JP4315496B2 - 硫酸還元菌からの硫化水素産生阻害剤およびそれを含有する硫化水素産生阻害組成物 - Google Patents
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Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、硫酸還元菌からの硫化水素産生阻害剤およびそれを含有する飲食物等の硫化水素産生阻害組成物に関する。
【０００２】
【従来の技術】
硫酸還元菌は硫酸塩から硫化水素を産生するので、その硫化水素の発生が問題となる環境や施設での硫酸還元菌からの硫化水素産生阻害剤は有用である。
従来、油井や各種精製工場等の産業施設におけるパイプライン，タンク等の金属設備の腐食において、あるいはまた、各種工場廃水処理あるいは公共汚水処理において、硫化水素が発生するのを抑えるいわゆる硫化水素産生阻害剤として、各種の殺菌剤や抗生剤が使用されている。
【０００３】
その殺菌剤や抗生剤としては、塩素、次亜塩素酸、二酸化塩素、オゾン、ホルムアルデヒド、グルタルアルデヒド、アクロレイン、セチルピリジニウムクロリド、塩化セチルトリメチルアンモニウムクロリド、ココジアミン、トリアジン、メチレンビスシアン酸、イソチアゾロン等が使用されている（「Biotechnology Handbooks ・８ Sulfate-Reducing Bacteria」、第１０章「Control in Industrial Settings」、Plenum Publishing co. 、New York、第２６５〜２９２頁、１９９５年発行）。
【０００４】
また、アントラキノン類（特開平６−２７９２０７）、ビートレッド、コチニールピグメント、モナスクピグメント、クリスタルバイオレット、フクシン、ゲンチアンバイオレットＢ等（特公平３−１０３９４）は、硫酸還元菌による硫化水素産生の抑制に有効であることが知られている。
【０００５】
ところで、硫酸還元菌は、産業施設ばかりでなく、人や家畜の腸内にもその存在が確認されており、特に人においてはその糞便中に顕著な数の硫酸還元菌が見つかる。その多くは、デスルホビブリオ（Desulfovibrio ）である（Gibsonら、FEMS Microbiology Ecology,86, 第１０３〜１１２頁〔1991年〕）。
硫酸還元菌の作用で１日当たり便１ｇ（乾燥重量）から９−３３８４nmolの硫化水素が発生する（NolletとVerstraete、Environmental Monitoring and Assessment,42, 第１１３〜１３１頁〔1996〕）。
【０００６】
硫化水素は金属を腐食させるばかりでなく、人にとっては不快な腐敗臭として感じる物質であって、糞便、おならの臭いの主原因物質であり（Moore ら、Gastroenterology,93,第１３２１〜１３２９頁〔1987〕）、また、人や家畜に対して毒性が強く、消化管内で発生した硫化水素が消化管粘膜細胞の代謝を阻害するなどして傷害する可能性が示唆されている。
【０００７】
特に、硫酸還元菌が産生する硫化水素は、潰瘍性大腸炎の一因であることが示唆されている（William ら、Gastroenterology,104, 第８０２〜８０９頁〔1993〕）ほどであり、消化管内の硫酸還元菌の硫化水素産生を抑制する方法が望まれているが、その抑制方法は未だ知られていない。仮に抗生物質を用いた場合、長期投与時の副作用など安全性や耐性菌の出現の問題がある。
【０００８】
【発明が解決しようとする課題】
本発明の目的は、人や家畜に投与しても安全であるとともに、耐性菌の出現のおそれがなく、副作用をともなうこともなく、消化管内および糞便中の硫化水素の発生を効果的に抑制することができる硫化水素産生阻害剤で、しかも、硫化水素の発生が問題となる環境や施設、すなわち、油井や各種精製工場等の産業施設におけるパイプライン，タンク等の金属設備の腐食において、さらに、各種工場廃水処理あるいは公共汚水処理において、硫化水素が発生するのを抑えるのにも使用できる硫化水素産生阻害剤を提供することにある。
【０００９】
発明者らは、ハーブ、生薬あるいは食品素材として知られ、人や家畜に対し安全でかつ副作用もないとされている各種の植物の抽出物や食品添加物について、それらの硫酸還元菌からの硫化水素の産生阻害に関し、鋭意検討をくわえ、本発明を完成するに至ったものである。
【００１０】
請求項１記載の本発明に係る硫酸還元菌からの硫化水素産生阻害剤は、ペパーミント精油抽出残渣の水抽出物を有効成分とする。
【００１１】
請求項２記載の本発明に係る硫酸還元菌からの硫化水素産生阻害剤は、レンセンソウ（連銭草）、キンコツソウ（筋骨草）、ホワイトホアハウンド、マートル、ヨウバイヒ（楊梅皮）、ラズベリーからなる群より選択される植物の抽出物の１種または２種以上を有効成分とする。
【００１２】
請求項３記載の本発明に係る硫酸還元菌からの硫化水素産生阻害剤は、 ３，４−ジメトキシ−１−アリルベンゼン、３，７−ジメチル−１−オクタノール、３−エトキシ−４−ヒドロキシベンズアルデヒド、ラバンズロール、メトフラン、２−メチルブチルイソバレート、ノポール、３−フェニル−１−プラパノール、ｔｒａｎｓ−サビネンハイドレートからなる群より選択される食品添加物の１種または２種以上を有効成分とする。
【００１３】
請求項４記載の本発明に係る硫化水素産生阻害組成物は、レンセンソウ（連銭草）、キンコツソウ（筋骨草）、ホワイトホアハウンド、マートルからなる群より選択される植物の抽出物の１種または２種以上を有効成分とする硫酸還元菌からの硫化水素産生阻害剤を含有してなるものである。
その硫化水素産生阻害組成物としては、飲食物として、たとえば、清涼飲料、チューインガム、キャンディ、チョコレート等の菓子、冷菓、乳製品、酒類、肉類、消臭食品等の食品が挙げられ、また、飲食物以外として、ペットフード、家畜用資料などが挙げられる。
【００１４】
上記各種の抽出物を得る植物の産地や形態、あるいは、抽出物の抽出方法等については、それらを特に限定をする必要はないし、当該植物は、そのままの状態で原料とすることも、あるいは所要の乾燥、細断、粉砕等の処理をして原料とすることもできる。
【００１５】
たとえば、抽出は、原料に１〜１０倍量の抽出溶媒を添加し、２５〜１００℃の温度で３０分〜５時間加熱抽出する方法で実施する。抽出溶媒としては、水、メタノール、エタノール、酢酸エチル、アセトン、エーテル、ｎ−へキサン等から任意の一種を選択して単独の溶媒、任意に選択した２種以上を任意の割合で混合した混合溶媒を使用することが可能である。
また、このようにして得られる抽出液をそのまま用いてもよいし、加熱濃縮、減圧濃縮して用いてもよい。さらには、必要に応じて、スプレードライ法、フリーズドライ法等により乾燥粉末化して用いてもよい。
【００１６】
上記各種の食品添加物としては、天然起源の抽出物から得られたものや合成品を使用することができる。
【００１７】
さらに、本発明に係る硫酸還元菌からの硫化水素産生阻害剤は、一種を単独で使用するほか、適宜の２種以上の混合物として使用することができ、あるいは、他の医薬または任意の製剤用担体ないし希釈液と混合して使用でき、しかも、任意の剤形にして医薬として利用することができる。その剤形としては、錠剤、顆粒剤、細粒剤、硬カプセル剤、軟カプセル剤または経口用液体製剤等を例示できる。
【００１８】
本発明に係る硫酸還元菌からの硫化水素産生阻害剤の投与量は、硫酸還元菌数や硫酸還元活性等によって変化するので一概には規定できないが、１日あたりの全投与量は、人および家畜に対し０．２ｍｇ〜１００ｍｇ／体重ｋｇ、好ましくは１ｍｇ〜６０ｍｇ／体重ｋｇである。
【００１９】
このように、本発明に係る硫酸還元菌からの硫化水素産生阻害剤は、既に、ハーブ、生薬あるいは食品素材として知られ、人や家畜に安全にしてかつ副作用もないとされている各種の植物の抽出物や食品添加物を有効成分として使用するものであるから、人や家畜に安心して投与できる。
また、油井や各種精製工場等の産業施設におけるパイプライン，タンク等の金属設備の腐食において、さらに、各種工場廃水処理あるいは公共汚水処理において、すなわち、硫化水素の発生が問題となる環境や施設において、その硫化水素が発生するのを抑制するのに使用できることも明らかである。
【００２０】
【発明の実施の形態】
以下本発明を複数の実施例、試験例を挙げて説明するが、それによって本発明の範囲が制限されるものではない。
【００２１】
〔実施例１−カキネガラシエタノール抽出物〕
カキネガラシの全草を天日乾燥し、得られた乾燥原料１００ｇを粉砕し、得られた粉砕物にエタノール１リットルを添加し、フラスコに入れて室温で２４時間静置して抽出した。さらにろ過により得られたエタノール抽出液をエバポレーターで減圧乾固させて、カキネガラシエタノール抽出物１４．４ｇを得た。
【００２２】
〔実施例２−コンフリー５０％エタノール抽出物〕
コンフリーの乾燥した葉２００ｇを粉砕し、得られた粉砕物に１リットルの５０％エタノールを添加し、還流冷却器付きフラスコに入れて８５℃で３時間還流抽出した。ろ過により得られたろ液をエバポレーターで減圧濃縮後、さらに凍結乾燥させて、コンフリー５０％エタノール抽出物２７．１ｇを得た。
【００２３】
〔実施例３−ペパーミント水抽出物〕
ペパーミントの葉を水蒸気蒸留装置により精油部分を除いた後、乾燥、粉砕して得られた粉砕物５０ｇに２００ミリリットルの水を添加しフラスコに入れて６０℃で２時間攪拌抽出した。ろ過により得られた抽出液をエバポレーターで濃縮乾固させて、ペパーミント水抽出物８．９ｇを得た。
【００２４】
〔実施例４−バジルエタノール抽出物〕
バジルの葉を５０℃で真空乾燥させた後、乾燥葉を粉砕し、得られた粉砕物５００ｇに２リットルのエタノールを添加し、還流冷却器付きフラスコに入れ、７０℃で２時間撹拌抽出した。ろ過により得られた抽出液をエバポレーターで濃縮し、さらに真空乾燥機で６０℃で乾燥させて、５．０ｇのバジルエタノール抽出物を得た。
【００２５】
〔実施例５−パセリ５０％エタノール抽出物〕
パセリの乾燥した葉３０ｇに３００ミリリットルの５０％エタノールを添加して還流冷却器付きフラスコに入れ８５℃で３時間還流抽出した。ろ過により得られた抽出液をエバポレーターで濃縮し、さらに凍結真空乾燥させて５．７ｇのパセリ５０％エタノール抽出物を得た。
【００２６】
〔実施例６−ヒソップ水抽出物〕
ヒソップの乾燥した葉１００ｇを粉砕し、得られた粉砕物に１リットルの水を添加し還流冷却器付きフラスコに入れ８０℃３時間抽出した。ろ過により得られた抽出液を凍結真空乾燥させて２０．６ｇのヒソップ水抽出物を得た。
【００２７】
〔実施例７−ホップ水抽出物〕
ホップの乾燥した球果２０．１ｇを粉砕し、得られた粉砕物に１００ｍｌの水を添加し、ビーカーに入れ８０℃３時間撹拌抽出した。ろ過により得られた抽出液を凍結真空乾燥させて５．２ｇのホップ水抽出物を得た。
【００２８】
〔実施例８−ホワイトホアハウンド水抽出物〕
ホワイトホアハウンドの乾燥した地上部１００ｇを粉砕し、得られた粉砕物に１リットルの水を添加し、還流冷却器付きのフラスコに入れ８０℃３時間抽出した。ろ過により得られた抽出液を凍結真空乾燥させて２４．３ｇのホワイトホアハウンド水抽出物を得た。
【００２９】
〔実施例９−マザーワート水抽出物〕
マザーワートの乾燥した地上部１００ｇを粉砕し、得られた粉砕物に１リットルの水を添加し、還流冷却器付きフラスコに入れ８０℃３時間抽出した。ろ過により得られた抽出液を凍結真空乾燥させて２８．４ｇのマザーワート水抽出物を得た。
【００３０】
〔実施例１０−ソヨウ５０％エタノール抽出物〕
ソヨウ（蘇葉）１００ｇを粉砕し、得られた粉砕物に５００ｍｌの５０％エタノールを添加し、還流冷却器付きフラスコに入れ８０℃３時間抽出した。ろ過により得られた抽出液を凍結真空乾燥させて２８．４ｇのソヨウ５０％エタノール抽出物を得た。
【００３１】
〔硫酸還元菌の硫化水素産生阻害試験〕
硫酸還元菌としてデスルホビブリオ・デスルフリカンス（Desulfovibrio desulfuricans (DSM642)）を用いた。培地は表１に示す試薬を１リットルの水に溶解し、ｐＨ６．８に調整後、培地の赤色が消えるまで１００％炭酸ガスを通気し、ハンゲート管に１０ｍｌずつ分注し、密栓した。
この培地をオートクレーブにより、１２１℃で１５分間滅菌処理した。この滅菌された培地にデスルホビブリオ・デスルフリカンスの培養液を０．２ｍｌずつ接種した。さらに、試料を水またはエタノール溶液として添加し（対照は試料無添加）、３７℃で４３時間培養した。この試験は常に二酸化炭素１００％の雰囲気中において行った。
このような試験においては培地に硫酸還元菌が生存、生育する場合には、硫酸塩が還元され、ヘッドスペースガス中には硫化水素が放出される。
この試験では、ガスクロマトグラフィーによるヘッドスペースガス中の硫化水素分析により、硫酸還元反応の確認を行った。なお硫化水素産生阻害率は下記計算式により求めた。
阻害率（％）＝（Ｃ−Ｓ）／Ｃ）×１００
（Ｃ：対照のヘッドスペースガス中の硫化水素量、Ｓ：試料添加のヘッドスペースガス中の硫化水素量）
【００３２】
【表１】
【００３３】
上記のようにして、実施例１〜１０の抽出物を含む本発明による植物の抽出物および同食品添加物について、スクリーニングテストを行い、その結果を表２〜６に示す。
【００３４】
【表２】
【００３５】
【表３】
【００３６】
【表４】
【００３７】
【表５】
【００３８】
【表６】
【００３９】
これらの結果は、本発明硫化水素産生阻害剤が、人や家畜の消化管内および糞便中、油井や各種精製工場等の産業施設における金属設備の腐食や各種工場廃水処理等で、硫化水素産生の原因菌である硫酸還元菌に対して阻害効果を有することを示し、さらに、本発明硫化水素産生阻害剤は、その活性成分により硫酸還元菌からの硫化水素産生阻害効果を発現して硫化水素の産生を阻害することによって、金属の腐食を防止し、また、人や家畜に対する毒性を軽減させ、潰瘍性大腸炎などの炎症を予防・治療し、消化管内容物や糞便、おならの臭いの発生を抑制することを示唆している。
【００４０】
〔実施例１１−キャンディー〕
以下に示す処方にてキャンディーを作製した。
グラニュー糖 ４５部
水飴（Ｄ．Ｅ．４２） ５０部
水 ２０部
カキネガラシＥｔＯＨ抽出物（実施例１） ３部
【００４１】
〔実施例１２−チューインガム〕
以下に示す処方にて慣用的に用いられる常法に従ってチューインガムを作製した。
ガムベース ２０部
砂糖 ５６部
水飴 １３部
ブドウ糖 １０部
ホワイトホアハウンド水抽出物 ５部
コンフリー５０％ＥｔＯＨ抽出物（実施例２）３部
軟化剤 １部
香料 ０．５部
【００４２】
〔実施例１３−チューインガム〕
以下に示す処方にて上記と同様にしてチューインガムを作製した。
ガムベース ２０部
砂糖 ５６部
水飴 １３部
ブドウ糖 １０部
パセリ５０％ＥｔＯＨ抽出物（実施例５） ５部
軟化剤 １部
香料 ０．５部
【００４３】
〔実施例１４−チョコレート〕
以下に示す処方にて慣用的に用いられている常法に従ってチョコレートを作製した。
カカオビター ２０部
カカオバター １７部
砂糖 ４３部
全脂粉乳 ２０部
ヒソップ水抽出物（実施例６） １部
香料 ０．２部
【００４４】
〔実施例１５−ビスケット〕
以下に示す処方にて慣用的に用いられる常法に従ってビスケットを作製した。
薄力粉 １００部
ショートニング ３０部
粉糖 ３２部
水飴（Ｄ．Ｅ．４２） ５部
脱脂粉乳 １．８部
食塩 １．１部
ペパーミント水抽出物（実施例３） １部
膨化剤 ０．４５部
【００４５】
〔実施例１６−錠剤〕
以下に示す処方にて慣用的に用いられる常法に従って錠剤を作製した。
乳糖 １００部
馬鈴薯でんぷん １００部
ソヨウ５０％ＥｔＯＨ抽出物（実施例１０）６０部
【００４６】
〔実施例１７−飲料〕
以下に示す処方にて慣用的に用いられる常法に従って飲料を作製した。
オレンジ果汁 ３０部
異性化糖 １５．２４部
クエン酸 ０．１部
ビタミンＣ ０．０４部
香料 ０．３１部
ホップ水抽出物（実施例７） ０．１部
水 ５５部
【００４７】
〔実施例１８−練り歯磨〕
以下に示す処方にて慣用的に用いられる常法に従って練り歯磨を作製した。
炭酸カルシウム ５０部
グリセリン ２０部
カルボキシメチルセルロース ２部
ラウリル硫酸ナトリウム ２部
ｎ−デカノール １部
サッカリン ０．１部
バジルＥｔＯＨ抽出物（実施例４） ８部
クロルヘキシジン ０．０１部
水 ９４部
【００４８】
〔実施例１９−散剤〕
以下に示す処方にて慣用的に用いられる常法に従って散剤を作製した。
乳糖 ６２部
馬鈴薯デンプン ２５部
２−ノナノン ３部
カンフェン １部
【００４９】
【発明の効果】
以上述べたところから明らかなように、本発明に係る硫化水素産生阻害剤は、ハーブ、生薬あるいは食品材料として知られている植物の抽出物の群、あるいは、３，４−ジメトキシ−１−アリルベンゼン等の食品添加物の群から選択される１種または２種以上を有効成分とするものであるから、人や家畜に対し恬然であり、その消化管内および糞便中での硫化水素産生の抑制はもちろん、油井や各種精製工場等の産業施設におけるパイプライン，タンク等の金属設備の腐食、各種工場排水処理あるいは公共汚水処理における硫化水素産生の抑制にも使用でき、かつ、その抑制または阻害効果が顕著なものである。
【００５０】
本発明に係る硫化水素産生阻害組成物は、レンセンソウ（連銭草）、キンコツソウ（筋骨草）、ホワイトホアハウンド、マートルからなる群より選択される植物の抽出物の１種または２種以上を有効成分とする硫化水素産生阻害剤を含有してなるから、飲食物、ペットフードまたは家畜用飼料として有益である。
【発明の属する技術分野】
本発明は、硫酸還元菌からの硫化水素産生阻害剤およびそれを含有する飲食物等の硫化水素産生阻害組成物に関する。
【０００２】
【従来の技術】
硫酸還元菌は硫酸塩から硫化水素を産生するので、その硫化水素の発生が問題となる環境や施設での硫酸還元菌からの硫化水素産生阻害剤は有用である。
従来、油井や各種精製工場等の産業施設におけるパイプライン，タンク等の金属設備の腐食において、あるいはまた、各種工場廃水処理あるいは公共汚水処理において、硫化水素が発生するのを抑えるいわゆる硫化水素産生阻害剤として、各種の殺菌剤や抗生剤が使用されている。
【０００３】
その殺菌剤や抗生剤としては、塩素、次亜塩素酸、二酸化塩素、オゾン、ホルムアルデヒド、グルタルアルデヒド、アクロレイン、セチルピリジニウムクロリド、塩化セチルトリメチルアンモニウムクロリド、ココジアミン、トリアジン、メチレンビスシアン酸、イソチアゾロン等が使用されている（「Biotechnology Handbooks ・８ Sulfate-Reducing Bacteria」、第１０章「Control in Industrial Settings」、Plenum Publishing co. 、New York、第２６５〜２９２頁、１９９５年発行）。
【０００４】
また、アントラキノン類（特開平６−２７９２０７）、ビートレッド、コチニールピグメント、モナスクピグメント、クリスタルバイオレット、フクシン、ゲンチアンバイオレットＢ等（特公平３−１０３９４）は、硫酸還元菌による硫化水素産生の抑制に有効であることが知られている。
【０００５】
ところで、硫酸還元菌は、産業施設ばかりでなく、人や家畜の腸内にもその存在が確認されており、特に人においてはその糞便中に顕著な数の硫酸還元菌が見つかる。その多くは、デスルホビブリオ（Desulfovibrio ）である（Gibsonら、FEMS Microbiology Ecology,86, 第１０３〜１１２頁〔1991年〕）。
硫酸還元菌の作用で１日当たり便１ｇ（乾燥重量）から９−３３８４nmolの硫化水素が発生する（NolletとVerstraete、Environmental Monitoring and Assessment,42, 第１１３〜１３１頁〔1996〕）。
【０００６】
硫化水素は金属を腐食させるばかりでなく、人にとっては不快な腐敗臭として感じる物質であって、糞便、おならの臭いの主原因物質であり（Moore ら、Gastroenterology,93,第１３２１〜１３２９頁〔1987〕）、また、人や家畜に対して毒性が強く、消化管内で発生した硫化水素が消化管粘膜細胞の代謝を阻害するなどして傷害する可能性が示唆されている。
【０００７】
特に、硫酸還元菌が産生する硫化水素は、潰瘍性大腸炎の一因であることが示唆されている（William ら、Gastroenterology,104, 第８０２〜８０９頁〔1993〕）ほどであり、消化管内の硫酸還元菌の硫化水素産生を抑制する方法が望まれているが、その抑制方法は未だ知られていない。仮に抗生物質を用いた場合、長期投与時の副作用など安全性や耐性菌の出現の問題がある。
【０００８】
【発明が解決しようとする課題】
本発明の目的は、人や家畜に投与しても安全であるとともに、耐性菌の出現のおそれがなく、副作用をともなうこともなく、消化管内および糞便中の硫化水素の発生を効果的に抑制することができる硫化水素産生阻害剤で、しかも、硫化水素の発生が問題となる環境や施設、すなわち、油井や各種精製工場等の産業施設におけるパイプライン，タンク等の金属設備の腐食において、さらに、各種工場廃水処理あるいは公共汚水処理において、硫化水素が発生するのを抑えるのにも使用できる硫化水素産生阻害剤を提供することにある。
【０００９】
発明者らは、ハーブ、生薬あるいは食品素材として知られ、人や家畜に対し安全でかつ副作用もないとされている各種の植物の抽出物や食品添加物について、それらの硫酸還元菌からの硫化水素の産生阻害に関し、鋭意検討をくわえ、本発明を完成するに至ったものである。
【００１０】
請求項１記載の本発明に係る硫酸還元菌からの硫化水素産生阻害剤は、ペパーミント精油抽出残渣の水抽出物を有効成分とする。
【００１１】
請求項２記載の本発明に係る硫酸還元菌からの硫化水素産生阻害剤は、レンセンソウ（連銭草）、キンコツソウ（筋骨草）、ホワイトホアハウンド、マートル、ヨウバイヒ（楊梅皮）、ラズベリーからなる群より選択される植物の抽出物の１種または２種以上を有効成分とする。
【００１２】
請求項３記載の本発明に係る硫酸還元菌からの硫化水素産生阻害剤は、 ３，４−ジメトキシ−１−アリルベンゼン、３，７−ジメチル−１−オクタノール、３−エトキシ−４−ヒドロキシベンズアルデヒド、ラバンズロール、メトフラン、２−メチルブチルイソバレート、ノポール、３−フェニル−１−プラパノール、ｔｒａｎｓ−サビネンハイドレートからなる群より選択される食品添加物の１種または２種以上を有効成分とする。
【００１３】
請求項４記載の本発明に係る硫化水素産生阻害組成物は、レンセンソウ（連銭草）、キンコツソウ（筋骨草）、ホワイトホアハウンド、マートルからなる群より選択される植物の抽出物の１種または２種以上を有効成分とする硫酸還元菌からの硫化水素産生阻害剤を含有してなるものである。
その硫化水素産生阻害組成物としては、飲食物として、たとえば、清涼飲料、チューインガム、キャンディ、チョコレート等の菓子、冷菓、乳製品、酒類、肉類、消臭食品等の食品が挙げられ、また、飲食物以外として、ペットフード、家畜用資料などが挙げられる。
【００１４】
上記各種の抽出物を得る植物の産地や形態、あるいは、抽出物の抽出方法等については、それらを特に限定をする必要はないし、当該植物は、そのままの状態で原料とすることも、あるいは所要の乾燥、細断、粉砕等の処理をして原料とすることもできる。
【００１５】
たとえば、抽出は、原料に１〜１０倍量の抽出溶媒を添加し、２５〜１００℃の温度で３０分〜５時間加熱抽出する方法で実施する。抽出溶媒としては、水、メタノール、エタノール、酢酸エチル、アセトン、エーテル、ｎ−へキサン等から任意の一種を選択して単独の溶媒、任意に選択した２種以上を任意の割合で混合した混合溶媒を使用することが可能である。
また、このようにして得られる抽出液をそのまま用いてもよいし、加熱濃縮、減圧濃縮して用いてもよい。さらには、必要に応じて、スプレードライ法、フリーズドライ法等により乾燥粉末化して用いてもよい。
【００１６】
上記各種の食品添加物としては、天然起源の抽出物から得られたものや合成品を使用することができる。
【００１７】
さらに、本発明に係る硫酸還元菌からの硫化水素産生阻害剤は、一種を単独で使用するほか、適宜の２種以上の混合物として使用することができ、あるいは、他の医薬または任意の製剤用担体ないし希釈液と混合して使用でき、しかも、任意の剤形にして医薬として利用することができる。その剤形としては、錠剤、顆粒剤、細粒剤、硬カプセル剤、軟カプセル剤または経口用液体製剤等を例示できる。
【００１８】
本発明に係る硫酸還元菌からの硫化水素産生阻害剤の投与量は、硫酸還元菌数や硫酸還元活性等によって変化するので一概には規定できないが、１日あたりの全投与量は、人および家畜に対し０．２ｍｇ〜１００ｍｇ／体重ｋｇ、好ましくは１ｍｇ〜６０ｍｇ／体重ｋｇである。
【００１９】
このように、本発明に係る硫酸還元菌からの硫化水素産生阻害剤は、既に、ハーブ、生薬あるいは食品素材として知られ、人や家畜に安全にしてかつ副作用もないとされている各種の植物の抽出物や食品添加物を有効成分として使用するものであるから、人や家畜に安心して投与できる。
また、油井や各種精製工場等の産業施設におけるパイプライン，タンク等の金属設備の腐食において、さらに、各種工場廃水処理あるいは公共汚水処理において、すなわち、硫化水素の発生が問題となる環境や施設において、その硫化水素が発生するのを抑制するのに使用できることも明らかである。
【００２０】
【発明の実施の形態】
以下本発明を複数の実施例、試験例を挙げて説明するが、それによって本発明の範囲が制限されるものではない。
【００２１】
〔実施例１−カキネガラシエタノール抽出物〕
カキネガラシの全草を天日乾燥し、得られた乾燥原料１００ｇを粉砕し、得られた粉砕物にエタノール１リットルを添加し、フラスコに入れて室温で２４時間静置して抽出した。さらにろ過により得られたエタノール抽出液をエバポレーターで減圧乾固させて、カキネガラシエタノール抽出物１４．４ｇを得た。
【００２２】
〔実施例２−コンフリー５０％エタノール抽出物〕
コンフリーの乾燥した葉２００ｇを粉砕し、得られた粉砕物に１リットルの５０％エタノールを添加し、還流冷却器付きフラスコに入れて８５℃で３時間還流抽出した。ろ過により得られたろ液をエバポレーターで減圧濃縮後、さらに凍結乾燥させて、コンフリー５０％エタノール抽出物２７．１ｇを得た。
【００２３】
〔実施例３−ペパーミント水抽出物〕
ペパーミントの葉を水蒸気蒸留装置により精油部分を除いた後、乾燥、粉砕して得られた粉砕物５０ｇに２００ミリリットルの水を添加しフラスコに入れて６０℃で２時間攪拌抽出した。ろ過により得られた抽出液をエバポレーターで濃縮乾固させて、ペパーミント水抽出物８．９ｇを得た。
【００２４】
〔実施例４−バジルエタノール抽出物〕
バジルの葉を５０℃で真空乾燥させた後、乾燥葉を粉砕し、得られた粉砕物５００ｇに２リットルのエタノールを添加し、還流冷却器付きフラスコに入れ、７０℃で２時間撹拌抽出した。ろ過により得られた抽出液をエバポレーターで濃縮し、さらに真空乾燥機で６０℃で乾燥させて、５．０ｇのバジルエタノール抽出物を得た。
【００２５】
〔実施例５−パセリ５０％エタノール抽出物〕
パセリの乾燥した葉３０ｇに３００ミリリットルの５０％エタノールを添加して還流冷却器付きフラスコに入れ８５℃で３時間還流抽出した。ろ過により得られた抽出液をエバポレーターで濃縮し、さらに凍結真空乾燥させて５．７ｇのパセリ５０％エタノール抽出物を得た。
【００２６】
〔実施例６−ヒソップ水抽出物〕
ヒソップの乾燥した葉１００ｇを粉砕し、得られた粉砕物に１リットルの水を添加し還流冷却器付きフラスコに入れ８０℃３時間抽出した。ろ過により得られた抽出液を凍結真空乾燥させて２０．６ｇのヒソップ水抽出物を得た。
【００２７】
〔実施例７−ホップ水抽出物〕
ホップの乾燥した球果２０．１ｇを粉砕し、得られた粉砕物に１００ｍｌの水を添加し、ビーカーに入れ８０℃３時間撹拌抽出した。ろ過により得られた抽出液を凍結真空乾燥させて５．２ｇのホップ水抽出物を得た。
【００２８】
〔実施例８−ホワイトホアハウンド水抽出物〕
ホワイトホアハウンドの乾燥した地上部１００ｇを粉砕し、得られた粉砕物に１リットルの水を添加し、還流冷却器付きのフラスコに入れ８０℃３時間抽出した。ろ過により得られた抽出液を凍結真空乾燥させて２４．３ｇのホワイトホアハウンド水抽出物を得た。
【００２９】
〔実施例９−マザーワート水抽出物〕
マザーワートの乾燥した地上部１００ｇを粉砕し、得られた粉砕物に１リットルの水を添加し、還流冷却器付きフラスコに入れ８０℃３時間抽出した。ろ過により得られた抽出液を凍結真空乾燥させて２８．４ｇのマザーワート水抽出物を得た。
【００３０】
〔実施例１０−ソヨウ５０％エタノール抽出物〕
ソヨウ（蘇葉）１００ｇを粉砕し、得られた粉砕物に５００ｍｌの５０％エタノールを添加し、還流冷却器付きフラスコに入れ８０℃３時間抽出した。ろ過により得られた抽出液を凍結真空乾燥させて２８．４ｇのソヨウ５０％エタノール抽出物を得た。
【００３１】
〔硫酸還元菌の硫化水素産生阻害試験〕
硫酸還元菌としてデスルホビブリオ・デスルフリカンス（Desulfovibrio desulfuricans (DSM642)）を用いた。培地は表１に示す試薬を１リットルの水に溶解し、ｐＨ６．８に調整後、培地の赤色が消えるまで１００％炭酸ガスを通気し、ハンゲート管に１０ｍｌずつ分注し、密栓した。
この培地をオートクレーブにより、１２１℃で１５分間滅菌処理した。この滅菌された培地にデスルホビブリオ・デスルフリカンスの培養液を０．２ｍｌずつ接種した。さらに、試料を水またはエタノール溶液として添加し（対照は試料無添加）、３７℃で４３時間培養した。この試験は常に二酸化炭素１００％の雰囲気中において行った。
このような試験においては培地に硫酸還元菌が生存、生育する場合には、硫酸塩が還元され、ヘッドスペースガス中には硫化水素が放出される。
この試験では、ガスクロマトグラフィーによるヘッドスペースガス中の硫化水素分析により、硫酸還元反応の確認を行った。なお硫化水素産生阻害率は下記計算式により求めた。
阻害率（％）＝（Ｃ−Ｓ）／Ｃ）×１００
（Ｃ：対照のヘッドスペースガス中の硫化水素量、Ｓ：試料添加のヘッドスペースガス中の硫化水素量）
【００３２】
【表１】
上記のようにして、実施例１〜１０の抽出物を含む本発明による植物の抽出物および同食品添加物について、スクリーニングテストを行い、その結果を表２〜６に示す。
【００３４】
【表２】
【表３】
【表４】
【表５】
【表６】
これらの結果は、本発明硫化水素産生阻害剤が、人や家畜の消化管内および糞便中、油井や各種精製工場等の産業施設における金属設備の腐食や各種工場廃水処理等で、硫化水素産生の原因菌である硫酸還元菌に対して阻害効果を有することを示し、さらに、本発明硫化水素産生阻害剤は、その活性成分により硫酸還元菌からの硫化水素産生阻害効果を発現して硫化水素の産生を阻害することによって、金属の腐食を防止し、また、人や家畜に対する毒性を軽減させ、潰瘍性大腸炎などの炎症を予防・治療し、消化管内容物や糞便、おならの臭いの発生を抑制することを示唆している。
【００４０】
〔実施例１１−キャンディー〕
以下に示す処方にてキャンディーを作製した。
グラニュー糖 ４５部
水飴（Ｄ．Ｅ．４２） ５０部
水 ２０部
カキネガラシＥｔＯＨ抽出物（実施例１） ３部
【００４１】
〔実施例１２−チューインガム〕
以下に示す処方にて慣用的に用いられる常法に従ってチューインガムを作製した。
ガムベース ２０部
砂糖 ５６部
水飴 １３部
ブドウ糖 １０部
ホワイトホアハウンド水抽出物 ５部
コンフリー５０％ＥｔＯＨ抽出物（実施例２）３部
軟化剤 １部
香料 ０．５部
【００４２】
〔実施例１３−チューインガム〕
以下に示す処方にて上記と同様にしてチューインガムを作製した。
ガムベース ２０部
砂糖 ５６部
水飴 １３部
ブドウ糖 １０部
パセリ５０％ＥｔＯＨ抽出物（実施例５） ５部
軟化剤 １部
香料 ０．５部
【００４３】
〔実施例１４−チョコレート〕
以下に示す処方にて慣用的に用いられている常法に従ってチョコレートを作製した。
カカオビター ２０部
カカオバター １７部
砂糖 ４３部
全脂粉乳 ２０部
ヒソップ水抽出物（実施例６） １部
香料 ０．２部
【００４４】
〔実施例１５−ビスケット〕
以下に示す処方にて慣用的に用いられる常法に従ってビスケットを作製した。
薄力粉 １００部
ショートニング ３０部
粉糖 ３２部
水飴（Ｄ．Ｅ．４２） ５部
脱脂粉乳 １．８部
食塩 １．１部
ペパーミント水抽出物（実施例３） １部
膨化剤 ０．４５部
【００４５】
〔実施例１６−錠剤〕
以下に示す処方にて慣用的に用いられる常法に従って錠剤を作製した。
乳糖 １００部
馬鈴薯でんぷん １００部
ソヨウ５０％ＥｔＯＨ抽出物（実施例１０）６０部
【００４６】
〔実施例１７−飲料〕
以下に示す処方にて慣用的に用いられる常法に従って飲料を作製した。
オレンジ果汁 ３０部
異性化糖 １５．２４部
クエン酸 ０．１部
ビタミンＣ ０．０４部
香料 ０．３１部
ホップ水抽出物（実施例７） ０．１部
水 ５５部
【００４７】
〔実施例１８−練り歯磨〕
以下に示す処方にて慣用的に用いられる常法に従って練り歯磨を作製した。
炭酸カルシウム ５０部
グリセリン ２０部
カルボキシメチルセルロース ２部
ラウリル硫酸ナトリウム ２部
ｎ−デカノール １部
サッカリン ０．１部
バジルＥｔＯＨ抽出物（実施例４） ８部
クロルヘキシジン ０．０１部
水 ９４部
【００４８】
〔実施例１９−散剤〕
以下に示す処方にて慣用的に用いられる常法に従って散剤を作製した。
乳糖 ６２部
馬鈴薯デンプン ２５部
２−ノナノン ３部
カンフェン １部
【００４９】
【発明の効果】
以上述べたところから明らかなように、本発明に係る硫化水素産生阻害剤は、ハーブ、生薬あるいは食品材料として知られている植物の抽出物の群、あるいは、３，４−ジメトキシ−１−アリルベンゼン等の食品添加物の群から選択される１種または２種以上を有効成分とするものであるから、人や家畜に対し恬然であり、その消化管内および糞便中での硫化水素産生の抑制はもちろん、油井や各種精製工場等の産業施設におけるパイプライン，タンク等の金属設備の腐食、各種工場排水処理あるいは公共汚水処理における硫化水素産生の抑制にも使用でき、かつ、その抑制または阻害効果が顕著なものである。
【００５０】
本発明に係る硫化水素産生阻害組成物は、レンセンソウ（連銭草）、キンコツソウ（筋骨草）、ホワイトホアハウンド、マートルからなる群より選択される植物の抽出物の１種または２種以上を有効成分とする硫化水素産生阻害剤を含有してなるから、飲食物、ペットフードまたは家畜用飼料として有益である。
Claims (4)
- ペパーミント精油抽出残渣の水抽出物を有効成分とすることを特徴とする硫酸還元菌からの硫化水素産生阻害剤。
- レンセンソウ（連銭草）、キンコツソウ（筋骨草）、ホワイトホアハウンド、マートル、ヨウバイヒ（楊梅皮）、ラズベリーからなる群より選択される植物の抽出物の１種または２種以上を有効成分とすることを特徴とする硫酸還元菌からの硫化水素産生阻害剤。
- ３，４−ジメトキシ−１−アリルベンゼン、３，７−ジメチル−１−オクタノール、３−エトキシ−４−ヒドロキシベンズアルデヒド、ラバンズロール、メトフラン、２−メチルブチルイソバレート、ノポール、ｔｒａｎｓ−サビネンハイドレートからなる群より選択される食品添加物の１種または２種以上を有効成分とすることを特徴とする硫酸還元菌からの硫化水素産生阻害剤。
- レンセンソウ（連銭草）、キンコツソウ（筋骨草）、ホワイトホアハウンド、マートルからなる群より選択される植物の抽出物の１種または２種以上を有効成分とする硫酸還元菌からの硫化水素産生阻害剤を含有することを特徴とする硫化水素産生阻害組成物。
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