JP4579550B2 - セラミド合成促進剤及び皮膚外用剤 - Google Patents
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Description
本発明は、アサナの抽出物を含有することを特徴とするセラミド合成促進剤に関し、特に肌荒れ、乾燥肌の防止に有効性を発揮するセラミド合成促進剤に関するものである。
セラミドは、皮膚の基底層から角質層に細胞が移行する際に、上層の有棘層及び顆粒層で産生、分泌される層板顆粒の主成分であり、皮膚のバリア機能や水分保持能に重要な役割を果たす角質細胞間脂質を形成する。肌荒れの一因として乾燥や刺激物との接触や紫外線等による皮膚の炎症がある。乾燥や刺激物から肌を守るバリア機能の回復において、セラミドの産生を促進することが有効であるとされている。ヒト皮膚には、７系統のセラミドが存在することが確認されており、全種類のセラミドが角質層に存在する比率で補うことが理想的である。
従来、この様な肌荒れ、乾燥肌の予防改善に有効な化粧料として、セラミドが種々の皮膚外用剤に配合されているが、ヒトの皮膚に存在する全種類のセラミドを適正な比率で補充することは技術的に困難であった。生体内におけるセラミド合成を促進するセラミド合成促進剤として、特許文献１や特許文献２が報告されているが、効果が十分とはいい難かった。なお、アサナの抽出物のセラミド合成促進効果については報告されていない。
特開平８−２１７６５８号
特開２００１−２２０３４５号
以上のことから、肌荒れ、乾燥肌の改善効果に優れたセラミド合成促進剤及び皮膚外用剤が望まれている。
この様な事情により、本発明者らは鋭意研究検討した結果、アサナの抽出物によりセラミド合成が促進されることを見出し、さらにその抽出物に肌荒れ、乾燥肌の予防改善効果を見出し、本発明を完成するに至った。
本発明に用いるアサナは、マメ科に属し、学名：Ｐｔｅｒｏｃａｒｐｕｓ
ｍａｒｓｕｐｉｕｍであり、その種子が抗炎症、止血、皮膚病、打撲に用いられてきた。
ｍａｒｓｕｐｉｕｍであり、その種子が抗炎症、止血、皮膚病、打撲に用いられてきた。
本発明のアサナの抽出方法は特に限定されず、例えば、加熱抽出したものであっても良いし、常温又は低温で抽出したものであっても良い。抽出する溶媒としては、例えば、水、低級アルコール類（メタノール、エタノール、１−プロパノール、２−プロパノール、１−ブタノール、２−ブタノール等）、液状多価アルコール（１，３−ブチレングリコール、プロピレングリコール、グリセリン等）、ケトン類（アセトン、メチルエチルケトン等）、アセトニトリル、エステル類（酢酸エチル、酢酸ブチル等）、炭化水素類（ヘキサン、ヘプタン、流動パラフィン等）、エーテル類（エチルエーテル、テトラヒドロフラン、プロピルエーテル等）が挙げられる。好ましくは、水、低級アルコール及び液状多価アルコール等の極性溶媒が良く、特に好ましくは、水、エタノール、１，３−ブチレングリコール及びプロピレングリコールが良い。これらの溶媒は１種でも２種以上を混合して用いても良い。
上記抽出物は、抽出した溶液のまま用いても良く、必要に応じて、濃縮、希釈、濾過、活性炭等による脱色、脱臭等の処理をして用いても良い。更には、抽出した溶液を濃縮乾固、噴霧乾燥、凍結乾燥等の処理を行い、乾燥物として用いても良いし、カラム精製等を行って有効成分を濃縮したり単離してから用いても良い。
本発明のアサナの抽出物を含有することを特徴とするセラミド合成促進剤を肌荒れ改善の目的で用いるには、通常全身的又は局所的に内用や外用により投与される。投与量は、年齢、体重、症状、治療効果、投与方法、処理時間などにより異なるが、通常成人１人当たり１回に１ｍｇ〜１ｇ、好ましくは２０ｍｇ〜２００ｍｇの範囲で１日１回から数回投与される。投与量は種々の条件で変動するので、上記投与範囲より少ない量で十分な場合もあるし、また、範囲を超えて投与する必要のある場合もある。
本発明の経口投与のためのセラミド合成促進剤としては、錠剤、丸剤、散剤、顆粒剤、カプセル剤、乳濁剤、溶液剤、懸濁剤、シロップ剤、エリキシル剤などが挙げられる。上記抽出物をそのまま使用しても良く、抽出物の効果を損なわない範囲内で、賦形剤、増量剤、結合剤、湿潤剤、崩壊剤、表面活性剤、滑沢剤、分散剤、緩衝剤、香料、保存料、溶解補助剤、溶剤等を用いることができる。具体的には、乳糖、ショ糖、ソルビット、マンニット、澱粉、沈降性炭酸カルシウム、重質酸化マグネシウム、タルク、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、セルロース又はその誘導体、アミロペクチン、ポリビニルアルコール、ゼラチン、界面活性剤、水、生理食塩水、エタノール、グリセリン、プロピレングリコール、カカオ脂、ラウリン脂、ワセリン、パラフィン、高級アルコール等である。
本発明の皮膚外用剤は、化粧品、医薬部外品及び医薬品のいずれにも用いることができ、その剤形としては、例えば、化粧水、クリーム、乳液、ゲル剤、エアゾール剤、エッセンス、パック、洗浄剤、浴用剤、ファンデーション、打粉、口紅、軟膏、パップ剤等の皮膚に適用されるものが挙げられる。上記抽出物をそのまま使用しても良く、抽出物の効果を損なわない範囲内で、外用剤に用いられる成分である油脂類、ロウ類、炭化水素類、脂肪酸類、アルコール類、エステル類、界面活性剤、金属石鹸、ｐＨ調整剤、防腐剤、香料、保湿剤、粉体、紫外線吸収剤、増粘剤、色素、酸化防止剤、美白剤、キレート剤等の成分を配合することもできる。
本発明に用いる上記抽出物の配合量は、本発明のセラミド合成促進剤に対し、固形物に換算して０．０００１重量％以上、好ましくは０．００１〜５０重量％の配合が良い。０．０００１重量％未満では十分な効果は望みにくい。５０重量％を越えて配合した場合、効果の増強はみられにくく不経済である。また、添加の方法については、予め加えておいても、製造途中で添加しても良く、作業性を考えて適宜選択すれば良い。
本発明のアサナの抽出物はセラミド合成促進効果に優れていた。また、この抽出物を含有する皮膚外用剤は、安全で肌荒れ、乾燥肌の改善効果に優れていた。
次に本発明を詳細に説明するため、実施例として本発明に用いる抽出物の製造例、本発明の処方例及び実験例を挙げるが、本発明はこれに限定されるものではない。実施例に示す配合量の部とは重量部を示し、％は重量％を示す。
製造例１ アサナの熱水抽出物
アサナの樹皮の乾燥物１００ｇに精製水２Ｌを加え、９５〜１００℃で２時間抽出した後、濾過し、その濾液を濃縮し、凍結乾燥してアサナの熱水抽出物を２．６ｇ得た。
アサナの樹皮の乾燥物１００ｇに精製水２Ｌを加え、９５〜１００℃で２時間抽出した後、濾過し、その濾液を濃縮し、凍結乾燥してアサナの熱水抽出物を２．６ｇ得た。
製造例２ アサナのエタノール抽出物
アサナの樹皮及び茎の乾燥物１００ｇにエタノール２Ｌを加え、常温で７日間抽出した後、濾過し、その濾液を濃縮乾固して、アサナのエタノール抽出物を４．５ｇ得た。
アサナの樹皮及び茎の乾燥物１００ｇにエタノール２Ｌを加え、常温で７日間抽出した後、濾過し、その濾液を濃縮乾固して、アサナのエタノール抽出物を４．５ｇ得た。
製造例３ アサナの５０％１，３−ブチレングリコール水溶液抽出物
アサナの種子及び樹皮の乾燥物２０ｇに精製水２００ｍＬ及び１，３−ブチレングリコール２００ｍＬを加え、常温で７日間抽出した後、濾過し、アサナの５０％１，３−ブチレングリコール抽出物を３６０ｇ得た。
アサナの種子及び樹皮の乾燥物２０ｇに精製水２００ｍＬ及び１，３−ブチレングリコール２００ｍＬを加え、常温で７日間抽出した後、濾過し、アサナの５０％１，３−ブチレングリコール抽出物を３６０ｇ得た。
参考製造例１ ロッダの５０％１，３−ブチレングリコール水溶液抽出物
ロッダの葉及び樹皮の乾燥物２０ｇに精製水２００ｍＬ及び１，３−ブチレングリコール２００ｍＬを加え、常温で7日間抽出した後、濾過し、ロッダの５０％１，３−ブチレングリコール抽出物を３８０ｇ得た。
ロッダの葉及び樹皮の乾燥物２０ｇに精製水２００ｍＬ及び１，３−ブチレングリコール２００ｍＬを加え、常温で7日間抽出した後、濾過し、ロッダの５０％１，３−ブチレングリコール抽出物を３８０ｇ得た。
参考製造例２ サクナのエタノール抽出物
サクナの葉及び枝の乾燥物５０ｇにエタノール１Ｌを加え、常温で7日間抽出した後、濾過し、その濾液を濃縮乾固し、サクナのエタノール抽出物を９．８ｇ得た。
サクナの葉及び枝の乾燥物５０ｇにエタノール１Ｌを加え、常温で7日間抽出した後、濾過し、その濾液を濃縮乾固し、サクナのエタノール抽出物を９．８ｇ得た。
処方例１ クリーム
処方 配合量
１．アサナの熱水抽出物（製造例１） １．０部
２．スクワラン ５．５
３．オリーブ油 ３．０
４．ステアリン酸 ２．０
５．ミツロウ ２．０
６．ミリスチン酸オクチルドデシル ３．５
７．ポリオキシエチレンセチルエーテル（２０Ｅ．Ｏ．） ３．０
８．ベヘニルアルコール １．５
９．モノステアリン酸グリセリン ２．５
１０．香料 ０．１
１１．１，３−ブチレングリコール ８．５
１２．パラオキシ安息香酸エチル ０．０５
１３．パラオキシ安息香酸メチル ０．２
１４．精製水 ６７．１５
［製造方法］成分２〜９を加熱溶解して混合し、７０℃に保ち油相とする。成分１及び１１〜１４を加熱溶解して混合し、７５℃に保ち水相とする。油相に水相を加えて乳化して、かき混ぜながら冷却し、４５℃で成分１０を加え、更に３０℃まで冷却して製品とする。
処方 配合量
１．アサナの熱水抽出物（製造例１） １．０部
２．スクワラン ５．５
３．オリーブ油 ３．０
４．ステアリン酸 ２．０
５．ミツロウ ２．０
６．ミリスチン酸オクチルドデシル ３．５
７．ポリオキシエチレンセチルエーテル（２０Ｅ．Ｏ．） ３．０
８．ベヘニルアルコール １．５
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１１．１，３−ブチレングリコール ８．５
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１３．パラオキシ安息香酸メチル ０．２
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［製造方法］成分２〜９を加熱溶解して混合し、７０℃に保ち油相とする。成分１及び１１〜１４を加熱溶解して混合し、７５℃に保ち水相とする。油相に水相を加えて乳化して、かき混ぜながら冷却し、４５℃で成分１０を加え、更に３０℃まで冷却して製品とする。
比較例１ 従来のクリーム
処方例１において、アサナの熱水抽出物を精製水に置き換えたものを従来のクリームとした。
処方例１において、アサナの熱水抽出物を精製水に置き換えたものを従来のクリームとした。
処方例２ 乳液
処方 配合量
１．アサナの５０％１，３−ブチレングリコール水溶液抽出物（製造例３）０．５部
２．スクワラン ５．０
３．オリーブ油 ５．０
４．ホホバ油 ５．０
５．セタノール １．５
６．モノステアリン酸グリセリン ２．０
７．ポリオキシエチレンセチルエーテル（２０Ｅ．Ｏ．） ３．０
８．ポリオキシエチレンソルビタンモノオレエート（２０Ｅ．Ｏ．） ２．０
９．香料 ０．１
１０．プロピレングリコール １．０
１１．グリセリン ２．０
１２．パラオキシ安息香酸メチル ０．２
１３．精製水 ７２．７
［製造方法］成分２〜８を加熱溶解して混合し、７０℃に保ち油相とする。成分１及び１０〜１３を加熱溶解して混合し、７５℃に保ち水相とする。油相に水相を加えて乳化して、かき混ぜながら冷却し、４５℃で成分９を加え、更に３０℃まで冷却して製品とする。
処方 配合量
１．アサナの５０％１，３−ブチレングリコール水溶液抽出物（製造例３）０．５部
２．スクワラン ５．０
３．オリーブ油 ５．０
４．ホホバ油 ５．０
５．セタノール １．５
６．モノステアリン酸グリセリン ２．０
７．ポリオキシエチレンセチルエーテル（２０Ｅ．Ｏ．） ３．０
８．ポリオキシエチレンソルビタンモノオレエート（２０Ｅ．Ｏ．） ２．０
９．香料 ０．１
１０．プロピレングリコール １．０
１１．グリセリン ２．０
１２．パラオキシ安息香酸メチル ０．２
１３．精製水 ７２．７
［製造方法］成分２〜８を加熱溶解して混合し、７０℃に保ち油相とする。成分１及び１０〜１３を加熱溶解して混合し、７５℃に保ち水相とする。油相に水相を加えて乳化して、かき混ぜながら冷却し、４５℃で成分９を加え、更に３０℃まで冷却して製品とする。
処方例３ ファンデーション
処方 配合量
１．アサナのエタノール抽出物（製造例２） ０．５部
２．サクナのエタノール抽出物（参考製造例２） ０．５
３．ステアリン酸 ２．４
４．ポリオキシエチレンソルビタンモノステアレート（２０Ｅ．Ｏ．） １．０
５．ポリオキシエチレンセチルエーテル（２０Ｅ．Ｏ．） ２．０
６．セタノール １．０
７．液状ラノリン ２．０
８．流動パラフィン ３．０
９．ミリスチン酸イソプロピル ６．５
１０．カルボキシメチルセルロースナトリウム ０．１
１１．ベントナイト ０．５
１２．プロピレングリコール ４．０
１３．トリエタノールアミン １．１
１４．パラオキシ安息香酸メチル ０．２
１５．二酸化チタン ８．０
１６．タルク ４．０
１７．ベンガラ １．０
１８．黄酸化鉄 ２．０
１９．香料 ０．１
２０．精製水 ６０．１
［製造方法］成分１〜８を加熱溶解し、８０℃に保ち油相とする。成分２０に成分１０をよく膨潤させ、続いて、成分１２〜１４を加えて均一に混合する。これに粉砕機で粉砕混合した成分１５〜１８を加え、ホモミキサーで撹拌し７５℃に保ち水相とする。この水相に油相をかき混ぜながら加え、冷却し、４５℃で成分１９を加え、かき混ぜながら３０℃まで冷却して製品とする。
処方 配合量
１．アサナのエタノール抽出物（製造例２） ０．５部
２．サクナのエタノール抽出物（参考製造例２） ０．５
３．ステアリン酸 ２．４
４．ポリオキシエチレンソルビタンモノステアレート（２０Ｅ．Ｏ．） １．０
５．ポリオキシエチレンセチルエーテル（２０Ｅ．Ｏ．） ２．０
６．セタノール １．０
７．液状ラノリン ２．０
８．流動パラフィン ３．０
９．ミリスチン酸イソプロピル ６．５
１０．カルボキシメチルセルロースナトリウム ０．１
１１．ベントナイト ０．５
１２．プロピレングリコール ４．０
１３．トリエタノールアミン １．１
１４．パラオキシ安息香酸メチル ０．２
１５．二酸化チタン ８．０
１６．タルク ４．０
１７．ベンガラ １．０
１８．黄酸化鉄 ２．０
１９．香料 ０．１
２０．精製水 ６０．１
［製造方法］成分１〜８を加熱溶解し、８０℃に保ち油相とする。成分２０に成分１０をよく膨潤させ、続いて、成分１２〜１４を加えて均一に混合する。これに粉砕機で粉砕混合した成分１５〜１８を加え、ホモミキサーで撹拌し７５℃に保ち水相とする。この水相に油相をかき混ぜながら加え、冷却し、４５℃で成分１９を加え、かき混ぜながら３０℃まで冷却して製品とする。
処方例４ 軟膏
処方 配合量
１．アサナの熱水抽出物（製造例１） ０．０１部
２．ロッダの５０％１，３−ブチレングリコール抽出物（参考製造例１） ０．５
３．ポリオキシエチレンセチルエーテル（３０Ｅ．Ｏ．） ２．０
４．モノステアリン酸グリセリン １０．０
５．流動パラフィン ５．０
６．セタノール ６．０
７．パラオキシ安息香酸メチル ０．１
８．プロピレングリコール １０．０
９．精製水 ６６．３９
［製造方法］成分３〜６を加熱溶解して混合し、７０℃に保ち油相とする。成分１、２及び７〜９を加熱溶解して混合し、７５℃に保ち水相とする。油相に水相を加えて乳化して、かき混ぜながら３０℃まで冷却して製品とする。
処方 配合量
１．アサナの熱水抽出物（製造例１） ０．０１部
２．ロッダの５０％１，３−ブチレングリコール抽出物（参考製造例１） ０．５
３．ポリオキシエチレンセチルエーテル（３０Ｅ．Ｏ．） ２．０
４．モノステアリン酸グリセリン １０．０
５．流動パラフィン ５．０
６．セタノール ６．０
７．パラオキシ安息香酸メチル ０．１
８．プロピレングリコール １０．０
９．精製水 ６６．３９
［製造方法］成分３〜６を加熱溶解して混合し、７０℃に保ち油相とする。成分１、２及び７〜９を加熱溶解して混合し、７５℃に保ち水相とする。油相に水相を加えて乳化して、かき混ぜながら３０℃まで冷却して製品とする。
処方例５ 飲料
処方 配合量（重量％）
１．アサナの熱水抽出物（製造例１） １．０
２．ステビア ０．０５
３．リンゴ酸 ５．０
４．香料 ０．１
５．水 ９３．８５
［製造方法］成分２及び３を少量の水に溶解する。次いで、成分１及び４、５を加えて混合する。
処方 配合量（重量％）
１．アサナの熱水抽出物（製造例１） １．０
２．ステビア ０．０５
３．リンゴ酸 ５．０
４．香料 ０．１
５．水 ９３．８５
［製造方法］成分２及び３を少量の水に溶解する。次いで、成分１及び４、５を加えて混合する。
次に、本発明の効果を詳細に説明するため、実験例を挙げる。
実験例１ セラミド合成促進試験
マウスケラチノサイト由来細胞株であるＰａｍ２１２細胞を６ｃｍディッシュに１×１０５個播種し、４日間培養した。その後、試料を最終濃度が１０μｇ／ｍＬになるように添加し、さらに２４時間培養を続けた。次に細胞をＰＢＳ（−）にて３回洗浄した後、ラバーポリスマンにて集め、凍結乾燥した。クロロホルム：メタノール（２：１）１ｍＬにて細胞から脂質を抽出し、その中のセラミド量をＫｉｓｉｃらの蛍光法（Ｋｉｓｉｃ Ａ． ａｎｄ Ｒａｐｐｏｒｔ Ｍ．Ｍ．， Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｌｉｐｉｄ Ｒｅｓｅａｒｃｈ， １５， １７９−１８０ （１９７４））により測定した。すなわち、脂質を３Ｎ塩酸０．１５ｍＬにて１００℃で２時間加水分解し、デシケーター中で乾燥、塩酸除去した後、酢酸エチル２ｍＬと０．１Ｍ酢酸緩衝液（ｐＨ３．７）１．２５ｍＬを加え、よく撹拌した。次に、フルオレスカミン溶液（フルオレスカミン ７ｍｇ／２５ｍＬ アセトン）０．２５ｍＬを加え、よく撹拌した後、遠心分離し、酢酸エチル層の蛍光強度をＥｘ４１０ｎｍ、Ｅｍ４９０ｎｍにて測定した。セラミドの合成促進率は、コントロールのセラミド生成量に対する比で求めた。
マウスケラチノサイト由来細胞株であるＰａｍ２１２細胞を６ｃｍディッシュに１×１０５個播種し、４日間培養した。その後、試料を最終濃度が１０μｇ／ｍＬになるように添加し、さらに２４時間培養を続けた。次に細胞をＰＢＳ（−）にて３回洗浄した後、ラバーポリスマンにて集め、凍結乾燥した。クロロホルム：メタノール（２：１）１ｍＬにて細胞から脂質を抽出し、その中のセラミド量をＫｉｓｉｃらの蛍光法（Ｋｉｓｉｃ Ａ． ａｎｄ Ｒａｐｐｏｒｔ Ｍ．Ｍ．， Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｌｉｐｉｄ Ｒｅｓｅａｒｃｈ， １５， １７９−１８０ （１９７４））により測定した。すなわち、脂質を３Ｎ塩酸０．１５ｍＬにて１００℃で２時間加水分解し、デシケーター中で乾燥、塩酸除去した後、酢酸エチル２ｍＬと０．１Ｍ酢酸緩衝液（ｐＨ３．７）１．２５ｍＬを加え、よく撹拌した。次に、フルオレスカミン溶液（フルオレスカミン ７ｍｇ／２５ｍＬ アセトン）０．２５ｍＬを加え、よく撹拌した後、遠心分離し、酢酸エチル層の蛍光強度をＥｘ４１０ｎｍ、Ｅｍ４９０ｎｍにて測定した。セラミドの合成促進率は、コントロールのセラミド生成量に対する比で求めた。
これらの実験結果を表１に示した。その結果、アサナの抽出物は、コントロールと比較して優れたセラミド合成促進効果を示した。
実験例２ 使用試験１
アサナの熱水抽出物の１％水溶液を用いて、肌荒れ、乾燥肌に悩む女性３０人（１９才〜４８才）を対象に１ヶ月間の使用試験を行った。使用後、肌荒れ、乾燥肌の改善作用をアンケートにより判定した。なお対照としては精製水を用いた。
アサナの熱水抽出物の１％水溶液を用いて、肌荒れ、乾燥肌に悩む女性３０人（１９才〜４８才）を対象に１ヶ月間の使用試験を行った。使用後、肌荒れ、乾燥肌の改善作用をアンケートにより判定した。なお対照としては精製水を用いた。
これらの試験結果を表２に示した。その結果、アサナの熱水抽出物の１％水溶液を用いた場合は、対照として精製水を用いた場合よりも、優れた肌荒れ、乾燥肌の改善効果を示した。すなわち、アサナの熱水抽出物の１％水溶液は顕著な効果を示した。なお、試験期間中、皮膚トラブルは一人もなく、安全性においても問題なかった。
アサナの抽出物を含有するその他の水溶液についても同様に使用試験を行ったところ、安全であり、優れた肌荒れ、乾燥肌の改善効果を示した。
実験例３ 使用試験２
処方例１のクリーム、比較例１の従来のクリームを用いて、肌荒れ、乾燥肌に悩む女性３０人（１９〜４９才）を対象に１ヶ月間の使用試験を行った。使用後、肌荒れ、乾燥肌の改善作用をアンケートにより判定した。
処方例１のクリーム、比較例１の従来のクリームを用いて、肌荒れ、乾燥肌に悩む女性３０人（１９〜４９才）を対象に１ヶ月間の使用試験を行った。使用後、肌荒れ、乾燥肌の改善作用をアンケートにより判定した。
これらの試験結果を表３に示した。その結果、処方例１で得られるクリームは、比較例１で得られる従来のクリームよりも、肌荒れ、乾燥肌の予防改善効果に優れていた。なお、試験期間中、皮膚トラブルは一人もなく、安全性においても問題なかった。また、処方成分の劣化についても問題なかった。
処方例２〜５についても同様に使用試験を行ったところ、安全であり、優れた肌荒れ、乾燥肌の予防改善作用を示した。
本発明のアサナの抽出物は優れたセラミド合成促進剤として用いることが出来る。また、安全な肌荒れ、乾燥肌の改善用皮膚外用剤を提供できる。
Claims (2)
- アサナの抽出物を含有することを特徴とするセラミド合成促進剤。
- 請求項１記載のセラミド合成促進剤を含有することを特徴とする、肌荒れ、乾燥肌の予防又は改善用皮膚外用剤。
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