ｒ^３は
−（ＣＨ_２）_ｓ−ＮＲ^６Ｒ^７ （ａ−１）
−Ｏ−Ｈ （ａ−２）
−Ｏ−Ｒ^８ （ａ−３）
−Ｓ−Ｒ^９ （ａ−４）または
−Ｃ≡Ｎ （ａ−５）
ここで
ｓは０、１、２または３であり；
Ｒ^６は−ＣＨＯ、Ｃ_１−６アルキル、ヒドロキシＣ_１−６アルキル、Ｃ_１−６アルキルカルボニル、ジ（Ｃ_１−６アルキル）アミノＣ_１−６アルキル、Ｃ_１−６アルキルオキシＣ_１−６アルキル、Ｃ_１−６アルキルカルボニルアミノＣ_１−６アルキル、ピペリジニルＣ_１−６アルキルアミノカルボニル、ピペリジニル、ピペリジニルＣ_１−６アルキル、ピペリジニルＣ_１−６アルキルアミノカルボニル、Ｃ_１−６アルキルオキシ、チエニルＣ_１−６アルキル、ピロリルＣ_１−６アルキル、アリールＣ_１−６アルキルピペリジニル、アリールカルボニルＣ_１−６アルキル、アリールカルボニルピペリジニルＣ_１−６アルキル、ハロインドゾリルピペリジニルＣ_１−６アルキルまたはアリールＣ_１−６アルキル（Ｃ_１−６アルキル）アミノＣ_１−６アルキルであり；
Ｒ^７は水素またはＣ_１−６アルキルであり；
Ｒ^８はＣ_１−６アルキル、Ｃ_１−６アルキルカルボニルまたはジ（Ｃ_１−６アルキル）アミノＣ_１−６アルキルであり；そして
Ｒ^９はジ（Ｃ_１−６アルキル）アミノＣ_１−６アルキルである、
から選択される基であるか、あるいは
Ｒ^３は式
−Ｚ− （ｂ−１）
式中
Ｚは

ここで
各Ｒ^１０は独立して水素、Ｃ_１−６アルキル、アミノカルボニル、ヒドロキシ、

Ｃ_１−６アルキルオキシＣ_１−６アルキル、Ｃ_１−６アルキルオキシＣ_１−６アルキルアミノ、アリールＣ_１−６アルキル、ジ（フェニルＣ_２−６アルケニル）、ピペリジニルＣ_１−６アルキル、Ｃ_３−１０シクロアルキル、Ｃ_３−１０シクロアルキルＣ_１−６アルキル、アリールオキシ（ヒドロキシ）Ｃ_１−６アルキル、ハロインダゾリル、アリールＣ_１−６アルキル、アリールＣ_２−６アルケニル、モルホリノ、Ｃ_１−６アルキルイミダゾリルまたはピリジニルＣ_１−６アルキルアミノである、
から選択される複素環式環系である、
の基であり；
Ｒ^４は水素、Ｃ_１−６アルキル、フラニル、ピリジニル、Ｃ_１−６アルキル、または

であり；
アリールはフェニル、またはハロ、Ｃ_１−６アルキルまたはＣ_１−６アルキルオキシで置換されたフェニルである］
の化合物、そのＮ−オキシド形、製薬学的に許容され得る付加塩および立体化学的異性体である。

ＰＡＲＰ結合特性の観点から、本発明の化合物は参照化合物または追跡化合物として使用することができ、この場合、分子中の１つの原子を例えば放射性同位体に置き換えることができる。

本発明の製薬学的組成物を調製するために、有効成分として塩基もしくは酸付加塩の形態である特定化合物の有効量が、製薬学的に許容される担体との完全な混合物に合わせられ、この担体は投与に望ましい調製物の形態に依存して様々な広い形態を取ることができる。これらの製薬学的組成物は、好ましくは経口で、直腸に、皮下に、または非経口的注入による投与に適する望ましい単位剤形である。例えば経口剤形の組成物の調製では、懸濁液、シロップ、エリキシル、乳液および溶剤のような経口用の液体調製物の場合に、例えば水、グリコール、油、アルコール等のような任意の通常の製薬学的媒質を；あるいは粉末、ピル、カプセルおよび錠剤の場合には澱粉、糖、カオリン、潤滑剤、結合剤、崩壊剤等のような固体担体を使用することができる。錠剤およびカプセルの投与し易さから、それらは最も有利な経口単位剤形を表し、この場合、固体の製薬学的担体が明らかに使用される。非経口用の組成物には担体は通常、滅菌水を少なくとも大部分で含んで成るが、他に成分も例えば溶解性を目的として含むことができる。注入可能な溶剤は、例えば担体が塩溶液、グルコース溶液または塩およびグルコース溶液の混合物を含んで成るように調製することができる。注入可能な懸濁液も調製することができ、この場合、適当な液体担
体、沈殿防止剤等を使用することができる。皮下投与に適する組成物では、担体は場合により浸透強化剤および／または適当な湿潤剤を、場合により任意の性質の適当な添加剤をわずかな比率で組み合わせて含んで成り、この添加剤は皮膚に対して有意な有害効果を引き起こさない。該添加剤は皮膚への投与を容易にし、かつ／または所望の組成物を調製するために役立つことができる。これらの組成物は、種々の方法、例えば経皮的パッチとして、スポット-オン（ｓｐｏｔ−ｏｎ）として、軟膏として投与することができる。前記の製薬学的組成物は、投与の容易さおよび投薬容量の均一性から、単位剤形に配合することが特に有利である。本明細書および請求の範囲で使用する単位剤形は、単位投薬用量として適当な物理的に分かれた単位を称し、各単位は必要な製薬学的担体と一緒になって所望する治療効果を生成するように計算された予め定めた量の有効成分を含む。そのような単位剤形の例は錠剤（刻み目付き、またはコート錠剤を含む）、カプセル、ピル、粉末小袋、カシェ剤、注入可能な溶液または懸濁液等、茶サジ一杯、大匙一杯等、およびそれらが多数に分けられたものである。

本発明の化合物は、細胞傷害または例えば壊死もしくはアポトーシスによる死から生じる組織傷害を処置または防止するために使用でき；病巣虚血、心筋梗塞および再潅流損傷後を含む神経または心血管組織傷害を改善することができ；ＰＡＲＰ活性により生じるか、または増悪する種々の疾患および状態を処置することができ；細胞の寿命または増殖能力を延ばすか、または上げることができ；老化した細胞の遺伝子発現を改変することができ；細胞を放射線増感および／または化学増感することができる。一般にＰＡＲＰ活性の阻害は、細胞のエネルギー損失を切り詰め、神経細胞の場合はニューロンの不可逆的脱分極を防ぎ、すなわち神経保護を提供する。

前述の理由から、本発明はさらにＰＡＲＰ活性を阻害するために、細胞傷害または壊死もしくはアポトーシスによる死から生じる組織の傷害を処置または防止するために、ＮＭＤＡ毒性により媒介されないニューロン活性を及ぼすために、ＮＭＤＡ毒性により媒介されるニューロン活性を及ぼすために、虚血および再潅流損傷、神経学的障害および神経変性疾患から生じる神経組織傷害を処置するために；血管発作を防止または処置するために；心血管障害を処置または防止するために；加齢が関係する筋肉の変性、ＡＩＤＳおよび他の免疫老化疾患、炎症、通風、関節炎、アテローム硬化症、悪液質、ガン、細胞老化が関与する骨格筋の変性疾患、糖尿病、頭部外傷、炎症性腸疾患（結腸炎およびクローン病のような）、筋ジストロフィー、変形性関節炎、骨粗鬆症、慢性および／または急性疼痛（ニューロパシー性疼痛）、腎不全、網膜虚血、敗血症ショック（内毒素ショックのような）および皮膚の老化のような状態および／または障害を処置するために；細胞の寿命および増殖能を延ばすために；老化細胞の遺伝子発現を改変するために；（低酸素）腫瘍細胞を化学増感および／または放射線増感するために十分な量で、治療に有効な量の上で確認される化合物を投与する方法に関する。また本発明は動物の疾患および状態を処置することに関し、これは該動物に治療に有効な量の上で確認される化合物を投与することを含んでなる。

特に本発明は、動物の神経学的障害を処置し、防止し、または抑制する方法に関し、この方法は該動物に治療に有効な量の上で確認される化合物を投与することを含んでなる。神経学的障害は、物理的損傷または疾患状態により生じる末梢ニューロパーシー、外傷性脳損傷、脊髄に対する物理的傷害、脳の傷害に伴う脳卒中、病巣虚血、全身性虚血、再潅流損傷、脱髄疾患および神経変性に関連する神経障害からなる群から選択される。

また本発明はＰＡＲＰ活性を阻害し、細胞傷害または壊死もしくはアポトーシスによる死から生じる組織の傷害を処置、防止または抑制するために、動物における神経的障害を処置、防止または抑制するために、式（Ｉ）の化合物の使用を意図する。

用語「神経変性を防止する」には、神経変性疾患を有すると新たに診断された患者における神経変性、または神経変性疾患にすでに罹患しているか、または症状を有する患者において、新たな変性疾患を発症するリスクを防止し、そしてさらなる神経変性を防止する能力を含む。

本明細書で使用する用語「処置」は、動物そして特にヒトにおける疾患および／または状態の任意の処置を網羅し、そして：（ｉ）疾患および／または状態になる素因を有する可能性があるが、未だにそれを有していないと診断された個体に、疾患および／または状態が生じることを防ぐこと；（ｉｉ）疾患および／または状態を抑制すること、すなわちその発症を止めること；（ｉｉｉ）疾患および／または状態を軽減すること、すなわち疾患および／または状態の回復を生じること含む。

本明細書で使用する用語「放射線増感物質」とは、電離放射線に対する細胞の感度を増すために、かつ／または電離放射線で処置できる疾患の処置を促進するために、治療に有効な量で動物に投与される分子、好ましくは低分子量分子と定義する。電離放射線で処置できる疾患には新形成疾患、良性および悪性腫瘍およびガン性細胞を含む。本明細書には列挙しない他の疾患の電離放射線処置も本発明では企図する。

本明細書で使用する「化学増感物質」とは、化学療法に対する細胞の感度を増すために、かつ／または化学療法で処置できる疾患の処置を促進するために、治療に有効な量で動物に投与される分子、好ましくは低分子量分子と定義する。化学療法で処置できる疾患には新形成疾患、良性および悪性腫瘍およびガン性細胞を含む。本明細書には列挙しない他の疾患の化学療法処置も本発明では企図する。

本発明の化合物、組成物および方法は、壊死またはアポトーシスによる細胞死または傷害から生じる組織傷害を処置または防止するために特に有用である。

本発明の化合物は「抗ガン薬」となることもでき、この用語は「抗腫瘍細胞増殖薬」および「抗新生物薬」も包含する。例えば本発明の方法は、ガン細胞を処置し、そしてＡＣＴＨ生産腫瘍、急性リンパ球性白血病、急性非リンパ球性白血病、副腎皮質のガン、膀胱ガン、脳のガン、胸部のガン、頚部ガン、慢性リンパ球性白血病、慢性骨髄球性白血病、結腸直腸ガン、皮膚Ｔ−細胞リンパ主、子宮内膜ガン、食道ガン、ユーイング肉腫、胆嚢ガン、ヘアリーセル白血病、頭および首のガン、ホジキンリンパ腫、カポジ肉腫、腎臓ガン、肝臓ガン、肺ガン（小および／または非小細胞）、悪性腹膜滲出、悪性胸膜滲出、黒色腫、中皮腫、多発性骨髄腫、神経芽腫、非ホジキンリンパ腫、骨肉腫、卵巣ガン、卵巣（生殖細胞）ガン、前立腺ガン、膵臓ガン、陰茎ガン、網膜芽腫、皮膚ガン、柔軟組織肉腫、鱗状細胞癌腫、胃ガン、精巣ガン、甲状腺ガン、栄養膜新形成、子宮ガン、膣ガン、外陰のガンおよびウィルムス腫瘍のようなガンにおける腫瘍細胞を化学増感および／または放射線増感するためにも有用である。

したがって本発明の化合物は、「放射線増感物質」および／または「化学増感物質」として使用することができる。

放射線増感物質は、ガン性細胞の電離放射線の毒性効果に対する感度を上げることが知られている。電離放射線の作用様式に関する幾つかのメカニズムが文献に示唆され、それらには以下を含む；低酸素細胞の放射線増感物質（例えば２−ニトロイミダゾール化合物、および二酸化ベンゾトリアジン化合物）は酸素を模倣するか、または低酸素下で生物還元剤のように挙動する；非低酸素細胞の放射線増感物質（例えばハロゲン化ピリミジン）はＤＮＡ塩基の類似体であり、そしてガン細胞のＤＮＡに優先的に取り込まれることができ、そしてこれにより放射線が誘導するＤＮＡ分子の破壊を促進し、かつ／または正常な
ＤＮＡ修復メカニズムを防止する；および種々の他の有力な作用機作が疾患の処置における放射線増感物質について仮定されてきた。

現在、多くのガン処置プロトコールが、ｘ−線の放射と組み合わせて放射線増感物質を使用している。ｘ−線活性化放射線増感物質の例には、限定するわけではないが以下を含む：メトロニダゾール、ミソニダゾール（ｍｉｓｏｎｉｄａｚｏｌｅ）、デスメチルミソニダゾール（ｄｅｓｍｅｔｈｙｌｍｉｓｏｎｉｄａｚｏｌｅ）、ピモニダゾール（ｐｉｍｏｎｉｄａｚｏｌｅ）、エタニダゾール（ｅｔａｎｉｄａｚｏｌｅ）、ニモラゾール（ｎｉｍｏｒａｚｏｌｅ）、マイトマイシンＣ、ＲＳＵ１０６９、ＳＲ４２３３、ＥＯ９、ＲＢ６１４５、ニコチンアミド、５−ブロモデオキシウリジン（ＢＵｄＲ）、５−ヨードデオキシウリジン（ＩＵｄＲ）、ブロモデオキシシチジン、フルオロデオキシウリジン（ＦｕｄＲ）、ヒドロキシウレア、シスプラチンおよびその治療に有効な類似体および誘導体。

ガンの光ダイナミック療法（ＰＤＴ）には、増感剤の放射線アクチベーターとして可視光を使用する。光ダイナミック放射線増感物質の例には、限定するわけではないが以下を含む：ヘマトポルフィリン誘導体、Ｐｈｏｔｏｆｒｉｎ、ベンゾポルフィリン誘導体、錫エチオポルフィリン、フェオボルビト（ｐｈｅｏｂｏｒｂｉｄｅ）−ａ、バクテリオクロロフィル−ａ、ナフタロシアニン（ｎａｐｈｔｈａｌｏｃｙａｎｉｎｅ）、フタロシアニン、亜鉛フタロシアニンおよびその治療に有効な類似体および誘導体。

放射線増感物質は、治療に有効な量の１もしくは複数の他の化合物と一緒になって投与することができ、それらには限定するわけではないが：放射線増感物質の標的細胞への取り組みを促進する化合物；治療薬、栄養および／または酸素の標的細胞への流れを制御する化合物；さらなる放射線を用いて、または用いずに腫瘍に作用する化学療法薬；またはガンもしくは他の疾患を処置するための他の治療に有効な化合物を含む。放射線増感物質と一緒になって使用することができるさらなる治療薬の例には限定するわけではないが：５−フルオロウラシル、ロイコボリン、５’−アミノ−５’デオキシチミジン、酸素、カルボージェン、赤血球輸血、過弗化炭素（例えばＦｌｕｏｓｏｌ １０ＤＡ）、２，３−ＤＰＧ、ＢＷ１２Ｃ、カルシウムチャンネル遮断剤、ペントキシフィリン、抗血管新生化合物、ヒドララジンおよびＬＢＳＯを含む。放射線増感物質と一緒になって使用することができる化学療法剤の例には、限定するわけではないが：アドリアマイシン、カンプトテシン、カルボプラチン、シスプラチン、ダウノルビシン、ドセタキセル（ｄｏｃｅｔａｘｅｌ）、ドキソルビシン、インターフェロン（アルファ、ベータ、ガンマ）、インターロイキン２、イリノテカン、パクリタキセル、トポテカンおよびその治療に有効な類似体および誘導体を含む。

化学増感物質は、治療に有効な量の１もしくは複数の他の化合物と一緒になって投与することができ、それらには限定するわけではないが：化学増感物質の標的細胞への取り組みを促進する化合物；治療薬、栄養および／または酸素の標的細胞への流れを制御する化合物；腫瘍に作用する化学治療剤、またはガンもしくは他の疾患を処置するための他の治療に有効な化合物を含む。化学増感物質と一緒になって使用することができるさらなる治療薬の例には限定するわけではないが：メチル化剤、トポイソメラーゼＩインヒビター、およびシスプラチンおよびブレオマイシンのような他の化学療法剤を含む。

式（Ｉ）の化合物は、ＰＡＲＰそしてさらに詳細にはＰＡＲＰ−１受容体を検出または同定するためにも使用することができる。その目的には、式（Ｉ）の化合物を標識することができる。該標識は放射性同位体、スピンラベル、抗原標識、酵素標識蛍光基または化学発光基からなる群から選択することができる。

当業者は、これから提示する試験結果から有効な量を容易に決定することができる。一般に、有効な量は０．０１ｍｇ／ｋｇ〜１００ｍｇ／ｋｇ体重、そして特に０．０５ｍｇ／ｋｇ〜１０ｍｇ／ｋｇ体重となることを企図している。必要な用量を２、３、４またはそれ以上の副（ｓｕｂ）用量として１日を通して適当な間隔で投与することも適当かもしれない。該副用量は例えば単位剤形あたり０．５〜５００ｍｇ、そして特に１〜２００ｍｇの有効成分を含む単位剤形として配合することもできる。

以下の実施例は本発明を具体的に説明する。

実験の部
今後、“ＢｕＬｉ”はブチル−リチウムと定義し、“ＤＣＭ”はジクロロメタンと定義し、“ＤＩＰＥ”はジイソプロピルエーテルと定義し、“ＤＭＦ”はＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドと定義し、“ＥｔＯＡｃ”は酢酸エチルと定義し、“ＥｔＯＨ”はエタノールと定義し、“ＭＥＫ”はメチルエチルケトンと定義し、“ＭｅＯＨ”はメタノールと定義し、そして“ＴＨＦ”はテトラヒドロフランと定義する。
Ａ．中間体化合物の調製
実施例Ａ１
ａ）中間体１の調製

１−（４−アミノ−３−ニトロフェニル）−２−メチル−１−プロパノン（０．０１４４モル）（４．９３ｍｌのギ酸中）およびホルムアミド（１８．２ｍｌ）の混合物を、１６０℃で１５時間撹拌し、次いで室温に冷却し、氷水に注ぎ、そして濃水酸化アンモニウム溶液で塩基性とし、そしてＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を分離し、乾燥させ（ＭｇＳＯ_４）、濾過し、そして溶媒を蒸発乾固して、４．８ｇの中間体１を得た。
ｂ）中間体２の調製

中間体１（０．０１４４モル）の混合物（５０ｍｌのＭｅＯＨ中）を３バールの圧力下で１時間、触媒としてラニーニッケル（３．４ｇ）を使用して水素化した。Ｈ_２の取り込み（３当量）後、触媒はセライトを通して濾過し、ＭｅＯＨで洗浄し、そして濾液を蒸発乾固した。生成物はさらに精製せずに使用して、４．７ｇの中間体２を得た。
実施例Ａ２
中間体３および４の調製

塩化アルミニウム（０．６９２８モル）を、クロロ−アセチルクロライド（０．５１９６モル）の溶液（５０．２ｍｌのＤＣＭ中）に、温度を３０℃未満に維持しながら数部に分けて加えた。３−エチル−２（１Ｈ）−キノリノン（０．１７３２モル）を温度を３０℃未満に維持しながら加えた。混合物を１５時間撹拌そして還流し、冷却し、そして氷水に注いだ。沈殿を濾過し、水で洗浄し、ＤＣＭに取った。有機溶液を撹拌し、そして濾過した。沈殿を乾燥させ、３３．５ｇの中間体３を得た。濾液を抽出した。有機層を分離し、乾燥させ（ＭｇＳＯ_４）、濾過し、そして溶媒を蒸発乾固して、２０．４６ｇの中間体４を得た。
実施例Ａ３
ａ）中間体５の調製

６−ブロモ−２−クロロ−３−メチル−キノリン（０．０４４８３モル）およびＣＨ_３ＯＮａ（０．２２４ル）の混合物（２００ｍｌのＭｅＯＨ中）を、７０℃で３６時間撹拌した。混合物を冷却し、氷に注ぎ、ＥｔＯＡｃを加え、そして混合物をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を水で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ_４）、濾過し、そして蒸発させて１１ｇ（９７％）の中間体５を得た。
ｂ）中間体６の調製

ヘキサン（０．０６１９モル中）のＢｕＬｉ １．６Ｍを、−６０℃にてＮ_２流下で中間体５（０．０４７６モル）の混合物（２００ｍｌのＴＨＦ中）に滴下した。混合物を−６０℃で１時間撹拌した。３−（ジメチルアミノ）−１−（２−フラニル）−１−プロパノン（０．０５７１モル）の混合物（１００ｍｌのＴＨＦ中）を−６０℃にて滴下した。混合物を−６０℃で２時間撹拌し、ついで−４０℃で１時間撹拌した。混合物を飽和塩化アンモニウム溶液に注ぎ、そしてＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を分離し、乾燥させ（ＭｇＳＯ_４）、濾過し、そして溶媒を蒸発させた。生成物はさらに精製せずに使用して１６．２ｇの中間体６を得た。
ｃ）中間体７の調製

中間体６（０．０４７６モル）（２５４ｍｌの３Ｎ塩酸中）およびＴＨＦ（１２８ｍｌ）の混合物を、６時間撹拌そして還流した。混合物を氷に注ぎ、濃水酸化アンモニウムで塩基性とし、そしてＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を分離し、乾燥させ（ＭｇＳＯ_４）、濾過し、そして溶媒を蒸発させた。残渣をシリカゲル（１５〜４０μｍ）でのカラムクロマトグラフィーにより精製した（溶出：ＤＣＭ／ＭｅＯＨ／ＮＨ_４ＯＨ ９５／５／０．２）。純粋な画分を集め、そして溶媒を蒸発させて４ｇ（２７％）の中間体７を得た。
実施例Ａ４
中間体８の調製

ヘキサン（０．１２９モル中）のｎＢｕＬｉ １．６Ｍを、−６０℃にてＮ_２流下で６−ブロモ−３−エチル−２−メトキシ−キノリン（０．０９９６モル）の混合物（２６５ｍｌのＴＨＦ中）に滴下した。混合物を−６０℃で１時間撹拌した。２−エチル−ブタナール（０．１１９モル）の混合物（１００ｍｌのＴＨＦ中）を−６０℃にて滴下した。混合物を−６０℃で２時間撹拌し、ついで−４０℃で１時間撹拌し、飽和塩化アンモニウム溶液に注ぎ、そしてＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を分離し、乾燥させ（ＭｇＳＯ_４）、濾過し、そして溶媒を蒸発させた。生成物はさらに精製せずに使用して２８．６２ｇの中間体８を得た。
実施例Ａ５
ａ）中間体９の調製

（２−ブロモエチル）−ベンゼン（０．１７４モル）の溶液（１２５ｍｌのジエチルエーテル中）を、Ｍｇ削屑（０．２１モル）の懸濁液（１２５ｍｌのジエチルエーテル中）に０℃で滴下し、そして混合物を０℃で１時間撹拌した。３−メチル−６−キノリンカルボキシアルデヒド（０．１１６モル）溶液（２００ｍｌのＴＨＦ中）を０℃で滴下し、そして混合物を室温で２時間撹拌した。混合物を氷水に注ぎ、セライトを通して濾過し、そしてＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を水で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ_４）、濾過し、そ
して蒸発させた。残渣をＥｔＯＡｃ／ジエチルエーテルから結晶化して、１９ｇ（５９％）の中間体９を得た。
ｂ）中間体１０の調製

過マンガン酸カリウム（１９ｇ）を、Ｎ_２流下にて５℃で中間体９（０．０６９モル）の溶液（３００ｍｌのＤＣＭおよび２ｍｌのトリス［２−（２−メトキシエトキシ）エチル］アミン）に滴下し、そして混合物を室温で一晩撹拌した。混合物はセライトを通して濾過し、そして濾液を蒸発させて１７ｇ（９０％）の中間体１０を得た。
ｃ）中間体１１の調製

３−クロロ−ベンゼンカルボペルオキソ酸（０．１２３モル）の溶液（２００ｍｌのＤＣＭ中）を、Ｎ_２下にて５℃で中間体１０（０．０６２モル）の溶液（２００ｍｌのＤＣＭ中）に加え、混合物を５℃で１時間撹拌し、次いで室温で３時間撹拌した。水性の炭酸カリウム１０％を加え、そして生成物をＤＣＭで抽出した。有機層を水で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ_４）、濾過し、そして蒸発させた。生成物はさらに精製せずに使用して、１８ｇ（１００％）の中間体１１を得た。
ｄ）中間体１２の調製

炭酸カリウム１０％（２５０ｍｌ）を室温で中間体１１（０．０６２モル）の溶液（２５０ｍｌのＤＣＭ中）に加え、そして混合物を１０分間撹拌した。トシルクロライド（０．０９３モル）を数部に分けて加え、そして混合物を室温で２時間撹拌した。沈殿を濾過し、水で洗浄し、そして乾燥させた。残渣（１０．１ｇ）を２−プロパノンから再結晶して、２．８ｇ（７２％）の中間体１２を得た。
Ｂ．最終化合物の調製
実施例Ｂ１
最終化合物１の調製

中間体２（０．０１１モル）およびエチル２−オキソブタノエート（０．０２２モル）の混合物（４０ｍｌのＥｔＯＨ中）を、６０℃で６時間撹拌し、次いで室温に冷却した。溶媒を蒸発させた。残渣を飽和ＮａＨＣＯ_３溶液に取った。混合物をＤＣＭで抽出した。有機層を分離し、乾燥させ（ＭｇＳＯ_４）、濾過し、そして溶媒を蒸発乾固した。残渣はシリカゲル（１５〜４０μｍ）でのカラムクロマトグラフィーにより精製した（溶出：ＤＣＭ／ＭｅＯＨ／ＮＨ_４ＯＨ ９９／１／０．１および８５／１５／０．１）。純粋な画分を集め、そして溶媒を蒸発させた。残渣（１．９ｇ）をシリカゲル（１５〜４０μｍ）でのカラムクロマトグラフィーにより精製した（溶出：シクロヘキサン／２−プロパノール／ＮＨ_４ＯＨ ８８／１２／１）。純粋な画分を集め、そして溶媒を蒸発させた。残渣をＤＩＰＥから結晶化した。沈殿を濾過し、そして乾燥させて、０．３３ｇ（１１％）の化合物１、融点２０４℃を得た。
実施例Ｂ２
最終化合物２の調製

塩化アルミニウム（０．２３４モル）を、Ｎ−［４−［１−（１Ｈ−イミダゾール−１−イル）−２−メチルプロピル］フェニル］−２−メチル−３−フェニル−２−プロペンアミド（０．０２６モル）の溶液（６０ｍｌのクロロ−ベンゼン中）に数部に分けて加え、そして混合物を１００℃で３時間撹拌した。混合物を氷水に注ぎ、ＮＨ_４ＯＨで塩基性とし、そしてＤＣＭで抽出した。混合物はセライトを通して濾過し、そして濾液を捨てた。有機層を乾燥させ（ＭｇＳＯ_４）、濾過し、そして蒸発乾固した。残渣をシリカゲル（３５〜７０μｍ）でのカラムクロマトグラフィーにより精製した（溶出：ＤＣＭ／ＭｅＯＨ／ＮＨ_４ＯＨ ９５／５／０．１）。純粋な画分を集め、そして蒸発させた。残渣（４ｇ）をＭＥＫから結晶化し、２．１２ｇ（２９％）の化合物２、融点２１１．４℃を得た。
実施例Ｂ３
最終化合物３の調製

ジメチルアミン、塩酸塩（０．３モル）を、室温にてＮ_２流下で炭酸カリウム（０．３６０３モル）の懸濁液（３００ｍｌのＤＭＦ中）に数部に分けて加えた。混合物を３０分間撹拌した。中間体３（０．０６モル）および中間体４（０．０６モル）の混合物を慎重に加えた。混合物を室温で３０分間撹拌した。氷水を加えた。沈殿を濾過し、水で洗浄し、そして濾液をＤＣＭで抽出した。有機層を分離し、乾燥させ（ＭｇＳＯ_４）、濾過し、そして溶媒を蒸発乾固した。残渣（１６．６ｇ）をシリカゲル（２０〜４５μｍ）でのカラムクロマトグラフィーにより精製した（溶出：ＤＣＭ／ＭｅＯＨ／ＮＨ_４ＯＨ ９５／５／０．２）。純粋な画分を集め、そして溶媒を蒸発させた。残渣（４．９ｇ）を２−プロパノンおよびＭｅＯＨから結晶化した。沈殿を濾過し、そして乾燥させて１．２ｇの化合物３、融点１８０℃を得た。
実施例Ｂ４
最終化合物４の調製

中間体７（０．０１１３モル）の混合物（６０ｍｌのＭｅＯＨ中）を、４０℃にて４．８バールの圧力下にて６時間、触媒としてＰｄ／Ｃ１０％（０．３５ｇ）を用いて水素化した。Ｈ_２（１当量）の取り込み後、触媒はセライトで濾過し、そして濾液を蒸発させた。残渣を水および濃水酸化アンモニウム溶液に取り、そしてＤＣＭで抽出した。有機層を分離し、乾燥させ（ＭｇＳＯ_４）、濾過し、そして溶媒を蒸発させた。残渣はシリカゲル（１５〜４０μｍ）でのカラムクロマトグラフィーにより精製した（溶出：ＤＣＭ／ＭｅＯＨ／ＮＨ_４ＯＨ ９５／５／０．３および９３／７／０．５）。純粋な画分を集め、そして溶媒を蒸発させた。残渣を２−プロパノンおよびジエチルエーテルから結晶化した。沈殿を濾過し、そして乾燥させて０．６９ｇ（２０％）の化合物４を得た。
実施例Ｂ５
最終化合物５の調製

中間体８（０．０９９６モル）の混合物（４２６ｍｌの３Ｎ 塩酸および２７４ｍｌのＴＨＦ中）を、７０℃で一晩撹拌し、次いで氷に注ぎ、濃ＮＨ_４ＯＨ溶液で塩基性とし、そしてＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を分離し、乾燥させ（ＭｇＳＯ_４）、濾過し、そして溶媒を蒸発させた。残渣をＤＣＭから結晶化した。沈殿を濾過し、そして乾燥させて１５．２１ｇ（５６％）の化合物５を得た。
実施例Ｂ６
最終化合物６の調製

中間体１２（０．０１３モル）の混合物（６１．８ｍｌのホルムアミドおよび３０ｍｌのギ酸中）を３６時間、撹拌そして還流した。混合物を室温に冷却し、氷水に注ぎ、そして濾過した。沈殿を水、２−プロパノンそしてジエチルエーテルで洗浄した。沈殿を乾燥させ、そしてＭｅＯＨ／ＴＨＦから再結晶させて、１．７４ｇ（４０％）の化合物６、融点２２１．３℃を得た。
実施例Ｂ７
最終化合物７の調製

ホウ酸水素ナトリウム（０．０１５１モル）を０℃でＮ_２流下にて中間体３（０．０１１６モル）の溶液（５０ｍｌのＭｅＯＨ中）に加えた。混合物を１時間撹拌し、そして水に注いだ。有機溶媒を蒸発させた。水性濃縮物をＤＣＭおよび水に取り、そして混合物を抽出した。有機層を分離し、乾燥させ（ＭｇＳＯ_４）、濾過し、そして溶媒を蒸発乾固した。残渣を２−プロパノンおよびＭｅＯＨから結晶化した。沈殿を濾過し、ジエチルエーテルで洗浄し、そして乾燥させて１．２ｇの化合物７、融点１３１℃を得た。

表Ｆ−１は、上記実施例の１つに従い調製した化合物を列挙する。表では以下の略号を使用した。

薬理学的実施例
ＰＡＲＰ−１阻害活性のインビトロシンチレーション近位アッセイ（ＳＰＡ）
本発明の化合物を、ＳＰＡ技法（アマシャム ファルマシア バイオテック（Ａｍｅｒｓｈａｍ Ｐｈａｒｍａｃｉａ Ｂｉｏｔｅｃｈ）の登録商標）に基づくインビトロアッセイで試験した。

原理的には、このアッセイはビオチン化した標的タンパク質、すなわちヒストンのポリ（ＡＤＰ−リボシル）化を検出するために十分に確立されたＳＰＡ技法に依る。このリボシル化は、ニックＤＮＡ活性化ＰＡＲＰ−１酵素およびＡＤＰ−リボシル供与体として［^３Ｈ］−ニコチンアミドアデニンジヌクレオチド（［^３Ｈ］−ＮＡＤ^＋）を使用して導入される。

ＰＡＲＰ−１酵素活性のインデューサーとして、ニックＤＮＡを調製した。このために、２５ｍｇのＤＮＡ（供給元；シグマ（Ｓｉｇｍａ））を２５ｍｌのＤＮＡｓｅバッファー（１０ｍＭ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ、ｐＨ７．４；０．５ｍｇ／ｍｌのウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）；５ｍＭ ＭｇＣｌ_２．６Ｈ_２Ｏおよび１ｍＭ ＫＣｌ）に溶解し、これに５０μｌのＤＮＡｓｅ溶液（０．１５Ｍ ＮａＣｌ中の１ｍｇ／ｍｌ）を加えた。３７℃で
９０分のインキュベーション後、反応は１．４５ｇのＮａＣｌを加え、続いてさらに５８℃で１５分間インキュベーションすることにより停止した。反応混合物は氷上で冷却し、そして４℃でそれぞれ１．５および２時間、１．５リットルの０．２Ｍ ＫＣｌに対して、そして２度目に１．５リットルの０．０１Ｍ ＫＣｌにそれぞれ１．５および２時間透析した。混合物をアリコートに分け、そして−２０℃で保存した。ヒストン（１ｍｇ／ｍｌ、ＩＩ−Ａ型、供給元：シグマ）は、アマシャムのビオチン化キットを使用してビオチン化し、そしてアリコートとして−２０℃にて保存した。１００ｍｇ／ｍｌＳＰＡポリ（ビニルトルエン）（ＰＶＴ）ビーズ（供給元：アマシャム）のストック溶液を、ＰＢＳ中に作成した。［^３Ｈ］−ＮＡＤ^＋のストック溶液は、１２０μｌの［^３Ｈ］−ＮＡＤ^＋（０．１ｍＣｉ／ｍｌ、供給元：ＮＥＮ）を６ｍｌのインキュベーションバッファー（５０ｍＭ Ｔｒｉｓ／ＨＣｌ、ｐＨ８；０．２ｍＭ ＤＴＴ；４ｍＭ ＭｇＣｌ_２）に加えることにより作成した。４ｍＭ ＮＡＤ^＋（供給元：ロッシュ（Ｒｏｃｈｅ））の溶液をインキュベーションバッファー（−２０℃に冷却した水中１００ｍＭのストック溶液から）中に作成した。ＰＡＲＰ−１酵素は、技術的に知られている技法、すなわちヒト肝臓ｃＤＮＡから出発したタンパク質のクローニングおよび発現を使用して生産した。参考文献を含め、使用したＰＡＲＰ−１酵素のタンパク質配列に関する情報は、Ｓｗｉｓｓ−Ｐｒｏｔデータベース中に、主要寄託番号Ｐ０９８７４で見いだすことができる。ビオチン化ヒストンおよびＰＶＴ−ＳＰＡビーズは混合し、室温で３０分間プレインキュベーションした。ＰＡＲＰ−１酵素（濃度はロットに依存する）を、ニックＤＮＡと混合し、そして混合物を４℃で３０分間プレインキュベーションした。この等部のヒストン／ＰＶＴ−ＳＰＡビーズ溶液およびＰＡＲＰ−１酵素／ＤＮＡ溶液を混合し、そして７５μｌの混合物をＤＭＳＯ中１μｌの化合物および２５μｌの［^３Ｈ］−ＮＡＤ^＋と一緒になって９６ウェルのマイクロタイタープレート中の各ウェルに加えた。インキュベーション混合物中の最終濃度は、ビオチン化ヒストンについて２μｇ／ｍｌ、ＰＶＴ−ＳＰＡビーズについて２ｍｇ／ｍｌ、ニックＤＮＡについて２μｇ／ｍｌ、そしてＰＡＲＰ−１酵素について５から１０μｇ／ｍｌの間であった。混合物を室温で１５分間インキュベーションした後、反応はインキュベーションバッファー中１００μｌの４ｍＭ ＮＡＤ^＋（最終濃度２ｍＭ）を加え、そしてプレートを混合することにより停止した。

ビーズは少なくとも１５分間沈降させ、そしてプレートはシンチレーションカウンティングのためにＴｏｐＣｏｕｎｔＮＸＴ（商標）（パッカード：Ｐａｃｋａｒｄ）に移し、値を分あたりのカウント（ｃｐｍ）として表した。各実験に関して、対照（ＰＡＲＰ−１酵素およびＤＭＳＯを含有し、そして化合物を含まない）、ブランクインキュベーション（ＤＭＳＯを含有するが、ＰＡＲＰ−１酵素または化合物を含まない）およびサンプル（ＤＭＳＯに溶解したＰＡＲＰ−１酵素および化合物を含む）を平行して行った。試験したすべての化合物を溶解し、そして最後にはさらにＤＭＳＯで希釈した。第１の場合、化合物を１０^−６Ｍ濃度で試験した。化合物が１０^−６Ｍで活性を示した時、用量−応答曲線を作成し、ここで化合物は１０^−５から１０^−８Ｍの間の濃度で試験した。各試験で、ブランク値を対照およびサンプル値の両方から差し引いた。対照サンプルは最大のＰＡＲＰ−１酵素活性を表した。各サンプルに関して、ｃｐｍの量を対照の平均ｃｐｍ値の割合として表した。適切な場合、ＩＣ_５０値（ＰＡＲＰ−１酵素活性を対照の５０％まで下げるために必要な薬剤の濃度）は、５０％レベルを丁度越えた点と、丁度下がった点の実験点の間の線形補間を使用してコンピューター処理した。ここで試験化合物の効果はｐＩＣ_５０として表される（ＩＣ_５０値の負の対数値）。参照化合物として、４−アミノ−１，８−ナフタルイミドをＳＰＡアッセイを確認するために含めた。試験した化合物は、１０^−６Ｍの初期試験濃度で阻害活性を表した（表２を参照にされたい）。

ＰＡＲＰ−１阻害活性に関するインビトロ濾過アッセイ
本発明の化合物は、ＡＤＰ−リボシル供与体として［^３２Ｐ］−ＮＡＤを使用したヒストンのポリ（ＡＤＰ−リボシル）化活性により、ＰＡＲＰ−１活性を評価するインビトロ
濾過アッセイで試験した（ニックＤＮＡの存在下で誘発される）。放射性リボシル化ヒストンをトリクロロ酢酸（ＴＣＡ）で９６ウェルフィルタープレート中で沈殿させ、そして取り込まれた［^３２Ｐ］をシンチレーションカウンターを使用して測定した。

ヒストン（ストック溶液：Ｈ_２Ｏ中の５ｍｇ／ｍｌ）、ＮＡＤ^＋（ストック溶液：Ｈ_２Ｏ中の１００ｍＭ）、および［^３２Ｐ］−ＮＡＤ^＋の混合物をインキュベーションバッファー（５０ｍＭ Ｔｒｉｓ／ＨＣｌ、ｐＨ８；０．２ｍＭ ＤＴＴ；４ｍＭ ＭｇＣｌ_２）中に作成した。ＰＡＲＰ−１酵素（５〜１０μｇ／ｍｌ）およびニックＤＮＡの混合物も作成した。ニックＤＮＡは、ＰＡＲＰ−１阻害活性についてインビトロＳＰＡで記載したように調製した。１μｌの化合物（ＤＭＳＯ中）および２５μｌのヒストン−ＮＡＤ^＋／［^３２Ｐ］−ＮＡＤ^＋の混合物を一緒になって含む７５μｌのＰＡＲＰ−１酵素／ＤＮＡ混合物は、９６ウェルフィルタープレート（０．４５μｍ、供給元：ミリポア（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）のウェル毎に加えた。インキュベーション混合物中の最終濃度は、ヒストンについて２μｇ／ｍｌ、ＮＡＤ^＋について０．１ｍＭ、［^３２Ｐ］−ＮＡＤ^＋について２００μＭ（０．５μＣ）、そしてニックＤＮＡについて２μｇ／ｍｌであった。プレートは室温で１５分間インキュベーションし、そして反応は１０μｌの氷冷した１００％ＴＣＡを加え、続いて１０μｌの氷冷ＢＳＡ溶液（Ｈ_２Ｏ中の１％）を加えることにより停止した。タンパク質画分を４℃で１０分間沈殿させ、そしてプレートを吸引濾過した。引き続きプレートを各ウェルについて室温で１ｍｌの１０％氷冷ＴＣＡ、１ｍｌの５％氷冷ＴＣＡおよび１ｍｌの５％ＴＣＡで洗浄した。最後に１００μｌのシンチレーション溶液（Ｍｉｃｒｏｓｃｉｎｔ４０、パッカード）を各ウェルに加え、そしてプレートはシンチレーションカウンティングのためにＴｏｐＣｏｕｎｔＮＸＴ（商標）（供給元：パッカード）に移し、そして値は分あたりのカウントとして表した（ｃｐｍ）。各実験に関して、対照（ＰＡＲＰ−１酵素およびＤＭＳＯを含有し、そして化合物を含まない）、ブランクインキュベーション（ＤＭＳＯを含有するが、ＰＡＲＰ−１酵素または化合物を含まない）およびサンプル（ＤＭＳＯに溶解したＰＡＲＰ−１酵素および化合物を含む）を平行して行った。試験するすべての化合物を溶解し、そして最後にはさらにＤＭＳＯで希釈した。第１の場合、化合物を１０^−５Ｍ濃度で試験した。化合物が１０^−５Ｍで活性を示した時、用量−応答曲線を作成し、ここで化合物は１０^−５から１０^−８Ｍの間の濃度で試験した。各試験で、ブランク値を対照およびサンプル値の両方から差し引いた。対照サンプルは最大のＰＡＲＰ−１酵素活性を表した。各サンプルに関して、ｃｐｍの量を対照の平均ｃｐｍ値の割合として表した。適切な場合、ＩＣ_５０値（ＰＡＲＰ−１酵素活性を対照の５０％まで下げるために必要な薬剤の濃度）は、５０％レベルの丁度上と、丁度下の実験点の間の線形補間を使用してコンピューター処理した。ここで試験化合物の効果はｐＩＣ_５０として表される（ＩＣ_５０値の負の対数値）。参照化合物として、４−アミノ−１，８−ナフタルイミドを濾過アッセイを確認するために含めた。試験した化合物は、１０^−５Ｍの初期試験濃度で阻害活性を表した（表２を参照にされたい）。

化合物は細胞化学−および／または放射線増感アッセイ、ガン細胞株中の内因性ＰＡＲＰ−１活性の阻害を測定するアッセイ、そして最終的にインビトロ放射線増感試験でさらに評価できる。

Claims (13)

1. 式（Ｉ）
   

   

   ［式中、
   ｎは０、１または２であり；
   ＸはＮまたはＣＲ^５であり、ここでＲ^５は水素であるか、またはＲ^１と一緒になって式−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ＝ＣＨ−の二価の基を形成することができ；
   Ｒ^１はＣ_１−６アルキルまたはチエニルであり；
   Ｒ^２は水素またはヒドロキシであるか、またはＲ^３またはＲ^４と一緒になって＝Ｏを形成することができ；
   Ｒ^３は
   −（ＣＨ_２）_ｓ−ＮＲ^６Ｒ^７ （ａ−１）
   −Ｏ−Ｈ （ａ−２）または
   −Ｏ−Ｒ^８ （ａ−３）
   ここで
   ｓは０、１、２または３であり；
   Ｒ^６は−ＣＨＯ、Ｃ_１−６アルキル、ヒドロキシＣ_１−６アルキル、Ｃ_１−６アルキルカルボニル、ジ（Ｃ_１−６アルキル）アミノＣ_１−６アルキル、Ｃ_１−６アルキルオキシＣ_１−６アルキル、Ｃ_１−６アルキルカルボニルアミノＣ_１−６アルキル、ピペリジニル、ピペリジニルＣ_１−６アルキル、ピペリジニルＣ_１−６アルキルアミノカルボニル、Ｃ_１−６アルキルオキシ、チエニルＣ_１−６アルキル、ピロリルＣ_１−６アルキル、アリールＣ_１−６アルキルピペリジニル、アリールカルボニルＣ_１−６アルキル、アリールカルボニルピペリジニルＣ_１−６アルキル、ハロインドゾリルピペリジニルＣ_１−６アルキルまたはアリールＣ_１−６アルキル（Ｃ_１−６アルキル）アミノＣ_１−６アルキルであり；
   Ｒ^７は水素またはＣ_１−６アルキルであり；
   Ｒ^８はＣ_１−６アルキル、Ｃ_１−６アルキルカルボニルまたはジ（Ｃ_１−６アルキル）アミノＣ_１−６アルキルであるか、あるいは
   Ｒ^３は式
   −Ｚ− （ｂ−１）
   式中
   Ｚは
   

   

   ここで
   各Ｒ^１０は独立して水素、Ｃ_１−６アルキルまたはＣ_１−６アルキルオキシＣ_１−６アルキルアミノである、
   から選択される複素環式環系である、
   の基であり；
   Ｒ^４は水素、Ｃ_１−６アルキル、フラニル、ピリジニル、アリールＣ_１−６アルキル、または
   

   

   であり；
   アリールはフェニル、またはハロ、Ｃ_１−６アルキルまたはＣ_１−６アルキルオキシで置換されたフェニルであるが、ただしｎが０であり、ＸがＮであり、Ｒ^２が水素であり、Ｒ^３が式（ｂ−１）の基であり、Ｚが複素環式環系（ｃ−２）または（ｃ−４）であり（ここで該複素環式環系Ｚは、窒素原子で分子の残りと結合しており）、そしてＲ^１０が水素である場合、Ｒ^４はＣ_１−６アルキルまたはピリジニル以外であり、
   但し以下の化合物は除外される
   

   

   の化合物、その製薬学的に許容される付加塩または立体化学的異性体。
2. ｎが０または１であり；ＸがＮまたはＣＲ^５であり；Ｒ^５が水素であり；ｓが０、１または２であり；Ｒ^６が−ＣＨＯ、Ｃ_１−６アルキル、ピペリジニルＣ_１−６アルキル、アリールカルボニルピペリジニルＣ_１−６アルキル、またはアリールＣ_１−６アルキル（Ｃ_１−６アルキル）アミノＣ_１−６アルキルであり；Ｒ^８がＣ_１−６アルキルである、請求項１に記載の化合物。
3. ｎが０であり；ＸがＮまたはＣＲ^５であり；Ｒ^５が水素であり；Ｒ^１がＣ_１−６アルキ
   ルであり；Ｒ^２が水素またはヒドロキシであるか、またはＲ^４と一緒になって＝Ｏを形成することができ；Ｒ^３が式（ａ−１）または（ａ−２）から選択される基であり；ｓが０または１であり；Ｒ^６が−ＣＨＯまたはＣ_１−６アルキルであり；そしてＲ^４が水素、Ｃ_１−６アルキルまたは
   

   

   である、請求項１および２のいずれかに記載の化合物。
4. 以下に示される、化合物が化合物番号１、化合物番号５、化合物番号７、化合物番号３および化合物番号１７
   

   

   から選択される請求項１、２および３のいずれかに記載の化合物。
5. Ｒ ^３ が（ａ−１）、（ａ−２）または（ａ−３）から選択される基である請求項１に記載の化合物。
6. 薬剤として使用するための請求項１ないし５のいずれかに記載の化合物。
7. 製薬学的に許容され得る担体および有効成分として治療に有効な量の請求項１ないし５のいずれかに記載の化合物を含んでなる製薬学的組成物。
8. 製薬学的に許容され得る担体および請求項１ないし５のいずれかに記載の化合物が完全に混合される、請求項７に記載の製薬学的組成物の調製法。
9. 化学増感または放射線増感のための薬剤を製造するための化合物の使用であって、該化合物が式（Ｉ）
   

   

   ［式中、
   ｎは０、１または２であり；
   ＸはＮまたはＣＲ^５であり、ここでＲ^５は水素であるか、またはＲ^１と一緒になって式−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ＝ＣＨ−の二価の基を形成することができ；
   Ｒ^１はＣ_１−６アルキルまたはチエニルであり；
   Ｒ^２は水素またはヒドロキシであるか、またはＲ^３またはＲ^４と一緒になって＝Ｏを形成することができ；
   Ｒ^３は
   −（ＣＨ_２）_ｓ−ＮＲ^６Ｒ^７ （ａ−１）
   −Ｏ−Ｈ （ａ−２）または
   −Ｏ−Ｒ^８ （ａ−３）
   ここで
   ｓは０、１、２または３であり；
   Ｒ^６は−ＣＨＯ、Ｃ_１−６アルキル、ヒドロキシＣ_１−６アルキル、Ｃ_１−６アルキルカルボニル、ジ（Ｃ_１−６アルキル）アミノＣ_１−６アルキル、Ｃ_１−６アルキルオキシＣ_１−６アルキル、Ｃ_１−６アルキルカルボニルアミノＣ_１−６アルキル、ピペリジニル、ピペリジニルＣ_１−６アルキル、ピペリジニルＣ_１−６アルキルアミノカルボニル、Ｃ_１−６アルキルオキシ、チエニルＣ_１−６アルキル、ピロリルＣ_１−６アルキル、アリールＣ_１−６アルキルピペリジニル、アリールカルボニルＣ_１−６アルキル、アリールカルボニルピペリジニルＣ_１−６アルキル、ハロインドゾリルピペリジニルＣ_１−６アルキルまたはアリールＣ_１−６アルキル（Ｃ_１−６アルキル）アミノＣ_１−６アルキルであり；
   Ｒ^７は水素またはＣ_１−６アルキルであり；
   Ｒ^８はＣ_１−６アルキル、Ｃ_１−６アルキルカルボニルまたはジ（Ｃ_１−６アルキル）アミノＣ_１−６アルキルであり；そして
   から選択される基であるか、あるいは
   Ｒ^３は式
   −Ｚ− （ｂ−１）
   式中
   Ｚは
   

   

   ここで
   各Ｒ^１０は独立して水素、Ｃ_１−６アルキルまたはＣ_１−６アルキルオキシＣ_１−６アルキルアミノである、
   から選択される複素環式環系である、
   の基であり；
   Ｒ^４は水素、Ｃ_１−６アルキル、フラニル、ピリジニル、アリールＣ_１−６アルキル、または
   

   

   であり；
   アリールはフェニル、またはハロ、Ｃ_１−６アルキルまたはＣ_１−６アルキルオキシで置換されたフェニルである］
   の化合物、その製薬学的に許容され得る付加塩または立体化学的異性体である上記使用。
10. 薬剤が化学増感のためである請求項９に記載の使用。
11. 薬剤が放射線増感のためである請求項９に記載の使用。
12. 請求項１ないし５のいずれかに記載の化合物を化学治療薬と共に含んでなる医薬組成物。
13. 化学増感または放射線増感のための薬剤の製造のための請求項１ないし５のいずれかに記載の化合物使用。