JP3729910B2

JP3729910B2 - アルカリα−アミラーゼ、これを生産する微生物及び当該アルカリα−アミラーゼの製造法

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Publication number: JP3729910B2
Application number: JP2099996A
Authority: JP
Inventors: 一暁五十嵐; 萩原　　浩; 和久澤田; 勝俊荒; 修次川合; 進伊藤
Original assignee: Kao Corp
Current assignee: Kao Corp
Priority date: 1996-02-07
Filing date: 1996-02-07
Publication date: 2005-12-21
Anticipated expiration: 2016-02-07
Also published as: JPH09206073A

Description

【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、洗浄剤配合成分として有用なアルカリα−アミラーゼ、これを生産する微生物及び当該アルカリα−アミラーゼの製造法に関する。
【０００２】
【従来の技術】
α−アミラーゼは、澱粉、アミロース、アミロペクチン等の澱粉系多糖類の分子中のα−１，４グルコシド結合のみを切断する酵素群の総称で、１８３３年にPayenとPersozにより麦芽抽出液より初めて見出されて以来、バチルスズブチリスマーブーグ（Bacillus subtilis Marburg）、バチルスズブチリス（ナットウ）（Bacillus subtilis (natto)）、バチルスアミロリケファシエンス（Bacillus amyloliquefaciens）、バチルスリケニフォルミス（Bacillus licheniformis）、バチルスセレウス（Bacillus cereus）、バチルスサーキュランス（Bacillus circulans）、バチルスマセランス（Bacillus macerans）、シュードモナスシュツッツェリ（Pseudomonas stutzeri）、クレブシェアエロゲネス（Klebisiella aerogenes）等のバチルス属を中心とする細菌、ストレプトマイセスグリセウス（Streptomyces griseus）等の放線菌、アスペルギラスオリザエ（Aspergillus oryzae）等のカビ類、イネ科及びマメ科植物の種子、ヒト及びブタ等の動物の消化腺など多くの生物から結晶標品あるいは電気泳動的に均一な標品として得られている。
【０００３】
α−アミラーゼは昔から、醸造産業において穀類やイモ類の液化や糖化に利用され、繊維産業において澱粉糊抜き剤として、医薬品産業において強力な消化剤として利用され、食品産業において水飴の製造に利用されるなど広く利用されてきた。
最近、本発明者は斯かるα−アミラーゼを枝切り酵素と共に食器洗剤及び衣料用洗剤に配合することにより、主に澱粉汚れに対して洗浄力が飛躍的に向上することを見出し、特許出願した（特開平２−１３２１９１２号公報）。
【０００４】
しかしながら、自然界において既に見出されているα−アミラーゼのほとんどが、中性乃至酸性領域において最大且つ安定な酵素活性を示す、いわゆる中性もしくは酸性のα−アミラーゼに分類されるものであり、pHがアルカリ側にある界面活性剤含有液中では活性が低下してしまうという問題点があった。これに対し、アルカリ領域で最大活性を示すか、あるいはアルカリ耐性をするα−アミラーゼ、いわゆるアルカリα−アミラーゼ及びアルカリ耐性α−アミラーゼは、このような問題点がなく、洗浄剤の配合成分として有効である。
【０００５】
このようなアルカリα−アミラーゼ及びアルカリ耐性α−アミラーゼとしては、バチルスＡ−４０−２株の生産する酵素〔Agric. Biol. Chem., 35, 1783(1971)〕、バチルスＮＲＲＬＢ−３８８１株の生産する酵素〔J. Bacteriol., 110, 992(1972)〕、ストレプトマイセス（Streptomyces）属ＫＳＭ−９の生産する酵素（特開昭６１−２０９５８８号公報）、バチルスＨ−１６７の生産する酵素（特開昭６２−２０８２７８号公報）、バチルスアルカロサーモフィラス（Bacillus alkalothermophilus）Ａ３−８株の生産する酵素（特開平１−４９５８４号公報）及びナトロノコッカス（Natronococcus sp.）Ａｈ−３６株（特開平４−２１１３６９号公報）が知られているのみである。
【０００６】
ここでアルカリα−アミラーゼとは、至適pHがアルカリ領域にあるものをいい、アルカリ耐性α−アミラーゼとは、至適pHは中性から酸性領域にあるが、アルカリ領域においても至適pHにおける活性に比較して十分に活性を有し且つ安定性を保持するものをいう。また、中性とはpH６〜８の範囲をいい、アルカリ性とはそれ以上の範囲をいう。
【０００７】
【発明が解決しようとする課題】
一般に、食器及び衣類の洗浄は中性から高アルカリ性の広範なpH条件下で行われるため、高アルカリ性側に耐性を有し、且つ食器洗浄機用並びに衣料洗浄用酵素としての機能を有するアルカリα−アミラーゼを生産する微生物を自然界から探索し、取得することは極めて意義のあることである。
【０００８】
しかしながら、本発明者の知る限り、これらのアルカリ酵素のほとんどは、pH１１〜１２という高アルカリ領域では安定性が悪く、５０℃で１５分間保温した後はほとんど残存活性はなく、洗浄剤組成物として使用するには適さないという問題があった。
従って、pH１１〜１２といった高アルカリに至適又は耐性を有し、且つ洗剤成分に対して耐性を有するα−アミラーゼの開発が望まれていた。
【０００９】
【課題を解決するための手段】
斯かる実情において、本発明者は、高アルカリ耐性α−アミラーゼを生産する微生物を自然界から求め、鋭意探索を続けてきたが、土壌より採取した好アルカリ微生物が食器洗浄剤組成物並びに衣料用洗浄剤組成物の添加成分として有効な、新規なアルカリα−アミラーゼＳ−１を生産することを見出し、本発明を完成した。
【００１０】
すなわち、本発明は、次の酵素学的性質を有するアルカリα−アミラーゼＳ−１、これを生産する微生物及び当該アルカリα−アミラーゼＳ−１の製造法を提供するものである。
【００１１】
１）作用
澱粉、アミロース、アミロペクチン及びそれらの部分分解物のα−１，４グルコシド結合を分解し、アミロースからはグルコース（Ｇ１）、マルトース（Ｇ２）、マルトトリオース（Ｇ３）及びマルトテトラオース（Ｇ４）を生成する。但しプルランには作用しない。
２）作用pH及び至適pH
pH６．５〜１２．５の範囲で作用し、至適pHは１０〜１１である。
３）pH安定性
５０℃で１５分処理した場合、pH７〜１１．５の範囲で極めて安定であり、pH７．５〜１１．５においても、５０％以上の活性を維持する。
４）作用温度範囲及び最適温度
２０〜７０℃の範囲で作用し、最適作用温度は６０℃である。
５）温度安定性
pH ９のグリシン−食塩−水酸化ナトリウム緩衝液中、１５分間処理した場合、５５℃以下で極めて安定である。
６）分子量
ソディウムドデシル硫酸ポリアクリルアミドゲル電気泳動法による分子量は６０，０００±３，０００である。
７）等電点
等電点電気泳動法により等電点は４．１付近にある。
８）金属イオンの影響
Ｈｇ²⁺イオンによって阻害される。Ｃａ²⁺、Ｃｏ²⁺、Ｍｎ²⁺及びＣｕ²⁺イオンによって活性が促進する。
【００１２】
【発明の実施の形態】
本発明のアルカリα−アミラーゼＳ−１は、例えばバチルス（Bacillus）属に属するアミラーゼ生産菌を培養し、その培養物から採取することにより製造することができる。
【００１３】
かかるバチルス属に属する本発明アミラーゼ生産菌としては、バチルス属に属し、上記の本発明アミラーゼを生産する限り特に制限されないが、例えば次の分類学的性質を示すＫＳＭ−ＳＡＡ１１１２株が挙げられる。
【００１４】
本発明のアミラーゼ生産菌の分類に用いられる培地を以下に示す。
【００１５】

【００１６】
ＫＳＭ−ＳＡＡ１１１２の分類学的性質を以下に示す。
【００１７】
〔分類学的性質〕
（ａ）顕微鏡的観察結果：
菌体は０．７〜１．２μｍ×２．５〜８．０μｍの桿菌であり、菌体の一端に楕円形の内生胞子（０．５〜１．０μｍ×０．８〜１．２μｍ）を作る。周鞭毛を有し運動性がある。グラム染色は陽性。抗酸性はない。
（ｂ）各種培地における生育状態：
（１）肉汁寒天平板培養（培地１）；
生育状態は良い。集落の形状は円形であり、粘稠性がある。表面は粗造、周縁は波状である。また、集落の色調は淡黄色である。
（２）肉汁寒天斜面培養（培地１）；
生育する。
（３）肉汁液体培養（培地２）；
生育する。
（４）肉汁ゼラチン穿刺培養（培地３）；
生育状態は良い。ゼラチンの液化が認められる。
（５）リトマスミルク培地（培地４）；
変化しない。
（ｃ）生理学的性質：
（１）硝酸塩の還元及び脱窒反応（培地５）；
硝酸塩の還元は陽性。脱窒反応は陰性。
（２）ＭＲテスト（培地６）；
陰性。
（３）Ｖ−Ｐテスト（培地６）；
陰性。
（４）インドールの生成（培地７）；
陰性。
（５）硫化水素の生成（培地８）；
陰性。
（６）澱粉の加水分解（培地９）；
陽性。
（７）クエン酸の利用；
コーサー培地（培地１０）で生育し、陰性。クリステンセン培地（培地１１）では陽性。
（８）無機窒素源の利用（培地１２）；
硝酸塩、アンモニウム塩、亜硝酸塩ともに利用する。
（９）色素の生成（培地１３、１４）；
陰性。
（10）ウレアーゼ（培地１５）；
陰性。
（11）オキシダーゼ（培地１６）；
陽性。
（12）カタラーゼ（培地１７）；
陽性。
（13）生育の範囲（培地１８）；
生育の温度範囲は、１０〜５５℃、生育最適温度範囲は３０〜４５℃である。
生育のpH範囲は、pH７．０〜１１．５、生育最適pHはpH１０．５である。
（14）酵素に対する態度；
好気的。
（15）Ｏ−Ｆテスト（培地１９）；
陽性。
（16）糖の利用性（培地２０）；
Ｌ−アラビノース、Ｄ−キシロース、Ｄ−グルコース、Ｄ−マンノース、Ｄ−フラクトース、Ｄ−ガラクトース、メリビオース、麦芽糖、ショ糖、乳糖、トレハロース、Ｄ−ソルビット、Ｄ−マンニット、グリセリン、澱粉、サリシン、Ｄ−リボース及びデキストリンを利用する。
（17）食塩含有培地に於ける生育（培地１を改変）；
食塩濃度が５％では生育するが、７％では生育できない。
（18) カゼインの分解（培地２１）；
陽性。
【００１８】
以上の分類学的性質に関する検討に基づき、バージーズ・マニュアル・オブ・デタミネイティブ・バクテリオロジー（Bergey's Mannual of Determinative Bacteriology）第８版及びジーナス・バチルス（The Genus Bacillus）を参照し、比較検討した結果、本菌株は有胞子桿菌であるバチルス（Bacillus）属の一種であると認められる。しかし、本菌株は中性領域では生育できず、専ら高アルカリ領域で良好な生育を示すことから、最近、HorikoshiとAkiba（“Alkalophilic Microorganism”, Japan Scientific Society Press(Tokyo). 1982年巻）の主張している、いわゆる好アルカリ性（Alkalophilic）微生物に属し、暫定的に従来の中性で生育するバチルス属細菌とは区別される。
【００１９】
従って、本菌株の分類学的性質は公知の好アルカリ性バチルスのいずれとも一致しないので、これを新規菌株と判断してバチルスエスピー（Bacillus sp.）ＫＳＭ−ＳＡＡ１１１２と命名し、ＦＥＲＭＰ−１５２００号として通産省工業技術院生命工学工業技術研究所に寄託した。
【００２０】
上記の菌株を用いて本発明のアルカリα−アミラーゼＳ−１を得るには、培地に菌株を接種し、常法に従って培養すればよい。
【００２１】
培養に用いる培地中には資化し得る炭素源及び窒素源を適当量含有せしめておくことが好ましい。この炭素源及び窒素源は特に制限されないが、例えば炭素源としては、可溶性澱粉、不溶性澱粉、アミロペクチン、グリコーゲン及びこれらの部分分解により生じた分岐オリゴ糖に加え、資化し得る炭素源、例えばグルコース、マルトース、アラビノース、キシロース、リボース、マンノース、フラクトース、ガラクトース、麦芽糖、ショ糖、乳糖、トレハロース、マンニット、ソルビット、グリセリンや資化し得る有機酸、例えば酢酸などが挙げられる。また、窒素源としては、コーングルテンミール、大豆粉、コーンスティープリカー、カザミノ酸、酵母エキス、ファーマメディア、肉エキス、トリプトン、ソイトン、ハイプロ、アジパワー、ソイビーンミール、綿実油粕、カルチベータ、アジプロン、ゼストなどの有機窒素源及び硫酸アンモニウム、硝酸アンモニウム、リン酸アンモニウム、炭酸アンモニウム、硝酸ナトリウム、酢酸アンモニウムなどの無機窒素源が挙げられる。更に、リン酸塩、亜鉛塩、コバルト塩、ナトリウム塩、カリウム塩等の無機塩や、必要であれば、無機、有機微量栄養源を培地中に適宜添加することもできる。
【００２２】
培養温度は２０〜５０℃、特に３０〜４０℃が好ましく、pHは７〜１２、特に９〜１１が好ましく、この条件下において通常１〜３日間で培養が完了する。
【００２３】
斯くして得られた培養物中からの目的物質であるアルカリα−アミラーゼＳ−１の採取及び精製は一般の酵素の採取及び精製の手段に準じて行うことができる。すなわち、遠心分離又は濾過等の通常の固体分離手段により菌体を培養液から除去し、粗酵素液を得ることができる。この粗酵素液は、そのまま使用することができるが、必要に応じて、塩析法、沈殿法、限外濾過法などの分離手段により粗酵素を得、更に公知の方法により精製結晶化することにより精製酵素として使用することも可能である。
【００２４】
本発明のアルカリα−アミラーゼＳ−１の精製法の一例について説明する。アルカリ性バチルス属細菌ＫＳＭ−ＳＡＡ１１１２株を１．０％可溶性澱粉、０．２％トリプトン、０．１％酵母エキス、０．０３％ＫＨ₂ＰＯ₄、０．０２％ＣａＣｌ₂・２Ｈ₂Ｏ、０．１％（ＮＨ₄）₂ＳＯ₄、０．００１％ＦｅＳＯ₄・７Ｈ₂Ｏ、０．０００１％ＭｎＣｌ₂・４Ｈ₂Ｏ、０．０２％ＭｇＳＯ₄・７Ｈ₂Ｏ及び０．５％炭酸ナトリウムを含む培地で３０℃にて３日間好気的に振盪培養し、得られる培養液から菌体を除き、上清液を得る。次いで該上清液に１０mMトリス塩酸緩衝液（pH８．０）で平衡化したＤＥＡＥ−セルロース粉末を加え、上清中のα−アミラーゼを完全にＤＥＡＥ−セルロースに吸着させる。次いで、１０mMトリス塩酸緩衝液（pH８．０）で樹脂を洗浄した後、１Ｍの食塩を含む１０mMトリス塩酸緩衝液（pH８．０）で酵素を溶出する。更に、１０mMトリス塩酸緩衝液（pH８．０）に対して透析、濃縮後、同緩衝液で平衡化したＤＥＡＥ−トヨパール６５０Ｓ（トーソー社製）に吸着させ、１０mMトリス塩酸緩衝液（pH８．０）を用いて０〜１Ｍの食塩の濃度勾配により溶出する。活性画分を１０mMトリス塩酸緩衝液（pH８．０）にて透析後、０．１Ｍ食塩を含む１０mMトリス塩酸緩衝液（pH８．０）で平衡化したセファクリルＳ−２００カラムに吸着後、同緩衝液で溶出する。斯くして得られる精製酵素はポリアクリルアミドゲル電気泳動（ゲル濃度１０％）及びソディウムドデシル硫酸（ＳＤＳ）電気泳動で単一のバンドを与え、活性収率は約０．６％であった。
【００２５】
斯くして得られる本アルカリα−アミラーゼＳ−１の酵素学的諸性質について、以下に説明する。尚、酵素活性の測定は次の緩衝液を用い、以下の方法に従って行った。
【００２６】
pH６〜８トリス塩酸緩衝液
pH８〜１１グリシン−食塩−水酸化ナトリウム緩衝液
pH１１〜１３炭酸緩衝液
【００２７】
〔酵素活性測定法〕
各種緩衝液（４０mM）に可溶性澱粉（反応系における最終濃度は０．５％）を溶解させた基質溶液０．９mlに、酵素液０．１mlを加え、５０℃で３０分間反応させた。反応後、３，５−ジニトロサリチル酸（３，５−dinitorosalicylic acid(DNS)）法にて、還元糖の定量を行った。すなわち、反応液１．０mlにＤＮＳ試薬１．０mlを加え、５分間、１００℃で加熱発色させ、冷却後、４．０mlの脱イオン水を加えて希釈し、波長５３５nmで比色定量した。酵素の力価は、１分間に１μmol のグルコースに相当する還元糖を生成する酵素量を１単位（Ｕ）とした。
【００２８】
〔酵素化学的諸性質〕
（１）作用：
澱粉、アミロース、アミロペクチン及びそれらの部分分解物のα−１，４グルコシド結合を分解する。但しプルランには作用しない。種々の基質に対する作用を表１に示す。
【００２９】
【表１】

【００３０】
（２）作用pH及び至適pH：
pH６．５〜１２．５の範囲で作用し、至適pHは１０．０〜１１．０である（図１）。
（３）pH安定性：
pH７．０〜１１．５まで極めて安定であり、pH７．５〜１１．５においても約５０％以上の活性を維持する（図２）。
（４）作用温度範囲及び最適温度：
２０〜７０℃の広範囲で作用し、最適作用温度は６０℃である。
（５）温度安定性：
本酵素についてpH９．０の条件で温度を変化させ、各温度で１５分処理することにより失活の条件を調べたところ、５５℃までは極めて安定であった（図４）。
（６）分子量：
ソディウムドデシル硫酸ポリアクリルアミドゲル電気泳動法により測定した分子量は６０，０００±３，０００である（図５）。
（７）等電点：
等電点電気泳動法により測定した等電点は４．１付近である。
【００３１】
（８）金属塩の影響：
表２に示す各種金属塩を反応系に共存させて５０℃で１５分間処理し、その影響を調べたところ、Ｋ⁺、Ｎａ⁺、Ｃａ²⁺、Ｍｇ²⁺、Ｍｎ²⁺、Ｂａ²⁺、Ｆｅ²⁺、Ｆｅ³⁺及びＡｌ³⁺イオンに対して極めて安定であった。Ｈｇ²⁺イオンによって阻害されるが、Ｃａ²⁺、Ｃｕ²⁺、Ｃｏ²⁺及びＭｎ²⁺イオンによって約１５〜５０％活性が促進されることが認められた。
【００３２】
【表２】

【００３３】
（９）界面活性剤の影響：
線状アルキルベンゼンスルホン酸ナトリウム、アルキル硫酸エステルナトリウム塩、ポリオキシエチレンアルキル硫酸エステルナトリウム塩、α−オレフィンスルホン酸ナトリウム、α−スルホン化脂肪酸エステルナトリウム、アルキルスルホン酸ナトリウム、ＳＤＳ、石鹸及びソフタノール等の各種界面活性剤０．０５％溶液で、５０℃、１５分処理してもほとんど活性阻害を受けない。
【００３４】
【発明の効果】
本発明のアルカリα−アミラーゼＳ−１は、従来のα−アミラーゼに比較して高アルカリ性（pH１１〜１２）において極めて安定である。また、至適温度も６０℃であり、熱安定性も５５℃まで極めて安定である。更に、界面活性剤等の洗浄剤配合成分によってもほとんど阻害を受けない。従って、本酵素は衣料用洗剤、食器用洗剤及び糊抜き剤等に配合することにより有利に使用することができるものであり、工業的に極めて大きな意義を有するものである。
【００３５】
【実施例】
以下に実施例を挙げて本発明を更に説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。
【００３６】
実施例１
薬匙一杯の土壌（約０．５ｇ）を滅菌生理食塩水に懸濁し、８０℃で１５分間熱処理した。この熱処理液の上清を適当に希釈して、分離用寒天培地（培地Ａ）に塗布した。次いで、これを５０℃で３日間培養し、集落を形成させた。集落の周に澱粉溶解に基づく透明帯を形成するものを選出し、α−アミラーゼ生産菌を取得した。更に、取得菌を培地Ｂの液体培地に接種し、３０℃で３日間振盪培養した。培養後、遠心分離した上清液についてα−アミラーゼ活性をpH１０にて測定し、アルカリα−アミラーゼ生産菌をスクリーニングし、アルカリα−アミラーゼＳ−１生産菌バチルスエスピーＫＳＭ−ＳＡＡ１１１２（ＦＥＲＭＰ−１５２００）を取得した。
【００３７】
【表３】

【００３８】
【表４】

【００３９】
実施例２
アルカリα−アミラーゼＳ−１生産菌バチルスエスピーＫＳＭ−ＳＡＡ１１１２（ＦＥＲＭＰ−１５２００）を実施例１と同様の液体培地Ｂに接種し、３０℃で３日間振盪培養した。培養後、菌体を遠心分離して除き、粗α−アミラーゼ酵素液とした。更に、通常の方法に従って、エタノール乾燥粉末とし、表５に示す粗酵素標品を得た。
【００４０】
【表５】

【００４１】
実施例３
実施例１と同様の液体培地Ｂにおいて、アルカリα−アミラーゼＳ−１生産菌バチルスエスピーＫＳＭ−ＳＡＡ１１１２（ＦＥＲＭＰ−１５２００）を接種し、３０℃で２〜３日間振盪培養した。遠心分離上清についてα−アミラーゼ活性を測定した結果、培養液１Ｌ当たり、４５９Ｕの活性を有していた。
【００４２】
実施例４
実施例２で得られた粗酵素液について、（１）ＤＥＡＥセルロース吸着、（２）ＤＥＡＥトヨパール（トーソー社製）クロマトグラフィー、（３）セファクリル（ファルマシア社製）クロマトグラフィーをすることによって精製を行い、アルカリα−アミラーゼＳ−１を得た。得られたアルカリα−アミラーゼＳ−１についてデービス（Davis D. J. ANN. N. Y. Acad. Sci., 121, 404(1964)）の方法に従ってポリアクリルアミド電気泳動を行った結果、単一のバンドを与えることを確認した（図５）。
【００４３】
実施例５
実施例４で得られたアルカリα−アミラーゼＳ−１について、常法に従いポリアクリルアミドＳＤＳ電気泳動を行った（図６）。この結果から、本酵素の分子量は６０，０００±３，０００であった。
【図面の簡単な説明】
【図１】本発明のアルカリα−アミラーゼＳ−１の反応pHと相対活性との関係を示す図である。
【図２】本発明のアルカリα−アミラーゼＳ−１の処理pHと残存活性との関係を示す図である。
【図３】本発明のアルカリα−アミラーゼＳ−１の反応温度と相対活性との関係を示す図である。
【図４】本発明のアルカリα−アミラーゼＳ−１の処理温度と残存活性との関係を示す図である。
【図５】本発明のアルカリα−アミラーゼＳ−１のポリアクリルアミド電気泳動の結果を示す図である。
【図６】本発明のアルカリα−アミラーゼＳ−１のＳＤＳポリアクリルアミド電気泳動の結果を示す図である。

Claims

次の酵素学的性質を有するアルカリα−アミラーゼＳ−１。
１）作用
澱粉、アミロース、アミロペクチン及びそれらの部分分解物のα−１，４グルコシド結合を分解し、アミロースからはグルコース（Ｇ１）、マルトース（Ｇ２）、マルトトリオース（Ｇ３）及びマルトテトラオース（Ｇ４）を生成する。但しプルランには作用しない。
２）作用pH及び至適pH
pH６．５〜１２．５の範囲で作用し、至適pHは１０〜１１である。
３）pH安定性
５０℃で１５分処理した場合、pH７〜１１．５の範囲で極めて安定であり、pH７．５〜１１．５においても、５０％以上の活性を維持する。
４）作用温度範囲及び最適温度
２０〜７０℃の範囲で作用し、最適作用温度は６０℃である。
５）温度安定性
pH ９のグリシン−食塩−水酸化ナトリウム緩衝液中、１５分間処理した場合、５５℃以下で極めて安定である。
６）分子量
ソディウムドデシル硫酸ポリアクリルアミドゲル電気泳動法による分子量は６０，０００±３，０００である。
７）等電点
等電点電気泳動法により等電点は４．１付近にある。
８）金属イオンの影響
Ｈｇ²⁺イオンによって阻害される。Ｃａ²⁺、Ｃｏ²⁺、Ｍｎ²⁺及びＣｕ²⁺イオンによって活性が促進する。
バチルスエスピー（Bacillus sp.）ＫＳＭ−ＳＡＡ１１１２と命名され、ＦＥＲＭＰ−１５２００号として寄託された微生物。
請求項２記載の微生物を培養し、その培養物からアルカリα−アミラーゼＳ−１を採取することを特徴とする請求項１記載のアルカリα−アミラーゼＳ−１の製造法。